山东烟区烟草环斑病毒病(TRSV)发生和病原鉴定 被引量：4

1

作者 王劲波 王凤龙 +3 位作者 钱玉梅 时焦 王从丽 张爱东 《中国烟草科学》 CSCD 1999年第1期34-35,共2页

１９９７年，在对山东烟区各主要产烟县进行烟叶田间标样的烟草病毒病毒原鉴定中发现有烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ）的发生，现简报如下：１材料与方法１．１将采集的烟叶标样用人工摩擦方法，接种到普通烟栽培品种ＮＣ８９（Ｎｉｃｏｔｉ... １９９７年，在对山东烟区各主要产烟县进行烟叶田间标样的烟草病毒病毒原鉴定中发现有烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ）的发生，现简报如下：１材料与方法１．１将采集的烟叶标样用人工摩擦方法，接种到普通烟栽培品种ＮＣ８９（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍｃｖ．ＮＣ８９... 展开更多

关键词 烟草环斑病毒病 trsv 鉴定 病害防治

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TRSv4.0售票模块的设计与研究 被引量：2

2

作者 孙玫肖 王丽华 《铁路计算机应用》 2003年第1期40-42,共3页

介绍了TRSv4.0成功地解决了清算系统提出的问题,满足了清算系统的要求;实现了更为灵活的计价方式,以适应铁路改革和市场发展的需要;解决了SMART3.0中存在的问题;增强了售票系统的安全性。目前,TRSv4.0已经在全路推广应用。

关键词 trsv4.0 售票模块 设计 铁路运输 客票售票系统

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陕西渭北地区烟草环斑病毒(TRSV)的研究——Ⅰ.病毒的鉴定及其理化特性 被引量：2

3

作者 魏宁生 安调过 《中国烟草科学》 CSCD 1990年第3期1-5,35,共6页

自然感染 TRSV 的烟草植株表现矮化,并具有典型的小叶症状。接种结果表明该病毒的寄主范围广泛,可侵染9个科的23种植物,受侵染的植物大多数呈现局部坏死和环斑,某些植物种类到后期还可恢复。病毒的致死温度为65～70℃,稀释限点为10^(-3)... 自然感染 TRSV 的烟草植株表现矮化,并具有典型的小叶症状。接种结果表明该病毒的寄主范围广泛,可侵染9个科的23种植物,受侵染的植物大多数呈现局部坏死和环斑,某些植物种类到后期还可恢复。病毒的致死温度为65～70℃,稀释限点为10^(-3)～10^(-4),体外保毒期为6～7天。对提纯病毒的研究结果表明:病毒粒子为等轴对称体,直径达26nm,其中有些粒子呈中空状态。病毒制备物经紫外线扫描后可获得典型的核蛋白紫外吸收光谱,其 Amax=260nm,Amin=240nm,A260/280=1.4。病毒降解后所得的核酸和蛋白的紫外吸收最高值分别为260nm 和278nm,而最低值分别为232nm 和250nm。经 PAGE 分析表明外壳蛋白只有一种亚基,其分子量为57000道尔顿;核酸具有2个组分,即 RNA_1和 RNA_2,它们的分子量分别为2.3×10~6和1.4×10~6,其中 RNA_1单独接种无侵染性,RNA_2的侵染性会由于 RNA_1的存在而得到增强。血清学测定表明病株汁液和提纯病毒只与 TRSV 标准抗血清起沉淀反应,而与 CMV、TMV、TNV、TEV 以及 TBRV 抗血清之间没有血清学关系。 展开更多

关键词 RNA trsv 侵染性 渭北地区 对称体 局部坏死 外壳蛋白 理化特性 烟草植株 紫外吸收光谱

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TRSv4.0技术支持系统的设计与实现

4

作者 孙玫肖 王元媛 +1 位作者 王芳 江琳 《铁路计算机应用》 2003年第12期21-22,共2页

系统地分析铁路客票发售和预订系统技术支持工作的现状和特点,提出建立客票技术支持系统的方案,对系统设计、技术难点进行详细讨论,目前该系统已经投入使用。它的应用可以逐步建立技术支持知识库,实现信息共享,提高技术支持的效率。

关键词 trsv4.0技术 客票系统 客票发售 客票预订 系统设计 数据库 信息共享

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陕西渭北地区烟草环斑病毒(TRSV)的研究 Ⅱ、病毒的传播、种苗带毒检测及防治

5

作者 魏宁生 安调过 《中国烟草科学》 CSCD 1990年第4期1-5,共5页

试验表明桃蚜具有传播 TRSV 的能力,但是传毒率仅为4.2%,蚜虫最短获毒时间在2分钟以内,最短接毒时间也是2分钟,最长持毒时间则为125分钟,因而属于非持久性传毒。烟草种子带毒是传播病毒的主要途径,植株感染 TRSV 的早晚是决定种子带毒... 试验表明桃蚜具有传播 TRSV 的能力,但是传毒率仅为4.2%,蚜虫最短获毒时间在2分钟以内,最短接毒时间也是2分钟,最长持毒时间则为125分钟,因而属于非持久性传毒。烟草种子带毒是传播病毒的主要途径,植株感染 TRSV 的早晚是决定种子带毒率高低的主要因素,但其子代幼苗常表现为无症感染。提纯 TRSV 制备的抗血清具有高度的专化性,只与同源的 TRSV 抗原起沉淀反应,而与 CMV、TMV、TNV、TEV 以及 TBRV 之间不存在血清学关系。抗血清的效价为1:516。利用酶联免疫吸附测定技术(ELISA)对 TRSV 检测获得成功。在受侵染后已恢复的植株中,以 ELISA 作为带毒检测手段比琼脂双扩散法更加灵敏和准确,但对单粒、10、25、50及75粒烟种的带毒检测没有获得肯定的结果,可用 ELISA 检测种苗的带毒情况来确定单粒种子的带毒率。经测定生产上种植的3个烟草品种均有不同程度的带毒。在混合感染的条件下,CMV 和 TMV 对 TRSV 有抑制作用,而 TEV 却对 TRSV 表现出协生现象。 展开更多

关键词 渭北地区 trsv 烟草环斑病毒 烟草品种 琼脂双扩散法 单粒 传毒 带毒率 白肋烟 桃蚜

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大豆的烟草环斑病毒(TRSV)生物学性状的鉴定 被引量：1

6

作者 韦石泉 《沈阳农业大学学报》 CAS 1985年第2期38-44,共7页

大豆的烟草环斑病毒(TRSV),系种子带毒传病,它是引起产量严重损失的大豆病毒病害之一。我国是否发生未见报道。本研究系在美国依阿华大学采用该地分离的毒原,对大豆 TRSV 的生物学性状如毒原繁殖、病毒接种指示植物鉴定及寄主范围、病... 大豆的烟草环斑病毒(TRSV),系种子带毒传病,它是引起产量严重损失的大豆病毒病害之一。我国是否发生未见报道。本研究系在美国依阿华大学采用该地分离的毒原,对大豆 TRSV 的生物学性状如毒原繁殖、病毒接种指示植物鉴定及寄主范围、病毒汁液性质的常规测定等进行了试验。所得结果为:大豆的烟草环斑病毒接种于豇豆叶上产生红褐枯斑;接种于黄瓜叶上产生淡黄环斑,系统性;接种于普通烟—白贝菜(White Burley)叶上,初形成同心纹环斑,后转为系统轻花叶症;接种于克利夫兰烟叶上也是先生同心环斑,后转为轻花叶症,在蔓陀萝叶上表现花叶症;在千日红叶上表现褪绿小枯斑等。TRSV 的寄主范围颇广;茄科、藜科、豆科、葫芦科均受侵染,但不侵染禾本科和茄科及豆科里某些品种。其失毒温度为60℃;稀释限点为10^(-6)(但在10^(-3)时侵染率已下降);体外存活11天。 展开更多

关键词 烟草环斑病毒 trsv 生物学性状 同心纹 环斑 大豆 指示植物 稀释限点 稀释终点 枯斑 花叶 隐症

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TRSV粒体细胞间传播过程的电镜观察

7

作者 李学湛 《电子显微学报》 CAS CSCD 1990年第3期70-70,共1页

本文对烟草环斑病毒(TRSV)接触感染大豆叶片细胞后的细胞间传播过程进行了电镜观察。研究结果表明:①TRSV粒体是以整体病毒颗粒的形式进行细胞间传播的。②TRSV粒体通过细胞壁的胞间连丝和类似吞噬过程进入细胞。③TRSV粒体装配、成熟后... 本文对烟草环斑病毒(TRSV)接触感染大豆叶片细胞后的细胞间传播过程进行了电镜观察。研究结果表明:①TRSV粒体是以整体病毒颗粒的形式进行细胞间传播的。②TRSV粒体通过细胞壁的胞间连丝和类似吞噬过程进入细胞。③TRSV粒体装配、成熟后,贮存在液泡中。 展开更多

关键词 烟草 trsv 粒体细胞 传播 电镜观察

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烟草环斑病毒的RT-PCR和IC-RT-PCR检测方法研究 被引量：12

8

作者 杨翠云 曹洁 +3 位作者 于翠 高焕利 沈禹飞 代光辉 《上海农业学报》 CSCD 2007年第1期83-87,共5页

根据TRSV CP基因的保守序列设计引物,RT-PCR和IC-RT-PCR能从TRSV的2个分离物中分别扩增到与预期大小相同的DNA条带,序列测定和分析表明所扩增序列为TRSV CP基因的部分序列,在系统关系树上与TRSV的其他分离物形成一簇,表明所建立的RT-PCR... 根据TRSV CP基因的保守序列设计引物,RT-PCR和IC-RT-PCR能从TRSV的2个分离物中分别扩增到与预期大小相同的DNA条带,序列测定和分析表明所扩增序列为TRSV CP基因的部分序列,在系统关系树上与TRSV的其他分离物形成一簇,表明所建立的RT-PCR和IC-RT-PCR检测方法是可靠的。 展开更多

关键词 烟草环斑病毒(trsv) RT-PCR IC-RT-PCR 检测方法

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烟草环斑病毒外壳蛋白基因片段原核表达载体的构建及表达 被引量：5

9

作者 乔艳艳 杨翠云 +3 位作者 于翠 曹洁 马青 张丽莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期345-349,共5页

根据烟草环斑病毒外壳蛋白(TRSV-CP)基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法,获得烟草环斑病毒基因组中编码外壳蛋白部分基因片段,将其插入原核表达载体pET28a中,获得重组表达质粒pET-CP,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG诱导蛋白大量... 根据烟草环斑病毒外壳蛋白(TRSV-CP)基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法,获得烟草环斑病毒基因组中编码外壳蛋白部分基因片段,将其插入原核表达载体pET28a中,获得重组表达质粒pET-CP,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG诱导蛋白大量表达。重组蛋白经过Ni+-NTA纯化后,SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,TRSV-CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达,产生的融合蛋白分子质量约为34 ku,并具有免疫学活性。以纯化的表达蛋白免疫新西兰大白兔,多抗血清效价达1∶409 600,可以与重组蛋白发生抗原抗体反应。 展开更多

关键词 烟草环斑病毒(trsv) RT-PCR 原核表达 融合蛋白

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葡萄的两种检疫性病毒的多重RT-PCR检测 被引量：7

10

作者 薛杨 安德荣 李明福 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第S1期14-17,共4页

本研究利用多重RT-PCR技术,对葡萄的检疫性病毒中番茄环斑病毒(ToRSV)和烟草环斑病毒(TRSV)进行检测, 并研究了反应体系中各个参数对多重RT-PCR的影响。结果表明:可以在同一反应体系中实现对ToRSV和TRSV的RT- PCR检测,但模板浓度、引物... 本研究利用多重RT-PCR技术,对葡萄的检疫性病毒中番茄环斑病毒(ToRSV)和烟草环斑病毒(TRSV)进行检测, 并研究了反应体系中各个参数对多重RT-PCR的影响。结果表明:可以在同一反应体系中实现对ToRSV和TRSV的RT- PCR检测,但模板浓度、引物浓度、循环数等3个因素对检测结果的准确性有较大的影响,3个参数的增加都会导致非特异性扩增的增多,而dNTP以及Taq酶的浓度对实验结果并无较大影响。 展开更多

关键词 多重RT-PCR 番茄环斑病毒(ToRSV) 烟草环斑病毒(trsv)

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从德国鼠尾草中检测出3种危险性病毒 被引量：1

11

作者 孔宝华 陈海如 +7 位作者 蔡红 蒋小龙 沐咏民 魏正 唐惠 曹云华 李凡 刘进元 《植物检疫》 北大核心 2000年第2期76-77,共2页

对世博会来自德国的鼠尾草进行了目检、酶联实验、电镜观察及生物接种实验。初步确证鼠尾草携带番茄环斑病毒 (ToRSV) ,南芥菜花叶病毒 (ArMV)和烟草环斑病毒(TRSV)。

关键词 鼠尾草 ToRSV ArMV trsv 诊断 鉴定

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百合珠芽组培及脱毒研究 被引量：97

12

作者 赵祥云 程廉 +2 位作者 邢尤美 谢丽萍 贾学文 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期284-288,共5页

对带有烟草环斑病毒(TRSV)的淡黄花白合(Lilium sulphureum Baker)珠芽生长点进行组培脱毒。经试验得出,珠芽生长点诱导成愈伤组织的最适培养基为MS+BA0.5+2,4-D0.25mg/l,诱导率为92.8％。适合幼芽分化的培养基为MS+BA1.5+NAA0.1+KT0.1m... 对带有烟草环斑病毒(TRSV)的淡黄花白合(Lilium sulphureum Baker)珠芽生长点进行组培脱毒。经试验得出,珠芽生长点诱导成愈伤组织的最适培养基为MS+BA0.5+2,4-D0.25mg/l,诱导率为92.8％。适合幼芽分化的培养基为MS+BA1.5+NAA0.1+KT0.1mg/l,分化率为71.4％。适合生根的培养基为1/2MS+IBA0.25mg/l,生根率为100％。从外植体到发育成幼苗约需120～150天。将培养出的幼苗在6种指示植物上进行脱毒鉴定,结果表明,0.3～0.8mm长的珠芽生长点其诱导的幼苗成功地脱去了百合的烟草环斑病毒。 展开更多

关键词 百合 珠芽 脱毒 组织培养

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RT-PCR方法检测烟草环斑病毒的研究 被引量：21

13

作者 孔宝华 蔡红 +3 位作者 陈海如 唐慧 沐咏民 刘进元 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2001年第1期13-15,共3页

根据烟草环斑病毒 (TRSV)外壳蛋白基因非编序列设计的引物P1,P2 ,用感病及健康组织总RNA为模板 ,进行cDNA合成和PCR试验 ,感病组织中扩增出了 6 0 0bp的目的片段 ,而健康组织中无此扩增带。摸索各项实验条件 ,建立了RT -PCR检测烟草环... 根据烟草环斑病毒 (TRSV)外壳蛋白基因非编序列设计的引物P1,P2 ,用感病及健康组织总RNA为模板 ,进行cDNA合成和PCR试验 ,感病组织中扩增出了 6 0 0bp的目的片段 ,而健康组织中无此扩增带。摸索各项实验条件 ,建立了RT -PCR检测烟草环斑病毒 (TRSV)的方法。 展开更多

关键词 烟草 环斑病毒 RT-PCR 检测方法 外壳蛋白基因非编序列设计

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烟草环斑病毒PCR产物的克隆及部分序列分析 被引量：8

14

作者 相宁 孙彤 +2 位作者 刘宏迪 张成良 杨立 《植物检疫》 北大核心 1998年第5期260-263,共4页

将ＴＲＳＶ的ＰＣＲ产物与ｐＧＥＴ－ＴＥａｓｙＶｅｃｔｏｒ连接，克隆到大肠杆菌ＴＧ１中，得到白色菌落，重组质粒通过酶切鉴定、ＰＣＲ扩增和部分序列分析，表明ＴＲＳＶ的ＰＣＲ产物确实插入了质粒，并已克隆到大肠杆菌中，测序列... 将ＴＲＳＶ的ＰＣＲ产物与ｐＧＥＴ－ＴＥａｓｙＶｅｃｔｏｒ连接，克隆到大肠杆菌ＴＧ１中，得到白色菌落，重组质粒通过酶切鉴定、ＰＣＲ扩增和部分序列分析，表明ＴＲＳＶ的ＰＣＲ产物确实插入了质粒，并已克隆到大肠杆菌中，测序列２４０个碱基，与资料显示的序列相比较，同源性达９２．５％，可用于解决病毒检疫应用中阳性对照有扩散危险的疑难问题。 展开更多

关键词 烟草 环斑病毒 PCR产物 序列分析 克隆

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单管实时荧光RT-PCR方法同时检测大豆种子中的菜豆荚斑驳病毒和烟草环斑病毒 被引量：7

15

作者 易汪雪 陈舜胜 +1 位作者 杨翠云 于翠 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期85-92,共8页

本研究建立了大豆种子中菜豆荚斑驳病毒(BPMV)和烟草环斑病毒(TRSV)单管双重实时荧光PCR检测方法。将含有相同浓度的分别带有BPMV和TRSVCP基因的质粒溶液作为阳性对照,以受两种病毒侵染的大豆种子作为待测样品进行实时荧光PCR检测,结果... 本研究建立了大豆种子中菜豆荚斑驳病毒(BPMV)和烟草环斑病毒(TRSV)单管双重实时荧光PCR检测方法。将含有相同浓度的分别带有BPMV和TRSVCP基因的质粒溶液作为阳性对照,以受两种病毒侵染的大豆种子作为待测样品进行实时荧光PCR检测,结果表明能从同一管中同时检测出这两种病毒而不发生交叉反应。尽管在阳性对照中,二者的检测限相当,均可达到35 pg/mL,但在实际应用中,两种病毒由于在大豆种子中的浓度不一致而存在一定的差别。该方法快速、灵敏、简便,同时特异性更强,在出入境检验检疫中具有广泛的应用前景。 展开更多

关键词 菜豆荚斑驳病毒 烟草环斑病毒 双重实时荧光PCR 检测

原文传递

几种危险性病毒抗血清的制备及检测方法的建立 被引量：5

16

作者 陈京 陈燕芳 +2 位作者 宋淑敏 胡伟贞 王树琴 《植物检疫》 北大核心 1997年第4期202-204,共3页

番茄环斑病毒、烟草环斑病毒和南芥菜花叶病毒用改进的方法提纯后免疫兔子，制备出高质量的抗血清。琼脂扩散效价为１／３２０，用ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ方法检测病汁液可达１０－３～１０－４。３种血清之间无交叉反应，与健康寄主和常见... 番茄环斑病毒、烟草环斑病毒和南芥菜花叶病毒用改进的方法提纯后免疫兔子，制备出高质量的抗血清。琼脂扩散效价为１／３２０，用ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ方法检测病汁液可达１０－３～１０－４。３种血清之间无交叉反应，与健康寄主和常见的自然寄主蛋白也无反应。应用３种血清分别对２３种植物１００多个采集的样品和进口种子进行了ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测。 展开更多

关键词 抗血清 A蛋白 酶联免疫吸附 番茄 环斑病毒 烟草

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SW26010处理器上的并行结构化稀疏三角方程组求解器 被引量：1

17

作者 陈道琨 刘芳芳 杨超 《软件学报》 EI CSCD 北大核心 2022年第12期4452-4463,共12页

稀疏三角线性方程组求解(Sp TRSV)在科学与工程计算领域是比较重要的核心计算函数,其中基于结构化网格构造的线性方程组是Sp TRSV求解器经常遇到的一类问题.在国产神威?太湖之光超级计算机所配备的SW26010处理器上,Sp TRSV求解器通常需... 稀疏三角线性方程组求解(Sp TRSV)在科学与工程计算领域是比较重要的核心计算函数,其中基于结构化网格构造的线性方程组是Sp TRSV求解器经常遇到的一类问题.在国产神威?太湖之光超级计算机所配备的SW26010处理器上,Sp TRSV求解器通常需要结合该平台的架构特点,通过搭建一定的数据路由体系来满足各工作线程对未知量数据的需求.面向与结构化网格相关的稀疏三角方程组问题,提出一套适用于SW26010处理器的并行求解器.该求解器在任务划分阶段将各线程的数据依赖模式限制在相对可控的范围之内,并在无数据路由的条件下解决线程的通信问题,不仅消除了数据路由带来的额外通信开销,而且适用的问题范围也不再受数据路由规则的制约.经测试,针对多种不同类型的结构化网格问题,提出的求解器框架的平均访存带宽利用率达88.2%,部分问题的访存带宽可达平台峰值带宽的94.5%(24.5 GB/s),整体性能相比现有工作有较为明显的提高. 展开更多

关键词 稀疏三角线性方程求解(Sp trsv) 结构化网格 SW26010处理器 异构计算

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应用逆转录环介导等温扩增技术检测大豆种子中烟草环斑病毒 被引量：3

18

作者 郭立新 陈先锋 +3 位作者 徐亚飞 邱志君 朱迪琦 段维军 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期980-983,987,共5页

根据烟草环斑病毒(TRSV)外壳蛋白基因序列设计并合成了1组RT-LAMP引物,利用实时浊度仪监测反应过程,初步建立了烟草环斑病毒的RT-LAMP检测方法,并进行了特异性与灵敏度检测。结果显示,RT-LAMP灵敏度与普通RT-PCR法相当,但检测时间明显缩... 根据烟草环斑病毒(TRSV)外壳蛋白基因序列设计并合成了1组RT-LAMP引物,利用实时浊度仪监测反应过程,初步建立了烟草环斑病毒的RT-LAMP检测方法,并进行了特异性与灵敏度检测。结果显示,RT-LAMP灵敏度与普通RT-PCR法相当,但检测时间明显缩短,1 h即可完成反应。此外,体系中加入钙黄绿素,反应结束后,可通过裸眼观察荧光的有无来判断是否有扩增。对大豆种子中携带的烟草环斑病毒进行了RT-LAMP检测,裸眼判定与仪器监测结果一致。结果证明所建立的TRSV RT-LAMP方法具有快速、特异、灵敏,操作简单的特点,不需复杂仪器设备,适合于TRSV的现场快速检测。 展开更多

关键词 烟草环斑病毒 逆转录环介导等温扩增 检测

原文传递

逆转录环介导等温扩增技术检测烟草环斑病毒的研究 被引量：9

19

作者 张吉红 陈先锋 孙辉 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期629-633,共5页

本研究采用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),建立了一种快速、简便的烟草环斑病毒检测方法。根据TRSV外壳蛋白编码基因上的8个位点,共设计了6条引物,通过RT-LAMP扩增得到特征性的梯度条带。特异性试... 本研究采用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),建立了一种快速、简便的烟草环斑病毒检测方法。根据TRSV外壳蛋白编码基因上的8个位点,共设计了6条引物,通过RT-LAMP扩增得到特征性的梯度条带。特异性试验表明,引物对TRSV的检测具有良好的特异性;灵敏度试验显示RT-LAMP比普通RT-PCR高10倍。通过反应温度和时间的优化,该方法只需在水浴锅中60℃等温扩增60 min,整个检测周期约1.5 h,结果采用SYBR green I染色显示,易于观察和判定。 展开更多

关键词 烟草环斑病毒 环介导等温扩增 检测

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基于抗原表位烟草环斑病毒单克隆抗体的制备 被引量：1

20

作者 秦绍钊 何月秋 +3 位作者 李旻 雷屈文 王光勇 丁元明 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期598-603,共6页

基于多种生物信息学软件综合预测烟草环斑病毒(TRSV)外壳蛋白抗原表位所在的结构域,明确了该外壳蛋白抗原表位可能位于C端319～328、384～388、420～430、480～487、495～511位氨基酸残基附近。通过RT-PCR扩增出了目的片段,构建了TRSV... 基于多种生物信息学软件综合预测烟草环斑病毒(TRSV)外壳蛋白抗原表位所在的结构域,明确了该外壳蛋白抗原表位可能位于C端319～328、384～388、420～430、480～487、495～511位氨基酸残基附近。通过RT-PCR扩增出了目的片段,构建了TRSV外壳蛋白原核表达载体,表达的TRSV外壳蛋白外源融合蛋白具免疫活性。采用杂交瘤细胞技术,利用外源融合蛋白制备了单克隆抗体,制备的抗血清可与TRSV外壳蛋白基因原核表达产物发生免疫反应。检验结果表明,制备的抗血清具较好的特异性,可应用于TRSV的检疫检验。 展开更多

关键词 烟草环斑病毒 抗原表位 原核表达 融合蛋白 单克隆抗体

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