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替代LUC系统的一种新公钥系统 被引量：2
1
作者 陈小松 唐勇民 《通信学报》 EI CSCD 北大核心 2006年第3期124-128,共5页
新公钥系统是利用Dickson的另外两类多项式,替代生成LUC系统的Lucas序列,利用一个新的算法构造的公钥系统。与LUC系统相比,新公钥系统具有相同的安全性,但是计算量减少,效率相对提高,比LUC系统实用性更强。
关键词 公钥密码 Dickson多项式 luc公钥 lucAS序列
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一种在LUC基础上改进的密码体制及其安全性分析
2
作者 杜珍珍 周同 陆正福 《延安职业技术学院学报》 2022年第2期106-108,共3页
在LUC与RSA密码体制的基础上进行研究改进,进而设计H-LUC密码体制,该密码体制既满足不具有乘法封闭性的LUC密码体制的特性,又满足RSA密码体制的运算性质。同时,文章给出了其安全性的分析与证明。
关键词 luc密码体制 H-luc密码体制 安全性分析
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基于夜间灯光与LUC数据的川渝地区人口空间化研究 被引量：64
3
作者 胡云锋 赵冠华 张千力 《地球信息科学学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期68-78,共11页
高精度的人口空间分布数据是开展小尺度人口活动变化规律研究的关键数据。夜间遥感影像对于反映人类社会活动具有独特的能力,因而被广泛的应用于社会经济领域的空间数据挖掘。本研究以DMSP/OLS夜间灯光数据、NPP/VIIRS夜间灯光数据、常... 高精度的人口空间分布数据是开展小尺度人口活动变化规律研究的关键数据。夜间遥感影像对于反映人类社会活动具有独特的能力,因而被广泛的应用于社会经济领域的空间数据挖掘。本研究以DMSP/OLS夜间灯光数据、NPP/VIIRS夜间灯光数据、常住人口统计数据、土地利用数据为数据源,在县级尺度上建立逐步回归模型,构建川渝地区人口空间分布数据;并随机抽取研究区内500个乡镇,以常住人口统计数据为真实数据,对人口空间化结果进行精度检验。结果表明:(1)2种夜间灯光数据与人口均有较高的相关性,相关系数均在0.76以上,NPP/VIIRS夜间灯光数据与人口的相关性要高于DMSP/OLS,且受拟合模型的影响不大。(2)与人口相关性较高的土地利用类型有多种,耕地、林地对人口空间分布也有影响,在建模时不应只考虑建成区。(3)在2种夜间灯光数据分别与土地利用与土地覆被数据(Land Use/Land Cover,LUC)结合时,使用DMSP/OLS夜间灯光数据和NPP/VIIRS夜间灯光数据得到的逐步回归模型的复相关系数R2分别为0.796、0.817,模型拟合率较高,而基于NPP/VIIRS夜间灯光数据得到的人口空间化结果分辨率(500 m)相比DMSP/OLS提高了一倍(1 km),中心城区与周边城区人口密度变化更加自然,更符合实际人口分布情况。(4)与LUC数据结合时,使用NPP/VIIRS夜间灯光数据得到的人口空间化结果精度要高于DMSP/OLS夜间灯光数据,表明NPP/VIIRS夜间灯光数据相比DMSP/OLS更适用于人口数据空间化研究。 展开更多
关键词 DMSP/OLS NPP/VIIRS 人口模拟 逐步回归 luc
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VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒筛选抗HIV-1药物的条件优化及应用 被引量：4
4
作者 王萍 陈欢 +3 位作者 罗荣华 卿晨 张高红 郑永唐 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期433-438,共6页
目的建立并优化VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒筛选抗HIV药物药效模型。方法参照Promega公司的荧光素酶活性分析系统,比较VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc对4种不同细胞的感染力。通过采用3种不同实验条件对不同类型HIV-1上市药物进行活性评价,进... 目的建立并优化VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒筛选抗HIV药物药效模型。方法参照Promega公司的荧光素酶活性分析系统,比较VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc对4种不同细胞的感染力。通过采用3种不同实验条件对不同类型HIV-1上市药物进行活性评价,进一步验证了该模型的可行性与有效性。最后,应用该系统对特定靶点化合物进行筛选,并与HIV-1_(ⅢB)病毒筛选体系所得结果进行比较。结果 VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc对CRFK细胞的感染力最强,报告基因的表达水平与加入的病毒量呈剂量依赖关系。比较3种实验条件下不同阳性药物抑制VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc的半数有效剂量浓度EC50,发现第3种条件最优。而用该假病毒对合成化合物进行筛选,发现其EC50与病毒HIV-1_(ⅢB)所得EC_(50)基本一致。结论成功建立并优化了基于VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒的抗HIV药物筛选系统。 展开更多
关键词 VSVG/HIV-1NL4-3luc HIV 药物筛选 阳性药物 优化 应用
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基于LUC密码体制的广义秘密共享方案 被引量：7
5
作者 张建中 李文敏 《计算机工程》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期162-163,共2页
给出一个安全性基于LUC密码体制的广义秘密共享方案,其中,每个参与者的私钥即为其子秘密,在秘密分发者和参与者之间不需要维护一条安全信道,降低了系统的代价。秘密恢复过程中,每位参与者都能够验证其他参与者是否进行了欺骗,并且只需... 给出一个安全性基于LUC密码体制的广义秘密共享方案,其中,每个参与者的私钥即为其子秘密,在秘密分发者和参与者之间不需要维护一条安全信道,降低了系统的代价。秘密恢复过程中,每位参与者都能够验证其他参与者是否进行了欺骗,并且只需维护一个子秘密,就可以实现对多个秘密的共享。 展开更多
关键词 广义秘密共享 luc密码体制 接入结构 授权子集
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GFP和Luc双标技术在小鼠肿瘤模型建立中的应用 被引量：8
6
作者 王晓敏 闫明霞 +4 位作者 梁琳慧 李金枝 朱淼鑫 吴一迁 姚明 《实验动物与比较医学》 CAS 2010年第1期2-7,共6页
目的建立GFP（绿色荧光蛋白）／Luc（荧光素酶）双标高效表达的人肺癌细胞系和人肝癌细胞系，利用活体成像系统观察裸小鼠肺原位移植瘤和肝原位移植瘤的生长情况。方法应用慢病毒转染的方法建立GFP／Luc双标的SPC-A-1和SMMC-7721细胞系... 目的建立GFP（绿色荧光蛋白）／Luc（荧光素酶）双标高效表达的人肺癌细胞系和人肝癌细胞系，利用活体成像系统观察裸小鼠肺原位移植瘤和肝原位移植瘤的生长情况。方法应用慢病毒转染的方法建立GFP／Luc双标的SPC-A-1和SMMC-7721细胞系，结合流式细胞分选技术使GFP／Luc双标表达率接近100％，分别接种于裸小鼠肺原位和肝原位，采用活体成像技术监测各稳定转染细胞在小鼠体内深部组织的表达情况。结果成功建立了GFP／Luc双标表达率接近100％的SPC-A-1-GFP／LHC和SMMC-7721-GFP／Ltic细胞系，进行裸小鼠肺原位移植和肝原位移植后，应用活体成像系统观测到裸小鼠肺原位和肝原位早期的微小病灶和晚期移植瘤的生长情况，而且，随着肿瘤移植时间的延长，移植瘤体积的增大，活体成像检测到的发光面积逐渐增大，发光强度也逐渐增加。结论所建立的稳定表达GFP／Luc的细胞系，结合活体成像技术，能够对动物模型深部的肿瘤病灶进行活体、实时、定量检测，且灵敏度极高，为进一步研究肿瘤的发生及发展提供了理想的技术手段。 展开更多
关键词 GFP/luc双标 慢病毒载体 活体成像系统 裸小鼠 肿瘤模型
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基于LUC密码体制的(t,n)门限秘密共享方案 被引量：6
7
作者 庞辽军 王育民 《西安电子科技大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第6期927-930,共4页
基于LUC密码体制提出了一个(t,n)门限秘密共享方案,使用参与者的私钥作为他们的秘密份额,秘密分发者不需要进行秘密份额的分配.秘密份额的长度小于或等于秘密的长度.在秘密重构过程中,每个合作的参与者只需提交一个由秘密份额计算的伪份... 基于LUC密码体制提出了一个(t,n)门限秘密共享方案,使用参与者的私钥作为他们的秘密份额,秘密分发者不需要进行秘密份额的分配.秘密份额的长度小于或等于秘密的长度.在秘密重构过程中,每个合作的参与者只需提交一个由秘密份额计算的伪份额,且任何人都能够立即检验每个合作的参与者是否进行了欺骗.该方案可用来共享任意多个秘密,而不必修改各参与者的秘密份额.方案的安全性是基于LUC密码体制和Sham ir的(t,n)门限方案的安全性. 展开更多
关键词 秘密共享 门限方案 luc密码体制
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活体生物发光示踪术观察中国被毛孢抑制小鼠4T1-luc乳腺癌肺转移作用 被引量：3
8
作者 傅惠英 屠珏 +3 位作者 凌云 张利棕 寿旗扬 陈民利 《浙江中医药大学学报》 CAS 2013年第2期121-124,共4页
[目的]利用活体生物发光成像技术,探讨中国被毛孢菌丝体对小鼠乳腺癌肺转移的影响。[方法]4T1-luc乳腺癌细胞原位接种于50只BALB/c小鼠2周后,取40只荷瘤小鼠,分成4组,即模型组(10mL.kg-1NS)、HSM低剂量组(1.0g.kg-1HSM)、HSM高剂量组(2.... [目的]利用活体生物发光成像技术,探讨中国被毛孢菌丝体对小鼠乳腺癌肺转移的影响。[方法]4T1-luc乳腺癌细胞原位接种于50只BALB/c小鼠2周后,取40只荷瘤小鼠,分成4组,即模型组(10mL.kg-1NS)、HSM低剂量组(1.0g.kg-1HSM)、HSM高剂量组(2.0g.kg-1HSM)、阳性组(20mg.kg-1CTX),每组10只,连续给药21d;测定各组小鼠原位肿瘤体积和重量,并用活体生物发光成像仪观察各组小鼠乳腺癌肺转移情况。[结果]小鼠灌胃给予1.0g.kg-1、2.0g.kg-1HSM后,原位肿瘤体积和重量明显降低(P<0.05,P<0.01),原位肿瘤抑瘤率分别为22.92%和32.50%;给予2.0g.kg-1HSM的小鼠乳腺癌肺转移明显减少(P<0.01),乳腺癌肺转移的抑制率为51.77%。[结论]中国被毛孢菌丝体具有较好的抑制小鼠乳腺癌肺转移作用。 展开更多
关键词 中国被毛孢菌丝体 4T1-luc乳腺癌 肺转移 生物发光示踪术
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视黄酸和α-干扰素对带有视黄酸反应元件的LUC报告基因表达的调控作用 被引量：1
9
作者 张乾勇 糜漫天 +1 位作者 程天民 韦娜 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期249-251,共3页
目的　探讨视黄酸 (Retinoicacid ,RA)通过视黄酸反应元件 (RARE)调控外源基因表达的可行性。方法　构建带有视黄酸受体 β(RARβ)基因增强子区域RARE的荧光素酶 (Luciferase ,LUC)报告基因表达载体 ,应用脂质体包裹RARE TK LUC和RARE3 ... 目的　探讨视黄酸 (Retinoicacid ,RA)通过视黄酸反应元件 (RARE)调控外源基因表达的可行性。方法　构建带有视黄酸受体 β(RARβ)基因增强子区域RARE的荧光素酶 (Luciferase ,LUC)报告基因表达载体 ,应用脂质体包裹RARE TK LUC和RARE3 TK LUC质粒 ,并转染HL 60细胞 ,48h后 ,用RA和 /或α 干扰素 (IFNα)处理不同时间 ,用LUC报告基因检测试剂盒分析LUC报告基因活性。结果　经RA处理不同时间后 ,RARE TK LUC和RARE3 TK LUC质粒转染细胞的LUC相对活性分别较未经处理的转染细胞增加 12～ 3 8和 2 0～ 85倍 ;单用IFNα处理转染细胞 ,对LUC的表达无明显的诱导作用 ;IFNα和RA联合处理 48、72h ,LUC相对活性比单用RA处理增加 60 %～ 70 %。结论　RA可调控带有RARE的LUC报告基因的表达 。 展开更多
关键词 视黄酸 Α-干扰素 视黄酸反应元件 荧光素酶报告基因 luc 调控作用
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基于LUC密码体制的多重秘密共享方案 被引量：1
10
作者 张建中 张艺林 《计算机工程》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期116-117,共2页
基于LUC密码体制提出一种(t,n)门限多重秘密共享方案,各参与者的秘密份额是其私钥,秘密分发者不需要向各参与者传送任何秘密信息。在秘密重构过程中,参与者提交的仅仅是秘密份额的伪份额,各参与者可以相互验证伪份额的有效性。每个参与... 基于LUC密码体制提出一种(t,n)门限多重秘密共享方案,各参与者的秘密份额是其私钥,秘密分发者不需要向各参与者传送任何秘密信息。在秘密重构过程中,参与者提交的仅仅是秘密份额的伪份额,各参与者可以相互验证伪份额的有效性。每个参与者只需维护一个秘密份额就可以一次共享多个秘密或者多次共享秘密。 展开更多
关键词 luc密码体制 秘密共享 门限方案 多重秘密共享
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细胞因子诱导的杀伤细胞对人宫颈癌HeLa-luc细胞荷瘤裸鼠模型的抗肿瘤作用 被引量：1
11
作者 白引苗 张超 +1 位作者 单保恩 艾军 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2009年第11期825-828,共4页
目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)抗肿瘤活性,及其作用机制。方法:人宫颈癌细胞HeLa-luc接种BALB/C裸鼠建立动物模型。从健康人外周血单个核细胞诱导培养CIK细胞。CIK或PBS经瘤周注射入荷瘤鼠体内。应用活体生物发光成像技术观察... 目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)抗肿瘤活性,及其作用机制。方法:人宫颈癌细胞HeLa-luc接种BALB/C裸鼠建立动物模型。从健康人外周血单个核细胞诱导培养CIK细胞。CIK或PBS经瘤周注射入荷瘤鼠体内。应用活体生物发光成像技术观察肿瘤大小变化。观察肿瘤的体积和重量变化。ELISA法检测荷瘤鼠外周血中IFN-γ水平。HE染色观察肿瘤、肺脏、肝脏及脾脏的病理形态学变化。结果:CIK治疗后实验组(CIK)肿瘤明显比对照组(PBS)体积小,P<0.05。接种HeLa-luc细胞第5、8周的抑瘤率分别为47.18%、64.38%。接种HeLa-luc细胞第8周实验组血清中IFN-γ〔(61.92±6.49)ρg/mL〕明显高于对照组〔(34.30±1.78)ρg/mL〕,P<0.01。实验组和对照组中,肿瘤组织形态学无明显差别。实验组肺脏、肝脏未见癌结节出现,但均有炎细胞浸润。对照组肺脏出现大量癌结节而肝脏未见癌结节出现。两组脾脏中均可见癌结节。结论:CIK细胞可以明显抑制肿瘤的生长,其机制可能与免疫细胞产生IFN-γ有关。该研究为肿瘤的临床过继免疫治疗提供了理论依据。 展开更多
关键词 杀伤细胞 淋巴因子激活 HeLa-lucc细胞 宫颈肿瘤 活体生物发光成像技术
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B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞生物学特性的研究 被引量：2
12
作者 苏云术 周鸿敏 徐利军 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第10期2169-2173,共5页
目的:探讨B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞的生物学特性。方法:倒置荧光显微镜下连续观察B16-F10-luc-G5细胞生长动态。流式细胞术检测冻存复苏后、培养基漂浮细胞、胰酶消化损伤后的细胞死亡率以评价其对实验损伤的耐受性。1×104/孔B1... 目的:探讨B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞的生物学特性。方法:倒置荧光显微镜下连续观察B16-F10-luc-G5细胞生长动态。流式细胞术检测冻存复苏后、培养基漂浮细胞、胰酶消化损伤后的细胞死亡率以评价其对实验损伤的耐受性。1×104/孔B16-F10-luc-G5细胞按1∶2梯度稀释至0.78×102/孔,加入底物荧光素后检测其生物发光特性。Babl/C和C57 bl/6雄性小鼠各10只接种该细胞,目测肿瘤生长速度和活体成像监测Babl/C小鼠移植瘤生长动态以评价其成瘤特性。结果:B16-F10-luc-G5细胞生长动态符合典型B16-F10细胞特性,无自发及激发荧光。B16-F10-luc-G5细胞冻存、漂浮细胞及对数生长期细胞消化后死亡率分别为23.8%、35.8%和4.8%。B16-F10-luc-G5细胞数与实测平均光子数之间存在线性回归关系,检测光子数可反映细胞数目。两组小鼠移植成瘤率均为100%,平均肿瘤出现时间差异显著(t=9.05,P<0.05),移植瘤病理符合B16黑色素瘤典型生长特点;活体成像监测可灵敏监测移植瘤生长动态。结论:B16-F10-luc-G5细胞具有生长快、对各种实验操作耐受性好、标记生物发光基因易追踪等优点,且其一般特性与B16-F10细胞基本相同,是肿瘤学研究良好的实验材料。 展开更多
关键词 B16-F10-luc-G5 黑色素瘤细胞 生物学特性 活体成像
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基于LUC密码体制的分类多秘密共享方案 被引量：1
13
作者 陆正福 杜珍珍 +3 位作者 何英 张瑜 李林 张翔 《昆明学院学报》 2010年第6期43-45,共3页
提出一种基于LUC公钥体制的分类多秘密共享方案,该方案使用各用户的私钥作为各自的秘密份额,秘密分发者不需要进行秘密份额的分配,整个系统不需要维护安全的信道,每个子组共享一个秘密,全体参与者共享一个总秘密,所有类型的秘密之和构... 提出一种基于LUC公钥体制的分类多秘密共享方案,该方案使用各用户的私钥作为各自的秘密份额,秘密分发者不需要进行秘密份额的分配,整个系统不需要维护安全的信道,每个子组共享一个秘密,全体参与者共享一个总秘密,所有类型的秘密之和构成核心秘密,该方案能够有效地保管多个秘密,并且实现了对多个秘密的分类管理,其安全性是基于LUC密码体制与Sham ir门限秘密方案的安全性. 展开更多
关键词 门限方案 luc密码体制 分类多秘密共享
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鼻内镜联合Caldwell-luc手术治疗对鼻内翻性乳头状瘤患者围手术指标及术后复发的影响 被引量：7
14
作者 郜元坤 李文娟 《中南医学科学杂志》 CAS 2018年第4期377-380,共4页
选择本院鼻内翻性乳头状瘤(SNIP)患者95例,依据手术方式分为观察组(鼻内镜联合Caldwell-luc术,n=40)、对照组(鼻内镜手术,n=55),记录其围术期指标、术后恢复情况及复发率。结果显示,与对照组相比,观察组手术时间长、术中出血量大(P<0... 选择本院鼻内翻性乳头状瘤(SNIP)患者95例,依据手术方式分为观察组(鼻内镜联合Caldwell-luc术,n=40)、对照组(鼻内镜手术,n=55),记录其围术期指标、术后恢复情况及复发率。结果显示,与对照组相比,观察组手术时间长、术中出血量大(P<0.01);两组手术有效率差异无显著性(P>0.05);观察组术后3、6个月LMS及VAS评分降低(P<0.05);观察组术后1年并发症发生率2.50%、复发率7.50%低于对照组16.36%、23.64%(P<0.05),本研究表明,证实鼻内镜手术联合Caldwell-luc术治疗SNIP虽然会延长手术时间,增加术中出血量,但操作简单,可减少术后并发症、复发率,改善预后。 展开更多
关键词 鼻内镜手术 Caldwell-luc 鼻内翻性乳头状瘤 围手术指标 复发
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变异链球菌ldh-luc基因荧光报告株对氯己定的敏感性实验研究 被引量：1
15
作者 霍丽珺 凌均棨 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期822-825,共4页
目的:探讨变异链球菌ldh-luc基因荧光报告株(荧光报告株)对氯己定的敏感性。方法:将变异链球菌荧光报告株S.mutans ldh-luc和野生菌株分别以浮离态和生物膜态培养于BHI,菌落计数法(CFU)检测氯己定对2种菌株的最小抑制浓度(MIC)、RLU、A_... 目的:探讨变异链球菌ldh-luc基因荧光报告株(荧光报告株)对氯己定的敏感性。方法:将变异链球菌荧光报告株S.mutans ldh-luc和野生菌株分别以浮离态和生物膜态培养于BHI,菌落计数法(CFU)检测氯己定对2种菌株的最小抑制浓度(MIC)、RLU、A_(600),以观测其生长状态及荧光活性的变化及相互关系。结果:氯己定对S. mutans ldh-luc基因荧光报告株和野生株的MICs均为(0. 25±0. 39)μg/ml。氯己定作用30 min后,浮游态和24 h生物膜S. mutans ldh-luc基因荧光报告株的RLU、A_(600)、CFU呈下降趋势;作用60 min后,RLU、CFU下降至检测水平以下,去除氯己定,加入BHI培养基培养90 min,仍未检出RLU,氯己定作用前后的差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论:S. mutans ldh-luc基因荧光报告株能准确反映氯己定对生物膜中细菌的作用。 展开更多
关键词 变异链球菌(S.mutans) ldh-luc基因荧光报告株 氯己定
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一种新的基于Lucas序列的公钥密码体制
16
作者 王衍波 张凯泽 +2 位作者 王开华 端木庆峰 雷凤宇 《电子与信息学报》 EI CSCD 北大核心 2007年第1期185-188,共4页
该文分析了LUC公钥密码体制,提出了基于Lucas序列的新的公钥密码体制LUC-RSA,LUC-Rabin,其安全性比LUC,RSA强,数据吞吐率大于LUC。
关键词 公钥密码体制 RSA luc
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基于LUC访问结构上的秘密共享方案
17
作者 李慧贤 程春田 庞辽军 《东南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期43-46,共4页
基于LUC公钥密码体制提出了一个访问结构上的秘密共享方案.该方案使用参与者的私钥作为其秘密份额,秘密分发者不需要进行秘密份额的分配.秘密份额的长度小于或等于秘密的长度.在秘密重构过程中,每个合作的参与者只需提交一个由秘密份额... 基于LUC公钥密码体制提出了一个访问结构上的秘密共享方案.该方案使用参与者的私钥作为其秘密份额,秘密分发者不需要进行秘密份额的分配.秘密份额的长度小于或等于秘密的长度.在秘密重构过程中,每个合作的参与者只需提交一个由秘密份额计算的伪份额,且任何人都能够立即检验每个合作的参与者是否进行了欺骗.该方案可以用来共享任意多个秘密,而不必更新各参与者的秘密份额.分析发现,所提出的方案是一个安全、有效的方案,特别适合应用于秘密分发者与参与者之间不存在安全通信信道的场合. 展开更多
关键词 秘密共享 访问结构 luc公钥密码体制
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phP53-luc质粒的构建及其用于检测化学物质遗传毒性的初步分析
18
作者 施柯 黎怀星 +2 位作者 吴丹 李雅慧 孙树汉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期277-279,共3页
目的 :构建 2个分别由 p5 3基因启动子和核心启动子驱动的荧光素酶报告基因表达质粒 ,并探讨其用于检测遗传毒性化学物质的可行性。方法 :通过 PCR扩增人 p5 3基因启动子片段 ,然后采用重组 DNA技术克隆入 p GL3- BASIC的荧光素酶报告... 目的 :构建 2个分别由 p5 3基因启动子和核心启动子驱动的荧光素酶报告基因表达质粒 ,并探讨其用于检测遗传毒性化学物质的可行性。方法 :通过 PCR扩增人 p5 3基因启动子片段 ,然后采用重组 DNA技术克隆入 p GL3- BASIC的荧光素酶报告基因的上游而获得 ph P5 3- luc表达质粒。用脂质体转染法将 ph P5 3- luc转染入 NIH3T3细胞并分别用 5 -氟尿嘧啶 (5 -FU)处理 ,最后裂解细胞用 Dual- L uciferase Reporter Assay System检测荧光素酶报告基因表达。 结果 :构建了 2个分别由p5 3基因启动子和核心启动子驱动的荧光素酶报告基因表达质粒 ,位于这 2个质粒上的荧光素酶报告基因在 NIH3T3细胞内的表达显著地受遗传毒性化学物质的诱导 ,其表达比对照的 p GL 3- BASIC载体上的荧光素酶报告基因高近 2 4 0倍。结论 :基于人 p5 展开更多
关键词 phP53—luc质粒 检测 化学物质遗传毒性 P53基因 5—氟尿嘧啶
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萤火虫Luc基因的克隆及生物信息学分析
19
作者 许勇 张忠东 +4 位作者 李静 王红萍 王娟 胡倩 赵娜娜 《生物技术》 CAS 2020年第4期328-334,共7页
[目的]克隆野生型虫荧光素酶(luciferase)基因(Luc)全长序列并对其进行生物信息学分析。[方法]以虫荧光素酶报告栽体pXP2 DNA为模板,应用PCR技术,获得萤火虫Luc基因目标条带并克隆到pGEM-T-Easy载体,利用CD search、ProtParam、ProtScal... [目的]克隆野生型虫荧光素酶(luciferase)基因(Luc)全长序列并对其进行生物信息学分析。[方法]以虫荧光素酶报告栽体pXP2 DNA为模板,应用PCR技术,获得萤火虫Luc基因目标条带并克隆到pGEM-T-Easy载体,利用CD search、ProtParam、ProtScale和SOMPA等11种预测软件对其保守区域、一级结构、理化性质、空间结构及活性区域等进行预测分析。[结果]该酶由551个氨基酸残基组成,属于可溶性亲水蛋白。其二级结构主要由无规卷曲和α-螺旋组成。三级结构以6q2m.1的A链为模板进行同源建模,其活性区域由125个氨基酸残基构成,面积和体积分别为2 483.879A^2和1 834.454A^3。在该蛋白质的活性区域之外,筛选出38个具备引入二硫键条件的潜在位点。[结论]成功克隆了Luc基因,并对野生型虫荧光素酶进行了生物信息学分析预测,为进一步过定点突变提高虫荧光素酶的热稳定性奠定了理论基础。 展开更多
关键词 萤火虫 荧光素酶 luc基因 基因克隆 生物信息学分析 热稳定性
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基于U937-NF-κB-Luc细胞系的阿达木单抗生物学活性快速检测方法的建立及验证
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作者 郭莎 贾哲 +7 位作者 龙彩凤 黄璟 贺鹏飞 高洁 于传飞 徐刚领 刘万卉 王兰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第1期79-85,共7页
目的建立基于U937-NF-κB-Luc细胞系的阿达木单抗生物学活性快速检测方法,并进行验证。方法以U937-NF-κB-Luc细胞系为效应细胞,通过荧光素酶发光原理建立阿达木单抗生物学活性检测方法,并优化方法的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis fac... 目的建立基于U937-NF-κB-Luc细胞系的阿达木单抗生物学活性快速检测方法,并进行验证。方法以U937-NF-κB-Luc细胞系为效应细胞,通过荧光素酶发光原理建立阿达木单抗生物学活性检测方法,并优化方法的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)浓度(以160 ng/mL为初始浓度,进行2倍系列稀释,共10个稀释度)、抗体起始浓度(起始终浓度设为2000 ng/mL,进行2倍系列稀释,共20个稀释度)、抗体稀释倍数(1.5、2、3、4倍)、细胞接种量(8×10^(3)、2×10^(4)、4×10^(4)、6×10^(4)个/孔)、孵育时间(0.5、1、2、3 h),验证方法的专属性、准确性、精密性及线性范围。采用优化的方法及基于L929细胞的TNF-α中和活性法分别检测5批阿达木单抗的相对效价。结果阿达木单抗国际标准品的剂量-效应曲线呈典型的S型,且所得数据符合四参数方程式:y=(A-D)/[1+(x/C)^(B)]+D,R~2>0.99。确定最适TNF-α浓度为5 ng/mL,抗体起始浓度为800 ng/mL,抗体稀释倍数为2倍,细胞接种量为2×10^(4)个/孔,诱导时间为2 h。阿达木单抗等3种TNF-α靶点的治疗性单抗均可获得较好的剂量-效应曲线,其他非TNF-α靶点的治疗性单抗未呈现该曲线;效价理论值对数与其实测值对数的直线回归方程的斜率为1.037,相对偏倚均在±12%范围内;各效价样品的相对效价测定值的几何变异系数(geometric coefficient of variation,GCV)均<20%;理论效价在64%~156%范围内,与检测值呈良好的线性关系,拟合直线回归方程为y=1.0374 x-0.0237,R~2=0.9984。两种方法检测5批阿达木单抗的相对效价检测结果差异无统计学意义(t=1.198,P=0.2651)。结论建立的基于U937-NF-κB-Luc细胞系的阿达木单抗生物学活性检测方法具有良好的专属性、准确性及精密性,且耗时短(仅需3 h),可作为阿达木单抗生物学活性的快速评价方法。 展开更多
关键词 阿达木单抗 U937-NF-κB-luc细胞 肿瘤坏死因子-α 生物学活性
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