基于miR-20b-5p/TXNIP通路探讨羟基喜树碱脂质体对梗阻性肾病大鼠肾脏线粒体动力学的影响

1

作者 李思阳 李更东 闫宇辉 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第3期521-528,共8页

基于miR-20b-5p/硫氧还蛋白互作蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)通路探讨羟基喜树碱脂质体(hydroxycamptothecin liposomes,HCPTL)对梗阻性肾病大鼠肾脏线粒体动力学的影响。单侧输尿管结扎(unilateral ureteral ligation,... 基于miR-20b-5p/硫氧还蛋白互作蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)通路探讨羟基喜树碱脂质体(hydroxycamptothecin liposomes,HCPTL)对梗阻性肾病大鼠肾脏线粒体动力学的影响。单侧输尿管结扎(unilateral ureteral ligation,UUO)法成功构建梗阻性肾病大鼠模型后分别用羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)、HCPTL、HCPTL+miR-20b-5p antagomir(miR-Ant)干预,检测血清中血肌酐(serum creatinine,SCR)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平;观察肾组织纤维化及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平变化;评估肾组织中线粒体结构、线粒体膜电位、线粒体融合蛋白2(mitochondrial fusion protein 2,MFN2)、动力相关蛋白1(dynamic related protein 1,DRP1)平均光密度值、miR-20b-5p表达及TXNIP、MFN2、DRP1蛋白变化。结果显示,HCPT、HCPTL干预后,UUO大鼠呈蓝染的纤维化区域减少,线粒体基质肿胀、嵴破裂等现象有所缓解,血清中SCR、BUN降低,肾组织中SOD水平、线粒体膜电位、MFN2平均光密度值、miR-20b-5p表达及MFN2蛋白表达升高,肾组织中MDA水平、DRP1平均光密度值、TXNIP、DRP1蛋白表达降低,且HCPTL干预后的对应变化趋势更明显(P<0.05);miR-Ant减弱了HCPTL对梗阻性肾病大鼠肾脏线粒体动力学的改善作用。以上结果表明HCPTL可能通过调控miR-20b-5p/TXNIP通路改善肾脏线粒体动力学,增强抗氧化应激能力,进而抑制梗阻性肾病大鼠肾损伤。 展开更多

关键词 羟基喜树碱脂质体 梗阻性肾病 mir-20b-5p 线粒体动力学 硫氧还蛋白互作蛋白

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miR-20b-5p对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭及凋亡的影响

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作者 周艺杰 谈顺 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2025年第4期243-248,共6页

目的探究miR-20b-5p对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力和凋亡水平的影响。方法利用RT-qPCR比较HeLa细胞和H8细胞miR-20b-5p的表达差异,随后对miR-20b-5p基因分别进行过表达和沉默后,结合CCK-8、迁移实验、基质胶侵袭实验、细胞克隆... 目的探究miR-20b-5p对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力和凋亡水平的影响。方法利用RT-qPCR比较HeLa细胞和H8细胞miR-20b-5p的表达差异,随后对miR-20b-5p基因分别进行过表达和沉默后,结合CCK-8、迁移实验、基质胶侵袭实验、细胞克隆形成实验以及流式细胞术检测miR-20b-5p对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力以及细胞凋亡水平。结果He-La细胞miR-20b-5p表达水平高于H8细胞,且其增殖、迁移和侵袭能力均高于H8细胞。miR-20b-5p过表达显著提高了HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭能力,降低了其凋亡水平。相反,miR-20b-5p沉默显著降低了HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭能力并提高了其凋亡水平。结论miR-20b-5p在HeLa细胞高表达,且与其较高的增殖、迁移和侵袭能力、凋亡水平直接相关,表明其有作为宫颈癌诊断及防控靶点的潜力。 展开更多

关键词 mir-20b-5p分子 HELA细胞 侵袭 迁移 凋亡

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miR-20b抑制哮喘小鼠的气道炎症 被引量：3

3

作者 马华 罗玉岚 +2 位作者 郭术俊 申林 宋传旺 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1463-1466,共4页

目的探讨miR-20b对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、哮喘+miR-20b模拟物处理组、哮喘+miR-20b模拟物对照处理组。卵清白蛋白(OVA)致敏和激发构建哮喘模型小鼠,miR-20b模拟物及其对照采用鼻滴的方... 目的探讨miR-20b对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、哮喘+miR-20b模拟物处理组、哮喘+miR-20b模拟物对照处理组。卵清白蛋白(OVA)致敏和激发构建哮喘模型小鼠,miR-20b模拟物及其对照采用鼻滴的方式给药干预。实验流程的第49天检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞总数和分类计数,肺组织进行HE染色观察病理学变化,ELISA检测BALF中血管内皮生长因子(VEGF)的浓度。结果哮喘小鼠经miR-20b模拟物处理后,BALF中细胞总数及中性粒细胞、嗜酸性粒细胞的分类计数明显降低(P<0.01),并且气道黏膜增厚减轻,气道腔内粘液分泌及支气管周围炎性细胞的浸润减少。与哮喘组BALF中VEGF的含量28.55±3.42 pg/m L相比,哮喘+miR-20b模拟物处理组的含量18.19±3.67 pg/m L明显降低(P<0.01)。结论 miR-20b对哮喘小鼠气道炎症产生抑制作用,这一效应可能是通过降低VEGF的表达来介导。 展开更多

关键词 mir-20b 哮喘 气道炎症 血管内皮生长因子

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血浆miR-20a和miR-20b对Ⅱ型糖尿病肾病的诊断价值 被引量：10

4

作者 张一平 靳思思 +1 位作者 李金生 任苗苗 《中国中西医结合肾病杂志》 2020年第3期233-236,共4页

目的:探讨血浆miR-20a和miR-20b对Ⅱ型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的诊断价值。方法:选取2017年01月~2019年06月在我院就诊的327名Ⅱ型糖尿病(typeⅡdiabetes mellitus,T2DM)患者,根据Mogenson分期标准,327例T2DM患者中,213例... 目的:探讨血浆miR-20a和miR-20b对Ⅱ型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的诊断价值。方法:选取2017年01月~2019年06月在我院就诊的327名Ⅱ型糖尿病(typeⅡdiabetes mellitus,T2DM)患者,根据Mogenson分期标准,327例T2DM患者中,213例被分到T2DM组,114例被分为Ⅱ型DN组。同时选取同时期在我院体检中心参加体检的健康人120例作为正常对照组(normal control,NC)。应用定量实时聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法测定miR-20a和miR-20b的相对表达量。采用Pearson相关分析比较miRNA和临床指标的相关性。采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析miR-20a和miR-20b对Ⅱ型DN的诊断价值。采用Logistic回归分析影响Ⅱ型DN的因素。结果:miR-20a和miR-20b在DN患者中的表达量显著高于T2DM组和NC组患者(P均<0.05)。Pearson相关分析显示,miR-20a和miR-20b均与UAER呈正相关,与e GFR呈负相关(P均<0.05)。ROC分析显示miR-20a和miR-20b诊断Ⅱ型DN的ROC曲线下面积(areas under the ROC curve,AUC)分别为0.823和0.870。多因素Logistic回归分析显示较高水平的BMI、TG、TC、FPG、Hb A1C以及miR-20a和miR-20b高表达均是Ⅱ型DN的独立危险因素(P <0.05)。结论:血浆miR-20a和miR-20b在Ⅱ型DN中高表达,是诊断Ⅱ型DN潜在的生物标志物。 展开更多

关键词 mir-20a mir-20b Ⅱ型糖尿病肾病 诊断价值

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血清外泌体miR-20b-5p miR-107水平检测在非小细胞肺腺癌诊断及预后评估中的应用 被引量：3

5

作者 李纪远 马新 +3 位作者 张灿斌 王献 郑帅玉 尚自强 《安徽医学》 2023年第1期38-44,共7页

目的探究血清外泌体miR-20b-5p、miR-107水平检测在非小细胞肺腺癌诊断及预后评估中的应用价值。方法选取2015年12月至2018年12月河南科技大学第一附属医院胸外科收治的124例非小细胞肺腺癌患者为观察组,另选取120例同期于本院接受体检... 目的探究血清外泌体miR-20b-5p、miR-107水平检测在非小细胞肺腺癌诊断及预后评估中的应用价值。方法选取2015年12月至2018年12月河南科技大学第一附属医院胸外科收治的124例非小细胞肺腺癌患者为观察组,另选取120例同期于本院接受体检的健康体检者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链法(qRT-PCR)检测血清外泌体miR-20b-5p、miR-107表达水平,受试者工作特征曲线(ROC)评估miR-20b-5p、miR-107水平检测对非小细胞肺腺癌的早期诊断价值,Kaplan-Meier生存分析研究miR-20b-5p、miR-107水平与患者预后的关系。结果观察组的血清外泌体miR-20b-5p、miR-107水平高于对照组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清外泌体miR-20b-5p、miR-107检测诊断非小细胞肺腺癌的AUC值分别为0.766、0.821,最佳截断值分别为1.81、1.27。观察组患者中,117例完成随访,7例失访。随访3年后,64例患者死亡,53例患者存活。根据患者的生存状态绘制ROC曲线,确定miR-20b-5p、miR-107预测患者预后的最佳截断值分别为1.95、1.60;miR-20b-5p高表达与低表达、miR-107高表达与低表达患者的TNM分期和淋巴结转移比较,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-20b-5p、miR-107高表达患者的中位生存时间均低于低表达患者(P<0.05)。结论外泌体miR-20b-5p、miR-107在非小细胞肺腺癌患者血清中呈高表达状态,其表达水平与患者的预后相关,在疾病诊断与预测患者累计生存率方面具有一定的参考意义。 展开更多

关键词 非小细胞肺腺癌 血清外泌体 mir-20b-5p mir-107 诊断 预后

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靶向抑制miR-20b降低肝癌HuH-7细胞增殖、迁移和侵袭能力 被引量：1

6

作者 王敬红 崔永兴 +1 位作者 彭鹏 于锦萍 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1162-1167,共6页

目的探讨miR-20b对肝癌HuH-7细胞增殖、迁移、侵袭的影响和机制。方法在肝癌HuH-7细胞中转染miR-20b inhibitor,分别采用Real-time PCR评估下调效果,MTT法评估细胞增殖变化,Transwell小室评估细胞侵袭能力,Western blot法评估细胞中MMP-... 目的探讨miR-20b对肝癌HuH-7细胞增殖、迁移、侵袭的影响和机制。方法在肝癌HuH-7细胞中转染miR-20b inhibitor,分别采用Real-time PCR评估下调效果,MTT法评估细胞增殖变化,Transwell小室评估细胞侵袭能力,Western blot法评估细胞中MMP-2、E-cadherin、MMP-9和vimentin蛋白水平。应用生物信息学软件预测TCF21可能是miR-20b的靶基因,以双荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。在肝癌HuH-7细胞中共转染TCF21 siRNA和miR-20b inhibitor,评估细胞增殖、侵袭、迁移与细胞中MMP-2、E-cadherin、MMP-9、vimentin蛋白的表达水平。结果转染miR-20b inhibitor后HuH-7细胞中miR-20b表达水平降低[(1.02±0.11)vs(0.43±0.05)];细胞增殖[(0.57±0.06)vs(0.34±0.02)]、迁移[(125.64±13.65)vs(92.14±6.94)]和侵袭[(88.15±9.32)vs(63.48±6.2)]能力下降;MMP-2、vimentin、MMP-9蛋白表达水平降低;E-cadherin蛋白表达水平升高。miR-20b靶向负调控TCF21表达。共转染TCF21 siRNA和miR-20b inhibitor可以显著提高HuH-7细胞增殖[(0.40±0.05)vs(0.56±0.06)]、迁移[(89.62±9.25)vs(115.26±10.84)]和侵袭[(68.25±4.15)vs (95.21±6.51)]能力;提高细胞中MMP-2、vimentin、MMP-9蛋白表达水平,降低E-cadherin蛋白水平;与共转染siRNA control和miR-20b inhibitor的细胞比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论下调miR-20b表达,可通过靶向TCF21抑制肝癌HuH-7细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化。 展开更多

关键词 肝肿瘤 mir-20b TCF21 侵袭

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miR-20b-5p靶向MAPK1调控脑出血过程中脑微血管内皮细胞铁死亡 被引量：2

7

作者 蒋锋 马敏江 +2 位作者 王乐 常莎 王晓辉 《现代生物医学进展》 CAS 2023年第24期4633-4641,4709,共10页

目的:探讨miR-20b-5p对氧糖剥夺(OGD)/Hemin处理的脑微血管内皮细胞(BMVEC)功能的影响及机制。方法:将BMVEC分为Control组、agomir-NC组、agomir-miR-20b-5p组、antagomir-NC组和antagomir-miR-20b-5p组。使用Lipofectamine2000试剂对... 目的:探讨miR-20b-5p对氧糖剥夺(OGD)/Hemin处理的脑微血管内皮细胞(BMVEC)功能的影响及机制。方法:将BMVEC分为Control组、agomir-NC组、agomir-miR-20b-5p组、antagomir-NC组和antagomir-miR-20b-5p组。使用Lipofectamine2000试剂对细胞进行相应的转染处理。BMVEC转染后,将BMVEC再分为Control组、OGD/Hemin组(O/H组)、OGD/Hemin+agomir-NC组(O/H+agomir-NC组)、OGD/Hemin+agomir-miR-20b-5p组(O/H+agomir-miR-20b-5p组)、OGD/Hemin+antagomir-NC组(O/H+antagomir-NC组)和OGD/Hemin+antagomir-miR-20b-5p组(O/H+antagomir-miR-20b-5p组)。Control组BMVEC正常培养,其他组BMVEC进行OGD/Hemin处理。MTT法检测BMVEC增殖,TUNEL染色检测BMVEC凋亡,Transwell检测BMVEC迁移。使用试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平。使用Iron Assay试剂盒检测Fe2+含量。通过qRT-PCR检测miR-20b-5p和MAPK1 mRNA水平。通过Western blot检测MAPK1、Bax、Bcl-2、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)蛋白表达水平。通过免疫荧光染色检测MAPK1的荧光强度水平。结果:与Control组和agomir-NC组比较,agomir-miR-20b-5p组BMVEC中的miR-20b-5p水平升高(P<0.05)。与Control组和antagomir-NC组比较,antagomir-miR-20b-5p组BMVEC中的miR-20b-5p水平降低(P<0.05)。与Control组比较,O/H组BMVEC中的miR-20b-5p水平降低,细胞活力降低,TUNEL阳性率和Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低,迁移数量降低,SOD和GSH-Px活性降低,MDA含量升高,Fe2+含量和PTGS2的蛋白表达水平升高,GPX4的蛋白表达水平降低,MAPK1的mRNA和蛋白表达水平以及相对荧光强度升高(P<0.05)。与O/H组和O/H+agomir-NC组比较,O/H+agomir-miR-20b-5p组BMVEC中的miR-20b-5p水平升高,细胞活力升高,TUNEL阳性率和Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高,迁移数量升高,SOD和GSH-Px活性升高,MDA含量降低,Fe2+含量和PTGS2的蛋白表达水平降低,GPX4的蛋白表达水平升高,MAPK1的mRNA和蛋白表达水平以及相对荧光强度降低(P<0.05)。与O/H组和O/H+antagomir-NC组比较,O/H+antagomir-miR-20b-5p组BMVEC中的miR-20b-5p水平降低,细胞活力降低,TUNEL阳性率和Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低,迁移数量降低,SOD和GSH-Px活性降低,MDA含量升高,Fe2+含量和PTGS2的蛋白表达水平升高,GPX4的蛋白表达水平降低,MAPK1的mRNA和蛋白表达水平以及相对荧光强度升高(P<0.05)。结论:本研究表明上调miR-20b-5p通过抑制OGD/Hemin处理的BMVEC中MAPK1的表达从而抑制了铁死亡途径。 展开更多

关键词 脑出血 脑微血管内皮细胞 mir-20b-5p 丝裂原活化蛋白激酶1 铁死亡

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妊娠期糖尿病视网膜病变患者血清miR-200c-3p、 miR-20b-5p表达水平及检测临床意义 被引量：1

8

作者 李威威 杨倩 +6 位作者 常瑚 宋森 李世强 程亚辉 岳钟 冯丽 肖博文 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第8期1076-1080,共5页

目的:探讨妊娠期糖尿病视网膜病变(DR)患者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平变化及检测临床意义。方法:选择妊娠期糖尿病孕妇80例(GDM组)和DR孕妇75例(DR组),正常妊娠期女性95例(对照组)。采用qRT-PCR法对受试者血清miR-200c-3p、miR-20... 目的:探讨妊娠期糖尿病视网膜病变(DR)患者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平变化及检测临床意义。方法:选择妊娠期糖尿病孕妇80例(GDM组)和DR孕妇75例(DR组),正常妊娠期女性95例(对照组)。采用qRT-PCR法对受试者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平进行测定,采用全自动生化分析仪对受试者低密度脂胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)进行测定,采用血糖检测仪对受试者空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)进行测定。结果:GDM组、DR组患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于对照组(均P<0.05);DR组患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于GDM组(均P<0.05);随着病情严重程度的增加,DR组患者miR-200c-3p、miR-20b-5p水平显著升高(均P<0.05);预后不良组DR患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于预后良好组(均P<0.05);多因素Logistic回归分析显示血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平升高为DR患者发生预后不良的危险因素;ROC曲线结果显示,血清miR-200c-3p、miR-20b-5p、两者联合诊断DR患者不良预后曲线下面积(AUC)为0.927(95%CI:0.843~0.974)、0.848(95%CI:0.746~0.920)、0.985(95%CI:0.924~0.999)。结论:DR患者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平升高,对DR不良预后具有一定的预测价值。 展开更多

关键词 妊娠期糖尿病视网膜病变 mir-200c-3p mir-20b-5p 表达水平 预后 诊断

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miR-20b过表达对P19细胞增殖和细胞分化的影响 被引量：2

9

作者 朱莎莎 刘雪华 +6 位作者 余章斌 朱春 李萌萌 韩树萍 胡晓山 朱金改 彭宇竹 《发育医学电子杂志》 2014年第2期87-92,共6页

目的探讨miR-20b过表达对P19细胞增殖和细胞分化的影响。方法将包含鼠miR-20b成熟序列的慢病毒载体及空载体分别感染P19细胞,通过嘌呤霉素筛选2周,建立稳定过表达鼠mR-20b的P19细胞系。用Real-time PCR的方法验证稳定细胞表达株。用CCK-... 目的探讨miR-20b过表达对P19细胞增殖和细胞分化的影响。方法将包含鼠miR-20b成熟序列的慢病毒载体及空载体分别感染P19细胞,通过嘌呤霉素筛选2周,建立稳定过表达鼠mR-20b的P19细胞系。用Real-time PCR的方法验证稳定细胞表达株。用CCK-8方法检测稳定感染miR-20b过表达慢病毒和空载体的P19细胞间细胞增殖的差别。将稳定感染的两组细胞以无血清培养液37℃孵育24小时使细胞停留于G0期,而后恢复血清培养,取不同时间点的细胞,使用流式细胞仪检测两组间细胞周期的差别,从而间接验证CCK-8的结果。以1%二甲基亚砜(DMSO)将两组稳定感染的P19细胞诱导分化为心肌细胞,Real-time PCR检测心肌分化相关标志基因的表达,并用光镜观察分化过程中的形态变化。结果建立了稳定表达miR-20b的P19细胞系,与空载体组相比,miR-20b过表达可抑制P19细胞的增殖,促进心肌分化相关标志基因的表达(P<0.05,P<0.01或P<0.001)。结论 miR-20b过表达可显著抑制P19细胞的增殖,并具有促进P19细胞向心肌细胞分化的作用。 展开更多

关键词 P19细胞 mir-20b 细胞增殖 心肌分化

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miR-20b在乳腺癌的表达及对乳腺癌细胞增殖的影响 被引量：1

10

作者 唐炜 叶熹罡 +4 位作者 潘凌霄 高进 陈伦 张晓申 郑文博 《岭南现代临床外科》 2016年第4期391-396,共6页

目的观察miRNA-20b(mi R-20b)在乳腺癌组织中的表达情况和对乳腺癌细胞株生长凋亡的影响。方法运用实时定量RT-PCR检测134例乳腺浸润性导管癌组织miR-20b的表达,并与临床病理资料和生存时间进行相关分析;瞬时转染miR-20b抑制物到乳腺癌... 目的观察miRNA-20b(mi R-20b)在乳腺癌组织中的表达情况和对乳腺癌细胞株生长凋亡的影响。方法运用实时定量RT-PCR检测134例乳腺浸润性导管癌组织miR-20b的表达,并与临床病理资料和生存时间进行相关分析;瞬时转染miR-20b抑制物到乳腺癌细胞中,CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况。结果miR-20b在乳腺癌组织中表达量明显高于癌旁组织(P<0.001)。其表达与肿瘤大小、远处转移情况及Ki67表达相关(P<0.001)。miR-20b高表达组病人的无病生存期(DFS)和总生存期(OS)短于低表达组(P<0.05)。转染miR-20b抑制物后,细胞增殖减弱(P<0.05),凋亡增强(P<0.05)。结论乳腺癌组织中miR-20b表达与乳腺癌预后相关,可作为乳腺癌恶性程度的预测指标。 展开更多

关键词 乳腺癌:实时定量RT—PCR mir-20b

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miR-20b对卵巢癌细胞迁移和侵袭的影响及其机制 被引量：2

11

作者 王政 王芳 《临床与病理杂志》 2017年第12期2530-2535,共6页

目的:研究miR-20b在卵巢癌细胞系中的表达及其对迁移和侵袭的影响。方法:采用qRT-PCR检测卵巢癌细胞系HO8910,A2780,SKOV3与正常卵巢细胞系Hose中miR-20b的表达水平。将A2780细胞系分成两组,miR-20b模拟物组和阴性对照组,分别转染miR-20... 目的:研究miR-20b在卵巢癌细胞系中的表达及其对迁移和侵袭的影响。方法:采用qRT-PCR检测卵巢癌细胞系HO8910,A2780,SKOV3与正常卵巢细胞系Hose中miR-20b的表达水平。将A2780细胞系分成两组,miR-20b模拟物组和阴性对照组,分别转染miR-20b mimics和阴性对照质粒;细胞划痕实验和Transwel l实验分别测定两组细胞迁移和侵袭能力,qRT-PCR和Western印迹分别测定两组血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)mRNA和蛋白表达水平。结果:miR-20b在卵巢癌细胞系HO8910,A2780,SKOV3中低表达,分别为0.30±0.05,0.23±0.03及0.10±0.02,显著低于Hose细胞系的1.00±0.03(P<0.001)。miR-20b模拟物组划痕愈合率为23.20%±3.50%,阴性对照组为65.70%±8.30%,miR-20b模拟物组划痕愈合率显著低于阴性对照组(P<0.01)。miR-20b模拟物组侵袭细胞数为(21.3±4.5)个,阴性对照组为(73.5±6.7)个,miR-20b模拟物组侵袭细胞数显著少于阴性对照组(P<0.01)。miR-20b模拟物组VEGF mRNA相对表达量为0.30±0.02,而阴性对照组为1.00±0.05,miR-20b模拟物组VEGF mRNA表达量显著低于阴性对照组(P<0.001)。miR-20b模拟物组VEGF蛋白表达量为118.00±8.00,显著低于阴性对照组的180.00±5.90(P<0.05)。结论:miR-20b在卵巢癌细胞系中低表达,过表达miR-20b抑制卵巢癌细胞转移与侵袭,可能通过下调VEGF发挥抑癌作用。 展开更多

关键词 mir-20b 卵巢癌 转移 侵袭 血管内皮细胞生长因子

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缺血性脑卒中患者血清PTX3、miR-20b、miR-199a水平与神经功能缺损程度及侧支循环形成的关系 被引量：11

12

作者 郑力 黎玉环 +4 位作者 熊光润 李敏 陈书科 李寅珍 郑永强 《热带医学杂志》 CAS 2020年第1期77-81,共5页

目的观察缺血性脑卒中患者血清五聚素3(PTX3)、miR-20b、miR-199a表达水平,并探讨三者与神经功能缺损程度及侧支循环形成的关系。方法选取2015年9月-2018年6月宜昌市第二人民医院神经内科收治的71例急性脑卒中患者作为研究对象,根据ASIT... 目的观察缺血性脑卒中患者血清五聚素3(PTX3)、miR-20b、miR-199a表达水平,并探讨三者与神经功能缺损程度及侧支循环形成的关系。方法选取2015年9月-2018年6月宜昌市第二人民医院神经内科收治的71例急性脑卒中患者作为研究对象,根据ASITN/SIR血流分级将患者分为侧支循环良好组35例与侧支循环不良组36例,选取同期医院体检正常者33人作为对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测研究对象血清PTX3水平,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-20b、miR-199a表达水平,所有患者根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分进行神经功能缺损程度评估(<4分为轻型组,21例;4~15分为中型组,24例;>15分为重型组,26例)。结果随病情加重,患者PTX3、miR-20b水平和NIHSS评分均升高,miR-199a水平降低(P<0.05);Pearson分析显示,血清PTX3、miR-20b水平与NIHSS评分呈正相关(r=0.704,0659;P=0.002,0.001),血清miR-199a水平与NIHSS评分呈负相关(r=-0.693,P=0.001)。与对照组比较,侧支循环良好组血清PTX3水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);侧支循环不良组血清PTX3、miR-20b水平显著升高,miR-199a水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与侧支循环良好组比较,侧支循环不良组血清PTX3、miR-20b水平显著升高,miR-199a水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。侧支循环良好组ROC曲线显示,血清PTX3、miR-20b、miR-199a水平预测缺血性脑卒中患者侧支循环良好曲线下面积分别为0.861(敏感度为77.8%,特异性为88.6%)、0.863(敏感度为88.9%,特异性为86.7%)、0.837(敏感度为91.4%,特异性为71.2%)。结论缺血性脑卒中患者血清PTX3、miR-20b高表达,miR-199a低表达,且三者均能反应缺血性脑卒中病情程度,可作为判别侧支循环良好与否的生物学指标。 展开更多

关键词 缺血性脑卒中 五聚素3 mir-20b mir-199a 神经功能缺损 侧支循环

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川芎嗪和过表达miR-20b-5p干预早期膝骨关节炎模型大鼠滑膜、软骨和软骨下骨血管新生的组织学变化 被引量：26

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作者 谢平金 罗臻 +3 位作者 卢启贵 郭艳幸 陈群群 李飞龙 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第2期237-245,共9页

背景:血管新生参与早期膝骨关节炎进展,滑膜、软骨及软骨下骨均具有血管新生病理表现,探讨川芎嗪和过表达miR-20b-5p对这些组织病理性血管新生的抑制能力及相关作用途径,有助于开发新的早期膝骨关节炎治疗药物。目的:通过组织学观察探... 背景:血管新生参与早期膝骨关节炎进展,滑膜、软骨及软骨下骨均具有血管新生病理表现,探讨川芎嗪和过表达miR-20b-5p对这些组织病理性血管新生的抑制能力及相关作用途径,有助于开发新的早期膝骨关节炎治疗药物。目的:通过组织学观察探讨川芎嗪和过表达miR-20b-5p对早期膝骨关节炎大鼠滑膜、软骨及软骨下骨血管新生的影响及可能发挥作用的途径。方法:将25只SD大鼠进行早期膝骨关节炎造模,造模成功后分5组,每组5只:A组膝关节腔注射与灌胃给予生理盐水,B组膝关节腔注射agomir NC,C组膝关节腔注射miR-20b-5p agomir,D组灌胃给予川芎嗪+膝关节腔注射agomir NC,E组灌胃给予川芎嗪+膝关节腔注射miR-20b-5p agomir,膝关节腔注射为单次给药,灌胃给药为1次/d,连续灌胃4周。4周后处死大鼠,取完整左膝关节制作石蜡切片,进行苏木精-伊红染色、番红O-固绿染色与免疫组织化学染色。结果与结论:①滑膜组织:苏木精-伊红染色与免疫组化染色显示,C、D、E组的血管密度、炎症细胞浸润程度及血管内皮生长因子蛋白、Notch1蛋白表达均低于A、B组(P<0.05),E组血管密度、炎症细胞浸润程度及血管内皮生长因子蛋白、Notch1蛋白表达低于C、D组(P<0.05);②软骨及软骨下骨组织:苏木精-伊红染色、番红O-固绿染色与免疫组织化学染色显示,C、D、E组的软骨基质流失程度及血管侵袭情况轻于A、B组,C、D、E组的骨关节炎软骨组织病理学评分及血管内皮生长因子蛋白、Notch1蛋白表达均低于A、B组(P<0.05),E组的骨关节炎软骨组织病理学评分及血管内皮生长因子蛋白、Notch1蛋白表达低于C、D组(P<0.05);③结果表明,在早期膝骨关节炎大鼠滑膜、软骨及软骨下骨中,川芎嗪和过表达miR-20b-5p可能通过抑制血管内皮生长因子/Notch1信号通路介导的血管新生在一定程度上改善多方面的组织学表现,抑制早期膝骨关节炎的进展。 展开更多

关键词 膝骨关节炎 川芎嗪 mir-20b-5p 血管内皮生长因子 Notch 血管新生

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miR-20b-5p与TGFBR2在宫颈癌组织中的表达及意义 被引量：3

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作者 汪莹 申复进 +3 位作者 李洋 冯丹 刘婷婷 廖文欣 《河北医药》 CAS 2023年第7期1006-1010,共5页

目的通过分析miR-20b-5p、TGFBR2在宫颈癌组织中的表达水平及与临床病理特征的关系,探讨miR-20b-5p与TGFBR2在宫颈癌转移中的作用。方法选取2018年1月至2020年10月诊治的58例宫颈癌患者为宫颈癌组,选取同期32例因子宫肌瘤或子宫腺肌症... 目的通过分析miR-20b-5p、TGFBR2在宫颈癌组织中的表达水平及与临床病理特征的关系,探讨miR-20b-5p与TGFBR2在宫颈癌转移中的作用。方法选取2018年1月至2020年10月诊治的58例宫颈癌患者为宫颈癌组,选取同期32例因子宫肌瘤或子宫腺肌症行全子宫切除术患者的正常宫颈组织为对照组。RT-PCR检测2组宫颈组织中miR-20b-5p、TGFBR2 mRNA表达情况,免疫组化及Western blot检测宫颈癌组织中TGFBR2蛋白表达情况,通过在线网站预测miR-20b-5p与TGFBR2的靶向结合位点,并分析两者相关性,讨论两者其在宫颈癌组中表达差异与临床病理特征的关系。结果宫颈癌组中miR-20b-5p表达量显著高于对照组(P<0.01),而宫颈癌组中TGFBR2 mRNA表达量显著低于对照组(P<0.01)。免疫组化及Western blot结果进一步证实TGFBR2在宫颈癌组中表达水平显著低于对照组(P<0.01)。miR-20b-5p表达水平与TGFBR2 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.7366,P<0.01)。且miR-20b-5p表达水平与宫颈癌患者的FIGO分期、淋巴结转移相关(P<0.05),与年龄、病理类型、分化程度、肿瘤大小无相关性(P>0.05);TGFBR2表达与宫颈癌患者的分化程度、FIGO分期、淋巴结转移相关(P<0.05),与年龄、病理类型、肿瘤大小无相关性(P>0.05)。结论miR-20b-5p与TGFBR2的异常表达可能参与了宫颈癌的发生发展,且两者存在密切联系,可能作为宫颈癌淋巴转移和预后的标志物。 展开更多

关键词 mir-20b-5p TGbFR2 宫颈癌 治疗结果

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MiR-20b直接靶向3’-UTR调控HIF-1α表达 被引量：1

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作者 王贺龙 罗玉岚 +4 位作者 陶象男 汪忆梦 何晶 郭术俊 宋传旺 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期657-661,共5页

目的:探讨微小RNA-20b(micro RNA-20b/miR-20b)是否直接靶向低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)信使RNA的3’-非编码区(3’-untranslated region,3’-UTR)调控其基因表达。方法:采用Target Scan和miRanda算法预测H... 目的:探讨微小RNA-20b(micro RNA-20b/miR-20b)是否直接靶向低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)信使RNA的3’-非编码区(3’-untranslated region,3’-UTR)调控其基因表达。方法:采用Target Scan和miRanda算法预测HIF-1α3’-UTR区是否存在miR-20b的配对序列;构建并鉴定表达HIF-1α3’-UTR的双荧光素酶基因报告系统(pmiRRB-ReportTM-HIF-1α3’-UTR),将重组质粒(recombinant plasmid,RP)与mimics-miR-20b(M)或NC-miR-20b(N)共转染He La细胞,本研究共分为RP、RP+M、RP+N、P、P+M和P+N六组,24 h后检测各组双荧光素酶活性的比值。结果:HIF-1α3’-UTR区存在miR-20b配对区域;成功构建了含HIF-1α3’-UTR序列的双荧光素酶基因报告载体;重组质粒与mimics-miR-20b共转染的He La细胞荧光素酶活性明显低于其他对照组(P=0.022)。结论:miR-20b可以直接靶向结合HIF-1α3’-UTR区负向调控其表达。 展开更多

关键词 低氧诱导因子 3’-非编码区 mir-20b 双荧光素酶基因报告系统

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miR-20b直接靶向3′-UTR负性调节VEGF的表达 被引量：4

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作者 陶象男 汪忆梦 宋传旺 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期22-26,共5页

目的探讨miR-20b是否直接靶向VEGF 3′-非编码区(3′-UTR)而调控其表达。方法采用miRanda软件预测VEGF 3′-UTR是否存在miR-20b的结合位点;使用PCR方法扩增RAW264.7细胞VEGF基因3′-UTR序列,经双酶切后克隆到pmiR-RB-Report^(TM)质粒海... 目的探讨miR-20b是否直接靶向VEGF 3′-非编码区(3′-UTR)而调控其表达。方法采用miRanda软件预测VEGF 3′-UTR是否存在miR-20b的结合位点;使用PCR方法扩增RAW264.7细胞VEGF基因3′-UTR序列,经双酶切后克隆到pmiR-RB-Report^(TM)质粒海肾荧光素酶的下游,得到pmiR-RB-Report TM-VEGF 3′-UTR双荧光素酶重组质粒,使用电泳法和测序法进行验证;将重组质粒或空质粒与miR-20b模拟物或其对照共转染HeLa细胞,24h后检测相应荧光素酶活性。结果 VEGF 3′-UTR存在miR-20b的结合位点;获得了含VEGF 3′-UTR的双荧光素酶报告载体;重组质粒与miR-20b模拟物共转染组HeLa细胞的荧光素酶活性明显低于空质粒转染组(P<0.05)。结论成功构建小鼠VEGF基因3′-UTR双荧光素酶报告载体,miR-20b可以直接靶向VEGF 3′-UTR而负性调控其表达。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 3′-非编码区 mir-20b 双荧光素酶报告载体

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miR-20a-5p/miR-20b-5p在胃癌细胞和组织中的表达及调控靶基因信号通路富集分析 被引量：10

17

作者 李海龙 宋耀辉 +5 位作者 陈兆峰 王晶 田一虹 王圆圆 陈彻 牛媛瑕 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第11期822-827,共6页

目的观察miR-20a-5p/miR-20b-5p在胃癌细胞和胃癌组织中的表达,并用生物信息学方法分析其靶基因和富集的信号通路,探讨其生物学行为和功能。方法采用实时荧光定量PCR法检测miR-20a-5p/miR-20b-5p在不同分化程度(高、中、低)的胃癌细胞... 目的观察miR-20a-5p/miR-20b-5p在胃癌细胞和胃癌组织中的表达,并用生物信息学方法分析其靶基因和富集的信号通路,探讨其生物学行为和功能。方法采用实时荧光定量PCR法检测miR-20a-5p/miR-20b-5p在不同分化程度(高、中、低)的胃癌细胞和正常胃黏膜细胞以及其在胃癌组织和癌旁组织中的表达水平,并分析其临床意义,采用mir WALK网站数据库的预测软件预测其靶基因,选择该网站10个软件中具备3个以上软件支持的靶基因,用DAVID 6.7在线富集其靶基因参与的信号通路。结果 miR-20a-5p/miR-20b-5p在不同分化程度(高、中、低)的胃癌细胞中表达上调(P均<0.05),胃癌组织相对于癌旁组织亦明显上调表达(P<0.05),miR-20b-5p表达上调与胃癌淋巴结侵袭转移以及浸润深度关系密切(P均<0.05);生物信息学分析提示,miR-20a-5p/miR-20b-5p的靶基因富集存在于肿瘤相关的多个信号通路中。结论 miR-20a-5p/miR-20b-5p在胃癌细胞系及组织中呈高表达,并于与淋巴结侵袭转移以及浸润深度有关,可作为胃癌潜在的生物学标志物。 展开更多

关键词 mir-20a-5p mir-20b-5p 胃癌

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非酒精性脂肪性肝病合并2型糖尿病患者外周血miR-17、miR-20a和miR-20b变化及其临床意义 被引量：3

18

作者 葛海燕 匡霞 周瑞君 《实用肝脏病杂志》 CAS 2021年第5期697-700,共4页

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)合并2型糖尿病(T2DM)患者外周血miR-17、miR-20a和miR-20b变化及其临床意义。方法2018年12月~2020年6月我院收治的T2DM患者46例和NAFLD合并T2DM患者50例(轻度19例、中度17例和重度14例)。采用实时荧... 目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)合并2型糖尿病(T2DM)患者外周血miR-17、miR-20a和miR-20b变化及其临床意义。方法2018年12月~2020年6月我院收治的T2DM患者46例和NAFLD合并T2DM患者50例(轻度19例、中度17例和重度14例)。采用实时荧光定量RT-PCR法检测血清miR-17、miR-20a和miR-20b mRNA水平。采用多因素Logistic回归分析NAFLD合并T2DM发生的独立危险因素,应用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)分析各指标诊断严重NAFLD的效能。结果NAFLD合并T2DM患者外周血miR-17、miR-20a和miR-20b mRNA水平分别为(5.6±1.3)、(3.8±0.9)和(1.8±0.5),显著高于T2DM患者【分别为(4.4±1.1)、(3.1±0.6)和(1.4±0.4),P<0.05】;重度NAFLD组血清miR-17、miR-20a和miR-20b mRNA水平分别为(6.0±1.1)、(4.0±0.8)和(1.9±0.5),显著高于中度患者【分别为(4.4±1.0)、(3.4±0.6)和(1.5±0.4),P<0.05】或轻度患者【分别为(4.1±0.6)、(2.8±0.8)和(1.2±0.3),P<0.05】;多因素Logistic回归分析显示,BMI、血清LDL-C、miR-17、miR-20a和miR-20b是NAFLD合并T2DM发生的独立危险因素(P<0.05);ROC分析结果显示,血清miR-17、miR-20a和miR-20b诊断严重NAFLD的AUC分别为0.75、0.74和0.70。结论NAFLD合并T2DM患者外周血miR-17、miR-20a和miR-20b水平显著升高,可能参与了NAFLD的发病过程,对判断NAFLD的严重程度具有一定的意义。 展开更多

关键词 非酒精性脂肪肝病 2型糖尿病 mir-17 mir-20a mir-20b 诊断

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子宫内膜异位症患者内膜中miR-20b-5p、miR-106a-5p的表达及机制探讨 被引量：4

19

作者 张倩 顾成磊 +2 位作者 叶明侠 张哲 孟元光 《解放军医学院学报》 CAS 2018年第10期915-918,共4页

目的检测miR-20b-5p、miR-106a-5p、PTEN mRNA、CCNE1 mRNA在正常子宫内膜(N)、子宫内膜异位症(endometriosis,EM)患者在位内膜(eutopic endometrial,Eu)、子宫内膜异位症患者异位内膜(ectopic endometrial,Ec)组织中的表达,并探讨miR-2... 目的检测miR-20b-5p、miR-106a-5p、PTEN mRNA、CCNE1 mRNA在正常子宫内膜(N)、子宫内膜异位症(endometriosis,EM)患者在位内膜(eutopic endometrial,Eu)、子宫内膜异位症患者异位内膜(ectopic endometrial,Ec)组织中的表达,并探讨miR-20b-5p、miR-106a-5p对子宫内膜异位症细胞增殖与凋亡的影响。方法选择2017年5月-2018年5月在本院妇产科行腹腔镜手术及术后病理检查确诊的EM患者30例,年龄(32.4±6.2)岁,对照组选择同期行腹腔镜子宫肌瘤剔除术的患者30例,年龄(36.35±5.89)岁。采用qRT-PCR法检测Eu(n=30)、Ec(n=37)以及N(n=30)组织中miR-20b-5p、miR-106a-5p、PTEN mRNA、CCNE1 mRNA的表达,并用Pearson相关检验分析miR-20b-5p、miR-106a-5p与PTEN mRNA、CCNE1 mRNA的相关性。结果 Ec与Eu相比,miR-20b-5p、miR-106a-5p表达下降(P <0.001),PTEN mRNA的表达上升(P <0.001),CCNE1 mRNA的表达下降(P=0.005);Eu与N相比,miR-20b-5p表达上升(P=0.038),PTEN表达下降(P=0.049),miR-106a-5p及CCNE1的表达未见明显差异(P> 0.05);miR-20b-5p与PTEN mRNA在Eu及Ec中的表达呈负相关(r=-0.63,P <0.001;r=-0.42,P=0.01);mi R-106a-5p与PTEN mRNA的表达在Eu(r=-0.14,P=0.465)及Ec(r=-0.25,P=0.142)中不存在相关性。结论 miR-20b-5p可能通过PTEN上调细胞增殖,促进EM的发病。 展开更多

关键词 微小RNA-20b-5p 微小RNA-106a-5p PTEN 细胞周期蛋白E1 子宫内膜异位症

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人肝癌组织中miR-20b的表达水平及其与临床病理关系 被引量：2

20

作者 刘忆华 成善泉 +1 位作者 郑安斌 罗燕 《肝脏》 2017年第3期250-252,共3页

目的检测人肝癌组织中miR-20b的表达水平,分析miR-20b的表达与临床病理参数的关系,探究miR-20b的临床意义。方法收集本院肝癌组织标本80例,正常肝组织80例,分别作为实验组和对照组,提取肝癌组织及正常组织中的总RNA,并逆转录合成cDNA;通... 目的检测人肝癌组织中miR-20b的表达水平,分析miR-20b的表达与临床病理参数的关系,探究miR-20b的临床意义。方法收集本院肝癌组织标本80例,正常肝组织80例,分别作为实验组和对照组,提取肝癌组织及正常组织中的总RNA,并逆转录合成cDNA;通过RT-PCR(Real Time PCR)分别检测实验组和对照组中miR-20b的表达水平,然后以miR-20b在实验组的表达水平为依据,将肝癌患者分为低表达组以及高表达组,并运用SPSS软件分析miR-20b的表达水平与肝癌患者临床病理参数的关系。结果与对照组相比,在实验组中大部分肝癌组织中的miR-20b的表达显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。虽然miR-20b的表达与肿瘤大小、年龄、性别以及肿瘤的分级无相关性,但是miR-20b的表达与肿瘤的复发(P<0.05)及转移(P<0.05)却紧密相关。提示当判断肝癌患者的预后情况时,miR-20b的表达水平可作为一项独立的预测因子。结论 miR-20b在肝脏组织中的表达与肿瘤的转移以及复发紧密相关,因此可将miR-20b的表达水平作为一个预测指标,判断肝癌患者的预后情况。 展开更多

关键词 人肝癌组织 mir-20b 表达水平 病理参数

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