内质网应激途径在鬼臼毒素纳米脂质载体诱导VK2/E6E7细胞凋亡的机制 被引量：4

1

作者 王琦 韩凯 +2 位作者 李雪芽 肖艳 曾抗 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期832-836,共5页

目的探讨鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)通过内质网应激途径诱导体外永生化人阴道上皮细胞(VK2/E6E7细胞)凋亡的机制。方法自制0.5%POD-NLC和单纯-NLC,实验分为单纯-NLC、0.125μg/mlPOD-NLC、0.25μg/ml POD-NLC、0.5μg/ml POD-NLC和... 目的探讨鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)通过内质网应激途径诱导体外永生化人阴道上皮细胞(VK2/E6E7细胞)凋亡的机制。方法自制0.5%POD-NLC和单纯-NLC,实验分为单纯-NLC、0.125μg/mlPOD-NLC、0.25μg/ml POD-NLC、0.5μg/ml POD-NLC和空白对照组,分别作用VK2/E6E7细胞24 h。采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测各组细胞内Ca2+浓度的变化;RT-PCR和Western blot法检测各组GRP78、GRP94和calpain2基因mRNA和蛋白表达。结果与空白对照组相比,不同浓度POD-NLC可呈浓度依赖性的增加细胞内Ca2+浓度(P<0.01),各药物处理组之间比较有统计学差异(P<0.05)。PODNLC可上调GRP78、GRP94、calpain2基因mRNA和蛋白表达。单纯-NLC和空白对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论POD-NLC诱导VK2/E6E7细胞凋亡的分子机制可能与内质网应激反应性凋亡途径的启动有关。 展开更多

关键词 鬼臼毒素纳米脂质载体 vk2 E6E7细胞 内质网应激途径 细胞凋亡

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dl-扁桃酸对人精子与阴道黏膜上皮VK2/E6E7细胞的毒性研究 被引量：4

2

作者 夏敏杰 王玉柱 +3 位作者 黄超 丁训城 李卫华 芦洁 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2015年第4期391-395,共5页

目的探讨dl-扁桃酸对人阴道黏膜上皮细胞(VK2/E6E7)与精子的细胞毒性损伤。方法不同浓度的dl-扁桃酸处理高活力精子20 s,计算机辅助精子分析仪测定精子活率,扫描电子显微镜检测精子受损情况。1.25,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸和4.0 g·... 目的探讨dl-扁桃酸对人阴道黏膜上皮细胞(VK2/E6E7)与精子的细胞毒性损伤。方法不同浓度的dl-扁桃酸处理高活力精子20 s,计算机辅助精子分析仪测定精子活率,扫描电子显微镜检测精子受损情况。1.25,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸和4.0 g·L?1壬苯醇醚(nonoxynol-9,N-9)处理VK2/E6E7细胞,MTT法检测细胞活性,ELISA试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率,并用流式细胞法检测细胞凋亡率。结果 dl-扁桃酸抑制精子活率的半数有效浓度约为1.25 g·L?1,最低有效浓度约为2.5 g·L?1。扫描电镜结果显示,dl-扁桃酸处理组精子表面结构与对照组形态相似,无明显受损特征,N-9组精子严重受损。MTT实验结果表明,1.25 g·L?1 dl-扁桃酸组细胞存活率>95%,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸组细胞存活率约为50%。1.25,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸处理组LDH释放量只有微量检出,远低于N-9组。流式细胞检测表明,1.25,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸处理组中活细胞和晚期凋亡比例与对照组相近,早期凋亡细胞略少于对照组,死亡细胞稍多于对照组,N-9组大量细胞死亡。结论 dl-扁桃酸对VK2/E6E7细胞毒性远低于N-9,其对精子的抑制作用不是通过破坏精子质膜与鞭毛来实现。 展开更多

关键词 dl-扁桃酸 壬苯醇醚 vk2/E6E7细胞 细胞毒性

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鬼臼毒素纳米脂质载体通过非Caspase依赖途径诱导VK2/E6E7细胞凋亡机制的研究 被引量：2

3

作者 李雪芽 肖艳 曾抗 《皮肤性病诊疗学杂志》 2013年第2期89-92,共4页

目的:探讨鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)诱导人永生化阴道上皮细胞(VK2/E6E7)凋亡的作用及机制。方法:取对数期生长VK2/E6E7细胞,分别加入POD-NLC和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同培养24小时。实验分为4组:A组:空白对照组;B组:0.25μg/mL ... 目的:探讨鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)诱导人永生化阴道上皮细胞(VK2/E6E7)凋亡的作用及机制。方法:取对数期生长VK2/E6E7细胞,分别加入POD-NLC和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同培养24小时。实验分为4组:A组:空白对照组;B组:0.25μg/mL POD-NLC+Caspase抑制剂组;C组:1μg/mL POD-NLC+Caspase抑制剂组;D组:空白NLC+Caspase抑制剂组。采用流式细胞仪检测ROS水平,qPCR检测AIF mRNA表达,蛋白印迹检测各组细胞AIF、cyt-C蛋白表达。结果:B组、C组均可以上调ROS、AIF、cyt-C水平,与A组及D组相比均有统计学差异(P值均<0.05);B组与C组AIF mRNA及AIF蛋白表达无统计学差异(P值均>0.05);ROS、cyt-C各组间比较均有统计学意义(P值均<0.05)。结论:鬼臼毒素纳米脂质载体可以通过非Caspase依赖途径诱导永生化阴道上皮细胞凋亡。 展开更多

关键词 鬼臼毒素纳米脂质载体 凋亡机制 非Caspase依赖途径 vk2 E6E7细胞

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胞外ATP对VK2／E6E7细胞胞内pH的影响

4

作者 伍忠銮 左武麟 +4 位作者 盛雪婷 李琳 刘叔文 姜世勃 周文良 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期123-124,共2页

利用激光扫描共聚焦显微镜（Confocal microscope）采用pH依赖的荧光探针Snarf-4F测量细胞胞内pH（pHi）方法，发现胞外ATP能剂量依赖（10—1000μmol／L）地降低人阴道上皮细胞株VK2／E6E7细胞pHi。当胞外加入200μmol／L ATP时，能快... 利用激光扫描共聚焦显微镜（Confocal microscope）采用pH依赖的荧光探针Snarf-4F测量细胞胞内pH（pHi）方法，发现胞外ATP能剂量依赖（10—1000μmol／L）地降低人阴道上皮细胞株VK2／E6E7细胞pHi。当胞外加入200μmol／L ATP时，能快速地使VK2／E6E7细胞pHi降低，此降低的pHi在洗脱ATP后可迅速恢复。这些结果表明胞外ATP能引起VK2／E6E7细胞胞内酸化。 展开更多

关键词 ATP vk2/E6E7 胞内pH

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乙酸阴道热敏凝胶剂对人VK2/E6E7细胞损伤的研究

5

作者 孙冰 王玉柱 +4 位作者 黄超 田芳 夏敏杰 胡晶莹 李卫华 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期101-106,共6页

目的探讨乙酸阴道热敏凝胶剂（Acid-TISG）对人阴道黏膜上皮细胞（VK2/E6E7）损伤等影响。方法Acid-TISG和阳性对照市售壬苯醇醚冻胶剂（N-9 jelly）分别按不同稀释浓度0.04-200 mg/ml与VK2/E6E7细胞共培养4 h,用MTT法检测细胞存活率并... 目的探讨乙酸阴道热敏凝胶剂（Acid-TISG）对人阴道黏膜上皮细胞（VK2/E6E7）损伤等影响。方法Acid-TISG和阳性对照市售壬苯醇醚冻胶剂（N-9 jelly）分别按不同稀释浓度0.04-200 mg/ml与VK2/E6E7细胞共培养4 h,用MTT法检测细胞存活率并计算IC50值和治疗指数（therapeutic index,TI）。VK2/E6E7细胞与Acid-TISG 10-100 mg/ml（临床拟用量1-10倍）和市售N-9 jelly 4 mg/ml（临床用量0.1倍）分别作用4 h,用ELISA试剂盒方法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶（LDH）释放率（%）;丙二醛（MDA）和还原性谷胱甘肽（GSH）含量;白介素（IL-6）和肿瘤坏死因子（TNF-α）水平;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 MTT实验结果表明,Acid-TISG和市售N-9 jelly对细胞存活率具有抑制作用,且呈现剂量-效应关系（r=0.981,P=0.003和r=0.991,P=0.009）,Acid-TISG的IC50和TI值分别为106.32 mg/ml和612.72,市售N-9 jelly的IC50和TI值分别为0.441 mg/ml和5.73。与空白凝胶组相比,AcidTISG的低、中浓度10和50 mg/ml（临床拟用量的1和5倍）未见细胞损伤和凋亡,但高浓度100 mg/ml（临床拟用量10倍）作用4 h,VK2/E6E7细胞LDH释放率和MDA含量显著升高（P〈0.01）,GSH含量明显降低（P〈0.01）。IL-6和TNF-α水平的增高与VK2/E6E7细胞晚期凋亡/坏死细胞增多呈正相关（r=0.925,P〈0.05）,具有浓度依赖性。结论高浓度AcidTISG与低浓度市售N-9 jelly对VK2/E6E7细胞有相似的氧化损伤和凋亡作用,就氧化应激程度来看,市售N-9 jelly比Acid-TISG高100倍,这与TI值相一致,提示Acid-TISG对人阴道黏膜上皮细胞的毒性明显较小,安全性更高。 展开更多

关键词 乙酸阴道热敏凝胶剂 vk2/E6E7细胞 氧化应激 炎症 凋亡

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高效液相色谱法测定微胶囊化片剂型保健食品中VK2的含量 被引量：1

6

作者 陈晓嘉 周芳梅 +3 位作者 罗小宝 吴家玲 叶帆 冯志强 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2021年第6期114-118,共5页

建立高效液相色谱法测定微胶囊化保健品片剂中VK2(七烯甲萘醌)的分析方法。样品使用添加了稀盐酸溶液进行破壁,破坏维生素片的微胶囊化包裹,使目标物充分游离,再用无水乙醇提取游离态的VK2,采用Thermo scientific Vitade-004K1色谱柱进... 建立高效液相色谱法测定微胶囊化保健品片剂中VK2(七烯甲萘醌)的分析方法。样品使用添加了稀盐酸溶液进行破壁,破坏维生素片的微胶囊化包裹,使目标物充分游离,再用无水乙醇提取游离态的VK2,采用Thermo scientific Vitade-004K1色谱柱进行分离,以100%甲醇为流动相进行等度洗脱,用二极管阵列检测器在波长254nm处进行检测,外标法定量。结果表明:VK2(七烯甲萘醌)保留时间为4.2min,当取样量为1g时,VK2(七烯甲萘醌)检出限为0.52μg/100g,在0.20-2.0μg/mL范围内线性良好,相关系数R2=0.99991,3个浓度级别的回收率为91.2%-94.1%之间;相对标准偏差(RSD)≤1.11%,该方法准确性高、重现性好、操作简单,可用于微胶囊化片剂型保健食品中VK2的测定。 展开更多

关键词 高效液相色谱法 vk2 微胶囊化 保健食品

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高效液相色谱法测定乳粉中VK2（七烯甲萘醌）含量 被引量：5

7

作者 王瑶 张敏 +5 位作者 马晓冲 刘星 柴艳兵 张耀广 李飞 李兴佳 《乳业科学与技术》 2019年第6期30-33,共4页

建立使用高效液相色谱快速检测乳粉中VK2(七烯甲萘醌(menaquinone-7,MK-7))含量的方法。乳粉样品用250 mg/g脂肪酶酶解2 h,经500 mg/g碳酸钾皂化,正己烷提取,旋转蒸发浓缩,甲醇-异丙醇(4∶1,V/V)复溶,用C18色谱柱及还原柱柱后衍生,经高... 建立使用高效液相色谱快速检测乳粉中VK2(七烯甲萘醌(menaquinone-7,MK-7))含量的方法。乳粉样品用250 mg/g脂肪酶酶解2 h,经500 mg/g碳酸钾皂化,正己烷提取,旋转蒸发浓缩,甲醇-异丙醇(4∶1,V/V)复溶,用C18色谱柱及还原柱柱后衍生,经高效液相色谱-荧光检测器测定,外标法定量。结果表明:MK-7在19.47 min附近出峰,标准曲线在MK-7质量浓度0.0~1.5μg/mL范围内呈良好线性关系(R^2=0.99995);空白乳粉样品中MK-7添加量为5、10、25μg/100 g时,加标回收率为87.9%~94.3%,相对标准偏差为0.9%~6.4%;取样量为2 g、定容体积为1 mL时,MK-7检测限为0.15μg/100 g,定量限为0.5μg/100 g。本检测方法前处理简单,具有较高准确度、灵敏度和稳定性,可以用于乳粉中VK2(MK-7)含量的检测。 展开更多

关键词 乳粉 vk2 七烯甲萘醌 高效液相色谱 荧光检测器 定量测定

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研究发现服用VK2受益甚微

8

作者 黄敏燕(摘) 《国外药讯》 2005年第8期26-26,共1页

对日本卫材公司生产的维生素K2，即Glakay（menatetrenone，四烯甲奈醌）（Ⅰ），治疗骨质疏松症进行的一次大规模上市后研究中期分析报告显示，（Ⅰ）在治疗骨质疏松症中在预防新发生脊椎骨折方面无显著益处。而在次要终点显示有一定... 对日本卫材公司生产的维生素K2，即Glakay（menatetrenone，四烯甲奈醌）（Ⅰ），治疗骨质疏松症进行的一次大规模上市后研究中期分析报告显示，（Ⅰ）在治疗骨质疏松症中在预防新发生脊椎骨折方面无显著益处。而在次要终点显示有一定改善。 展开更多

关键词 研究发现 vk2 骨质疏松症 受益 服用 维生素K2 分析报告 脊椎骨折 上市后

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副干酪乳酪杆菌CCFM1317激活Keap1/Nrf2通路缓解小鼠阴道加德纳菌感染 被引量：3

9

作者 林如梦 黄小艳 +4 位作者 崔树茂 毛丙永 唐鑫 赵建新 张秋香 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第3期21-27,共7页

乳杆菌有助于调节机体抗氧化信号通路,上调抗氧化酶类的表达缓解氧化损伤。该研究旨在探讨特定益生菌对宿主抗氧化能力的提升,及其在调节阴道加德纳菌(Gardnerella vaginalis,GV)感染造成的氧化应激中的作用。通过建立炎症模型和筛选具... 乳杆菌有助于调节机体抗氧化信号通路,上调抗氧化酶类的表达缓解氧化损伤。该研究旨在探讨特定益生菌对宿主抗氧化能力的提升,及其在调节阴道加德纳菌(Gardnerella vaginalis,GV)感染造成的氧化应激中的作用。通过建立炎症模型和筛选具有抗氧化潜力的乳杆菌,该研究采用1.25μg/mL的脂多糖处理VK2/E6E7细胞24 h,使用CCK-8法确定具有抗氧化潜力的乳杆菌。在动物实验中,采用颈部皮下注射5 mg/mL戊酸雌二醇和阴道注射20μL 1010 CFU/mL的GV建立小鼠感染模型,随后连续10 d灌胃100μL 109 CFU/mL的乳杆菌菌悬液。实验结束后,对不同组别小鼠阴道进行GV载量检测、病理组织切片观察以及抗氧化信号通路Kelch-like ECH-associated protein 1(Keap1)/Nuclear factor erythroid 2-related factor 2(Nrf2)表达检测。研究结果显示,副干酪乳酪杆菌CCFM1317在体外试验中可显著上调细胞活力至109.0%。在动物试验中,口服CCFM1317后,GV载量下降了40.6%,阴道组织的病理切片结果也显示良好表征。进一步地,检测阴道组织Keap1/Nrf2信号通路表达情况,发现CCFM1317可使Keap1 mRNA水平表达显著降低48.6%,Nrf2 mRNA水平表达显著上调(P<0.0001),同时Nrf2含量上升了1.9倍。综上,该研究筛选的副干酪乳酪杆菌CCFM1317具有增强阴道抗氧化能力的特性,能够帮助机体缓解氧化应激。 展开更多

关键词 乳杆菌 阴道加德纳菌 氧化应激 Keap1/Nrf2信号通路 vk2/E6E7

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枯草杆菌发酵生产VK_2的技术工艺条件初探 被引量：6

10

作者 李拖平 郭梅 +1 位作者 王娜 陈积星 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第11期379-382,共4页

对枯草杆菌发酵生产VK2的培养条件进行优化的结果表明,培养基中大豆蛋白和玉米淀粉的浓度过高或过低均不利于VK2的产生与积累,其最适浓度均为2%。甘油作为枯草杆菌的补助碳源对VK2的产生与积累具有一定的促进作用,其最适添加量为5%。1%... 对枯草杆菌发酵生产VK2的培养条件进行优化的结果表明,培养基中大豆蛋白和玉米淀粉的浓度过高或过低均不利于VK2的产生与积累,其最适浓度均为2%。甘油作为枯草杆菌的补助碳源对VK2的产生与积累具有一定的促进作用,其最适添加量为5%。1%蔗糖作为枯草杆菌生长的外源性糖源对VK2的生产具有明显的促进作用,但Ca2+、Mg2+、K+等一些无机离子对VK2的产生都表现出不同程度的抑制作用。 展开更多

关键词 枯草杆菌 vk2 发酵条件

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鬼臼毒素纳米脂质载体通过线粒体途径诱导人阴道上皮细胞凋亡的机制研究 被引量：2

11

作者 肖艳 李雪芽 曾抗 《皮肤性病诊疗学杂志》 2013年第2期85-88,共4页

目的:研究鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)对体外培养的永生化人阴道上皮细胞(VK2/E6E7细胞)线粒体途径相关凋亡基因表达的影响,探索POD-NLC诱导VK2/E6E7细胞凋亡的作用机制。方法:自制0.5%POD-NLC,用不同浓度的POD-NLC(0.25,1μg/mL)和... 目的:研究鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)对体外培养的永生化人阴道上皮细胞(VK2/E6E7细胞)线粒体途径相关凋亡基因表达的影响,探索POD-NLC诱导VK2/E6E7细胞凋亡的作用机制。方法:自制0.5%POD-NLC,用不同浓度的POD-NLC(0.25,1μg/mL)和空白NLC作用VK2/E6E7细胞24 h后,采用实时荧光定量核酸扩增法(Real-time Quantitative PCR,qPCR)检测bcl-2、bax、caspace-3、caspase-9等mRNA表达水平,Western Bolt检测bcl-2、bax蛋白的表达水平。结果:POD-NLC呈剂量依赖性的上调bax mRNA的表达水平(P值均<0.01),同时也增加caspase-3、caspase-9 mRNA的表达(P值均<0.05),并降低bcl-2 mRNA表达量(P值均<0.01);空白-NLC组对上述mRNA的影响均无统计学意义(P值均>0.05)。POD-NLC可剂量依赖性地上调bax蛋白表达量(P值均<0.01),同时下调bcl-2蛋白表达量(P值均<0.01),但各药物处理组之间差异无统计学意义(P值均>0.05)。结论:POD-NLC能通过线粒体途径诱导VK2/E6E7细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 鬼臼毒素纳米脂质载体 vk2 E6E7细胞 细胞凋亡 线粒体途径

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维生素K_2对HL-60细胞生长及凋亡、分化的诱导作用

12

作者 曲辉 任立红 +2 位作者 冯玉芝 李钰 刘晓阳 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2004年第2期160-162,共3页

目的　观察维生素K2 (VK2 )对HL 6 0细胞生长及凋亡、分化的诱导作用。方法　通过四氮唑蓝比色 ,细胞形态 ,流式细胞仪测定细胞周期、凋亡率及CD1 4的表达 ,观察VK2 对HL 6 0细胞的影响。结果　HL 6 0细胞经1 0 μmol L以上浓度的VK2 ... 目的　观察维生素K2 (VK2 )对HL 6 0细胞生长及凋亡、分化的诱导作用。方法　通过四氮唑蓝比色 ,细胞形态 ,流式细胞仪测定细胞周期、凋亡率及CD1 4的表达 ,观察VK2 对HL 6 0细胞的影响。结果　HL 6 0细胞经1 0 μmol L以上浓度的VK2 作用后增殖受到抑制 ,1 0 μmol L、2 0 μmol LVK2 作用 72h后 ,细胞形态呈现凋亡细胞的特征。 5 μmol L、1 0 μmol L、2 0 μmol LVK2 作用于HL 6 0细胞 72h凋亡率分别为 7.1 6 %、1 1 .31 %、2 0 .36 % ,与对照组相比差异显著。G0 G1 期细胞阻滞 ,CD1 4的表达与对照组相比无差异性。结论　VK2 对HL 6 0细胞有生长抑制作用 ,能诱导HL 6 0细胞发生凋亡 ,具有一定的量效和时效关系 ,单独使用VK2 的分化作用不显著。 展开更多

关键词 维生素K2 HL-60细胞生长 vk2 细胞凋亡 细胞分化 基因表达

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益生菌制剂对钙缺乏骨质疏松症的防治作用 被引量：4

13

作者 张颜廷 Joerg J.Jacoby +3 位作者 王静 刘虹 张化朋 王丽春 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期45-48,共4页

目的运用饲喂低钙饲料的方法建立大鼠骨质疏松模型,结合骨密度、骨矿含量及uc OC/c OC等指标,探讨含VK2(MK-7)的益生菌粉、VD2及Ga的复配产品对防治骨质疏松的作用。方法 220 g^250 g雌性SD大鼠分为正常饲喂对照组、低钙饲料饲喂组、低... 目的运用饲喂低钙饲料的方法建立大鼠骨质疏松模型,结合骨密度、骨矿含量及uc OC/c OC等指标,探讨含VK2(MK-7)的益生菌粉、VD2及Ga的复配产品对防治骨质疏松的作用。方法 220 g^250 g雌性SD大鼠分为正常饲喂对照组、低钙饲料饲喂组、低剂量复配产品治疗组、高剂量复配产品治疗组,每组8只大鼠,试验进行前及试验结束后对每组大鼠进行DEXA测定,并对试验结束后每组大鼠的uc OC/c OC等血液指标进行测定。结果相对于正常对照组,低钙饲料饲喂组大鼠骨密度及骨矿含量值显著降低(P<0.05)。灌胃复配产品高低剂量组大鼠骨密度及骨矿含量与低钙饲喂组相比显著提高(P<005),且uc OC/c OC值显著降低(P<0.05)。结论 VK2(MK-7)的益生菌粉、VD2的益生菌粉及Ga的复配产品具有防治骨质疏松的作用。 展开更多

关键词 骨质疏松 vk2益生菌粉 骨密度 骨矿含量 ucOC/cOC值

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维生素K_2及其与性激素联合应用对去卵巢大鼠骨的影响 被引量：1

14

作者 刘春梅 徐苓 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2008年第8期537-542,共6页

目的观察维生素K2(vitamin K2,VK2)及其与性激素(sex hormone,SH)联合应用对去卵巢大鼠骨质疏松模型预防的效果。方法30只SPF级10月龄雌性SD大鼠按体重随机分为4组,行卵巢切除(OVX,n=22)或假手术(Sham,n=8),术后2周给以不同的药物干预:... 目的观察维生素K2(vitamin K2,VK2)及其与性激素(sex hormone,SH)联合应用对去卵巢大鼠骨质疏松模型预防的效果。方法30只SPF级10月龄雌性SD大鼠按体重随机分为4组,行卵巢切除(OVX,n=22)或假手术(Sham,n=8),术后2周给以不同的药物干预:VK2组(OVX+VK2,n=7)、VK2+SH组(OVX+VK2+SH,n=7);OVX组(n=8)和假手术组不做药物干预。14周后检测血骨特异性碱性磷酸酶(BALP)和尿脱氧吡啶啉(uDPYD);测定骨密度(BMD)。牺牲后进行股骨三点弯曲实验和股骨远端骨组织形态计量学测定。结果①骨转换指标:OVX组较Sham组BALP和uDPYD显著升高,骨转换加快。与OVX组相比,VK2组uDPYD明显增加,而BALP没有统计学差异;VK2+SH组BALP和uDPYD均下降。②BMD:标化体重,OVX组腰椎和股骨BMD明显低于Sham组,VK2组腰椎BMD显著高于OVX组,VK2+SH组BMD没有变化。③股骨远端形态计量学:OVX组与Sham组相比,骨小梁厚度变薄,分离度增加,数量减少,但无统计学意义,骨形成和骨吸收参数均升高,其中骨形成率(BFR/Bs)、类骨质周长百分数(%O.Pm)与Sham组有统计学差异。与OVX组相比,用药组对骨量和骨小梁结构无改善,均有降低骨形成参数的趋势,从数值上看,VK2+SH组降低的程度>VK2组。VK2+SH组骨矿化延迟时间(MLT)、BFR/Bs下降最为显著。④股骨三点弯曲实验结果:VK2+SH组最大载荷较其他各组显著降低,最大应变和弹性模量各组之间无统计学差异。结论单用VK2可以增加去卵巢大鼠腰椎BMD,但作用机制尚不清楚。VK2与SH合用未发现对骨健康有利。 展开更多

关键词 维生素K2 大鼠 激素替代治疗 雌激素 骨质疏松 骨组织形态计量学 骨生物力学 骨密度

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维生素K_2对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用

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作者 李璐 毕富勇 +1 位作者 吕俊 吴明彩 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期30-33,共4页

近年研究发现维生素K2（VK2）对肝癌具有抑制作用，但目前VK2的抗肝癌的机理尚不明确。VK2对人肝癌细胞株HepG-2细胞增殖的抑制作用及其机制。具体做法如下：体外培养肝癌HepG-2细胞，分别用不同浓度的VK2（0、5、10、20和40μmol／L）... 近年研究发现维生素K2（VK2）对肝癌具有抑制作用，但目前VK2的抗肝癌的机理尚不明确。VK2对人肝癌细胞株HepG-2细胞增殖的抑制作用及其机制。具体做法如下：体外培养肝癌HepG-2细胞，分别用不同浓度的VK2（0、5、10、20和40μmol／L）处理培养1～3d，采用台盼蓝拒染法测定各时期的各组细胞的活力；收集20μmol／LVK，作用24h和48h后的HepG-2细胞和对照细胞，抽提DNA电泳检测；收集20μmol／LVK，作用48h后的HepG-2细胞和对照细胞，抽提总RNA，半定量RT—PCR检测抗凋亡基因survivin、bcl-2和促凋亡基因bax的mRNA表达水平。各VK2处理组的活细胞数明显低于对照组（P〈0．05）；经VK2处理的细胞其DNA电泳结果呈明显的梯状条带；与对照组相比，VK2处理组细胞的抗凋亡基因survivin和bcl-2的RT—PCR产物电泳的目的条带相对灰度值（目的基因灰度／GAPDH灰度）明显减少（P〈0．05），而促凋亡基因bax则无明显变化（P〉0．05）。VK2通过下调抗凋亡基因survivin和bel－2／bax的桌浊水平诱导肝痛HenG-2细胞凋亡。 展开更多

关键词 维生素K2 HEPG-2细胞 细胞凋亡 SURVIVIN BCL-2

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维生素K2的合成新工艺 被引量：1

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作者 剧锦亮 董晓丽 吴文忠 《大连工业大学学报》 CAS 2008年第3期232-234,共3页

以2-甲基-1,4-萘醌和香叶基里那醇为原料,无水ZnCl2为催化剂,采用傅-克烷基化反应合成了维生素K2。考察了原料与催化剂的摩尔比、反应温度、反应时间及醋酸投加量对维生素K2收率的影响。结果表明,在n(2-甲基-1,4-萘醌)∶n(香叶基里那醇)... 以2-甲基-1,4-萘醌和香叶基里那醇为原料,无水ZnCl2为催化剂,采用傅-克烷基化反应合成了维生素K2。考察了原料与催化剂的摩尔比、反应温度、反应时间及醋酸投加量对维生素K2收率的影响。结果表明,在n(2-甲基-1,4-萘醌)∶n(香叶基里那醇)∶n(ZnCl2)=1∶1.8∶1,反应温度50℃,反应时间2 h,醋酸投加量为0.8 mmol的条件下,维生素K2一次收率达55.80%。 展开更多

关键词 2-甲基-1 4-萘醌 香叶基里那醇 维生素K2

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产维生素K2贝莱斯芽孢杆菌ND的诱变育种及突变子快速筛选 被引量：1

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作者 赵长乐 汤贵祥 +2 位作者 万银平 黄晓梅 张慧莉 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期695-703,共9页

本研究旨在探索贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)ND诱变育种的最佳条件,确定原生质体的最佳制备条件和融合条件.结果表明,紫外灯下50cm处诱变30s涂布于2.0%LiCl平板的复合诱变,最有利于获得VK2产量提高的突变子.溶菌酶0.1mg/mL于33... 本研究旨在探索贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)ND诱变育种的最佳条件,确定原生质体的最佳制备条件和融合条件.结果表明,紫外灯下50cm处诱变30s涂布于2.0%LiCl平板的复合诱变,最有利于获得VK2产量提高的突变子.溶菌酶0.1mg/mL于33℃下保温20min,原生质体再生率最高,为41.2%;65℃热处理10min或紫外处理40s,原生质体的灭活率可达到100%;40%PEG-6000在37℃下处理6min原生质体融合频率最高,为9.8%.本研究将分光光度法测定与HPLC法测定提取液中维生素K2(VK2,MK-7)的含量相结合构建了一种可快速筛选产VK2突变体的方法,最终获得一株VK2产量提高31.42%的突变菌株.另外也为贝莱斯芽孢杆菌的诱变育种和原生质体制备提供了研究基础. 展开更多

关键词 贝莱斯芽孢杆菌 维生素K2 诱变育种 原生质体

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