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MiR-216a-5p靶向TRIP4对乳腺癌细胞放射敏感性的影响及机制研究 被引量：8
1
作者 杨霞 汤山松 +1 位作者 谢仲梅 张群 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第1期61-68,共8页
目的:研究miR-216a-5p对乳腺癌细胞放疗敏感性的影响及其作用机制。方法:培养正常乳腺上皮细胞MCF10A和乳腺癌细胞MCF7、MDA-MB-231、SK-BR-3,用实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-216a-5p和甲状腺激素受体相互作用蛋白4(TRIP4)的表达;将乳... 目的:研究miR-216a-5p对乳腺癌细胞放疗敏感性的影响及其作用机制。方法:培养正常乳腺上皮细胞MCF10A和乳腺癌细胞MCF7、MDA-MB-231、SK-BR-3,用实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-216a-5p和甲状腺激素受体相互作用蛋白4(TRIP4)的表达;将乳腺癌细胞MCF7分为Control组(未做任何处理)、si-con组(转染TRIP4干扰载体阴性对照质粒)、si-TRIP4组(转染TRIP4干扰载体质粒)、miR-con组(转染miR-216a-5p模拟物阴性对照)、miR-216a-5p组(转染miR-216a-5p模拟物)、si-TRIP4+anti-miR-con组(共转染TRIP4干扰载体质粒和miR-216a-5p抑制剂阴性对照)、si-TRIP4+anti-miR-216a-5p组(共转染TRIP4干扰载体质粒和miR-216a-5p抑制剂);用Western blotting检测蛋白的表达;MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;分别用0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy和8 Gy剂量的射线照射Control组、si-con组、si-TRIP4组、miR-con组、miR-216a-5p组、si-TRIP4+anti-miR-con组、si-TRIP4+anti-miR-216a-5p组细胞,用细胞克隆形成实验检测细胞放射敏感性;将TRIP4野生型(TRIP4-WT)和突变型(TRIP4-MT)荧光素酶表达载体分别与miR-con和miR-216a-5p共转染至MCF7细胞中,用双荧光素酶报告基因实验检测细胞荧光活性。结果:与正常乳腺上皮细胞MCF10A相比,乳腺癌细胞MCF7、MDA-MB-231、SKBR-3中TRIP4 mRNA和蛋白表达水平升高,miR-216a-5p表达水平降低(P<0.05)。沉默TRIP4和过表达miR-216a-5p后,细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达水平降低,半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达水平升高,细胞增殖抑制率显著升高,细胞凋亡率显著升高(P<0.05),射线照射后细胞存活分数降低(P<0.05)。miR-216a-5p与TRIP4-WT共转染的细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05),而miR-216a-5p与TRIP4-MT共转染的细胞荧光素酶活性无明显变化(P>0.05)。沉默TRIP4逆转了抑制miR-216a-5p表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡和放射敏感性的作用。结论:过表达miR-216a-5p可能通过下调TRIP4抑制乳腺癌细胞增殖、促细胞凋亡,从而增加了细胞的放射敏感性。 展开更多
关键词 miR-216a-5p trip4 乳腺癌 放射敏感性 增殖 凋亡
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论TRIPS协议“最惠国待遇”的含义及例外
2
作者 冯寿波 《西部法学评论》 2014年第6期122-130,共9页
作为GATT基石的最惠国待遇第一次被纳入知识产权多边条约——TRIPS协议。货物贸易、服务贸易、知识产权方面的MFN待遇例外各不相同。TRIPS最惠国待遇例外对所有成员采取一致的原则,其第4条(a)项例外之基础在于司法协助协定的双边性质。... 作为GATT基石的最惠国待遇第一次被纳入知识产权多边条约——TRIPS协议。货物贸易、服务贸易、知识产权方面的MFN待遇例外各不相同。TRIPS最惠国待遇例外对所有成员采取一致的原则,其第4条(a)项例外之基础在于司法协助协定的双边性质。(d)项的豁免不能扩大适用于1995年1月1日后对这些条约的修订。"对其他成员之国民不构成随意的或不公平的歧视"的含义是:这些协定的制定旨在对知识产权标准产生(直接或间接的)影响。没有通知TRIPS理事会的条约将不能从豁免中获益,而不管其最终是否符合第4.4条所确立的两个其他条件。WTO对迟延的通知并无明确禁令。通知的效力既涵盖过去又包括将来。第5条涵盖了1995年1月1日后缔结的WIPO协定。鉴于WIPO的许多条约实际上具有混合性质,因此,在同一WIPO条约中,可能有的条款享有TRIPS第5条规定的豁免,而其他条款则并不享有该豁免。 展开更多
关键词 TRIPS协议第4、5条 MFN待遇 含义 例外
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miR-199a-5p对宫颈癌CaSki细胞放射敏感性的影响及机制研究 被引量：1
3
作者 王光霞 董立新 曹丽艳 《中国医师杂志》 CAS 2021年第9期1366-1370,共5页
目的探讨miR-199a-5p对宫颈癌CaSki细胞放射敏感性的影响及潜在机制。方法体外培养宫颈癌CaSki细胞。采用脂质体Lipofectamine 2000将miR-199a-5p模拟物(miR-199a-5p mimics)转染至宫颈癌CaSki细胞,记为miR-199a-5p组,以转染模拟物对照(... 目的探讨miR-199a-5p对宫颈癌CaSki细胞放射敏感性的影响及潜在机制。方法体外培养宫颈癌CaSki细胞。采用脂质体Lipofectamine 2000将miR-199a-5p模拟物(miR-199a-5p mimics)转染至宫颈癌CaSki细胞,记为miR-199a-5p组,以转染模拟物对照(mimics control)的CaSki细胞为阴性对照(NC组),以未转染的CaSki细胞为空白对照(Control组),各组细胞经X射线照射后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-199a-5p的表达量,通过克隆形成实验和流式细胞凋亡实验检测miR-199a-5p对CaSki细胞放射敏感性和凋亡的影响,使用生物信息学软件预测miR-199a-5p的靶基因,通过双荧光素酶报告基因实验和蛋白免疫印迹(Western blot)验证miR-199a-5p和甲状腺激素受体相互作用因子4(TRIP4)的靶向关系。结果转染miR-199a-5p mimics后,miR-199a-5p组中miR-199a-5p的表达量显著高于Control组(P<0.05),经X射线照射后,miR-199a-5p过表达更明显(P<0.05);过表达miR-199a-5p降低CaSki细胞克隆形成能力(P<0.05),促进CaSki细胞的凋亡;且过表达miR-199a-5p能够进一步降低放射后细胞的克隆形成,并促进放射后细胞凋亡(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验和Western blot证实了miR-199a-5p能够靶向负调控TRIP4。结论miR-199a-5p可通过靶向负调控TRIP4的表达提高宫颈癌CaSki细胞的放射敏感性。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 CASKI细胞 miR-199a-5p 放射敏感性 trip4
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甲状腺激素受体相互作用因子4基因多态性与阿尔茨海默病的相关性研究 被引量：7
4
作者 陈龙 徐小童 +7 位作者 杜远 吴晓平 王莹 王玉梅 孔晓明 王克永 张胜权 张许来 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期40-43,共4页
目的 探索甲状腺激素受体相互作用因子4 （TRIP4）基因rs4776494多态性与阿尔茨海默病的相关性.方法 运用病例对照研究设计,收集安徽及周边地区77例拟诊为阿尔茨海默病患者和80例正常健康对照.通过聚合酶链反应（PCR）及测序的方法,比... 目的 探索甲状腺激素受体相互作用因子4 （TRIP4）基因rs4776494多态性与阿尔茨海默病的相关性.方法 运用病例对照研究设计,收集安徽及周边地区77例拟诊为阿尔茨海默病患者和80例正常健康对照.通过聚合酶链反应（PCR）及测序的方法,比较病例组和对照组TRIP4rs4776494的等位基因及基因型频率的差异.并对每例研究对象进行简易精神状态检查表（MMSE）、临床痴呆评定量表（CDR）、痴呆伴精神行为异常（BPSD）量表检测.结果 TRIP4基因rs4776494的TT、CT和CC基因型在病例组和对照组中的频率公布[TT、CT、CC基因频率分别是AD组：57/77（74.02％）、18/77 （23.38％）、2/77（2.6％）;正常组：38/80（47.5％）、39/80（48.75％）、3/80（3.75％）]均差异有统计学意义（P＜0.01）.病例组中TRIP4基因携带者BPSD出现率明显高于非携带者（P＜0.05）.结论 TRIP4（rs4776494）T型等位基因是AD的风险基因.TRIP4基因可能在一定程度上促进了患者精神症状的发生. 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 甲状腺激素受体相互作用因子4基因 单核苷酸多态性
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