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InvA-PCR应用于磐安县钩端螺旋体病检测的研究 被引量：1
1
作者 李钟梁 孙继明 +5 位作者 姜理平 应凯满 郑柏福 李夏 陈岚岚 张孟田 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2012年第10期2360-2363,共4页
目的:针对InvA-PCR方法检测钩端螺旋体病的研究。方法:根据侵袭蛋白A基因(InvA)与卫生行业标准推荐的引物G1/G2对比,进行特异性与灵敏度研究,并应用于磐安鼠标本钩端螺旋体PCR检测。对磐安县2009分离菌株进行钩端螺旋体InvA-PCR和LS-PC... 目的:针对InvA-PCR方法检测钩端螺旋体病的研究。方法:根据侵袭蛋白A基因(InvA)与卫生行业标准推荐的引物G1/G2对比,进行特异性与灵敏度研究,并应用于磐安鼠标本钩端螺旋体PCR检测。对磐安县2009分离菌株进行钩端螺旋体InvA-PCR和LS-PCR鉴定。结果:InvA-PCR具有较高的灵敏度和特异性,该引物可特异性扩增致病性钩端螺旋体DNA,对本实验所用的其他细菌不扩增。2009年分离的钩端螺旋体菌株进行PCR鉴定结果与血清学鉴定结果相符。对鼠标本进行InvA-PCR检测,InvA-PCR检测阳性率为5%。与卫生行业标准推荐的引物G1/G2对比,符合率为100%。结论:InvA-PCR检测方法可灵敏、特异地检测致病性钩端螺旋体,能正确有效地反应野生动物带毒率,为控制钩端螺旋体病提供依据。 展开更多
关键词 侵袭蛋白A基因 钩端螺旋体 聚合酶链反应
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InvA-PCR快速检测鼠肾标本中钩端螺旋体 被引量：1
2
作者 鲍庆汉 姜理平 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2012年第12期2908-2909,2912,共3页
目的:探讨InvA-PCR方法快速检测钩端螺旋体的应用价值。方法:对2009年淳安县106只鼠肾标本直接提取其DNA用invA-PCR法进行检测,同时对106只鼠肾标本进行分离培养和显微镜凝集试验(MAT)血清学鉴定。结果:106只鼠肾标本经InvA-PCR法检测,... 目的:探讨InvA-PCR方法快速检测钩端螺旋体的应用价值。方法:对2009年淳安县106只鼠肾标本直接提取其DNA用invA-PCR法进行检测,同时对106只鼠肾标本进行分离培养和显微镜凝集试验(MAT)血清学鉴定。结果:106只鼠肾标本经InvA-PCR法检测,9份标本钩端螺旋体invA基因呈阳性,阳性率为8.5%。106只鼠肾标本分离培养,分离到3株钩端螺旋体菌株,均为黄疸出血群,阳性率为2.8%。3份培养阳性标本InvA-PCR均阳性。结论:InvA-PCR方法操作方便、耗时短、特异性强、灵敏度高,可作为致病性钩端螺旋体可靠的快速诊断方法,可用于钩体病的流行病学调查和钩体病临床标本快速初筛。 展开更多
关键词 侵袭蛋白A基因 钩端螺旋体 聚合酶链反应
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Ce^(Ⅳ)掺杂g-C_(3)N_(4)增强电化学发光靶向检测invA毒力基因
3
作者 杨旭莲 刘欣玲 +5 位作者 张红 蒋健 彭林 娄语芯 钟嘉 毛俐 《分析测试学报》 北大核心 2026年第1期127-134,共8页
沙门菌是一种高致病食源性病原菌,invA基因是沙门菌的高保守毒力基因,检测invA基因对沙门菌的快速、准确检测具有重要意义。该文研究构建了PANI-g-C_(3)N_(4)-Ce^(Ⅳ)纳米复合材料的阴极电化学发光(ECL)传感基底,利用滚环扩增(RCA)invA... 沙门菌是一种高致病食源性病原菌,invA基因是沙门菌的高保守毒力基因,检测invA基因对沙门菌的快速、准确检测具有重要意义。该文研究构建了PANI-g-C_(3)N_(4)-Ce^(Ⅳ)纳米复合材料的阴极电化学发光(ECL)传感基底,利用滚环扩增(RCA)invA基因互补序列,适配金纳米粒子标记响应探针,增强阴极ECL信号,用于靶向检测invA沙门毒力基因,并对传感器组装过程、实验条件进行优化,评价其分析性能。结果显示,该传感器的检测线性范围为10 amol/L~1μmol/L,线性方程为I=2131+840lgc(r^(2)=0.9943),检出限低至3.3 amol/L,加标回收率为96.6%~111%。该传感器对实际肉类食品沙门菌样本检测结果与基因测序结果一致,在公共卫生现场食品安全检测领域具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 沙门菌 invA基因 电化学发光 PANI-g-C_(3)N_(4)-Ce^(Ⅳ) 滚环扩增(RCA)
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非创伤性充填技术配合氟保护漆治疗小儿龋齿的效果
4
作者 周力 《妇儿健康导刊》 2025年第19期67-71,共5页
目的分析非创伤性充填技术配合氟保护漆治疗小儿龋齿的效果。方法选取2021年1月1日至2023年12月31日盐城市第三人民医院口腔科接诊的84例龋齿患儿作为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组与试验组,每组42例。对照组实施常规3M氟保... 目的分析非创伤性充填技术配合氟保护漆治疗小儿龋齿的效果。方法选取2021年1月1日至2023年12月31日盐城市第三人民医院口腔科接诊的84例龋齿患儿作为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组与试验组,每组42例。对照组实施常规3M氟保护漆涂布治疗,试验组采用非创伤性充填技术治疗后涂布3M氟保护漆,比较两组治疗总有效率、意外穿髓率、不良事件总发生率、咬合力、牙龈指数、探诊深度。结果试验组治疗总有效率高于对照组,意外穿髓率、不良事件总发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前的咬合力、牙龈指数、探诊深度比较无统计学差异(P>0.05);治疗后,两组咬合力均升高,牙龈指数、探诊深度均降低,且试验组咬合力高于对照组,牙龈指数、探诊深度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论非创伤性充填技术配合氟保护漆治疗小儿龋齿的效果较好,能够降低意外穿髓率,减少不良事件,提高咬合力,保障口腔健康,值得推广。 展开更多
关键词 小儿龋齿 氟保护漆 非创伤性充填技术
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PIN1/PPARγ信号通路表达在宫颈癌细胞侵袭转移中的作用机制
5
作者 刘艳 刘晓夏 +1 位作者 王冬花 周萍 《联勤军事医学》 2025年第7期551-559,共9页
目的 基于过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor, PPARγ)信号通路探讨肽基脯氨酰顺反式异构酶NIMA相互作用蛋白1(peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting 1,PIN1)对宫颈癌细胞侵袭... 目的 基于过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor, PPARγ)信号通路探讨肽基脯氨酰顺反式异构酶NIMA相互作用蛋白1(peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting 1,PIN1)对宫颈癌细胞侵袭转移的作用。方法 从作者医院妇产科病理数据库中随机抽取2021-01/2021-12月诊断为宫颈癌的鳞状细胞癌患者共105例,在患者知情同意的情况下采集2019-01/2020-12月新鲜的80例正常宫颈组织和72例早期宫颈癌组织样本进行研究。为了考察PIN1敲低对C33A细胞生物学功能的影响,将C33A细胞分为对照组(不作任何处理)、sh-NC组(转染sh-NC慢病毒)、sh-PIN1组(转染sh-PIN1慢病毒);为了考察PIN1上调对C33A细胞生物学功能的影响,将C33A细胞分为对照组(不作任何处理)、Vector组(转染Vector质粒)、PIN1组(转染PIN1质粒)。为了考察PIN1通过调节PPARγ对宫颈癌增殖和侵袭的影响,将C33A细胞分为对照组(不作任何处理)、sh-NC+Vector组(转染sh-NC和Vector)、sh-PIN1组(转染sh-PIN1慢病毒)、PPARγ组(转染PPARγ质粒)和sh-PIN1+PPARγ组(转染sh-PIN1慢病毒和PPARγ质粒)。通过Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction, qPCR)法分析PIN1在宫颈癌组织和细胞系中的表达水平,并分析了PIN1表达与临床病理特征的关系。采用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT)试验评估细胞活力,Transwell小室法检测细胞侵袭能力。结果 PIN1 mRNA在宫颈癌组织和细胞系中表达增加(P均<0.05)。与PIN1低表达患者相比,PIN1高表达患者的总生存期(overall survival, OS)和无病生存期(disease-free survival, DFS)较短(P均<0.001)。PIN1表达、基质侵袭和盆腔淋巴结转移是鳞状细胞宫颈癌患者OS的独立危险因素(P<0.05),PIN1表达和间质侵犯是鳞状细胞宫颈癌患者DFS的独立危险因素(P<0.05)。与sh-NC组相比,sh-PIN1组光密度(optical density, OD)值和侵袭数目显著降低(P均<0.001);与Vector组相比,PIN1组OD值和侵袭数目显著增加(P均<0.01)。免疫共沉淀(co-immunoprecipitation, co-IP)结果显示,PIN1和PPARγ相互作用,并且sh-PIN1+PPARγ组OD值和细胞侵袭数目均较sh-PIN1组显著增加(P均<0.05)。结论 PIN1可以作为早期宫颈癌患者的一种新的预后指标,其可能与宫颈癌细胞中PPARγ相互作用来发挥肿瘤促进作用。 展开更多
关键词 宫颈癌 过氧化物酶体增殖物激活受体 肽基脯氨酰顺反异构酶 侵袭转移
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内镜治疗早期食管腺鳞癌伴食管胃底静脉曲张一例
6
作者 王斌 《海南医学》 2025年第22期3319-3322,共4页
早期食管腺鳞癌是一种少见的肿瘤,它兼具腺癌和鳞癌两种成分的生物学特性,在临床诊断方法、治疗策略等方面都有其独特之处。而食管胃底静脉曲张是肝硬化常见的严重并发症,曲张静脉破裂出血会导致患者出现呕血、黑便等症状,严重时危及生... 早期食管腺鳞癌是一种少见的肿瘤,它兼具腺癌和鳞癌两种成分的生物学特性,在临床诊断方法、治疗策略等方面都有其独特之处。而食管胃底静脉曲张是肝硬化常见的严重并发症,曲张静脉破裂出血会导致患者出现呕血、黑便等症状,严重时危及生命。当早期食管腺鳞癌患者同时合并食管胃底静脉曲张时,治疗会变得更加复杂和棘手。本文将详细介绍一例胃底静脉曲张内镜下硬化术+食管静脉曲张套扎术治疗1个月后行内镜下食管黏膜剥离术内镜微创治愈治疗早期食管腺鳞癌伴食管胃底静脉曲张的病例,通过文献复习,以期为临床治疗此类病例提供有益的借鉴和参考。 展开更多
关键词 早期食管腺鳞癌 食管胃底静脉曲张 内镜微创治疗 病例报道
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市售鲜鸡蛋中沙门氏菌的分离鉴定及毒力岛基因检测 被引量：40
7
作者 王晶钰 董睿 +6 位作者 王利勤 芮弦 陈婷 李成山 张三东 张彦明 郭抗抗 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第16期154-158,共5页
目的:监测市售鲜鸡蛋中沙门氏菌的污染情况,检测分离菌株的致病性及其毒力岛基因携带情况,了解沙门氏菌分离株毒力岛基因的携带与其致病力的相关性。方法:从陕西省不同地市的超市中随机购买鲜鸡蛋,无菌取其蛋壳膜分离沙门氏菌,聚合酶链... 目的:监测市售鲜鸡蛋中沙门氏菌的污染情况,检测分离菌株的致病性及其毒力岛基因携带情况,了解沙门氏菌分离株毒力岛基因的携带与其致病力的相关性。方法:从陕西省不同地市的超市中随机购买鲜鸡蛋,无菌取其蛋壳膜分离沙门氏菌,聚合酶链式反应方法扩增沙门氏菌菌属特异性invA基因鉴定分离株;对分离菌株进行无特定病原体(SPF)雏鸡的致病性试验,依据GenBank发表的基因序列,设计引物聚合酶链式反应检测沙门氏菌毒力岛(SPI)核心蛋白基因。结果:从陕西省55家超市1100枚鲜蛋中分离鉴定出30株沙门氏菌,分离率达2.73%;动物致病性实验表明,30株沙门氏菌中13株有致病力,其中强致病力菌株有7株,占23.3%;分离菌株的毒力岛基因携带率分别为:SPI-1 60%、SPI-2 73.3%、SPI-3 100%、SPI-4 90%、SPI-5 76.7%,毒力岛基因SPI-1+SPI-2的携带与细菌致病性有关。结论:市售鲜鸡蛋中沙门氏菌携带率为2.73%,分离菌株对动物具有一定的致病力,毒力岛基因SPI-1+SPI-2的携带与沙门氏菌的致病性呈正相关。 展开更多
关键词 沙门氏菌 invA基因 致病性 毒力岛基因 鸡蛋 蛋壳膜
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食品中沙门氏菌LAMP快速检测方法的建立 被引量：38
8
作者 黄金海 孙跃辉 +3 位作者 陈瑞 庄世文 刘莹 王静思 《天津大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期468-472,共5页
食品及其原料中沙门氏菌的快速、现场检测对食品安全控制具有重要意义.根据沙门氏菌invA基因核苷酸序列设计一组引物,应用环介导等温扩增技术(LAMP),分别对7种不同血清型沙门氏菌和4种非沙门氏菌进行扩增,同时建立沙门氏菌人工污染的食... 食品及其原料中沙门氏菌的快速、现场检测对食品安全控制具有重要意义.根据沙门氏菌invA基因核苷酸序列设计一组引物,应用环介导等温扩增技术(LAMP),分别对7种不同血清型沙门氏菌和4种非沙门氏菌进行扩增,同时建立沙门氏菌人工污染的食品模型,比较了LAMP法与活菌计数检测的敏感性.结果表明,该方法仅对沙门氏菌产生特异性扩增,灵敏度高达336,mL-1,食品样品经细菌富集培养后,检测灵敏度高达8.25,g-1.所建立的检测沙门氏菌方法具有较高的特异性与灵敏性,操作简单、快速,可用于沙门氏菌污染食品的快速检测. 展开更多
关键词 沙门氏菌 侵袭性因子A 环介导等温扩增技术
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沙门氏菌的invA基因序列分析与分子检测 被引量：60
9
作者 陈金顶 索青利 +1 位作者 廖明 辛朝安 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期868-871,共4页
目的采用聚合酶链反应和DNA序列分析,了解沙门氏菌侵袭蛋白A(invasionproteinA,invA)基因核苷酸序列有何差异,建立沙门氏菌的分子快速检测方法。方法根据沙门氏菌的invA基因核苷酸序列设计一对引物,应用聚合酶链反应技术,分别对3种沙门... 目的采用聚合酶链反应和DNA序列分析,了解沙门氏菌侵袭蛋白A(invasionproteinA,invA)基因核苷酸序列有何差异,建立沙门氏菌的分子快速检测方法。方法根据沙门氏菌的invA基因核苷酸序列设计一对引物,应用聚合酶链反应技术,分别对3种沙门氏菌标准菌株的invA基因及6种非沙门氏菌株进行PCR扩增,并将扩增的片段进行克隆及序列分析。结果3种沙门氏菌标准菌株PCR均扩增出283bp的特异条带,非沙门氏菌皆无特异带扩增;DNA序列分析证实,沙门氏菌的invA基因核苷酸序列比较保守。结论本研究建立的检测沙门氏菌方法具有较高的特异性与灵敏性,invA基因的序列分析为进一步研究沙门氏菌不同分离株的流行病学、遗传学与分子致病机理奠定了基础。 展开更多
关键词 沙门氏菌 invA基因 DNA序列分析 分子检测
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肉制品中沙门氏菌invA基因实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：27
10
作者 杜雄伟 李叶 +2 位作者 冮洁 胡文忠 武晓松 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期68-70,80,共4页
针对沙门氏菌invA基因设计一对特异引物,建立SYBR Green实时荧光定量PCR检测方法,并进行特异性、敏感性、重复性检测。结果表明,所建立的沙门氏菌实时荧光定量PCR检测方法,特异性良好,组间组内重复性良好,沙门氏菌检测下线为101CFU/mL... 针对沙门氏菌invA基因设计一对特异引物,建立SYBR Green实时荧光定量PCR检测方法,并进行特异性、敏感性、重复性检测。结果表明,所建立的沙门氏菌实时荧光定量PCR检测方法,特异性良好,组间组内重复性良好,沙门氏菌检测下线为101CFU/mL。本研究建立了沙门氏菌特异、敏感、快速的实时荧光定量PCR检测方法,为沙门氏菌的快速诊断奠定了基础。 展开更多
关键词 沙门氏菌 invA基因 荧光定量PCR
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利用环介导等温扩增技术对沙门氏菌进行检测 被引量：22
11
作者 张宏伟 叶露萌 +4 位作者 彭杨思 赵玉龙 赵良娟 郑文杰 刘寅 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2009年第5期115-118,共4页
提出食品中沙门菌的环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法。针对沙门菌特异性基因invA,设计了4条沙门菌LAMP检测特异性引物,建立食品中沙门菌LAMP检测方法。用16个血清型45株沙门菌,58株近源菌验证试验表明,所建立的LAMP方法准确且灵敏度... 提出食品中沙门菌的环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法。针对沙门菌特异性基因invA,设计了4条沙门菌LAMP检测特异性引物,建立食品中沙门菌LAMP检测方法。用16个血清型45株沙门菌,58株近源菌验证试验表明,所建立的LAMP方法准确且灵敏度高。加菌试验表明,食品样品中沙门菌检测低限为1.5CFU/100g;新建的LAMP方法与FDABAM方法比较试验表明,二种方法的检测结果完全符合。本方法特异性好、灵敏度高、与传统方法相比可节省大量时间且对实验仪器和操作人员的要求低,非常适于在实际工作推广。 展开更多
关键词 沙门菌 LAMP invA
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微创椎弓根钉内固定加经皮穿刺椎体成形术治疗胸腰椎骨质疏松性骨折的疗效分析 被引量：33
12
作者 顾宇彤 张键 +4 位作者 姜晓幸 董健 费琴明 姚振均 张峰 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1057-1061,共5页
[目的]通过对患者的临床效果及椎体高度压缩率、恢复率和后凸角、后凸矫正率的观察和比较来评价微创椎弓根钉内固定+经皮穿刺椎体成形术的疗效。[方法]选取2008年7月～2011年1月间手术治疗的单节段胸腰椎新鲜骨折且无神经症状的患者共10... [目的]通过对患者的临床效果及椎体高度压缩率、恢复率和后凸角、后凸矫正率的观察和比较来评价微创椎弓根钉内固定+经皮穿刺椎体成形术的疗效。[方法]选取2008年7月～2011年1月间手术治疗的单节段胸腰椎新鲜骨折且无神经症状的患者共103例,分为3组,第1组:行经皮穿刺后凸成形术,37例;第2组:行开放椎弓根钉内固定+椎体成形术,35例;第3组:行微创椎弓根钉内固定+经皮穿刺椎体成形术,31例。记录手术时间、术中出血量和住院天数。术后平均随访16.9个月,观察并记录术前、术后即刻、术后1周,术后1、2、3个月、半年及末次随访的腰背痛评分,计算并比较各时点的椎体高度压缩率、恢复率和后凸角、后凸矫正率。[结果]术后各组VAS评分明显下降(P<0.001),末次随访时第3组明显低于第2组(P<0.05)。术后各时点2、3组的高度恢复率、后凸矫形率均明显大于第1组(P<0.001);术后即刻三组高度压缩率、后凸角均显著减小(P<0.001),而术后1个月时第1组高度恢复率(P<0.001)、后凸矫形率(P<0.05)明显下降,随后逐渐平稳,其他两组术后变化不大。[结论]在治疗胸腰椎骨质疏松性骨折时尽量采用微创椎弓根钉固定与经皮椎体成形相结合的方法。 展开更多
关键词 骨质疏松 胸腰椎骨折 椎体成形术 椎弓根钉内固定 微创脊柱外科
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Sextent系统下微创经皮与开放椎弓根螺钉内固定术治疗胸腰椎骨折疗效比较的Meta分析 被引量：32
13
作者 李志良 杨操 +3 位作者 熊期 李帅 张正东 郜勇 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期687-691,共5页
[目的]系统评价Sextent系统下微创经皮(Sextant percutaneous pedicle screw fixation,SPPSF)与开放椎弓根螺钉内固定术(open pedicle screw fixation,OPSF)治疗胸腰椎骨折疗效及安全性。[方法]计算机检索PubMed、EMbase、WanFang Data... [目的]系统评价Sextent系统下微创经皮(Sextant percutaneous pedicle screw fixation,SPPSF)与开放椎弓根螺钉内固定术(open pedicle screw fixation,OPSF)治疗胸腰椎骨折疗效及安全性。[方法]计算机检索PubMed、EMbase、WanFang Data、VIP和CNKI数据库,收集分别经SPPSF与OPSF治疗胸腰椎骨折的随机或非随机同期对照试验,并手检相关会议论文及追溯纳入文献的参考文献。根据纳入标准进行筛选文献、资料提取、质量评价后,采用Revman 5.2版软件进行Meta分析。[结果]最终纳入随机对照试验1篇,病例对照试验7篇,共417例患者。Meta分析结果显示:与OPSF相比较,SPPSF手术时间短[MD=-28.14,95%CI(-32.14,-24.14),P<0.000 01],术中出血量少[MD=-224.71,95%CI(-277.02,-172.40),P<0.000 01]、术后引流量少[MD=-331.30,95%CI(-392.09,-270.52),P<0.000 01]、下床活动早[MD=-11.95,95%CI(-17.78,-6.13),P<0.000 01]、住院天数少[MD=-8.65,95%CI(-12.56,-4.74),P<0.000 01]和并发症少[OR=0.26,95%CI(0.09,0.69),P=0.007],而SPPSF手术前后伤椎自身Cobb角改善程度不及OPSF,差异具有统计学意义[MD=-0.46,95%CI(-3.72,2.97),P=0.78]。两种术式的术后切口疼痛VAS评分和手术节段的Cobb角改变差异无统计学意义。[结论]SPPSF手术方式的安全性较高,但手术前后伤椎自身Cobb角改善程度不及OPSF,且两种术式的术后切口疼痛VAS评分和手术前后手术节段的Cobb角改善方面相似。 展开更多
关键词 胸腰椎骨折 Sextent系统 经皮 微创 开放椎弓根螺钉内固定术 META分析 系统评价
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沙门氏菌重组酶聚合酶检测方法的建立及应用 被引量：20
14
作者 刘立兵 耿云云 +4 位作者 姜彦芬 刘思颖 孙晓霞 南汇珠 王建昌 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第2期298-303,共6页
建立一种重组酶聚合酶扩增技术(recombinasepolymeraseamplification,RPA)检测沙门氏菌(Salmonella)的方法。本研究依据沙门氏菌侵袭蛋白A基因(invA)的保守序列设计特异性引物,通过对反应时间的优化,建立的RPA方法在38℃水浴锅中恒温反... 建立一种重组酶聚合酶扩增技术(recombinasepolymeraseamplification,RPA)检测沙门氏菌(Salmonella)的方法。本研究依据沙门氏菌侵袭蛋白A基因(invA)的保守序列设计特异性引物,通过对反应时间的优化,建立的RPA方法在38℃水浴锅中恒温反应20 min,即可实现对目的片段的有效扩增;除沙门氏菌外,其他26 种食源性致病菌均无扩增,具有良好的特异性;以沙门氏菌基因组DNA作为模板,该方法的检测灵敏度为1.1×10^(-3) ng/μL,与本研究应用的实时荧光聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,PCR)方法一致;人工污染实验表明,当羊肉、鸡肉和西兰花样品污染量为4 CFU/25 g,增菌8 h,即可通过RPA方法检出沙门氏菌。在人工污染实验中,RPA和PCR检测结果一致。本研究建立的沙门氏菌的RPA检测方法特异性强、操作简单、为食源性致病菌的鉴定提供了一种新的方向。 展开更多
关键词 沙门氏菌 invA基因 重组酶聚合酶扩增 检测
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外来入侵种黄顶菊及其伴生植物光合特性初步研究 被引量：36
15
作者 皇甫超河 王志勇 杨殿林 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期781-788,共8页
以不同生育期的外来入侵植物黄顶菊及其4种伴生杂草为材料,在实验网室条件下测定比较了它们的基本光合和叶绿素荧光特性,从而探讨黄顶菊具有高生物量及较强入侵性的原因,为其防控提供理论依据。结果表明:(1)5种植物的净光合速率日变化... 以不同生育期的外来入侵植物黄顶菊及其4种伴生杂草为材料,在实验网室条件下测定比较了它们的基本光合和叶绿素荧光特性,从而探讨黄顶菊具有高生物量及较强入侵性的原因,为其防控提供理论依据。结果表明:(1)5种植物的净光合速率日变化均呈单峰曲线,黄顶菊净光合速率以现蕾期最高,且大于其他4种伴生杂草;(2)3个生长时期的黄顶菊水分利用效率低于棒头草,高于齿果酸模和曼陀罗,而与反枝苋相当,显示较高的抗旱性;(3)影响5种植物光合速率主要因子为非气孔因素,影响黄顶菊以及棒头草、反枝苋等的主要生态因子是光合有效辐射,显示出其较强的喜光特性;(4)5种植物在午间较强的光照条件下均发生了不同程度光抑制,处于现蕾期和开花期的黄顶菊以及其余3种植物午间的Fv/Fm有轻微下降,其PSⅡ实际光化学效率维持在较高的水平。可见,黄顶菊具有较强的光合能力,更适应于在夏季高温干旱的环境下生长,从而表现出较强的入侵性。 展开更多
关键词 黄顶菊 光合特性 叶绿素荧光 日变化 入侵植物
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沙门氏菌LAMP检测方法的建立 被引量：27
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作者 吴家林 沙丹 +1 位作者 马广源 孙燕萍 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第7期611-614,共4页
目的建立检测沙门氏菌的环介导等温扩增技术。方法针对沙门氏菌侵袭蛋白基因(invA),用LAMP引物在线设计软件设计4条特异性引物(内、外引物各2条),建立了快速检测食品中沙门氏菌的环介导等温扩增方法。对dNTP浓度、Mg2+浓度、内引物浓度... 目的建立检测沙门氏菌的环介导等温扩增技术。方法针对沙门氏菌侵袭蛋白基因(invA),用LAMP引物在线设计软件设计4条特异性引物(内、外引物各2条),建立了快速检测食品中沙门氏菌的环介导等温扩增方法。对dNTP浓度、Mg2+浓度、内引物浓度和外引物浓度等反应条件进行优化,并测定方法的特异性和灵敏度,然后用该方法对猪肉模拟样品和猪肉实物样品进行检测。结果优化的LAMP反应体系为:0.8 mmol/L dNTP,6.0 mmol/L MgCl2,0.2μmol/L外引物F3和B3,1.6μmol/L内引物FIP和BIP。对6种相关肠道细菌进行LAMP扩增,仅含invA基因的沙门氏菌扩增阳性。对细菌纯培养物检测的灵敏度为101 cfu/ml,对猪肉模拟样品检测的灵敏度为102 cfu/g。采用环介导等温扩增方法检测57份猪肉实物样品,invA基因阳性5份。LAMP方法检测(包括DNA提取、LAMP反应和电泳分析)可在2h内完成。结论检测沙门氏菌的环介导等温扩增方法快速、灵敏、特异,适合在基层食源性疾病监测和应急检测中应用。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 沙门氏菌 invA基因
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不同氮素水平下入侵种豚草与本地种黄花蒿、蒙古蒿的竞争关系 被引量：28
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作者 王晋萍 董丽佳 桑卫国 《生物多样性》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期3-11,共9页
已有研究表明,土壤氮素增加可提高外来植物的入侵性,降低本地植物的竞争力。为揭示全球氮沉降对入侵种与本地种之间竞争关系的影响,我们于2010年5-8月在中国科学院北京森林生态系统定位研究站温室内,采用取代系列实验方法(standard repl... 已有研究表明,土壤氮素增加可提高外来植物的入侵性,降低本地植物的竞争力。为揭示全球氮沉降对入侵种与本地种之间竞争关系的影响,我们于2010年5-8月在中国科学院北京森林生态系统定位研究站温室内,采用取代系列实验方法(standard replacement experiment),研究了3个氮素水平下入侵种豚草(Ambrosia artemisiifolia)与本地种黄花蒿(Artemisi a annua)、蒙古蒿(Artemisia mongolica)的生长特征及种内、种间竞争关系的变化。实验采用双因素-随机区组设计,设置了低氮、中氮和高氮3个氮素水平,每一氮素水平分别设置豚草和黄花蒿、豚草和蒙古蒿组成的竞争实验,生长90d后测量株高和生物量。结果表明:单栽情况下,随氮素水平的增加3个物种的株高均增加,而生物量均无显著变化;混栽情况下,3个物种株高和生物量随氮素水平的增加变化各异,豚草呈极显著增加趋势,而黄花蒿无明显变化,蒙古蒿则先增加后减少。豚草的快速生长使其在竞争中处于优势地位,对本地种黄花蒿和蒙古蒿产生明显的竞争效应。但不同氮素水平下,豚草对本地种的竞争力不同:低氮素水平下,豚草<两个本地种;中氮素水平下,黄花蒿<豚草<蒙古蒿;高氮素水平下,豚草>两个本地种。氮素添加显著提高了豚草的种间竞争力,改变了豚草与本地种之间的竞争关系,使竞争有利于入侵种。据此推测,在全球变化的背景下,氮沉降的增加将会促进外来种豚草的入侵,增加本地群落的可入侵性。 展开更多
关键词 豚草 黄花蒿 蒙古蒿 种间竞争 生物入侵 氮素水平
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环介导等温扩增(LAMP)技术检测沙门菌属方法的建立 被引量：18
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作者 欧新华 张如胜 +2 位作者 宋克云 苏良 魏泉德 《实用预防医学》 CAS 2008年第6期1945-1947,共3页
建立一种检测沙门菌属快速敏感的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。针对沙门菌属侵袭蛋白(invA)基因序列的六个区域设计四条LAMP引物,65℃保温约60min,完成对沙门菌属的扩增,扩增产物经电泳和酶... 建立一种检测沙门菌属快速敏感的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。针对沙门菌属侵袭蛋白(invA)基因序列的六个区域设计四条LAMP引物,65℃保温约60min,完成对沙门菌属的扩增,扩增产物经电泳和酶切鉴定。利用LAMP和普通PCR方法同时检测4株沙门菌和9株非沙门菌(对照组)来验证LAMP方法的特异性;将肠炎沙门菌菌液做一系列10倍稀释后用LAMP和PCR方法进行检测来比较两者敏感性。4株沙门菌扩增出LAMP特征性梯状条带,9株非沙门菌没有出现LAMP扩增,LAMP产物的特异性通过限制性内切酶得到了证实;LAMP检测沙门菌属的特异性与普通PCR相同,但其敏感性比普通PCR高10倍,LAMP检测沙门菌属的检测下限为10cfu/ml,PCR检测下限为100cfu/ml。LAMP检测速度相比PCR更快速,在60min内即可完成扩增反应。建立了一个快速、特异、敏感的沙门菌属LAMP检测方法。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 沙门菌属 侵袭蛋白
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苏北滨海湿地互花米草两种繁殖体与本地种竞争能力分析 被引量：9
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作者 陈正勇 王国祥 +2 位作者 刘金娥 徐伟伟 王刚 《海洋科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期380-389,共10页
在碱蓬滩选取互花米草斑块,由外向内分为外围(A)、外侧(B)、内侧(C)、中心(D)四个取样点,研究互花米草实生苗、分蘖苗与本地植物碱蓬、芦苇的相对竞争力,探讨互花米草在碱蓬滩地入侵扩张的趋势。结果表明:1)在斑块B点处,互花米草实生苗... 在碱蓬滩选取互花米草斑块,由外向内分为外围(A)、外侧(B)、内侧(C)、中心(D)四个取样点,研究互花米草实生苗、分蘖苗与本地植物碱蓬、芦苇的相对竞争力,探讨互花米草在碱蓬滩地入侵扩张的趋势。结果表明:1)在斑块B点处,互花米草实生苗与碱蓬相对竞争力高于互花米草分蘖苗与碱蓬相对竞争力;在斑块C点处,互花米草实生苗与碱蓬相对竞争力低于互花米草分蘖苗与碱蓬相对竞争力;多样性指数分析表现为:B点>C点>A点>D点;在互花米草斑块B点处重要值大小表现为:互花米草实生苗>碱蓬>芦苇实生苗>互花米草分蘖苗,在互花米草斑块C点处重要值大小表现为:互花米草分蘖苗>芦苇实生苗>互花米草实生苗>碱蓬。因此,碱蓬滩互花米草斑块主要是通过实生苗入侵新生境,向外扩张,通过互花米草分蘖苗维持种群的稳定。2)在斑块B点,芦苇实生苗与互花米草实生苗的相对竞争力相当,大于互花米草分蘖苗的相对竞争力,但在斑块C点处,互花米草分蘖苗高于芦苇实生苗。碱蓬与本地种芦苇也产生了竞争关系,并很有可能被芦苇和互花米草共同取代。3)互花米草实生苗与碱蓬的相对竞争力与滩涂微生境土壤含水量、土壤全盐量负相关(P<0.01),与土壤pH正相关(P<0.01);互花米草分蘖苗与碱蓬的相对竞争力与土壤含水量、土壤全盐量正相关(P<0.05),与土壤pH负相关(P<0.01)。碱蓬滩斑块处的含水量、盐度适合互花米草的定居、扩张。 展开更多
关键词 外来种 繁殖方式 扩张趋势 种间竞争 生物入侵
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基质金属蛋白酶-2,9及其抑制剂在骨肉瘤中表达的意义 被引量：8
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作者 彭挺生 丘钜世 +2 位作者 吴惠茜 梁惠珍 钟觉民 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期132-135,T004,共5页
[目的]探讨基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,9)及其特异性抑制剂TIMP-2,1在骨肉瘤中的表达情况及其与骨肉瘤侵袭、转移、复发的关系。[方法]采用免疫组织化学链酶菌抗生物紊一过氧化酶(SP)法检测了62例骨肉瘤(初发性骨肉瘤51例、复发性骨肉瘤1... [目的]探讨基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,9)及其特异性抑制剂TIMP-2,1在骨肉瘤中的表达情况及其与骨肉瘤侵袭、转移、复发的关系。[方法]采用免疫组织化学链酶菌抗生物紊一过氧化酶(SP)法检测了62例骨肉瘤(初发性骨肉瘤51例、复发性骨肉瘤11例,确诊时即伴有肺转移者9例、不伴有肺转移者53例)和正常对照组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达,并根据阳性瘤细胞占肿瘤细胞总数的比率进行半定量量化分析和非参数检验。[结果]MMP-9、TIMP-1在骨肉瘤中的阳性表达率分别为76％、18％,与二者在正常对照组织中的阳性率相比,MMP-9表达明显升高,TIMP-1表达明显降低(P均<0.01)。MMP-2、TIMP-2在骨肉瘤中的阳性表达率分别为69％、52％,与二者在正常对照组织中的阳性率相比差异无显著性(P均>0.05)。MMP-9在肿瘤细胞的胞浆及胞膜中均有表达,且在肿瘤的侵袭边缘阳性细胞数目较多,染色强度较高。MMP-2,9及TIMP-1,2在初发性和复发性骨肉瘤之间以及在伴有肺转移和不伴有肺转移的骨肉瘤之间的表达差异无显著性。Spearman相关分析表明骨肉瘤中MMP-9与MMP-2、MMP-2与TIMP-2以及TIMP-1与TIMP-2之间的表达均显著性相关。[结论]骨肉瘤组织中MMP-9表达升高、TIMP-1表达降低,二者协同促进肿瘤细胞的生长和局部的侵袭破坏。骨肉瘤? 展开更多
关键词 骨肉瘤 肿瘤浸润 肿瘤转移 金属蛋白酶类 金属蛋白酶类抑制剂
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