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基于单细胞测序的柯萨奇A16型病毒中和性单克隆抗体筛选
1
作者 李静 马传敏 +3 位作者 全传松 李玉明 张振杰 史卫峰 《山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报》 2025年第1期1-8,共8页
目的通过单细胞测序筛选柯萨奇A组16型病毒(Coxsackievirus A16,CVA16)中和性单克隆抗体,并对其功能进行验证。方法以CVA16衣壳蛋白VP1作为抗原蛋白,流式细胞术分选VP1特异识别小鼠B细胞,对其进行B细胞抗原受体(B-cell receptor,BCR)组... 目的通过单细胞测序筛选柯萨奇A组16型病毒(Coxsackievirus A16,CVA16)中和性单克隆抗体,并对其功能进行验证。方法以CVA16衣壳蛋白VP1作为抗原蛋白,流式细胞术分选VP1特异识别小鼠B细胞,对其进行B细胞抗原受体(B-cell receptor,BCR)组库单细胞测序;基于测序数据分析IgG抗体轻重链序列,根据丰度排序筛选CVA16候选单克隆抗体并进行表达;利用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)、微量中和实验等方法,对CVA16单克隆抗体进行体内外功能验证。结果成功表达CVA16-VP1-His重组蛋白,共免疫14只ICR小鼠,经流式分选出约50000个存活VP1特异B细胞,单细胞测序构建BCR库,筛选并表达19株CVA16候选单克隆抗体。经验证单抗7-2、7-4、7-8、8-8及8-9具有中和作用,半数抑制率(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为9.09、12.00、5.56、9.68、9.67μg/mL。单抗7-8在体外细胞水平上具有较强的中和作用,在体内乳鼠攻毒保护实验中也表现出良好的中和效果。广谱性中和实验表明,单抗7-1具有针对EVA71病毒的中和能力,单抗7-5显示出针对CVA6病毒的中和能力。结论本研究成功建立了1种基于单细胞测序技术筛选CVA16单克隆抗体的方法,验证抗体7-8为1株具备较强中和活性的单克隆抗体。 展开更多
关键词 柯萨奇A组16型病毒 单克隆抗体 真核表达 B细胞抗原受体测序 酶联免疫吸附实验 微量中和实验
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人α-干扰素基因在转基因草鱼中的表达 被引量：17
2
作者 陈立祥 张学文 +5 位作者 肖调义 汪冬庚 符少辉 苏建明 陈开健 章怀云 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期177-178,共2页
为提高草鱼对出血病的抗性 ,采用显微注射法 ,将克隆在鲤 β-肌动蛋白基因启动子下游的人 α-干扰素基因转移到草鱼受精卵中 ,获得了大量转基因个体 .抽取转基因鱼血浆 ,以酶联免疫吸附法检测了转基因草鱼中人α-干扰素基因的表达情况 .... 为提高草鱼对出血病的抗性 ,采用显微注射法 ,将克隆在鲤 β-肌动蛋白基因启动子下游的人 α-干扰素基因转移到草鱼受精卵中 ,获得了大量转基因个体 .抽取转基因鱼血浆 ,以酶联免疫吸附法检测了转基因草鱼中人α-干扰素基因的表达情况 .从 6 72尾转基因草鱼中检测出 15 8尾有 α-干扰素的表达 ,阳性率为 2 3.5 1% ,其中表达水平最高个体血浆中α-干扰素质量浓度为 145 0 pg/ m L . 展开更多
关键词 草鱼 人α-干扰素 酶联免疫检测 基因转化 基因表达 出血病 抗生
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硫代磷酸二乙酯类农药半抗原设计及抗体识别特性 被引量：15
3
作者 谢桂勉 孙远明 +4 位作者 徐振林 李永祥 雷红涛 王弘 沈玉栋 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2193-2198,共6页
通过分析硫代磷酸二乙酯类农药的结构特点,设计并合成了系列半抗原;采用活泼酯法将半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备了系列免疫原和包被原;通过免疫新西兰大白兔获得了相应抗硫代磷酸二乙酯类农药的类特异性抗体.建... 通过分析硫代磷酸二乙酯类农药的结构特点,设计并合成了系列半抗原;采用活泼酯法将半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备了系列免疫原和包被原;通过免疫新西兰大白兔获得了相应抗硫代磷酸二乙酯类农药的类特异性抗体.建立检测硫代磷酸二乙酯类农药的间接竞争酶联免疫分析(ELISA)方法,分析探讨了免疫半抗原结构对抗体特性的影响,并阐述了包被半抗原结构对ELISA灵敏度的影响规律.结果表明,手臂取代位置在苯环对位且手臂较短的免疫原具有较好的免疫效果,同时异源包被可以显著提高ELISA方法的灵敏度.由抗体PAb-H1和包被原H6-OVA建立的间接竞争ELISA方法可以同时检测7个广泛使用的有机磷农药,其半抑制浓度(IC50)分别为蝇毒磷(0.013 mg/L)、对硫磷(0.348 mg/L)、喹硫磷(0.022 mg/L)、三唑磷(0.035 mg/L)、甲拌磷(0.751 mg/L)、除线磷(0.850 mg/L)及辛硫磷(1.301mg/L),最低检测限符合国内外相关有机磷药物最大允许残留限量标准(MRLS)的检测要求. 展开更多
关键词 有机磷农药 类特异性抗体 异源包被 酶联免疫分析
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IL-17和CRP在慢性阻塞性肺疾病中的作用及相关性 被引量：14
4
作者 陈凤娟 郑金旭 +3 位作者 卢培 唐秀忠 贯剑 庄远非 《天津医药》 CAS 北大核心 2011年第6期499-501,共3页
目的:探讨白细胞介素(IL)-17和C反应白蛋白(CRP)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病机制中的作用。方法:取100例健康体检者(健康对照组)、100例COPD急性加重期及100例稳定期患者空腹静脉血,采用双抗体酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清中IL... 目的:探讨白细胞介素(IL)-17和C反应白蛋白(CRP)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病机制中的作用。方法:取100例健康体检者(健康对照组)、100例COPD急性加重期及100例稳定期患者空腹静脉血,采用双抗体酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清中IL-17及CRP水平。并对全部研究对象进行肺功能检查,计算出第1秒用力呼气容积占预计值百分率(FEV1%)。结果:COPD急性加重期患者血清IL-17、CRP明显高于稳定期患者和健康对照组(P<0.05)。COPD急性加重期患者血清IL-17与FEV1%呈负相关,与血清CRP呈正相关(r分别为-0.437和0.582,均P<0.05);COPD稳定期患者血清IL-17与CRP呈正相关(r=0.481,P<0.05)。结论:IL-17可能参与COPD的发病,IL-17与CRP可作为监测COPD的病情活动的相关性指标之一。 展开更多
关键词 肺疾病 慢性阻塞性 白细胞介素17 C反应蛋白质 酶联免疫吸附测定 临床对照试验
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北京地区孕妇TORCH感染的检测 被引量：10
5
作者 孙媛媛 王占伟 +2 位作者 夏长胜 赵晓涛 张彦荣 《现代检验医学杂志》 CAS 2011年第4期120-122,共3页
目的通过北京地区孕妇TORCH感染的筛查，分析其与妊娠年龄的关系．方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA），对高龄（35～50岁）与适龄（20～34岁）的妊娠妇女分别进行弓形虫（TOX）、风疹病毒（RV），巨细胞病毒（CMV）和单纯疱疹病毒（HSV... 目的通过北京地区孕妇TORCH感染的筛查，分析其与妊娠年龄的关系．方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA），对高龄（35～50岁）与适龄（20～34岁）的妊娠妇女分别进行弓形虫（TOX）、风疹病毒（RV），巨细胞病毒（CMV）和单纯疱疹病毒（HSVI＋I）IgM抗体检测。结果孕妇TOX，RV，CMV和HSVI＋I的阳性率分别为0．17％（19／11275），O．38％（48／12596），0．41％（56／13717）和0．36％（39／10974），其中高龄孕妇组TORCH—IgM抗体的阳性率（0．65％，0．73％，0．77％和0．73％）均显著高于适龄孕妇组（O．06％，0．30％，0．32％和0．27％）（X^2检验，P〈0．05）．结论高龄是孕妇发生TORCH感染的一个独立高危因素，应加强高龄孕妇的产前筛查，提高出生人口的质量． 展开更多
关键词 TORCH 酶联免疫吸附试验 IGM抗体 孕妇
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化瘀祛痰方对ApoE^(-/-)小鼠主动脉MAPK信号通路相关蛋白表达的影响 被引量：14
6
作者 冷雪 李阳 +1 位作者 宋囡 王莹 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期116-121,共6页
目的:探讨载脂蛋白敲除(Apoe-/-)小鼠主动脉丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关mRNA的表达变化及化瘀祛痰方药对其的干预作用,探讨化瘀祛痰方药抗AS作用及可能的机制。方法:50只Apo E-/-小鼠随机分为模型组,丹参酮ⅡA组(30 mg·k... 目的:探讨载脂蛋白敲除(Apoe-/-)小鼠主动脉丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关mRNA的表达变化及化瘀祛痰方药对其的干预作用,探讨化瘀祛痰方药抗AS作用及可能的机制。方法:50只Apo E-/-小鼠随机分为模型组,丹参酮ⅡA组(30 mg·kg^(-1)·d^(-1)),化瘀祛痰高剂量组(20 g·kg^(-1)·d^(-1)),化瘀祛痰中剂量组(10 g·kg^(-1)·d^(-1)),化瘀祛痰低剂量组(5 g·kg^(-1)·d^(-1)),10只C57BL/6/J小鼠作为正常组。全自动生化仪检测血清甘油三酯(triglyceride,TG),胆固醇(cholesterol,TC),高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量;苏木素-伊红(HE)检测各组小鼠主动脉斑块情况;油红O检测各组小鼠肝脏脂质沉积情况;酶联免疫吸附测定(ELISA)测定各组小鼠血清中血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion protein 1,VCAM-1),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠主动脉c-Jun氨基末端激酶(c-Jun n-terminal kinase,JNK),磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,p-JNK),p38 MAPK,p-p38 MAPK,细胞外调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK),磷酸化细胞外调节激酶(extracellular regulated protein kinases,p-ERK)蛋白的表达变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清TC,TG,LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低;主动脉管腔见较大粥样斑块,肝细胞中见大量脂质沉积;血清内相关炎性因子TNF-α,IL-6,VCAM-1,ICAM-1含量增加;血管内相关MAPK信号通路p-p38,p-JNK蛋白表达明显增加(P<0.05)。与模型组比较,丹参酮ⅡA组与化瘀祛痰各组小鼠TC,TG,LDL-C明显下降,HDL-C明显升高,主动脉管腔中粥样斑块面积和肝脏脂质沉积量明显减少,血清内相关炎性因子TNF-α,IL-6,VCAM-1,ICAM-1含量降低(P<0.05);血管内相关MAPK信号通路p-p38,p-JNK蛋白表达明显降低(P<0.05),p-ERK表达趋势不明显。结论:化瘀祛痰方药可抑制Apo E-/-小鼠主动脉斑块形成,其机制可能与调控血管MAPK信号通路基因表达有关。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠 主动脉 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路
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胃癌患者血清中骨桥蛋白和CD44v6检测的临床意义 被引量：10
7
作者 于海东 辛华 +1 位作者 王英 张文陆 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期648-650,共3页
目的检测胃癌患者血清中骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和CD44v6(CD44 splice variant 6)的表达水平,探讨二者在胃癌诊断和病情监测方面的价值。方法应用酶联免疫吸附试验检测60例胃癌患者(胃癌组),42例胃溃疡患者(胃溃疡组),33例健康体检... 目的检测胃癌患者血清中骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和CD44v6(CD44 splice variant 6)的表达水平,探讨二者在胃癌诊断和病情监测方面的价值。方法应用酶联免疫吸附试验检测60例胃癌患者(胃癌组),42例胃溃疡患者(胃溃疡组),33例健康体检正常者(健康体检组)血清中OPN和CD44v6的水平。结果胃癌组血清中OPN和CD44v6的水平均高于溃疡组及健康体检组,差异均有统计学意义(P<0.01);胃癌患者血清OPN和CD44v6的水平均与胃癌的临床分期、肿瘤大小、淋巴结转移及远处转移相关(P<0.05)。胃癌患者血清中OPN与CD44v6的水平呈正相关(r=0.8645,P<0.01);二者联合检测敏感性提高至92.5%。结论血清OPN和CD44v6的水平可作为胃癌诊断和病情监测的临床指标,二者联合检测提高了胃癌诊断敏感性,可作为筛查指标用于胃癌的筛检。 展开更多
关键词 胃肿瘤 骨桥蛋白质 CD44V6 酶联免疫吸附测定
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2型糖尿病合并肥胖患者脂联素水平与胰岛素抵抗的相关性 被引量：28
8
作者 汪学军 姜志胜 黄佳克 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期535-538,共4页
目的研究2型糖尿病合并肥胖患者脂联素水平和胰岛素抵抗之间的相关性,探讨脂联素在2型糖尿病合并肥胖患者发生胰岛素抵抗中的作用。方法选择30例2型糖尿病合并肥胖患者、25例2型糖尿病患者及25例非糖尿病对照人员(其中13例为肥胖者),检... 目的研究2型糖尿病合并肥胖患者脂联素水平和胰岛素抵抗之间的相关性,探讨脂联素在2型糖尿病合并肥胖患者发生胰岛素抵抗中的作用。方法选择30例2型糖尿病合并肥胖患者、25例2型糖尿病患者及25例非糖尿病对照人员(其中13例为肥胖者),检测体质指数、腰/臀比值、空腹血糖、糖化血红蛋白、血清空腹胰岛素、血脂、脂联素水平,计算胰岛素抵抗指数和胰岛素敏感指数。分析血清脂联素与胰岛素抵抗的相关性。结果⑴糖尿病肥胖组的检测体质指数、糖化血红蛋白、空腹血糖、胰岛素抵抗指数、血清空腹胰岛素、腰/臀比值均高于对照肥胖组,脂联素、胰岛素敏感指数低于对照肥胖组(P<0.05)。⑵糖尿病非肥胖组甘油三酯、糖化血红蛋白、空腹血糖、胰岛素抵抗指数、血清空腹胰岛素均高于对照非肥胖组,胰岛素敏感指数、脂联素低于对照非肥胖组(P<0.05)。(3)糖尿病肥胖组甘油三酯、胆固醇、体质指数、糖化血红蛋白、空腹血糖、胰岛素抵抗指数、血清空腹胰岛素、腰/臀比值均高于糖尿病非肥胖组,胰岛素敏感指数、脂联素低于糖尿病非肥胖组(P<0.05)。结论脂联素与2型糖尿病肥胖患者的胰岛素抵抗发生有关,脂联素降低易导致胰岛素抵抗,脂联素水平可作为2型糖尿病合并肥胖患者发生胰岛素抵抗的监测标准。 展开更多
关键词 血清脂联素的测定 酶联免疫吸附法 2型糖尿病 脂联素 胰岛素抵抗
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乳腺癌患者血液中PGRMC1浓度与临床相关性 被引量：12
9
作者 赵越 阮祥燕 +5 位作者 张泉东 王虎生 李雪 蔡桂举 谷牧青 Alfred O.Mueck 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第4期486-493,共8页
目的本研究通过检测乳腺癌患者血液中孕激素受体膜组分1(progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)表达浓度来评价其在乳腺癌诊断中的临床价值。方法选取2016年9月至2018年1月期间因乳腺疾病就诊于首都医科大学附属北京妇产... 目的本研究通过检测乳腺癌患者血液中孕激素受体膜组分1(progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)表达浓度来评价其在乳腺癌诊断中的临床价值。方法选取2016年9月至2018年1月期间因乳腺疾病就诊于首都医科大学附属北京妇产医院乳腺外科、中国医学科学院肿瘤医院乳腺外科以及解放军263医院乳腺外科的患者140例,检测其血清及全血标本,其中乳腺癌组90例。根据临床分期早期50例:Ⅰ期(n=24)、Ⅱ期(n=26),晚期40例:Ⅲ期(n=20)、Ⅳ期(n=20)。乳腺良性肿瘤组50例。采用数字表法随机抽取同期门诊健康体检者30例作为对照组。全血样本处理后采用酶联免疫吸附剂测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组PGRMC1浓度,化学发光免疫分析法(chemiluminescent immunoassay,CLIA)测定各组血清CA125、CA153和CEA表达浓度。ROC曲线评价PGRMC1在乳腺癌诊断中的应用价值。结果 PGRMC1浓度在乳腺癌、乳腺良性疾病患者及正常对照人群中差异有统计学意义(P=0.000)。乳腺癌患者中PGRMC1浓度随临床分期增加而逐渐升高,明显高于乳腺良性疾病组及对照组浓度[Ⅱ期(60.89±16.86)ng/L,Ⅲ期(95.54±16.79)ng/L,Ⅳ期(113.78±41.20)ng/L vs良性肿瘤组(42.77±29.81)ng/L,对照组(39.36±25.10)ng/L],组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。与乳腺良性疾病组与正常对照组相比,乳腺癌晚期组3种肿瘤标志物明显升高(Ⅲ期:CA125:χ2=12.26,P=0.000;CA153:χ2=28.19,P=0.000;CEA:χ2=6.52,P=0.011;Ⅳ期:CA125:χ2=16.46,P=0.000;χ2=42.19,P=0.000;CEA:χ2=14.29,P=0.000)。与乳腺癌早期组比较,差异无统计学意义(P>0.05);乳腺良性疾病组与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析显示晚期组PGRMC1的曲线下面积(area under the ROC,AUC)为82.7%(P<0.05),CA125、CA153、CEA的AUC分别为78.3%(P<0.05)、86.8%(P<0.05)、77.3%(P<0.05)。早期组中,CA125、CA153和CEA的AUC均小于60%(P>0.05)。而PGRMC1的AUC为86.6%(P<0.05),敏感度为94.0%,特异度为50.0%。结论乳腺癌患者全血中PGRMC1表达含量高,且表达程度随乳腺癌期别的增加而增高;PGRMC1对早晚期乳腺癌诊断均有一定的临床参考价值,有望成为激素治疗前乳腺癌风险常规筛查的血液学标志物。 展开更多
关键词 绝经激素治疗 孕激素受体膜组分1 乳腺癌 酶联免疫吸附测定 血液生物学标志物 受试者工作特征曲线
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尖吻蝮蛇毒凝血酶样酶在兔体内的药物动力学 被引量：20
10
作者 魏京娜 王晴川 刘广芬 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期213-215,共3页
本文采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测(ELISA)技术,研究家兔一次快速iv 75,150及300μg/kg的凝血酶样酶(thrombin—like enzymes,TLEs)后24 h内血浆药物代谢动力学。结果表明,TLEs在家兔的血浆浓度时间过程以三室模型模拟较为合适,三种... 本文采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测(ELISA)技术,研究家兔一次快速iv 75,150及300μg/kg的凝血酶样酶(thrombin—like enzymes,TLEs)后24 h内血浆药物代谢动力学。结果表明,TLEs在家兔的血浆浓度时间过程以三室模型模拟较为合适,三种剂量的各参数的均数之间经F检验除中央室表观分布容积外无显著差别。其t_(1/2α)为3.86～5.12min,t_(1/2β)为43.3～59.8min,t_(1/2γ)为17.6～19.5h。 展开更多
关键词 尖吻蝮蛇毒 凝血酶样酶 药物动力学
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毒死蜱残留检测间接竞争ELISA试剂盒的研制 被引量：4
11
作者 魏松红 刘冰 +2 位作者 纪明山 谷祖敏 王英姿 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第4期246-249,共4页
在多克隆抗体的基础上研制一种适用于检测样品中毒死蜱残留的间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒,并对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定。结果表明,研制的试剂盒最低检测限为0.5μg/L,线性检测范围为1.8～1... 在多克隆抗体的基础上研制一种适用于检测样品中毒死蜱残留的间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒,并对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定。结果表明,研制的试剂盒最低检测限为0.5μg/L,线性检测范围为1.8～1000μg/L,供试样品检测结果的批内、批间变异系数均低于8%,回收率均高于85%。试剂盒在4℃或-20℃条件下至少可保存6个月。 展开更多
关键词 毒死蜱 残留 酶联免疫吸附分析 试剂盒
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沈阳市2013年HIV抗体初筛阳性标本的复检及确证结果分析 被引量：29
12
作者 刘建敏 董雪 +3 位作者 李欣 刘蕴博 王琪 张国斌 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第6期844-845,851,共3页
目的分析沈阳市934份HIV抗体筛查阳性标本的复检和确证实验结果,为沈阳市艾滋病防治工作提供依据。方法对初筛阳性的血清,用ELISA法和明胶颗粒凝集法(PA)复检,任一复检实验阳性的血清再用免疫印迹法(WB)进行确证实验,并对确证实验结果... 目的分析沈阳市934份HIV抗体筛查阳性标本的复检和确证实验结果,为沈阳市艾滋病防治工作提供依据。方法对初筛阳性的血清,用ELISA法和明胶颗粒凝集法(PA)复检,任一复检实验阳性的血清再用免疫印迹法(WB)进行确证实验,并对确证实验结果进行分析。结果 934份初筛阳性血清经过复检有847份呈阳性反应,经WB法确证660份为HIV-1抗体阳性,不确定98份,阴性89份。ELISA法和明胶颗粒凝集法与WB法的阳性符合率分别为80.9%和78.9%。结论采用ELISA法和明胶颗粒凝集法进行复检,可有效排除初筛实验室的假阳性标本,提高确证的阳性符合率,降低确证检测成本,但是2种方法均存在一定的假阳性。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 酶联免疫吸附测定法 明胶颗粒凝集法 免疫印迹法
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hMAM水平与乳腺癌早期诊断和癌微转移的相关性及临床意义研究 被引量：12
13
作者 印滇 王亚非 +1 位作者 杨莉 王以浪 《临床和实验医学杂志》 2015年第18期1512-1515,共4页
目的探讨血清人乳腺珠蛋白(hMAM)水平与乳腺癌早期诊断和癌微转移的相关性及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测64例乳腺癌患者、32例其他癌患者(直肠癌、胃癌、卵巢癌、前列腺癌患者各8例)、34例良性乳腺相关疾病肿... 目的探讨血清人乳腺珠蛋白(hMAM)水平与乳腺癌早期诊断和癌微转移的相关性及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测64例乳腺癌患者、32例其他癌患者(直肠癌、胃癌、卵巢癌、前列腺癌患者各8例)、34例良性乳腺相关疾病肿瘤患者和36例体检正常的女性(正常对照组)的血清人乳腺珠蛋白水平并做比较。将64例乳腺癌患者分别按临床TNM分期、雌激素受体(ER)表达程度、腋窝淋巴结的转移程度及绝经与否分组并做比较。通过受试者的工作特征曲线(即ROC曲线)确定乳腺癌患者的hMAM的Cut-off值。结果血清hMAM的ROC曲线面积为0.855,即乳腺癌诊断结果的可信度为85.5%;血清hMAM的Cut-off值为8.54 ng/ml,其特异性和敏感度分别为83.2%和75.9%。在血清hMAM水平和阳性率的比较中,乳腺癌组明显高于其他三组(P<0.05),且其他三组间差异无显著性(P>0.05)。Ⅲ和Ⅳ期乳腺癌患者的血清hMAM阳性率(62.50%、75.00%)明显高于Ⅰ和Ⅱ期患者(31.25%、37.50%,P<0.05),但hMAM水平无显著性差异(P>0.05)。存在腋窝淋巴结转移的乳腺癌患者的血清hMAM的阳性率(90.91%)明显高于无转移的患者(25.00%)(P<0.05),但hMAM水平无显著性差异(P>0.05)。乳腺癌患者的血清中是否存在ER以及是否绝经对hMAM及阳性率均无显著性差异(P>0.05)。结论乳腺癌临床TNM分期及腋窝淋巴结转移程度与hMAM的表达存在相关性;在乳腺癌高危人群的血清检验中,hMAM的检测有助于提高乳腺癌早期诊断的临床意义,在诊断乳腺癌早期微转移与治疗中具有关键性作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 人乳腺珠蛋白 微转移 酶联免疫吸附测定 ROC 曲线
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血液病毒核酸检测单独阳性标本研究 被引量：15
14
作者 田耘博 黄霞 +5 位作者 秦伟斐 李维 毛伟 廖红文 段恒英 何涛 《实验与检验医学》 CAS 2015年第6期704-707,716,共5页
目的对酶联免疫吸附检测(ELISA)阴性而核酸检测(NAT)阳性的NAT单独阳性献血标本进行研究分析,评价不同NAT方法检测结果的差异。方法对献血标本进行ELISA的同时,采用转录介导扩增技术(TMA)进行NAT。对NAT单独阳性标本分别进行NAT(TMA)鉴... 目的对酶联免疫吸附检测(ELISA)阴性而核酸检测(NAT)阳性的NAT单独阳性献血标本进行研究分析,评价不同NAT方法检测结果的差异。方法对献血标本进行ELISA的同时,采用转录介导扩增技术(TMA)进行NAT。对NAT单独阳性标本分别进行NAT(TMA)鉴别检测,乙肝血清学标志物检测,HBs Ag确证实验和基于聚合酶链式反应(PCR)的NAT。结果在47004例献血标本中,NAT(TMA)联检(HBV、HIV、HCV)出ELISA阴性的NAT阳性标本108例,其中40例鉴别检测为HBV,68例为鉴别阴性,未发现HIV和HCV,HBV的NAT的单阳性率为0.85‰。选取13例NAT(TMA)鉴别为HBV的标本中有9例NAT(PCR)也为HBV;选取30例NAT(TMA)鉴别阴性标本中有2例NAT(PCR)为HBV。选取鉴别阳性13例,阴性30例共计43例NAT(TMA)联检单阳性标本进行乙肝血清学标志物检测,其乙肝血清学标志物中HBc Ab阳性率最高,HBs Ag确证检测结果均为不确定。结论由于NAT单独阳性标本中大多为隐匿性HBV感染(OBI),可能给不同NAT方法的检测结果带来一定的差异。 展开更多
关键词 核酸检测(NAT) 酶联免疫吸附检测(ELISA) ELISA阴性且NAT阳性 HBV/HIV/HCV
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铜陵地区2845例孕妇TORCH感染状况分析 被引量：7
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作者 吴希静 朱前 +1 位作者 胡春秀 胡志军 《检验医学与临床》 CAS 2013年第13期1658-1659,1661,共3页
目的了解铜陵地区孕妇TORCH感染状况,分析其与妊娠年龄的关系。方法对2010年1月至2012年11月进行孕检的2 845例孕妇抽取血样,用酶联免疫吸附法对TORCH-IgM抗体进行检测。结果孕妇TORCH-IgM总阳性率2.601%,弓形虫(TOX),风疹病毒(RV),巨... 目的了解铜陵地区孕妇TORCH感染状况,分析其与妊娠年龄的关系。方法对2010年1月至2012年11月进行孕检的2 845例孕妇抽取血样,用酶联免疫吸附法对TORCH-IgM抗体进行检测。结果孕妇TORCH-IgM总阳性率2.601%,弓形虫(TOX),风疹病毒(RV),巨细胞病毒(CMV)和单纯疱疹病毒(HSVⅡ)IgM抗体阳性率分别为0.141%,0.211%,1.617%,0.738%;其中高龄(35～50岁)孕妇组TORCH-IgM总阳性率和CMV-IgM阳性率(6.178%,5.405%)均明显高于适龄(20～34岁)组(2.243%,1.237%)(P<0.01)。结论铜陵地区孕妇TORCH-IgM阳性率较低,高龄是孕妇发生CMV感染的一个高危因素,应加强孕妇的产前筛查,提高人口质量。 展开更多
关键词 TORCH 酶联免疫吸附试验 IGM抗体 孕妇
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IFA和ELISA检测J亚群禽白血病病毒的比较研究 被引量：9
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作者 董宣 刘娟 +2 位作者 李德庆 崔治中 赵鹏? 《中国家禽》 北大核心 2014年第2期16-19,共4页
为比较3种禽白血病病毒（ALV）抗原检测ELISA试剂盒的特异性和灵敏度,将J亚群禽白血病病毒（ALV-J）传染性克隆rNX0101株以病毒原液（9×103 TCID50）、10倍病毒稀释液（9×102 TCID50）、100倍病毒稀释液（90 TCID50）接种培养... 为比较3种禽白血病病毒（ALV）抗原检测ELISA试剂盒的特异性和灵敏度,将J亚群禽白血病病毒（ALV-J）传染性克隆rNX0101株以病毒原液（9×103 TCID50）、10倍病毒稀释液（9×102 TCID50）、100倍病毒稀释液（90 TCID50）接种培养于6孔板的DF1细胞,每孔均提前放入灭菌的细胞爬片,于接种后第1～6天每天取上清用3种ELISA试剂盒（A、B、C）检测ALV p27抗原,同时在接种后的第3天和第6天取出细胞爬片进行间接免疫荧光法（IFA）检测.结果表明,IFA方法对高、中、低剂量接种3d后均可检出ALV-J的感染,而ELISA试剂盒中只有A试剂盒在高剂量接种时才能检出,试剂盒B和试剂盒C最早要在第4天才可捡出;中、低剂量接种,3种试剂盒在第4～5天才能检出;第6天时,由于病毒的明显复制,无论IFA方法还是3种ELISA试剂盒都可检出ALV-J的感染.本研究结果为正确选择商品化禽白血病抗原检测试剂盒提供了借鉴. 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 间接免疫荧光 酶联免疫吸附试验
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进口大豆上菜豆荚斑驳病毒的免疫捕获巢式RT-PCR检测 被引量：13
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作者 于翠 杨翠云 +1 位作者 宋绍祎 洪健 《植物检疫》 2006年第4期201-204,共4页
利用DASELISA对进口大豆上BPMV进行检测发现,从美国进口的部分大豆样品对BPMV的多抗血清呈阳性反应;利用免疫吸附电镜观察发现,ELISA检测阳性的大豆种皮病汁液中存在直径约30nm的球状病毒粒子。根据BPMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列设计... 利用DASELISA对进口大豆上BPMV进行检测发现,从美国进口的部分大豆样品对BPMV的多抗血清呈阳性反应;利用免疫吸附电镜观察发现,ELISA检测阳性的大豆种皮病汁液中存在直径约30nm的球状病毒粒子。根据BPMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列设计了2对嵌合引物,建立了BPMV的高灵敏的免疫捕获巢式RTPCR(ICnestedRTPCR)检测方法。该方法经免疫捕获、反转录和2轮PCR扩增,能从带毒大豆种子中扩增到预期大小的DNA条带。序列测定与分析表明此条带的序列为BPMV部分CP基因,在系统关系树上与BPMV的其它分离物形成一簇亲缘关系很近。实验表明从进境大豆上检测到了BPMV。 展开更多
关键词 菜豆荚斑驳病毒 大豆 ELISA 免疫电镜 免疫捕获巢式 RT-PCR
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聚合酶链反应在检测脑性瘫痪患儿人巨细胞病毒感染中的应用 被引量：5
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作者 类延花 吴建贤 +1 位作者 蔡亦红 王明丽 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期157-159,共3页
目的　探讨聚合酶链反应 (PCR)在检测脑性瘫痪 (CP)患儿人巨细胞病毒 (HCMV)感染中的意义。方法　对 5 6例CP患儿用PCR检测尿巨细胞病毒 (CMV)DNA ,病毒分离检测尿标本 ,观察CMV特征性致细胞病变效应 (CPE) ,ELISA检测血清CMVIgM和IgG... 目的　探讨聚合酶链反应 (PCR)在检测脑性瘫痪 (CP)患儿人巨细胞病毒 (HCMV)感染中的意义。方法　对 5 6例CP患儿用PCR检测尿巨细胞病毒 (CMV)DNA ,病毒分离检测尿标本 ,观察CMV特征性致细胞病变效应 (CPE) ,ELISA检测血清CMVIgM和IgG。结果　PCR检测CMVDNA阳性率为 5 3 .6% ,9例CMV病毒分离结果阳性 ;CMVIgM、IgG阳性率分别为 12 .5 %、3 7.5 % ;病毒分离 :CMVIgM阳性与CMVDNA阳性的符合率分别为 10 0 %、10 % ,前两者与后者比较均有显著差异 (P <0 .0 1) ;CMVIgG阳性与PCR阳性符合率为 6.7% ,两者无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论　PCR检测CMVDNA能够早期快速检测到CP患儿CMV感染 ,可应用于CP患儿中CMV感染的检测 ,为早期干预提供可靠依据。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 脑性瘫痪 聚合酶链反应 酶联免疫吸附试验
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增生性玻璃体视网膜病变患者血清和眼内液HGF水平检测 被引量：5
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作者 张喜梅 张皙 +2 位作者 王方 富名水 顾青 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2003年第6期645-647,共3页
目的　检测视网膜脱离 (RD)和 /或伴有增生性玻璃体视网膜病变 (PVR)患者血清和玻璃体液、视网膜下液(SRF)中肝细胞生长因子 (HGF)的含量 ,并探讨其相互关系。方法　同时收集 3 5例RD患者血清和玻璃体液、SRF标本 ,酶联免疫吸附分析 (EL... 目的　检测视网膜脱离 (RD)和 /或伴有增生性玻璃体视网膜病变 (PVR)患者血清和玻璃体液、视网膜下液(SRF)中肝细胞生长因子 (HGF)的含量 ,并探讨其相互关系。方法　同时收集 3 5例RD患者血清和玻璃体液、SRF标本 ,酶联免疫吸附分析 (ELISA)方法检测HGF质量浓度 ,其中 9例不伴有PVR的单纯黄斑孔 (MH)患者作为对照组。结果　各组患者血清HGF质量浓度无明显差异 (P >0 0 5) ,明显低于同组眼内液的质量浓度 (P <0 0 1) ,且二者无相关性 (P >0 0 5)。PVR玻璃体内HGF质量浓度 (10 91± 3 87)ng/ml,均比对照组 (3 42± 0 85)ng/ml高 (P <0 0 1) ,但PVRC级和D级之间差异不明显 :(7 88± 3 83 )ng/ml,(10 2 4± 4 0 7)ng/ml,P >0 0 5。SRF外引流 (14 68± 1 16)ng/ml或内引流 (10 3 5± 6 94)ng/ml的HGF质量浓度均高于玻璃体内水平 (P <0 0 5)。结论　PVR眼内HGF高质量浓度不是通过血 -视网膜屏障弥散 ,可能来自眼组织细胞的分泌 ;玻璃体内HGF随着PVR的发展而增高 。 展开更多
关键词 增生性玻璃体视网膜病变 肝细胞生长因子 酶联免疫吸附分析
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运用单样本核酸扩增检测技术对提高深圳地区HIV检出率的效果分析 被引量：4
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作者 王宋兴 熊文 +3 位作者 古醒辉 刘衡 徐筠娉 曾劲峰 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第13期1562-1565,共4页
目的分析运用单样本核酸扩增检测技术(SS-NAT)对提高深圳地区HIV检出能力的效果,探讨SS-NAT对降低输血感染HIV残余风险的作用。方法采用Procleix Tigris单样本核酸检测系统和第三代、第四代两种酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂对2015年1月... 目的分析运用单样本核酸扩增检测技术(SS-NAT)对提高深圳地区HIV检出能力的效果,探讨SS-NAT对降低输血感染HIV残余风险的作用。方法采用Procleix Tigris单样本核酸检测系统和第三代、第四代两种酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂对2015年1月至2017年8月采集的269 228份无偿献血者血液标本进行平行检测。对ELISA检测无反应性而SS-NAT有反应性的标本进行HIV鉴别试验,并对鉴别有反应性的献血者进行追踪检测。所有ELISA或SS-NAT HIV鉴别试验有反应性的样本均送到深圳市疾病预防控制中心(CDC)做免疫印迹法(WB)确证试验。结果 269 228份样本HIV第三代ELISA试剂检测有反应性188份,有反应性率为0.698‰(188/269 228),第四代ELISA试剂检测有反应性340份,有反应性率为1.263‰(340/269 228),两种ELISA试剂共检测有反应性422份,有反应性率为1.567‰(422/269 228),SS-NAT检测有反应性共103份,有反应性率为0.383‰(103/269 228),其中有4份ELISA无反应性而SS-NAT有反应性标本,对应献血者随访追踪血液标本ELISA和SS-NAT均呈有反应性。所有ELISA或SS-NAT HIV鉴别试验有反应性标本经CDC确认有103份标本呈阳性。ELISA检测后HIV窗口期检出率为1∶67 307(4/269 228)。结论 SS-NAT应用于血液筛查可提高HIV检出率,缩短HIV检测窗口期,降低输血感染HIV残余风险,从而有效提高输血安全性。 展开更多
关键词 核酸检测 酶联免疫吸附试验 人类免疫缺陷病毒 窗口期 输血安全
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