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NR/DAPI共染色-荧光计数法测定自来水中的微塑料 被引量：2
1
作者 方源 胡文涛 +4 位作者 汪炎 梅红 宣亮 王伟 袁守军 《工业用水与废水》 CAS 2024年第1期95-100,共6页
为解决现有NR/DAPI共染色-荧光计数法对水样中微塑料(MPs)的高估问题,对水样及实验器具的处理方法进行了优化研究。优化试验结果表明,在500℃条件下对玻璃器皿、滤膜灼烧1 h,可显著减少由实验器具带入样品中的MPs;对自来水样品采用30%H_... 为解决现有NR/DAPI共染色-荧光计数法对水样中微塑料(MPs)的高估问题,对水样及实验器具的处理方法进行了优化研究。优化试验结果表明,在500℃条件下对玻璃器皿、滤膜灼烧1 h,可显著减少由实验器具带入样品中的MPs;对自来水样品采用30%H_(2)O_(2)在V_(H_(2)O_(2))∶VH_(2)O=1∶5条件下消解24 h,可消除水样中有机物引起的结果高估。采用改进的NR/DAPI共染色-荧光计数法对合肥市不同区域自来水样品测定结果表明,样品中MPs的平均浓度范围为350~1250个/L,占比最大的MPs种类为聚乙烯(PE,占比为40%~60%),尺寸小于10μm的MPs占比较高(36%~71%)。自来水样品中的MPs具有显著的时间分布特征,在夜间用水低谷时段供水管网中自来水流速低,小颗粒MPs发生沉降聚集,导致早晨龙头初放水中MPs浓度显著高于其他时段。 展开更多
关键词 NR/dapi共染色 荧光计数法 自来水 微塑料 灼烧 H_(2)O_(2)
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Steedman’s wax包埋切片DAPI染色法证实铝诱导花生根尖细胞程序性死亡 被引量：7
2
作者 邓伦武 黄文静 +4 位作者 何海旺 何虎翼 李创珍 韦善清 何龙飞 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1353-1357,共5页
【目的】检验Steedman’swax包埋切片DAPI染色法是否适用于观察花生根尖细胞核形态。【方法】分别采取100μmol/L AlCl3处理不同时间(0、4、8、12 h)后两个花生品种(铝敏感型中花2号和耐铝型99-1507)的根尖,经过Steedman’s wax包埋切... 【目的】检验Steedman’swax包埋切片DAPI染色法是否适用于观察花生根尖细胞核形态。【方法】分别采取100μmol/L AlCl3处理不同时间(0、4、8、12 h)后两个花生品种(铝敏感型中花2号和耐铝型99-1507)的根尖,经过Steedman’s wax包埋切片等一系列过程,利用荧光染料DAPI染色观察细胞核形态变化。【结果】100μmol/L AlCl3可引起花生根尖细胞核形态发生改变,核质浓缩、核边缘化、呈新月状等,具有明显的PCD特征。花生根尖细胞在铝胁迫下发生PCD,PCD程度与花生耐铝性呈负相关,与处理时间呈正相关。【结论】Steedman’swax包埋切片DAPI染色法是一种快速、高效的适用于观察花生根尖细胞核形态的方法。 展开更多
关键词 花生 铝胁迫 细胞程序性死亡 Steedman’s wax包埋切片 dapi染色
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海带染色体的DAPI染色及核型初步分析 被引量：10
3
作者 刘宇 毕燕会 周志刚 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期50-54,共5页
鉴于海带染色体比较小且数目存在分歧等原因,利用0.2%秋水仙素对海带配子体及孢子体处理10 h左右,经过卡诺试剂固定、多种酶组合处理及30 cm的高位滴片,可以获得质量比较高的海带染色体;使用灵敏度高、特异性强的DNA荧光染料DAPI进行染... 鉴于海带染色体比较小且数目存在分歧等原因,利用0.2%秋水仙素对海带配子体及孢子体处理10 h左右,经过卡诺试剂固定、多种酶组合处理及30 cm的高位滴片,可以获得质量比较高的海带染色体;使用灵敏度高、特异性强的DNA荧光染料DAPI进行染色,结果显示,海带雌、雄配子体的染色体各为31条,孢子体染色体为62条,大多为短杆状或者点状;雌配子体染色体的大小为0.78～2.61μm,稍大于雄配子体(大小为0.57～2.17μm)。根据染色体的大小,对海带配子体的染色体核型进行了初步分析。这些结果为分子标记的染色体定位等细胞学研究奠定了技术基础。 展开更多
关键词 海带 配子体 dapi 染色体 核型 孢子体
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一种用于DAPI染色的方法——Steedman's wax包埋切片法 被引量：9
4
作者 安丽华 尤瑞麟 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第8期1367-1372,共6页
以植物的胚珠和子房为实验材料,介绍一种用Steedman swax包埋对组织切片中的细胞核进行DAPI染色的方法.Steedman swax作为一种低熔点多酯蜡,具有与石蜡相似的性质,切片方法同常规石蜡切片,适合于切成厚度大于5μm的连续切片.Steedman s... 以植物的胚珠和子房为实验材料,介绍一种用Steedman swax包埋对组织切片中的细胞核进行DAPI染色的方法.Steedman swax作为一种低熔点多酯蜡,具有与石蜡相似的性质,切片方法同常规石蜡切片,适合于切成厚度大于5μm的连续切片.Steedman swax包埋的切片能成功地进行DAPI染色.与用压片法和Technovit7100或GMA包埋切片法进行的DAPI染色相比,用Steedman swax包埋切片法进行的DAPI染色具有廉价、操作简便、可进行连续切片、图象清晰等优点,特别在植物细胞程序化死亡 PCD 的研究中及细胞核DNA含量测定方面,有着较大的应用价值和潜能. 展开更多
关键词 Steedman’s WAX 组织切片 dapi 细胞核
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PKH26和DAPI联合示踪骨髓干细胞在脑缺血模型小鼠脑内迁移的实验研究 被引量：3
5
作者 张雪梅 杜芳 +2 位作者 杨丹 户宏艳 付锦 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期296-299,共4页
目的探讨PKH26和DAPI联合标记骨髓干细胞在脑内迁移过程中的示踪作用。方法用PKH26和DAPI联合标记从Balb/c小鼠骨髓中分离出的骨髓单个核细胞(BMMCs),用改良电凝法制备局灶性脑缺血模型后,将标记的BMMCs经尾静脉移植入脑缺血小鼠体内,... 目的探讨PKH26和DAPI联合标记骨髓干细胞在脑内迁移过程中的示踪作用。方法用PKH26和DAPI联合标记从Balb/c小鼠骨髓中分离出的骨髓单个核细胞(BMMCs),用改良电凝法制备局灶性脑缺血模型后,将标记的BMMCs经尾静脉移植入脑缺血小鼠体内,对照组经尾静脉注入PBS。移植2w后取脑组织,通过激光共聚焦荧光显微镜观察BMMCs向脑内迁移的情况。结果实验组小鼠脑组织内可发现PKH26和DAPI双标的神经样细胞。结论 PKH26和DAPI可以联合标记向脑缺血模型小鼠脑组织迁移的骨髓干细胞,为体内示踪骨髓干细胞脑内迁移提供更加准确的实验方法。 展开更多
关键词 PKH26 dapi 骨髓干细胞 脑缺血 BALB/C小鼠
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小鼠骨髓组织细胞微核DAPI染色法 被引量：8
6
作者 张艳芬 许重洁 +1 位作者 杨保胜 刘小学 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第29期5696-5698,共3页
实验将DAPI染色方法运用到小鼠微核检测中。选取20只小鼠随机分为实验组和对照组,每组10只。2组均往小鼠腹腔注射环磷酰胺60mg/kg,1次/d,连续注射3d。实验组采用DAPI染色;对照组采用10%的Giemsa染色。结果显示,实验小鼠骨髓组织细胞微核... 实验将DAPI染色方法运用到小鼠微核检测中。选取20只小鼠随机分为实验组和对照组,每组10只。2组均往小鼠腹腔注射环磷酰胺60mg/kg,1次/d,连续注射3d。实验组采用DAPI染色;对照组采用10%的Giemsa染色。结果显示,实验小鼠骨髓组织细胞微核DAPI染色特异性强,易判断,对照组Giemsa染色结果特异性差,且不能排除染色过程中Giemsa染液中的染色颗粒沉淀的干扰,这样就使Giemsa染色后,对微核的判断造成困难。本实验建立了小鼠骨髓组织细胞微核DAPI染色方法,检测效果好,特异性强。 展开更多
关键词 微核 骨髓组织细胞 dapi染色法
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Hoechst33342与DAPI标记细胞核对胞内活性氧检测效果的比较 被引量：3
7
作者 周玉环 刘树迎 +4 位作者 平苏宁 王晶晶 陈大堤 黄锦桃 李朝红 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期75-78,共4页
目的探讨Hoechst 33342与DAPI两种荧光染料标记细胞核后对细胞内活性氧水平的影响。方法静息培养的血管平滑肌细胞加入晚期糖基化终末产物作用10 min,加入标记活性氧的荧光探针H2DCFDA,再分别加入Hoechst 33342和DAPI不同荧光染料进行... 目的探讨Hoechst 33342与DAPI两种荧光染料标记细胞核后对细胞内活性氧水平的影响。方法静息培养的血管平滑肌细胞加入晚期糖基化终末产物作用10 min,加入标记活性氧的荧光探针H2DCFDA,再分别加入Hoechst 33342和DAPI不同荧光染料进行核标记。荧光显微镜下观察细胞核被标记的数目与细胞内活性氧的荧光水平。结果 Hoechst 33342染料标记5 min后即可见细胞核被标记上,随着时间的延长被标记的核数目并不发生改变;而与之明显不同的是,DAPI染料标记5 min时,只有几个细胞核被标记上,但随着时间的延长被标记的核数目越来越多。Hoechst 33342标记后细胞内活性氧的荧光强度并不随时间的延长发生变化,而DAPI标记后细胞内活性氧绿色荧光的细胞数就越少,DAPI标记的细胞核数与显示活性氧绿色荧光的细胞数呈反比。这些结果提示,DAPI染料在标记细胞核时破坏了活性氧在细胞内的储存,干扰了实验结果。结论检测细胞内活性氧时,应使用Hoechst 33342核标记染料而不能用DAPI。 展开更多
关键词 活性氧 血管平滑肌细胞 Hoechst 33342 dapi
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栉孔扇贝DAPI带型和PI带型研究 被引量：2
8
作者 徐俊 包振民 +3 位作者 任晓亮 王珊 胡丽萍 黄晓婷 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期77-80,102,共5页
选取栉孔扇贝Chlamys farreri担轮幼虫为材料,采用秋水仙素-低渗-空气干燥法制备染色体标本,应用荧光显带技术,分析了DAPI带和PI带在栉孔扇贝染色体上的分布。DAPI带型结果显示,栉孔扇贝所有染色体上都存在DAPI阳性带,主要分布于传统的... 选取栉孔扇贝Chlamys farreri担轮幼虫为材料,采用秋水仙素-低渗-空气干燥法制备染色体标本,应用荧光显带技术,分析了DAPI带和PI带在栉孔扇贝染色体上的分布。DAPI带型结果显示,栉孔扇贝所有染色体上都存在DAPI阳性带,主要分布于传统的着丝粒区和端部区域,另外还存在一些中间区DAPI带及可变带,总带数为62。PI带型结果与DAPI带型结果相似,在所有染色体上都存在PI阳性带。2种带型的阳性带所在位置与异染色质分布区域相吻合。 展开更多
关键词 栉孔扇贝(Chlamys farreri) 染色体 dapi带 PI带
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DAPI染色直接定量测定细菌胞内多聚磷酸盐 被引量：3
9
作者 王鑫 张文 +2 位作者 陈旭 朱雯 杨柳燕 《环境监测管理与技术》 CSCD 2015年第6期40-43,共4页
采用DAPI将细菌胞内或活性污泥中多聚磷酸盐(Polyp)染色,用酶标仪测定DAPI-Polyp复合物发射荧光的强度,以此定量细菌胞内的Polyp。用该方法和镜检法同时测定异染粒含量差异显著的菌株胞内Polyp,2种方法测定结果一致。异染粒含量差异不... 采用DAPI将细菌胞内或活性污泥中多聚磷酸盐(Polyp)染色,用酶标仪测定DAPI-Polyp复合物发射荧光的强度,以此定量细菌胞内的Polyp。用该方法和镜检法同时测定异染粒含量差异显著的菌株胞内Polyp,2种方法测定结果一致。异染粒含量差异不显著的菌株胞内Polyp定量分析表明,该方法灵敏度高于镜检法和废水总磷间接测定法。 展开更多
关键词 多聚磷酸盐 dapi染色 异染粒 聚磷菌 废水 活性污泥
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DAPI标记骨髓间充质干细胞在胶质瘤模型大鼠脑内的迁徙和定位 被引量：3
10
作者 于音 杨洪发 +6 位作者 邵佳甲 邬巍 朱东 姜涛 郭永川 梁前垒 李衍鑫 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第23期4243-4246,共4页
背景:骨髓间充质干细胞作为载体细胞行脑内移植治疗胶质瘤,如何证实其为最好的药物载体?目的:将DAPI标记的大鼠骨髓间充质干细胞移植入模型鼠脑内,观察骨髓间充质干细胞在肿瘤内的迁徙与定位。方法:体外培养骨髓间充质干细胞。利用立体... 背景:骨髓间充质干细胞作为载体细胞行脑内移植治疗胶质瘤,如何证实其为最好的药物载体?目的:将DAPI标记的大鼠骨髓间充质干细胞移植入模型鼠脑内,观察骨髓间充质干细胞在肿瘤内的迁徙与定位。方法:体外培养骨髓间充质干细胞。利用立体定向仪将培养好的C6细胞注入大鼠脑内,建立大鼠脑内胶质瘤模型。将DAPI标记于培养好的骨髓间充质干细胞上,利用微量注射器注入模型鼠脑内;移植后第3,7天处死大鼠,利用共聚焦显微镜观察骨髓间充质干细胞在肿瘤内的分布及与肿瘤细胞的关系。结果与结论:实验成功建立了大鼠脑内胶质瘤模型。以DAPI标记的骨髓间充质干细胞。在模型鼠脑内主动聚集于肿瘤血管周围,并能与肿瘤细胞发生融合。结果证实骨髓间充质干细胞可以作为肿瘤基因治疗的良好载体。 展开更多
关键词 胶质瘤 骨髓间充质干细胞 大鼠 dapi标记 脑
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不同作物染色体DAPI荧光显带的研究 被引量：3
11
作者 徐延浩 高伟 张文英 《吉林农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第2期27-28,51,共3页
对花生、大豆、玉米、芝麻和丝瓜有丝分裂中期染色体进行DAPI荧光显带并比较它们DAPI带纹模式的差异。研究发现,DAPI染色能在花生、玉米染色体上显现清晰的带纹,可进行染色体识别;与花生和玉米相比,芝麻和丝瓜染色体上DAPI带纹反差较弱... 对花生、大豆、玉米、芝麻和丝瓜有丝分裂中期染色体进行DAPI荧光显带并比较它们DAPI带纹模式的差异。研究发现,DAPI染色能在花生、玉米染色体上显现清晰的带纹,可进行染色体识别;与花生和玉米相比,芝麻和丝瓜染色体上DAPI带纹反差较弱,能进行部分染色体识别;在大豆染色体上则没有观察到明显的带纹。这说明染色体DAPI荧光带纹模式存在明显的物种差异。 展开更多
关键词 染色体 荧光显带 作物 dapi
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DAPI联合PKH26标记骨髓干细胞在急性肝脏损伤模型小鼠肝内迁移的示踪作用 被引量：2
12
作者 金世柱 韩明子 +6 位作者 刘冰熔 曲波 宋吉涛 褚艳杰 赵瑞波 黄褀 班翔 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2012年第11期1043-1046,共4页
目的探讨PKH26和DAPI联合标记骨髓干细胞在肝脏组织内迁移过程中的示踪作用。方法用PKH26和DAPI联合标记从Balb/c小鼠骨髓中分离出骨髓干细胞,用CCl4腹腔注射的方法制备小鼠急性肝脏损伤模型后,将标记的BMMC经尾静脉移植入急性肝脏损伤... 目的探讨PKH26和DAPI联合标记骨髓干细胞在肝脏组织内迁移过程中的示踪作用。方法用PKH26和DAPI联合标记从Balb/c小鼠骨髓中分离出骨髓干细胞,用CCl4腹腔注射的方法制备小鼠急性肝脏损伤模型后,将标记的BMMC经尾静脉移植入急性肝脏损伤模型小鼠体内,对照组经尾静脉注入磷酸盐缓冲液(PBS)。移植2周后取肝脏组织,通过激光共聚焦荧光显微镜观察骨髓干细胞向肝脏内迁移的情况。结果接受骨髓干细胞移植组小鼠肝脏组织内可发现DAPI和PKH26双重标记的骨髓干细胞。结论 PKH26和DAPI可以联合标记向急性肝损伤模型肝组织迁移的骨髓干细胞,为体内示踪骨髓干细胞脑内迁移提供更加准确的实验方法。 展开更多
关键词 dapi PKH26 骨髓干细胞
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褐牙鲆、夏鲆及其杂交子代核型与DAPI带型分析 被引量：1
13
作者 隋娟 马道远 +5 位作者 肖志忠 徐世宏 肖永双 武宁宁 刘清华 李军 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期69-74,共6页
为了深入剖析褐牙鲆与夏鲆杂交后代的染色体结构,本研究利用秋水仙素-低渗-空气干燥法制备胚胎染色体和DAPI(4’,6’-diamidino-2-phenylindole)荧光染色的方法,对褐牙鲆(Paralichthys olivaceus)、夏鲆(Paralichthys dentatus)及其正... 为了深入剖析褐牙鲆与夏鲆杂交后代的染色体结构,本研究利用秋水仙素-低渗-空气干燥法制备胚胎染色体和DAPI(4’,6’-diamidino-2-phenylindole)荧光染色的方法,对褐牙鲆(Paralichthys olivaceus)、夏鲆(Paralichthys dentatus)及其正反交子代胚胎细胞的染色体组型和染色质的分布进行了研究。结果表明,褐牙鲆、夏鲆及其正交子代(褐牙鲆♀×夏鲆♂)染色体组均含有48条端部着丝粒染色体,染色体组型公式均为2n=48t,组内染色体长度分布连续,三者核型相似。反交子代(夏鲆♀×褐牙鲆♂)为46条端部着丝粒染色体,比亲本及正交子代少了两条染色体。DAPI荧光染色显示,褐牙鲆1号染色体中的一条染色体有较明显的次缢痕,夏鲆及正反交子代染色体中未见明显次缢痕。褐牙鲆与正交子代染色体着色较为均一,而夏鲆与反交子代着丝粒区域亮度明显增强。 展开更多
关键词 褐牙鲆(Paralichthys olivaceus) 夏鲆(Paralichthys dentatus) 杂交 核型 dapi带型
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MTG-DAPI双染色法观察黄瓜花粉细胞半薄切片中线粒体DNA的研究 被引量：3
14
作者 赵娟 沈佳 +3 位作者 李海梅 娄群峰 李季 陈劲枫 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期27-32,共6页
[目的]MTG(Mito Tracker Green)是一种线粒体特异绿色荧光探针,但是目前还没有研究将MTG应用于细胞的树脂半薄切片中线粒体的荧光染色。分子生物学研究证明黄瓜线粒体是父系遗传但是还没有在细胞学观察中得到进一步证实,因此我们选择MTG... [目的]MTG(Mito Tracker Green)是一种线粒体特异绿色荧光探针,但是目前还没有研究将MTG应用于细胞的树脂半薄切片中线粒体的荧光染色。分子生物学研究证明黄瓜线粒体是父系遗传但是还没有在细胞学观察中得到进一步证实,因此我们选择MTG和DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)2种染料建立适用于黄瓜花粉细胞的树脂半薄切片荧光双染色技术。[方法]树脂半薄切片厚度为0.3μm,切片首先经20 nmol·L-1的MTG染色液处理30 min,然后用0.1μg·m L-1的DAPI溶液染色6 min,即可在荧光显微镜下清楚地显示出线粒体结构及DNA的存在情况。[结果]观察显示:黄瓜贴壁期花粉细胞中生殖细胞内存在线粒体结构及线粒体DNA,表明黄瓜小孢子第一次有丝分裂时没有将线粒体排除在生殖细胞之外,而是被分配到了生殖细胞中,并且此时的线粒体细胞器携带有基因信息。[结论]MTG-DAPI双染色技术可以有效地对黄瓜花粉细胞中生殖细胞核周围的线粒体进行定位,为探索黄瓜线粒体基因父系遗传现象提供技术支持。同时研究也证实了MTG可以对固定后并进行树脂半薄切片的细胞中的线粒体进行着色,扩展了MTG的应用范围。 展开更多
关键词 黄瓜 线粒体 MTG-dapi双染色 半薄切片
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DAPI检测卵泡期绵羊生殖器官中细胞凋亡的比较研究 被引量：1
15
作者 葛晨霞 王龙涛 +2 位作者 李向军 王欣睿 姜怀志 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期109-113,共5页
为探讨在卵泡期绵羊生殖器官中细胞凋亡的作用机制,本试验以小尾寒羊和萨福克羊为研究对象,采用DAPI(4′,6′-联脒-2-苯基吲哚)原位荧光标记技术,对高繁殖力品种小尾寒羊和低繁殖力品种萨福克羊成年母羊卵泡期主要生殖器官(卵巢、输卵... 为探讨在卵泡期绵羊生殖器官中细胞凋亡的作用机制,本试验以小尾寒羊和萨福克羊为研究对象,采用DAPI(4′,6′-联脒-2-苯基吲哚)原位荧光标记技术,对高繁殖力品种小尾寒羊和低繁殖力品种萨福克羊成年母羊卵泡期主要生殖器官(卵巢、输卵管、子宫)进行细胞凋亡的确认与定位。结果显示:小尾寒羊和萨福克羊卵巢中卵泡上皮细胞、颗粒细胞、膜细胞均有凋亡现象。在三级卵泡和成熟卵泡的颗粒细胞和膜细胞中,萨福克羊比小尾寒羊表达出较多数量的凋亡细胞,两品种羊在卵泡期输卵管各部,子宫内膜腺体中几乎均未检测到凋亡细胞,子宫内膜基质中检测到少量细胞发生凋亡。因此,研究表明细胞凋亡是母羊生殖器官变化的重要调节机制,可能与造成两者繁殖力高低差异有关。 展开更多
关键词 绵羊 卵泡期 dapi检测 细胞凋亡
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基于DNA和小沟结合染料DAPI快速检测水样中Hg^(2+) 被引量：2
16
作者 赵秋伶 张振宇 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1477-1481,共5页
设计了一条DNA序列作为专一识别Hg2+的探针,结合小沟结合染料DAPI,构建了一种新型无标记荧光降低型核酸适体传感器。无Hg2+时DNA折叠成稳定的茎-环结构,DAPI插入茎部位有强荧光发射;Hg2+存在时DNA发生结构转变,DAPI释放荧光降低。结果表... 设计了一条DNA序列作为专一识别Hg2+的探针,结合小沟结合染料DAPI,构建了一种新型无标记荧光降低型核酸适体传感器。无Hg2+时DNA折叠成稳定的茎-环结构,DAPI插入茎部位有强荧光发射;Hg2+存在时DNA发生结构转变,DAPI释放荧光降低。结果表明:在最佳实验条件下,体系荧光降低百分数和Hg2+浓度正相关,在较低的浓度范围(0.5~50 nmol/L)仍呈良好的线性关系,实际检出限为0.5 nmol/L。该方法操作简单、对于环境水样中Hg2+的快速实时检测具有潜在的应用前景。 展开更多
关键词 小沟结合染料dapi 荧光传感器 核酸适体 HG^2+
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DAPI标记脐带间充质干细胞在颅脑创伤模型大鼠脑内的迁徙和分布 被引量：1
17
作者 李长栋 孙建军 荔志云 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期615-618,共4页
目的将人脐带间充质干细胞应用DAPI标记后经尾静脉移植入模型鼠体内,观察脐带间充质干细胞在模型鼠体内的迁徙与定位。方法体外培养脐带间充质干细胞。建立大鼠脑外伤模型,将DAPI标记于培养良好的脐带间充质干细胞上,通过尾静脉注入模... 目的将人脐带间充质干细胞应用DAPI标记后经尾静脉移植入模型鼠体内,观察脐带间充质干细胞在模型鼠体内的迁徙与定位。方法体外培养脐带间充质干细胞。建立大鼠脑外伤模型,将DAPI标记于培养良好的脐带间充质干细胞上,通过尾静脉注入模型鼠体内;移植后7d处死大鼠,断头取脑,利用荧光倒置显微镜观察脐带间充质干细胞在模型鼠脑内的分布及与损伤神经元细胞的关系。结果实验成功建立了大鼠脑外伤模型。荧光倒置显微镜观察在模型鼠脑皮质内可见经DAPI标记的脐带间充质干细胞,并能与损伤神经元细胞发生融合。结论人脐带间充质干细胞移植入宿主体内后可存活并迁徙至损伤的部位。 展开更多
关键词 颅脑外伤 人脐带间充质干细胞 dapi标记
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SPIO、DAPI双重标记猕猴骨髓间充质干细胞：对细胞活性及增殖的影响 被引量：3
18
作者 宋巧巧 周慧良 潘兴华 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第36期5741-5745,共5页
背景:传统的细胞移植示踪方法均需要在体外状态下进行组织学切片鉴定和分析,这显然限制了干细胞移植进入临床应用,因此,探索无创的、可多次重复应用的活体示踪方法已成为迫切亟待解决的问题。目的:观察SPIO和DAPI双标记猕猴骨髓间充质... 背景:传统的细胞移植示踪方法均需要在体外状态下进行组织学切片鉴定和分析,这显然限制了干细胞移植进入临床应用,因此,探索无创的、可多次重复应用的活体示踪方法已成为迫切亟待解决的问题。目的:观察SPIO和DAPI双标记猕猴骨髓间充质干细胞的效果及对干细胞存活、增殖的影响。方法:全骨髓贴壁法分离培养猕猴骨髓间充质干细胞,并采用流式细胞术对骨髓间充质干细胞进行鉴定。用SPIO和DAPI双标记骨髓间充质干细胞,通过荧光显微镜观察DAPI标记阳性率,普鲁士蓝染色和透射电镜鉴定SPIO标记阳性率,MTT检测标记细胞的活性、增殖能力。结果与结论:采用全骨髓贴壁法成功获得高纯度猕猴骨髓间充质干细胞,纯度达95.1%。SPIO和DAPI成功标记骨髓间充质干细胞,标记阳性率达95%-98%,且对干细胞的活性、增殖无影响。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 细胞标记 骨髓间充质干细胞 猕猴 SPIO dapi 国家自然科学基金
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DAPI染色法快速检测细胞培养中支原体的污染 被引量：1
19
作者 曾星 陈兆聪 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期126-128,150,共4页
利用DAPI与DNA特异结合进行简单,快速而灵敏地检测细胞培养中污染的支原体,检测被支原体污染的单层细胞整个过程不到三十分钟,就能判定培养物中是否有支原体污染,本方法可以成为一般实验室的常规方法。
关键词 支原体 细胞培养 dapi
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大肠杆菌O157:H7体内多聚磷酸盐的DAPI荧光定量检测 被引量：1
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作者 杜艳丽 韩宗利 +1 位作者 王湘雨 万成松 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期344-350,共7页
目的应用荧光剂DAPI探索一种直接定量大肠杆菌O157:H7无机多聚磷酸盐(polyP)的可靠方法。方法提取并纯化大肠杆菌O157:H7野生株DNA,DAPI与DNA、polyP45结合,测定360 nm和415 nm激发光的发射光谱;应用共聚焦显微镜,观察细菌DAPI-DNA和DAP... 目的应用荧光剂DAPI探索一种直接定量大肠杆菌O157:H7无机多聚磷酸盐(polyP)的可靠方法。方法提取并纯化大肠杆菌O157:H7野生株DNA,DAPI与DNA、polyP45结合,测定360 nm和415 nm激发光的发射光谱;应用共聚焦显微镜,观察细菌DAPI-DNA和DAPI-polyP复合物荧光,验证DAPI检测polyP的可行性;细菌液氮速冻溶解、-80℃速冻溶解、-20℃速冻溶解、60℃加热10 min、Triton x-100作用、室温下放置后倍比稀释涂平板,观察6种方法对细菌存活的影响;与DAPI作用后,测定荧光值,确定细胞膜通透性的最佳前处理方法;建立标准曲线,测定EHEC野生株、ppk1两个突变株polyP含量。结果应用360 nm激发波长,DAPI-DNA最大发射波长为460 nm;应用415 nm激发波长,DAPI-polyP最大发射波长为550 nm;应用405 nm激发光,收集DAPI-DNA蓝色荧光(425～475 nm),应用488 nm激发光,收集DAPI-polyP绿色荧光(500～560 nm);最佳细菌前处理方法为-80℃速冻后室温下自然溶解;标准曲线为Y=1849X+127.5(R2=0.991),测定各株菌polyP量,其中野生株显著高于ppk1缺失突变株。结论 DAPI荧光定量检测方法具有直接、可靠、易于操作、定量检测等特点,可为进一步研究polyP在肠出血型大肠埃希菌O157:H7中的作用提供技术支持。 展开更多
关键词 无机多聚磷酸盐 dapi染色 大肠杆菌O157:H7
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