稳定表达TMPRSS2蛋白Vero-E6细胞系的建立及其对新型冠状病毒增殖影响的研究

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作者 吴正双 兰婷 +9 位作者 郭瑶 陈合凤 吉克的渠 王雪 温志远 王金良 钟功勋 葛金英 陈伟业 步志高 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第8期860-866,共7页

为构建稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)的Vero-E6细胞系,并分析其对新型冠状病毒增殖的影响,本研究采用同源重组的方法,将经PCR扩增获得的TMPRSS2和IRES-mCherry基因克隆至真核表达质粒pCAGGSpuro中,构建重组质粒pCAGGS-TMPRSS2-IRE... 为构建稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)的Vero-E6细胞系,并分析其对新型冠状病毒增殖的影响,本研究采用同源重组的方法,将经PCR扩增获得的TMPRSS2和IRES-mCherry基因克隆至真核表达质粒pCAGGSpuro中,构建重组质粒pCAGGS-TMPRSS2-IRES-mCherry,经酶切和测序鉴定正确。将1μg/mL~10μg/mL嘌呤霉素加入Vero-E6细胞中加压培养14 d,每天观察细胞死亡情况。以细胞100%死亡的最低浓度为嘌呤霉素的最适浓度。结果显示,5μg/mL~10μg/mL嘌呤霉素培养的Vero-E6细胞全部死亡,其余浓度嘌呤霉素处理后仍有细胞存活。因此,确定其最适浓度为5μg/mL。将pCAGGS-TMPRSS2-IRES-mCherry转染Vero-E6细胞,并以5μg/mL嘌呤霉素筛选培养72 h,采用有限稀释法将单克隆细胞传代,7 d后通过荧光显微镜观察,选择红色荧光较强且仅有1个细胞形成的集落传代,将获得的细胞命名为Vero-E6-TMPRSS2。采用RT-PCR和western blot分别检测该细胞及其不同代次细胞(第5、10、15和20代)中TMPRSS2基因的转录和蛋白的表达水平。将嵌合病毒VSVΔG-S_(BA.1.1)-EGFP分别感染Vero-E6-TMPRSS2细胞和对照Vero-E6细胞,培养至12 h和24 h时观察荧光,并在感染后不同时间取上清液,采用Reed-Muench法测定各时间点病毒的TCID_(50),绘制病毒的生长曲线。RT-PCR结果显示,Vero-E6-TMPRSS2细胞及其不同代次均扩增出1596 bp的目的基因片段;Western blot结果显示,该细胞及不同代次的该细胞均在57.7 ku处出现特异性条带,而对照Vero-E6细胞则无任何基因片段和蛋白条带。荧光观察结果显示,VSVΔG-S_(BA.1.1)-EGFP接种后不同时间出现绿色荧光的Vero-E6-TMPRSS2细胞数量均明显多于该病毒接种的Vero-E6细胞;生长曲线结果显示,感染Vero-E6细胞后72 h VSVΔG-S_(BA.1.1)-EGFP的病毒滴度最高达10^(6.5)TCID_(50)/mL;而在感染Vero-E6-TMPRSS2细胞后36 h VSVΔGS_(BA.1.1)-EGFP的病毒滴度最高达10^(8.6)TCID_(50)/mL。上述结果表明,本研究首次建立了稳定表达TMPRSS2基因的Vero-E6-TMPRSS2细胞系,且Vero-E6-TMPRSS2细胞通过表达的TMPRSS2显著促进VSVΔG-S_(BA.1.1)-EGFP的快速增殖与复制,该结果为后续新冠病毒的基础研究及其疫苗的生产奠定了基础并提供了有力的工具。 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 跨膜丝氨酸蛋白酶2 VERO-E6细胞

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稳定表达人TMPRSS2基因BHK细胞系的建立及其对新城疫弱毒增殖效率评价 被引量：4

2

作者 刘伟 李梦娇 +7 位作者 郭佩东 孙英杰 仇旭升 谭磊 宋翠萍 廖瑛 孟春春 丁铲 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期594-600,共7页

为提高细胞培养系统中新城疫病毒的增殖效率,通过构建TMPRSS2过表达的BHK细胞系,探索其对新城疫弱毒增殖的影响。本研究将TMPRSS2基因克隆于噬菌体载体pHAGE中,构建重组质粒pHAGE-TMPRSS2。将重组质粒pHAGE-TMPRSS2以及辅助包装质粒psP... 为提高细胞培养系统中新城疫病毒的增殖效率,通过构建TMPRSS2过表达的BHK细胞系,探索其对新城疫弱毒增殖的影响。本研究将TMPRSS2基因克隆于噬菌体载体pHAGE中,构建重组质粒pHAGE-TMPRSS2。将重组质粒pHAGE-TMPRSS2以及辅助包装质粒psPAX2和pMD2G共转染至293T细胞并收集上清。将包装好的慢病毒感染BHK细胞,通过Blasticidin加入筛选和有限稀释法将单克隆细胞扩大培养。经RT-PCR和Western-blot鉴定,结果表明,TMPRSS2在BHK细胞中获得了稳定的高表达。接种新城疫弱毒后通过TCID50测定显示,TMPRSS2过表达BHK细胞系能支持较高水平的病毒增殖。 展开更多

关键词 tmprss2 慢病毒包装 BHK细胞 新城疫弱毒

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TMPRSS2-ERG、AMACR和p63在前列腺癌中的表达及相关性 被引量：8

3

作者 孙文国 夏利 +2 位作者 蒋雷鸣 杨伟娇 莫文发 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第11期1351-1355,共5页

目的分析跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)-ERG、甲酰基辅酶A-旋酶(AMACR)、基底细胞标记抗体(p63)在不同前列腺组织中的表达情况,并探讨其与前列腺癌临床病理特征之间的相关性。方法分别用快捷免疫组织化学染色法和荧光原位杂交(FISH)法检... 目的分析跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)-ERG、甲酰基辅酶A-旋酶(AMACR)、基底细胞标记抗体(p63)在不同前列腺组织中的表达情况,并探讨其与前列腺癌临床病理特征之间的相关性。方法分别用快捷免疫组织化学染色法和荧光原位杂交(FISH)法检测50例前列腺癌(PCa)、30例前列腺增生(BPH)、10例高级别前列腺上皮内肿瘤(HG-PIN)和10例前列腺转移癌患者组织中的AMACR、p63蛋白和TMPRSS2-ERG融合基因的表达情况,并分析其相关性。结果 TMPRSS2-ERG、AMACR在PCa中表达阳性率显著高于良性BPH对照组(P<0.01);p63在PCa和前列腺转移癌中表达阳性率显著低于BPH和HGPIN(P<0.01)。在PCa中,TMPRSS2-ERG融合基因稳定高表达,不受血清PSA大小、Gleason评分高低及TNM分期的影响,而AMACR表达与血清PSA大小、Gleason评分高低及TNM分期密切相关(P<0.05);TMPRSS2-ERG、AMACR、p63在PCa中的表达具有相关性(P<0.05);TMPRSS2-ERG和AMACR的阳性符合率随AMACR信号增强而增强,+、++、+++分别对应为0、66.7%(4/6)、83.3%(30/36),呈明显的正相关(rs=0.390,P=0.005),阴性符合率为71.4%(5/7)。结论在PCa诊断中TMPRSS2-ERG融合基因可作为独立检测因子,TM-PRSS2-ERG和AMACR在PCa诊断中具有高符合率,TM-PRSS2-ERG、AMACR和p63在PCa的疾病发生、发展中具有某种相互作用。联合检测TMPRSS2-ERG、AMACR、p63可以在基因和蛋白两个层面对PCa做出更加稳定可靠的早期诊断。 展开更多

关键词 前列腺癌 免疫组织化学染色法 荧光原位杂交 tmprss2-ERG融合基因 AMACR P63

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尿液中PCA3 mRNA和融合基因TMPRSS2:ERG mRNA的检测在前列腺癌早期临床诊断中的应用 被引量：7

4

作者 戴美洁 孔凡慧 +5 位作者 沈默 周武 陈伟 吴秀玲 翁志梁 陶志华 《医学研究杂志》 2011年第9期20-24,共5页

目的研究前列腺按摩后尿液中PCA3 mRNA联合融合基因TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA的定量检测在早期前列腺癌临床诊断中的应用价值。方法收集前列腺癌(PCa)患者53例和前列腺增生(BPH)患者37例,收集前列腺按摩后尿液,离心取细胞沉淀物,提取总R... 目的研究前列腺按摩后尿液中PCA3 mRNA联合融合基因TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA的定量检测在早期前列腺癌临床诊断中的应用价值。方法收集前列腺癌(PCa)患者53例和前列腺增生(BPH)患者37例,收集前列腺按摩后尿液,离心取细胞沉淀物,提取总RNA,用实时荧光定量RT-PCR的方法检测PSA mRNA、PCA3 mRNA和T1E4 mRNA的含量,以PSA mRNA来校正尿液中的前列腺癌细胞。以PCA3 mRNA/PSA mRNA表示PCA3 mRNA的含量,以T1E4 mRNA/PSA mRNA表示融合基因T1E4 mRNA的含量。用ROC曲线对T1E4 mRNA及PCA3 mRNA诊断PCa的性能进行分析。结果尿T1E4 mR-NA/PSA mRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积(AUC)为0.802(95%CI:0.709～0.895),以0.007为截断值时,其诊断前列腺癌的敏感度和特异度分别为56.6%和94.6%。尿PCA3 mRNA/PSA mRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积(AUC)为0.646(95%CI:0.533～0.758),以0.001为截断值时,其诊断前列腺癌的敏感度和特异度为47.2%和73.0%。PCa组PCA3 mRNA(P=0.009)及T1E4 mRNA(P=0.000)的含量均高于BPH组,T1E4 mRNA联合PCA3 mRNA定量检测的敏感度为81.1%,比单独应用PCA3 mRNA和T1E4 mRNA检测的敏感度分别提高了33.9%和24.5%。结论前列腺癌按摩后尿沉渣中可以检测到TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA,联合PCA3 mRNA和T1E4 mRNA两个指标定量检测,可以显著提高检出前列腺癌的敏感度。此联合检测方法可以用于早期的前列腺癌诊断。 展开更多

关键词 前列腺癌 融合基因 tmprss2基因 PCA3基因 尿液 肿瘤标志物

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融合基因TMPRSS2:ERG与前列腺癌病理分级关系的研究 被引量：2

5

作者 易发现 李虹 +2 位作者 魏强 李响 曾浩 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期887-891,共5页

目的:研究融合基因TMPRSS2:ERG和前列腺癌病理分级的关系。方法:选取前列腺癌的穿刺标本62例为病例组,同时选择10例良性前列腺增生(BPH)患者为对照组,同时纳入9株前列腺癌细胞株作为对照,采用巢式RT-PCR检测融合基因TMPRSS2:ERG,比较融... 目的:研究融合基因TMPRSS2:ERG和前列腺癌病理分级的关系。方法:选取前列腺癌的穿刺标本62例为病例组,同时选择10例良性前列腺增生(BPH)患者为对照组,同时纳入9株前列腺癌细胞株作为对照,采用巢式RT-PCR检测融合基因TMPRSS2:ERG,比较融合基因阳性和阴性患者Gleason评分的差异,Logistic回归法分析TMPRSS2:ERG和前列腺癌病理特征的关系。结果:62例前列腺癌患者中有28例检测出TMPRSS2:ERG融合基因,阳性率为45.16%;10例BPH和9株癌细胞株中均未检测出该融合基因。融合基因TMPRSS2:ERG阳性和阴性患者Gleason评分无显著差异(Z=-0.609,P=0.542),但融合基因阳性患者Gleason主评分显著高于阴性患者(Z=-2.600,P=0.009)。单因素Logistic回归分析显示,筛状结构、泡沫状腺体和印戒癌细胞分别与融合基因TMPRSS2:ERG有关联(OR=6.25,P=0.002;OR=6.666,P=0.023;OR=3.24,P=0.035);多因素Logistic回归分析显示,该融合基因和筛状结构有关(OR=3.750,P=0.033)。结论:TMPRSS2:ERG融合基因和前列腺癌中到高级的病理分级有关。 展开更多

关键词 前列腺癌 tmprss2:ERG融合基因 病理分级 GLEASON评分 病理特征

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前列腺癌融合基因TMPRSS2:ERG的检测及其意义 被引量：7

6

作者 易发现 李虹 +2 位作者 魏强 李响 曾浩 《临床泌尿外科杂志》 北大核心 2011年第3期215-217,共3页

目的:检测国人前列腺癌患者融合基因TMPRSS2:ERG的发生率以及该融合基因和ERG表达的关系。方法:连续选取经直肠B超前列腺癌穿刺证实的前列腺癌新鲜标本62例、6例高级别前列腺上皮内瘤(HGPIN)标本和9例其他器官恶性肿瘤细胞株,另选取10例... 目的:检测国人前列腺癌患者融合基因TMPRSS2:ERG的发生率以及该融合基因和ERG表达的关系。方法:连续选取经直肠B超前列腺癌穿刺证实的前列腺癌新鲜标本62例、6例高级别前列腺上皮内瘤(HGPIN)标本和9例其他器官恶性肿瘤细胞株,另选取10例BPH组织作为对照,采用RT-PCR检测融合基因,采用real-time RT-PCR检测ERG表达。结果:本组国人前列腺癌患者融合基因TMPRSS2:ERG的发生率为45.16%,融合基因TMPRSS2:ERG诊断前列腺癌的特异度为93.75%,灵敏度为45.16%。前列腺癌融合基因组ERG基因表达显著高于前列腺癌非融合基因组(t=3.549,P=0.001)。结论:融合基因TMPRSS2:ERG在本组国人前列腺癌患者中的发生率以及在HGPIN病灶的发生率与国外研究报道相似。该融合基因诊断前列腺癌的特异性很高,但灵敏度偏低。融合基因和前列腺癌组织中ERG高表达有关。 展开更多

关键词 前列腺癌 融合基因 tmprss2:ERG基因

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TMPRSS2-ETS融合基因在前列腺癌中的研究进展及临床应用前景 被引量：5

7

作者 丁奕星 齐隽 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期852-857,共6页

西方国家前列腺癌的发病率较高,我国的发病率也日渐上升。早期发现对前列腺癌的治疗和预后有很大帮助。目前对前列腺癌的无创诊断方法存在一定局限性;TMPRSS2-ETS融合基因是新发现的与前列腺癌发生相关的生物指标,其中TMPRSS2-ERG是最... 西方国家前列腺癌的发病率较高,我国的发病率也日渐上升。早期发现对前列腺癌的治疗和预后有很大帮助。目前对前列腺癌的无创诊断方法存在一定局限性;TMPRSS2-ETS融合基因是新发现的与前列腺癌发生相关的生物指标,其中TMPRSS2-ERG是最常见的融合类型,尿液TMPRSS2-ETS融合基因检测有较高的特异度和阳性预测值,对早期发现前列腺癌有一定的价值。文章对TMPRSS2-ETS融合基因在前列腺癌中的研究进展及临床应用前景进行综述。 展开更多

关键词 前列腺癌 tmprss2 ETS ERG ETV1 ETV4 融合基因

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前列腺癌中TMPRSS2-ETS基因融合及机制研究进展 被引量：3

8

作者 郭晓强 桂耀庭 蔡志明 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期117-122,共6页

超过50%的前列腺癌中存在跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)和E26(ETS)转录因子间的基因融合,其中TMPRSS2-ERG最为常见。TMPRSS2-ERG基因融合造成的ERG过表达参与了前列腺的癌变。雄激素受体结合和遗传毒性胁迫共同诱导了染色体的靠近和TMPRSS... 超过50%的前列腺癌中存在跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)和E26(ETS)转录因子间的基因融合,其中TMPRSS2-ERG最为常见。TMPRSS2-ERG基因融合造成的ERG过表达参与了前列腺的癌变。雄激素受体结合和遗传毒性胁迫共同诱导了染色体的靠近和TMPRSS2-ETS的基因融合。TMPRSS2-ERG基因融合可作为前列腺癌诊断的一种生物标志物,并可通过病人尿液检测来实现。文章对TMPRSS2-ETS基因融合的特征、融合及致癌及临床应用进行了综述。 展开更多

关键词 前列腺癌 基因融合 跨膜丝氨酸蛋白酶2 E26 融合机制

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前列腺癌中TMPRSS2-ERG融合基因和ERG蛋白表达及其意义 被引量：9

9

作者 郭琦 余英豪 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1099-1103,共5页

目的探讨前列腺癌(prostate cancer,PC)中TMPRSS2-ERG(T-E)融合基因和ERG蛋白表达及其与各临床病理参数和预后的关系。方法采用FISH和免疫组化技术分别检测145例PC穿刺标本中T-E融合基因和ERG蛋白的表达,以癌旁正常腺体为内对照。结果 ... 目的探讨前列腺癌(prostate cancer,PC)中TMPRSS2-ERG(T-E)融合基因和ERG蛋白表达及其与各临床病理参数和预后的关系。方法采用FISH和免疫组化技术分别检测145例PC穿刺标本中T-E融合基因和ERG蛋白的表达,以癌旁正常腺体为内对照。结果 145例PC中37例(25.5%)T-E融合基因阳性。T-E融合基因表达与患者年龄、术前血清PSA水平、Gleason评分、肿瘤有无远处转移和生存期均无相关性(P>0.05)。PC中ERG蛋白阳性率为24.8%(36/145)。ERG蛋白与术前血清PSA水平具有相关性(P<0.05);与患者年龄、Gleason评分、肿瘤有无远处转移和患者生存期均无相关性。结论T-E融合基因和ERG蛋白表达仅出现在PC中,而不出现于正常前列腺腺体,T-E融合基因和ERG蛋白可作为PC的特异性标志物。仅ERG蛋白表达与PSA水平相关,而T-E融合基因与临床病理参数和预后均无相关性。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 TMPRSS-ERG融合基因 ERG蛋白 荧光原位杂交 免疫组织化学

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TMPRSS2-ERG、P504S、P63和34βE12在前列腺癌中表达与临床意义 被引量：4

10

作者 李艳菊 张春莉 +3 位作者 杨彦玲 尹香利 高继学 杜雄 《延安大学学报（医学科学版）》 2017年第2期22-24,共3页

目的探讨跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)-ERG、P504S、P63、34βE12在前列腺癌中的表达与临床意义。方法应用免疫组织化学染色检测50例前列腺癌(PCa)、30例前列腺增生(BPH)患者组织中的P504S、P63、34βE12蛋白和TMPRSS2-ERG融合基因的表... 目的探讨跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)-ERG、P504S、P63、34βE12在前列腺癌中的表达与临床意义。方法应用免疫组织化学染色检测50例前列腺癌(PCa)、30例前列腺增生(BPH)患者组织中的P504S、P63、34βE12蛋白和TMPRSS2-ERG融合基因的表达。结果 TMPRSS2-ERG、P504S在PCa中表达阳性率分别为20%(10/50)、86%(43/50),P63、34βE12蛋白在PCa中表达丢失,而在BPH中表达完整。结论 TMPRSS2-ERG、P504S、P63、34βE12的表达与PCa临床病理特征和生物学行为有密切关系,联合检测TMPRSS2-ERG、P504S、P63、34βE12的表达对诊断PCa、判断其恶性程度及预后均有一定参考价值。 展开更多

关键词 前列腺癌 tmprss2-ERG融合基因 免疫组化

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前列腺按摩后尿液中融合基因TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA的定量检测在前列腺癌诊断中的应用 被引量：1

11

作者 沈默 孔凡慧 +3 位作者 陶志华 戴美洁 陈伟 吴秀玲 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第11期2896-2899,共4页

目的:建立实时荧光定量RT-PCR检测前列腺按摩后尿液中融合基因TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA的方法学并探讨T1E4 mRNA在前列腺癌临床诊断中的应用价值。方法:前列腺癌(PCa)患者46例,前列腺增生(BPH)患者44例,收集前列腺按摩后尿液,离心取细... 目的:建立实时荧光定量RT-PCR检测前列腺按摩后尿液中融合基因TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA的方法学并探讨T1E4 mRNA在前列腺癌临床诊断中的应用价值。方法:前列腺癌(PCa)患者46例,前列腺增生(BPH)患者44例,收集前列腺按摩后尿液,离心取细胞沉淀物,提取总RNA,实时荧光定量RT-PCR方法分别检测PSA mRNA和T1E4 mRNA,以T1E4 mRNA/PSA mRNA比值表示融合基因T1E4 mRNA的含量。比较PCa组与BPH组尿液T1E4 mR-NA的含量(T1E4 mRNA/PSA mRNA比值),用受试者工作曲线(ROC)评价尿液T1E4 mRNA含量对前列腺癌的诊断价值,并分析尿液T1E4 mRNA阳性率与前列腺癌骨转移及Gleason评分之间的关系。结果:PCa组尿液T1E4 mRNA含量(9.6×10-3,0～12.6)明显高于BPH组(0,0～8.5×10-3)(P<0.01)。尿液T1E4 mRNA含量诊断前列腺癌的曲线下面积(AUC)为0.810(95%CI:0.719～0.902),以1.0×10-5为截断值时,其诊断前列腺癌的敏感度和特异性分别为71.7%和81.8%。尿液T1E4 mRNA阳性率与前列腺癌骨转移及Gleason评分之间无关。结论:前列腺按摩后尿液中融合基因TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA含量检测对前列腺癌诊断有较高的敏感度和特异性,作为前列腺癌早期诊断指标具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 尿液 前列腺癌 融合基因 tmprss2:ERG T1E4亚型

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TMPRSS2-ETS融合基因在前列腺导管内癌诊断中的应用 被引量：3

12

作者 丘佳明 姚文英 +4 位作者 王晓燕 魏炜 林小星 蔡为民 盛仁明 《中国实验诊断学》 2019年第4期655-658,共4页

前列腺癌是老年男性常见的恶性肿瘤。近年来随着血清PSA筛查和前列腺穿刺活检技术的完善,前列腺癌及其癌前病变的检出率越来越高[1]。WHO(2016)泌尿系统和男性生殖器官肿瘤分类中明确列出了前列腺导管内癌(IDC-P)这一新的组织类型[2].

关键词 HGPIN IDC 良性前列腺增生 tmprss2-ETS 导管内癌 融合基因 正常前列腺组织 导管腺癌 浸润性癌 前列腺

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前列腺癌中TMPRSS2-ERG融合基因作用机制的研究进展 被引量：7

13

作者 丘佳明 宛传丹 《临床与病理杂志》 2017年第11期2479-2484,共6页

前列腺癌在欧美国家男性中是最常见的恶性肿瘤,近年来我国的发病率、病死率及其造成的疾病负担呈现明显增加趋势,但前列腺癌的发生发展机制仍未完全明确。跨膜丝氨酸蛋白酶2(transmembrane serine protease 2,TMPR SS2)与成红细胞病毒E2... 前列腺癌在欧美国家男性中是最常见的恶性肿瘤,近年来我国的发病率、病死率及其造成的疾病负担呈现明显增加趋势,但前列腺癌的发生发展机制仍未完全明确。跨膜丝氨酸蛋白酶2(transmembrane serine protease 2,TMPR SS2)与成红细胞病毒E26致癌物(E26 oncogene,ERG)融合基因在前列腺癌中具有特异性,在前列腺癌发生发展过程中发挥重要作用,其作用机制复杂,且与多个基因相互作用,因此深入了解TMPRSS2-ERG融合基因在前列腺癌中的作用机制至关重要,可以为前列腺癌的诊疗提供帮助。 展开更多

关键词 tmprss2-ERG融合基因 前列腺癌 雄激素受体 磷酸酶与张力蛋白同源蛋白 斑点型锌指结构蛋白

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前列腺癌中TMPRSS2、ERG及ETV1的表达及意义

14

作者 周华山 朱德茂 +4 位作者 罗海军 蒋莎莉 王志敢 谢晋予 刘爱凤 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期855-859,共5页

目的探讨TMPRSS2、ERG及ETV1在前列腺癌(prostate cancer,PCa)中的表达及其临床病理学意义。方法采用组织芯片及免疫组化技术分别检测70例PCa、10例前列腺上皮内瘤变(prostatic intraepithelial neoplasia,PIN)、18例良性前列腺组织(ben... 目的探讨TMPRSS2、ERG及ETV1在前列腺癌(prostate cancer,PCa)中的表达及其临床病理学意义。方法采用组织芯片及免疫组化技术分别检测70例PCa、10例前列腺上皮内瘤变(prostatic intraepithelial neoplasia,PIN)、18例良性前列腺组织(benign prostatic tissue,BPT)中TMPRSS2、ERG、ETV1的表达。结果 TMPRSS2在PCa、PIN及BPT组中的表达差异无统计学意义(P>0.05);ERG在PCa的阳性率(81.4%)高于PIN组(30.0%)和BPT组(0.0)(P<0.05);ETV1在PCa的阳性率(68.6%)高于PIN组(50.0%)和BPT组(22.2%)(P<0.05)。TMPRSS2、ERG及ETV1在PCa中的表达与Gleason评分、临床分期相关(P<0.05),与患者年龄无关(P>0.05)。TMPRSS2与ERG在PCa中的表达呈正相关(rs=0.465,P<0.01);TMPRSS2与ETV1在PCa中的表达呈正相关(rs=0.590,P<0.01);ERG与ETV1的表达无相关性(rs=0.151,P>0.05)。结论ERG和ETV1有望成为PCa的治疗靶点;TMPRSS2、ERG、ETV1联合标记对PCa的诊断和鉴别诊断有良好的应用价值,可作为PCa的新分子标志物。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 tmprss2 ERG ETV1 组织芯片 免疫组织化学

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前列腺癌组织中TMPRSS2基因与ETS家族基因的多种融合亚型及意义 被引量：1

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作者 石少波 戴美洁 《检验医学教育》 2008年第3期41-45,共5页

目的:了解前列腺癌组织标本中跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)基因与ETS转录因子家族成员ETS相关基因(ERG)、ETS变异体1(ETV1)及ETS变异体4(ETV4)基因之间的融合情况及意义。方法:采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)琼脂糖凝胶电泳法,检测3... 目的:了解前列腺癌组织标本中跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)基因与ETS转录因子家族成员ETS相关基因(ERG)、ETS变异体1(ETV1)及ETS变异体4(ETV4)基因之间的融合情况及意义。方法:采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)琼脂糖凝胶电泳法,检测32例前列腺癌患者及34例前列腺良性增生患者,前列腺组织中TMPRSS2基因与ETS家族基因融合的TMPRSS2/ERG、TMPRSS2/ETV1、TMPRSS2/ETV4转录体;琼脂糖凝胶电泳阳性者,纯化PCR产物进行直接测序,用BLAST在线软件比对确定融合位点;分析融合基因与Gleason分级关系。结果:在32例前列腺癌患者组织标本中,检测到TMPRSS2/ERG融合基因17例(53.1%),含5种不同融合基因亚型,其中1种为新发现融合基因亚型(Genbank登录号:EU090248),单一标本中可检测到一种以上TMPRSS2/ERG融合基因亚型;检测到TMPRSS2/ETV1融合基因2例(6.3%),为新发现融合基因亚型(Genbank登录号:EU090249);未检到TMPRSS2/ETV4融合基因型;34例前列腺良性增生组织标本中均未检测到TMPRSS2/ERG、TMPRSS2/ETV1和TMPRSS2/ETV4融合基因型;按Gleason评分值分为中分化与低分化的两组前列腺癌组织标本之间融合基因阳性率无统计学差异(P=0.169)。结论:前列腺癌组织中存在TMPRSS2/ERG和TMPRSS2/ETV1融合基因及多种亚型;前列腺癌融合基因的发现有望为前列腺癌的发病机制研究提供新的思路。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 基因融合 逆转录聚合酶链反应 ETS tmprss2

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TMPRSS2/ERG融合基因检测在前列腺癌诊断中的临床应用研究

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作者 王伟 何亮 +5 位作者 李伟 胡斌 李信众 韦华玉 蓝志相 梁建波 《临床泌尿外科杂志》 2013年第6期446-449,共4页

目的:通过比较TMPRSS2/ERG融合基因与前列腺癌各项诊断指标的关系,评估荧光原位杂交技术(FISH)诊断和鉴别诊断前列腺癌的临床应用价值。方法:分别对44例前列腺癌及12例BPH石蜡切片行FISH检测TMPRSS2和ETS(ERG、ETV1及ETV4)基因融合现象... 目的:通过比较TMPRSS2/ERG融合基因与前列腺癌各项诊断指标的关系,评估荧光原位杂交技术(FISH)诊断和鉴别诊断前列腺癌的临床应用价值。方法:分别对44例前列腺癌及12例BPH石蜡切片行FISH检测TMPRSS2和ETS(ERG、ETV1及ETV4)基因融合现象,比较两种疾病发生基因融合的情况,并分析前列腺癌标本中TMPRSS2/ETS基因融合改变和前列腺癌各项诊断指标的关系。结果:在44例前列腺癌标本中,26例(59.1%)检测到MPRSS2/ERG融合基因,4例(9.1%)检测到MPRSS2/ETV1融合基因;1例(2.3%)检测到MPRSS2/ETV4融合基因。20例BPH标本均未检测到基因融合现象。FISH诊断前列腺癌的敏感性为70.5%,特异性为100%。TMPRSS2/ETS基因融合状态异常与Gleason评分和ECT呈正相关,相关系数分别为0.383(P=0.001)和0.309(P=0.041);MPRSS2/ETS基因异常发生率与DRE和TRUS的阳性检出率无关联(P>0.05)。结论:FISH技术检测TMPRSS2/ETS(ERG、ETV1、ETV4)融合基因在诊断前列腺癌中具有较高的敏感性和特异性,有助于早期前列腺癌的诊断和鉴别诊断。 展开更多

关键词 前列腺癌 原位荧光杂交技术 tmprss2 ERG融合基因 诊断

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尿沉淀细胞中TMPRSS2-ETS融合基因对诊断前列腺癌的意义

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作者 丁奕星 齐隽 +1 位作者 马妍慧 沈立松 《临床泌尿外科杂志》 2013年第3期212-214,217,共4页

目的:检测尿沉淀细胞中TMPRSS2-ETS融合基因对诊断前列腺癌的意义。方法:将2010～2011年我院收治的经病理检查证实为前列腺癌者归为前列腺癌组,经病理检查证实为BPH者归为BPH组。收集两组患者前列腺按摩后首次尿液标本,用FISH检测其TMPR... 目的:检测尿沉淀细胞中TMPRSS2-ETS融合基因对诊断前列腺癌的意义。方法:将2010～2011年我院收治的经病理检查证实为前列腺癌者归为前列腺癌组,经病理检查证实为BPH者归为BPH组。收集两组患者前列腺按摩后首次尿液标本,用FISH检测其TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1和TMPRSS2-ETV4融合基因的表达。结果:纳入本次研究的前列腺癌组和BPH组分别为51例和20例,TMPRSS2-ERG(+)的病例分别为26例(50.98%)和4例(20%),差异有显著统计学意义(P<0.05)。其敏感度为50.98%,特异度为80%,假阳性率为20%,假阴性率为49.02%,阳性似然比为2.549,阴性似然比为0.613,Youden指数为0.3098。两组中均未发现有TMPRSS2-ETV1或TMPRSS2-ETV4融合基因阳性患者。结论:用FISH方法检测尿沉淀细胞TMPRSS2-ERG融合基因有助于区分前列腺癌与BPH。TMPRSS2-ETV1和TMPRSS2-ETV4融合基因在前列腺癌中出现率较低,故不推荐用于前列腺癌的诊断检测。 展开更多

关键词 前列腺癌 tmprss2 ETS ERG ETV1 ETV4 融合基因

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TMPRSS2-ERG基因融合在前列腺癌中研究新进展

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作者 郭琦 余英豪 《医学综述》 2012年第20期3397-3400,共4页

TMPRSS2-ERG基因融合是前列腺癌中最常出现的基因融合类型。TMPRSS2-ERG融合基因通过与雄激素受体、多聚ADP-核糖聚合酶1和DNA-PKcs、核因子κB和富含半胱氨酸分泌蛋白3的相互作用介导前列腺癌的发生。利用荧光原位杂交技术和免疫组织... TMPRSS2-ERG基因融合是前列腺癌中最常出现的基因融合类型。TMPRSS2-ERG融合基因通过与雄激素受体、多聚ADP-核糖聚合酶1和DNA-PKcs、核因子κB和富含半胱氨酸分泌蛋白3的相互作用介导前列腺癌的发生。利用荧光原位杂交技术和免疫组织化学技术检测前列腺癌标本中融合基因发生及其蛋白表达,具有较高的阳性率;尿液TMPRSS2-ERG融合基因检测有较高的特异度和阳性预测值。 展开更多

关键词 tmprss2-ERG 基因融合 前列腺癌

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TMPRSS2-ERG融合基因在淋巴结转移前列腺癌中的阳性率及与生存的关系 被引量：4

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作者 谢英伟 金世鹏 +3 位作者 闫伟 王伟 平浩 刘跃新 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第1期72-77,共6页

目的研究TMPRSS2-ERG融合基因在淋巴结阳性前列腺癌中的分布以及对其预后的意义。方法收集2008年1月至2012年12月前列腺癌根治术后,术后病理提示淋巴结转移的标本50例。所有患者术后均接受内分泌治疗。利用荧光原位杂交技术检测标本中TM... 目的研究TMPRSS2-ERG融合基因在淋巴结阳性前列腺癌中的分布以及对其预后的意义。方法收集2008年1月至2012年12月前列腺癌根治术后,术后病理提示淋巴结转移的标本50例。所有患者术后均接受内分泌治疗。利用荧光原位杂交技术检测标本中TMPRSS2-ERG融合基因。收集患者各种肿瘤特征(Gleason评分、分期)、有无生化复发、疾病特异性和总体生存率。比较融合基因阳性和阴性患者的临床病理资料分布及预后差异。结果 19例(38%)原发性肿瘤中检测到TMPRSS2-ERG融合基因。转移淋巴结中有16例(32%)出现融合基因。原发肿瘤与转移灶TMPRSS2-ERG状态一致性较好(Kappa=0. 73)。在COX分析中,原发肿瘤中TMPRSS2-ERG融合基因与Gleason评分是生化复发的预测因素。在生存分析中,原发肿瘤/淋巴结融合基因(+/+)组与原发肿瘤/淋巴结融合基因(+/-)组预后低于原发肿瘤/淋巴结融合基因(-/-)组,无生化复发率差异存在统计学意义(P=0. 03)。结论 TMPRSS2-ERG融合基因在伴有淋巴结转移的原发性前列腺癌中阳性率38%。原发肿瘤与淋巴结转移灶中TMPRRS2-ERG融合基因具有较好的一致性。原发肿瘤TMPRSS2-ERG融合基因阳性的患者预后较差。 展开更多

关键词 tmprss2-ERG融合基因 前列腺癌 转移 生存期

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TMPRSS2-ERG融合基因与转移性去势抵抗性前列腺癌化学药物治疗后生存率的关系 被引量：3

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作者 谢英伟 金仕鹏 +4 位作者 李爽 王永辉 王伟 平浩 刘跃新 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第1期103-107,共5页

目的明确TMPRSS2-ERG(T-E)融合基因与转移性去势抵抗性前列腺癌(metastatic castration-resistant prostate cancer,mCRPC)多西他赛化学药物治疗(以下简称化疗)后生存率的关系。方法选取首都医科大学附属北京同仁医院前列腺增生患者20例... 目的明确TMPRSS2-ERG(T-E)融合基因与转移性去势抵抗性前列腺癌(metastatic castration-resistant prostate cancer,mCRPC)多西他赛化学药物治疗(以下简称化疗)后生存率的关系。方法选取首都医科大学附属北京同仁医院前列腺增生患者20例,前列腺癌化疗的患者50例。用实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检查患者外周血单核细胞中融合基因表达。通过前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)应答率、PSA-无进展生存率(free survival,PSA-PFS)、放射学无进展生存率(radiological progression free survival,RX-PFS)和总生存率(overall survival,OS)评估不同融合基因表达患者的治疗反应。结果50例前列腺癌患者中10例(20%)检测到T-E融合基因。T-E阳性组的PSA应答率低于阴性组(32.52%vs 74.35%,P=0.040)。单因素生存分析显示T-E阳性患者前列腺PSA-PFS、RX-PFS、OS低于阴性患者,差异均有统计学意义(P<0.01)。多因素Cox回归分析显示T-E阳性是PSA-PFS、RX-PFS和OS的独立危险因素(P=0.010,P=0.010,P=0.020)。结论T-E融合基因表达是多西他赛化疗mCRPC患者PSA-PFS、RX-PFS和OS的独立危险因素。 展开更多

关键词 tmprss2-ERG融合基因 前列腺癌 化学药物治疗 耐药

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