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建议义“why not VP”的语用功能研究——兼谈与汉语“何不VP”结构的对比
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作者 刘丹 杨茜 《湖州师范学院学报》 2026年第1期105-114,共10页
建议是日常会话中常见的言语交际现象,作为其语言实现方式之一的“why not VP”结构也受到学界一定的关注。但现有研究大多停留在对此结构建议功能的讨论上,未对它的衍生功能进行探讨,也未将此结构与其他语言中的相似结构进行对比分析... 建议是日常会话中常见的言语交际现象,作为其语言实现方式之一的“why not VP”结构也受到学界一定的关注。但现有研究大多停留在对此结构建议功能的讨论上,未对它的衍生功能进行探讨,也未将此结构与其他语言中的相似结构进行对比分析。基于此,本文对表示建议义的结构“why not VP”的语用功能进行梳理,认为它已经从表示建议义的功能逐渐扩展到表达劝说、责问等话语功能,且这些功能均具有主观性或交互主观性。同时,还讨论了该结构交互主观性形成的原因,分析了其与汉语对应结构“何不VP”的异同之处。研究发现,两者在主语显现、标点符号使用及同义句式的种类上均存在差异。 展开更多
关键词 建议义“why not vp 语用功能 “何不vp
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“还不VP”结构的用法特点、使用动因和交互性表现
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作者 李强 《外国语》 北大核心 2026年第1期25-37,共13页
文章首先描述“还不VP”作为一种习语构式的性质,并从它在不同语境下呈现出来的多型用法讨论疑问、反问、感叹和陈述各种语气之间的关联性。其次,基于语言使用的否定偏向这种普遍性的社会心理,探讨冗余性“还不VP”结构的使用动因,说明... 文章首先描述“还不VP”作为一种习语构式的性质,并从它在不同语境下呈现出来的多型用法讨论疑问、反问、感叹和陈述各种语气之间的关联性。其次,基于语言使用的否定偏向这种普遍性的社会心理,探讨冗余性“还不VP”结构的使用动因,说明否定词“不”的功能是表现说话者的意外心理。此外,从交互性的语用表达效果看,冗余性“还不VP”可被视为一种隐性的多声表达形式,体现出明显的交际互动性特征。“不”否定和关联的对象VP反映了说话人的看法,同时,“不”又具有引入听话者的声音这一介入性功能。 展开更多
关键词 “还不vp 习语构式 否定偏向 多声性 交互性
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猪轮状病毒VP4单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定
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作者 赵佳莉 卞贤宇 +9 位作者 宋家鹏 王晨 汤学超 李运川 周金柱 朱雪蛟 陶然 董海龙 张雪寒 李彬 《中国农业科学》 北大核心 2026年第1期220-232,共13页
【背景】猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)是导致新生仔猪及幼龄仔猪病毒性腹泻的关键病原体之一,其感染可引发宿主严重的胃肠道功能紊乱,临床表现为脱水、腹泻甚至死亡,对全球养猪业造成巨大经济损失。VP4蛋白是PoRV病毒粒子表面关... 【背景】猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)是导致新生仔猪及幼龄仔猪病毒性腹泻的关键病原体之一,其感染可引发宿主严重的胃肠道功能紊乱,临床表现为脱水、腹泻甚至死亡,对全球养猪业造成巨大经济损失。VP4蛋白是PoRV病毒粒子表面关键的结构蛋白之一。VP4蛋白经胰蛋白酶水解后可生成VP8和VP5两个功能亚基,它们在病毒感染宿主细胞的初始阶段发挥核心作用,介导病毒吸附宿主细胞受体和随后的膜穿透过程。同时,VP4蛋白也是激发宿主免疫反应的重要靶抗原。然而,目前针对PoRV VP4蛋白的特异性单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)研究相对匮乏,限制了相关诊断方法和新型疫苗的研发。【目的】制备针对PoRV VP4蛋白的mAb,在此基础上,对这些单克隆抗体进行全面的生物学特性分析,包括反应性、抗原表位类型(构象依赖型或线性)、亚型鉴定以及关键的中和活性评估,精确鉴定VP4蛋白上具有重要功能意义的抗原表位区域,为PoRV感染的精准诊断和新型疫苗设计提供支撑。【方法】以纯化的VP4*P23重组蛋白免疫BALB/c小鼠,运用脾细胞融合技术筛选杂交瘤细胞株,通过Western blot、间接免疫荧光(IFA)、免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)鉴定单克隆抗体反应性,采用间接ELISA评估单抗对构象的敏感性。最后构建VP5蛋白的不同截短体鉴定靶向的抗原表位区域,通过体外中和实验评估VP5单抗的中和能力。【结果】成功获得26株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,抗体亚型包括IgG1、IgG2a、IgG2b和IgM等多种亚型,其中轻链类型以κ链为主。在获得的26株单抗中,有15株被证实能够与天然的PoRV病毒粒子发生特异性反应(通过IFA和IPMA检测)。间接ELISA检测显示,mAb11、14、15、23为构象不敏感型单抗,mAb16、17、18、19、21、24、25、26为构象敏感型单抗,值得注意的是,mAb1、2、22这3株单抗在抗原变性后反应性反而增强。Western blot分析进一步聚焦于识别线性表位的单抗(mAb11,14,15),结果显示它们均能特异性识别VP5蛋白上约300—360位氨基酸区域内的线性表位,可能针对同一抗原表位。然而,体外中和试验评估表明这3株单抗对PoRV毒株无中和作用。【结论】成功制备多株靶向PoRV VP4蛋白的单克隆抗体,并鉴定了它们与天然病毒结合的能力。通过系统的表征,不仅明确了单抗的亚型分布和轻链类型,更重要的是对单抗的抗原识别特性进行了深入解析:成功区分了构象敏感型与构象不敏感型单抗,并精确定位了mAb11、14、15识别的线性抗原表位区域。研究成果为PoRV诊断试剂优化、亚单位疫苗研发提供了关键抗体资源,为深入研究VP4蛋白的免疫学功能及抗病毒机制奠定了基础。 展开更多
关键词 猪轮状病毒 vp4蛋白 单克隆抗体 抗原表位 诊断
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表达传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的转基因柔嫩艾美耳球虫的构建与鉴定
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作者 刘跃辉 孙颖颖 +3 位作者 王浩迪 索静霞 宋铭忻 刘贤勇 《畜牧兽医学报》 北大核心 2026年第2期1008-1016,共9页
传染性法氏囊病严重制约家禽养殖业经济发展。因此,研发安全且高效的传染性法氏囊病疫苗成为当下备受瞩目的关键课题。为探索柔嫩艾美耳球虫作为活载体表达及递送传染性法氏囊病毒抗原的可行性,本研究构建表达该病毒VP2蛋白的转基因柔... 传染性法氏囊病严重制约家禽养殖业经济发展。因此,研发安全且高效的传染性法氏囊病疫苗成为当下备受瞩目的关键课题。为探索柔嫩艾美耳球虫作为活载体表达及递送传染性法氏囊病毒抗原的可行性,本研究构建表达该病毒VP2蛋白的转基因柔嫩艾美耳球虫株(Et-VP2)。构建表达质粒,酶切后核转染入柔嫩艾美耳球虫中,利用流式细胞分选技术筛选得到表达红色荧光报告基因(mCherry)的阳性虫株,在基因和蛋白水平上鉴定VP2基因的表达。结果显示,构建表达VP2蛋白的转基因柔嫩艾美耳球虫经雏鸡体内3次传代阳性球虫荧光率已高于95%,在球虫基因和蛋白水平上证实了外源基因的成功插入和稳定表达(后代群体荧光率均达95%),间接免疫荧光结果显示融合蛋白(Mic2-linker-VP2)定位于柔嫩艾美耳球虫子孢子顶端。本研究成功建立柔嫩艾美耳球虫稳定转染体系,为后续转基因虫株的传染性法氏囊病免疫保护研究奠定基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 传染性法氏囊病病毒 vp2 MCHERRY 转基因
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E种牛肠道病毒VP1蛋白的截短表达及抗体间接ELISA检测方法的建立
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作者 崔平 刘澜 +3 位作者 李本科 白耀国 李玉坤 管宇 《中国兽医杂志》 北大核心 2026年第2期40-48,共9页
为了开展E种牛肠道病毒(BEV-E)的流行病学调查和抗体筛查,本试验采用原核表达技术对BEV-E外衣壳蛋白VP1进行体外截短表达,采用His-Tag蛋白纯化柱对VP1重组蛋白进行纯化,采用蛋白免疫印迹(WB)方法对重组蛋白进行鉴定。以纯化的VP1重组蛋... 为了开展E种牛肠道病毒(BEV-E)的流行病学调查和抗体筛查,本试验采用原核表达技术对BEV-E外衣壳蛋白VP1进行体外截短表达,采用His-Tag蛋白纯化柱对VP1重组蛋白进行纯化,采用蛋白免疫印迹(WB)方法对重组蛋白进行鉴定。以纯化的VP1重组蛋白作为包被抗原,对反应条件进行优化和确定临界值,建立了检测BEV-E抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,并进行特异性、灵敏性、重复性、符合率试验和临床样品检测。结果显示,成功表达VP1重组蛋白;间接ELISA检测方法的最佳抗原工作浓度为15.0μg/mL,最佳一抗稀释倍数为1∶80,最佳酶标二抗稀释倍数为1∶3000,最佳封闭液为10%马血清,最佳一抗、酶标二抗、封闭液工作时间分别为30、30、60 min;临界值为0.386;与牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛冠状病毒、牛轮状病毒、O型口蹄疫病毒、A型口蹄疫病毒、产肠毒素性大肠杆菌阳性血清均无交叉反应,特异性良好;BEV-E阳性血清1∶25600稀释时仍可检测出阳性,灵敏性较高;批内和批间变异系数均小于10%,重复性良好;该方法与间接免疫荧光检测方法的符合率为92.5%;临床样品检测结果显示,BEV-E抗体平均阳性率为7.88%。结果表明,本试验建立的BEV-E VP1抗体间接ELISA检测方法为开展BEV-E临床诊断和流行病学调查提供了试验依据。 展开更多
关键词 E种牛肠道病毒(BEV-E) vp1蛋白 截短表达 抗体检测 间接ELISA
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过表达Vps16改善心肌缺血/再灌注大鼠心肌功能
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作者 汪雁归 谈晶花 +4 位作者 赵瑾 王涛 马婷婷 邵丽莉 祁炜罡 《基础医学与临床》 2026年第3期396-401,共6页
目的探究自噬调节因子空泡分选蛋白16(Vps16)在大鼠心肌缺血/再灌注(MI/R)损伤中的作用。方法将大鼠随机分为Sham组、MI/R组、慢病毒空白载体(Lv-NC)组和慢病毒过表达Vps16(Lv-Vps16)组,n=6。超声心动图检测大鼠左心室功能[左室舒张内径... 目的探究自噬调节因子空泡分选蛋白16(Vps16)在大鼠心肌缺血/再灌注(MI/R)损伤中的作用。方法将大鼠随机分为Sham组、MI/R组、慢病毒空白载体(Lv-NC)组和慢病毒过表达Vps16(Lv-Vps16)组,n=6。超声心动图检测大鼠左心室功能[左室舒张内径(LVIDd)和左室收缩内径(LVISd),得到左室缩短分数(LVFS)、左室射血分数(LVEF)]。ELISA检测血清心肌损伤标志物[肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)和乳酸脱氢酶(LDH)]水平及炎性因子[白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)]。采用HE及TUNEL染色评估心肌损伤与凋亡,并以IHC和Western blot测定Vps16、紫外线辐射抗性相关基因蛋白(UVRAG)、Ras相关蛋白7(Rab7)和自噬蛋白表达。结果与Sham组比较,MI/R组大鼠LVIDd、LVISd、CK-MB、cTnⅠ和LDH水平及TUNEL阳性细胞率及IL-6、TNF-a、IL-1β、p62水平升高,LVFS、LVEF及Vps16、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、UVRAG、Rab7蛋白下调(P<0.05)。且MI/R组大鼠心肌组织结构紊乱,提示MI/R模型构建成功。而过表达Vps16缓解心肌损伤和炎性反应,改善大鼠心功能。结论Vps16激活UVRAG/Rab7诱导心肌细胞自噬缓解MI/R损伤。 展开更多
关键词 vps16 心肌缺血/再灌注 自噬 紫外线辐射抗性相关基因蛋白(UVRAG) Ras相关蛋白7(Rab7)
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从能否去掉“的”再探“NP的VP”结构
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作者 闫晓凤 《现代语言学》 2026年第1期755-761,共7页
从“这本书的出版”引发的关于“NP的VP”的结构问题学术界已展开众多讨论。不同于大多聚焦于词类及其转换的研究,本文从实际语料出发,将重点讨论能否去掉“的”,分析这一特殊用法的表现特征及形成的原因。本文发现,在去掉“的”不影响... 从“这本书的出版”引发的关于“NP的VP”的结构问题学术界已展开众多讨论。不同于大多聚焦于词类及其转换的研究,本文从实际语料出发,将重点讨论能否去掉“的”,分析这一特殊用法的表现特征及形成的原因。本文发现,在去掉“的”不影响语用的句子中,VP主要由一般或具体的动词构成,并与前面的名词构成主动关系;在去掉“的”后不成立或难以成立的句子中,动词多为抽象的动词,转化为名词义的能力较强,对“的”依赖性较强,此时动词与“的”前面的名词多构成被动关系。后者中的动词很可能是兼类词,其名词义与动词义都被广泛应用。上述现象表明,“NP的VP”结构中“的”的可省略性,与动词的名物化倾向及其兼类属性密切相关。 展开更多
关键词 名物化 NP的vp 动词 兼类
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基于VPS2103的小功率DC-DC变换器设计
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作者 赵敏如 董玉昆 +1 位作者 郭旭东 王博文 《电力设备管理》 2026年第3期166-168,共3页
随着开关电源的应用领域不断扩大,不同功率等级下的拓扑也逐渐多样化,具有隔离功能的小功率DC-DC变换器在各个领域应用广泛、需求数量庞大。综合考虑小功率隔离式DC-DC变换器仍以反激拓扑为主,本文设计了一款基于VPS2103芯片控制的小功... 随着开关电源的应用领域不断扩大,不同功率等级下的拓扑也逐渐多样化,具有隔离功能的小功率DC-DC变换器在各个领域应用广泛、需求数量庞大。综合考虑小功率隔离式DC-DC变换器仍以反激拓扑为主,本文设计了一款基于VPS2103芯片控制的小功率反激式DC-DC变换器,此芯片内部集成MOS管且有斜坡补偿、过压保护、过流保护等功能,具有体积小、重量轻、轻载功耗低、效率高、输入电压范围宽、成本低等优点。本文详细给出了基于VPS2103的小功率变换器设计过程,完成功率为10W的超小型DC-DC变换器样机搭建及测试,验证了该变换器的运行性能。 展开更多
关键词 DC-DC变换器 反激拓扑 vpS2103 样机测试
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柯萨奇病毒A16型VP1-VP4基因克隆及其表达产物的抗原相关性分析 被引量:4
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作者 宋远斌 何思杰 +4 位作者 余楠 陈欣欣 王斌 车小燕 曾其毅 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1713-1717,共5页
目的克隆并表达柯萨奇病毒A16型VP1-VP4蛋白基因,初步分析其抗原相关性。方法抽提病毒RNA,经RT-PCR方法分别扩增出VP1-VP4蛋白基因片段,经克隆后,在QIA表达系统中表达,表达产物经8 mol/L尿素洗涤及镍柱亲和层析纯化后,用柯萨奇病毒A16... 目的克隆并表达柯萨奇病毒A16型VP1-VP4蛋白基因,初步分析其抗原相关性。方法抽提病毒RNA,经RT-PCR方法分别扩增出VP1-VP4蛋白基因片段,经克隆后,在QIA表达系统中表达,表达产物经8 mol/L尿素洗涤及镍柱亲和层析纯化后,用柯萨奇病毒A16型病毒免疫兔血清及肠道病毒71型病毒免疫兔血清对重组蛋白进行Western blotting及ELISA分析其抗原相关性及交叉反应性。结果成功构建的重组质粒pQE30a/VP1-VP4并经IPTG诱导,重组蛋白VP1-VP4高效表达并纯化成功,经Western blotting及ELISA证实重组蛋白VP1-VP4可以被CVA16免疫兔血清特异识别,部分与肠道病毒71型免疫血清存在交叉反应。结论在大肠杆菌M15中高效表达出柯萨奇病毒A16型VP1-VP4蛋白,经纯化产物具有较强的抗原反应性。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A16型 vp1蛋白 vp2蛋白 vp3蛋白 vp4蛋白 克隆 原核表达 抗原反应性
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大西洋鲑传染性胰腺坏死病病毒VP2蛋白和VP3蛋白重组腺病毒载体的构建及其表达 被引量:1
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作者 李守湖 秦闯 +1 位作者 李新苍 石建高 《水产科技情报》 2025年第1期26-32,共7页
传染性胰腺坏死病(infectious pancreatic necrosis,IPN)是由传染性胰腺坏死病病毒(infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)引起的一种主要危害鲑科鱼类的传染病。为克隆传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)VP2基因和VP3基因,并构建其重组... 传染性胰腺坏死病(infectious pancreatic necrosis,IPN)是由传染性胰腺坏死病病毒(infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)引起的一种主要危害鲑科鱼类的传染病。为克隆传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)VP2基因和VP3基因,并构建其重组腺病毒载体,利用PCR方法分别扩增出IPNV VP2基因和VP3基因,通过多基因片段同源重组技术将IPNV VP2基因和VP3基因克隆到pAd-Track-CMV载体,经过线性化后与pAd-easy-1载体在BJ5183菌体内进行同源重组,构建出重组腺病毒质粒;通过PCR及NotⅠ和HindⅢ双酶切鉴定,再经PacⅠ线性化后用于转染293T细胞,获得重组腺病毒;通过绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达监控重组腺病毒的复制情况,用Western-blotting法分别检测IPNV VP2蛋白和VP3蛋白的表达,并测定重组病毒滴度。结果显示,分别克隆出IPNV VP2和VP3基因,基因总长度为2211 bp,构建出目的基因重组腺病毒载体,该病毒在293T细胞中分别表达出蛋白分子质量约为54 kD和26 kD的产物,滴度为1.0×10^(9)个/mL TCID_(50)。结果表明,已成功获得IPNV VP2基因和VP3基因重组腺病毒,该病毒在293T细胞中滴度较高,能够稳定表达。传染性胰腺坏死病病毒VP2蛋白和VP3蛋白重组腺病毒载体的成功构建可为大西洋鲑传染性胰腺坏死病活载体疫苗的研制提供参考。 展开更多
关键词 大西洋鲑 传染性胰腺坏死病 vp2基因 vp3基因 腺病毒载体
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朝鲜语“VP_1+■+VP_2”结构在汉语中的对应形式 被引量:2
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作者 南日 《汉语学习》 CSSCI 北大核心 2009年第5期75-79,共5页
朝鲜语的"VP1+■+VP2"结构在汉语中最常见的对应形式有两种,即分别由结构助词"地"和"得"构成的"VP1+地+VP2"结构和"VP1+得+VP2"结构。本文主要讨论朝、汉两种语言这些结构的特点以... 朝鲜语的"VP1+■+VP2"结构在汉语中最常见的对应形式有两种,即分别由结构助词"地"和"得"构成的"VP1+地+VP2"结构和"VP1+得+VP2"结构。本文主要讨论朝、汉两种语言这些结构的特点以及对应规律。本文通过对大量的朝、汉语对译语料的分析,认为朝、汉语的这种对应关系主要取决于语义。 展开更多
关键词 vp1+ +vp2” vp1+地+vp2” vp1+得+vp2” 对应
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一起猪轮状病毒感染的实验室诊断及VP4、VP7基因序列分析
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作者 周锋涛 刘洋 +2 位作者 张振 刘淑华 李莲瑞 《湖南畜牧兽医》 2025年第6期27-30,共4页
为探究新疆阿克苏地区某一规模化猪场引发仔猪腹泻的病原体,采集病死仔猪肠道内容物,进行细菌分离鉴定,并采用荧光定量RT-PCR技术对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎(TGEV)、猪轮状病毒(PoRV)进行病原检测。结果显示,样本中PoRV... 为探究新疆阿克苏地区某一规模化猪场引发仔猪腹泻的病原体,采集病死仔猪肠道内容物,进行细菌分离鉴定,并采用荧光定量RT-PCR技术对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎(TGEV)、猪轮状病毒(PoRV)进行病原检测。结果显示,样本中PoRV检测呈阳性,提示该猪场仔猪腹泻的病原体为猪轮状病毒。设计并合成针对PoRV毒株VP4、VP7基因的特异性引物,进行RT-PCR扩增实验,并对扩增产物进行测序及同源性分析。结果表明,该毒株VP4基因序列与P[6]型参考株的核苷酸同源性为82.0%~92.3%,而VP7基因序列与G4型参考株的核苷酸同源性达到93.1%。据此判定,引发此次疫情的病原体为G4 P[6]基因型猪轮状病毒。研究为后续有效预防和控制疫情提供了重要依据。 展开更多
关键词 规模化猪场 仔猪腹泻 轮状病毒 vp4 vp7
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携带FPV VP2基因的重组减毒鼠伤寒沙门菌口服疫苗免疫原性研究
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作者 陈慧敏 王文婕 +7 位作者 韩新雨 贾钰航 余祖华 贾艳艳 廖成水 丁轲 尚珂 陈松彪 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第7期947-952,共6页
本试验旨在评价表达泛猫白细胞减少综合症病毒(FPV)VP2蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd口服疫苗的免疫原性。将重组菌按照10^(6)CFU/只的剂量口服免疫6周龄雌性KM小鼠,在免疫后第7、14、21、28、35和42天进行称重,检测VP2... 本试验旨在评价表达泛猫白细胞减少综合症病毒(FPV)VP2蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd口服疫苗的免疫原性。将重组菌按照10^(6)CFU/只的剂量口服免疫6周龄雌性KM小鼠,在免疫后第7、14、21、28、35和42天进行称重,检测VP2特异性Ig G抗体、中和抗体、IL-4和IFN-γ水平的变化。同时口服免疫8周龄健康田园猫,检测疫苗的攻毒保护效果。结果显示,与对照组相比,重组菌免疫后对小鼠体重无明显影响(P>0.05);重组菌免疫小鼠后能够显著诱导血清中针对VP2特异性抗体和中和抗体水平(P<0.05);IL-4和IFN-γ细胞因子水平显著升高(P<0.05),且在免疫后第28天达到峰值;重组菌免疫猫后对FPV感染具有一定程度的免疫保护效果,可明显降低实验猫致死率并且延缓发病时间和发病程度。以上结果表明,构建的FPV VP2重组减毒鼠伤寒沙门菌口服疫苗能够有效刺激机体产生免疫应答且具有较好的免疫保护效力,为进一步研发FPV新型疫苗奠定了良好基础。 展开更多
关键词 泛猫白细胞减少综合症病毒 vp2 SL1344ΔcrpΔasd 口服疫苗 免疫原性
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犬细小病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
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作者 龚婷 马辉 郑鸣 《家畜生态学报》 北大核心 2025年第7期81-84,118,共5页
为获得犬细小病毒(canine parvovirus disease,CPV)VP2蛋白单克隆抗体,该研究利用原核表达技术对VP2蛋白进行截短表达,制备单克隆抗体。结果显示:获得了3株稳定的单克隆抗体(C6F7、D2E4、E3F6),其抗体效价分别为1∶1024000、1∶1024000... 为获得犬细小病毒(canine parvovirus disease,CPV)VP2蛋白单克隆抗体,该研究利用原核表达技术对VP2蛋白进行截短表达,制备单克隆抗体。结果显示:获得了3株稳定的单克隆抗体(C6F7、D2E4、E3F6),其抗体效价分别为1∶1024000、1∶1024000、1∶2048000,染色体数目分别为106、105、103,重链分别为IgG1、IgG2b和IgG1,轻链均为κ链,均能与VP2蛋白和CPV感染的F81细胞发生特异性反应,均与4种常见病毒不发生交叉反应。该研究获得了3株抗体效价高、特异性强、免疫学活性好的VP2蛋白单克隆抗体,可为CPV基础性研究和免疫学诊断试剂盒开发奠定基础。 展开更多
关键词 犬细小病毒 vp2蛋白 单克隆抗体 制备与鉴定
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“S别VP呢罢”的形成及同义糅合句式的兴替
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作者 叶建军 《古汉语研究》 北大核心 2025年第3期64-78,127,128,共17页
清代中叶始见的特殊测度句式“S别VP呢罢”的生成机制是糅合,而糅合的动因是言者对事件“SVP”的真实性存在矛盾心理。糅合句式“S别VP呢罢”后来消亡了,但是在清代中叶以后出现了若干与之同义的糅合句式,并在历史发展过程中发生了兴替... 清代中叶始见的特殊测度句式“S别VP呢罢”的生成机制是糅合,而糅合的动因是言者对事件“SVP”的真实性存在矛盾心理。糅合句式“S别VP呢罢”后来消亡了,但是在清代中叶以后出现了若干与之同义的糅合句式,并在历史发展过程中发生了兴替。陈述句式或感叹句式与测度句式发生糅合是汉语中一种常见的句式糅合模式。 展开更多
关键词 测度句式 “S别vp呢罢” 句式糅合 同义糅合句式
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Vps16通过调控心肌细胞自噬流减轻心肌I/R损伤的机制研究
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作者 李媛彬 欧阳翌国 +3 位作者 陈歆 邱爱珠 张海琴 陈壮 《医师在线》 2025年第11期3-8,共6页
目的 探讨液泡分选蛋白16(Vps16)在心肌缺血/再灌注(I/R)损伤中的作用及其机制。方法 分别构建大鼠心肌I/R模型[分组:对照空载体(AdVector)+假手术(Sham)组、Vps16过表达腺病毒载体(AdVps16)+Sham组、AdVector+I/R组、AdVps16+I/R组]和H... 目的 探讨液泡分选蛋白16(Vps16)在心肌缺血/再灌注(I/R)损伤中的作用及其机制。方法 分别构建大鼠心肌I/R模型[分组:对照空载体(AdVector)+假手术(Sham)组、Vps16过表达腺病毒载体(AdVps16)+Sham组、AdVector+I/R组、AdVps16+I/R组]和H9c2细胞低氧/复氧(H/R)模型(分组:siCtrl+AdVector组、siCtrl+AdVps16组、siUVRAG+AdVector组、siUVRAG+AdVps16组)。采用免疫印迹试验(Western blot)检测心肌I/R后Vps相关蛋白的表达;通过心内注射腺病毒Vps16过表达载体(AdVps16)干预,超声心动图评估心功能,生化法检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织形态学变化;在H9c2细胞中进一步检测Vps16-紫外线抗性相关基因(UVRAG)-RAS相关蛋白7(Rab7)信号轴对自噬流的影响;细胞免疫荧光技术观察自噬小体与Rab7的定位情况;并利用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验评估细胞损伤情况。结果 与Sham组大鼠比较,I/R组大鼠心肌组织中UVRAG、Rab7、Vps16和Vps33b蛋白表达水平显著降低,Vps26蛋白表达水平升高(P <0.01);与AdVector+I/R组比较,AdVps16+I/R组在再灌注24 h后的左室收缩末期内径(LVIDs)减少,左室短轴缩短率(LVFS)和左室射血分数(LVEF)增加,CK-MB水平降低(P <0.05),心肌组织病理损伤减轻;进一步研究发现,在H9c2细胞中,Vps16过表达联合UVRAG或Rab7可显著提高微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/Ⅰ比值并降低p62表达,促进自噬体与Rab7共定位,增强自噬流;而敲低UVRAG则部分抑制Vps16介导的自噬体成熟及细胞保护作用,表现为LDH释放水平增加。结论 Vps16通过调控UVRAG/Rab7信号轴促进心肌细胞自噬流,从而减轻心肌I/R损伤。 展开更多
关键词 vps16 UVRAG Rab7 缺血/再灌注 自噬流
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历时构式语法视角下的图式性构式“且VP吧”研究
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作者 朱献珑 王雪乔 《外语教学》 北大核心 2025年第5期14-20,共7页
“且VP吧”是北方方言中司空见惯的表达形式,但迄今尚未见到针对该构式的系统性研究。本研究以历时构式语法为理论框架,基于BCC语料库历时语料,探讨图式性构式“且VP吧”建构特征,并考察该构式演变历程和演变动因。研究发现:在形式方面... “且VP吧”是北方方言中司空见惯的表达形式,但迄今尚未见到针对该构式的系统性研究。本研究以历时构式语法为理论框架,基于BCC语料库历时语料,探讨图式性构式“且VP吧”建构特征,并考察该构式演变历程和演变动因。研究发现:在形式方面,准入该构式的构件为时间副词“且”、语气助词“吧”及表长时义的延续性VP;在意义方面,该构式在实际应用过程中发生变异性扩展,新生出强烈的现场协同移情语义。该构式的变异性扩展历经变异萌芽期、扩展形成期与语义稳定期三个阶段。在此过程中,形式_旧—意义_新配对逐渐占据优势并最终主导构式的使用。扩展的主要动因源于认知经济性、言语信据性及高频率使用等。 展开更多
关键词 “且vp吧”构式 历时构式语法 变异性扩展
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2023年云南省手足口病病原谱及柯萨奇病毒A2型VP1区基因特征
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作者 寸建萍 姜黎黎 +6 位作者 李楠 曹亿会 周晓芳 杨溪 伏晓庆 张勇 田炳均 《华南预防医学》 2025年第12期1363-1366,共4页
目的了解云南省手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)的病原构成及柯萨奇病毒A2型(coxsackievirus A2,CVA2)的VP1基因特征。方法选取2023年云南省手足口病病例标本中经实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定为肠道病毒阳性的... 目的了解云南省手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)的病原构成及柯萨奇病毒A2型(coxsackievirus A2,CVA2)的VP1基因特征。方法选取2023年云南省手足口病病例标本中经实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定为肠道病毒阳性的标本进行病毒分离培养。通过RT-PCR对分离株肠道病毒结构蛋白VP4/VP2结合区和VP1区进行扩增并测序,并对其中7株CVA2毒株进行基因序列比较与进化分析。结果1488份粪便样本中共分离获得184株毒株,总分离率为12.71%(184/1448),其中A组肠道病毒占94.02%(173/184),涵盖6个血清型;B组肠道病毒占3.80%(7/184),涉及4个血清型;C组病毒4株占2.17%。基于完整的VP1序列系统进化分析显示:CVA2病毒可分为4个基因型(A~D),本研究分离的7株CVA2均属于基因型D分支2。序列分析显示,本研究7株CVA2分离株间VP1区核苷酸和氨基酸相似性分别为93.23%~99.89%和99.30%~100.00%。结论2023年云南省HFMD病原呈现多样性,以A组肠道病毒为主。2023年云南省HFMD病例分离的CVA2主要是基因型D。未来需进一步加强对肠道病毒的实验室监测及分子流行病学分析,为手足口病防控提供依据。 展开更多
关键词 手足口病 柯萨奇病毒A组2型 vp1基因 基因特征分析
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长链非编码RNA VPS9D1-AS1调控miR-532-3p/WEE1轴对卵巢癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化的影响
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作者 刘宏伟 王雅红 +2 位作者 周齐 闫亚男 王颖欣 《中国优生与遗传杂志》 2025年第5期1025-1032,共8页
目的探究长链非编码RNA VPS9D1反义RNA1(lncRNA VPS9D1-AS1)靶向调控微小RNA-532-3p/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(miR-532-3p/WEE1)信号轴对卵巢癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法将SKOV3细胞分为Control组、si-NC组、si-VPS... 目的探究长链非编码RNA VPS9D1反义RNA1(lncRNA VPS9D1-AS1)靶向调控微小RNA-532-3p/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(miR-532-3p/WEE1)信号轴对卵巢癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法将SKOV3细胞分为Control组、si-NC组、si-VPS9D1-AS1组、si-VPS9D1-AS1+anti-NC组、si-VPS9D1-AS1+anti-miR-532-3p组;以qRT-PCR法检测组织与细胞中lncRNA VPS9D1-AS1、miR-532-3p水平;以双荧光素酶实验检测lncRNA VPS9D1-AS1、WEE1分别与miR-532-3p靶向关系;以Edu、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡;以Western blot法检测细胞增殖、凋亡、EMT相关蛋白及WEE1表达情况;以裸鼠移植瘤验证lncRNA VPS9D1-AS1对卵巢癌移植瘤生长及miR-532-3p/WEE1轴的影响。结果在卵巢癌组织及SKOV3细胞中lncRNA VPS9D1-AS1高表达,miR-532-3p低表达。lncRNA VPS9D1-AS1、WEE1与miR-532-3p之间存在靶向结合位点。si-VPS9D1-AS1组较si-NC组Edu阳性率和lncRNA VPS9D1-AS1水平及WEE1、Ki67、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin表达降低,细胞凋亡率和miR-532-3p水平及p21、Bax、E-cadherin表达升高(P<0.05);以沉默miR-532-3p可部分逆转沉默VPS9D1-AS1对SKOV3细胞恶性表型的改善作用;裸鼠移植瘤实验显示,si-VPS9D1-AS1组较si-NC组裸鼠移植瘤生长缓慢,lncRNA VPS9D1-AS1水平及WEE1表达降低,miR-532-3p水平升高(P<0.05)。结论lncRNA VPS9D1-AS1可通过调控miR-532-3p/WEE1轴参与卵巢癌细胞增殖、凋亡、EMT过程。 展开更多
关键词 长链非编码RNA vpS9D1反义RNA1 微小RNA-532-3p 蛋白激酶WEE1 卵巢癌 上皮间质转化
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