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抗虫基因CryIA(b)植物表达载体的构建 被引量：1
1
作者 易善军 陈少瑜 +4 位作者 程在全 孙一丁 王寅冰 陈芳 吴涛 《西部林业科学》 CAS 2008年第2期86-90,共5页
苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因具有对鳞翅目昆虫的毒杀作用,因此被广泛用于转基因研究,以提高植物的抗虫能力。故以含有CryIA(b)基因的PKUB质粒为模板,利用PCR技术克隆出抗虫基因〔CryIA(b)〕,将其构建到PGEMT-Easy上,获得重组质粒PGE... 苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因具有对鳞翅目昆虫的毒杀作用,因此被广泛用于转基因研究,以提高植物的抗虫能力。故以含有CryIA(b)基因的PKUB质粒为模板,利用PCR技术克隆出抗虫基因〔CryIA(b)〕,将其构建到PGEMT-Easy上,获得重组质粒PGEMT-CryIA(b),并测定全部序列,将PGEMT-CryIA(b)用BamH I和Sm aI酶切后插入表达载体PB I121的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,构建成准备用于丽江云杉等针叶树种遗传转化CryIA(b)基因的植物表达载体PB I-CryIA(b),采用液氮冻融法将其转化到根癌农杆菌LBA4404和C58中,为下一步的转化工作奠定了基础。 展开更多
关键词 抗虫基因 cryia(b)基因 植物表达载体
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利用Bt基因和Xa21基因转化获得抗螟虫、白叶枯病的转基因水稻 被引量：6
2
作者 王爱菊 姚方印 +5 位作者 温孚江 朱常香 李广贤 杨磊 朱其松 张洪瑞 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期857-860,共4页
利用水稻的愈伤组织作受体 ,采用 PIG基因枪法 ,首先成功地将 Bt基因 [cry IA(b) ]连同抗除草剂 bar基因导入栽培水稻品种中国 91,选育出纯合稳定的株系 T91系。然后将 T91系与黄淮区主栽品种豫粳 6号杂交 ,并辅以标记基因选择 ,选育出... 利用水稻的愈伤组织作受体 ,采用 PIG基因枪法 ,首先成功地将 Bt基因 [cry IA(b) ]连同抗除草剂 bar基因导入栽培水稻品种中国 91,选育出纯合稳定的株系 T91系。然后将 T91系与黄淮区主栽品种豫粳 6号杂交 ,并辅以标记基因选择 ,选育出纯合稳定、综合性状优良的转 Bt基因株系 C48。利用农杆菌介导的转化系统将 X a2 1基因转入 C48,根据标记基因测定 ,转基因植株的 PCR和 Southern分析 ,田间抗病虫性鉴定 ,获得了双抗 (螟虫、白叶枯病 ) 展开更多
关键词 bT基因 XA21基因 螟虫 白叶枯病 水稻 遗传转化 基因枪
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玉米粉中转基因Bt176玉米的定量检测 被引量：8
3
作者 潘良文 陈家华 +2 位作者 罗达 喻德跃 冯献忠 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第6期463-467,共5页
使用根据转基因Bt176玉米中的外源基因CryIA(b)和内源基因Zein设计的引物和TaqMan荧光探针和ABIPRISM 770 0定量PCR仪对玉米粉中Bt176玉米的含量进行了定量检测 ,建立了Bt176玉米参照样品CryIA(b)和Zein的Ct值之差与样品中Bt176玉米含... 使用根据转基因Bt176玉米中的外源基因CryIA(b)和内源基因Zein设计的引物和TaqMan荧光探针和ABIPRISM 770 0定量PCR仪对玉米粉中Bt176玉米的含量进行了定量检测 ,建立了Bt176玉米参照样品CryIA(b)和Zein的Ct值之差与样品中Bt176玉米含量之间的标准曲线和线性回归方程 。 展开更多
关键词 转基因食品 玉米粉 转基因bt176玉米 定量检测
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PEG-CaCl_2介导苏云金杆菌CryⅠA(b)基因转化哈茨木霉 被引量：4
4
作者 高兴喜 杨谦 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1333-1336,共4页
为构建兼具杀虫防病双重功效的工程菌株，通过PEG-CaCl2介导的原生质体法将来自苏云金芽孢杆菌的CryIA（b）基因导入生防真菌哈茨木霉中．转化频率约为2～3个转化子／雌质粒DNA.Southern blot和RT-PCR检测结果表明，CryIA（b）基因已经... 为构建兼具杀虫防病双重功效的工程菌株，通过PEG-CaCl2介导的原生质体法将来自苏云金芽孢杆菌的CryIA（b）基因导入生防真菌哈茨木霉中．转化频率约为2～3个转化子／雌质粒DNA.Southern blot和RT-PCR检测结果表明，CryIA（b）基因已经整合到哈茨木霉基因组DNA中，并且在转录水平上得到了表达．各转化子都能够稳定遗传．对转化子的抑菌活性和杀虫活性检测结果表明，转化子不但保持了野生菌株的抑菌活性，而且表现出了一定的杀虫效果．转化子Tp1和Tp2对玉米螟幼虫的矫正死亡率分别为75．00％和72．75％．杀虫防病哈茨木霉工程菌株的构建为研究和开发新型微生物农药探索了新的诛径． 展开更多
关键词 哈茨木霉 苏云金杆菌 cryia(b)基因 遗传转化
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抗烟青虫转基因烟草的培育 被引量：4
5
作者 高明尉 颜启传 +3 位作者 舒庆尧 梁竹青 崔海瑞 成雄鹰 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期388-392,共5页
烟青虫属鳞翅目（Ｌｅｐｉｄｏｐｔｅｒａ）昆虫。前人研究表明，苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）中的Ｂｔ毒蛋白对其具有很强的毒杀作用。设法将Ｂｔ基因导入到烟草中，是防治这类虫害的一种有效途径。８０年... 烟青虫属鳞翅目（Ｌｅｐｉｄｏｐｔｅｒａ）昆虫。前人研究表明，苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）中的Ｂｔ毒蛋白对其具有很强的毒杀作用。设法将Ｂｔ基因导入到烟草中，是防治这类虫害的一种有效途径。８０年代后期以来，为了提高Ｂｔ基因在植物... 展开更多
关键词 转基因烟草 bT基因 农杆菌 介导法 烟青虫
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根癌农杆菌介导的高粱遗传转化体系的研究 被引量：3
6
作者 林凤 石太渊 +2 位作者 赵淑华 王小光 苗则彦 《生物技术》 CAS CSCD 2004年第1期13-14,共2页
采用根癌农杆菌介导法将杀虫晶体蛋白基因cryIA(b)转入高粱胚性愈伤组织中 ,建立农杆菌转化高粱的遗传转化体系 ,获得 70棵再生植株。经GUS及PCR检测 ,结果表明 ,cryIA(b)基因确实转移到高粱恢复系 0 - 30中 ,报告基因GUS在再生植株中... 采用根癌农杆菌介导法将杀虫晶体蛋白基因cryIA(b)转入高粱胚性愈伤组织中 ,建立农杆菌转化高粱的遗传转化体系 ,获得 70棵再生植株。经GUS及PCR检测 ,结果表明 ,cryIA(b)基因确实转移到高粱恢复系 0 - 30中 ,报告基因GUS在再生植株中也得到表达。转化植株的抗病性鉴定正在进行中。 展开更多
关键词 杀虫晶体蛋白基因 根癌农杆菌介导 高粱恢复系 遗传转化
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