目的探究LncRNA ZFAS1是否通过调节miR-34b-5p促进弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B lymphoma,DLBCL)细胞增殖并抑制细胞凋亡。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测30例DLBCL患者肿瘤组织及DLBCL细胞株中LncRNA ZFAS1和miR-34b-5p转录...目的探究LncRNA ZFAS1是否通过调节miR-34b-5p促进弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B lymphoma,DLBCL)细胞增殖并抑制细胞凋亡。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测30例DLBCL患者肿瘤组织及DLBCL细胞株中LncRNA ZFAS1和miR-34b-5p转录水平。将含有敲低ZFAS1序列的载体和抑制或过表达miR-34b-5p的序列使用Lipofectamine 2000试剂转染到SU-DHL-4细胞,RT-qPCR检测敲低和过表达效率,双荧光素酶报告基因实验分析ZFAS1和miR-34b-5p的靶向关系。最后SU-DHL-4细胞随机分组为对照组、sh-ZFAS1组、miR-34b-5p inhibitor组和shRNA-ZFAS1+miR-34b-5p inhibitor组,克隆形成实验和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白的表达。结果在DLBCL患者和细胞系中ZFAS1的表达量增加,而miR-34b-5p的表达量减少,同时ZFAS1靶向负调节miR-34b-5p的表达。与对照组相比较,sh-ZFAS1组miR-34b-5p的表达量增加,miR-34b-5p inhibitor组miR-34b-5p的表达量减少。与miR-34b-5p inhibitor组相比较,sh-ZFAS1和miR-34b-5p inhibitor共转染组中miR-34b-5p的表达量增加。敲低ZFAS1的表达抑制SU-DHL-4细胞增殖,促进细胞凋亡,并降低线粒体膜电位,同时升高Bax/Bcl-2和cleaved caspase-3/caspase-3比值。结论LncRNA ZFAS1通过下调miR-34b-5p促进SU-DHL-4细胞增殖并抑制细胞凋亡。展开更多
文摘目的:评估骨髓单个核细胞中miR-34a/b/c表达水平与老年急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者临床特征及生存预后的关联。方法:连续纳入91例接受化疗的老年AML初治患者,同时纳入21例非血液恶性疾病患者作为对照者。采用荧光定量PCR(Quantitative real time polymerase chain reaction,qPCR)检测患者和对照者骨髓单个核细胞miR-34a/b/c的相对表达量。所有老年AML患者均根据自身疾病状况以及危险分级,选择接受常规诱导治疗方案,而后评估患者治疗反应。记录患者无事件生存期(event-free survival,EFS)及总体生存期(overall survival,OS)。结果:老年AML患者组的miR-34a和miR-34b水平显著低于对照组(P值均<0.01),而miR-34c水平在两组间无差异(P>0.05)。miR-34a高表达与无FLT3-ITD突变(P<0.05)和较低的危险分级(P<0.05)相关,miR-34b高表达与正常核型(P<0.05)、伴CEBPA双突变(P<0.01)、伴NPM1突变(P<0.05)和WBC计数≤10×109/L(P<0.05)相关,而miR-34c表达水平与患者病理特征均无关联(均P>0.05)。此外,miR-34a高表达与老年AML患者高的CR率(P<0.05)、长的EFS(P<0.01)及好的OS(P<0.01)相关,而miR-34b/c表达水平与患者的CR率、EFS及OS期均无关联(均P>0.05)。结论:miR-34a/b在老年AML患者中低表达,且它们高表达与患者良好的表现临床相关,其中miR-34a高表达还可以在一定程度上预测老年AML患者生存预后。
