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IBDV阳离子PLGA微球DNA疫苗的制备及其抗原性研究
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作者 王致远 蒲德粉 +4 位作者 陈盛峰 陈果 王威威 韦平 何秀苗 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第5期51-59,共9页
探究聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)作为IBDV-VP2核酸疫苗递送载体的潜力。通过复乳溶剂挥发法制备阳离子PLGA微球,用扫描电镜观察其形态。检测阳离子PLGA微球的细胞毒性、对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及淋巴细胞增殖能力的影响,以及阳离子... 探究聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)作为IBDV-VP2核酸疫苗递送载体的潜力。通过复乳溶剂挥发法制备阳离子PLGA微球,用扫描电镜观察其形态。检测阳离子PLGA微球的细胞毒性、对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及淋巴细胞增殖能力的影响,以及阳离子PLGA微球吸附IBDV DNA疫苗的能力、吸附后在体外的完整性和释放情况。通过动物实验检测微球疫苗的免疫效果。本研究制备的阳离子PLGA微球平均粒径为1~5μm,对正常生长的Vero细胞无毒性作用,且能够促进巨噬细胞的吞噬作用和B、T淋巴细胞的增殖;该微球吸附IBDV DNA疫苗后8 h达到平衡,且DNA保持完整的结构和功能;使用IBDV阳离子PLGA微球DNA疫苗免疫14日龄三黄鸡,试验鸡35日龄时的IBDV抗体水平达到峰值,并且高于裸DNA疫苗组。阳离子PLGA微球作为IBDV-DNA疫苗的载体可以激发雏鸡产生较高水平的IBDV抗体,且抗体持续时间较长,本研究的结果将为IBDV微球核酸疫苗的研发提供依据。 展开更多
关键词 阳离子PLGA ibdv-DNA疫苗 免疫
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Adjuvanting a subunit novel variant IBDV vaccine to induce protective immunity
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作者 Gang Shu Jingyi Han +10 位作者 Yuanling Huang Cong Huang Liping Kong Hongchang Li Lu Zhao Qijiang Tang Jia Li Yingnan Liu Jingyi Liu Hongjun Chen Zongyan Chen 《Journal of Integrative Agriculture》 2025年第5期2019-2023,共5页
Infectious bursal disease(IBD)is an acute,highly contagious disease that affects chicks(Müller et al.2003).IBD mainly damages the immune organs of chicks,especially the central immune organ,causing immune suppres... Infectious bursal disease(IBD)is an acute,highly contagious disease that affects chicks(Müller et al.2003).IBD mainly damages the immune organs of chicks,especially the central immune organ,causing immune suppression in diseased chicks(Muller et al.2012).The pathogenic infectious bursal disease virus(IBDV)is a member of the Avira virus genus in the Birnaviridae family.(Harkness et al.1975;Dobos et al.1979;Müller et al.1979).IBDV is prevalent worldwide,causing serious economic losses to the global poultry industry.Currently,vaccination remains the most cost-effective way to prevent IBDV. 展开更多
关键词 pathogenic infectious bursal disease virus ibdv avira virus Infection Immune suppression infectious bursal disease ibd immune suppression Infectious bursal disease VACCINATION
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IBDV单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立
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作者 姜艳平 刘薇 +6 位作者 宫浩阳 蔡李萌 李佳璇 崔文 周晗 韩建春 唐丽杰 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3433-3441,共9页
旨在建立一种快速有效的检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的方法,本研究以IBDV全病毒作为免疫原制备单克隆抗体,以获得的单抗6G3作为捕获抗体,单抗4C12作为检测抗体,建立检测IBDV的双抗体夹心ELISA方法。结果表明,该ELISA方法具有良好的... 旨在建立一种快速有效的检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的方法,本研究以IBDV全病毒作为免疫原制备单克隆抗体,以获得的单抗6G3作为捕获抗体,单抗4C12作为检测抗体,建立检测IBDV的双抗体夹心ELISA方法。结果表明,该ELISA方法具有良好的特异性,与REV、AEV、ALV和EDSV均无交叉反应;能检测病毒的最小量为1.585×10^(3) ELD50;批间和批内重复性试验显示,该方法具有良好的重复性;通过该方法对49份临床样品进行检测,与商品化的IBDV抗原检测卡进行比较,符合率达94.18%。综上,本研究建立的双抗体夹心ELISA方法,具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于IBDV的快速检测,为制备商品化的IBDV检测试剂盒奠定基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 单克隆抗体 检测方法 双抗体夹心ELISA
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表达IBDV VP2基因的重组嵌合型新城疫病毒的免疫原性初步评价 被引量:1
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作者 周俏艳 杨宏春 +4 位作者 陈浩 冯书风 李海珠 刘耕松 欧长波 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1430-1438,共9页
本研究为了研发能同时预防传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)和新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染的二联苗,将IBDV VP2基因插入NDV LaSota疫苗株基因组的P基因和M基因之间,利用NDV反向遗传操作系统... 本研究为了研发能同时预防传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)和新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染的二联苗,将IBDV VP2基因插入NDV LaSota疫苗株基因组的P基因和M基因之间,利用NDV反向遗传操作系统构建并成功获得重组病毒LS-IBDV-VP2。对重组病毒的鸡胚平均死亡时间(mean death time,MDT)、鸡胚半数感染量(egg infectious dose,EID50)和1日龄雏鸡脑内接种的致病指数(intracerebral pathogenicity index,ICPI)等生物学特性进行测定,并对18日龄SPF鸡胚进行免疫接种,利用血凝抑制实验(hemagglutination inhibition test,HI)测定NDV抗体以及间接酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定IBDV VP2抗体,评价重组病毒的免疫应答反应。结果显示,重组病毒LS-IBDV-VP2的EID50为108.5/mL、MDT为147 h、ICPI为0;NDV抗体效价在孵化后第14天达到最高,与LaSota疫苗株差异不显著(P>0.05),并在孵化后第14天也能产生较高水平的IBDV VP2抗体。本研究结果表明,重组病毒LS-IBDV-VP2与LaSota疫苗株具有相似的生物学特性,但重组病毒毒力更低,并且能够有效诱导机体产生抗体,具有成为预防IBDV和NDV二联候选疫苗株的潜力。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒(ibdv) 新城疫病毒(NDV) VP2基因 反向遗传操作系统 鸡胚免疫
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基于重组IBDV VP3蛋白的免疫磁珠间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用 被引量:3
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作者 龚如月 于淑媛 +8 位作者 王书博 姜艳平 崔文 乔薪瑗 王丽 周晗 徐义刚 李一经 唐丽杰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期678-686,共9页
本研究旨在毕赤酵母中表达鸡传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)的VP3蛋白,以重组VP3蛋白作为包被抗原建立IBDV血清抗体免疫磁珠间接ELISA检测方法并进行初步应用。利用毕赤酵母表达系统获得约为39 ku的重组VP3蛋... 本研究旨在毕赤酵母中表达鸡传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)的VP3蛋白,以重组VP3蛋白作为包被抗原建立IBDV血清抗体免疫磁珠间接ELISA检测方法并进行初步应用。利用毕赤酵母表达系统获得约为39 ku的重组VP3蛋白,Western-blotting检测表明,重组VP3蛋白具有良好的特异性和反应原性。免疫磁珠间接ELISA的最佳反应条件:磁珠和抗原偶联的缓冲液是50 mmol/L MES(p H 8.0),偶联时间为3 h,抗原加入量为95μg,抗原与羧基磁珠最大偶联量为80μg。待检血清和酶标二抗的稀释度分别为1∶1 600和1∶4 000,血清孵育时间为30 min,酶标二抗孵育时间为20 min。在该优化条件下,阴性、阳性临界值判定标准为0.134。特异性试验显示,对抗AIV、IBV、MDV、NDV阳性血清检测结果均为阴性。敏感性试验显示,本试验所建立的检测方法敏感性高于商品化IBDV血清抗体检测试剂盒。重复性试验显示,批内和批间重复试验的最大变异系数分别为3.8%和5.9%。稳定性试验结果显示变异系数小于7%。用建立的检测方法和商品化IBDV血清抗体检测试剂盒同时检测50份血清,结果显示两种检测方法的相对敏感性为94.6%,相对特异性为92.3%,符合率为94.0%。本试验建立的检测方法具有敏感性高、特异性强、重复性好、稳定性高特点,为其应用于临床IBDV血清抗体的检测奠定了基础。 展开更多
关键词 免疫磁珠间接ELISA ibdv抗体检测 ibdv VP3蛋白 毕赤酵母表达系统
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雏鸡在感染IBDV后红细胞免疫功能变化的研究 被引量:22
6
作者 陈龙 殷定忠 +2 位作者 庞训胜 王成明 毛鑫智 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期280-284,共5页
在经IBD弱毒苗免疫和未免疫的30~59日龄AA鸡研究了感染IBDV后红细胞免疫功能的变化。结果表明:从以IBDV攻毒前1天到攻毒后头5天内,未免疫攻毒鸡(A组)和免疫攻毒鸡(B组)RBC-CR1花环率降低或显著降低... 在经IBD弱毒苗免疫和未免疫的30~59日龄AA鸡研究了感染IBDV后红细胞免疫功能的变化。结果表明:从以IBDV攻毒前1天到攻毒后头5天内,未免疫攻毒鸡(A组)和免疫攻毒鸡(B组)RBC-CR1花环率降低或显著降低,而未免疫未攻毒鸡(C组)没有类似变化,高于B组,明显高于A组,以后A和B组逐渐回升到攻毒前水平。A和B组RBC-IC花环率在IBDV攻毒后第5天明显降低,均显著低于C组水平,以后A组仍处于较低水平上变动,B组即逐渐回升,三组比较,A组仍低于C组,同时也低于B组。 展开更多
关键词 雏鸡 ibdv 红细胞 免疫功能
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传染性法氏囊病病毒(IBDV)快速检测与分型技术 被引量:48
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作者 韦平 龙进学 +1 位作者 阳秀英 李康然 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期313-316,共4页
根据已发表的传染性法氏囊病病毒 (IBDV)核苷酸序列 ,在病毒结构蛋白 VP2编码基因的高变区两端外侧的保守序列内设计合成了 2条寡核苷酸引物 ,对各种不同致病性的 12株参考毒株进行了 RT- PCR检测。结果 :12个参考毒株均能扩增出约 6 7... 根据已发表的传染性法氏囊病病毒 (IBDV)核苷酸序列 ,在病毒结构蛋白 VP2编码基因的高变区两端外侧的保守序列内设计合成了 2条寡核苷酸引物 ,对各种不同致病性的 12株参考毒株进行了 RT- PCR检测。结果 :12个参考毒株均能扩增出约 6 79bp的目的片段 ,而对照的 5种鸡源性病原体 NDV、IBV、CAIV、E.coli、PM均未扩增到相应片段 ;对疑似 IBD的 34份临床病料进行检测 ,并同时在其扩增的片段内设计另 1对引物进行 Nested- PCR检测 ,结果基础 RT- PCR检测到 11份阳性 ,Nested- PCR检测到 2 3份阳性 ,后者的检出率大大提高。结果表明 ,建立的 RT- PCR诊断技术具有特异、快捷、敏感的特点。取限制性内切酶 Sac 和 Ssp 以及设计的 2条 vv IBDV(超强毒株 )特异性引物 ,分别应用 v VP2片段 PCR扩增产物的限制性内切酶分析和型特异性引物的 PCR扩增 2种方法 ,对 7个 IBDV分离参考毒株和 2 4个临床样品进行致病性分型。结果 ,确定 2 1株属于 c IBDV(经典毒株 ) ,8株属于 vv IBDV,2株未能确定 ;2种分型方法的结果基本一致 ,均可用于 IBDV的快速分型 ,型特异性引物的 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 ibdv RT-PCR 快速诊断 致病性分型
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IBDV强毒株感染SPF鸡后法氏囊淋巴细胞的凋亡及调控机制 被引量:12
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作者 刘玉锋 佘锐萍 +2 位作者 李慧姣 梁明珍 彭芳珍 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期45-48,共4页
为探究IBDV强毒BC6 / 85株感染SPF鸡后 1~ 9d内法氏囊淋巴细胞中Bcl 2和Bax蛋白的动态表达与淋巴细胞凋亡的关系 ,通过透射电镜观察及TUNEL法检测凋亡的淋巴细胞 ,用免疫组织化学方法检测Bcl 2和Bax蛋白。研究结果表明 :感染后 3~ 5d... 为探究IBDV强毒BC6 / 85株感染SPF鸡后 1~ 9d内法氏囊淋巴细胞中Bcl 2和Bax蛋白的动态表达与淋巴细胞凋亡的关系 ,通过透射电镜观察及TUNEL法检测凋亡的淋巴细胞 ,用免疫组织化学方法检测Bcl 2和Bax蛋白。研究结果表明 :感染后 3~ 5d可见到大量凋亡的淋巴细胞 ,Bcl 2和Bax蛋白表达量显著高于同时点的对照组 (P <0 0 1) ;Bcl 2 /Bax(Bcl 2与Bax比率 )显著低于同时点的对照组 (P <0 0 1)。BC6 / 85株感染SPF雏鸡3~ 5d后法氏囊淋巴细胞会发生大量凋亡 ,Bcl 2 /Bax能准确反映淋巴细胞的凋亡程度。 展开更多
关键词 无特定病原的鸡 ibdv强毒株 法氏囊 细胞凋亡 BAX蛋白 BCL-2蛋白
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IBDV丝素蛋白/壳聚糖DNA微球疫苗的制备及免疫原性分析 被引量:6
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作者 刘岩 吕志强 +4 位作者 张存 祝新荣 石团员 钟石 孟智启 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期393-403,共11页
为了制备传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)DNA微球疫苗,并评价其免疫效果。以丝素蛋白(Silk fibroin,SF)/壳聚糖(Chitosan,CS)为壁材,IBDV的VP2/4/3 DNA疫苗为芯材,通过戊二醛和Na2SO4介导的乳化交联技术,制备... 为了制备传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)DNA微球疫苗,并评价其免疫效果。以丝素蛋白(Silk fibroin,SF)/壳聚糖(Chitosan,CS)为壁材,IBDV的VP2/4/3 DNA疫苗为芯材,通过戊二醛和Na2SO4介导的乳化交联技术,制备出SF/CS复合微球疫苗,然后经肌肉注射14日龄非免疫鸡,2周后加强免疫一次,酶联免疫法(ELISA)定期监测鸡血清的IBDV抗体,以研究微球化疫苗的免疫原性。结果显示:戊二醛介导交联方法影响荷载DNA疫苗的活性,而Na2SO4介导的交联方法操作简单且不影响荷载DNA活性;建立了以壳聚糖浓度0.5%(pH 5.0)、丝素蛋白浓度0.6%,质粒DNA 500μg/mL溶解在2%Na2SO4溶液中的工作条件;SF-CS复合微球DNA疫苗荷载率89.14%,大小1.98μm,对DNaseⅠ的消化有保护作用。免疫后的抗IBDV血清ELISA抗体的检测显示,微球免疫组总体高于质粒疫苗免疫组(P<0.05),而且SF/CS复合微球组免疫反应要略高于单纯CS包被的抗原组。研究表明,丝素蛋白/壳聚糖作为微球佐剂能提高IBDV DNA疫苗的临床免疫效果,有很好的应用前景。 展开更多
关键词 微球疫苗 丝素 壳聚糖 ibdv VP2 4 3 免疫原性
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硫酸化黄芪多糖对CEF生长及抵抗IBDV感染的影响 被引量:10
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作者 黄小燕 胡元亮 +6 位作者 王德云 王君敏 赵晓娜 张帆 郭振环 卢宇 孙峻岭 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期110-114,共5页
采取一步醇沉和分步醇沉法提取4种黄芪多糖APSt、APS40、APS50和APS60,用氯磺酸-吡啶法进行硫酸化修饰,得到4种硫酸化黄芪多糖(sAPS)sAPSt、sAPS40、sAPS50和sAPS60,用MTT法比较了4种硫酸化黄芪多糖对鸡胚成纤维细胞(CEF)的生长及抵抗... 采取一步醇沉和分步醇沉法提取4种黄芪多糖APSt、APS40、APS50和APS60,用氯磺酸-吡啶法进行硫酸化修饰,得到4种硫酸化黄芪多糖(sAPS)sAPSt、sAPS40、sAPS50和sAPS60,用MTT法比较了4种硫酸化黄芪多糖对鸡胚成纤维细胞(CEF)的生长及抵抗鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)感染的影响,以未修饰的APSt为对照。结果显示,APSt显著促进CEF生长,细胞毒性较低,但抵抗鸡传染性法氏囊病毒感染细胞的作用较弱;sAPS抵抗鸡传染性法氏囊病毒感染的作用显著增强,显效浓度降低,但安全浓度也降低。表明通过硫酸化修饰可以提高黄芪多糖的抗病毒活性,但高浓度sAPS的细胞毒性增强。 展开更多
关键词 黄芪多糖 硫酸化修饰 鸡胚成纤维细胞 ibdv感染
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雏鸡混合感染IBDV与CAV的研究 被引量:16
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作者 王笑梅 王秀荣 +1 位作者 邱冬 王积海 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第5期321-324,共4页
实验分为 4组 :空白对照组、CAV感染组、IBDV感染组、IBDV_CAV混合感染组。选择IBDV发病严重期 (6日龄 )与CAV发病严重期 (13日龄 )测定并计算各组鸡的法氏囊、胸腺和体重的比值 ;分离外周血、法氏囊和胸腺中的淋巴细胞 ,加入适量的刀... 实验分为 4组 :空白对照组、CAV感染组、IBDV感染组、IBDV_CAV混合感染组。选择IBDV发病严重期 (6日龄 )与CAV发病严重期 (13日龄 )测定并计算各组鸡的法氏囊、胸腺和体重的比值 ;分离外周血、法氏囊和胸腺中的淋巴细胞 ,加入适量的刀豆蛋白 (ConA)和商陆凝集素 (PAM)作为有丝分裂刺激原 ,利用MTT法检测实验鸡免疫细胞的功能变化 ;统计死亡率 ,绘制死亡曲线。研究发现 ,IBDV与CAV的混合感染较单独感染严重降低了感染鸡免疫活性细胞的增殖功能 ,并同时增强了IBDV或CAV的致病力 ,出现两次死亡高峰 ,病死率达 10 0 %。 展开更多
关键词 ibdv CAV 混合感染
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雏鸡在感染IBDV后血浆cAMP、cGMP和IL-2水平变化 被引量:3
12
作者 陈龙 庞训胜 +2 位作者 毛鑫智 高勤学 殷定忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期157-163,共7页
在经IBD弱毒苗免疫和未免疫的30~59日龄AA鸡研究了感染IBDV后血浆cAMP、cGMP和IL2水平动态变化。结果表明:未免疫攻毒鸡(A组)、免疫攻毒鸡(B组)和未免疫未攻毒鸡(C组)在IBDV攻毒前1天血浆c... 在经IBD弱毒苗免疫和未免疫的30~59日龄AA鸡研究了感染IBDV后血浆cAMP、cGMP和IL2水平动态变化。结果表明:未免疫攻毒鸡(A组)、免疫攻毒鸡(B组)和未免疫未攻毒鸡(C组)在IBDV攻毒前1天血浆cAMP和cGMP水平B组明显高于A和C组,cAMP/cGMP比值同样是B组高于或明显高于A和C组,IL2水平三组之间无明显差异。在攻毒后的头5天内,B和C组cAMP明显升高,而A组没有类似的变化,第5天明显低于B和C组,以后B和C组仍高于或显著高于攻毒前和同期A组水平。在攻毒后A和B组cGMP均呈波动性上升趋势,第7天明显高于攻毒前水平并高于C组,以后A、B、C三组均下降,但A组比B和C组下降更快。在攻毒后28天内,A组cAMP/cGMP比值无明显变化,B组波动上升,C组处于高水平上,B和C组均高于或明显高于A组。血浆IL2水平A和B组在IBDV攻毒后的头7天内呈逐渐下降趋势,但A组下降的更剧烈,C组无明显差异性变化,三组相比,B和C组均高于或明显高于A组,以后A和B组逐渐回升。 展开更多
关键词 雏鸡 ibdv 血浆 cAMP CGMP IL-2 法氏囊病
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IBDV逆转录-聚合酶链反应和核酸杂交检测方法的研究 被引量:5
13
作者 王永山 周宗安 +3 位作者 翟春生 顾志香 王元伦 方元 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期12-14,共3页
以建立的传染性法氏囊病病毒(IBDV)逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和核酸杂交检测方法,检测了细胞培养物、病理组织、粪便和饲料中的IBDV,并与IBDV夹心ELISA、琼脂扩散试验(ID)和病毒分离方法进行了平... 以建立的传染性法氏囊病病毒(IBDV)逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和核酸杂交检测方法,检测了细胞培养物、病理组织、粪便和饲料中的IBDV,并与IBDV夹心ELISA、琼脂扩散试验(ID)和病毒分离方法进行了平行比较试验。结果表明,RT-PCR和核酸杂交检测方法具有高度的敏感性和特异性,是深入研究IBD流行病学。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 核酸杂交 ibdv 检测
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感染IBDV雏鸡血液激素水平和ANAE阳性淋巴细胞动态变化 被引量:5
14
作者 陈龙 庞训胜 +2 位作者 高勤学 殷定忠 邹叔和 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期22-25,共4页
为探讨内分泌活动及细胞免疫反应在鸡抗传染性法氏囊病毒(IBDV)感染中的调节作用机制而进行了本研究。结果表明,攻毒后1~5d内,未免疫攻毒鸡(A组)、免疫攻毒鸡(B组)血浆皮质酮均明显上升,而未免疫未攻毒鸡(C组)则... 为探讨内分泌活动及细胞免疫反应在鸡抗传染性法氏囊病毒(IBDV)感染中的调节作用机制而进行了本研究。结果表明,攻毒后1~5d内,未免疫攻毒鸡(A组)、免疫攻毒鸡(B组)血浆皮质酮均明显上升,而未免疫未攻毒鸡(C组)则否。A、B、C3组血浆T4水平攻毒前后无明显变化,T3除在攻毒后第3天A组明显高于B、C组外,其他时间无明显差异性变化。血液ANAE阳性淋巴细胞(%)在攻毒后的1~5d内,A组和B组明显下降,以后回升,至28d回复到攻毒前水平,并接近于C组。A组的ANAE阳性淋巴细胞(%)与皮质酮呈显著负相关,与T3和T4无明显相关性。 展开更多
关键词 雏鸡 ibdv 血液 激素 淋巴细胞 相关性
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高亲和力抗IBDV单克隆抗体的产生与免疫学鉴定 被引量:5
15
作者 杨艳艳 张改平 +2 位作者 郭军庆 陈凤民 袁麦顺 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第7期384-386,共3页
目的:生产高亲和力的抗IBDV不同抗原决定簇的单克隆抗体,为IBD的快速检测准备试剂。方法:用IBDV抗原诱导Balb/c小鼠产生最强最适当的反应,将免疫脾细胞与NSO瘤细胞融合,通过对大量的杂交细胞培养上清进行检测和鉴定,筛选出分泌高... 目的:生产高亲和力的抗IBDV不同抗原决定簇的单克隆抗体,为IBD的快速检测准备试剂。方法:用IBDV抗原诱导Balb/c小鼠产生最强最适当的反应,将免疫脾细胞与NSO瘤细胞融合,通过对大量的杂交细胞培养上清进行检测和鉴定,筛选出分泌高亲和力单克隆抗体的杂交瘤细胞。结果:获得分泌高亲和力单克隆抗体的杂交瘤21株,其中4株YNZ-1、YNZ-12、YNZ-8和YNZ-26的间接ELISA效价分别为:1:2560、1:1280、1:2560、1:640;腹水间接ELLSA效价分别为:1×10-6、5×10-5、1×10-6和1×10-5。结论:单抗YNZ-1和YNZ-18、YNZ-12和YNZ-26亲和力高,识别IBDV不同的抗原决定簇,可作为制备快速诊断IBD的特异单克隆抗体。 展开更多
关键词 ibdv 单克隆抗体 亲和力 抗原决定簇 制备
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中药提取物对IBDV感染SPF鸡的防治效果 被引量:5
16
作者 朱买勋 唐红梅 +2 位作者 闫志强 陈春林 翟少钦 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期25-31,共7页
为了确定中药提取物对IBDV感染的防治效果,将150羽SPF雏鸡随机分为对照组、模型组和中药提取物高、中、低剂量组,中药提取物高、中、低剂量组分别在饮水中添加10.0、5.0、2.5 g/L的中药提取物,连续添加7 d,对照组和模型组不添加任何药... 为了确定中药提取物对IBDV感染的防治效果,将150羽SPF雏鸡随机分为对照组、模型组和中药提取物高、中、低剂量组,中药提取物高、中、低剂量组分别在饮水中添加10.0、5.0、2.5 g/L的中药提取物,连续添加7 d,对照组和模型组不添加任何药物。给药后,除对照组外,其余组雏鸡分别通过滴鼻接种IBDV,攻毒后连续观察2周。统计雏鸡的成活率,荧光定量PCR检测IBDV在组织中的载量,分析病毒在脏器中的分布。结果显示:中药提取物能提高雏鸡成活率,高、中、低剂量组雏鸡成活率分别为86.67%、93.33%和70.00%,高剂量组雏鸡脾脏和法氏囊指数显著降低,中剂量组的胸腺和法氏囊指数显著降低。高、中剂量组脾脏、胸腺、法氏囊病毒载量极显著低于模型组,脾脏、胸腺病毒载量极显著低于低剂量组,法氏囊病毒载量显著低于低剂量组。表明中药提取物能提高雏鸡的成活率,促进IBDV核酸转阴,改善脾脏、胸腺、法氏囊等免疫器官状况,降低病毒在脾脏、法氏囊、胸腺的载量,且中剂量组效果优于其他剂量组。 展开更多
关键词 SPF雏鸡 ibdv 中药提取物 抗病能力 病毒载量
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中药复方提取物对IBDV感染SPF鸡抗氧化和抗炎能力的影响 被引量:9
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作者 游斌杰 翟少钦 朱买勋 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期462-466,共5页
将150羽SPF雏鸡随机分为5组,即对照组(CK)、病毒感染模型组(MC)、中药提取物高、中、低剂量组(T1、T2、T3),T1、T2、T3组试验鸡分别按照10.0、5.0、2.5g/L的剂量在饮水中添加中药提取物(由2∶2∶1∶1质量比的女贞子、黄芪、枸杞子、菟... 将150羽SPF雏鸡随机分为5组,即对照组(CK)、病毒感染模型组(MC)、中药提取物高、中、低剂量组(T1、T2、T3),T1、T2、T3组试验鸡分别按照10.0、5.0、2.5g/L的剂量在饮水中添加中药提取物(由2∶2∶1∶1质量比的女贞子、黄芪、枸杞子、菟丝子组成),连续添加7d,CK和MC不添加任何药物,给药完成后,对照组滴鼻生理盐水,其他各组雏鸡分别通过滴鼻接种IBDV,攻毒后连续观察7 d,检测抗氧化指标(T-SOD、GSH-Px、T-AOC、MDA)和炎性因子(NO、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6)的分泌量,检测脾淋巴细胞i NOS、NF-κB、MCP-1基因m RNA表达量。结果显示:T1和T2试验鸡抗氧化能力均提高,血清中GSH-Px活力和T-AOC极显著高于MC的(P<0.01),MDA含量显著低于MC的(P<0.05),T2试验鸡血清中T-SOD活力显著高于MC的(P<0.05);T1和T2试验鸡炎症反应明显减少,血清中NO、TNF-ɑ、IL-1β含量均极显著低于MC的(P<0.01),NO和TNF-ɑ含量显著低于T3的(P<0.05),IL-1β含量显著或极显著低于T3的,IL-6含量显著高于T3和MC的(P<0.05);T1和T2试验鸡脾淋巴细胞中i NOS m RNA表达量显著低于MC的(P<0.05),NF-κB和MCP-1 m RNA表达量极显著低于MC的(P<0.01)。表明中药提取物可能通过增强雏鸡的抗氧化能力,促进炎性相关因子的分泌和调节基因表达实现抗炎效果来抵抗IBDV。 展开更多
关键词 SPF雏鸡 传染性法氏囊病病毒(ibdv) 中药复方提取物 抗氧化 炎性因子
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复方中药对蛋雏鸡感染IBDV后免疫器官的形态学影响 被引量:4
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作者 张乐萃 王金宝 +3 位作者 张宗敏 马端忠 孙月平 宋玉芹 《中国家禽》 北大核心 1998年第9期10-11,共2页
200只30日龄健康海兰蛋雏鸡随机分为四组,每组50只。A组饲料中添加复方中药,接种IBDV;B组饲料中添加中药,接种IBDV;C组不添加中药,接种IBDV;D组不作任何处理为对照组。在接种后7d剖检、取材作石蜡切片... 200只30日龄健康海兰蛋雏鸡随机分为四组,每组50只。A组饲料中添加复方中药,接种IBDV;B组饲料中添加中药,接种IBDV;C组不添加中药,接种IBDV;D组不作任何处理为对照组。在接种后7d剖检、取材作石蜡切片,观察鸡免疫器官的形态学变化。结果表明,传染性IBD野毒可使鸡免疫器官发育不良,主要导致法氏囊的淋巴细胞变性坏死,抑制免疫活性细胞的生成,导致免疫抑制;中药促进免疫器官发育及免疫活性细胞生成,提高免疫活性,调节免疫抑制,使免疫器官的组织结构保持或恢复正常水平;复方中药抗IBDV感染的效果优于中药。 展开更多
关键词 中药 ibdv 免疫器官 鸡病 形态学
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超强毒IBDV细胞克隆化毒回归鸡后的致病性与VP_2基因高变区的分子变化 被引量:6
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作者 朱瑞良 崔治中 +3 位作者 张纪元 赵静 孙淑红 丁家波 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期353-358,共6页
为了研究超强毒鸡传染性法氏囊病病毒(vvIBDV)的致病性及其VP2基因高变区的分子变化,以vvIBDVGX8/99株囊毒为研究对象,将该毒在SPF鸡胚连传10代后,再在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续盲传。该病毒在CEF上传至22代时开始引发CEF细胞病变,随之... 为了研究超强毒鸡传染性法氏囊病病毒(vvIBDV)的致病性及其VP2基因高变区的分子变化,以vvIBDVGX8/99株囊毒为研究对象,将该毒在SPF鸡胚连传10代后,再在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续盲传。该病毒在CEF上传至22代时开始引发CEF细胞病变,随之在96孔细胞培养板上用无限稀释法连续克隆2次后获得了4个病毒克隆,再将该4个病毒克隆分别连续回传3~5周龄SPF鸡10代。分别比较4个克隆毒及其回传SPF鸡后不同传代毒,对4~6周龄SPF鸡的致病性及VP2高变区氨基酸分子的变化,结果表明,4个克隆化毒的细胞培养毒对SPF鸡只有0~6 7%的致死率,不同克隆毒的SPF鸡传代毒对SPF鸡的致病性却都逐渐增强,但程度差异很大,其中克隆#5在回鸡1、5和10代后的致死率从0分别增加到10%、20%和27%;克隆#4从6 7%增加至13%、17%和23%;但克隆#1和#3的致病性变化相对较小。相对于原始囊毒及鸡胚毒,4个克隆化毒在测序的VP2高变区的约145个氨基酸中,有10个位点发生了相同的变异,变得与适应细胞的疫苗毒D78株基本一致,在回鸡传代导致对鸡毒力增强的过程中,这10个位点中大多数氨基酸不再变化,只有第253位和256位氨基酸从囊毒的Q和I变为细胞适应毒的H和V后,有些病毒克隆回鸡至第10代时又变为原囊毒的Q和I。 展开更多
关键词 SPF鸡 ibdv 超强毒 致病性 VP2基因 传代 GX8/99株 克隆 分子变化 高变区
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IBDV强、弱毒VP2诱饵载体构建及在酵母双杂交系统中自激活作用的检测 被引量:3
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作者 李铁强 高玉龙 +3 位作者 高宏雷 邓小芸 王笑梅 王立群 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期1-4,共4页
采用Gateway技术将鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)Gx株和Gt株vp2基因分别克隆到载体pDEST-32构建诱饵载体,通过酶切和PCR鉴定并测序正确后,用醋酸锂法转化酵母菌株MaV203,通过缺陷型平板筛选和X-gal颜色筛选检测诱饵载体有无自激活作用。... 采用Gateway技术将鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)Gx株和Gt株vp2基因分别克隆到载体pDEST-32构建诱饵载体,通过酶切和PCR鉴定并测序正确后,用醋酸锂法转化酵母菌株MaV203,通过缺陷型平板筛选和X-gal颜色筛选检测诱饵载体有无自激活作用。结果表明,成功构建了诱饵载体pDEST-32-Gxvp2和pDEST-32-Gtvp2,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活作用。为下一步利用酵母双杂交方法从鸡法氏囊B淋巴细胞和鸡胚成纤维细胞cDNA表达文库中筛选与强、弱毒VP2诱饵载体作用的分子奠定了基础。 展开更多
关键词 ibdv 酵母双杂交 诱饵载体 自激活
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