牛肺炎链球菌重组PsaA蛋白对牛胚气管上皮细胞黏附抑制作用的研究 被引量：5

1

作者 孙雅婕 郭婷 +5 位作者 周雅坪 赵红梅 赵逢淼 高源 李梦思 郝永清 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期195-200,共6页

为研究牛肺炎链球菌的黏附蛋白—肺炎链球菌表面黏附素A (PsaA)对牛肺炎链球菌黏附牛胚气管上皮细胞的影响,本研究利用PCR扩增牛肺炎链球菌psaA基因,构建重组质粒pET32a-PsaA,经双酶切和测序鉴定正确后,将阳性重组质粒转化BL21(DE3)感... 为研究牛肺炎链球菌的黏附蛋白—肺炎链球菌表面黏附素A (PsaA)对牛肺炎链球菌黏附牛胚气管上皮细胞的影响,本研究利用PCR扩增牛肺炎链球菌psaA基因,构建重组质粒pET32a-PsaA,经双酶切和测序鉴定正确后,将阳性重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞后进行IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE和western blot鉴定重组PsaA蛋白(rPsaA)的表达情况及反应原性,结果显示,rPsaA在上清和沉淀中均获得了表达,且具有较好的反应原性。将牛胚气管上皮细胞与1.3×10^(8)cfu/mL的牛肺炎链球菌稀释液于37℃共孵育后,利用间接免疫荧光试验(IFA)检测牛肺炎链球菌对牛胚气管上皮细胞的黏附性,结果显示,可观察到黏附在牛胚气管上皮细胞的牛肺炎链球菌的绿色荧光,即牛肺炎链球菌可以黏附牛胚气管上皮细胞。利用牛肺炎链球菌稀释液孵育经不同浓度rPsaA预处理的牛胚气管上皮细胞后,对黏附的细菌计数,结果显示,rPsaA可以极显著减少牛肺炎链球菌对牛胚气管上皮细胞的黏附菌数(P<0.01)。利用本研究制备的rPsaA多克隆抗体和肺炎链球菌阳性血清分别与牛肺炎链球菌作用后,与牛胚气管上皮细胞孵育,对黏附的细菌计数,结果显示,rPsaA多克隆抗体与肺炎链球菌阳性血清均能有效减少牛肺炎链球菌对牛胚气管上皮细胞的黏附数。本研究经原核系统表达了牛肺炎链球菌rPsaA,并首次证明rPsaA具有影响牛肺炎链球菌黏附牛胚气管上皮细胞的作用,该结果为探究抑制肺炎链球菌黏附呼吸道上皮细胞的机理以及肺炎链球菌亚单位疫苗的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 psaa基因 原核表达 黏附

在线阅读 下载PDF 职称材料

烟草PsaA/PsaB基因家族鉴定及其对逆境胁迫的响应 被引量：1

2

作者 常永春 尹国英 +4 位作者 燕一波 郭玉双 羽王洁 彭一洪 吴玉香 《陕西师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期55-70,共16页

PsaA和PsaB是光系统Ⅰ的中心蛋白,在植物光合作用及逆境调控中发挥重要功能。烟草(Nicotiana tabacum L.)是植物功能基因组学研究的模式作物,目前关于其PsaA和PsaB基因功能的研究较少。为解析烟草PsaA/PsaB基因对逆境胁迫的响应规律,在... PsaA和PsaB是光系统Ⅰ的中心蛋白,在植物光合作用及逆境调控中发挥重要功能。烟草(Nicotiana tabacum L.)是植物功能基因组学研究的模式作物,目前关于其PsaA和PsaB基因功能的研究较少。为解析烟草PsaA/PsaB基因对逆境胁迫的响应规律,在烟草基因组中鉴定PsaA/PsaB基因家族,并对其理化性质、亚细胞定位、系统进化、Motif基序、启动子调控元件进行分析。结果表明:烟草中共有27个PsaA/PsaB基因,与拟南芥相比,烟草PsaA/PsaB基因家族大量扩增,根据系统发育和结构特征可分为3类亚家族。烟草PsaA/PsaB基因启动子中含有大量响应光、低温、干旱及植物激素等的顺式作用元件。RT-qPCR分析发现,多数烟草PsaA/PsaB基因在低温胁迫下表达量上调,上调数目为8个;而在聚乙二醇、茉莉酸甲酯胁迫下表达量下调,下调数目分别为8个和7个;马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)和烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)感染后大多数烟草PsaA/PsaB基因表达量下调,PVY感染后下叶肉和叶脉组织中基因下调数目分别为19个和17个,其中叶脉中下调更明显,TMV感染后基因下调数目为9个。可见,烟草PsaA/PsaB基因参与烟草对多种非生物胁迫的应答过程,研究结果为进一步探索PsaA/PsaB基因在调控植物对逆境胁迫响应中的作用提供了参考。 展开更多

关键词 烟草 psaa/PsaB基因家族 聚乙二醇响应 茉莉酸甲酯响应 干旱胁迫 低温胁迫 TMV响应 PVY响应

在线阅读 下载PDF 职称材料

肺炎链球菌表面黏附素A(PsaA)的研究进展 被引量：2

3

作者 何斌 朱虹 《微生物学免疫学进展》 2007年第3期84-86,共3页

肺炎链球菌表面黏附素A(PsaA)是各型肺炎链球菌共有的种特异性表面结合脂蛋白,具有较好的免疫原性,在肺炎链球菌黏附呼吸道粘膜过程中起关键作用,PsaA的编码基因psaA在遗传上高度保守,PsaA是目前肺炎链球菌抗原研究的热点之一。本文就... 肺炎链球菌表面黏附素A(PsaA)是各型肺炎链球菌共有的种特异性表面结合脂蛋白,具有较好的免疫原性,在肺炎链球菌黏附呼吸道粘膜过程中起关键作用,PsaA的编码基因psaA在遗传上高度保守,PsaA是目前肺炎链球菌抗原研究的热点之一。本文就十年来PsaA的研究进展作一简要综述。 展开更多

关键词 肺炎链球菌表面黏附素A(psaa) psaa基因 重组psaa

暂未订购

PSAA水溶液中铝形态分布研究 被引量：16

4

作者 高宝玉 李翠平 +1 位作者 于慧 岳钦艳 《中国环境科学》 EI CAS CSSCI CSCD 北大核心 1997年第3期279-282,共4页

ＰＳＡＡ是一种含有铝离子的聚硅酸絮凝剂。本文用２７Ａｌ－ＮＭＲ法和Ａｌ－Ｆｅｒｒｏｎ逐时络合比色法研究了ＰＳＡＡ水溶液中铝的形态分布情况，考察了ＳｉＯ２／Ａｌ３＋摩尔比，温度及稀释作用对铝的形态分布的影响。结果表明，... ＰＳＡＡ是一种含有铝离子的聚硅酸絮凝剂。本文用２７Ａｌ－ＮＭＲ法和Ａｌ－Ｆｅｒｒｏｎ逐时络合比色法研究了ＰＳＡＡ水溶液中铝的形态分布情况，考察了ＳｉＯ２／Ａｌ３＋摩尔比，温度及稀释作用对铝的形态分布的影响。结果表明，ＰＳＡＡ水溶液中的铝主要是以单核羟铝络合物形式存在，聚硅酸的存在对铝的形态分布影响不大，温度对铝的形态分布无影响，稀释作用对铝的形态分布有一定的影响。 展开更多

关键词 psaa 絮凝剂 水溶液 铝 形态分布

在线阅读 下载PDF 职称材料

球形棕囊藻(Phaeocystis globosa)叶绿体psaA基因片段的序列分析 被引量：10

5

作者 杨泽民 章群 +3 位作者 谢数涛 韩博平 吕颂辉 Hodgkiss 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期435-439,共5页

根据GenBank中检索到的南极棕囊藻(Phaeocystisantarctica)psaA基因序列设计psaAL和psaAR引物,对球形棕囊藻(Phaeocystisglobosa)的psaA基因片段进行PCR扩增并测序,获得了629bp的DNA序列。应用ClustalX对球形棕囊藻P1、P2株系和南极棕... 根据GenBank中检索到的南极棕囊藻(Phaeocystisantarctica)psaA基因序列设计psaAL和psaAR引物,对球形棕囊藻(Phaeocystisglobosa)的psaA基因片段进行PCR扩增并测序,获得了629bp的DNA序列。应用ClustalX对球形棕囊藻P1、P2株系和南极棕囊藻的psaA基因片段序列进行比对,结果表明,球形棕囊藻psaA基因片段序列无插入/缺失,核苷酸差异率为3.34%。应用DNAstar分析软件推断球形棕囊藻和南极棕囊藻的psaA基因对应的氨基酸序列和RNA二级结构,发现它们的氨基酸序列差异不大,序列中209个氨基酸只有1个发生了变化,其氨基酸变异率为0.48%;除部分结构域比较相似外,RNA二级结构上体现一定程度的差异,这可能对棕囊藻的分子分类研究有参考价值。因所获得的psaA基因片段序列及氨基酸序列具有种的极端保守性,不适宜用作Phaeocystis属种间的分子分类研究。 展开更多

关键词 球形棕囊藻 南极棕囊藻 psaa基因:DNA序列 氨基酸序列 RNA二级结构 藻类

在线阅读 下载PDF 职称材料

坛紫菜叶绿体psaA基因片段的序列分析 被引量：7

6

作者 佘大为 张海波 +1 位作者 王月 侯和胜 《水产科学》 CAS 北大核心 2007年第5期289-291,共3页

根据日本kazusaDNA研究所收录的坛紫菜EST序列AV434021和AV433683设计引物,对坛紫菜配子体的RNA进行RT-PCR扩增,得到产物长度为480 bp。利用DNAstar、Clastal1.81等专业软件进行分析,结果表明,所得产物为紫菜叶绿体的psaA基因片段,其G+... 根据日本kazusaDNA研究所收录的坛紫菜EST序列AV434021和AV433683设计引物,对坛紫菜配子体的RNA进行RT-PCR扩增,得到产物长度为480 bp。利用DNAstar、Clastal1.81等专业软件进行分析,结果表明,所得产物为紫菜叶绿体的psaA基因片段,其G+C含量为55.9%。G+C含量明显高于A+T的含量;对按核酸序列推导的蛋白序列进行二级结构和三级结构预测,该蛋白存在3个α螺旋和2个β折叠。 展开更多

关键词 坛紫菜 psaa基因 RT—PCR 序列分析 结构预测

在线阅读 下载PDF 职称材料

鼠疫菌PsaA抗原的表达及抗体制备和应用

7

作者 洪文艳 王浩然 +3 位作者 王津 郭兆彪 周蕾 杨瑞馥 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第12期2201-2203,共3页

目的:制备鼠疫菌PsaA抗原及抗体,建立针对PsaA抗体的快速检测方法,并检测鼠疫感染猴血清标本中的PsaA抗体的阳性率。方法:利用PCR方法扩增出PsaA蛋白基因片段,在大肠杆菌原核表达系统中表达出重组PsaA抗原,以镍柱亲和层析纯化包涵体形... 目的:制备鼠疫菌PsaA抗原及抗体,建立针对PsaA抗体的快速检测方法,并检测鼠疫感染猴血清标本中的PsaA抗体的阳性率。方法:利用PCR方法扩增出PsaA蛋白基因片段,在大肠杆菌原核表达系统中表达出重组PsaA抗原,以镍柱亲和层析纯化包涵体形式的表达蛋白,以尿素梯度透析复性成可溶蛋白。再以表达蛋白为免疫原,常规免疫家兔,收集兔血清制备多抗,并以正辛酸-硫酸铵法提纯获得PsaA抗体IgG。利用得到的PsaA抗原和抗体为材料,建立两种检测PsaA抗体的快速检测方法,即间接ELISA法和上转换发光(Up-converting Phospher Technology,UPT)免疫层析试纸条法。最后利用这两种方法检测18份猴血清标本中的PsaA抗体。结果:鼠疫菌感染猴血清标本中PsaA抗体的阳性率为62%(8/13)。结论:成功建立了针对鼠疫菌PsaA抗体的快速检测方法,并检测到13份鼠疫感染猴血清标本中的PsaA抗体的阳性率为62%。 展开更多

关键词 鼠疫菌 psaa抗原 蛋白表达 抗体制备 抗体检测

原文传递

广东省575株肺炎链球菌的毒力因子psaA、ply基因检测分析 被引量：3

8

作者 熊平 李柏生 +6 位作者 江锦志 彭托华 杨彤 刘美真 柯碧霞 刘闪闪 柯昌文 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第8期693-698,共6页

目的采用PCR检测肺炎链球菌(S.pn)毒力基因psaA和ply,研究分析两个毒力基因的特异性,为S.pn临床诊断提供依据。方法对广东省12家医疗机构诊断为S.pn感染患者的654份标本,经过细菌培养和乳胶凝集试验筛选出575株,以psaA、ply基因核心区... 目的采用PCR检测肺炎链球菌(S.pn)毒力基因psaA和ply,研究分析两个毒力基因的特异性,为S.pn临床诊断提供依据。方法对广东省12家医疗机构诊断为S.pn感染患者的654份标本,经过细菌培养和乳胶凝集试验筛选出575株,以psaA、ply基因核心区域序列设计合成扩增引物,以抽提的S.pn分离株DNA为模板,采用常规聚合酶链反应(PCR)扩增目标基因psaA、ply片段,长度分别为838bp和209bp,调查分析不同来源标本的分离株psaA和ply基因检出率;采用乳胶凝集试验与多重PCR分型,比较两种结果中S.pn菌株psaA和ply检出率差异,以及广东S.pn主要血清型与非主要血清型菌株的psaA和ply检出率情况。结果经乳胶凝集试验鉴定为S.pn的560株菌株中,psaA和ply基因检出率分别为78.21%和83.57%,ply基因检出率高于psaA基因,psaA基因阳性的S.pn菌株,其ply基因均阳性;来源于血液和脑脊液标本的S.pn分离株的psaA和ply基因检出率分别为93.18%和95.45%,脓液标本分离的S.pn菌株psaA和ply基因检出率为100%。在荚膜肿胀反应和多重PCR检测为S.pn可分型血清型菌株中,前者psaA和ply基因阳性率分别为93.90%和98.57%,后者为96.34%和98.31%;而在多重PCR检定为不可分型血清型菌株中,psaA和ply基因检出率分别为47.06%和57.84%,显著低于荚膜肿胀试验的68.59%和74.64%,但ply基因检出率也均比psaA高;可分型血清型中主要血清型菌株的psaA和ply基因检出率高于非主要血清型。结论广东地区S.pn临床分离株中ply基因检出率比psaA高,保守性高,但其他链球菌亦能扩增出ply基因从而出现假阳性,因此,对于S.pn菌株的鉴定,采用PCR同时扩增psaA和ply基因,并结合临床常规实验,鉴定更为可靠。此外,血液和脑脊液psaA和ply基因阳性率高可能与psaA和ply是S.pn入侵血和脑的关键因子有关。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 psaa基因 ply基因 PCR

原文传递

基于psaA和psbA基因的红索藻目系统发育研究 被引量：3

9

作者 王亚楠 冯佳 谢树莲 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期257-260,共4页

对红索藻目植物棘刺红索藻(Thorea hispida)的psaA和psbA基因进行扩增和测序,并与其它类群比对分析,分别用最大简约法、邻接法和贝叶斯法构建系统发育树。结果显示,psaA和psbA基因测得的序列片段分别为825和920 bp,psaA基因A、T、C、G... 对红索藻目植物棘刺红索藻(Thorea hispida)的psaA和psbA基因进行扩增和测序,并与其它类群比对分析,分别用最大简约法、邻接法和贝叶斯法构建系统发育树。结果显示,psaA和psbA基因测得的序列片段分别为825和920 bp,psaA基因A、T、C、G碱基含量分别为29.9%、35.8%、16.5%和17.8%,psbA基因A、T、C、G碱基含量分别为27.5%、35.3%、16.8%和20.4%,两个基因A+T含量均高于C+G含量,说明两个基因在进化上均有碱基的偏好性。用3种方法所构建的系统树拓扑结构基本一致,红索藻目植物均聚合于一个分支,独立于其它类群,支持红索藻目为一独立的目。 展开更多

关键词 psaa PSBA 红索藻目 系统发育

在线阅读 下载PDF 职称材料

花叶矢竹psaA基因克隆及功能分析 被引量：2

10

作者 徐丽丽 安苗苗 +3 位作者 姜可以 许冰清 杨海芸 周明兵 《竹子研究汇刊》 北大核心 2015年第1期41-48,共8页

光系统I(PS I)主要分布在类囊体膜的非垛叠部分,由反应中心复合体和捕光复合体I(LHC I)等亚单位组成。PS I反应中心复合体的功能是将电子从PC传递给铁氧还蛋白,psa A所编码的蛋白Psa A是复合体重要组成部分。研究基于psa A高保守性,扩增... 光系统I(PS I)主要分布在类囊体膜的非垛叠部分,由反应中心复合体和捕光复合体I(LHC I)等亚单位组成。PS I反应中心复合体的功能是将电子从PC传递给铁氧还蛋白,psa A所编码的蛋白Psa A是复合体重要组成部分。研究基于psa A高保守性,扩增出psa A全长序列,获得其编码区2516bp。对该序列及其推导出的氨基酸序列结构进行分析,将之与其他禾本科植物的psa A氨基酸序列进行同源性比较,并构建出基于psa A的系统进化树。通过定量RT-PCR调查了psa A基因在花叶矢竹叶色变异过程中表达丰度变化,分析其在花叶矢竹叶片发育过程中的作用,为进一步探讨花叶矢竹叶色变异的分子机理奠定一定的基础。 展开更多

关键词 花叶矢竹 psaa基因 克隆 RT-PCR 功能分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

新型抗氧化膜材料PSAA的研制 被引量：1

11

作者 陈永康 林梁雪仪 +1 位作者 吴清辉 王树森 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期7-13,共7页

对聚亚磺酰氨基酰胺(PSAA)作为新型抗氧化反渗透膜材料的可能性,以及聚合条件和成膜条件对膜性能的影响作了初步研究。

关键词 膜 psaa 抗氧化 反渗透膜材料

在线阅读 下载PDF 职称材料

高粱叶绿体psaA基因的克隆和核苷酸序列分析 被引量：2

12

作者 龚小松 阎景智 +1 位作者 吴乃虎 阎隆飞 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期207-212,共6页

我们克隆了含高粱叶绿体psaA基因的6.7kb EcoRI酶切片段,进行了限制酶图谱分析和核苷酸序列结构测定,所测核苷酸序列总长为3080bp,其中高粱叶绿体psaA基因序列为2253bp,编码一个含750个氨基酸残基的蛋白质,其分子量为83000Da。高粱psaA... 我们克隆了含高粱叶绿体psaA基因的6.7kb EcoRI酶切片段,进行了限制酶图谱分析和核苷酸序列结构测定,所测核苷酸序列总长为3080bp,其中高粱叶绿体psaA基因序列为2253bp,编码一个含750个氨基酸残基的蛋白质,其分子量为83000Da。高粱psaA基因的核苷酸序列与玉米、水稻、菠菜的同源性分别为99.4%、96.3%和89.4%;推导出的氨基酸序列的同源性分别为99.3%、98.0%和95.7%。C_4植物与C_3植物比较,由于P_(700)脱辅基蛋白的第493位氨基酸性质的不同(Gly→Arg,Ser),而导致了它们的多肽在疏水性图谱上的差异。 展开更多

关键词 高粱 psaa基因 核苷酸序列

在线阅读 下载PDF 职称材料

肺炎链球菌去信号肽脂蛋白PsaA锌离子结合特性的初步表征

13

作者 李楠 王南杰 +4 位作者 王红翠 李慧 詹胜 阳小燕 孙雪松 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期27-32,共6页

肺炎链球菌是细菌性肺炎的主要病原体。PsaA是各种肺炎链球菌共有的遗传保守的特异性表面金属结合脂蛋白。通过PCR扩增肺炎链球菌D39不含信号肽的PsaA基因片段,将其通过T4连接酶连接至含6His标签的表达载体PBAD/HisA中,转化表达宿主大... 肺炎链球菌是细菌性肺炎的主要病原体。PsaA是各种肺炎链球菌共有的遗传保守的特异性表面金属结合脂蛋白。通过PCR扩增肺炎链球菌D39不含信号肽的PsaA基因片段,将其通过T4连接酶连接至含6His标签的表达载体PBAD/HisA中,转化表达宿主大肠杆菌Top-10后用L(+)-阿拉伯糖诱导重组蛋白的表达。重组蛋白经亲和镍柱纯化以后,用外切酶-重组肠激酶(REK)去除6His标签。感应偶合电浆质谱(ICP-MS)测得纯化的PsaA蛋白以1∶1比例结合金属锌离子。进而,通过圆二色谱法分析金属离子的结合对蛋白二级结构中α-螺旋和β-片层含量的影响,荧光光谱研究蛋白结合锌离子的解离常数及结合当量,为进一步研究该蛋白在体外的金属结合特性及细菌的金属运输及毒力机制提供理论基础。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 psaa 圆二色谱法 ICP-MS 荧光光谱

原文传递

可用于多种污水净化处理的新型高分子无机混凝剂PSAA 被引量：6

14

作者 高宝玉 岳钦艳 《油田化学》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期84-86,共3页

ＰＳＡＡ是一种新型无机高分子混凝剂。本文在室内考察了ＰＳＡＡ用于净化油田稠油采出水、一般原油脱出水及油田生活污水的效果。结果表明，ＰＳＡＡ的净水效果优于ＰＡＣ，是一种可用于净化油田回注水的高效混凝剂。

关键词 混凝剂 水处理 油田注水

在线阅读 下载PDF 职称材料

重组肺炎链球菌表面黏附素A(rPsaA)的融合表达及抗原性分析 被引量：2

15

作者 何斌 朱虹 端青 《微生物学免疫学进展》 2007年第2期12-14,共3页

为探索一种大量表达功能性重组肺炎链球菌表面黏附素A(rPsaA)的方法,用PCR和基因重组技术将基因psaA的先导序列替换为伯氏疏螺旋体外膜蛋白A(OspA)信号肽基因序列,并在大肠杆菌中表达。表达产物用SDS-PAGE检测,Western blot分析抗原性... 为探索一种大量表达功能性重组肺炎链球菌表面黏附素A(rPsaA)的方法,用PCR和基因重组技术将基因psaA的先导序列替换为伯氏疏螺旋体外膜蛋白A(OspA)信号肽基因序列,并在大肠杆菌中表达。表达产物用SDS-PAGE检测,Western blot分析抗原性。结果表明,rPsaA表达量明显提高且有较好的抗原性。 展开更多

关键词 重组肺炎链球菌表面黏附素A 融合表达 抗原性

暂未订购

CTB增强PsaA疫苗对肺炎链球菌急性中耳炎的保护作用 被引量：4

16

作者 戴文佳 梁琼 +2 位作者 刘向 李雯 徐江红 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期561-566,共6页

目的研究以霍乱毒素B(CTB)作为PsaA蛋白疫苗黏膜佐剂经鼻腔黏膜途径免疫在BALB/c小鼠体内诱导的特异性免疫应答能力以及对肺炎链球菌急性中耳炎的保护作用。方法 6~8周龄的BALB/c小鼠随机分为3组,分别接受PsaA蛋白免疫(PsaA组,15μg Psa... 目的研究以霍乱毒素B(CTB)作为PsaA蛋白疫苗黏膜佐剂经鼻腔黏膜途径免疫在BALB/c小鼠体内诱导的特异性免疫应答能力以及对肺炎链球菌急性中耳炎的保护作用。方法 6~8周龄的BALB/c小鼠随机分为3组,分别接受PsaA蛋白免疫(PsaA组,15μg PsaA蛋白),PsaA蛋白及CTB免疫(PsaA/CTB组,15μg PsaA/4μg CTB),CTB免疫(CTB组,4μg CTB),经鼻腔途径免疫,相同剂量和方法每周免疫两次,连续三周,末次免疫后两周收集鼻腔灌洗液、中耳灌洗液及支气管肺泡灌洗液检测特异性IgA抗体反应;收集血清,检测特异性IgG、IgG1及IgG2a抗体反应;末次免疫后2周,小鼠经鼓膜注射14型肺炎链球菌,攻毒后5天组织病理学评估中耳炎症程度。结果PsaA/CTB组鼻腔黏膜免疫获得了较高水平的全面免疫应答:鼻腔、中耳和支气管肺泡灌洗液中特异性IgA抗体水平明显高于PsaA组和CTB组(P<0.05);血清中特异性IgG、IgG1、IgG2a抗体水平明显高于PsaA组和CTB组(P<0.05);攻毒后5天PsaA/CTB组中耳炎症细胞数少于PsaA和CTB组(P<0.05)。结论 CTB是肺炎链球菌蛋白疫苗PsaA有效的黏膜免疫佐剂,黏膜免疫也是PsaA有效的免疫途径,该免疫策略研究为新一代肺炎链球菌疫苗的设计提供了实验基础。 展开更多

关键词 霍乱毒素B 肺炎链球菌 黏膜免疫 psaa 急性中耳炎

暂未订购

肺炎链球菌表面抗原PsaA-PspA融合蛋白双抗夹心ELISA定量检测方法的建立及验证 被引量：3

17

作者 孙青 赵兴红 +1 位作者 吴永革 谷铁军 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第8期892-895,901,共5页

目的建立快速测定肺炎链球菌表面抗原PsaA-PspA融合蛋白含量的双抗夹心ELISA方法,并进行验证。方法制备PsaA-PspA抗原,确定PsaA单抗和PsaA-PspA兔多抗的最佳工作浓度,建立双抗夹心ELISA方法。对方法的抗原特异性、精密性和准确性进行验... 目的建立快速测定肺炎链球菌表面抗原PsaA-PspA融合蛋白含量的双抗夹心ELISA方法,并进行验证。方法制备PsaA-PspA抗原,确定PsaA单抗和PsaA-PspA兔多抗的最佳工作浓度,建立双抗夹心ELISA方法。对方法的抗原特异性、精密性和准确性进行验证,并分析变性抗原对测定的影响。结果单抗和兔多抗最佳稀释倍数为1∶500和1∶10 000。建立的双抗夹心ELISA法检测PsaA-PspA抗原的浓度范围为70~560 ng/m L,R^2为0.993 8;该方法不适用于其他抗原的测定,但可用于鉴定抗原是否变性;该方法检测不同批次PsaA-PspA抗原的批内平均变异系数(CV)为4.9%,批间平均CV为19%,平均回收率为88.98%。结论建立的双抗夹心ELISA方法特异性、精密性和准确性良好,可用于PsaA-PspA融合蛋白浓度的检测,且可检测抗原是否变性。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 表面抗原 psaa-PspA融合蛋白 酶联免疫吸附测定

原文传递

细胞因子基因融合增强PsaA免疫原性的研究及其在小鼠中保护性免疫的评估

18

作者 何平 《国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册）》 2003年第6期271-272,共2页

关键词 细胞因子 基因融合 psaa 免疫原性 小鼠 保护性免疫

暂未订购

皮下免疫肺炎球菌PsaA肽对小鼠肺炎球菌携带的抑制

19

作者 李振红 《国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册）》 2003年第3期132-132,共1页

关键词 肺炎球菌 皮下免疫 psaa肽 小鼠 肺炎球菌携带 免疫原性

暂未订购

肺炎链球菌外膜蛋白PspA和PsaA的免疫原性比较

20

作者 林海英 孟春 +1 位作者 林子琳 郭养浩 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期712-716,共5页

目的 比较肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）表面黏附素A（PsaA）和表面蛋白A（PspA）的免疫原性.方法 电泳分析Sp6B亚型菌株的两种外膜蛋白基因及所编码蛋白相对分子质量的可变性,采用Western blot方法比较两种重组外膜蛋白对5... 目的 比较肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）表面黏附素A（PsaA）和表面蛋白A（PspA）的免疫原性.方法 电泳分析Sp6B亚型菌株的两种外膜蛋白基因及所编码蛋白相对分子质量的可变性,采用Western blot方法比较两种重组外膜蛋白对5种亚型菌株相应蛋白抗血清的交叉反应,采用酶联免疫吸附法（ELISA）分析两种外膜蛋白的抗体类型和抗体水平以及抗血清对5种亚型菌株的亲和性,以小鼠保护实验比较两种蛋白对5种亚型菌株的交叉保护作用.结果 两种蛋白产生的抗体亚型水平相当 PspA蛋白与其他亚型蛋白的交叉反应广泛性不如PsaA蛋白,只限于同一支系的蛋白之间 PspA抗体与病原菌具有可接近性,并具备交叉免疫保护作用.可作为一种更有效的抗原成分.结论 PspA对同家族同支系菌株攻击具有交叉免疫保护作用,可作为一种更有效的抗原成分. 展开更多

关键词 肺炎链球菌 psaa PSPA 免疫原性

原文传递