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hsMAD2基因及Nocodazole对人肝癌细胞生长和细胞周期的影响 被引量:4
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作者 李擒龙 王文亮 +8 位作者 张晓晖 晏伟 成胜权 郭双平 王文勇 张志培 王丽 严晓昱 张静 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期590-594,共5页
目的观察hsMAD2过表达以及联合Nocodazole处理对HepG2细胞的生长和细胞周期的影响。方法将人全长hs-MAD2基因经脂质体包裹转染肝细胞肝癌HepG2细胞,经G418筛选期获得转基因癌细胞克隆,采用免疫细胞化学法、Westernblot方法检测hsMAD2的... 目的观察hsMAD2过表达以及联合Nocodazole处理对HepG2细胞的生长和细胞周期的影响。方法将人全长hs-MAD2基因经脂质体包裹转染肝细胞肝癌HepG2细胞,经G418筛选期获得转基因癌细胞克隆,采用免疫细胞化学法、Westernblot方法检测hsMAD2的表达情况。观察细胞形态、测量生长曲线和分裂指数曲线,观察hsMAD2基因对HepG2细胞生长和细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测HepG2细胞周期的变化。然后观察在纺锤体阻滞剂50nmol/L Nocodazole作用下,hs-MAD2对HepG2细胞的影响。结果稳定表达外源性hsMAD2蛋白的HepG2细胞生长速度和细胞增殖能力并无变化;流式细胞仪检测结果显示HepG2-hsMAD2细胞周期G2、S期比例增加,而G1期细胞比例下降,但差异无显著性。经过nocodazole处理后,HepG2-hsMAD2细胞生长速度下降,差异具有显著性,细胞周期出现G2期阻滞。相反,HepG2在受到Nocodazole处理后无明显变化。结论单纯过表达外源性hsMAD2对细胞无影响。由于hsMAD2蛋白发挥了细胞周期关卡作用,使受到No-codazole破坏作用的细胞出现细胞周期的阻滞。 展开更多
关键词 肝肿瘤 hsmad2基因 NOCODAZOLE 基因转染 细胞周期
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纺锤体组装关卡基因hsMAD2在人肝细胞肝癌中的表达及其意义 被引量:2
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作者 李擒龙 王文亮 +1 位作者 张晓晖 晏伟 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第9期1326-1328,共3页
目的:探讨人原发性肝细胞肝癌中纺锤体组装关卡hsMAD2蛋白的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学 SABC法检测了hsMAD2在39例HCC组织、26例肝硬化组织和3例HCC细胞系的表达情况,并分析了其阳性率与HCC病理分级的关系。结果:59%(23/39)... 目的:探讨人原发性肝细胞肝癌中纺锤体组装关卡hsMAD2蛋白的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学 SABC法检测了hsMAD2在39例HCC组织、26例肝硬化组织和3例HCC细胞系的表达情况,并分析了其阳性率与HCC病理分级的关系。结果:59%(23/39)的HCC组织表达hsMAD2,而癌旁肝组织的阳性率为100%(15/15);肝硬化为92%(24/26),3例HCC细胞系均未见表达.hsMAD2在HCC中表达率与HCC 病理分级无关,而在癌组织与癌旁肝组织(x^2=6.888,P<0.01)、肝硬化组织(x^2=8.656,P<0.01)之间的差异具有显著性。结论:hsMAD2在HCC组织中的表达率相对于癌旁肝组织和肝硬化组织显著降低,提示该蛋白的表达可能与早期HCC发生相关。 展开更多
关键词 纺锤体组装关卡基因 hsmad2蛋白 肝细胞肝癌 免疫组织化学SABC法 肝硬化
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急性白血病中有丝分裂关卡基因hsMAD2表达的分析 被引量:1
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作者 张晓晖 黄高升 +1 位作者 谢学军 李擒龙 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第17期1570-1573,共4页
目的 检测 17例急性白血病病例中有丝分裂关卡基因 hs MAD2的表达 .方法 采取 17例急性白血病患者骨髓或外周血 ,分离单个核细胞 ,用 RT- PCR和 Western blot的方法检测 hs MAD2基因的表达 ,并与正常外周血单个核细胞进行对照 .结果 ... 目的 检测 17例急性白血病病例中有丝分裂关卡基因 hs MAD2的表达 .方法 采取 17例急性白血病患者骨髓或外周血 ,分离单个核细胞 ,用 RT- PCR和 Western blot的方法检测 hs MAD2基因的表达 ,并与正常外周血单个核细胞进行对照 .结果  RT- PCR分析表明 ,14例急性非淋巴细胞白血病病例中的 9例、3例急性淋巴细胞白血病中的 1例 hs MAD2表达与正常对照相比有显著下降 . Western blot证实了在 8例急性非淋巴细胞性白血病病例中有 4例表达有明显下降 ,与 RT-PCR半定量分析结果一致 .结论  hs MAD2基因是白血病的肿瘤相关基因 ,可能在白血病发病中具有重要作用 . 展开更多
关键词 急性白血病 有丝分裂 hsmad2表达
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结肠癌中有丝分裂关卡基因hsMAD2表达的分析
4
作者 施琼 翁亚光 +4 位作者 蒋洪彦 徐远久 刘子杰 刘青松 蔡燕 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第3期247-249,共3页
目的:研究结肠癌组织中有丝分裂关卡基因HsMAD2的表达。方法:采用定量real-timeRT-PCR方法检测18例结肠癌及正常结肠组织中hsMAD2基因表达水平。结果:以hsMAD2基因mRNA拷贝数/GAPDH基因mRNA拷贝数比值为hs-MAD2基因mRNA水平的相对定量... 目的:研究结肠癌组织中有丝分裂关卡基因HsMAD2的表达。方法:采用定量real-timeRT-PCR方法检测18例结肠癌及正常结肠组织中hsMAD2基因表达水平。结果:以hsMAD2基因mRNA拷贝数/GAPDH基因mRNA拷贝数比值为hs-MAD2基因mRNA水平的相对定量值。结肠癌和正常组织中的hsMAD2基因mRNA拷贝数/GAPDH基因mRNA拷贝数比值分别为0.1235±0.0752和0.0312±0.0598。hsMAD2基因的表达水平在结肠癌中显著高于正常结肠组织。结论:hsMAD2基因在结肠癌组织中的高表达,可能与癌细胞的异常增殖有关,是结肠癌发生发展的原因,可为临床结肠癌的治疗提供有效的靶点。 展开更多
关键词 hsmad2基因 定量RT-PCR 结肠癌
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hsMAD2在染色体异常自然流产胚胎中的表达
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作者 陈鑫苹 何旺 +4 位作者 符生苗 龚护民 陈安琴 徐卫华 马志超 《中国妇幼保健》 CAS 2015年第25期4339-4342,共4页
目的探讨hs MAD2蛋白及基因表达水平在人类胚胎染色体分离中的变化情况。方法选取2009年3月~2013年10月该院收治的50例自然流产患者,利用荧光原位杂交(FISH)方法对患者胚胎绒毛染色体数目进行检测,根据染色体数目将患者分为正常组和... 目的探讨hs MAD2蛋白及基因表达水平在人类胚胎染色体分离中的变化情况。方法选取2009年3月~2013年10月该院收治的50例自然流产患者,利用荧光原位杂交(FISH)方法对患者胚胎绒毛染色体数目进行检测,根据染色体数目将患者分为正常组和异常组,分别利用蛋白免疫印迹(Western blotting)和荧光逆转录聚合酶链反应(q PCR)对两组患者胚胎绒毛组织中的hs MAD2蛋白和基因水平进行检测。结果 50例自然流产患者的胚胎中存在染色体异常28例(56.0%),检出嵌合体8例(16.0%)。异常组胚胎绒毛中hs MAD2蛋白水平为(0.88±0.20),基因水平为(23.46±0.07),这与正常组相对应的(0.61±0.19)和(18.35±0.10)比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论染色体的数目异常与自然流产具有密切关联,hs MAD2因子对细胞周期有关卡效应,可阻滞细胞的有丝分裂过程,对维持染色体的正常分离及稳定具有重要作用。 展开更多
关键词 自然流产 胚胎绒毛 染色体异常 hsmad2
原文传递
High Expression of hsMAD2 in the Villi of Spontaneously Aborted Embryo with Chromosomal Abnormality
6
作者 Zaochang Wang Junjie Hu +4 位作者 Wang He Humin Gong Weihua Xu Zhichao Ma Xinping Chen 《Open Journal of Obstetrics and Gynecology》 2021年第6期763-772,共10页
<strong>Objective</strong><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;"><strong>:</strong... <strong>Objective</strong><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;"><strong>:</strong></span></span></span><span><span><span style="font-family:""><span style="font-family:Verdana;"> To investigate the changes of hsMAD2 protein and gene expression levels during chromosome segregation of human embryos. </span><b><span style="font-family:Verdana;">Method</span></b></span></span></span><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;"><b><span style="font-family:Verdana;">:</span></b></span></span><span><span><span style="font-family:""><span style="font-family:Verdana;"> The embryos of spontaneous abortion were collected in our hospital from 2009 to 2013, the chromosomal numbers of the embryonic villi were subsequently detected by fluorescence in situ hybridization (FISH). The patients were then divided into the normal and abnormal groups based on the chromosome number. The hsMAD2 protein and gene expression levels in the villi tissues of the two embryo groups were detected by western blotting and qRT-PCR, respectively. The hsMAD2 protein and gene levels in the embryonic villus tissue of the patient were detected. </span><b><span style="font-family:Verdana;">Results</span></b></span></span></span><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;"><b><span style="font-family:Verdana;">:</span></b></span></span><span><span><b><span style="font-family:""> </span></b></span></span><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;">From 2009 to 2013, we collected 50 embryos from spontaneous abortion patients. The chromosome abnormality and no abnormality were 36 cases (abnormal number of 28 cases (56.0%) and chimerism in 8 cases (16.0%)) and 14 cases (28.0%), respectively.</span></span></span><span><span><span style="font-family:""> </span></span></span><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;">The expression of hsmad2 protein and its gene in the villi of spontaneously aborted embryo with chromosomal abnormality in the abnormal group was significantly higher than that in those without chromosomal abnormalities (0.88 ± 0.20 vs 0.61 ± 0.19, P < 0.05), (23.46 ± 0.07 vs 18.35 ± 0.10, P < 0.05).</span></span></span><span><span><span style="font-family:""> </span></span></span><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;"><b><span style="font-family:Verdana;">Conclusion</span></b></span></span><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;"><b><span style="font-family:Verdana;">:</span></b></span></span><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;"> Abnormal number of chromosomes is closely related to spontaneous abortion Linked, hsMAD2 factor has a card effect on the cell cycle, can block the mitotic process of cells, and play an important role in maintaining the normal separation and stability of chromosomes</span></span></span><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;"><span style="font-family:Verdana;">.</span></span></span> 展开更多
关键词 Spontaneous Abortion Embryonic Villi Chromosomal Abnormality hsmad2
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染色体数目异常自然流产胚胎有丝分裂关卡蛋白基因的研究 被引量:3
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作者 施琼 王箭 +5 位作者 袁泰先 翁亚光 王应雄 徐远久 蔡燕 蒋洪彦 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期197-201,共5页
目的探讨染色体数目异常自然流产胚胎中有丝分裂关卡蛋白(hsMAD2)基因的功能。方法分别用定量PCR和Western blotting在mRNA和蛋白水平检测染色体数目异常(实验组)和正常(对照组)的自然流产胚胎组织中目的基因的表达;构建针对hsMAD2基因... 目的探讨染色体数目异常自然流产胚胎中有丝分裂关卡蛋白(hsMAD2)基因的功能。方法分别用定量PCR和Western blotting在mRNA和蛋白水平检测染色体数目异常(实验组)和正常(对照组)的自然流产胚胎组织中目的基因的表达;构建针对hsMAD2基因的shRNA表达载体,抑制胚胎细胞内源性hsMAD2基因的表达,用Western blotting和定量PCR方法评价shRNA的干扰效果;用MTT法测定细胞增殖率;流式细胞术检测细胞周期。结果hsMAD2蛋白在实验组中的表达显著低于对照组。shRNA的重组质粒表达载体能明显抑制胚胎细胞中hsMAD2基因的表达。胚胎细胞转染有效干扰质粒48 h后,细胞增殖抑制率达58%。有效干扰质粒引起G0/G1期和S期细胞的明显降低,G2/M期细胞增多。结论hsMAD2基因表达下调可能在染色体数目异常的自然流产胚胎发生中起着很重要的作用,为寻找可靠的临床检测指标奠定了基础。 展开更多
关键词 有丝分裂关卡基因 RNA干扰 细胞增殖 染色体数目异常 免疫印迹法
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