复元醒脑汤对糖尿病脑梗死大鼠BMECs的影响及microRNA-503的调控机制研究 被引量：1

1

作者 沈俊逸 方邦江 +4 位作者 赵智明 刘春丽 壮雨雯 徐文俊 蔡辉 《浙江中医杂志》 2018年第10期718-721,共4页

目的:在细胞水平观察复元醒脑汤对糖尿病脑梗死大鼠缺血脑组织脑微血管内皮细胞(BMECs)的影响,从microRNA-503调控途径探索复元醒脑汤治疗糖尿病脑梗死的具体作用靶点。方法:20只健康雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为2组,每组10只,适应... 目的:在细胞水平观察复元醒脑汤对糖尿病脑梗死大鼠缺血脑组织脑微血管内皮细胞(BMECs)的影响,从microRNA-503调控途径探索复元醒脑汤治疗糖尿病脑梗死的具体作用靶点。方法:20只健康雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为2组,每组10只,适应性饲养3天后,一组常规饲养,另一组常规饲养的基础上以复元醒脑汤10.4g/kg/d灌胃,连续3d,于末次给药1h后腹主动脉采血,制备空白血清和中药血清。对糖尿病脑梗死大鼠缺血脑组织进行BMEC的分离培养,分别加入空白血清、中药血清,转染microR-503抑制剂,中药血清混合转染microR-503抑制剂,检测不同处理组含药血清对BMECs迁移、成管能力的影响,在细胞水平上利用实时荧光定量PCR检测脑组织microRNA-503,CCNE1、CDC25A的基因表达水平。结果:与空白血清组相比,复元醒脑汤中药血清以及microRNA-503抑制剂组都可以明显增强BMECs的迁移能力(P<0.01),联合用药效果最好。与空白血清组相比,microRNA-503抑制剂和复元醒脑汤含药血清都可以明显上调CCNE1和CDC25A的基因表达(P<0.05),从而抑制了microRNA-503的表达(P<0.05)。miR-503抑制剂和复元醒脑汤中药血清组都对小管形成有一定的促进作用;联合使用microRNA-503抑制剂和复元醒脑汤中药血清也能明显促进小管的形成。结论:复元醒脑汤通过促进CCNE1和CDC25A的表达,从而抑制microRNA-503的表达水平,间接提高了BMEC的成管和迁移能力,从而使得受损血管内皮修复功能得到改善,进而促进局部血管的再生和侧支循环的建立。 展开更多

关键词 复元醒脑汤 糖尿病脑梗死 BMECs microrna-503大鼠

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microRNA-503在糖尿病大鼠心肌梗死后血管新生过程中的变化 被引量：4

2

作者 陈琴 黄铭涵 +1 位作者 张在保 郑行春 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2015年第3期261-265,共5页

目的通过比较自发糖尿病GK大鼠与Wistar大鼠急性心肌梗死后,梗死边缘区心肌组织内血管新生水平、microRNA-503(miR-503)及其靶基因水平的变化,探讨miR-503在糖尿病心肌缺血后血管新生中的调控作用。方法选取GK大鼠、Wistar大鼠各30只,... 目的通过比较自发糖尿病GK大鼠与Wistar大鼠急性心肌梗死后,梗死边缘区心肌组织内血管新生水平、microRNA-503(miR-503)及其靶基因水平的变化,探讨miR-503在糖尿病心肌缺血后血管新生中的调控作用。方法选取GK大鼠、Wistar大鼠各30只,结扎左前降支近段建立急性心肌梗死模型,分别于术前及术后3天、7天、14天、28天处死动物,留取血浆及心脏组织。免疫组织化学染色法检测梗死边缘区心肌Ⅷ因子表达计数微血管数;qRT-PCR检测组织中miR-503水平;Western blot检测梗死边缘区细胞周期素E1和细胞分裂周期蛋白25A表达水平。结果在缺血后各时间点,GK大鼠组心肌梗死边缘区微血管数量均少于Wistar大鼠组(P<0.05),而心肌组织内的miR-503水平均高于Wistar大鼠组(P<0.05),细胞分裂周期蛋白25A表达水平均低于Wistar大鼠组(P<0.05)。GK大鼠组心肌组织细胞周期素E1蛋白表达水平仅在术后14天及28天时低于Wistar大鼠组(P<0.05)。结论糖尿病可引起心肌缺血组织边缘区miR-503异常升高;升高的miR-503可能通过抑制细胞分裂周期蛋白25A的表达,参与调控糖尿病心肌梗死边缘区组织内血管新生能力的下降。 展开更多

关键词 心肌梗死 血管新生 microrna-503 糖尿病

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复元醒脑汤对糖尿病脑梗死大鼠microRNA-503及CCNE1、CDC25A蛋白表达的影响及对促进血管新生的实验研究 被引量：5

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作者 沈俊逸 方邦江 +4 位作者 赵智明 刘春丽 壮雨雯 徐文俊 蔡辉 《中国中医急症》 2018年第11期1881-1885,1890,共6页

目的观察复元醒脑汤对microRNA-503及CCNE1、CDC25A蛋白表达的影响,探讨复元醒脑汤促进糖尿病脑梗死血管新生的分子机制。方法 150只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、西药治疗组、中药治疗组,每组30只。采用腹腔... 目的观察复元醒脑汤对microRNA-503及CCNE1、CDC25A蛋白表达的影响,探讨复元醒脑汤促进糖尿病脑梗死血管新生的分子机制。方法 150只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、西药治疗组、中药治疗组,每组30只。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)后予以高能量高脂肪饲料喂养2周的方法复制糖尿病大鼠模型,制模后采用线栓法制备糖尿病脑梗死动物模型。完成造模后,中药治疗组灌胃复元醒脑汤;西药治疗组灌胃二甲双胍、尼莫地平;空白对照组、假手术组、模型组均灌胃等量的0.9%氯化钠注射液。各组连续灌胃14 d后处死取材。免疫荧光法检测脑梗死区域的血管新生、微循环观察仪检测脑梗死区域血管微循环状况、实时荧光定量PCR法检测脑组织microRNA-503、CCNE1、CDC25A基因表达水平,利用Western blotting检测CCNE1、CDC25A蛋白表达水平。结果与模型组相比,中药治疗组和西药治疗组的脑梗死区域都出现血管新生增多,血管管径增粗,血流加快,蛋白渗漏减少,少见白细胞黏附现象且中药治疗组优于西药治疗组;各实验组脑组织的CCNE1、CDC25A基因及蛋白表达水平由高到低依次为:空白对照组、假手术组、中药治疗组、西药治疗组、模型组。各实验组脑组织microRNA-503基因的表达水平由低到高依次是:空白对照组、假手术组、中药治疗组、西药治疗组、模型组,中药治疗组和西药治疗组均显著低于模型组(P <0.01)。结论复元醒脑汤通过上调CCNE1、CDC25A的表达,从而抑制microRNA-503的表达水平,达到促进梗死组织区域的血管新生,改善脑部微循环。 展开更多

关键词 糖尿病脑梗死 脑部微循环 复元醒脑汤 血管新生 microrna-503

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microRNA-499靶控的PI3K/Akt通路在大鼠缺血-再灌注心肌损伤中的作用 被引量：10

4

作者 崔瑞新 吕风华 +2 位作者 岳莹 刘亚坤 高建芝 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第6期740-743,共4页

目的:探讨microRNA-499在大鼠心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)中的作用及其与PI3K/Akt通路的关系。方法:将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和干预组,每组10只。假手术组仅在冠状动脉的左前降支下穿线但并不结扎,模型组结扎冠状动脉左前... 目的:探讨microRNA-499在大鼠心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)中的作用及其与PI3K/Akt通路的关系。方法:将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和干预组,每组10只。假手术组仅在冠状动脉的左前降支下穿线但并不结扎,模型组结扎冠状动脉左前降支以建立大鼠MIRI模型(缺血30 min,再灌注120 min),干预组于建立MIRI模型前48 h注射microRNA-499激动剂。采用荧光定量RT-PCR法检测大鼠心肌组织中miRNA-499及PI3K mRNA表达量,Western blot法检测Akt磷酸化活性,采用TTC染色法检测心肌梗死面积。结果:与假手术组相比,模型组miRNA-499及PI3K mRNA表达量减少,Akt磷酸化活性明显降低,心肌梗死面积明显增加(P<0.05)。与模型组比较,干预组miRNA-499及PI3K mRNA表达量、Akt磷酸化活性明显升高,心肌梗死面积明显减少(P<0.05)。心肌组织中PI3K mRNA与microRNA-499的表达量呈正相关(P<0.05)。结论:microRNA-499可能通过激活PI3K/Akt信号通路,减轻大鼠MIRI。 展开更多

关键词 心肌 缺血-再灌注损伤 microrna-499 PI3K Akt 大鼠

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电针调控microRNA-34a对缺血再灌注损伤大鼠内源性神经干细胞分化的影响 被引量：9

5

作者 柳维林 郑薏 +4 位作者 金婷婷 张宇豪 施丹 陈立典 陶静 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2019年第2期162-171,共10页

目的探讨电针曲池和足三里是否是通过调控microRNA-34a (miR-34a)促进缺血再灌注损伤大鼠缺血周边区神经干细胞分化为星形胶质细胞。方法将108只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组再分为3 d、7 d、14 d 3个时间... 目的探讨电针曲池和足三里是否是通过调控microRNA-34a (miR-34a)促进缺血再灌注损伤大鼠缺血周边区神经干细胞分化为星形胶质细胞。方法将108只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组再分为3 d、7 d、14 d 3个时间点,每个时间点12只。另取16只大鼠随机分为电针^+二甲基亚砜(DMSO)组(n=8)和电针^+miR-34a抑制剂组(n=8)。构建大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)致局灶性脑缺血模型。电针组造模后第2天进行电针患侧肢体曲池(LI11)、足三里(ST36),疏密波1/20 Hz,以肢体轻轻抖动为度,每次30 min,每天1次,共14 d。同时,造模后第2天至第14天各组大鼠腹腔注射5-溴代-2'-脱氧尿苷(BrdU),每天2次,每次注射间隔8h;DMSO溶解液、miR-34a抑制剂在造模前进行侧脑室注射;免疫荧光染色检测BrdU、巢蛋白(Nestin)与神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的共定位情况;逆转录实时定量聚合酶链反应检测缺血周边区miR-34a相对表达量。结果电针组各时间点Longa神经行为学评分低于模型组(t> 2.084, P <0.05)。模型组患侧肢体的爪印面积(右前爪、右后爪)、最大压强(右前爪、右后爪)与同时间假手术组比较均下降(P <0.05),模型组随着时间延长右后爪印面积增加(P <0.05)。电针组患侧肢体的爪印面积(右前爪、右后爪)与同时间模型组比较增加(P <0.05)。电针干预3 d和7 d后,电针组患侧最大压强(右前爪、右后爪)与模型组比较无显著性差异(P>0.05);14 d后电针组大于模型组(P <0.05)。电针干预3 d至7 d,电针组右后爪印面积与右前最大压强逐渐增加,一定程度上呈时间依赖性(P <0.05)。模型组和电针组缺血周围区均表达Nestin^+/GFAP^+细胞和BrdU^+/GFAP^+细胞,且电针组3 d、7 d和14 d后Nestin^+/GFAP^+、BrdU^+/GFAP^+双阳性共标的细胞较模型组表达均增加(t> 3.292, P <0.05),且在7 d达到峰值。脑缺血7 d后模型组缺血周边区miR-34a的表达较假手术组明显增加(P <0.01);而电针组和^+DMSO组miR-34a表达进一步升高(P <0.05);电针^+miR-34a抑制组miR-34a表达和BrdU^+/GFAP^+细胞数较电针组均减少(P <0.05)。结论电针曲池和足三里可以促进缺血再灌注损伤大鼠缺血周边区神经干细胞分化为星形胶质细胞,可能是通过调控miR-34a的表达。 展开更多

关键词 缺血再灌注损伤 电针 microrna-34a 神经干细胞 分化 大鼠

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过表达microRNA-29a上调锌脂蛋白91对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞凋亡的影响 被引量：4

6

作者 刘永敏 段萍 +3 位作者 鄢文海 何芳 唐娜 钟华 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期18-23,共6页

目的建立高感染效率、稳定过表达microRNA-29a(mi R-29a)的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12),探索miR-29a对PC12细胞凋亡的影响。方法将miR-29a前体表达载体、空白对照载体进行慢病毒包装,用病毒上清感染PC12并进行抗性筛选。实时荧光定... 目的建立高感染效率、稳定过表达microRNA-29a(mi R-29a)的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12),探索miR-29a对PC12细胞凋亡的影响。方法将miR-29a前体表达载体、空白对照载体进行慢病毒包装,用病毒上清感染PC12并进行抗性筛选。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测miR-29a的表达,流式细胞术检测miR-29a稳定过表达组、空质粒对照组以及未感染组PC12细胞的凋亡情况,利用Target Scan 6.0数据库预测miR-29a的关键靶点,RT-qPCR以及Western blot检测预测的miR-29a下游靶基因mRNA以及蛋白表达的变化。结果经抗性筛选后获得稳定表达miR-29a的PC12细胞系,荧光显微镜下观察各组PC12细胞的感染效率均达80%以上,miR-29a过表达组凋亡率为(5.1±0.92)%,空质粒对照组为(1.832±0.26)%,未感染组为(1.667±0.185)%,miR-29a过表达促进PC12细胞凋亡(P<0.01),空质粒对照组与未感染组细胞凋亡率比较,差异无统计学意义;RT-qPCR检测miR-29a过表达时锌指蛋白91(ZFP91)的表达量升高,miR-29a过表达组ZFP91 mRNA的表达量是空质粒对照组的1.835倍(P=0.000),空质粒对照组与未感染组ZFP91 mRNA的表达量比较差异无统计学意义;Western blot检测的ZFP91蛋白表达量与空质粒对照组比较也升高。结论在PC12中miR-29a过表达促进PC12细胞凋亡,过表达miR-29a也促进ZFP91表达,其机制仍待进一步阐明。 展开更多

关键词 microrna-29a 锌指蛋白91 细胞凋亡 大鼠 嗜铬细胞瘤细胞 实时荧光定量聚合酶链反应

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MicroRNA-195与Bcl-2/Bax在钙化大鼠主动脉中的表达及其相互作用 被引量：2

7

作者 潘莹 曾宪钦 +2 位作者 段雯 张志远 张文斌 《心脏杂志》 CAS 2016年第1期20-24,共5页

目的观察Bcl-2/Bax和microRNA(miRNA)-195在大鼠血管钙化中表达的变化和相互关系。方法将16只实验大鼠随机分对照组和钙化组,每组8只。钙化组肌肉注射维生素D3(30万U/kg,1次)和尼古丁灌胃(25mg/kg溶于花生油中,早、晚各1次)诱导大鼠血... 目的观察Bcl-2/Bax和microRNA(miRNA)-195在大鼠血管钙化中表达的变化和相互关系。方法将16只实验大鼠随机分对照组和钙化组,每组8只。钙化组肌肉注射维生素D3(30万U/kg,1次)和尼古丁灌胃(25mg/kg溶于花生油中,早、晚各1次)诱导大鼠血管钙化模型,对照组大鼠予灌服等量生理盐水。建模6周后,股动脉放血处死大鼠,将主动脉用Von Kossa梁色后,观察其形态特征。用免疫组化染色法和免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达,应用实时荧光定量多聚酶链式反应(qRT-PCR)法检测miRNA-195的表达。结果钙化组的主动脉有大量黑色颗粒沉淀。钙化组主动脉组织中Bax的表达与对照组无明显差别,而Bcl-2的表达升高(P<0.05)。钙化组miRNA-195的表达量高于对照组(P<0.01)。Pearson直线相关分析显示,钙化的主动脉中miRNA-195表达的水平与Bcl-2表达的水平呈显著正相关(r=0.791,P<0.05)。结论钙化的主动脉组织中miRNA-195的表达升高,并伴有Bcl-2蛋白的表达上调。miRNA-195与Bcl-2可能参与主动脉钙化。 展开更多

关键词 BCL-2/BAX microrna-195 凋亡 血管钙化 大鼠

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MicroRNA-21在大鼠胚胎植入过程中的差异表达与调节 被引量：1

8

作者 金孝华 夏红飞 +3 位作者 宋培培 崔熠 韩仲吉 马旭 《生殖医学杂志》 CAS 2009年第3期284-290,共7页

目的初步研究microRNA-21(miR-21)在大鼠胚胎植入过程中的作用。方法利用Northern印迹和原位杂交分析了miR-21在大鼠胚胎植入前期和植入期的表达差异,检测miR-21在假孕、人工诱导蜕膜化和延迟着床激活大鼠子宫中的表达模式,分析了17β-... 目的初步研究microRNA-21(miR-21)在大鼠胚胎植入过程中的作用。方法利用Northern印迹和原位杂交分析了miR-21在大鼠胚胎植入前期和植入期的表达差异,检测miR-21在假孕、人工诱导蜕膜化和延迟着床激活大鼠子宫中的表达模式,分析了17β-雌二醇和孕酮对于大鼠子宫miR-21表达的影响。结果 miR-21在植入前期和植入期的大鼠子宫中存在差异表达,在大鼠妊娠第5天miR-21的表达量开始增加,其主要分布在植入位点内腔基质细胞,在第5.5天子宫miR-21的表达量达到最高。在假孕的D4～D7大鼠子宫中miR-21表达无差异,在延迟着床激活模型中大鼠子宫miR-21的表达量明显增加,miR-21在诱导蜕膜化的大鼠子宫中表达也显著增加,17β-雌二醇和孕酮可以抑制大鼠子宫miR-21的表达。这些结果提示在植入期miR-21的表达增加主要是由胚泡引起的,并且其参与了蜕膜化过程。结论在大鼠妊娠早期,miR-21的表达增加可能有利于胚胎植入的发生。 展开更多

关键词 microrna-21 SD大鼠 子宫 胚胎植入

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microRNA-22-3p低表达上调幼年哮喘气道重塑大鼠的NK1R表达 被引量：2

9

作者 宋建刚 高永伟 +3 位作者 刘庆 贾鲲鹏 庞随军 李元霞 《西部医学》 2021年第1期4-9,共6页

目的探讨幼年哮喘气道重塑大鼠的microRNA-22-3p(miR-22-3p)表达水平和神经激肽受体1(NK1R)表达水平的相关性。方法将48只Wistar大鼠分为对照组、模型组、模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组。对照... 目的探讨幼年哮喘气道重塑大鼠的microRNA-22-3p(miR-22-3p)表达水平和神经激肽受体1(NK1R)表达水平的相关性。方法将48只Wistar大鼠分为对照组、模型组、模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组。对照组注射生理盐水并吸入空气;模型组应用卵白蛋白(OVA)雾化吸入法建立哮喘大鼠模型;模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组,在大鼠每次激发前1 h内分别尾静脉注射1 mL的mimic、mimic-NC、inhibitor、inhibitor-NC。H&E染色法观察小鼠气道重塑变化,RT-qPCR检测miR-22-3p的水平变化。荧光素酶基因报告检测方法在大鼠气道平滑肌细胞RASMCs中验证miR-22-3p靶向NK1R。使用Western blot和免疫组织化学法检测NK1R的表达水平。结果与对照组比较,模型组发生明显的气道重塑现象,且气道组织中miR-22-3p水平降低(P<0.05)。在RASMCs细胞中,NK1R的3′UTR和miR-22-3p的直接结合,导致荧光素酶活性强度降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组的NK1R的mRNA和蛋白的表达水平明显上调(P<0.01)。与模型+mimic-NC组比较,模型+mimic组miR-22-3p的水平上调,而NK1R的表达下调(均P<0.05)。与模型+inhibitor-NC组比较,模型+inhibitor组miR-22-3p的水平下调,而NK1R水平上调(均P<0.05)。结论哮喘诱发大鼠气道NK1R的表达增加,miR-22-3p直接靶向调节抑制哮喘大鼠气道重塑中NK1R的表达水平,下调miR-22-3p解除对NK1R的抑制从而上调NK1R水平。 展开更多

关键词 microrna-22-3p 幼年大鼠 哮喘 神经激肽受体1 气道平滑肌重塑

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氧糖剥夺诱导原代大鼠星形胶质细胞增殖反应中microRNA-125b的表达变化 被引量：1

10

作者 范玉颖 于涛 +2 位作者 王华 张俊梅 赵晓春 《解剖科学进展》 CAS 2014年第1期1-4,共4页

目的研究氧糖剥夺诱导原代大鼠星形胶质细胞增殖过程中microRNA-125b的表达,探讨microRNA-125b是否参与了缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞的增殖。方法原代大鼠星形胶质细胞随机分为正常组和氧糖剥夺组,分别培养3、6和9h。EdU掺入法检... 目的研究氧糖剥夺诱导原代大鼠星形胶质细胞增殖过程中microRNA-125b的表达,探讨microRNA-125b是否参与了缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞的增殖。方法原代大鼠星形胶质细胞随机分为正常组和氧糖剥夺组,分别培养3、6和9h。EdU掺入法检测各组星形胶质细胞的增殖,real-timePCR方法检测各组星形胶质细胞microRNA-125b的表达。结果氧糖剥夺组microRNA-125b的表达水平随培养时间延长呈先升高后降低的动态变化,3h开始高于对照组水平(P<0.05);6h达高峰(P<0.01),随后下降,9h与对照组无差异(P>0.05)。氧糖剥夺不同时间星形胶质细胞增殖变化与microRNA-125b的变化趋势一致。结论 miroRNA-125b可能参与缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞的增殖。 展开更多

关键词 星形胶质细胞 氧糖剥夺 microrna-125b 大鼠

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过表达microRNA-21对大鼠心肌梗死面积的影响 被引量：1

11

作者 张小花 方五旺 +2 位作者 管丽娟 王斐 王腾飞 《微循环学杂志》 2015年第4期28-31,F0003,共5页

目的:观察直接心肌注入microRNA-21基因腺病毒对大鼠心肌梗死面积的影响。方法:40只健康SD大鼠,随机分为五组:假手术组、模型组、生理盐水组、腺病毒载体组、microRNA-21腺病毒组,每组8只。假手术组只开胸、穿线,不结扎,也不注射任何物... 目的:观察直接心肌注入microRNA-21基因腺病毒对大鼠心肌梗死面积的影响。方法:40只健康SD大鼠,随机分为五组:假手术组、模型组、生理盐水组、腺病毒载体组、microRNA-21腺病毒组,每组8只。假手术组只开胸、穿线,不结扎,也不注射任何物质。余4组通过结扎冠状动脉左前降支复制心肌梗死模型,其中模型组成模后不做其它处理,另3组成模后分别注入不同目标物质。饲养3天后一并处死,摘取心脏,采用实时荧光定量PCR检测左心室心肌microRNA-21表达量,采用TTC染色法测量心肌梗死面积。统计学分析各组上述指标间的差异。结果:microRNA-21腺病毒组microRNA-21表达量(0.72±0.01)较其它四组明显增加(P<0.01),其它四组间差异无统计学意义(P>0.05);假手术组未见心肌梗死,microRNA-21腺病毒组心肌梗死面积(31.27±1.60%)较其它三组明显减小(P<0.05),其它三组心肌梗死面积差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:直接心肌注射microRNA-21基因腺病毒可实现心肌microRNA-21基因的过表达,进而减小心肌梗死面积。 展开更多

关键词 microrna-21基因 过表达 心肌梗死 大鼠

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MicroRNA-154对大鼠肝星状细胞HSC-T6中β-catenin蛋白表达的影响

12

作者 张英 张洪 +1 位作者 彭锐 魏丹芸 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第22期2015-2020,共6页

目的:探讨microRNA-154(miR-154)对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cellc,HSC)中β-catenin蛋白表达的影响。方法:合成miR-154模拟物(miR-154 mimics)和miR-154抑制物(miR-154 inhibitor)转染HSC-T6,以其阴性对照物(mimics NC、inhibi... 目的:探讨microRNA-154(miR-154)对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cellc,HSC)中β-catenin蛋白表达的影响。方法:合成miR-154模拟物(miR-154 mimics)和miR-154抑制物(miR-154 inhibitor)转染HSC-T6,以其阴性对照物(mimics NC、inhibitor NC)转染细胞作为阴性对照组,不作处理的正常细胞为空白对照组(Blank);通过实时定量RT-PCR检测转染后各组细胞内的miR-154和β-catenin mRNA的相对表达,免疫印迹法(Western blotting)检测转染后各组细胞内β-catenin蛋白的表达。结果:β-catenin蛋白表达量和β-catenin mRNA表达量在转染miR-154 mimics组显著上调,与空白对照组和阴性对照组相比差异具有统计学意义,P<0.05;β-catenin蛋白表达量和β-catenin mRNA表达量在转染miR-154 inhibitor组显著下降,与空白对照组和阴性对照组相比差异具有统计学意义,P<0.05。结论:细胞内过表达miR-154能够诱导细胞中β-catenin mRNA及蛋白的过表达;抑制细胞内miR-154的表达则能够抑制细胞中β-catenin mRNA及蛋白的表达。 展开更多

关键词 microrna-154 大鼠肝星状细胞β-pcatenin 表达量

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microRNA-150在心房颤动患者心房组织中的表达及其对大鼠H9c2心肌细胞的影响

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作者 李小兵 王军 +4 位作者 吕瑛 张会军 黄建成 李红英 苏振宇 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2018年第4期612-616,共5页

目的:探讨microRNA-150在心房颤动患者心房组织中的表达及其对大鼠H9c2心肌细胞的影响。方法:选择行风湿性心脏病瓣膜置换术心房颤动患者的心房组织(30例)作为心房颤动组,行风湿性心脏病瓣膜置换术窦性心律患者的心房组织(30例)作为对... 目的:探讨microRNA-150在心房颤动患者心房组织中的表达及其对大鼠H9c2心肌细胞的影响。方法:选择行风湿性心脏病瓣膜置换术心房颤动患者的心房组织(30例)作为心房颤动组,行风湿性心脏病瓣膜置换术窦性心律患者的心房组织(30例)作为对照组。将H9c2心肌细胞分为microRNA-150组(转染p GIPZ-miR-150慢病毒)、阴性对照组(转染p GIPZ慢病毒)和空白对照组(未转染病毒)。采用RT-PCR测定组织和细胞中microRNA-150表达和c Myb mRNA水平;采用Western blotting测定细胞中c Myb蛋白、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;采用ELISA法测定细胞中胶原Ⅰ水平。结果:心房颤动组心房组织中microRNA-150的相对表达量低于对照组(P<0.05)。microRNA-150组H9c2心肌细胞中microRNA-150表达量明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),c Myb mRNA和蛋白水平明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),胶原Ⅰ水平明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),MMP-9和TGF-β1水平明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05);阴性对照组和空白对照组H9c2心肌细胞中各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:心房颤动患者心房组织中microRNA-150表达量下降,上调心肌细胞中microRNA-150表达量可通过靶基因c Myb降低心肌细胞纤维化。 展开更多

关键词 microrna-150 心房颤动 心肌细胞 胶原Ⅰ 基质金属蛋白酶-9 转化生长因子-Β1 大鼠

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MicroRNA-184抑制剂联合阿霉素对骨肉瘤大鼠的疗效研究

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作者 林博川 李新钢 +2 位作者 刁振斌 丁学珍 南静 《齐齐哈尔医学院学报》 2019年第15期1853-1855,共3页

目的观察MicroRNA-184(miR-184)抑制剂联合阿霉素化疗方案对荷骨肉瘤大鼠的疗效。方法将18只荷骨肉瘤Sprague Dawley(SD)大鼠随机分成对照组、阿霉素组和联合治疗组三组,每组各6只。其中阿霉素组采用单纯阿霉素处理,联合用药组采用micro... 目的观察MicroRNA-184(miR-184)抑制剂联合阿霉素化疗方案对荷骨肉瘤大鼠的疗效。方法将18只荷骨肉瘤Sprague Dawley(SD)大鼠随机分成对照组、阿霉素组和联合治疗组三组,每组各6只。其中阿霉素组采用单纯阿霉素处理,联合用药组采用microRNA-184抑制剂联合阿霉素处理,对照组不作任何治疗处理。治疗期间,每周测量肿瘤大小;5周治疗结束后,处死SD大鼠,取出肿瘤并测量瘤体平均直径和重量。应用TUNNEL法对移植瘤组织中的细胞进行染色和凋亡率分析。结果两种治疗方法均可抑制骨肉瘤生长,但联合化疗方案对骨肉瘤抑瘤作用更明显。结论 microRNA-184抑制剂联合阿霉素抑瘤作用明显,有望成为一种有效的骨肉瘤化疗方案。 展开更多

关键词 骨肉瘤 microrna-184 阿霉素 SD大鼠

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糖尿病大鼠心肌组织microRNA-27b的改变及意义

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作者 来丹丹 钱正明 +1 位作者 黄建振 李建芳 《心电与循环》 2015年第1期31-32,65,I0001,共4页

目的研究microRNA-27b在糖尿病大鼠心肌组织中的表达变化和意义。方法建立糖尿病大鼠模型,VG染色观察心肌组织形态及胶原容量,microRNA芯片筛选心肌纤维化相关microRNA,realtime PCR验证rrmicroRNA的表达改变。结果 VG染色显示糖尿病组... 目的研究microRNA-27b在糖尿病大鼠心肌组织中的表达变化和意义。方法建立糖尿病大鼠模型,VG染色观察心肌组织形态及胶原容量,microRNA芯片筛选心肌纤维化相关microRNA,realtime PCR验证rrmicroRNA的表达改变。结果 VG染色显示糖尿病组大鼠心肌组织内胶原容量高于对照组(P<0.05),microRNA芯片提示糖尿病组大鼠与对照组相比心肌组织中多个microRNA出现表达差异,Realtime PCR证实糖尿病大鼠心肌组织中microRNA-27b的表达较对照组上调(P<0.05)。结论 microRNA-27b可能与糖尿病大鼠心肌纤维化的发生相关。 展开更多

关键词 心肌纤维化 microrna-27b 糖尿病 大鼠

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MicroRNA-503抑制乳腺癌细胞增殖的作用及其机制研究 被引量：2

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作者 蒲涛 曹璐 +3 位作者 梁琪 刘华生 杨明 叶斌 《肿瘤药学》 CAS 2016年第2期114-119,共6页

目的观察miR-503对乳腺癌细胞增殖的影响并探讨其作用机制。方法收集35对乳腺癌及癌旁组织,利用实时荧光定量PCR法检测和比较其miR-503的表达。选择体外培养的乳腺癌T47D细胞系,分别转染miR-503模拟物和miR阴性对照模拟物(miR-NC),构建m... 目的观察miR-503对乳腺癌细胞增殖的影响并探讨其作用机制。方法收集35对乳腺癌及癌旁组织,利用实时荧光定量PCR法检测和比较其miR-503的表达。选择体外培养的乳腺癌T47D细胞系,分别转染miR-503模拟物和miR阴性对照模拟物(miR-NC),构建miR-503和miR-NC过表达细胞系。同时,利用荧光素酶报告基因检测法探索miR-503的下游靶基因。转染miR-503靶基因的真核表达质粒于上述两种T47D细胞系中,通过MTT检测细胞活力变化。结果 miR-503在乳腺癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织。过表达miR-503能显著降低乳腺癌T47D细胞的增殖。胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R)是miR-503的靶基因,其在T47D细胞中的蛋白表达水平被miR-503负调控,上调IGF-1R的表达能显著逆转miR-503对T47D细胞增殖的抑制作用。结论 miR-503通过负调控IGF-1R的表达,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。 展开更多

关键词 乳腺癌 microrna-503 胰岛素样生长因子1型受体 增殖

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MicroRNA-27b在高血压脑出血大鼠脑组织中的表达及对星形胶质细胞生物学功能的影响 被引量：3

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作者 肖仕和 李钢 +2 位作者 周奋 刘珍 刘仲海 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第17期48-53,共6页

目的探讨microRNA-27b(miR-27b)在高血压脑出血(HICH)大鼠脑组织中的表达及对星形胶质细胞生物学功能的影响。方法选取15只健康WKY大鼠作为对照组,15只自发性高血压大鼠作为HICH组。HICH组通过自体血脑内注射法复制HICH大鼠模型,对照组... 目的探讨microRNA-27b(miR-27b)在高血压脑出血(HICH)大鼠脑组织中的表达及对星形胶质细胞生物学功能的影响。方法选取15只健康WKY大鼠作为对照组,15只自发性高血压大鼠作为HICH组。HICH组通过自体血脑内注射法复制HICH大鼠模型,对照组进行假手术但不注射自体血。HE染色和TUNEL染色检测大鼠脑组织损伤和凋亡情况,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-27b mRNA相对表达量。将星形胶质细胞分为NC组、miR-27b mimic组及miR-27b inhibitor组,分别转染miR-27b mimic和miR-27b inhibitor质粒,过表达和抑制miR-27b水平。qRT-PCR检测各组细胞miR-27b mRNA相对表达量,CCK-8法检测各组细胞增殖及凋亡情况。结果HICH组大鼠出血脑组织出现显著损伤,凋亡指数(35.91±3.24)高于对照组(2.75±0.36)(P<0.05);HICH组miR-27b mRNA相对表达量(3.45±0.48)高于对照组(1.00±0.12)(P<0.05);miR-27b mimic组的miR-27b mRNA相对表达量高于NC组,增殖活力低于NC组,凋亡率高于NC组(P<0.05)。miR-27b inhibitor组的miR-27b mRNA相对表达量低于NC组,增殖活力高于NC组,凋亡率低于NC组(P<0.05)。结论miR-27b mRNA相对表达量在HICH大鼠脑组织中显著升高,并抑制星形胶质细胞的增殖,促进星形胶质细胞凋亡。 展开更多

关键词 高血压脑出血 大鼠 microrna-27b 星形胶质细胞

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microRNA-145调控大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究 被引量：2

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作者 沈树平 陆亚倩 +2 位作者 郑旸 张玮 朱庆萍 《口腔医学》 CAS 2017年第8期693-697,共5页

目的探讨microRNA-145在大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的作用。方法取3周龄雄性大鼠胫骨骨髓间充质干细胞,分为阴性对照组与microRNA-145下调组,分别感染慢病毒,观察microRNA-145对大鼠骨髓间充质干细胞在细胞增殖、细胞周期、凋... 目的探讨microRNA-145在大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的作用。方法取3周龄雄性大鼠胫骨骨髓间充质干细胞,分为阴性对照组与microRNA-145下调组,分别感染慢病毒,观察microRNA-145对大鼠骨髓间充质干细胞在细胞增殖、细胞周期、凋亡和成骨分化方面的影响。结果 microRNA-145下调表达组(p Lv3-(anti)miR-145)与阴性对照组(p Lv3-Negative control)相比,大鼠骨髓间充质干细胞的增殖、细胞周期和凋亡无统计学差异(P>0.05);microRNA-145下调表达组成骨相关基因Sema3A、OPG、Runx2及Osterix/SP7表达均明显高于阴性对照组,且microRNA-145下调组茜素红染色范围也大于阴性对照组。结论 microRNA-145下调表达可以促进大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化,但对其细胞增殖、细胞周期和凋亡无明显影响。 展开更多

关键词 microrna-145 大鼠骨髓间充质干细胞 成骨分化

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1,25（OH）2D3干预糖尿病肾病模型大鼠肾脏组织MicroRNA-130b及转化生长因子β1的变化 被引量：12

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作者 刘玥彤 王琴 +2 位作者 杨烨 朱筠 阿布力克木·吐尔地 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第2期248-253,共6页

背景:1,25(OH)2D3在糖尿病肾病的发展过程中发挥着重要调节作用。目的:探索1,25(OH)2D3对糖尿病肾病大鼠肾脏组织MicroRNA-130b及转化生长因子β1表达的影响作用。方法:实验方案经新疆医科大学动物实验中心动物实验伦理委员会批准。将2... 背景:1,25(OH)2D3在糖尿病肾病的发展过程中发挥着重要调节作用。目的:探索1,25(OH)2D3对糖尿病肾病大鼠肾脏组织MicroRNA-130b及转化生长因子β1表达的影响作用。方法:实验方案经新疆医科大学动物实验中心动物实验伦理委员会批准。将25只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病肾病+1,25(OH)2D3组、糖尿病肾病+花生油组,后2组分别给予骨化三醇(即1,25(OH)2D3,活性维生素D3)0.03μg/(kg?d)治疗、花生油对照处理。37 d后采集标本,以实时聚合酶链式反应(RT-PCR)、Western blot及免疫组织化学方法检测大鼠肾脏组织转化生长因子β1的表达;RT-PCR检测MicroRNA-130b的表达;采用苏木精-伊红及Masson染色对大鼠肾脏形态结构及纤维化程度进行分析。结果与结论:①RT-PCR结果显示,糖尿病肾病+1,25(OH)2D3组及糖尿病肾病+花生油组MicroRNA-130b的表达明显低于正常对照组(P<0.01),糖尿病肾病+1,25(OH)2D3组明显高于糖尿病肾病+花生油组(P<0.01);②RT-PCR、Western blot、免疫组织化学及病理结果显示,糖尿病肾病+1,25(OH)2D3组及糖尿病肾病+花生油组转化生长因子β1 mRNA和蛋白的表达、大鼠肾脏组织结构紊乱及纤维化程度明显高于正常对照组(P<0.01),糖尿病肾病+1,25(OH)2D3组明显低于糖尿病肾病+花生油组(P<0.01);③结果说明,糖尿病肾病大鼠肾脏MicroRNA-130b表达水平下降,转化生长因子β1 mRNA及蛋白表达水平升高,肾脏组织结构紊乱及纤维化程度严重;1,25(OH)2D3可上调糖尿病肾病大鼠肾脏MicroRNA-130b的表达水平,同时还可下调糖尿病肾病大鼠肾脏转化生长因子β1的表达水平,改善肾脏组织结构紊乱及纤维化程度。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 SPF级SD大鼠 链脲佐菌素 肾脏纤维化 1 25(OH)2D3 microrna-130b 转化生长因子Β1

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七氟醚通过上调MicroRNA-96影响大鼠认知障碍的效果与机制研究 被引量：2

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作者 袁东 吴滨阳 张东 《临床和实验医学杂志》 2019年第6期565-568,共4页

目的探讨七氟醚通过上调MicroRNA-96(miR-96)影响大鼠认知障碍的效果与机制。方法健康清洁级雄性SD大鼠15只随机数字表法分为3组,每组5只,分别为对照组、七氟醚暴露4 h组(实验1组)、七氟醚暴露8h组(实验2组),对照组在相同的环境下吸入2 ... 目的探讨七氟醚通过上调MicroRNA-96(miR-96)影响大鼠认知障碍的效果与机制。方法健康清洁级雄性SD大鼠15只随机数字表法分为3组,每组5只,分别为对照组、七氟醚暴露4 h组(实验1组)、七氟醚暴露8h组(实验2组),对照组在相同的环境下吸入2 L/min氧气8 h,实验1组停止吸入七氟醚后吸入2 L/min氧气4 h。采用水迷宫实验测定大鼠认知功能,检测不同时间点的认知功能、血气指标、体温、血清IGF-1水平和miR-96表达情况。结果实验1组与实验2组麻醉后3 d、7 d与14 d的逃避潜伏期显著高于对照组,目标象限累计时间低于对照组,比较差异有统计学意义(P <0. 05),实验1组与实验2组比较差异也有统计学意义(P <0. 05)。三组大鼠PaO_2与体温在麻醉前、麻醉4 h与麻醉8 h的组内与组间比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。实验1组与实验2组麻醉后3 d、7d与14 d的血清IGF-1含量均显著低于对照组(P <0. 05),实验2组显著低于实验1组(P <0. 05)。实验1组与实验2组麻醉后7 d海马组织的miR-96相对表达量显著低于对照组(P <0. 05),实验2组显著低于实验1组(P <0. 05)。结论七氟醚能通过上调大鼠海马组织miR-96的表达,抑制血清IGF-1的表达,从而损伤大鼠的认知功能,且七氟醚暴露8 h较暴露4 h对其损伤更明显。 展开更多

关键词 大鼠 认知障碍 七氟醚 microrna-96 水迷宫实验

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