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外泌体递送CRISPR/Cas系统在靶细胞内可实现基因编辑
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作者 王白燕 杨树 +5 位作者 王弋鸣 吴梦晴 肖瑀 郭梓璇 张博艺 冯书营 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第7期1839-1849,共11页
背景:CRISPR/Cas基因编辑系统具有精准基因编辑、靶向设计简单、低成本以及高效率等特性,已被广泛应用于科学研究和相关临床治疗。然而,CRISPR/Cas系统如何更安全、更高效、更精准地递送到靶细胞内,仍是一个急需解决的难题。目的:从递送... 背景:CRISPR/Cas基因编辑系统具有精准基因编辑、靶向设计简单、低成本以及高效率等特性,已被广泛应用于科学研究和相关临床治疗。然而,CRISPR/Cas系统如何更安全、更高效、更精准地递送到靶细胞内,仍是一个急需解决的难题。目的:从递送CRISPR/Cas系统的外泌体来源及工程化策略、外泌体对CRISPR/Cas系统的装载方法、CRISPR/Cas系统的生物形式及其在细胞内的作用途径等方面进行全方面综述,为该领域的研究者提供更直观、更系统的视角。方法:以“exosome,drug delivery systems,delivery,CRISPR/Cas,gene editing,engineered exosomes,targeting”为英文检索词,以“外泌体,药物递送,CRISPR/Cas,工程化”为中文检索词,分别检索Pub Med数据库及中国知网,检索时限为2014-2024年。通过仔细阅读文献的标题和摘要进行初步筛选,排除研究内容相关性差及内容重复的文献,最终纳入了78篇文献进行归纳和探讨。结果与结论:(1)外泌体是一种直径30-150 nm的脂质囊泡,具有循环半衰期长、靶向组织的内在能力、良好的生物相容性以及较小的固有毒性等优势,显现出强大的靶向递送能力;(2)CRISPR/Cas系统虽是一种强大的基因编辑工具,然而现有的CRISPR/Cas系统递送载体各有利弊,无法完全满足需求;(3)递送CRISPR/Cas系统的外泌体主要来源于高产外泌体的细胞或组织,但研究者们依然需要根据研究所需进行选择或进一步工程化;(4)递送CRISPR/Cas系统的外泌体主要通过基因工程修饰、化学修饰、外泌体-脂质体杂交等策略实现工程化;(5)外泌体装载CRISPR/Cas系统的方法包括电穿孔、孵育、转染和主动装载途径等,选择合适的装载方法取决于CRISPR/Cas系统的理化性质;(6)外泌体递送CRISPR/Cas系统的生物形式包括质粒和核糖核蛋白复合体,两种形式各具特点,成功递送的CRISPR/Cas系统在靶细胞内实现基因编辑。 展开更多
关键词 外泌体 CRISPR/cas系统 基因编辑 药物负载 靶向递送 工程化
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Aging Dynamics in Polymer Powder Bed Fusion Systems:The Case of Selective Laser Sintering
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作者 Bruno Alexandre de Sousa Alves Dimitrios Kontziampasis Abdel-Hamid Soliman 《Additive Manufacturing Frontiers》 2025年第2期156-166,共11页
Additive manufacturing(AM)is an advanced production method for layer-by-layer fabrication,offering a paradigm shift in manufacturing.However,the sustainability of AM processes is poor,since suppliers recommend reusing... Additive manufacturing(AM)is an advanced production method for layer-by-layer fabrication,offering a paradigm shift in manufacturing.However,the sustainability of AM processes is poor,since suppliers recommend reusing 50%-70%of reprocessed powder,contributing to a significant increase in material disposal.To explore the possibility of fully reusing the polymeric material,we conduct a comprehensive characterisation of the powder particulates,in combination with analysis of the final prints.Utilizing optical and scanning electron microscopes,we statistically evaluate the size,morphology,and shape of the particles.Furthermore,tensile strength and deformation of printed bars is evaluated,showcasing the impact of aging on the print properties.The findings reveal that consecutive reuse of used powder significantly influences dimensional accuracy of the printed parts.We detect a 30.63%relative value of shrinkage after six printing iterations,which corresponds to an absolute shrinkage increase by 0.98%.This is significant considering the standard shrinkage for the material used is already 3.2%.Additionally,parts that are printed with reused material exhibit a small increase in elongation at yield,as well as an unexpected rise in tensile strength.Significant agglomeration of small particles is observed in the aged powder,since there are particles of less than 10μm,which are not found in the virgin powder.These results contribute to a better understanding of the issues related to the reusing of aged material,and offer invaluable insights for mitigating the environmental impact that is associated with material disposal in AM. 展开更多
关键词 Additive manufacturing 3D printing Powder bed fusion Selective laser sintering POLYMERS SUSTAINABILITY RECYCLING
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Advancements in titanium nanocomposites:Microstructure and fretting wear resistance via spark plasma sintering
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作者 Basant Lal Abhijit Dey 《International Journal of Minerals,Metallurgy and Materials》 2026年第1期265-281,共17页
This study investigated enhancing the wear resistance of Ti6Al4V alloys for medical applications by incorporating Ti C nanoreinforcements using advanced spark plasma sintering(SPS). The addition of up to 2.5wt% Ti C s... This study investigated enhancing the wear resistance of Ti6Al4V alloys for medical applications by incorporating Ti C nanoreinforcements using advanced spark plasma sintering(SPS). The addition of up to 2.5wt% Ti C significantly improved the mechanical properties, including a notable 18.2% increase in hardness(HV 332). Fretting wear tests against 316L stainless steel(SS316L) balls demonstrated a 20wt%–22wt% reduction in wear volume in the Ti6Al4V/Ti C composites compared with the monolithic alloy. Microstructural analysis revealed that Ti C reinforcement controlled the grain orientation and reduced the β-phase content, which contributed to enhanced mechanical properties. The monolithic alloy exhibited a Widmanstätten lamellar microstructure, while increasing the Ti C content modified the wear mechanisms from ploughing and adhesion(0–0.5wt%) to pitting and abrasion(1wt%–2.5wt%). At higher reinforcement levels, the formation of a robust oxide layer through tribo-oxide treatment effectively reduced the wear volume by minimizing the abrasive effects and plastic deformation. This study highlights the potential of SPS-mediated Ti C reinforcement as a transformative approach for improving the performance of Ti6Al4V alloys, paving the way for advanced medical applications. 展开更多
关键词 Ti6Al4V alloy TiC particle MICROSTRUCTURE wear mechanism spark plasma sintering
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Cas9和PE介导湖羊骨骼肌卫星细胞MSTN基因敲除的研究 被引量:5
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作者 周磊 李东旭 +3 位作者 冒魏佳 刘孜斐 高雪 万永杰 《南京农业大学学报》 北大核心 2025年第2期419-426,共8页
[目的]本文利用CRISPR/Cas9系统和先导编辑(prime editor, PE)对湖羊骨骼肌卫星细胞中的肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因外显子进行敲除,旨在比较2种技术敲除MSTN基因的效率,以验证新型基因编辑工具PE用于湖羊骨骼肌卫星细胞上的可... [目的]本文利用CRISPR/Cas9系统和先导编辑(prime editor, PE)对湖羊骨骼肌卫星细胞中的肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因外显子进行敲除,旨在比较2种技术敲除MSTN基因的效率,以验证新型基因编辑工具PE用于湖羊骨骼肌卫星细胞上的可行性。[方法]针对湖羊MSTN基因的3个外显子分别设计向导RNA(single guide RNA,sgRNA)以及引导RNA(prime editing guide RNA,pegRNA),构建相应的质粒后将含有Cas9/sgRNA或PE/pegRNA的质粒共同转染湖羊骨骼肌卫星细胞。24 h后观察细胞荧光,48 h后再将细胞消化,使用流式细胞分选仪根据荧光强度筛选出转染成功的强阳性细胞,收集细胞,获得基因组DNA后进行桑格测序,检测2种基因编辑工具对MSTN基因的打靶效率。[结果]成功构建了分别针对湖羊骨骼肌卫星细胞MSTN基因3个外显子敲除的基因编辑工具,质粒测序结果显示序列插入正确;CRISPR/Cas9的编辑效率(65%、88%、91%)显著高于PE的编辑效率(57%、29%、33%),而PE的插入缺失率显著低于CRISPR/Cas9。[结论]在转染效率相近的情况下,CRISPR/Cas9相比于PE对于湖羊骨骼肌卫星细胞MSTN基因的敲除有更高的编辑效率。 展开更多
关键词 基因编辑 CRISPR/cas9 先导编辑(PE) MSTN 湖羊 骨骼肌卫星细胞
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基于RPA-CRISPR/Cas12a的沙氏弧菌可视化检测方法的建立 被引量:1
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作者 葛辉 巫旗生 +8 位作者 宁岳 冯君雅 陈昊翔 李慧耀 叶军 吴丽云 温凭 徐春燕 任磊 《水产学报》 北大核心 2025年第11期203-215,共13页
【目的】建立基于RPA-CRISPR/Cas12a的沙氏弧菌实时荧光检测法和试纸条检测法,满足牡蛎新发病原沙氏弧菌的快速检测需求。【方法】实验针对沙氏弧菌toxR基因设计特异性片段,优选RPA引物和crRNA序列,确保基因标志物的准确扩增与识别;当CR... 【目的】建立基于RPA-CRISPR/Cas12a的沙氏弧菌实时荧光检测法和试纸条检测法,满足牡蛎新发病原沙氏弧菌的快速检测需求。【方法】实验针对沙氏弧菌toxR基因设计特异性片段,优选RPA引物和crRNA序列,确保基因标志物的准确扩增与识别;当CRISPR/Cas12a系统识别到RPA扩增的病原靶标基因并激活其反式切割活性后,生物素修饰的单链DNA荧光探针作为报告分子被切割,分别依据蓝光下的荧光强度和试纸条的显色情况判定检测结果;实验采用多种弧菌验证检测方法的特异性,并通过不同浓度沙氏弧菌菌液评估2种检测方法的灵敏度;最终将2种检测方法与PCR方法进行真实样本检测对比。【结果】本研究成功建立了RPA-CRISPR/Cas12a荧光检测法和试纸检测法,且均表现出优异的特异性,可准确识别沙氏弧菌,整个检测流程可在1 h内完成;2种方法的检测限均达到100 CFU/mL,检测结果与PCR高度一致(符合率100%)。【结论】本研究开发的基于RPA-CRISPR/Cas12a的荧光检测法和试纸检测法,突破了传统方法的局限,显著缩短检测时间,且无需复杂仪器,操作简便,为沙氏弧菌的现场快速检测提供了可靠的技术支持。本研究为沙氏弧菌的快速检测提供了高效、便捷的新方法,对水产养殖病害防控和食品安全保障具有重要意义。 展开更多
关键词 沙氏弧菌 重组酶聚合酶扩增(RPA) CRISPR/cas12a 荧光检测 试纸检测
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基于CRISPR-Cas系统的多重耐药菌防治技术研究进展 被引量:1
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作者 周倩 唐梦君 +4 位作者 张小燕 陆俊贤 唐修君 杨星星 高玉时 《生物技术通报》 北大核心 2025年第5期42-51,共10页
动物源细菌耐药性影响动物养殖安全,同时对人类公共卫生和食品安全产生重要威胁。抗生素的滥用加剧了耐药细菌的传播,而新型抗菌药物研发日益困难,动物源细菌耐药污染已成为全球范围内的公共危机,一旦耐药菌从动物向人类扩散,将极大地... 动物源细菌耐药性影响动物养殖安全,同时对人类公共卫生和食品安全产生重要威胁。抗生素的滥用加剧了耐药细菌的传播,而新型抗菌药物研发日益困难,动物源细菌耐药污染已成为全球范围内的公共危机,一旦耐药菌从动物向人类扩散,将极大地威胁人类健康,亟须新的方法和策略应对细菌耐药。CRISPR-Cas(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR-associated)是第三代“基因组定点编辑技术”,该技术能够靶向剪切外源性核酸,保护微生物遗传物质遗传稳定性。与传统的多重耐药菌防治策略相比,CRISPR-Cas系统具备独特的DNA序列的靶向性和灵敏度,通过精准、简便和高效的基因编辑技术,与核酸扩增技术、比色技术等相结合,可以提高灵敏度和检测时效性等性能指标。本文介绍了CRISPR-Cas系统的由来、系统分类、基因编辑的作用机理,在此基础之上,聚焦于该系统在多重耐药菌防治领域的研究进展和应用,在耐药致病菌消除、耐药基因消除以及致病菌诊断检测方面给出案例分析以及目前存在的挑战。总的来说,基于CRISPR-Cas系统的序列特异性抗菌剂能够降低细菌多重耐药性,结合核酸扩增技术和实时监控设备提升检测的精准性和效率,为动物源细菌耐药防控和监测研究提供了新思路。 展开更多
关键词 CRISPR-cas系统 基因编辑 多重耐药菌 耐药基因 防治技术
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CAS成为“世界体育最高法庭”何以可能?——基于对国际体育仲裁的批判性思考 被引量:2
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作者 姜熙 《武汉体育学院学报》 北大核心 2025年第5期43-52,共10页
国际体育仲裁院(CAS)作为国际体育领域最为核心的体育纠纷解决机构已经实质上充当着“世界体育最高法庭”的角色,但当前的CAS制度和仲裁机制却无法真正地胜任“世界体育最高法庭”的职能。运用文献资料法、逻辑分析法、比较法等方法,以... 国际体育仲裁院(CAS)作为国际体育领域最为核心的体育纠纷解决机构已经实质上充当着“世界体育最高法庭”的角色,但当前的CAS制度和仲裁机制却无法真正地胜任“世界体育最高法庭”的职能。运用文献资料法、逻辑分析法、比较法等方法,以CAS建立与兴起的深层逻辑为分析起点,探讨了CAS制度传播后导致的全球各国体育仲裁中心主义路径的依赖。文章批判性地思考了CAS存在的问题,并分析了CAS要成为真正的“世界体育最高法庭”的改革路径。研究发现,CAS的建立和兴起源于国际体育组织对国家司法干预的排斥和“体育自由王国”的维护。CAS制度的传播促成了一个无形的“体育仲裁帝国”形成。通过国际体育组织制度性赋权下的强制管辖权制度设计,国家司法权力在体育领域被消解。然而,CAS面临着过度依赖国际体育组织、仲裁员地域与提名失衡、裁决透明度不足等深层困境,导致其还不是真正意义上的“世界体育最高法庭”。CAS需通过制度重构、透明度提升及程序革新,向兼具效率与公正的全球体育司法机构转型,朝着真正的“世界体育最高法庭”发展,成为“全球体育正义的维护者”。中国应警惕体育仲裁的“制度化陷阱”,打破体育纠纷解决仲裁中心主义的“神话”,平衡司法与仲裁的关系,构建多元纠纷解决机制,推行“阳光仲裁”透明机制,优化仲裁员选拔和提名机制,推动中国体育仲裁的国际化发展。 展开更多
关键词 国际体育 国际体育仲裁院 体育仲裁 体育纠纷 司法主权
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利用CRISPR/Cas9编辑草莓FvPDS基因的研究
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作者 刘丽锋 宋艳红 +2 位作者 赵霞 李刚 周厚成 《园艺学报》 北大核心 2025年第7期1687-1695,共9页
八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)是类胡萝卜素生物合成的关键酶,其编码的PDS基因参与并调控植物类胡萝卜素的累积,PDS基因突变会使植物产生肉眼可见的白化表型,常用来作为检测基因编辑成功与否的标记基因。选取森林草莓Fv... 八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)是类胡萝卜素生物合成的关键酶,其编码的PDS基因参与并调控植物类胡萝卜素的累积,PDS基因突变会使植物产生肉眼可见的白化表型,常用来作为检测基因编辑成功与否的标记基因。选取森林草莓FvPDS基因作为靶标,利用CRISPR/Cas9系统构建双靶点基因编辑载体,农杆菌介导法稳定遗传转化森林草莓种质HLJ-005(红果)、HLJ-004(白果),通过TA克隆测序法分析基因编辑的类型。遗传转化HLJ-005约2250块叶片外植体,筛选到具有卡那霉素抗性的植株147株,通过PCR鉴定,24株为阳性材料,阳性率为16.32%,最后测序获得了5株具有编辑的材料,编辑效率为20.83%;遗传转化HLJ-004约2305块叶片外植体,获得具有卡那霉素抗性的植株234株,PCR检测为6株阳性材料,阳性率为2.56%,测序只有3株为具有编辑的材料,编辑效率为50%。两个编辑位点都产生了突变,分别是单碱基或多个碱基的缺失,但是这两份种质的突变类型不尽相同。结果表明,利用CRISPR/Cas9系统可以通过稳定表达,HLJ-004、HLJ-005两个森林草莓实现双靶点同时敲除,HLJ-004、HLJ-005可作为草莓基因编辑的遗传转化材料,并验证了适合草莓基因编辑的CRISPR/Cas9系统。 展开更多
关键词 草莓 CRISPR/cas9 FvPDS 基因编辑
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新质生产力发展视阈下的会计盈余披露改进研究——基于CAS盈余与Non-CAS盈余功用的实证检验
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作者 王霞 李泰珉 吴佳琪 《上海财经大学学报(哲学社会科学版)》 北大核心 2025年第2期50-63,共14页
新质生产力是当下我国经济高质量发展的重要动力。会计盈余信息作为利益相关者进行判断和决策的依据,是促进要素有序流动、引导资源高效配置的重要手段,充分有效的会计盈余信息披露对于发展新质生产力至关重要。但是,随着企业在科技创... 新质生产力是当下我国经济高质量发展的重要动力。会计盈余信息作为利益相关者进行判断和决策的依据,是促进要素有序流动、引导资源高效配置的重要手段,充分有效的会计盈余信息披露对于发展新质生产力至关重要。但是,随着企业在科技创新推动下不断发展新业态、新产业,传统的会计准则已经滞后于复杂的经济形势。文章通过实证研究发现,现行会计准则下的盈余(CAS盈余)无法包含新质生产力发展程度高的企业未来业绩改善的信息增量,其持续性和预测性下降。文章在CAS盈余的基础上,对企业发展新质生产力投入的临时性项目进行调整,设计了Non-CAS盈余。检验发现,对于新质生产力发展水平较高的企业,Non-CAS盈余具有更好的持续性和预测性。上述影响对创业板、科创板等非主板市场企业更为明显。在股票定价方面,Non-CAS盈余同样发挥了定价作用。因此,有必要改进现行的会计盈余披露制度,允许上市企业自愿披露Non-CAS盈余,以满足会计信息更好地服务大力发展新质生产力的时代要求。 展开更多
关键词 新质生产力 cas盈余 Non-cas盈余 盈余持续性 盈余预测性
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基于CRISPR/Cas9基因编辑系统建立WIP 1基因g.37536832 C>A位点突变的ST细胞系
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作者 王楠 杜伟伟 +7 位作者 王婉洁 王悦 袁茂莎 聂雨欣 孙亚茹 刘志国 吴添文 牟玉莲 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第5期1966-1976,共11页
【目的】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得野生型p53诱导磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase 1,WIP1)基因与精子活力显著相关的位点g.37536832 C>A突变的猪睾丸(swine testis,ST)细胞系,为在细胞层面上进一步探讨WIP 1基因... 【目的】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得野生型p53诱导磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase 1,WIP1)基因与精子活力显著相关的位点g.37536832 C>A突变的猪睾丸(swine testis,ST)细胞系,为在细胞层面上进一步探讨WIP 1基因与公猪精液品质性状之间的关系奠定基础。【方法】利用CRISPOR在线网站在猪WIP 1基因g.37536832 C>A位点附近区域设计3条向导RNA(single guide RNA,sgRNA),并将其连接至pX458-GFP载体;通过T7E1酶切试验检测3条sgRNA活性,选择效率较高的sgRNA。构建Donor载体,并将其与sgRNA载体共同转染至ST细胞,采用流式细胞术将表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的阳性细胞进行富集和单克隆细胞筛选,并对筛选出的单克隆细胞进行基因型鉴定。【结果】质粒测序结果表明,成功将3条sgRNA连接至pX458-GFP载体上;T7E1酶切结果显示,转染pX458-GFP-sgRNA1和pX458-GFP-sgRNA2质粒组产生了切割,效率分别为24%和27%,而转染pX458-GFP-sgRNA3质粒组未检测到切割,因此选择pX458-GFP-sgRNA2质粒进行试验。成功构建Donor载体,并将pX458-GFP-sgRNA2和Donor载体共转染至ST细胞。基因型鉴定结果显示,获得的269株单克隆中有205株细胞发生了基因编辑,基因编辑效率为76%,其中9株为WIP 1基因g.37536832 C>A位点纯合突变的ST细胞,精确突变效率为3%。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功获得了WIP 1基因g.37536832 C>A位点突变的ST细胞系,为深入研究WIP 1基因对公猪精液品质的影响提供了良好的细胞模型。 展开更多
关键词 CRISPR/cas9 WIP 1基因 ST细胞系
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EuCAD基因CRISPR/Cas9敲除载体构建及基因编辑效果验证
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作者 陈博雯 肖玉菲 +4 位作者 李军集 钟连香 魏秋兰 覃子海 刘海龙 《分子植物育种》 北大核心 2025年第7期2226-2231,共6页
为了对尾叶桉(Eucalyptus urophylla)木质素合成关键基因开展基因编辑研究,本研究构建了Eu-CAD基因的CRISPR/Cas9敲除载体,并利用原生质体转化体系对基因编辑效果进行验证。对EuCAD基因序列进行分析,设计两条位于外显子的靶位点序列,使... 为了对尾叶桉(Eucalyptus urophylla)木质素合成关键基因开展基因编辑研究,本研究构建了Eu-CAD基因的CRISPR/Cas9敲除载体,并利用原生质体转化体系对基因编辑效果进行验证。对EuCAD基因序列进行分析,设计两条位于外显子的靶位点序列,使用Golden Gate技术构建得到基因编辑载体pRGEB35-CAD。以尾叶桉继代苗茎尖为材料建立原生质体转化体系,用pGFP质粒进行转化,依据GFP荧光激发结果统计体系的转化率为2.47%。将pRGEB35-CAD转化至原生质体,PCR鉴定显示在原生质体中EuCAD发生了预期的基因编辑,pRGEB35-CAD取得了预期基因编辑效果。本研究构建的EuCAD基因CRISPR/Cas9敲除载体可对目标基因进行基因编辑,为进一步创制EuCAD敲除突变体奠定了研究基础。 展开更多
关键词 CRISPR/cas9敲除载体 原生质体转化 CAD基因 尾叶桉
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应用CRISPR/Cas9技术对五指山猪GHRHR基因的编辑
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作者 王文涛 张思佳 +9 位作者 何鑫淼 陈诗怡 吴赛辉 张冬杰 陈瑶生 丛佩清 亓美玉 田明 刘娣 何祖勇 《东北农业大学学报》 北大核心 2025年第2期44-52,共9页
生长激素释放激素受体(GHRHR)表达于垂体细胞表面,调节垂体生长激素合成与分泌,对动物生长发育发挥重要调控作用。为深入了解GHRHR对五指山猪生长发育的影响,通过CRISPR-ctRNP体外酶切试验,筛选出切割效率达27.3%的1条gRNA用于构建CRISP... 生长激素释放激素受体(GHRHR)表达于垂体细胞表面,调节垂体生长激素合成与分泌,对动物生长发育发挥重要调控作用。为深入了解GHRHR对五指山猪生长发育的影响,通过CRISPR-ctRNP体外酶切试验,筛选出切割效率达27.3%的1条gRNA用于构建CRISPR/Cas9表达载体。转染五指山猪肾细胞后,经流式分选富集到编辑效率高达100%的细胞群体作为供体细胞,进行体细胞核移植;再将250枚克隆胚胎转移至5头代孕母猪输卵管中,最终1头代孕母猪成功妊娠,分娩3头克隆仔猪均为GHRHR双等位基因编辑个体;编辑均导致GHRHR基因产生移码突变,可导致蛋白翻译提前终止,丧失生物学功能。最终仅有1头GHRHR编辑五指山猪存活,该个体60日龄时,体质量较野生型个体平均体质量下降23.4%。研究结果在五指山猪中实现GHRHR基因高效编辑,为培养微型宠物猪及解析GHRHR的调控功能提供理论依据。 展开更多
关键词 五指山猪 生长激素释放激素受体 基因编辑猪 CRISPR/cas9
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基于CAS理论下体育与健康课程培养学生核心素养系统的机理研究
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作者 张娜 胡祖尧 《青少年体育》 2025年第8期75-78,共4页
培养学生核心素养是新时代体育与健康课程的重要目标导向,但现有研究多集中于单一要素或静态分析,本文旨在为培养学生核心素养提供参考和智力支持、系统的理论认知,让理论认知产生践行能力,并为教学实践优化提出建议。本文以复杂适应系... 培养学生核心素养是新时代体育与健康课程的重要目标导向,但现有研究多集中于单一要素或静态分析,本文旨在为培养学生核心素养提供参考和智力支持、系统的理论认知,让理论认知产生践行能力,并为教学实践优化提出建议。本文以复杂适应系统(Complex Adaptive System,CAS)为研究框架,运用系统分析法、文献资料法、专家访谈法对体育与健康课程培养学生核心素养育人系统的机理进行分析,研究通过探究课程系统中的主体(学生、教师)、环境(教学资源、社会需求)与规则(教学目标、评价体系)的适应性互动,揭示体育教育如何通过自组织、非线性反馈和协同演化等机制促进学生运动能力、健康行为、体育品德等核心素养的形成。研究发现:体育与健康课程培养学生核心素养这一系统具有多主体、多环节、多层次和多要素的特点,是一个明显的CAS。研究认为:适应性主体是体育与健康课程培养学生核心素养的原动力,聚集是其基本特质,标识是其基本导向机制,非线性是其持续发展作用的内在动力,流的畅通是其发展作用的必备条件,多样性是其系统不断产生发展适应的重要条件,内部模型和积木的组合是其系统生成发展的可持续机制。 展开更多
关键词 体育与健康课程 核心素养 cas理论
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基于CAS理论的公立医院财会监督体系运行机制模型探索
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作者 陈隽 向炎珍 +1 位作者 曹卉 胡金艳 《中国卫生经济》 北大核心 2025年第4期99-103,共5页
公立医院财会监督是1项复杂的系统性工程,目前缺乏全面、系统的指导,需要通过实践完善相关理论体系。文章在运用复杂适应系统(Complex Adaptive System,CAS)理论框架对公立医院财会监督体系进行分析的基础上,构建了CAS理论的公立医院财... 公立医院财会监督是1项复杂的系统性工程,目前缺乏全面、系统的指导,需要通过实践完善相关理论体系。文章在运用复杂适应系统(Complex Adaptive System,CAS)理论框架对公立医院财会监督体系进行分析的基础上,构建了CAS理论的公立医院财会监督体系运行机制模型。公立医院财会监督符合CAS理论的聚集性、非线性、要素流和多样性的特征,通过构建公立医院财会监督CAS模型,对于推动复杂治理环境下的公立医院财会监督体系建设具备可行性与推广性。 展开更多
关键词 公立医院 财会监督体系 复杂适应系统理论
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CRISPR/Cas系统的生物传感器在食品安全快速检测中的应用 被引量:3
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作者 唐兴悦 沈亚芳 +5 位作者 舒在习 黄爱霞 林锋 乔朝晖 戴煌 郝贵杰 《中国食品学报》 北大核心 2025年第1期411-426,共16页
规律成簇的间隔短回文重复序列(CRISPR)及其相关蛋白(Cas)组成的CRISPR/Cas系统,因具有极高的特异性、可编程性和易操作等优势而被广泛应用于食品安全快速检测领域。近年来,基于CRISPR/Cas系统的生物传感器发展迅速,已成为快速检测领域... 规律成簇的间隔短回文重复序列(CRISPR)及其相关蛋白(Cas)组成的CRISPR/Cas系统,因具有极高的特异性、可编程性和易操作等优势而被广泛应用于食品安全快速检测领域。近年来,基于CRISPR/Cas系统的生物传感器发展迅速,已成为快速检测领域的明星工具之一。本文探讨CRISPR/Cas系统中Cas9、Cas12a、Cas13a和Cas14a等常见Cas效应蛋白的作用机制及应用范围,综述其在食源性致病菌、重金属、农药残留和真菌毒素等常见食品有害物质快速检测中的应用,分析CRISPR/Cas生物传感器目前所面临的挑战和发展趋势,以期为其在食品安全领域的应用提供新思路。 展开更多
关键词 CRISPR/cas 生物传感器 食品安全 快速检测
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基于RTCPA-CRISPR/Cas12a的牛病毒性腹泻病毒检测方法的建立及应用
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作者 蒙琦 常亮 +2 位作者 杨明 曹映辉 贺泂杰 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期80-88,共9页
本研究旨在建立一种检测牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a方法。选取BVDV的E0蛋白基因序列为基础,设计CPA特异性引物。同时,依据CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了crRNA靶向RT-RAA扩增产物,并优化了RT-CPA-CRISPR/Cas12a反应体系,... 本研究旨在建立一种检测牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a方法。选取BVDV的E0蛋白基因序列为基础,设计CPA特异性引物。同时,依据CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了crRNA靶向RT-RAA扩增产物,并优化了RT-CPA-CRISPR/Cas12a反应体系,此外,借助建立的该方法,开展了临床样品的检测。结果显示:所建立的检测方法对BVDV的最低检出限为8.0 copies/μL,并具有高度特异性,对42份临床样品检测显示,该方法与传统PCR方法的一致性好,符合率能达到92.86%。该研究建立了牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a检测方法,为该病的诊断提供了技术手段。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 交叉引物恒温扩增技术 CRISPR/cas12a 灵敏度 特异性
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基于CRISPR/Cas12a与重组酶扩增的非洲猪瘟病毒可视化检测技术
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作者 戴丽红 吴植 朱善元 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第12期124-129,共6页
旨在建立一种快速、灵敏且特异性强的即时诊断(point-of-care testing,POCT)非洲猪瘟病毒(ASFV)的检测方法,以满足现场快速诊断和监控的需求。本研究以ASFV的CD2v基因为靶点,采用酶促重组酶扩增技术(ERA)实现核酸的恒温快速扩增,并结合C... 旨在建立一种快速、灵敏且特异性强的即时诊断(point-of-care testing,POCT)非洲猪瘟病毒(ASFV)的检测方法,以满足现场快速诊断和监控的需求。本研究以ASFV的CD2v基因为靶点,采用酶促重组酶扩增技术(ERA)实现核酸的恒温快速扩增,并结合CRISPR/Cas12a系统对扩增产物进行特异性识别,同时结合荧光报告分子,构建了一种可视化快速检测体系。通过优化反应条件,验证了该体系的灵敏度、特异性和稳定性。结果:该检测体系在37℃恒温条件下,30 min内即可完成检测,灵敏度可达10 copies/μL病毒DNA。特异性检测结果显示,该体系未与伪狂犬病毒(PRV)等常见猪病病毒发生交叉反应,且阳性样品可通过肉眼直观识别。此外,该方法无需精密仪器和复杂操作,检测周期显著短于传统方法。综上,本研究建立的ASFV可视化快速检测体系具有快速、灵敏、特异性强和操作简便等特点,在实验室条件下表现出良好性能,为其在现场条件下的早期诊断和监测应用提供了技术储备和研究基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 即时诊断 酶促重组酶扩增技术 CRISPR/cas12a 侧向流试验
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Investigating on casting mold (or core) making with coated sand by the selected laser sintering 被引量:7
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作者 Zitian FAN Naiyu HUANG +1 位作者 Yan LI Zhili LIU 《China Foundry》 SCIE CAS 2004年第2期122-126,共5页
Using a special coated sand as the material of the selected laser sintering (SLS), the authors test and investigate the strength change of the test samples in terms of different sintering parameters (scanning speed, l... Using a special coated sand as the material of the selected laser sintering (SLS), the authors test and investigate the strength change of the test samples in terms of different sintering parameters (scanning speed, laser power, sintering thickness, and so on). The characteristics of coated sand hardening by laser beam are analyzed. The sintered mold (or core) for given casting is poured with molten metal. 展开更多
关键词 rapid prototyping selected laser sintering(SLS) laser scanning casting mold(core) technological parameters
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CAS协同理论框架下产教融合共同体的复杂度分析与构建策略
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作者 韩莉莉 安建业 +1 位作者 王文佳 胡梦涵 《北京城市学院学报》 2025年第4期33-39,共7页
产教融合共同体在国家职业教育革新与人才强国战略中扮演着至关重要的角色。文章依托复杂适应系统(CAS)理论,深入剖析了产教融合共同体的复杂性,如参与主体的多样性与非线性交织、利益链条的复杂性与差异化并存、合作模式的多元化发展... 产教融合共同体在国家职业教育革新与人才强国战略中扮演着至关重要的角色。文章依托复杂适应系统(CAS)理论,深入剖析了产教融合共同体的复杂性,如参与主体的多样性与非线性交织、利益链条的复杂性与差异化并存、合作模式的多元化发展与挑战共生,发展环境的开放性与不确定性同在等难题。在此基础上,结合融合协同理论,文章提出了构建产教融合共同体的三大策略。 展开更多
关键词 cas协同理论 产教融合共同体 时代境遇 复杂度分析 构建策略
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CRISPR/Cas9技术:探索lncRNA的自身功能以及在癌症进程中的作用
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作者 李欣 胡莹 王玉明 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第3期364-375,共12页
CRISPR/Cas系统的出现极大推动了基因编辑领域的进步,特别是CRISPR/Cas9系统,已成为生物医学研究的核心工具。长非编码RNA(lncRNA)在基因调控、细胞分化和多种疾病的发展过程中发挥关键作用,尤其在癌症研究中,lncRNA作为癌症生物标志物... CRISPR/Cas系统的出现极大推动了基因编辑领域的进步,特别是CRISPR/Cas9系统,已成为生物医学研究的核心工具。长非编码RNA(lncRNA)在基因调控、细胞分化和多种疾病的发展过程中发挥关键作用,尤其在癌症研究中,lncRNA作为癌症生物标志物和治疗靶点,具有重要的应用前景。然而,由于lncRNA普遍具有低丰度和保守性差等特点,限制了传统手段对其功能的研究。CRISPR/Cas9技术为lncRNA的研究提供了一个高效、灵活且精确的工具,显著加速了该领域的进展。本文首先回顾了CRISPR/Cas9系统的基本原理及其在基因编辑中的广泛应用,包括CRISPR敲除、敲入、干扰和激活等多种功能系统。这些技术不仅可以筛选特定生物过程中的关键lncRNA,还能够用于基因功能研究,探索其在疾病中的作用。本文重点分析了CRISPR/Cas9技术在研究lncRNA功能和调控机制,以及其在肿瘤研究中的关键应用。此外,文章还总结了通过CRISPR/Cas9进行全基因组筛选以识别功能性lncRNA的方法,并探讨了这些lncRNA在癌症细胞增殖、迁移、侵袭以及耐药性中的作用。CRISPR/Cas9敲除系统可以高效敲除lncRNA基因,揭示其在基因调控中的具体功能。同时,CRISPR激活和干扰技术为非编码基因的研究提供了新的思路,通过调控lncRNA的表达水平,进一步探索其在癌症等疾病中的临床应用。文章还探讨了CRISPR技术在未来lncRNA研究中的潜力,尤其是在解决基因组复杂性、靶向效率和脱靶效应等技术难题方面的进展。综上所述,CRISPR/Cas9技术不仅为研究lncRNA提供了强有力的工具,也为未来开发新的癌症诊断和治疗手段提供了新的思路和机会。 展开更多
关键词 成簇的规则间隔短回文重复序列(CRISPR/cas9) 长非编码RNA 基因调控 癌症
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