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TRIM家族蛋白在甲型流感病毒感染中的作用研究进展
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作者 刘爱军 张传亮 +2 位作者 安慧婷 章杭建 周彩琴 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第1期108-116,共9页
泛素化是一种重要的蛋白质翻译后修饰,主要通过E1泛素激活酶、E2泛素结合酶和E3泛素连接酶三大关键酶类的精密协作完成。泛素化过程中,E3泛素连接酶负责识别特定底物,并将泛素转移到底物上。三方基序(Tripartite motif,TRIM)蛋白属于E3... 泛素化是一种重要的蛋白质翻译后修饰,主要通过E1泛素激活酶、E2泛素结合酶和E3泛素连接酶三大关键酶类的精密协作完成。泛素化过程中,E3泛素连接酶负责识别特定底物,并将泛素转移到底物上。三方基序(Tripartite motif,TRIM)蛋白属于E3泛素连接酶家族,人类、小鼠、鸭、鸡中已经分别发现不少于80、64、57、54种TRIM基因[1]。TRIM家族蛋白广泛参与细胞生理和病理过程,包括但不限于细胞增殖与分化、免疫、自噬、程序性死亡等。大多数TRIM家族蛋白N端包含RING、B-box和coiled-coil(CC)3个保守的结构域。其中,RING结构域具有E3泛素连接酶活性;B-box结构域能协调自身的寡聚化,具有弱E3泛素连接酶活性;CC结构域负责同源或异源二聚化以及蛋白质之间的相互作用。 展开更多
关键词 泛素化 trim家族蛋白 甲型流感病毒 E3泛素连接酶
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TRIM24、c-myc及ARF在食管鳞癌组织中的表达及意义
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作者 吴建龙 姜海斌 +5 位作者 王学文 宋晶晶 初晓燕 王爱民 李建辉 苏彬 《现代肿瘤医学》 2025年第3期417-422,共6页
目的:探讨三结构域蛋白家族24(tripartite motif-containing protein 24,TRIM24)、c-myc及ARF蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其意义。方法:选取2018年01月至2022年12月期间承德市中心医院接受手术治疗的102例食管鳞癌患者临床病理... 目的:探讨三结构域蛋白家族24(tripartite motif-containing protein 24,TRIM24)、c-myc及ARF蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其意义。方法:选取2018年01月至2022年12月期间承德市中心医院接受手术治疗的102例食管鳞癌患者临床病理资料作为研究对象(实验组),同时选取癌旁正常食管黏膜组织54例(对照组),采用免疫组化(Envision法)对TRIM24、c-myc及ARF蛋白进行检测,观察三者在鳞癌组织及癌旁正常食管黏膜组织中的表达情况,并分析三者的表达与临床病理特征的关系,同时研究三者于食管鳞癌组织内表达的相关性。结果:TRIM24、c-myc及ARF在鳞癌组织及癌旁正常食管黏膜组织中阳性表达率分别为72.62%vs 7.45%、74.36%vs 13.85%、26.56%vs 83.18%,三种蛋白在鳞癌组织及正常食管黏膜组织中的表达差异具有统计学意义(P均<0.05);经分析,食管鳞癌组织中的TRIM24、c-myc及ARF蛋白表达与癌的分化程度、淋巴结转移、临床分期具有显著相关性(P均<0.05);经Spearman相关性分析,食管鳞癌组织中TRIM24与c-myc蛋白表达呈正相关(r=0.587,P<0.05),TRIM24与ARF蛋白表达呈负相关(r=-0.601,P<0.05),c-myc与ARF蛋白表达呈负相关(r=-0.465,P<0.05)。结论:TRIM24、c-myc、ARF的异常表达可能对食管鳞状细胞癌的发生及发展有一定关系。因此,c-myc、TRIM24和ARF可能作为新的潜在治疗靶点,为食管鳞癌患者的个体化治疗提供新的方向。 展开更多
关键词 trim24 C-MYC ARF 食管鳞状细胞癌 病理学特征
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TRIM27:A Bifunctional Biomarker for Immune Microenvironment Regulation and Prognostic Assessment in Skin Cutaneous Melanoma
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作者 Weizheng Liang Chenyang Hou +9 位作者 Fengxu Yan Yanyan Bo Shan Liu Dandan Xu Jiajia Xiao Xiran Wang Fei Guo Qingxue Meng Zhongwu Li Rensen Ran 《Biomedical and Environmental Sciences》 2025年第12期1569-1574,共6页
Skin cutaneous melanoma(SKCM),a highly invasive malignant tumor originating from skin melanocytes,poses a significant threat to public health[1,2].Its development is closely associated with multiple factors,such as ul... Skin cutaneous melanoma(SKCM),a highly invasive malignant tumor originating from skin melanocytes,poses a significant threat to public health[1,2].Its development is closely associated with multiple factors,such as ultraviolet radiation,gene mutations,and immune escape.Among these,imbalance in the immune surveillance and clearance of tumor cells is a crucial link to disease progression[3,4].Tripartite motif-containing 27,which belongs to the TRIM protein family and is encoded by the TRIM27 gene,contains the RING,B-box,and coiled-coil domains.It participates in biological processes such as cell-cycle regulation,signal transduction,and immune response mainly by modifying target proteins through ubiquitination.Notably,increasing evidence indicates that TRIM27 is closely associated with the tumor immune microenvironment and contributes to cancer immune escape via multiple mechanisms,thereby promoting tumor development[5].However,the role of TRIM27 in SKCM remains unclear,thus prompting our investigation to elucidate this. 展开更多
关键词 immune microenvironment skin cutaneous melanoma trim protein skin cutaneous melanoma skcm ultraviolet radiationgene prognostic assessment malignant tumor trim
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利用CRISPR/Cas9技术构建TRIM21敲除稳定HeLa细胞系
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作者 杨东亮 邵帅 +3 位作者 纪晓岚 张德荣 柏家林 李琼毅 《华北农学报》 北大核心 2025年第6期231-238,共8页
旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,成功构建TRIM21基因敲除的稳定人宫颈癌细胞(HeLa)系。首先,针对TRIM21基因设计并合成了2个特异性的sgRNA(sgRNA1和sgRNA2),通过PCR扩增和无缝克隆技术将其分别克隆至LentiCRISPRv2载体中。随后,利用... 旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,成功构建TRIM21基因敲除的稳定人宫颈癌细胞(HeLa)系。首先,针对TRIM21基因设计并合成了2个特异性的sgRNA(sgRNA1和sgRNA2),通过PCR扩增和无缝克隆技术将其分别克隆至LentiCRISPRv2载体中。随后,利用电转染法将编辑载体转染至HeLa细胞中,并通过嘌呤霉素筛选获得成功整合编辑载体的单克隆细胞系。经Western Blot验证和扩大培养,获得了稳定敲除TRIM21的HeLa细胞系。基于该细胞系,进一步探究了TRIM21在调控Ⅰ型干扰素信号通路中的作用。试验结果表明,TRIM21敲除显著抑制了细胞内MDA5、MAVS和IRF3的表达水平,同时抑制了IRF3的磷酸化,揭示了TRIM21在Ⅰ型干扰素信号通路中的重要调控作用。成功构建的TRIM21敲除HeLa细胞系为深入研究TRIM21调控病毒增殖机制及其在先天免疫应答中的作用提供了可靠的细胞模型;通过优化试验方法,证实了电转染法在构建基因敲除细胞系中的高效性和稳定性,为其他基因敲除细胞系的构建提供了技术参考。 展开更多
关键词 细胞系 trim21 CRISPR/Cas9 电转染 人宫颈癌细胞HeLa
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宿主蛋白TRIM7对口蹄疫病毒复制的影响
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作者 刘泓屹 张伟 +7 位作者 蔡建涛 古涛鸣 王良锋 陈治彤 曹伟军 郑海学 杨帆 张桂红 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第7期870-876,共7页
本研究旨在探究TRIM7对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响。首先,针对猪源TRIM7基因外显子设计两条单向导RNA(single guide RNA,sgRNA),分别构建至载体PX459中,将成功构建的sgRNA重组质粒转染PK-15细胞,经嘌呤霉素筛选、有限稀释法挑取单克隆... 本研究旨在探究TRIM7对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响。首先,针对猪源TRIM7基因外显子设计两条单向导RNA(single guide RNA,sgRNA),分别构建至载体PX459中,将成功构建的sgRNA重组质粒转染PK-15细胞,经嘌呤霉素筛选、有限稀释法挑取单克隆细胞,经测序及Western-blot分析鉴定TRIM7基因的敲除情况,获得敲除TRIM7基因的PK-15细胞系。将TRIM7基因敲除细胞和对照细胞中分别感染FMDV,用Western-blot、RT-qPCR和TCID50测定等方法综合评价敲除TRIM7基因后对FMDV复制的影响。同时,在PK-15细胞上过表达TRIM7检测其对病毒复制的影响。结果显示,成功构建TRIM7基因敲除PK-15细胞系,且FMDV在TRIM7基因敲除细胞系中的复制水平均显著低于在对照细胞中的复制水平,当过表达TRIM7时则会显著促进病毒的复制,表明TRIM7影响了FMDV的复制。本研究为深入探索TRIM7的生物学功能及其调控病毒复制的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 trim7基因 细胞系 过表达 口蹄疫病毒
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TRIM39.2过表达对鸡巨噬细胞转录表达的影响
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作者 吴双 尹娜 +4 位作者 余莫涵 平玉宇 白皓 陈世豪 常国斌 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期178-188,共11页
旨在探究鸡主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC)定位的TRIM39.2过表达对鸡巨噬细胞转录表达谱的影响。本研究通过RT-qPCR构建鸡TRIM39.2基因组织表达谱,克隆鸡TRIM39.2基因并构建携带标签的重组表达载体。分... 旨在探究鸡主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC)定位的TRIM39.2过表达对鸡巨噬细胞转录表达谱的影响。本研究通过RT-qPCR构建鸡TRIM39.2基因组织表达谱,克隆鸡TRIM39.2基因并构建携带标签的重组表达载体。分别转染空载体和TRIM39.2真核表达载体至HD11细胞内,收获RNA制备文库并进行转录组测序及生物信息学分析。筛选差异表达基因,随后进行GO和KEGG富集分析,并用RT-qPCR方法进一步验证转录组测序结果。结果表明,与其他组织相比,脾脏中TRIM39.2的表达最高。成功克隆了鸡TRIM39.2基因,并构建了携带Myc标签的重组表达载体pCAGGS-Myc-TRIM39.2,并验证了重组载体成功在鸡HD11细胞中表达TRIM39.2重组蛋白。转录组测序分析获得了33个显著差异表达基因。GO分析主要富集于细胞因子的活性特性及其参与介导的信号传导途径。KEGG分析则主要富集于细胞因子与受体间的相互作用及RIG-I样受体信号等通路。鸡TRIM39.2基因在巨噬细胞介导的免疫应答和信号传导中具有重要的调控作用,尤其对RIG-I样受体介导的I型干扰素信号通路具有正调控作用,本研究为进一步丰富鸡RIG-I样受体信号通路调控网络奠定基础。 展开更多
关键词 trim39.2 鸡巨噬细胞 转录组 GO KEGG
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姜黄素调控TRIM2介导mTOR通路抑制RKO细胞增殖的机制研究
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作者 于航 武海阔 +2 位作者 赵千慧 李宇栋 刘剑 《首都医科大学学报》 北大核心 2025年第5期845-852,共8页
目的本研究旨在探讨姜黄素对结肠癌RKO细胞增殖的抑制作用及其机制,重点关注三结构域蛋白2(tripartite motif-containing protein 2,TRIM2)表达和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的调控。方法通过... 目的本研究旨在探讨姜黄素对结肠癌RKO细胞增殖的抑制作用及其机制,重点关注三结构域蛋白2(tripartite motif-containing protein 2,TRIM2)表达和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的调控。方法通过分析计算半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值,确定实验姜黄素给药浓度。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)法检测RKO细胞和人正常肠黏膜细胞(fetal human colon,FHC)中TRIM2表达水平。通过蛋白质免疫印迹实验(Western blotting,WB)检测姜黄素处理后RKO细胞中TRIM2及敲减TRIM2后RKO细胞mTOR通路相关蛋白表达情况。利用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)检测姜黄素处理、TRIM2敲减及mTOR信号通路激活剂对RKO细胞增殖的影响。结果TRIM2在RKO细胞中异常高表达。姜黄素可降低RKO细胞TRIM2表达,敲减TRIM2后RKO细胞mTOR信号通路相关蛋白表达下调。姜黄素和TRIM2敲减均显著抑制RKO细胞增殖,而mTOR信号通路激活剂可逆转这种抑制作用。结论姜黄素通过下调TRIM2表达调控mTOR信号通路抑制结肠癌RKO细胞增殖。 展开更多
关键词 姜黄素 结肠癌 trim2 MTOR 信号通路 细胞增殖
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TRIM家族蛋白在调控骨代谢中的作用及机制
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作者 杨晶 黄睿奇 +4 位作者 徐可 杨绵绵 衣雪洁 常波 姚婷婷 《生理学报》 北大核心 2025年第3期472-482,共11页
三结构域蛋白(tripartite motif-containing protein,TRIM)家族是一类关键的E3泛素连接酶,近年来在骨代谢调控中的作用受到广泛关注。本文综述了TRIM家族蛋白在骨代谢中的作用及其调控机制,特别是其在骨形成和骨吸收过程中的双重功能,... 三结构域蛋白(tripartite motif-containing protein,TRIM)家族是一类关键的E3泛素连接酶,近年来在骨代谢调控中的作用受到广泛关注。本文综述了TRIM家族蛋白在骨代谢中的作用及其调控机制,特别是其在骨形成和骨吸收过程中的双重功能,并详细分析了TRIM家族成员调控成骨细胞和破骨细胞活性的信号通路和分子机制。调节TRIM家族蛋白的表达或活性有助于治疗骨质疏松症等骨疾病。本综述重点回顾了TRIM家族成员在骨生理和病理中的分子机制,旨在为开发新型骨疾病治疗策略提供理论依据及科学指导。 展开更多
关键词 骨代谢 trim家族蛋白 骨形成 骨吸收 骨疾病
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猪TRIM56 E3泛素连接酶活性突变体的构建及功能研究
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作者 张金霞 曹莹 +9 位作者 张昊文 刘德鹏 李铎 王晓冉 田似报 吴香菊 齐静 周萌 王先炜 杜以军 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第6期98-104,共7页
旨在构建猪三基序蛋白(TRIM)56 E3泛素连接酶活性突变体并验证其在干扰素刺激蛋白(STING)介导的Ⅰ型干扰素信号通路中的作用。对猪源、人源TRIM56进行同源性比对、氨基酸序列分析,确定猪TRIM56 E3泛素连接酶活性位点;设计猪TRIM56 E3泛... 旨在构建猪三基序蛋白(TRIM)56 E3泛素连接酶活性突变体并验证其在干扰素刺激蛋白(STING)介导的Ⅰ型干扰素信号通路中的作用。对猪源、人源TRIM56进行同源性比对、氨基酸序列分析,确定猪TRIM56 E3泛素连接酶活性位点;设计猪TRIM56 E3泛素连接酶活性突变体引物,定点突变猪TRIM56 E3泛素连接酶活性位点,构建猪TRIM56 E3泛素连接酶活性突变体质粒并通过蛋白质免疫印迹(Western blot)验证表达;通过双荧光素酶报告基因(Luciferase)试验、实时荧光定量PCR(Real-time PCR)试验及免疫共沉淀(Co-IP)试验研究猪TRIM56及其E3泛素连接酶活性突变体在STING介导的Ⅰ型干扰素信号通路中的作用。结果:猪TRIM56 E3泛素连接酶活性突变体构建成功;猪TRIM56促进STING介导的干扰素β(IFN-β)mRNA水平和启动子活性,促进STING K63连接的多聚泛素化修饰,而猪TRIM56 E3泛素连接酶活性突变体没有显著促进作用。本研究为后续开展猪TRIM56在抗病毒天然免疫中的作用提供了有效工具。 展开更多
关键词 trim56 E3泛素连接酶 定点突变 STING
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基于CRISPR/Cas9技术的猪TRIM8基因敲除细胞系构建及其对猪流行性腹泻病毒复制的调控作用
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作者 王威 毕祯彬 +5 位作者 顾善绅 肖叶懿 周雅静 吴圣龙 包文斌 王海飞 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第8期3790-3799,共10页
【目的】利用CRISPR/Cas9技术构建三方基序蛋白8(tripartite motif 8,TRIM8)基因敲除的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),并探究TRIM8基因敲除对猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的调控作用,为深入理解TRIM8基因在抗病毒天然免疫中的作用机制及开发新... 【目的】利用CRISPR/Cas9技术构建三方基序蛋白8(tripartite motif 8,TRIM8)基因敲除的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),并探究TRIM8基因敲除对猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的调控作用,为深入理解TRIM8基因在抗病毒天然免疫中的作用机制及开发新的PEDV防控策略提供基因资源和理论依据。【方法】在猪TRIM8基因转录本第1外显子区域设计3条sg RNAs(sg RNA1、sg RNA2和sg RNA3),经退火形成双链DNA,与线性化p GK1.2载体连接,产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞进行鉴定。将重组载体转染IPEC-J2细胞。PCR扩增敲除位点附近序列,并通过测序判断sg RNA敲除效率;利用T7核酸内切酶Ⅰ(M0302)酶切鉴定阳性细胞克隆,通过TA克隆测序鉴定敲除序列;利用Western blotting检测基因敲除细胞中TRIM8蛋白表达情况。利用半数组织培养感染剂量(TCID_(50))和实时荧光定量PCR检测TRIM8基因敲除后PEDV复制的变化情况。【结果】重组载体测序结果显示,sg RNAs与p GK1.2成功连接。敲除效率分析发现,3个sg RNAs中只有sg RNA2有敲除效率。PCR产物经T7核酸内切酶Ⅰ(M0302)酶切筛选出8个阳性单克隆细胞。TA克隆测序分析发现,TRIM8基因2个等位基因序列分别缺失5和9bp。Western blotting结果表明,TRIM8基因敲除细胞中未见TRIM8蛋白表达。TCID_(50)和实时荧光定量PCR检测结果显示,与野生型IPEC-J2细胞相比,敲除TRIM8基因后显著上调了PEDV的病毒滴度(P<0.05),且PEDV M基因和N蛋白也显著上调(P<0.05)。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了TRIM8基因敲除的IPEC-J2细胞,并提高了PEDV在宿主细胞中复制的能力。TRIM8基因敲除细胞可为探究TRIM8基因功能及其调控PEDV复制的分子机制提供材料。 展开更多
关键词 trim8基因 猪流行性腹泻病毒(PEDV) CRISPR/Cas9技术 病毒复制
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MG53/TRIM72蛋白的功能及作用机制研究进展
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作者 张进 杨丽丽 +2 位作者 康静 刘建勋 李磊 《生理科学进展》 北大核心 2025年第2期146-153,共8页
MG53(mitsugumin 53)蛋白,是E3泛素连接酶多功能三结构域(tripartite motif,TRIM)蛋白家族成员之一,又被称为TRIM72。MG53是一种细胞膜修复蛋白,广泛表达于心肌和骨骼肌,可在膜损伤部位快速积累,在骨骼肌和心肌细胞膜修复中发挥重要作... MG53(mitsugumin 53)蛋白,是E3泛素连接酶多功能三结构域(tripartite motif,TRIM)蛋白家族成员之一,又被称为TRIM72。MG53是一种细胞膜修复蛋白,广泛表达于心肌和骨骼肌,可在膜损伤部位快速积累,在骨骼肌和心肌细胞膜修复中发挥重要作用。近年来,大量研究发现,MG53可以参与缺血预适应和缺血后适应的心肌保护作用,减轻心肌缺血再灌注损伤;并且在生理或病理状态下,MG53在许多器官中均有表达,促进细胞膜修复。然而MG53过表达则会导致泛素依赖的胰岛素受体表达下降,进而导致代谢综合征和糖尿病性心脏病。本文综述了近年来MG53的生理功能及其相关作用机制研究进展,以期为重组人MG53(recombinant human mitsugumin53,rhMG53)的临床应用提供参考。 展开更多
关键词 MG53 trim72 E3泛素连接酶 心肌细胞 骨骼肌细胞 细胞膜修复 糖尿病性心脏病
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CRISPR-Cas9介导的TRIM3基因敲除细胞系的建立及其应用
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作者 裴丹诗 范许许 +7 位作者 朱兆宇 王一卓 何路 任青峰 李熙忠 郑海学 李伟伟 万博 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第6期725-731,共7页
本研究旨在探究宿主蛋白TRIM3对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响。利用CRISPR/Cas9系统构建了TRIM3基因敲除的BHK21细胞系,并借助CCK8试剂盒检测了该基因的缺失对细胞活力的影响,结果表明,TRIM3敲除对细胞生长状态无明显影响。将FMDV分别感... 本研究旨在探究宿主蛋白TRIM3对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响。利用CRISPR/Cas9系统构建了TRIM3基因敲除的BHK21细胞系,并借助CCK8试剂盒检测了该基因的缺失对细胞活力的影响,结果表明,TRIM3敲除对细胞生长状态无明显影响。将FMDV分别感染野生型和TRIM3敲除型的BHK21细胞,通过Q-PCR、Western-blot和TCID50等多种方法检测FMDV在上述2株细胞中的复制情况,结果表明,TRIM3缺失能够显著抑制FMDV的复制。为了进一步验证TRIM3的表型功能,用慢病毒包装系统构建了TRIM3过表达细胞系。结果显示,过量表达TRIM3能够促进FMDV的复制。综上所述,本研究通过CRISPR/Cas9系统成功构建了TRIM3基因敲除细胞系和过表达细胞系,首次证明了TRIM3能够正向调控FMDV的复制,为后续探究TRIM3调控FMDV复制的具体机制奠定了基础。 展开更多
关键词 trim3 口蹄疫病毒 细胞系
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鸡TRIM32的序列分析及功能初步研究
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作者 黄心钰 张俊生 +5 位作者 卢军 张淼湘 林宏文 黄小武 焦培荣 郭剑英 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第5期122-129,共8页
本研究克隆鸡TRIM32(ChTRIM32)基因序列,分析其基因序列及其与不同物种TRIM32基因的同源性和遗传演化关系,预测其结构域及蛋白质二级结构,表达鸡TRIM32蛋白,并探究鸡TRIM32在天然免疫信号通路中的作用。试验结果表明:鸡TRIM32基因开放... 本研究克隆鸡TRIM32(ChTRIM32)基因序列,分析其基因序列及其与不同物种TRIM32基因的同源性和遗传演化关系,预测其结构域及蛋白质二级结构,表达鸡TRIM32蛋白,并探究鸡TRIM32在天然免疫信号通路中的作用。试验结果表明:鸡TRIM32基因开放阅读框为1944 bp,编码647个氨基酸,其蛋白质分子质量约为71.84 kDa;鸡TRIM32蛋白包含1个N端RING-HC结构域、1个B-box1结构域和6个重复的C端NHL结构;鸡TRIM32与火鸡、美洲雕、天鹅、枭鹦、鸿雁、绿头鸭、野猪、人、家鼠、狗、水牛、斑马鱼TRIM32的氨基酸序列同源性分别为97.2%、92.6%、91.9%、91.7%、91.6%、88.8%、75.0%、74.8%、74.7%、74.2%、74.0%、63.9%;鸡TRIM32与其他鸟类TRIM32的亲缘关系最近,与哺乳动物TRIM32的亲缘关系较远,与鱼类TRIM32的亲缘关系最远;鸡TRIM32蛋白质二级结构包含无规则卷曲(38.64%)、α-螺旋(29.37%)、延伸链(22.87%)、β-转角(9.12%);构建pCAGGS-ChTRIM32真核表达质粒;H5N1亚型禽流感病毒(DK212株)感染DF1细胞后,鸡TRIM32基因及其他抗病毒基因(IFN-β、IL-6、OAS、Mx)表达水平上调;过表达鸡TRIM32能增强鸡STING对IFN-β启动子的激活作用。本文成功鉴定并克隆了鸡TRIM32基因,预测了鸡TRIM32蛋白的结构域与二级结构,并研究了鸡TRIM32在天然免疫信号通路中的功能,为进一步探究鸡TRIM32在鸡抗病毒天然免疫信号通路中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 trim32基因 序列分析 天然免疫信号通路
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禽TRIM13负调控宿主抗病毒天然免疫反应的分子机制 被引量:2
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作者 《中国兽医科学》编辑部 罗锐 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第1期142-142,共1页
病毒感染细胞后,宿主模式识别受体(PRRs)能够识别病毒的核酸,激活一系列的先天免疫级联反应,最终清除入侵的病毒。RIG-I和MDA5作为重要的PRRs成员,主要识别病毒复制过程中产生的双链RNA,激活下游接头分子MAVS,触发抗病毒先天免疫反应。... 病毒感染细胞后,宿主模式识别受体(PRRs)能够识别病毒的核酸,激活一系列的先天免疫级联反应,最终清除入侵的病毒。RIG-I和MDA5作为重要的PRRs成员,主要识别病毒复制过程中产生的双链RNA,激活下游接头分子MAVS,触发抗病毒先天免疫反应。近期,华中农业大学罗锐团队在国际学术期刊Autophagy发表了题为“Avian TRIM13 attenuates antiviral innate immunity by targeting MAVS for autophagic degradation”的研究论文,首次揭示了禽类E3连接酶TRIM13通过选择性自噬负调控MAVS抗病毒天然免疫反应的分子机制。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 宿主蛋白trim13 自噬-溶酶体途径
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沉默TRIM59对卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性的影响
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作者 李晓丹 崔建涛 +2 位作者 陈秀英 张士表 高娜 《解剖科学进展》 2025年第2期200-204,共5页
目的 探讨沉默TRIM59对卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性的影响及机制。方法 设卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP组、sh-NC组、TRIM59 inhibitor组、顺铂组与TRIM59 inhibitor+顺铂组。CCK-8方法与克隆形成实验测定细胞增殖水平,流式... 目的 探讨沉默TRIM59对卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性的影响及机制。方法 设卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP组、sh-NC组、TRIM59 inhibitor组、顺铂组与TRIM59 inhibitor+顺铂组。CCK-8方法与克隆形成实验测定细胞增殖水平,流式细胞术测定细胞凋亡水平,Transwell实验测定细胞侵袭水平,实时荧光定量PCR测定细胞TRIM59和AKT mRNA表达水平,蛋白印迹法测定细胞AKT蛋白表达水平。结果 沉默TRIM59明显降低SKOV3/DDP细胞克隆形成数、细胞存活率、穿膜细胞数、TRIM59 mRNA、AKT mRNA及蛋白表达水平,升高凋亡率;沉默TRIM59与顺铂联合使用后,克隆形成数、细胞存活率、细胞穿膜数、TRIM59 mRNA、AKT mRNA及蛋白表达水平降低尤为明显,凋亡率升高尤为明显。结论 沉默TRIM59导致AKT表达下调进而抑制卵巢癌细胞增殖、侵袭水平,诱导细胞凋亡,增加卵巢癌细胞顺铂敏感性。 展开更多
关键词 trim59 卵巢癌 顺铂 耐药 AKT
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SCD5通过TRIM15调控脂滴数量的机制研究
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作者 白文哲 李继豪 +5 位作者 方钱海 张帆 胡睿祺 陈洪波 毕延震 王锐 《中国农业科学》 北大核心 2025年第8期1638-1649,共12页
【背景】脂肪沉积对猪肉的风味、嫩度和色泽有着重要影响,硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearoyl-Co A desaturase,SCD)在调控脂质代谢过程中发挥关键作用,其中家族成员硬脂酰辅酶A去饱和酶-5(stearoyl-Co A desaturase 5,SCD5)作为单不饱和脂肪... 【背景】脂肪沉积对猪肉的风味、嫩度和色泽有着重要影响,硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearoyl-Co A desaturase,SCD)在调控脂质代谢过程中发挥关键作用,其中家族成员硬脂酰辅酶A去饱和酶-5(stearoyl-Co A desaturase 5,SCD5)作为单不饱和脂肪酸(monounsaturated fatty acid,MUFA)限速酶,调控单不饱和脂肪酸组成与三酰基甘油(TAG)含量。然而SCD5在脂滴(Lipid droplet,LD)生物发生过程中具体影响尚不明确。三元基序蛋白家族成员15(Tripartite Motif Containing15,TRIM15)通过调节TAG代谢影响脂滴生物发生,并且在SCD5缺失后其表达量显著下降,两者之间的调控关系及其在脂滴形成过程中的作用机制仍有待深入探讨。【目的】探究SCD5对脂滴生物发生的调控作用以及SCD5是否通过TRIM15介导脂滴的形成与积累,进一步揭示SCD5在脂质代谢中的作用机制,为猪肉品质性状的遗传改良提供理论支持。【方法】本研究通过猪肾细胞(porcine kidney-15,PK-15)系利用CRISPR/Cas9技术构建PK-15 SCD5敲除细胞系,通过转染SCD5过表达载体构建PK-15 SCD5过表达细胞系,以及在小鼠成肌细胞(C2C12)中过表达SCD5。利用Bodipy染色流式细胞术分析脂滴含量;利用Bodipy染色、共聚焦成像和油红O染色观察脂滴数量,探究SCD5对脂滴生物发生过程的作用。随后对PK-15 SCD5缺失细胞进行RNA-seq测序发现TRIM15显著下调,通过RT-q PCR和Western blot验证TRIM15的表达量,并构建TRIM15过表达载体在PK-15 SCD5缺失细胞中过表达TRIM15,探讨SCD5和TRIM15在LD生物发生过程中的作用。【结果】Bodipy染色流式细胞术结果表明在PK-15 SCD5缺失细胞中脂滴含量显著降低,过表达SCD5显著增加脂滴含量;在C2C12中过表达SCD5结果相同。Bodipy染色共聚焦成像和油红O染色结果显示,SCD5缺失显著降低了PK-15细胞LD的数量而过表达SCD5后LD的数量显著增加;在C2C12细胞中异位表达SCD5则结果与之相同;对PK-15 SCD5缺失细胞进行RNA-seq测序后分析,GO和KEGG富集分析揭示SCD5与多细胞生物发育和脂质代谢途径相关,表明SCD5调控脂质代谢。通过对调控脂质代谢的基因进行分析发现TRIM15下调最为显著,这表明SCD5可能通过TRIM15调控脂质代谢。在PK-15 SCD5缺失细胞中过表达TRIM15,Bodipy染色流式细胞术以及Bodipy染色和油红O染色结果表明TRIM15增加了PK-15 SCD5缺失细胞的脂滴含量同时PK-15 SCD5缺失细胞中的LD数量显著增加。【结论】SCD5通过调控TRIM15的表达来介导LD生物发生进而调控LD的数量,调控脂肪沉积,这为猪肉品质改良提供了理论支持。 展开更多
关键词 SCD5 trim15 脂滴 脂质代谢
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A型流感病毒NP蛋白与TRIM25蛋白互作的研究
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作者 胡欣妍 刘倩芸 +2 位作者 安乐乐 蓝秋菊 马晓霞 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第3期219-226,共8页
目的探索A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)核蛋白(nucleoprotein,NP)与TRIM25之间的互作关系。方法运用生物信息学的方法对IAV NP蛋白的理化特性及蛋白质结构进行分析;利用分子对接技术模拟IAV NP和TRIM25蛋白之间的互作情况并预测... 目的探索A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)核蛋白(nucleoprotein,NP)与TRIM25之间的互作关系。方法运用生物信息学的方法对IAV NP蛋白的理化特性及蛋白质结构进行分析;利用分子对接技术模拟IAV NP和TRIM25蛋白之间的互作情况并预测其互作位点;以A/Puerto Rico/8/1934(H1N1)PR8毒株基因组cDNA为模板,PCR扩增NP蛋白克隆至真核表达载体pCMV-C-Flag上,构建真核表达重组质粒pCMV-Flag-NP,并进一步验证其表达,同时检测重组质粒pCMV-Flag-NP及pCMV-HA-TRIM25在不同时段蛋白表达的水平;利用免疫共沉淀技术对NP蛋白和TRIM25蛋白进行互作验证;使用激光共聚焦显微镜对NP蛋白与TRIM25蛋白在细胞中的共定位情况进行观察。结果生物信息学分析发现NP蛋白由498个氨基酸、20种氨基酸构成,为不稳定的亲水蛋白。NP蛋白存在N-糖基化位点和O-糖基化位点,并且存在多个磷酸化位点,但并不存在跨膜结构域及信号肽结构域。NP蛋白二级结构中α-螺旋和无规则卷曲结构占比较高。分子对接技术预测结果显示IAV NP与TRIM25蛋白之间存在相互作用且具有多个潜在互作位点,其中包括NP蛋白第233位丙氨酸、第234位丙氨酸、第236位赖氨酸、第440位丙氨酸等多个位点。成功构建并表达IAV NP蛋白,通过免疫共沉淀和激光共聚焦显微镜观察验证IAV NP与TRIM25蛋白之间存在互作关系。结论IAV NP蛋白的结构与其所发挥的功能息息相关,其对于病毒自身的重要性不言而喻。同时IAV NP与TRIM25蛋白之间存在互作关系,这可能与TRIM25抗流感病毒机制相关,后续的深入研究或许能为抗流感病毒策略提供新思路。 展开更多
关键词 A型流感病毒 核蛋白 trim25 蛋白互作
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TRIM13在内质网质量控制中的作用及其与疾病的关系
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作者 杨世英 戎玉莹 +1 位作者 董玥宏 蒋丽娜 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第4期159-168,共10页
内质网质量控制系统是维持细胞稳态的核心机制之一,主要通过内质网相关降解和内质网自噬两条途径介导内质网中错误折叠蛋白质的降解。三方基序蛋白13(tripartite motif 13,TRIM13)是一种定位于内质网膜上的蛋白,其E3泛素连接酶活性使其... 内质网质量控制系统是维持细胞稳态的核心机制之一,主要通过内质网相关降解和内质网自噬两条途径介导内质网中错误折叠蛋白质的降解。三方基序蛋白13(tripartite motif 13,TRIM13)是一种定位于内质网膜上的蛋白,其E3泛素连接酶活性使其在内质网相关降解过程中发挥重要作用。此外,TRIM13也作为一种非经典内质网自噬受体介导内质网自噬的发生。近年来,TRIM13在内质网质量控制领域受到了广泛的关注,本文将对TRIM13的结构和功能以及TRIM13在内质网质量控制中的作用机制进行综述,并总结其在疾病中的异常表达和调控作用,以期为相关疾病的治疗提供新策略。 展开更多
关键词 trim13 内质网质量控制 内质网相关降解 内质网自噬
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TRIM家族在肝细胞癌中的研究进展
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作者 陈玉姬 杨红 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第1期137-141,共5页
肝细胞癌(HCC)是最常见和最致命的恶性肿瘤之一。大多数三元基序(TRIM)家族蛋白具有E3泛素连接酶活性,参与了多种细胞生物学过程的调控,包括基因表达、细胞周期进展、凋亡、信号转导和癌变等。越来越多的研究发现,TRIM家族成员在促进HC... 肝细胞癌(HCC)是最常见和最致命的恶性肿瘤之一。大多数三元基序(TRIM)家族蛋白具有E3泛素连接酶活性,参与了多种细胞生物学过程的调控,包括基因表达、细胞周期进展、凋亡、信号转导和癌变等。越来越多的研究发现,TRIM家族成员在促进HCC细胞增殖、迁移和侵袭中起着重要作用。本综述旨在讨论TRIM家族在HCC中的作用,为HCC寻找新的诊断及治疗靶点提供依据。 展开更多
关键词 trim28 trim59 trim37 trim24 肝细胞癌
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基于TRIMMING的牛鞋面革湿态染整工艺简化研究 被引量:1
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作者 刘琳 牛泽 +3 位作者 唐金璐 林可心 韦永红 温会涛 《皮革与化工》 2025年第3期1-6,44,共7页
以牛鞋面革为研究对象,针对传统湿态染整工艺工序冗余、化工材料消耗高等问题,应用TRIMMING对工艺进行系统优化。通过工序整合(填充-染色-加脂同浴)和多功能皮革助剂替代,将原11个工序缩减至7个,化工材料总用量降低了约10%。试验结果表... 以牛鞋面革为研究对象,针对传统湿态染整工艺工序冗余、化工材料消耗高等问题,应用TRIMMING对工艺进行系统优化。通过工序整合(填充-染色-加脂同浴)和多功能皮革助剂替代,将原11个工序缩减至7个,化工材料总用量降低了约10%。试验结果表明,应用简化湿态染整工艺所制得的坯革,撕裂力(76.38 N)和崩裂高度(10.41 mm)较传统湿态染整工艺提升15.2%和13.0%,且符合QB/T 1873-2010标准要求。 展开更多
关键词 湿态染整 trimMING 工序优化 牛鞋面革 多功能皮革助剂
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