原生质体融合获得羊肚菌黑色栽培种与黄色非栽培种间杂交高产菌株 被引量：2

1

作者 廖武俊 钟啟萍 +2 位作者 李荣光 霍达 霍光华 《江西农业大学学报》 北大核心 2025年第2期349-359,共11页

【目的】目前限制江西地区羊肚菌产业发展的主要问题为产量低、高产难重复及优质菌种少,而解决这些问题的关键在于菌种。本研究旨在选育适合江西本土栽培的高产羊肚菌新菌株。【方法】根据遗传与环境互作理论,有针对性的选择江西本土采... 【目的】目前限制江西地区羊肚菌产业发展的主要问题为产量低、高产难重复及优质菌种少,而解决这些问题的关键在于菌种。本研究旨在选育适合江西本土栽培的高产羊肚菌新菌株。【方法】根据遗传与环境互作理论,有针对性的选择江西本土采集到的野生黄色羊肚菌JFRL01-161和在江西鹰潭地区商业栽培的梯棱羊肚菌JFRL01-107、六妹羊肚菌JFRL01-217作为原始菌种,通过20 g/L溶壁酶+10 g/L蜗牛酶组成的复合酶溶解细胞壁制取原生质体,再通过高温和紫外双灭活获得2种灭活原生质体,将不同灭活的原生质体进行两两融合获得融合子。对得到的融合子进行拮抗试验,栽培品比以及区间简单重复序列标记(ISSR)鉴定确定种源关系。【结果】经原生质体融合共获得融合菌株16株,即A11、A37、A39、B7、B12、B17、B18、B25、B26、B29、C1、C2、C5、C6、C11和C12;其中菌株A11、A37、A39和B18出菇并形成产量,特别是融合菌株A11产量达到351.90g/m^(2),显著高于亲本JFRL01-107产量264.51g/m^(2),年度重复栽培验证试验确认A11产量可达527.8g/m^(2),亲本JFRL01-107产量为262.4 g/m^(2)。非加权算数平均聚类系统发生树(UPGMA)显示A11分别与亲本JFRL01-161(相似水平系数0.24)和JFRL01-107(相似系数水平0.696)处于不同分支,证明融合菌株A11是不同于两亲本的新菌株。【结论】融合菌株A11产量显著高于亲本,经过重复栽培试验确认其种质稳定,经ISSR确定是不同于亲本的菌株,因此融合菌株A11可作为适应江西本土栽培的高产羊肚菌新菌株。 展开更多

关键词 羊肚菌 高产羊肚菌新菌株A11 紫外和热双灭活 原生质体融合 区间简单重复序列标记分析

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原生质体ARTP诱变选育白灵菇高产菌株

2

作者 赵新海 杨帆 +4 位作者 鲍东霞 罗国秀 孙宁 黄亮 班立桐 《核农学报》 北大核心 2025年第10期2096-2103,共8页

白灵菇(Pleurotus tuoliensis)营养丰富、肉质鲜美独特,是经济价值较高的珍稀食用菌。为探寻白灵菇新种质创制方法,选育优良新品种,采用常压室温等离子体(ARTP)技术对白灵菇TN01原生质体进行诱变处理。结果表明,ARTP诱变的最佳时间为120... 白灵菇(Pleurotus tuoliensis)营养丰富、肉质鲜美独特,是经济价值较高的珍稀食用菌。为探寻白灵菇新种质创制方法,选育优良新品种,采用常压室温等离子体(ARTP)技术对白灵菇TN01原生质体进行诱变处理。结果表明,ARTP诱变的最佳时间为120 s;通过拮抗试验初步筛选出38个突变菌株后再经平板培养和产酶能力测定,最终选出了4个菌丝生长速度快、分解纤维素能力强的菌株。通过色度培养基(LBL)评价法复筛,确定突变菌株TN01-35的脱色能力最强。直接码垛法栽培的突变菌株TN01-35的生物学转化率达到了61.17%,显著高于其他参试菌株,比出发菌株提高13.00个百分点;垒泥墙栽培法的TN01-35的生物学转化率可达73.37%,比码垛栽培法提高12.20个百分点。综上,以菌丝生物学特性结合产纤维素酶能力及LBL法作为白灵菇高产突变菌株的筛选评价,方法简便有效。本研究结果可为食用菌品种改良和选育技术提供新的思路和方法。 展开更多

关键词 白灵菇TN01 原生质体 常压室温等离子体诱变 高产

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桉树焦枯病菌原生质体制备条件的优化 被引量：5

3

作者 叶小真 郭文硕 +5 位作者 冯丽贞 金亚杰 杨新新 刘宏毅 连鑫坤 李慧敏 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2016年第2期141-145,共5页

以桉树焦枯病强致病菌株Calonectria pseudoreteaudii YA51为材料,对其原生质体生成条件进行优化.结果表明,收集1 g(湿重)培养24 h的菌丝,以0.8 mol·L^(-1)Na Cl为渗透压稳定剂,置于10 m L含20 mg·m L^(-1)崩溃酶和30 mg·... 以桉树焦枯病强致病菌株Calonectria pseudoreteaudii YA51为材料,对其原生质体生成条件进行优化.结果表明,收集1 g(湿重)培养24 h的菌丝,以0.8 mol·L^(-1)Na Cl为渗透压稳定剂,置于10 m L含20 mg·m L^(-1)崩溃酶和30 mg·m L^(-1)裂解酶的混合酶液中,在30℃、100 r·min^(-1)条件下裂解4 h,原生质体生成量可达3.72×107个·m L^(-1),在SR培养基上的再生率为32.33%. 展开更多

关键词 桉树焦枯病菌 原生质体 生成量 条件优化

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高雄山虫草无性型-细脚拟青霉原生质体制备及其再生的初步研究 被引量：3

4

作者 蒲顺昌 李春如 +3 位作者 汪小艳 黄勃 樊美珍 李增智 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期421-425,共5页

对细脚拟青霉RCEF3456菌株原生质体的形成和制备有影响的多个因素,如菌丝生长时间、酶种类、酶浓度以及酶解时间等进行研究。结果表明,得到制备原生质体的最佳产量(8.0×107个.mL-1)的方法是培养18 h的菌丝、1%溶壁酶+1%Cellulase&q... 对细脚拟青霉RCEF3456菌株原生质体的形成和制备有影响的多个因素,如菌丝生长时间、酶种类、酶浓度以及酶解时间等进行研究。结果表明,得到制备原生质体的最佳产量(8.0×107个.mL-1)的方法是培养18 h的菌丝、1%溶壁酶+1%Cellulase"Onozuka"R-10+1%蜗牛酶、酶解2.5 h,而且,酶解过程都是在30℃条件下进行的;同时,对原生质体的形成以及再生过程进行显微观察,再生率为1.2%。 展开更多

关键词 细脚拟青霉 原生质体 酶解时间 原生质体产量 原生质体再生

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羊肚菌原生质体制备与再生 被引量：20

5

作者 崔宗强 罗信昌 《菌物系统》 CSCD 北大核心 2003年第3期498-501,共4页

羊肚菌原生质体制备的最佳条件为:以培养3d的菌丝体为材料, 0.6mol/L蔗糖溶液为稳渗剂,1.5%浓度的溶壁酶30℃条件下酶解3个小时,可得原生质体产量最高为3.35×106个/100mg。 以0.6mol/L的蔗糖溶液做稳渗剂, CYM再生培养基上得到原... 羊肚菌原生质体制备的最佳条件为:以培养3d的菌丝体为材料, 0.6mol/L蔗糖溶液为稳渗剂,1.5%浓度的溶壁酶30℃条件下酶解3个小时,可得原生质体产量最高为3.35×106个/100mg。 以0.6mol/L的蔗糖溶液做稳渗剂, CYM再生培养基上得到原生质体再生率为0.171%。这一研究结果为羊肚菌通过原生质体技术进行菌株的遗传改良提供了重要技术参数。 展开更多

关键词 菌丝体 酶解 原生质体产量 再生率

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花生原生质体分离与培养 被引量：3

6

作者 黄玲 赵凯 +2 位作者 孔贺 周红梅 王晶珊 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第14期47-50,共4页

以花生(Arachis hypogaeaL.)品种花育20为材料,探讨不同的酶液浓度、酶解时间及渗透压对花生原生质体分离的影响。结果表明:原生质体分离的适宜酶液配比是2%纤维素酶(Cellulase Onozuka RS)、0.2%果胶酶(Pectolyase Y-23),甘露醇渗透压... 以花生(Arachis hypogaeaL.)品种花育20为材料,探讨不同的酶液浓度、酶解时间及渗透压对花生原生质体分离的影响。结果表明:原生质体分离的适宜酶液配比是2%纤维素酶(Cellulase Onozuka RS)、0.2%果胶酶(Pectolyase Y-23),甘露醇渗透压调节剂的浓度为0.7mol/L,暗处理10h,叶片原生质体产量为4.86×105个/ml,存活率75.6%,愈伤组织原生质体产量为4.97×105个/ml,存活率75.4%。将分离的原生质体培养在添加1mg/LNAA和4mg/LBAP的改良MS液体培养基中。培养约2～3天后,细胞开始分裂。然后部分细胞继续分裂,并形成细胞团。培养5～6周后,将培养物转移到添加2mg/L2,4-D和3mg/LBAP的MS液体培养基(pH5.8)中进行培养。7～8周后,将形成的直径为1～2mm的小愈伤组织转移到添加1mg/LNAA和5mg/LBAP的MS固体培养基上培养,小愈伤组织迅速生长。转移3～4周后,愈伤组织长至7～9mm。 展开更多

关键词 花生 原生质体分离 产量 活力 培养

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2株酵母菌单倍体原生质体形成与再生条件的研究 被引量：6

7

作者 易弋 赵东玲 +3 位作者 黎娅 龚熠 黄翠姬 伍时华 《中国酿造》 CAS 北大核心 2011年第11期42-46,共5页

对酒精高产酿酒酵母GGFS16和GJ2008单倍体原生质体的形成与再生条件进行了研究。结果表明,在菌龄8h、0.2%β-巯基乙醇和0.1%EDTA-Na2预处理20min、1.5%的蜗牛酶37℃处理30min以及使用浓度170g/L的蔗糖作为渗透压稳定剂的条件下,GGFS16和... 对酒精高产酿酒酵母GGFS16和GJ2008单倍体原生质体的形成与再生条件进行了研究。结果表明,在菌龄8h、0.2%β-巯基乙醇和0.1%EDTA-Na2预处理20min、1.5%的蜗牛酶37℃处理30min以及使用浓度170g/L的蔗糖作为渗透压稳定剂的条件下,GGFS16和GJ2008单倍体原生质体的形成率和再生率均达到最大。形成率分别是98.14%和97.19%,再生率分别是17.29%和15.78%。 展开更多

关键词 酿酒酵母 酒精高产 原生质体 形成率:再生率

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原生质体融合选育赖氨酸高产菌种的研究 被引量：4

8

作者 周东坡 平文祥 +13 位作者 贾树彪 宋秀娟 刘桂荣 洪建中 洪岩 郭德栋 刘桂清 孙波 张智 郝芳兰 沈瑞萼 魏凤桐 梁金中 王建华 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期287-292,共6页

北京棒杆菌1134衍生株与枯草芽孢杆菌151衍生株的原生质体融合得到了一株可以甜菜糖蜜为原料,在摇床与小罐发酵均能稳定产赖氨酸6.50%以上的高产菌株——Q4413。Q4413菌落形态类似于1134株,而菌体形态区别于双亲,呈较短的杆状,无鞭毛,... 北京棒杆菌1134衍生株与枯草芽孢杆菌151衍生株的原生质体融合得到了一株可以甜菜糖蜜为原料,在摇床与小罐发酵均能稳定产赖氨酸6.50%以上的高产菌株——Q4413。Q4413菌落形态类似于1134株,而菌体形态区别于双亲,呈较短的杆状,无鞭毛,但有较稀疏的纤毛。生理生化研究表明:Q4413耐盐性、蔗糖发酵、石蕊牛奶试验产碱状况酷似151株,而与1134株略有差异;运动性、糊精、柠檬酸盐利用、MR 试验、酪素水解、明胶水解、石蕊牛奶还原,又酷似于1134株而区别于151株;Q4413的最适生长温度、pH 值居双亲之间;Q4413为原养型加三重抗性[Rif^r,AEC^r Nal^r];其细胞 DNA 含量与GC 比测定结果均居双亲之中,而且生物量测定结果也均与双亲有一定的差异。 展开更多

关键词 赖氨酸高产菌 选育 原生质体 融合

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草菇V_9菌株栽培性状研究 被引量：4

9

作者 蔡令仪 陈敬荣 +5 位作者 高君辉 乔卫亚 王辅德 叶叙丰 王凌健 夏镇澳 《食用菌学报》 1995年第3期37-42,共6页

利用原生质体融合菌株,通过优选试验,筛选出在产量、商品性状上优于对照V_(23),在温度上比对照种有较宽适应能力的菌株,以期应用于生产。

关键词 草姑 原生质体菌株 产量 温度 栽培

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中国水仙花粉原生质体的分离与培养 被引量：7

10

作者 陈振光 林庆良 +1 位作者 刘群 林顺权 《福建农学院学报》 CSCD 1993年第2期159-163,共5页

取水仙花花葶中上部即将开放的花蕾,按常规方法消毒后,把花粉粒挤在含纤素酶0.5%、果胶酶1.5%、甘露醇12%的酶混合液中.保育5h 后离心、纯化,可获得2±0.04×10~5(个/朵)原生质体.花粉原生质体在附加 BA,2,4-D 分别为0.5mg/L,... 取水仙花花葶中上部即将开放的花蕾,按常规方法消毒后,把花粉粒挤在含纤素酶0.5%、果胶酶1.5%、甘露醇12%的酶混合液中.保育5h 后离心、纯化,可获得2±0.04×10~5(个/朵)原生质体.花粉原生质体在附加 BA,2,4-D 分别为0.5mg/L,甘露醇5%,蔗糖10%的1/2 MS 或 KM8p 的液体培养基中,培养3d,原生质体开始分裂.每隔10d 换培养液一次,使培养基的渗透压逐渐降低至普通培养浓度.1个月后,形成肉眼可见的愈伤组织,转入以琼脂糖作固化剂的相同培养基中培养2个月后,细胞分裂减弱.愈伤组织的增殖和分化,目前正在进一步探索之中. 展开更多

关键词 水仙 花粉 原生质体 培养

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稻瘟病菌原生质体制备条件优化实验研究 被引量：6

11

作者 尹良芬 八重樫博志 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2011年第4期33-35,共3页

原生质体的制备一直是现代分子生物学研究的重要内容。以稻瘟病菌作为供试菌株,优化了其原生质体的制备条件。优化的原生质体制备条件包括:使用新鲜的菌丝进行接种;加入玻璃珠一起培养,通过振荡使菌丝体破碎分离以获得更多的生长点;菌... 原生质体的制备一直是现代分子生物学研究的重要内容。以稻瘟病菌作为供试菌株,优化了其原生质体的制备条件。优化的原生质体制备条件包括:使用新鲜的菌丝进行接种;加入玻璃珠一起培养,通过振荡使菌丝体破碎分离以获得更多的生长点;菌悬液继续加入新鲜培养液进行培养;原生质体沉淀时选择3 000r/min离心10min,保证最大限度地收集原生质体。实验证明,通过这4个条件优化后,原生质体的产量有了极大的提高,每毫升酶液可制备10 8～109个原生质体。 展开更多

关键词 原生质体制备 稻瘟病菌 原生质体产量

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响应面法优化平菇单核原生质体的制备及再生技术 被引量：1

12

作者 孔维丽 崔筱 +5 位作者 刘芹 袁瑞奇 段亚魁 康源春 孔维威 张玉亭 《天津农业科学》 CAS 2019年第12期5-10,14,共7页

为了提高平菇原生质体融合育种效率,本研究通过构建基于原生质体产量及单核原生质体再生率的响应面模型,优化平菇原生质体制备体系。以平菇菌株黑平16-1为试材,分别通过单因素试验考察菌丝菌龄(3~6 d)、酶液浓度(0.5%~2.0%)、酶解温度(2... 为了提高平菇原生质体融合育种效率,本研究通过构建基于原生质体产量及单核原生质体再生率的响应面模型,优化平菇原生质体制备体系。以平菇菌株黑平16-1为试材,分别通过单因素试验考察菌丝菌龄(3~6 d)、酶液浓度(0.5%~2.0%)、酶解温度(28~34℃)和酶解时间(3~6 h)对原生质体制备及再生率的影响,并在单因素试验基础上,设计4因素3水平的响应面试验,建立各因素与响应值(原生质体产量和单核原生质体再生率)之间的数学模型,确定原生质体制备及单核原生质体再生的最佳提取工艺。结果表明,最佳提取工艺为菌龄4 d、酶液浓度1.51%、酶解温度28.3℃、酶解时间3.7 h,在此条件下平菇原生质体产量和单核原生质体再生率分别为(2.25±0.21)×10^7个·mL^-1和(6.80±0.42)%,与模型预测值接近(2.27×10^7个·mL^-1和6.83%),方程拟合度良好,该方法适用于对平菇原生质体的制备及单核原生质体再生条件的参数优化。 展开更多

关键词 响应面法 平菇 原生质体产量 单核原生质体再生率 参数优化

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蕙兰原生质体分离条件的研究 被引量：3

13

作者 杨柏云 沈前华 +2 位作者 徐敏 杨宁生 钟青萍 《江西农业学报》 CAS 1996年第2期108-113,共6页

用蕙兰无菌苗的幼叶和幼原球茎以及花蕾时的花瓣和花粉块为材料，研究了纤维素酶（商品名ＯｎｏｚｕｋａＲ－１０）浓度、渗透压稳定剂甘露醇浓度和酶解时间等因素对蕙兰原生质体分离的影响，结果表明：①花粉块和花瓣的分离条件为１．... 用蕙兰无菌苗的幼叶和幼原球茎以及花蕾时的花瓣和花粉块为材料，研究了纤维素酶（商品名ＯｎｏｚｕｋａＲ－１０）浓度、渗透压稳定剂甘露醇浓度和酶解时间等因素对蕙兰原生质体分离的影响，结果表明：①花粉块和花瓣的分离条件为１．５％纤维素酶、０．３％果胶酶、１１％甘露醇、酶解时间６．５ｈ时，其原生质体最高得率分别为４．５６×１０６和２．１２×１０６个／ｇＦＷ。②幼叶的分离条件为１．０％纤维素酶、０．３％果胶酶、１３％甘露醇、酶解时间２０ｈ时，其原生质体最高得率为３．３６×１０６个／ｇＦＷ。③幼原球茎的分离条件为１．０％纤维素酶、０．３％果胶酶、１１％甘露醇、酶解时间１６ｈ时，其原生质体最高得率为１．８７×１０５个／ｇＦＷ。此外，花粉块与叶片的原生质体溶液中杂质很少，有利于提纯；花瓣原生质体溶液中碎屑较多，且有少量的针晶；原球茎原生质体溶液中的淀粉粒与针晶很多，非常不易提纯。因此。 展开更多

关键词 蕙兰 原生质体 分离条件 产量

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庆大霉素产生菌原生质体融合高产株与发酵罐试产的研究 被引量：1

14

作者 管玉霞 蓝基贤 +1 位作者 严广兴 郑景世 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期62-67,共6页

对庆大霉素产生菌绛红色小单孢菌(Micromonospora purpurea)原生质体分别用硫酸二乙酯(DES)和紫外线(uv)进行诱变、融合,用庆大霉素进行抗性筛选、再生后得到高产菌株;经摇瓶连续10批次发酵考查,平均发酵单位在2200±U/ml;又经5L发... 对庆大霉素产生菌绛红色小单孢菌(Micromonospora purpurea)原生质体分别用硫酸二乙酯(DES)和紫外线(uv)进行诱变、融合,用庆大霉素进行抗性筛选、再生后得到高产菌株;经摇瓶连续10批次发酵考查,平均发酵单位在2200±U/ml;又经5L发酵罐连续发酵考查7批次,产量平均1900±U/ml。产品质量符合药典。 展开更多

关键词 绛红色小单孢菌 原生质体诱变融合 抗性筛选 发酵罐产量

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食用真菌原生质体无性繁殖株产菇优势及出菇性状研究 被引量：3

15

作者 路等学 李成一 +1 位作者 卢洪英 王秉峰 《甘肃科学学报》 1994年第2期67-72,共6页

本研究以十一菌株为材料，对原生质体无性繁殖株的单、双核比例、产菇优势及出菇性状进行了研究。结果表明：（１）平菇、香菇原生质体无性繁殖株，以“锁状联合（ｃｌａｍｐｃｏｎｎｅｃｔｉｏｎ）”的有无可区分为无Ｃ．Ｃ．的单核株... 本研究以十一菌株为材料，对原生质体无性繁殖株的单、双核比例、产菇优势及出菇性状进行了研究。结果表明：（１）平菇、香菇原生质体无性繁殖株，以“锁状联合（ｃｌａｍｐｃｏｎｎｅｃｔｉｏｎ）”的有无可区分为无Ｃ．Ｃ．的单核株和有Ｃ．Ｃ．的双核株，但其比例因菌株不同而迥异。（２）同一菌株的单、双核林的菌丝体生长速度、出菇期及菇产量等性状有较大差异，双核株多优于单核株；但双核株与其原始异核株相比，其优劣因菌株而异。（３）无性单核株是进行细胞融合或常规杂交育种的理想材料，而双核株可用于选出优质高产菌株。 展开更多

关键词 食用菌 原生质体 无性繁殖株

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人心果原生质体分离初探 被引量：1

16

作者 罗丽华 杨定海 +1 位作者 林尤河 王业华 《福建林业科技》 2009年第2期127-130,共4页

以人心果幼嫩叶片组织为材料,研究了酶液组合、酶解时间、酶液中甘露醇含量、pH值、温度等因素对其原生质体分离的影响,结果表明:以3%纤维素酶R-10+0.4%果胶酶Y-23为混合酶液,0.6 mol.L-1甘露醇为渗透压稳定剂,pH 5.6的酶液组合,在28℃... 以人心果幼嫩叶片组织为材料,研究了酶液组合、酶解时间、酶液中甘露醇含量、pH值、温度等因素对其原生质体分离的影响,结果表明:以3%纤维素酶R-10+0.4%果胶酶Y-23为混合酶液,0.6 mol.L-1甘露醇为渗透压稳定剂,pH 5.6的酶液组合,在28℃的黑暗条件下振荡,酶解时间2 h,分离出的原生质体产量最佳,可达到12.4×106个.g-1。 展开更多

关键词 人心果 原生质体分离 原生质体产量

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粗柄羊肚菌原生质体制备及再生技术 被引量：1

17

作者 付晓燕 范黎 《现代农业科学》 2009年第5期35-37,共3页

通过实验确定了粗柄羊肚菌(Morchella crassipes)原生质体制备的最佳条件,即:采用培养72 h的菌丝,以0.6 mol/L NaCl作为稳渗剂配制的4 mg/L蜗牛酶,5 mg/L溶壁酶的混合酶液为细胞壁降解酶液,30℃,50 rpm/min酶解3 h,可得原生质体最高产量... 通过实验确定了粗柄羊肚菌(Morchella crassipes)原生质体制备的最佳条件,即:采用培养72 h的菌丝,以0.6 mol/L NaCl作为稳渗剂配制的4 mg/L蜗牛酶,5 mg/L溶壁酶的混合酶液为细胞壁降解酶液,30℃,50 rpm/min酶解3 h,可得原生质体最高产量为2.07×106个/100 mg/mL。以0.6 mol/LNaCl溶液做稳渗剂,MYG再生培养基上得到原生质体再生率为0.16%。 展开更多

关键词 粗柄羊肚菌 原生质体 酶解 原生质体产量 再生率

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巨大侧耳原生质体制备条件的优化 被引量：5

18

作者 骈永茹 李婧怡 +3 位作者 李勤奋 王欢 李玉 杨阳 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1308-1316,共9页

为优化巨大侧耳原生质体的制备条件,该研究以两株不同温型的巨大侧耳菌株PG46和PG79为材料,采用单因素和正交试验方法对原生质体制备的菌丝体菌龄、稳渗剂种类、溶壁酶浓度、酶解温度和酶解时间进行研究。结果表明:(1)在单因素实验中,... 为优化巨大侧耳原生质体的制备条件,该研究以两株不同温型的巨大侧耳菌株PG46和PG79为材料,采用单因素和正交试验方法对原生质体制备的菌丝体菌龄、稳渗剂种类、溶壁酶浓度、酶解温度和酶解时间进行研究。结果表明:(1)在单因素实验中,巨大侧耳原生质体制备的适宜条件为菌龄5 d,溶壁酶浓度2.5%,0.6 mol·L^(-1)甘露醇,32℃(PG46)或27~35℃(PG79)酶解4 h。(2)正交试验验证并优化了单因素实验结果,组合2(菌龄5 d,溶壁酶浓度2.5%,0.6 mol·L^(-1)的甘露醇,32℃酶解4 h)可同时作为PG46和PG79原生质体制备的最适条件,原生质体产量分别为11.22×10^(6)CFU·mL^(-1)和7.28×10^(6)CFU·mL^(-1)。(3)F-test检验中,各因素对原生质体制备的影响程度依次为菌龄>溶壁酶浓度>酶解温度>酶解时间(PG46),菌龄>酶解时间>酶解温度>溶壁酶浓度(PG79)。综上所述,两株不同温型巨大侧耳菌株的原生质体制备条件基本一致,菌龄对两菌株原生质体得率的影响程度最显著。该研究结果可为后续巨大侧耳的杂交育种、遗传转化、全基因组测序等工作奠定基础,进一步推动巨大侧耳分子遗传学的发展。 展开更多

关键词 巨大侧耳 不同温型 热区 原生质体产量 制备条件

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姬松茸原生质体制备及再生条件优化 被引量：9

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作者 邹彰毅 邓百万 《北方园艺》 CAS 北大核心 2020年第3期128-137,共10页

以姬松茸JS01为试材,通过单因素试验和正交实验,利用SPSS 22.0软件进行分析,对姬松茸原生质体的制备及再生条件进行优化,以提高姬松茸原生质体产量和再生率。首次通过在再生培养基中添加细胞壁前体物质及营养因子,进一步提高姬松茸原生... 以姬松茸JS01为试材,通过单因素试验和正交实验,利用SPSS 22.0软件进行分析,对姬松茸原生质体的制备及再生条件进行优化,以提高姬松茸原生质体产量和再生率。首次通过在再生培养基中添加细胞壁前体物质及营养因子,进一步提高姬松茸原生质体的再生率。结果表明:原生质体最佳制备条件为菌龄7d,以0.6mol·L^-1 KCl作渗透压稳定剂,溶壁酶浓度1.5%,酶解温度30℃,酶解时间4.0h,pH 6.0,在该条件下原生质体产量高达1.97×107个·mL^-1;菌龄6d,以0.6mol·L^-1 MgSO4作渗透压稳定剂,溶壁酶浓度2.0%,酶解温度30℃,酶解时间3.0h,pH 6.5,再生培养基为GM时,原生质体的再生率最高,为1.12%。再生培养基中添加纤维二糖和维生素B1后,再生率为1.17%,较优化结果提高了4.46%。该研究为姬松茸在菌种提纯复壮、原生质体诱变、原生质体融合育种、原生质体基因组重排等遗传学研究提供参考依据。 展开更多

关键词 姬松茸 原生质体产量 再生率 单因素试验 正交实验

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常压室温等离子体诱变选育高产多糖灵芝新菌株 被引量：23

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作者 李塬 张赫男 +5 位作者 谭贻 刘艳芳 冯杰 张越野 唐传红 张劲松 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2021年第2期36-41,共6页

以灵芝(Ganoderma lucidum)菌株G0157为出发菌株,利用常压室温等离子体(atmospheric room temperature plasma,ARTP)对其原生质体进行诱变处理,获得640个再生菌株,通过拮抗实验鉴定获得103个诱变菌株。测定诱变菌株的菌丝体多糖含量和... 以灵芝(Ganoderma lucidum)菌株G0157为出发菌株,利用常压室温等离子体(atmospheric room temperature plasma,ARTP)对其原生质体进行诱变处理,获得640个再生菌株,通过拮抗实验鉴定获得103个诱变菌株。测定诱变菌株的菌丝体多糖含量和生物量并计算多糖产量,与出发菌株相比,诱变菌株A-434的多糖含量提高46.14%,诱变菌株A-246和A-434的多糖产量提高268.57%和63.07%。继代培养、拮抗实验和RAPD分析结果表明,诱变菌株A-246和A-434的遗传稳定性良好。 展开更多

关键词 常压室温等离子体 灵芝 原生质体 菌丝体生物量 多糖含量 多糖产量

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