建议是日常会话中常见的言语交际现象,作为其语言实现方式之一的“why not VP”结构也受到学界一定的关注。但现有研究大多停留在对此结构建议功能的讨论上,未对它的衍生功能进行探讨,也未将此结构与其他语言中的相似结构进行对比分析...建议是日常会话中常见的言语交际现象,作为其语言实现方式之一的“why not VP”结构也受到学界一定的关注。但现有研究大多停留在对此结构建议功能的讨论上,未对它的衍生功能进行探讨,也未将此结构与其他语言中的相似结构进行对比分析。基于此,本文对表示建议义的结构“why not VP”的语用功能进行梳理,认为它已经从表示建议义的功能逐渐扩展到表达劝说、责问等话语功能,且这些功能均具有主观性或交互主观性。同时,还讨论了该结构交互主观性形成的原因,分析了其与汉语对应结构“何不VP”的异同之处。研究发现,两者在主语显现、标点符号使用及同义句式的种类上均存在差异。展开更多
构建并表达猫杯状病毒(FCV)VP1及其截短体VP1-CDE,并评价其免疫原性。将目标基因克隆至pET28a-SUMO载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导尝试可溶性表达。SDS-PAGE结果显示,VP1蛋白与VP1-CDE蛋白分子质量分别约为60 k Da与15 k Da,...构建并表达猫杯状病毒(FCV)VP1及其截短体VP1-CDE,并评价其免疫原性。将目标基因克隆至pET28a-SUMO载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导尝试可溶性表达。SDS-PAGE结果显示,VP1蛋白与VP1-CDE蛋白分子质量分别约为60 k Da与15 k Da,与理论值相符;用6×His标签抗体进行Western-blot试验证实其正确性。重组蛋白经Ni^(2+)亲和层析纯化后,与弗氏佐剂等体积乳化后免疫BALB/c小鼠,采集血清进行间接ELISA,结果显示,VP1与VP1-CDE组均能诱导高滴度针对相应蛋白的特异性Ig G;在前3次免疫时,抗体水平随免疫次数增加而升高,第4次免疫后第14天测得抗体水平和第3次免疫后第14天的水平无显著差异,抗体水平达到平台期。病毒中和试验结果表明,三免后第14天VP1-CDE组中和抗体滴度达1∶223,VP1组为1∶178,二者水平相当。综上所述,VP1-CDE以较小分子质量实现与全长VP1相当的免疫原性,且表达中更易实现正确折叠、不易形成包涵体,可作为FCV亚单位疫苗的优选抗原,为后续疫苗研发提供了试验依据。展开更多
文摘建议是日常会话中常见的言语交际现象,作为其语言实现方式之一的“why not VP”结构也受到学界一定的关注。但现有研究大多停留在对此结构建议功能的讨论上,未对它的衍生功能进行探讨,也未将此结构与其他语言中的相似结构进行对比分析。基于此,本文对表示建议义的结构“why not VP”的语用功能进行梳理,认为它已经从表示建议义的功能逐渐扩展到表达劝说、责问等话语功能,且这些功能均具有主观性或交互主观性。同时,还讨论了该结构交互主观性形成的原因,分析了其与汉语对应结构“何不VP”的异同之处。研究发现,两者在主语显现、标点符号使用及同义句式的种类上均存在差异。
文摘构建并表达猫杯状病毒(FCV)VP1及其截短体VP1-CDE,并评价其免疫原性。将目标基因克隆至pET28a-SUMO载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导尝试可溶性表达。SDS-PAGE结果显示,VP1蛋白与VP1-CDE蛋白分子质量分别约为60 k Da与15 k Da,与理论值相符;用6×His标签抗体进行Western-blot试验证实其正确性。重组蛋白经Ni^(2+)亲和层析纯化后,与弗氏佐剂等体积乳化后免疫BALB/c小鼠,采集血清进行间接ELISA,结果显示,VP1与VP1-CDE组均能诱导高滴度针对相应蛋白的特异性Ig G;在前3次免疫时,抗体水平随免疫次数增加而升高,第4次免疫后第14天测得抗体水平和第3次免疫后第14天的水平无显著差异,抗体水平达到平台期。病毒中和试验结果表明,三免后第14天VP1-CDE组中和抗体滴度达1∶223,VP1组为1∶178,二者水平相当。综上所述,VP1-CDE以较小分子质量实现与全长VP1相当的免疫原性,且表达中更易实现正确折叠、不易形成包涵体,可作为FCV亚单位疫苗的优选抗原,为后续疫苗研发提供了试验依据。
