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中药复方多靶点治疗流行性感冒的临床价值提升策略 被引量：1
1
作者 明雨 王忠 王永炎 《成都中医药大学学报》 2025年第1期1-8,共8页
流行性感冒是一种具有高度传染性的急性呼吸道疾病,呈现季节性流行的特征,具有严重的致病性和高病死率。流感病毒的高变异性使疫苗难以有效、及时接种,逐渐出现的药物耐药性问题也给流感治疗带来巨大的挑战。中药复方药物能作用于多个... 流行性感冒是一种具有高度传染性的急性呼吸道疾病,呈现季节性流行的特征,具有严重的致病性和高病死率。流感病毒的高变异性使疫苗难以有效、及时接种,逐渐出现的药物耐药性问题也给流感治疗带来巨大的挑战。中药复方药物能作用于多个流感的病理环节,如病毒侵入、病毒增殖、系统免疫反应、过度炎症反应、肺组织细胞凋亡等,展现出优于传统单一靶点药物治疗流感的效果,因此在治疗领域展现出良好的应用前景。多种系统生物学研究方法的应用和相关计算机技术的快速发展也加速推动着对中药复方作用机制的研究。本文回顾总结中药复方治疗流行性感冒的研究进展,通过全面理解流行性感冒的相关病理途径以及不同靶向思路和方法,着重于针对复杂临床情况阐明中药复方多靶点治疗机制研究思路与方法,以期为后续不断提升中药复方多靶点治疗流行性感冒及其变异毒株临床价值的科学内涵提供参考。 展开更多
关键词 流行性感冒 中药复方 多靶点 临床价值 突变毒株
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一株PRV流行变异株的分离鉴定及致病性分析
2
作者 张丁中 黄剑波 +1 位作者 徐雷 朱玲 《四川农业大学学报》 北大核心 2025年第5期1324-1330,1390,共8页
【目的】为了解伪狂犬病毒变异株的特征以及变异毒株的致病性。【方法】采集腹泻且伴有神经症状的仔猪小脑,在BHK-21细胞上分离,经过3轮空斑纯化,并进行PCR鉴定以及IFA鉴定。提取PRV XJ株DNA,运用高通量测序,获得全基因组序列,并对分离... 【目的】为了解伪狂犬病毒变异株的特征以及变异毒株的致病性。【方法】采集腹泻且伴有神经症状的仔猪小脑,在BHK-21细胞上分离,经过3轮空斑纯化,并进行PCR鉴定以及IFA鉴定。提取PRV XJ株DNA,运用高通量测序,获得全基因组序列,并对分离的PRV变异株进行全基因序列分析以及仔猪致病性研究。【结果】PCR鉴定以及IFA鉴定表明该分离株为PRV病毒。遗传进化分析表明该PRV病毒与Ⅰ型Bartha-K61分属两个分支,与Ⅱ型变异株JS2012位于同一分支,表明PRV XJ株为Ⅱ型变异毒株。氨基酸序列分析结果发现:与参考变异毒株相比,PRV XJ株gB蛋白507位氨基酸突变为色氨酸;gE蛋白在409位氨基酸突变为异亮氨酸,其510位氨基酸突变为甘氨酸;gD蛋白在278位和279位插入了精氨酸和脯氨酸;TK蛋白无氨基酸突变。基因重组分析未发现重组现象。PRV XJ株攻毒组仔猪表现高热、食欲不振、精神萎靡等临床症状,组织病理学观察发现:肺泡壁增厚、可见浆液渗出;肝细胞肿胀变性有蛋白渗出;肾小管上皮细胞肿胀崩解脱落;脑部的神经元变性萎缩,核浓缩变小,空隙增多等明显的病理变化。【结论】本研究分离鉴定了一株Ⅱ型PRV变异毒株,并且该分离毒株是一株强毒株。 展开更多
关键词 伪狂犬变异株 致病性 全基因分析
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鸭瘟病毒强毒株与弱毒株双重PCR鉴别检测方法的建立与应用
3
作者 周婉婷 崔雪志 +9 位作者 毛秋艳 汪建华 李玉峰 李金平 刘朔 彭程 杨吉喆 侯广宇 刘华雷 蒋文明 《中国动物检疫》 2025年第8期108-114,共7页
鸭瘟是一种由鸭瘟病毒引起的急性、热性、高度接触性传染病,对养鸭业造成了严重威胁。目前,该病主要依靠鸭瘟弱毒活疫苗进行防控。鸭瘟病毒属于疱疹病毒科,其基因组为双链DNA,具有复杂的结构和多种变异类型。为建立一种能够区分鸭瘟病... 鸭瘟是一种由鸭瘟病毒引起的急性、热性、高度接触性传染病,对养鸭业造成了严重威胁。目前,该病主要依靠鸭瘟弱毒活疫苗进行防控。鸭瘟病毒属于疱疹病毒科,其基因组为双链DNA,具有复杂的结构和多种变异类型。为建立一种能够区分鸭瘟病毒强毒株与弱毒株的双重PCR鉴别检测方法,以提高临床诊断的准确性和效率,通过分析鸭瘟病毒基因组序列,设计针对UL2和LORF5基因的特异性引物,建立了双重PCR方法。该方法具有良好的特异性,能够准确区分鸭瘟病毒强毒株与弱毒株,同时对其他禽类病原无交叉反应:最低可检测到10拷贝的鸭瘟病毒DNA,表现出较高的灵敏度。使用建立的方法对2019-2024年收集的临床疑似鸭瘟病料进行检测,发现经典强毒株集中流行于2019-2022年,而变异强毒株在2023-2024年更为常见,表明鸭瘟病毒优势流行株可能正在发生变化。综上,本研究建立的双重PCR鉴别检测方法为鸭瘟病毒的快速、准确检测提供了技术支持,对鸭瘟防控及流行病学调查具有重要意义。 展开更多
关键词 鸭瘟病毒 UL2基因 LORF5基因 双重PCR 强毒株 变异株
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育肥场猪伪狂犬病病毒感染的防控策略优化及效益分析
4
作者 孟晨光 郭万里 +6 位作者 高智勇 刘振 苗华超 蔚超亮 谭磊 黎作华 麦金辉 《中国猪业》 2025年第5期73-79,共7页
猪伪狂犬病(Pseudorabies, PR)是严重危害我国养猪业的传染病之一。目前,部分猪场的育肥猪在出栏前仍面临伪狂犬病病毒野毒感染率持续偏高的问题,严重制约养猪场的生产效率和经济效益的提升。当前市场上,常规的伪狂犬病病毒疫苗类型所... 猪伪狂犬病(Pseudorabies, PR)是严重危害我国养猪业的传染病之一。目前,部分猪场的育肥猪在出栏前仍面临伪狂犬病病毒野毒感染率持续偏高的问题,严重制约养猪场的生产效率和经济效益的提升。当前市场上,常规的伪狂犬病病毒疫苗类型所诱导的免疫应答对某些流行野毒株的交叉保护效力不足,难以实现完全免疫保护。本文通过对某规模化育肥猪场采用猪伪狂犬病病毒变异株(HN1201株)“活疫苗+灭活疫苗”组合进行防控试验,同时结合多项生物安全管理措施,成功将育肥猪中的伪狂犬病病毒g E毒株的抗体转阳率从原有的100%降至66%,并将转阳时间推迟50 d以上。试验结果表明,精准的疫苗选择、科学的免疫程序及严格的生物安全措施是阻断猪伪狂犬病病毒野毒感染的关键。本文进一步结合文献探讨了猪伪狂犬病病毒防控的核心策略,为规模化猪场提供科学依据。 展开更多
关键词 猪 猪伪狂犬病病毒 HN1201变异株 gE抗体 疫苗免疫 生产效益
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SARS-CoV-2原型株及变异株感染K18-hACE2转基因小鼠肺组织炎性反应的比较
5
作者 孙凯丽 徐秀丽 +2 位作者 李春阳 卢佳 王泽鋆 《中国生物制品学杂志》 2025年第4期407-412,共6页
目的比较K18-hACE2转基因小鼠感染SARS-CoV-2原型株Prototype及其变异株Delta和Omicron BF.7后肺组织的免疫反应,以期为相关药物的研发提供实验依据。方法K18-hACE2转基因小鼠经滴鼻方式感染Prototype、Delta及Omicron BF.7株后7 d,无... 目的比较K18-hACE2转基因小鼠感染SARS-CoV-2原型株Prototype及其变异株Delta和Omicron BF.7后肺组织的免疫反应,以期为相关药物的研发提供实验依据。方法K18-hACE2转基因小鼠经滴鼻方式感染Prototype、Delta及Omicron BF.7株后7 d,无菌取小鼠肺组织,qPCR法检测小鼠肺组织中病毒核酸拷贝数及细胞因子基因的表达水平;HE染色法检测小鼠肺组织损伤情况。结果Delta组小鼠肺组织病毒核酸拷贝数明显高于Prototype及Omicron BF.7组(t=5.419~6.908、P均<0.01);Delta组小鼠肺组织中干扰素γ(interferonγ,IFNγ)及白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)基因表达水平明显高于Prototype及Omicron BF.7组(t=3.990~7.282,P均<0.05),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及IL-5基因表达水平明显高于Prototype组(t分别为7.108和2.908,P均<0.05);且3组小鼠肺组织切片均可见明显病毒感染相关病变。结论Delta变异株导致K18-hACE2转基因小鼠肺组织的炎性反应最强,致病性最高,其次为原型株和变异株Omicron BF.7。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 原型株 变异株 炎性反应 细胞因子
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门诊发热儿童Omicrony变异株和甲型流感病毒感染的临床特征及实验室指标差异
6
作者 刘鹏 郭璇 +1 位作者 梁文娟 谢云 《热带医学杂志》 2025年第7期946-950,I0002,共6页
目的探讨新型冠状病毒Omicron变异株感染与甲型流感病毒感染所致门诊发热儿童的临床特征及实验室指标差异,为儿童早期辅助诊断和防治提供参考。方法回顾性分析2022年12月及2023年3-4月分别就诊于西北妇女儿童医院儿童发热门诊的249例新... 目的探讨新型冠状病毒Omicron变异株感染与甲型流感病毒感染所致门诊发热儿童的临床特征及实验室指标差异,为儿童早期辅助诊断和防治提供参考。方法回顾性分析2022年12月及2023年3-4月分别就诊于西北妇女儿童医院儿童发热门诊的249例新型冠状病毒Omicron变异株感染患儿与730例甲型流感病毒感染患儿的临床资料。同时以2023年1-2月进行体检的277名健康儿童作为对照,比较Omicron或甲型流感病毒感染后,患儿血液中C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NC)、淋巴细胞计数(LC)、单核细胞计数(MC)和血小板计数(PLT)水平,并计算中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、淋巴细胞/单核细胞比值(LMR)和血小板/淋巴细胞比值(PLR)。结果两组病毒感染患儿中,Omicron感染以婴儿(<1岁)及幼儿(1~3岁)为主,体温多为低热和中度发热,而甲型流感病毒感染多以幼儿(1~3岁)及学龄前儿童(>3~6岁)为主,体温多为中度发热和高热。两组患儿的呼吸道症状相似,多表现为咳嗽、流涕等;而非呼吸道症状如头痛、乏力、嗜睡和肌肉酸痛,甲型流感病毒感染患儿发生率显著高于Omicron感染患儿,差异有统计学意义(χ^(2)=22.010,P<0.001)。与健康儿童相比,两组患儿体内NC、MC、CRP、NLR和PLR明显升高(Z=5.851,P<0.001),WBC、LC、PLT和LMR则明显降低(Z=6.423,P<0.001),且Omicron感染患儿PLT水平显著低于甲型流感病毒感染患儿(Z=6.782,P<0.001),差异均有统计学意义。受试者工作特征(ROC)曲线显示,LMR、LC、PLT、NLR对儿童Omicron感染,LMR、LC、NLR、PLR对儿童甲型流感病毒感染患儿的不同发育阶段均展示出较高的诊断效能。结论Omicron和甲型流感病毒感染引起的发热患儿在年龄分布、发热特征、非呼吸道症状及实验室指标上存在显著差异。 展开更多
关键词 Omicron变异株 甲型流感病毒 儿童
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奥密克戎变异株感染临床转归经验总结
7
作者 吴帆 范松 +2 位作者 赵宏敏 杨虎 王力军 《中国科技论文在线精品论文》 2025年第2期353-355,共3页
目的:探究奥密克戎变异株感染者的临床转归规律。方法:选取2022年11月21日至2022年12月23日武警某医院卫生防疫科收治的40例新冠肺炎感染患者,通过观察记录患者的抗原阳性持续时间、核酸阳性持续时间、发热持续时间、高热(≥38.5℃)持... 目的:探究奥密克戎变异株感染者的临床转归规律。方法:选取2022年11月21日至2022年12月23日武警某医院卫生防疫科收治的40例新冠肺炎感染患者,通过观察记录患者的抗原阳性持续时间、核酸阳性持续时间、发热持续时间、高热(≥38.5℃)持续时间及住院过程中出现的典型症状。观测抗原、核酸阳性持续时间的相关性及常见症状的发生率、转归规律。结果:通过观察发现本研究中患者抗原阳性持续时间为(8.54±1.76)d、核酸阳性持续时间为(9.87±2.02)d。抗原阳性持续时间和核酸阳性持续时间之间存在极显著的强正相关关系。相关性具有显著统计学意义(P<0.01)。15种常见症状的发生率分别为:咳嗽占77.5%;咳痰占77.5%;乏力、疲倦占75.0%;失去味觉占7.5%;味觉异常占32.5%;失去嗅觉占5.0%;嗅觉异常占25.0%;咽痒占57.5%;咽痛占57.5%;头痛占77.5%;肌肉酸痛占75.0%;鼻塞占77.5%;流涕占60.0%;打喷嚏占47.5%;食欲不振占52.5%。达到出院标准时,28人仍有残存症状,占70.0%。其中,残存咳嗽症状患者20人,占50.0%。结论:认识了感染奥密克戎变异株的临床特点,了解了其常见症状变化规律,根据本研究推荐的抗原检测方法可预估个人的核酸转阴时间,为制订个性化的居家方案提供直接的参考依据。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎 奥密克戎 变异株 阳性持续时间 常见症状
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多价重组受体结合域二聚体蛋白疫苗对SARS-CoV-2变异株的交叉中和作用
8
作者 曹晴 门运政 +5 位作者 张艳玲 刘晓雅 荣欢 佘广彪 吴常伟 黄恩启 《中国生物制品学杂志》 2025年第5期531-535,共5页
目的评价多价重组受体结合域(receptor-binding domain,RBD)二聚体蛋白疫苗对SARS-CoV-2变异株的交叉中和作用,以期为广谱SARS-CoV-2疫苗的研发提供实验依据。方法将22只雌性SD大鼠随机分为ZF2202(B)(8只)、ZF2202(A)(6只)及生理盐水对... 目的评价多价重组受体结合域(receptor-binding domain,RBD)二聚体蛋白疫苗对SARS-CoV-2变异株的交叉中和作用,以期为广谱SARS-CoV-2疫苗的研发提供实验依据。方法将22只雌性SD大鼠随机分为ZF2202(B)(8只)、ZF2202(A)(6只)及生理盐水对照(8只)组,分别于0、21、42 d经肌内进行免疫,0.25 mL/只。末次免疫后14 d,采用假病毒中和试验检测ZF2202(B)及ZF2202(A)组大鼠血清对假病毒Delta、BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1、EG.5及BA.2.86的中和抗体水平,ELISpot法分析ZF2202(B)及生理盐水对照组大鼠脾淋巴细胞分泌IFNγ和IL-4的能力。结果F2202(B)组大鼠血清对假病毒BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1、EG.5和BA.2.86的中和抗体水平均明显高于ZF2202(A)组(U分别为3、1、1、1、0,P分别为0.0047、0.0013、0.0013、0.0013、0.0007);与生理盐水对照组比较,ZF2202(B)组大鼠脾淋巴细胞分泌IFNγ的特异性斑点数明显增多(U=4,P=0.0014),IL-4的特异性斑点数也明显增多(t=3.775,P=0.0021)。结论ZF2202(A)和ZF2202(B)对SARS-CoV-2变异株均具有交叉免疫保护作用,但ZF2202(B)对现流行株的保护效果优于ZF2202(A),具有更好的广谱效果。 展开更多
关键词 多价重组受体结合域二聚体蛋白疫苗 SARS-CoV-2 变异株 交叉中和作用
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猪伪狂犬病病毒新流行变异毒株的研究进展 被引量：44
9
作者 华利忠 刘剑锋 +2 位作者 冯志新 杨若松 邵国青 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期-,共5页
近30年内,猪伪狂犬活疫苗的应用对中国猪伪狂犬病的防控贡献巨大。2011年以来,中国许多免疫猪场相继暴发猪伪狂犬疫情,给养猪业造成了巨大的损失。研究显示最新流行的PRV毒株为变异株,部分商品化活疫苗不能对其提供完全的保护。本文详... 近30年内,猪伪狂犬活疫苗的应用对中国猪伪狂犬病的防控贡献巨大。2011年以来,中国许多免疫猪场相继暴发猪伪狂犬疫情,给养猪业造成了巨大的损失。研究显示最新流行的PRV毒株为变异株,部分商品化活疫苗不能对其提供完全的保护。本文详细介绍了2011年以来中国猪伪狂犬病的发病情况及其分子流行病学调查结果,分析了猪伪狂犬新变异株的分子生物学特性及其变异株来源,同时论述了针对PRV突变株新型疫苗的研究进展,最后对深入开展中国猪伪狂犬病控制与净化研究进行了展望。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 变异株 分子生物学 疫苗
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我国猪流行性腹泻病毒流行现状及分子遗传演化特征 被引量：27
10
作者 左媛媛 徐天刚 +2 位作者 戈胜强 路皓东 吴晓东 《中国动物检疫》 CAS 2022年第9期9-17,共9页
猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的,以腹泻为主要症状的急性肠道传染病,是长期以来危害我国养猪业健康发展的常见疾病之一。PEDV通过基因插入、缺失和重组等方式不断发生演化和变异,高致病力毒株、变异毒株不断出现,... 猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的,以腹泻为主要症状的急性肠道传染病,是长期以来危害我国养猪业健康发展的常见疾病之一。PEDV通过基因插入、缺失和重组等方式不断发生演化和变异,高致病力毒株、变异毒株不断出现,各类毒株之间的抗原性存在明显差异,导致临床上猪腹泻情况更加复杂。自2010年10月以来,由PEDV变异株引起的PED在我国大规模暴发流行,用经典毒株制备疫苗的免疫效果并不理想,因而造成重大经济损失。本文综述了PEDV在我国的流行现状及分子遗传演化特征,旨在为PED疫苗和诊断试剂研发提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 遗传演化 流行 基因分型 变异毒株
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猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株与猪瘟病毒等混合感染的调查与分析 被引量：14
11
作者 王连想 马静云 +5 位作者 谢青梅 陈峰 薛春宜 曹永长 毕英佐 于康震 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第10期3-5,共3页
从华南地区PRRSV变异株(NSP2 1 594-1 680 bp缺失)核酸阳性的23个规模场、42个个体养殖场和15个散养户,随机采集发病、同群猪血清197份、组织样品115份,调查猪群个体感染PRRSV变异株情况,并对PRRSV变异株核酸阳性样品进行CSFV、PRV、PCV... 从华南地区PRRSV变异株(NSP2 1 594-1 680 bp缺失)核酸阳性的23个规模场、42个个体养殖场和15个散养户,随机采集发病、同群猪血清197份、组织样品115份,调查猪群个体感染PRRSV变异株情况,并对PRRSV变异株核酸阳性样品进行CSFV、PRV、PCV2、SIV检测,调查PRRSV变异株混合感染情况。结果表明:312份样品中224份PRRSV变异株核酸阳性,阳性率71.79%;PRRSV变异株核酸阳性样品中CSFV、PRV、PCV2核酸阳性样品分别为12份、2份、35份,阳性率分别为5.35%、0.89%、15.6%;80个场(群)均未检测到SIV核酸的存在。25个场(群)存在病毒混合感染,其中PRRSV变异株/CSFV、PRRSV变异株/PRV、PRRSV变异株/PCV2二重感染和PRRSV变异株/CSFV/PCV2、PRRSV变异株/PRV/PCV2三重感染猪场(群)百分率分别为5%、1.25%、21.25%和2.5%、1.25%。PRRSV变异株(NSP2 1 594-1 680变异)是造成猪场(群)重大损失的直接原因,并可与CSFV、PRV、PCV2等病毒出现混合感染,与PCV2混合感染比率较高。 展开更多
关键词 PRRSV CSFV PCV2 PRV SIV 混合感染
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传染性法氏囊病病毒变异株主要免疫原基因cDNA的克隆及鉴定 被引量：21
12
作者 曹永长 毕英佐 +3 位作者 罗文新 杨永成 梁志清 林文量 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第9期3-5,共3页
采用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），从１株传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）本地分离株ＧＺ９０２中扩增到编码ＩＢＤＶ主要免疫蛋白ＶＰ２的ｃＤＮＡ片断，大小约为１３５０ｂｐ。将该ｃＤＮＡ片断插入ｐＢｓＫ质粒中，用重组... 采用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），从１株传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）本地分离株ＧＺ９０２中扩增到编码ＩＢＤＶ主要免疫蛋白ＶＰ２的ｃＤＮＡ片断，大小约为１３５０ｂｐ。将该ｃＤＮＡ片断插入ｐＢｓＫ质粒中，用重组质粒转化大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ，成功获得重组质粒转化菌。对重组质粒ＤＮＡ进行酶切鉴定，证明插入的ＤＮＡ片断与ＰＣＲ扩增的ＤＮＡ片段大小相符。对ＧＺ９０２高可变区进行了序列分析。其核苷酸序列与３株ＩＢ－ＤＶ变异株Ａ、ＧＬＳ、Ｅ的同源性分别达到９８．９％，９６．２％和９５．５％。而与其他Ⅰ型毒株的同源性较低。比较从ＤＮＡ序列推导出的氨基酸序列，发现ＧＺ９０２高可变区的两个亲水区均发生了一个氨基酸的变化，而在２４９和２５４位上的氨基酸分别为Ｋ和Ｓ，与以上３个变异株相同，但与所有标准Ⅰ型毒株不同。这两个氨基酸可以作为ＩＢＤＶ变异株的标志。 展开更多
关键词 变异株 基因克隆 序列分析 IBDV
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传染性法氏囊病病毒变异株的致病性 被引量：9
13
作者 刘爵 刘有昌 +2 位作者 姚炜光 周蛟 王平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期427-429,共3页
传染性法氏囊病病毒变异ＧＣ９０２株可引起１０日龄ＳＰＦ鸡胚肝脏坏死和脾脏明显肿大及较高的死亡率。接种２周龄ＳＰＦ雏鸡，同时设标准Ｉ型强毒ＣＪ８０１株和标准变异株强毒１０８４Ａ株接种对照，该毒株接种后第３天才出现法氏囊... 传染性法氏囊病病毒变异ＧＣ９０２株可引起１０日龄ＳＰＦ鸡胚肝脏坏死和脾脏明显肿大及较高的死亡率。接种２周龄ＳＰＦ雏鸡，同时设标准Ｉ型强毒ＣＪ８０１株和标准变异株强毒１０８４Ａ株接种对照，该毒株接种后第３天才出现法氏囊粘膜浆膜出血、个别黄化、质硬等病变，且于第４天法氏囊明显萎缩变小，至接种后２０天法氏囊仍严重萎缩；接种后第２天引起脾脏显著肿大，于第１２天时大小恢复正常。试验结果表明，该ＧＣ９０２株对ＳＰＦ雏鸡的致病性与标准变异株基本一致，仅有一定的差异，但明显不同于标准Ｉ型强毒株的致病性。 展开更多
关键词 鸡 传染性法氏囊病病毒 变异株 致病性
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猪流行性腹泻病毒变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株多重RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用 被引量：6
14
作者 秦毅斌 卢冰霞 +8 位作者 段群棚 何颖 李斌 梁家幸 苏乾莲 周英宁 蒋冬福 卢敬专 赵武 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第11期2746-2751,共6页
为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株快速鉴别检测方法,根据Gen Bank中公布的PEDV变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株的S基因和ORF3基因,设计合成2对特异性扩增引物,用以扩增PEDV S基因和ORF3基因,通过目的片段的... 为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株快速鉴别检测方法,根据Gen Bank中公布的PEDV变异毒株、经典毒株及弱毒疫苗株的S基因和ORF3基因,设计合成2对特异性扩增引物,用以扩增PEDV S基因和ORF3基因,通过目的片段的数量和片段大小来判断PEDV的毒株类型;通过对退火温度等反应条件的优化,建立了检测不同PEDV毒株类型的多重RT-PCR鉴别检测方法。结果显示,所建立的多重RT-PCR鉴别检测方法能特异性区分PEDV变异毒株、经典毒株和弱毒疫苗株;PEDV变异毒株扩增出2条目的条带,分别为234 bp的ORF3基因片段和826 bp的S基因片段;PEDV经典毒株扩增出1条目的条带,片段大小为234 bp的ORF3基因片段;而弱毒疫苗株扩增出1条目的条带,片段大小为185 bp的ORF3基因片段;与猪传染性胃肠炎病毒、A群猪轮状病毒、猪嵴病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪乙型脑炎病毒、猪细环病毒及猪细小病毒均无交叉反应;敏感性试验显示,该方法能检测到的最低核酸浓度为2.3×10-4ng/μl;且该方法具有良好的重复性。利用该方法对采集自广西部分地区的91份临床腹泻样品进行检测,样品中PEDV阳性样品有64份,其中变异毒株占89.06%(57/64),经典毒株占4.69%(3/64),弱毒疫苗株占6.25%(4/64)。结果表明,该多重RT-PCR鉴别检测方法特异性强、灵敏度高、操作简单,为猪流行性腹泻的流行病学及病原的鉴别诊断研究提供了可供借鉴的技术手段。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 变异毒株 经典毒株 弱毒疫苗株 RT-PCR 鉴别诊断
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猪伪狂犬病病毒变异株(Fujian-LY)人工感染小鼠动物模型的建立 被引量：6
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作者 范克伟 何沙 +8 位作者 林青青 郑琳 杨守深 刘建奎 林宏彬 宋洲洋 余佳 戴爱玲 杨小燕 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1435-1440,共6页
为建立猪伪狂犬病病毒(PRV)变异株人工感染小鼠动物模型,将本实验室分离鉴定的猪PRV变异株(Fujian-LY)进行连续10倍稀释后,对6周龄SPF级BALB/c小鼠进行腹股沟皮下接种攻毒,每个稀释度接种5只小鼠,测定其LD50,观测小鼠感染、致病的多项指... 为建立猪伪狂犬病病毒(PRV)变异株人工感染小鼠动物模型,将本实验室分离鉴定的猪PRV变异株(Fujian-LY)进行连续10倍稀释后,对6周龄SPF级BALB/c小鼠进行腹股沟皮下接种攻毒,每个稀释度接种5只小鼠,测定其LD50,观测小鼠感染、致病的多项指标,试验期为7 d。结果显示,该毒株对小鼠的LD50为3.7×103 TCID50/0.1 mL,在不同的感染剂量下各攻毒组小鼠的临床症状、死亡率等各项指标差异明显,其中以2.3×105 TCID50的攻毒剂量接种后小鼠未发生急性死亡,且能表现出以神经症状为主的典型伪狂犬病症状;病理剖检可见发病小鼠脑膜充血,肺脏出血,胸腺、脾脏严重萎缩等病理变化;病理组织学检查结果显示该毒株对攻毒小鼠全身多个重要组织器官均造成了严重的病理损伤,同时采用PCR及免疫组化的方法在这些组织内均能检测到PRV抗原。结果表明,本研究已成功建立了PRV变异株感染小鼠动物模型。 展开更多
关键词 猪 伪狂犬病病毒 变异株(Fujian-LY) 小鼠模型
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2008年江苏地区基因Ⅶd亚型新城疫病毒遗传变异分析 被引量：5
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作者 吴双 黄伟平 +3 位作者 王伟伟 胡顺林 王晓泉 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1782-1787,共6页
为了研究基因Ⅶd亚型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的分子流行病学及遗传变异规律,作者对2008年分离自江苏地区16株具有一定代表性NDV分离株的F和HN基因片段进行了扩增。根据F基因和HN基因序列绘制的2个遗传进化树基本一致,... 为了研究基因Ⅶd亚型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的分子流行病学及遗传变异规律,作者对2008年分离自江苏地区16株具有一定代表性NDV分离株的F和HN基因片段进行了扩增。根据F基因和HN基因序列绘制的2个遗传进化树基本一致,表明分离株中不存在囊膜糖蛋白基因发生重组的NDV;同时,HN蛋白线性表位发生E347K突变的变异株的分离率在我国呈上升趋势。基因Ⅶd亚型变异株的出现应引起相关领域从业者们的高度重视。 展开更多
关键词 新城疫病毒 基因Ⅶd亚型 变异株
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猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲株与NSP2变异株二重PCR诊断方法的建立及应用 被引量：6
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作者 何丹 龙剑明 +4 位作者 傅薇 冯淑萍 胡晓静 付建 刘棋 《广西农业科学》 CAS CSCD 2009年第1期84-87,共4页
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株VR2332保守序列与近年PRRSV自然变异株序列分析研究,设计合成了2对特异引物,分别扩增出225、427bp两条特异型基因片段,通过优化RT-PCR条件,建立了可同时检测PRRSV标准株和NSP2变异株的二... 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株VR2332保守序列与近年PRRSV自然变异株序列分析研究,设计合成了2对特异引物,分别扩增出225、427bp两条特异型基因片段,通过优化RT-PCR条件,建立了可同时检测PRRSV标准株和NSP2变异株的二重PCR诊断方法。应用该方法分别对广西不同地区的16份病、死猪的血液、肺等组织进行检测,结果15份PRRSV阳性,其中1份为标准株,14份为变异株。试验结果表明,PRRSV标准株与变异株二重PCR诊断方法具有高度特异性、敏感性和实用性,可用于临床诊断,为目前流行的猪高热病病原研究及广西PRRS的防制提供了一定科学依据。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 变异株 二重PCR
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猪源伪狂犬病病毒变异株AH02LA株细菌人工染色体的构建与鉴定 被引量：5
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作者 刘娅梅 乔永峰 +7 位作者 顾一奇 柳畅 许梦微 王志胜 郭容利 张传建 侯继波 王继春 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期880-885,共6页
为构建猪源伪狂犬病病毒(PRV)变异株AH02LA的细菌人工染色体(BAC),本研究将转移载体pHA2-pUC19-H1-H2的DNA与PRV AH02LA株基因组DNA共转染鸡胚成纤维细胞(CEF)进行同源重组,利用转移载体中的GFP为筛选标记,获得携带GFP基因的gE/gI基因... 为构建猪源伪狂犬病病毒(PRV)变异株AH02LA的细菌人工染色体(BAC),本研究将转移载体pHA2-pUC19-H1-H2的DNA与PRV AH02LA株基因组DNA共转染鸡胚成纤维细胞(CEF)进行同源重组,利用转移载体中的GFP为筛选标记,获得携带GFP基因的gE/gI基因缺失突变株PRV-AH02LA(gE-/gI-)-pHA2。提取纯化的该重组病毒DNA转化E.coli DH10B,对获得的阳性克隆命名为BAC^(PRV-G)。提取BAC^(PRV-G)的DNA,将含gE、gI和其上下游同源片段的DNA与BAC^(PRV-G)的DNA共转染CEF,获得gE、gZ基因恢复的病毒命名为PRVAH02LA^(Rec)。比较亲本株PRV AH02LA、基因缺失株和恢复株的生长动力学,结果表明,恢复株的生长特性与亲本株无显著差异。本研究成功构建了PRV变异株AH02LA的BAC,并证实其为全基因组的感染性克隆,为PRV变异株的致病机理研究和新型疫苗研制提供了重要的平台。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 变异株 猪源 细菌人工染色体 生长特性
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猪流行性腹泻病毒变异株(CH/YNKM-8/2013)的分离鉴定和全基因组序列分析 被引量：7
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作者 吴美洲 陈芳洲 +3 位作者 李中华 万胜锋 叶十一 何启盖 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期93-99,共7页
为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异株特性,通过细胞培养、细胞病变(CPE)观察、RT-PCR、间接免疫荧光实验和透射电镜观察分离鉴定1株PEDV变异株(CH/YNKM-8/2013株)并分析了全基因组序列。运用基因组分段扩增方法,测得该毒株的全基因组序... 为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异株特性,通过细胞培养、细胞病变(CPE)观察、RT-PCR、间接免疫荧光实验和透射电镜观察分离鉴定1株PEDV变异株(CH/YNKM-8/2013株)并分析了全基因组序列。运用基因组分段扩增方法,测得该毒株的全基因组序列(GenBank登录号为KF761675.1)。该毒株S基因N端比CV777毒株S基因的N端长9bp,包括15bp的插入和6bp的缺失,表明CH/YNKM-8/2013为变异毒株。同源性分析显示,该毒株的基因组序列与我国广东2011年分离毒株LC的同源关系最近,相似性为99.6%,与韩国毒株KNU-1305和美国毒株USA/Minnesota84/2013的序列相似性均为99.0%,而与CV777疫苗毒株的相似性较低,为96.7%。序列进化树分析表明该毒株和我国新近毒株、韩国及美国的变异毒株进化关系较近,而与我国之前流行的PEDV毒株以及疫苗毒株CV777处于不同分支。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 变异毒株 分离 鉴定 全基因组序列分析
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PEDV中国流行株和疫苗株S蛋白免疫反应性差异分析 被引量：8
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作者 陈静 杨盼盼 +7 位作者 雷喜梅 王晓梦 高冬生 常洪涛 杨霞 陈陆 赵军 王川庆 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1573-1577,共5页
为分析PEDV流行株和疫苗株S基因差异对疫苗免疫效果影响,分别在大肠杆菌中表达PEDV流行株CH/ZMDZY/11与疫苗株CV777S蛋白差异较大的N端（22～380aa）区域（SA）,将纯化的SA蛋白免疫小鼠获得多克隆抗体,并以SA蛋白为抗原,通过Western Blo... 为分析PEDV流行株和疫苗株S基因差异对疫苗免疫效果影响,分别在大肠杆菌中表达PEDV流行株CH/ZMDZY/11与疫苗株CV777S蛋白差异较大的N端（22～380aa）区域（SA）,将纯化的SA蛋白免疫小鼠获得多克隆抗体,并以SA蛋白为抗原,通过Western Blot及间接ELISA的方法检测2种蛋白与多克隆抗体的反应性差异。结果表明,抗PEDV疫苗株SA蛋白（YSA）多抗与疫苗株SA蛋白的反应性明显高于与流行株SA蛋白（LSA）的反应性;与此相反,抗PEDV流行株SA蛋白多抗与流行株SA蛋白的反应性明显高于与疫苗株SA蛋白的反应性。研究结果提示,PEDV S蛋白22～380aa区域存在差异性抗原表位,PEDV流行株和疫苗株S基因的差异可能是导致基于CV777疫苗株的PED疫苗免疫效果不好的原因。本研究将为开发PEDV流行株亚单位疫苗用于预防临床PEDV流行株的感染提供理论依据。 展开更多
关键词 PEDV流行株 CV777疫苗株 S蛋白 免疫反应性 ELISA
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