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bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c靶基因预测及生物信息学分析 被引量：3
1
作者 杜鑫泽 马鑫浩 +5 位作者 张殿琦 杜嘉伟 马婧 谢琨成 何杰 昝林森 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第7期2451-2461,共11页
【目的】试验旨在对bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c的序列保守性、转录因子和靶基因进行生物信息学预测和分析,探究其影响精子发生的作用机制,为研究其生物学功能及作用机制提供指导和思路。【方法】利用miRBase数据库获取不同物种的b... 【目的】试验旨在对bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c的序列保守性、转录因子和靶基因进行生物信息学预测和分析,探究其影响精子发生的作用机制,为研究其生物学功能及作用机制提供指导和思路。【方法】利用miRBase数据库获取不同物种的bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c序列并进行相似性分析;通过TargetScan、miRWalk、miRDB等方法预测bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c的靶基因,对获得的靶基因集合分别进行GO功能和KEGG通路富集分析;通过AnimalTFDB获取共同调控bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c的转录因子,并构建TF-miRNA-mRNA作用网络。【结果】bta-miR-34b/c和bta-miR-449a/b/c在不同物种间高度保守。预测得到2个转录因子和49个候选靶基因,这些靶基因主要富集在精子发生、钙离子依赖性胞吐的调节、胰岛素分泌的调节等GO条目,以及HIF-1信号通路、甲状腺激素信号通路、Wnt信号通路等KEGG通路。bta-miR-34b/c、bta-miR-449a/b/c与上游转录因子NR2C2和HIC1,下游靶基因AXL、E2F3、DAAM1等共同构成的作用网络通过调控减数分裂、细胞周期、细胞凋亡、精子细胞能量代谢等生物过程影响精子发生。【结论】bta-miR-34b/c、bta-miR-449a/b/c通过上游转录因子和下游靶基因组成的分子调控网络共同调节精子发生过程。 展开更多
关键词 mir-34b/c mir-449a/b/c 精子发生 靶基因 转录因子
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非小细胞肺癌组织中miR-449a/b/c的表达及临床意义 被引量：10
2
作者 贺文财 金丽山 李华 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第4期303-308,共6页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中微小RNA(miRNA)-449a/b/c的表达水平、临床意义及与预后的关系。方法收集2013年1月至2015年12月收治的82例手术切除的NSCLC组织及69例癌旁组织标本,采用荧光实时定量PCR(QPCR)法检测以上组织中miR-449... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中微小RNA(miRNA)-449a/b/c的表达水平、临床意义及与预后的关系。方法收集2013年1月至2015年12月收治的82例手术切除的NSCLC组织及69例癌旁组织标本,采用荧光实时定量PCR(QPCR)法检测以上组织中miR-449a/b/c的表达并比较3者在NSCLC组织及癌旁组织中的分布差异,Pearson相关分析NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c表达的相关性,分析NSCLC组织中miR-449a/b/c表达与临床病理特征(性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织学类型和淋巴结转移)的关系,同时根据随访数据比较不同miR-449a/b/c表达患者的预后情况。结果 QPCR结果显示,NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c的平均表达量依次为0.210±0.028、0.359±0.031和0.133±0.020,均低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c的表达均呈正相关,相关系数r_(miR-449a/b)、r_(miR-449a/c)和r_(miR-449b/c)分别为0.246、0.390和0.331(P<0.05);NSCLC组织中miR-449a/b/c表达均与TNM分期有关,miR-449a和miR-449c表达与肿瘤大小有关。全组中位总生存期(OS)为12.4个月,其中miR-449a低表达组和高表达组的中位OS分别为11.2个月和13.5个月(P>0.05),miR-449b低表达组和高表达组的中位OS分别为9.6个月和14.2个月(P<0.05),miR-449c低表达组和高表达组的中位OS分别为11.7个月和13.7个月(P>0.05)。结论miR-449a/b/c在NSCLC组织中表达降低,且均与TNM分期有关,miR-449b表达与预后有关,可能与NSCLC发生、发展有关,对NSCLC诊断及病情评估有一定价值。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌(NScLc) 微小RNA-449a(miRNA-449a) 微小RNA-449b(miRNA-449b) 微小RNA-449c(miRNA-449c)
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miR-449b通过E2F3-p53途径抑制子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B的生长 被引量：2
3
作者 陈慧君 黄亦波 +1 位作者 林蓉蓉 郑飞云 《医学研究杂志》 2015年第8期41-45,共5页
目的探讨miR-449b对子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B增殖和凋亡的影响及其作用的分子途径。方法脂质体lipofectamine 2000包被miR-449b并转染入HEC-1-B细胞,实时荧光定量PCR检测转染前后细胞内miR-449b的表达水平,CCK-8试验检测转染前后细胞活... 目的探讨miR-449b对子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B增殖和凋亡的影响及其作用的分子途径。方法脂质体lipofectamine 2000包被miR-449b并转染入HEC-1-B细胞,实时荧光定量PCR检测转染前后细胞内miR-449b的表达水平,CCK-8试验检测转染前后细胞活性,流式细胞仪来检测转染前后细胞凋亡情况。细胞克隆形成实验观察转染前后细胞克隆形成能力。Western blot方法检查转染前后细胞内E2F3蛋白和p53的表达情况。结果转染后实验组miR-449b表达量较NC组增加,细胞增殖能力和克隆能力减弱,而细胞凋亡增加(P<0.05)。miR-449b使E2F3表达下调,p53表达上调(P<0.05)。结论 miR-449b通过E2F3-p53途径抑制HEC-1-B细胞增殖并促进凋亡,可能作为治疗子宫内膜腺癌的新分子靶标。 展开更多
关键词 mir-449b HEc-1-b细胞 增殖 凋亡 E2F3 P53
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miR-449b多态性位点rs10061133差异调控LHCGR表达 被引量：2
4
作者 潘虹 陈蓓丽 +1 位作者 李腾龑 马旭 《生殖医学杂志》 CAS 2019年第12期1479-1483,共5页
目的探究miR-449b多态性位点rs10061133 A>G在卵巢功能不全(POI)中的可能作用机制。方法生物信息学预测可能与POI相关的miR-449b潜在靶基因。双荧光素酶检测LHCGR是否为miR-449b的靶基因以及miR-449b rs10061133不同基因型对LHCGR表... 目的探究miR-449b多态性位点rs10061133 A>G在卵巢功能不全(POI)中的可能作用机制。方法生物信息学预测可能与POI相关的miR-449b潜在靶基因。双荧光素酶检测LHCGR是否为miR-449b的靶基因以及miR-449b rs10061133不同基因型对LHCGR表达调控的影响。结果生物信息学预测LHCGR为miR-449b的潜在靶基因,双荧光素酶测定证实LHCGR是miR-449b的靶基因。与GG基因型相比,rs10061133 AA基因型显著减弱LHCGR 3’UTR的荧光素酶活性。结论LHCGR为miR-449b的靶基因,多态性位点rs10061133 A>G可能通过差异调控LHCGR表达在POI的发生发展中发挥作用。 展开更多
关键词 mir-449b 多态性 LHcGR 卵巢功能不全
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血清miR-200c、血栓素B2和氧化型低密度脂蛋白在急性脑梗死早期诊断的价值分析
5
作者 蔡晓旭 王嘉婕 成江 《宁夏医学杂志》 2025年第8期700-702,共3页
目的探讨血清微RNA-200c(miR-200c)、血栓素B2(TXB2)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)在急性脑梗死早期诊断的价值。方法回顾性选择急性脑梗死患者300例作为急性脑梗死组,另选择同期健康体检者300例作为健康对照组。比较2组研究对象miR-200... 目的探讨血清微RNA-200c(miR-200c)、血栓素B2(TXB2)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)在急性脑梗死早期诊断的价值。方法回顾性选择急性脑梗死患者300例作为急性脑梗死组,另选择同期健康体检者300例作为健康对照组。比较2组研究对象miR-200c、TXB2和ox-LDL水平,分析急性脑梗死患者miR-200c、TXB2水平与ox-LDL水平的相关性,绘制miR-200c、TXB2、ox-LDL及三者联合在急性脑梗死早期诊断的受试者工作特征(ROC)曲线,评估miR-200c、TXB2联合ox-LDL在急性脑梗死早期诊断的价值。结果急性脑梗死组患者与健康对照组miR-200c、TXB2和ox-LDL水平比较差异有统计学意义(P<0.05);miR-200c、TXB2水平与ox-LDL水平均呈正相关(r值分别为0.572,0.560,P<0.05);miR-200c、TXB2与ox-LDL水平均为患有急性脑梗死的危险因素(P<0.05)。患有急性脑梗死的风险随着miR-200c、TXB2与ox-LDL水平升高而增加。miR-200c、TXB2、ox-LDL及三者联合在急性脑梗死早期诊断曲线下面积(AUC)分别为0.832(95%CI:0.762~0.915)、0.774(95%CI:0.696~0.853)、0.839(95%CI:0.767~0.911)、0.861(95%CI:0.791~0.929),灵敏度分别为82.36%、72.18%、76.63%、79.25%,特异度分别为80.04%、65.67%、82.19%、83.39%。结论血清miR-200c、TXB2和ox-LDL联合对于急性脑梗死早期诊断有较高的准确性,灵敏度与准确度均更高,有助于急性脑梗死患者的早期诊断和治疗。 展开更多
关键词 急性脑梗死 早期诊断 血清mir-200c 血栓素b2 氧化型低密度脂蛋白
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基于转录组学分析miR-34b/c与miR-449对小鼠输出小管结构与功能的影响
6
作者 武宇洁 刘悦 +4 位作者 胡燕琴 王莉 白芙蓉 徐晨 伍静文 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1059-1067,共9页
目的:研究miR-34b/c、miR-449在维持输出小管正常结构与功能中发挥的作用,探索miR-34b/c^(-/-)、miR-449^(-/-)双敲除小鼠不育的分子机制。方法:HE染色对小鼠输出小管形态进行观察;利用转录组测序技术对野生型小鼠和miR-34b/c^(-/-)、mi... 目的:研究miR-34b/c、miR-449在维持输出小管正常结构与功能中发挥的作用,探索miR-34b/c^(-/-)、miR-449^(-/-)双敲除小鼠不育的分子机制。方法:HE染色对小鼠输出小管形态进行观察;利用转录组测序技术对野生型小鼠和miR-34b/c^(-/-)、miR-449^(-/-)双敲除小鼠输出小管基因表达进行分析,从中筛选出miR-34b/c、miR-449可能的靶基因与差异表达基因进行联合分析;qRT-PCR法验证测序结果。结果:双敲除小鼠输出小管形态异常;与野生型小鼠相比,双敲除小鼠输出小管中参与纤毛等结构形成以及水、离子、蛋白质转运等活动的基因表达显著下降。结论:miR-34b/c、miR-449的缺失导致双敲除小鼠输出小管结构异常,输出小管纤毛运动与重吸收功能障碍,导致双敲除小鼠不育。 展开更多
关键词 mir-34b/c mir-449 输出小管 转录组学 不育 小鼠
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miR-449a/b负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖 被引量：7
7
作者 林爱琴 卜文婕 +4 位作者 汪萍 高继光 杨建课 丁飞雨 李铁臣 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期13-19,共7页
目的探讨miR-449a/b在胃癌发生中的可能作用机制。方法采用qRT-PCR方法检测了miR-449a/b和E2F1基因在胃癌细胞BGC-823和胃粘膜细胞GES-1表达情况;采用瞬时转染技术将miR-449a/b模拟物(mimic)以及mimic阴性对照分别转入胃癌细胞BGC-823中... 目的探讨miR-449a/b在胃癌发生中的可能作用机制。方法采用qRT-PCR方法检测了miR-449a/b和E2F1基因在胃癌细胞BGC-823和胃粘膜细胞GES-1表达情况;采用瞬时转染技术将miR-449a/b模拟物(mimic)以及mimic阴性对照分别转入胃癌细胞BGC-823中,qRT-PCR验证转染成功后,通过CCK-8法检测胃癌细胞的增殖能力,流式细胞术检测胃癌细胞凋亡的变化,细胞划痕实验检测胃癌细胞的迁移能力,Western blot方法检测miR-449a/b上调后其靶基因蛋白的表达水平;并通过转染E2F1过表达质粒和空质粒对照入胃癌细胞BGC-823,Western blot确定转染效率后,分别用qRT-PCR和数字PCR检测miR-449a/b的表达水平。结果相比于正常胃粘膜细胞株GES-1,miR-449a/b在胃癌细胞株BGC-823中表达均下调(P<0.01);过表达miR-449a/b可抑制胃癌细胞BGC-823增殖和迁移,并促进其凋亡(P<0.05);过表达的E2F1可上调miR-449a/b的表达(P<0.001),而上调miR-449a/b的表达,其直接靶基因CDK4、CDK6表达下调,并可通过CDKs-pRb-E2F1信号通路,间接下调E2F1蛋白的表达(P<0.01)。结论 miR-449a/b的低表达和E2F1的高表达均参与了胃癌的发生、发展,并且miR-449a/b能负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖。 展开更多
关键词 胃癌 mir-449a/b E2F1 细胞增殖
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miR-449a/b在Ⅱ型子宫内膜癌中表达下调 被引量：4
8
作者 薛纪森 张乾 +4 位作者 李晓琳 胡燕 杨孝军 颜笑健 郑飞云 《医学研究杂志》 2012年第11期103-107,共5页
目的分析Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌及良性子宫内膜组织间MicroRNA(miRNA)表达谱差异。方法收集子宫内膜癌手术患者内膜及良性患者内膜组织,利用免疫组化法分组,分别提取总RNA,基因芯片检测差异表达的miRNA,并经反转录PCR和荧光定量PCR验证... 目的分析Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌及良性子宫内膜组织间MicroRNA(miRNA)表达谱差异。方法收集子宫内膜癌手术患者内膜及良性患者内膜组织,利用免疫组化法分组,分别提取总RNA,基因芯片检测差异表达的miRNA,并经反转录PCR和荧光定量PCR验证差异表达的miRNA。结果芯片检测发现Ⅱ型子宫内膜癌与Ⅰ型子宫内膜癌及良性内膜组织间存在显著下调的miRNA分别有12个和9个,均下调的有miR-449a/b和miR-20b,显著上调的miRNA分别有18个和4个,均上调的有miR-29a。经反转录PCR和荧光定量PCR验证后发现miR-449a在Ⅱ型子宫内膜癌比Ⅰ型子宫内膜癌及良性内膜组织分别下调347倍和288倍,miR-449b分别下调461倍和424倍。结论Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌间miRNA的表达差异可能与不同类型子宫内膜癌的发生发展相关,而miR-449a/b可能与Ⅱ型子宫内膜癌的发病机制有关,可为进一步研究子宫内膜癌发生的分子机制提供依据。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 MIcRORNA mir-449a b 基因芯片 荧光定量PcR
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miR-125b通过下调HAX-1的表达提高CD133^+ SW480细胞对顺铂的敏感性 被引量：2
9
作者 潘海强 沈锋 +2 位作者 崔焌辉 蔡珂 都志军 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1053-1059,共7页
目的:探讨miR-125b在CD133^+结直肠癌细胞中发挥的作用并研究其是否和顺铂的体外治疗有关。方法:用RT-qPCR方法检测miR-125b在常规SW480肿瘤细胞及CD133^+ SW480肿瘤细胞中的表达水平。流式细胞术检测miR-125b和顺铂对SW480细胞系中CD13... 目的:探讨miR-125b在CD133^+结直肠癌细胞中发挥的作用并研究其是否和顺铂的体外治疗有关。方法:用RT-qPCR方法检测miR-125b在常规SW480肿瘤细胞及CD133^+ SW480肿瘤细胞中的表达水平。流式细胞术检测miR-125b和顺铂对SW480细胞系中CD133^+ 细胞比例的影响。MTT法检测miR-125b对顺铂杀伤CD133^+ SW480细胞能力的影响。利用生物信息学及Western blot方法验证miR-125b是否调节CD133^+ SW480细胞中HAX-1的表达。运用JC-1染色、Annexin V染色及Western blot方法研究miR-125b影响顺铂疗效的信号通路的效应。结果:CD133^+ SW480细胞中的miR-125b表达水平显著低于正常结直肠上皮细胞系FHC和常规SW480肿瘤细胞。顺铂体外单独治疗能提高SW480细胞系中CD133^+细胞的比例,然而联用miR-125b模拟物后CD133^+ SW480细胞的比例显著下降。MTT实验结果表明miR-125b可显著增强顺铂对CD133^+ SW480细胞的杀伤活性。Western blot实验表明miR-125b的靶基因可能为HAX-1。miR-125b联合顺铂可引起CD133^+ SW480细胞线粒体膜电位的丧失并诱导线粒体内细胞色素C的释放,进而引起细胞凋亡。转染HAX-1表达载体后miR-125b联合顺铂对CD133^+ SW480细胞的凋亡诱导效应显著降低。结论:miR-125b通过下调HAX-1的表达提高CD133^+结直肠癌细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 mir-125b HAX-1 细胞色素c 顺铂 cD133+结直肠癌细胞
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河南汉族人群mir-34b/c基因rs4938723多态性与结直肠癌遗传易感性及预后的关系 被引量：2
10
作者 徐纪中 袁维堂 +2 位作者 王贵宪 周全博 胡晟云 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2020年第4期495-498,共4页
目的:探讨河南汉族人群mir-34b/c基因rs4938723多态性与结直肠癌(CRC)遗传易感性及预后的关系。方法:收集180例CRC患者术前及180例体检健康者(对照)空腹静脉血,采用PCR-RFLP法分析mir-34b/c基因启动子区rs4938723多态性;采用Kaplan-Meie... 目的:探讨河南汉族人群mir-34b/c基因rs4938723多态性与结直肠癌(CRC)遗传易感性及预后的关系。方法:收集180例CRC患者术前及180例体检健康者(对照)空腹静脉血,采用PCR-RFLP法分析mir-34b/c基因启动子区rs4938723多态性;采用Kaplan-Meier法针对不同基因型患者绘制生存曲线并进行log-rank检验,采用Cox回归模型分析rs4938723多态性与CRC预后的关系。结果:CRC组C等位基因频率高于对照组(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析结果显示,TT基因型与TC+CC基因型患者生存曲线差异有统计学意义(P<0.05),TC+CC基因型患者生存状况差于TT型患者。Cox回归分析结果显示,与TT基因型比较,TC、CC基因型是CRC预后不良的危险因素,HR(95%CI)分别为1.284(1.035~1.593)、2.042(1.415~2.946)。结论:mir-34b/c基因rs4938723多态性与河南汉族人群CRC遗传易感性及预后关系密切。 展开更多
关键词 河南 汉族人群 mir-34b/c 基因多态性 结直肠癌 遗传易感性 预后
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感音神经性耳聋患者外周血miR-34c、miR-29b的表达及意义 被引量：1
11
作者 李瀛 罗颜 +1 位作者 李文全 罗蔚锋 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第15期2105-2109,共5页
目的探讨感音神经性耳聋(SNHL)患者外周血miR-34c、miR-29b的表达情况及临床意义。方法筛选2020年6月至2023年6月我院收治的神经性耳聋患者140例为观察组,同期选取体检健康者40例为对照组。根据听力损伤情况将SNHL患者分为轻度耳聋组63... 目的探讨感音神经性耳聋(SNHL)患者外周血miR-34c、miR-29b的表达情况及临床意义。方法筛选2020年6月至2023年6月我院收治的神经性耳聋患者140例为观察组,同期选取体检健康者40例为对照组。根据听力损伤情况将SNHL患者分为轻度耳聋组63例,中度耳聋组42例,重度耳聋组35例。采用qRT-PCR检测miR-34c、miR-29b的表达,并检测VEGF、氧化应激水平(TAC、SOD、MDA)、NO和Cx26;采用Pearson检验进行相关性分析,采用logistic回归分析SNHL病情严重程度的独立危险因素,采用ROC曲线评估miR-34c、miR-29b对SNHL患者病情严重程度的预测价值。结果4组NO、TAC、SOD、Cx26水平比较,重度耳聋组<中度耳聋组<轻度耳聋组<对照组(P<0.05);VEGF和MDA水平比较,重度耳聋组>中度耳聋组>轻度耳聋组>对照组(P<0.05)。4组miR-34c mRNA和miR-29b mRNA表达水平比较,重度耳聋组>中度耳聋组>轻度耳聋组>对照组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,SNHL患者外周血miR-34c、miR-29b与VEGF、MDA呈正相关,与NO、TAC、SOD、Cx26呈负相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,VEGF、MDA、NO、Cx26、TAC、SOD、miR-34c、miR-29b是影响SNHL病情严重程度的独立因素。结论miR-34c、miR-29b在SNHL患者中过表达,可作为预测评估SNHL患者病情严重程度的血清标志物。 展开更多
关键词 mir-34c mir-29b 感音神经性耳聋 相关性
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卵巢癌组织中miR-29c、miR-133b和miR-1的水平分析及临床意义 被引量：6
12
作者 穆鹏 张菁如 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2015年第3期228-232,共5页
目的探讨卵巢癌组织中miR-29c、miR-133b和miR-1的表达水平,分析3者与卵巢癌临床病理特征的关系。方法收集本院确诊的65例卵巢癌患者经手术切除的上皮性卵巢癌组织标本(卵巢癌组),采用实时定量RT-PCR(qRTPCR)法检测miR-29c、miR-133b及m... 目的探讨卵巢癌组织中miR-29c、miR-133b和miR-1的表达水平,分析3者与卵巢癌临床病理特征的关系。方法收集本院确诊的65例卵巢癌患者经手术切除的上皮性卵巢癌组织标本(卵巢癌组),采用实时定量RT-PCR(qRTPCR)法检测miR-29c、miR-133b及miR-1水平,收集对应卵巢癌患者的临床病理参数(年龄、临床分期、分化程度、组织类型及淋巴结转移),同时选取32例正常卵巢上皮组织(正常组)和39例良性卵巢上皮囊肿组织(良性组)作对照,以正常组的各指标均数为界值,将卵巢癌组miR-29c、miR-133b及miR-1水平分为高水平组(>正常组)和低水平组(≤正常组),比较miR-29c、miR-133b及miR-1不同表达水平与卵巢癌临床病理参数的关系,同时分析卵巢癌组织中3者水平的关系。结果卵巢癌组miR-29c水平高于正常组和良性组,而miR-133b和miR-1水平均低于正常组和良性组,差异有统计学意义(P<0.05);卵巢癌组miR-29c、miR-133b及miR-1水平均与分化程度有关,miR-29c水平与临床分期及淋巴结转移有关,而miR-133b亦与淋巴结转移有关,差异均有统计学意义(P<0.05);卵巢癌miR-29c水平与miR-133b和miR-1均呈负相关(r=-0.541、-0.361),miR-133b与miR-1呈正相关(r=0.447),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论卵巢癌患者组织中miR-29c呈高表达,miR-133b及miR-1呈低表达,与临床病理学特征有关,且在卵巢癌诊断中有一定的价值,可用于辅助卵巢癌的诊断和病情评估。 展开更多
关键词 卵巢癌 微小RNA mir-29c mir-133b mir-1
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lncHAGLR通过抑制miR-26a激活NF-κB促进骨关节炎大鼠软骨细胞的炎症反应和细胞凋亡 被引量：2
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作者 孟晓源 乌尔坎·叶尔肯 +1 位作者 王志刚 马乐 《医学分子生物学杂志》 CAS 2024年第2期115-123,共9页
目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HOXD反义生长相关长链非编码RNA(HOXD antisense growth-associated long non-coding RNA,lncHAGLR)对大鼠膝关节退行性软骨细胞C518细胞的炎症反应和凋亡的作用与潜在机制。方法采用... 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HOXD反义生长相关长链非编码RNA(HOXD antisense growth-associated long non-coding RNA,lncHAGLR)对大鼠膝关节退行性软骨细胞C518细胞的炎症反应和凋亡的作用与潜在机制。方法采用StarBase和荧光素酶报告基因法预测和确认ln-cHAGLR和微小RNA(microRNA,miR)-26a之间的相互作用。为研究lncHAGLR对miR-26a表达的调控作用,将C518细胞分为沉默lncHAGLR的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)载体质粒(si-ln-cHAGLR)组、siRNA的阴性对照(negative control of siRNA,si-NC)组、miR-26a抑制剂阴性对照(nega-tive control of miR-26a inhibitor,inhibitor-NC)组、miR-26a的抑制剂(miR-26a-inhibitor)组。此外,为研究lncHAGLR是否通过调控miR-26a对C518细胞的炎症和凋亡具有调控作用,将C518细胞分为5组:Control组、白细胞介素(interleukin,IL)-1β组、IL-1β+si-NC组、IL-1β+si-lncHAGLR组和IL-1β+si-lncHA-GLR+miR-26a-inhibitor组。采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)分析lncHAGLR和miR-26a的水平。采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)、乳酸脱氢酶(lactate dehydro-genase,LDH)和流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测C518细胞的增殖、细胞毒性和凋亡情况。蛋白质印迹检测切割模式的半胱天冬酶3(CLEAVED-CASPASE3)、核因子κB P65(nuclear factor-κB P65,NF-κB P65)、磷酸化的NF-κB P65(phosphorylated NF-κB P65,P-NF-κB P65)的表达。ELISA法检测白细胞介素(interleukin,IL)-6和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α的释放。结果lncHAGLR直接靶向miR-26a。在IL-1β组,lncHAGLR水平明显较Control组增高,miR-26a水平较Control组降低(P均<0.05)。此外,IL-1β+si-lncHAGLR组减轻了IL-1β诱导的C518细胞的炎症并抑制了凋亡,而且细胞的活力增加,LDH释放减少,CLEAVED-CASPASE3的表达被抑制,TNF-α和IL-6的分泌减少,且p-NF-κB P65表达减少(P均<0.05)。IL-1β+si-lncHAGLR+miR-26a-inhibitor组逆转了IL-1β+si-lncHAGLR组的结果(P均<0.05)。结论lncHAGLR通过抑制miR-26a激活NF-κB促进C518细胞的炎症反应和细胞凋亡,表明lncHAGLR可能是治疗骨关节炎的一个有价值的靶点。 展开更多
关键词 lncHAGLR 骨关节炎 c518细胞 细胞凋亡 mir-26a NF-κb P65
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m icroRNA-449b对高迁移率族蛋白B1介导树突状细胞功能的影响 被引量：2
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作者 王勇涛 董宁 +3 位作者 柴艳芬 于燕 齐安龙 姚咏明 《感染．炎症．修复》 2015年第4期205-212,共8页
目的:探讨mi R-449b在高迁移率族蛋白B1(HMGB1)刺激树突状细胞(DC)中的变化及其对DC免疫功能的影响。方法:分别以10、100、1 000 ng/ml剂量的HMGB1刺激小鼠脾脏来源的CD11c+DC,于48后检测DC表面分子CD80、CD86、MHC-II及细胞内mi R-449... 目的:探讨mi R-449b在高迁移率族蛋白B1(HMGB1)刺激树突状细胞(DC)中的变化及其对DC免疫功能的影响。方法:分别以10、100、1 000 ng/ml剂量的HMGB1刺激小鼠脾脏来源的CD11c+DC,于48后检测DC表面分子CD80、CD86、MHC-II及细胞内mi R-449b改变;流式细胞仪分析不同剂量HMGB1刺激对DC凋亡的影响。DC转染mi R-449b模拟物(mi R-449b)、抑制物(In-mi R-449b)及相应对照(mi R-NC、In-mi RNC)后,HMGB1(100 ng/ml)刺激48 h收取细胞,检测DC表面分子、凋亡改变以及与T细胞混合培养后T细胞增殖、分化功能的变化。结果:HMGB1刺激DC后,其表面分子随着剂量的增加表达上调,其中以100 ng/ml组上调最为明显,而大剂量(1 000 ng/ml)时表达有所下调;mi R-449b在48 h 100及1 000 ng/ml HMBG1组表达明显上调(P<0.05);随着HMGB1剂量的增加,DC在48 h凋亡逐渐增加(P<0.05)。转染mi R-449b可上调其在细胞内表达,而抑制物可抑制其表达;上调mi R-449b后HMGB1(100 ng/ml)刺激48 h DC表面分子CD86表达显著上调(P<0.05)、凋亡增加(P<0.01)、对T细胞的共刺激增殖效应减弱、混合性淋巴细胞反应中IL-4水平增多(P<0.01)、IFN-γ水平下降(P<0.05)。结论:mi R-449b可负性调控HMGB1介导DC免疫功能及促进其凋亡,进而在机体免疫反应障碍过程中发挥调控作用。 展开更多
关键词 mir-449b 树突状细胞 高迁移率族蛋白 b1 免疫功能
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miR-19b下调大鼠H9c2心肌细胞Kir2.1蛋白表达 被引量：1
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作者 李闺琴 杨晓燕 +1 位作者 唐惠芳 雷小勇 《微量元素与健康研究》 CAS 2015年第2期1-3,5,共4页
目的:检测miR-19b对大鼠H9c2心肌细胞Kir2.1表达的影响,探讨miRNA参与房颤发生发展的机制。方法:培养大鼠H9c2心肌细胞,构建miR-19b过表达质粒、miR-19b干扰质粒、阴性序列质粒,通过慢病毒载体感染大鼠H9c2心肌细胞;倒置荧光显微镜观察... 目的:检测miR-19b对大鼠H9c2心肌细胞Kir2.1表达的影响,探讨miRNA参与房颤发生发展的机制。方法:培养大鼠H9c2心肌细胞,构建miR-19b过表达质粒、miR-19b干扰质粒、阴性序列质粒,通过慢病毒载体感染大鼠H9c2心肌细胞;倒置荧光显微镜观察感染效率,qRT-PCR检测H9c2细胞中miR-19b mRNA表达水平。qRT-PCR检测H9c2细胞中Kir2.1mRNA水平。Western blot检测H9c2细胞中Kir2.1蛋白表达水平。结果:miR-19b慢病毒载体成功感染H9c2细胞;qRT-PCR检测,与阴性序列组相比,miR-19b过表达组Kir2.1 mRNA表达水平降低,miR-19b干扰组Kir2.1 mRNA表达水平升高;Western blot检测,与阴性序列质粒组相比,miR-19b过表达组Kir2.1蛋白表达水平降低,miR-19b干扰组Kir2.1蛋白表达水平升高。结论:miR-19b抑制KCNJ2的转录,下调Kir2.1蛋白表达,提示mi-19b可能参与房颤的发生发展。 展开更多
关键词 mir-19b H9c2 KIR2.1 KcNJ2
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miR-200b、miR-200c靶向肝细胞生长因子抑制结直肠癌细胞 被引量：1
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作者 徐永良 刘贵波 +3 位作者 马英 李明秋 潘艳明 张大伟 《智慧健康》 2023年第23期130-133,共4页
目的研究miR-200b、miR-200c对肝细胞生长因子进行靶向调节抑制结直肠癌细胞增殖的机制。方法采用生物信息学软件预测和验证miR-200b、miR-200c靶基因,分析miR-200b、miR-200c过表达抑制HGF表达,并分析miR-200b、miR-200c在体外影响结... 目的研究miR-200b、miR-200c对肝细胞生长因子进行靶向调节抑制结直肠癌细胞增殖的机制。方法采用生物信息学软件预测和验证miR-200b、miR-200c靶基因,分析miR-200b、miR-200c过表达抑制HGF表达,并分析miR-200b、miR-200c在体外影响结直肠癌细胞增殖活性的情况。结果培养1d、2d、3d,阴性对照模拟物的结直肠癌细胞增殖活性均高于miR-200b模拟物、miR-200c模拟物、miR-200b/c模拟物(P<0.05),阴性对照抑制剂的结直肠癌细胞增殖活性均低于miR-200b抑制剂、miR-200c抑制剂、miR-200b/c抑制剂(P<0.05),miR-200b模拟物、miR-200c模拟物的结直肠癌细胞增殖活性均高于miR-200b/c模拟物(P<0.05),miR-200b抑制剂、miR-200c抑制剂的结直肠癌细胞增殖活性均低于miR-200b/c抑制剂(P<0.05)。结论miR-200b、miR-200c对肝细胞生长因子进行靶向调节抑制结直肠癌细胞增殖,可以作为潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 结直肠癌 细胞增殖 mir-200b mir-200c 靶向调节 肝细胞生长因子 机制
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miR-449b表达对慢性乙型肝炎合并肝细胞癌患者预后的影响
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作者 梁伊乐 胡新俊 +1 位作者 岳峰 徐芸 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2021年第6期516-518,523,共4页
目的:探讨miR-449b表达对慢性乙型肝炎(CHB)合并肝细胞癌(HCC)患者预后的影响。方法:选取2014年1月至2018年1月的100例CHB合并HCC患者为观察组,同期40例CHB患者作为对照组,使用qRT-PCR检测患者外周血中miR-449b水平,分析miR-449b与观察... 目的:探讨miR-449b表达对慢性乙型肝炎(CHB)合并肝细胞癌(HCC)患者预后的影响。方法:选取2014年1月至2018年1月的100例CHB合并HCC患者为观察组,同期40例CHB患者作为对照组,使用qRT-PCR检测患者外周血中miR-449b水平,分析miR-449b与观察组患者总生存期(OS)的关系。结果:观察组外周血miR-449b表达水平(0.27±0.10),低于对照组(0.64±0.10),差异有统计学意义(P<0.05)。miR-449b表达与HBV病毒载量、肿瘤分期、Child-Pugh分级具有相关性(P<0.05)。观察组共失访9例,成功随访率91.0%,平均随访时间(49.9±7.9)个月,死亡51例。miR-449b表达增高组2年死亡率为15.91%,miR-449b表达降低组2年死亡率为38.30%,差异具有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier联合Log-rank检验提示,miR-449b表达降低组OS短于miR-449b表达升高组(P<0.05)。Cox分析结果显示,miR-449b表达、年龄、TNM分期、病毒载量是CHB合并HCC OS的独立影响因素(P<0.05)。结论:CHB合并HCC患者外周血中miR-449b表达水平与TNM分期、病毒载量及Child-Pugh分级有关,且miR-449b表达降低患者的OS缩短,miR-449b可能是CHB合并HCC预后的标志物。 展开更多
关键词 肝细胞癌 慢性乙型肝炎 mir-449b 总生存期
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miR-34b/c启动子区单核苷酸多态性对其转录调控的影响
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作者 陈佳萍 秦真真 +2 位作者 曹松玉 胡志斌 沈洪兵 《肿瘤学杂志》 CAS 2012年第11期835-839,共5页
[目的]研究miR-34b/c启动子区单核苷酸多态rs4938723(T/C)对其转录调控的影响。[方法]构建含有不同基因型miR-34b/c启动子区的报告基因表达载体pGL3-basic-miR34b/c-T和pGL3-basic-miR34b/c-C,分别与内参质粒SV40共转染于Hela、A549和CH... [目的]研究miR-34b/c启动子区单核苷酸多态rs4938723(T/C)对其转录调控的影响。[方法]构建含有不同基因型miR-34b/c启动子区的报告基因表达载体pGL3-basic-miR34b/c-T和pGL3-basic-miR34b/c-C,分别与内参质粒SV40共转染于Hela、A549和CHO三种细胞后进行荧光素酶活性分析。[结果]pGL3-basic-miR34b/c-C等位基因组荧光素酶相对活性与pGL3-promoter-miR30C-T组等位基因相比,均有显著升高(P<0.01)。[结论]荧光素酶活性强弱间接反映了miRNA启动子区遗传变异对转录活性的影响,当miR-34b/c启动子区rs4938723位点为C时,可以更为有效地增加miR-34b/c的转录产物,从而在转录水平上调控miRNA的表达。 展开更多
关键词 mir-34b c 启动子区 单核苷酸多态性
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牛miR-29b影响牛病毒性腹泻病毒感染BALB/c小鼠的作用 被引量：17
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作者 田瑞鑫 李胜男 +11 位作者 胡新艳 陈俊贞 郭妍婷 赵新艳 李祯 董文丽 如先古丽 李淑娴 冉多良 姚刚 史慧君 付强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期264-271,共8页
前期研究发现高表达miR-29b能显著抑制牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)在体外的复制,而miR-29b过表达是否影响BVDV在体内的复制尚未见有报道。研究设计扩增牛pre-miR-29b基因片段的引物,以MDBK基因组为模板,PCR扩增... 前期研究发现高表达miR-29b能显著抑制牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)在体外的复制,而miR-29b过表达是否影响BVDV在体内的复制尚未见有报道。研究设计扩增牛pre-miR-29b基因片段的引物,以MDBK基因组为模板,PCR扩增pre-miR-29b并克隆至慢病毒载体pLL3.7。将阳性质粒pLL3.7-pre-miR-29b与包装质粒共转染HEK-293T细胞,包装慢病毒并测定慢病毒滴度,同时包装pLL3.7空质粒的慢病毒作为阴性对照。将4~5周龄BALB/c小鼠随机分成5组,每组6只,连续2次尾静脉注射2.5×107 IU慢病毒悬液pLL3.7-pre-miR-29b或pLL3.7,并于慢病毒注射后96 h通过滴鼻途径攻毒BVDV毒株NADL(1.68×105 TICD50/只),于攻毒后不同时间(0,2,4,10,15 d)处死BALB/c小鼠,采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、小肠和血液,提取总RNA,使用荧光定量RT-PCR检测不同组织中BVDV拷贝数;同时制备病理组织切片观察各组织病变情况。结果显示,成功构建pLL3.7-pre-miR-29b质粒;成功包装pLL3.7-pre-miR-29b和pLL3.7慢病毒;使用荧光定量RT-PCR检测发现,pLL3.7-pre-miR-29b感染能显著性降低BVDV拷贝数;与pLL3.7-pre-miR-29b感染的处理组相比较,pLL3.7感染的对照组中各组织病变情况较为严重。结果表明,BALB/c小鼠体内过表达miR-29b能明显抑制BVDV的复制,减轻BVDV感染造成的病变,为以后研发抗BVDV的有效策略和方法提供了理论依据。 展开更多
关键词 mir-29b前体 慢病毒 bALb/c小鼠 病毒载量 病理组织切片
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慢性乙型肝炎患者血清miR-29b、miR-30c水平及与肝纤维化的关系 被引量：10
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作者 黄平 杨永峰 熊清芳 《热带医学杂志》 CAS 2019年第12期1535-1538,1546,共5页
目的探讨慢性乙型肝炎患者血清miR-29b、miR-30c表达及其与肝纤维化的关系,为临床治疗慢性乙型肝炎患者肝纤维化提供新思路。方法收集南京中医药大学附属南京医院2015年9月-2018年6月期间慢性乙型肝炎患者98例,根据肝脏组织病理检查分... 目的探讨慢性乙型肝炎患者血清miR-29b、miR-30c表达及其与肝纤维化的关系,为临床治疗慢性乙型肝炎患者肝纤维化提供新思路。方法收集南京中医药大学附属南京医院2015年9月-2018年6月期间慢性乙型肝炎患者98例,根据肝脏组织病理检查分为轻、中重度肝纤维化组,并选取同期体检健康者47人作为健康对照组。使用qRT-PCR法检测研究对象血清miR-29b、miR-30c表达水平,采用免疫层析法检测肝纤维化指标透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(C-IV)、层粘连蛋白(LN),并采用受试者工作曲线(ROC)评估miR-29b、miR-30c对肝纤维化的诊断价值。结果与健康对照组相比,轻度、中重度肝纤维化组miR-29b、miR-30c水平显著降低,HA、PC-Ⅲ、C-Ⅳ、LN水平显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与轻度肝纤维化组相比,中重度肝纤维化组miR-29b和miR-30c水平显著降低,HA、PC-Ⅲ、C-Ⅳ、LN水平显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性结果表明,miR-29与HA、PC-Ⅲ、C-Ⅳ、LN呈负相关(r=-0.755、-0.684、-0.412、-0.625,P<0.05);miR-30c与HA、PC-Ⅲ、C-Ⅳ、LN呈负相关(r=-0.528、-0.711、-0.678、-0.669,P<0.05)。ROC曲线分析显示miR-29b、miR-30c以及二者联合检测预测慢性乙型肝炎患者发生肝纤维化曲线下面积分别为0.809(敏感度:73.1%,特异性:79.8%)、0.800(敏感度:85.3%,特异性:72.4%)、0.965(敏感度:96.5%,特异性:82.4%)。结论血清miR-29b、miR-30c在肝纤维化患者中低表达,检测血清miR-29b、miR-30c的表达水平对评估慢性乙型肝炎患者是否发生肝纤维化具有重要临床应用价值。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 mir-29b mir-30c 肝纤维化
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