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血清ACTH、TRAF6、Tim-3联合检测对肛瘘患者术后切口感染的预测价值
1
作者 王玉 刘纪锋 《检验医学与临床》 2026年第3期378-383,390,共7页
目的探讨血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF6)、免疫调节分子T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白3(Tim-3)联合检测对肛瘘患者术后切口感染的预测价值。方法选取2023年1月至2024年12月该院收治的需进行手术治疗的... 目的探讨血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF6)、免疫调节分子T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白3(Tim-3)联合检测对肛瘘患者术后切口感染的预测价值。方法选取2023年1月至2024年12月该院收治的需进行手术治疗的417例肛瘘患者为疾病组,另选取同期在该院进行健康体检者232例为对照组。根据术后切口是否感染分为感染组和未感染组,利用倾向性评分匹配(PSM)方法控制混杂因素。采用酶联免疫吸附试验检测所有参与者血清ACTH、TRAF6、Tim-3水平。采用多因素Logistic回归分析肛瘘患者术后切口感染的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ACTH、TRAF6、Tim-3对肛瘘患者术后切口感染的预测价值。结果疾病组血清ACTH、TRAF6、Tim-3水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。417例肛瘘患者中,术后发生切口感染41例,占比9.83%,未发生切口感染376例,占比90.17%。PSM前,感染组复杂性肛瘘类型占比及血清ACTH、TRAF6、Tim-3水平高于未感染组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PSM后,感染组复杂性肛瘘类型占比及血清ACTH、TRAF6、Tim-3水平高于未感染组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清ACTH、TRAF6、Tim-3水平升高是肛瘘患者术后切口感染的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清ACTH、TRAF6、Tim-3单独及3项指标联合预测肛瘘患者术后切口感染的曲线下面积(AUC)分别为0.811、0.825、0.845、0.945。3项指标联合预测的AUC大于血清ACTH、TRAF6、Tim-3单独预测的AUC(Z=3.112、2.828、3.313,均P<0.05)。结论术后发生切口感染的肛瘘患者血清ACTH、TRAF6、Tim-3水平升高,3项指标可用作预测肛瘘患者术后切口感染的生物标志物,3项指标联合检测对肛瘘患者术后切口感染有较高的预测价值。 展开更多
关键词 促肾上腺皮质激素 肿瘤坏死因子受体相关因子-6 免疫调节分子T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白3 肛瘘 切口感染 预测价值
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羟基磷灰石/氧化石墨烯/白细胞介素4涂层材料的理化性质及生物相容性
2
作者 李丛丛 吾凡别克·巴合提 +3 位作者 赵莉 陈晓涛 孔垂范 俞敏 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第2期404-413,共10页
背景:纯钛及钛合金种植体因良好的生物相容性及弹性模量被广泛应用于种植修复领域,但钛基种植体表面的生物惰性导致其与周围骨组织的整合性较差,需要进行表面修饰提高钛基种植体的骨整合能力。目的:在纯钛片表面制备羟基磷灰石/氧化石墨... 背景:纯钛及钛合金种植体因良好的生物相容性及弹性模量被广泛应用于种植修复领域,但钛基种植体表面的生物惰性导致其与周围骨组织的整合性较差,需要进行表面修饰提高钛基种植体的骨整合能力。目的:在纯钛片表面制备羟基磷灰石/氧化石墨烯/白细胞介素4涂层材料,探究涂层材料的理化性能与生物相容性。方法:通过电化学沉积法及浸泡冻干法在钛片表面制备负载羟基磷灰石/氧化石墨烯/白细胞介素4涂层,同时制备负载白细胞介素4的钛片与负载羟基磷灰石/氧化石墨烯涂层的钛片,表征纯钛片及上述3种钛片的理化性能。将MC3T3-E1细胞分别接种于纯钛片及上述3种钛片的表面,通过CCK-8、DAPI染色检测细胞增殖,Calcein-AM/PI染色检测细胞活性,扫描电镜观察细胞形态与黏附。结果与结论:①扫描电镜、X射线能量色散谱、X射线光电子能谱、X射线衍射谱、拉曼光谱检测显示,在钛片表面成功制备了羟基磷灰石/氧化石墨烯/白细胞介素4涂层。羟基磷灰石/氧化石墨烯/白细胞介素4组水接触角大于纯钛组、羟基磷灰石/氧化石墨烯组,小于白细胞介素4组。②CCK-8、DAPI染色结果显示,羟基磷灰石/氧化石墨烯/白细胞介素4涂层可促进MC3T3-E1细胞增殖。Calcein-AM/PI染色结果显示,羟基磷灰石/氧化石墨烯/白细胞介素4涂层组MC3T3-E1细胞活性较高,较少见死细胞。扫描电镜下可见MC3T3-E1细胞黏附于4组材料表面,细胞形态良好,相较于纯钛组,白细胞介素4组MC3T3-E1细胞伸出伪足更多,细胞间联系更加紧密,黏附面积更大;相较于羟基磷灰石/氧化石墨烯组,羟基磷灰石/氧化石墨烯/白细胞介素4组MC3T3-E1细胞伸出伪足更多,细胞间联系更加紧密,黏附面积更大。③结果表明,羟基磷灰石/氧化石墨烯/白细胞介素4涂层具有良好的理化性能及生物学性能。 展开更多
关键词 氧化石墨烯 羟基磷灰石 白细胞介素4 种植体复合涂层 MC3T3-E1细胞 生物相容性 工程化材料
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NIH3T3-CD40L-IL-2-IL-4-IL-21-BAFF细胞系的稳定建立及其在体外培养B细胞中的应用
3
作者 韩玉洁 梁思辛 +8 位作者 郑瑞 董昊 赵晓娟 王鹏举 李琰龙 杨建勋 杨安钢 阎博 左百乐 《中国免疫学杂志》 北大核心 2026年第1期180-185,共6页
目的:将CD40L、IL-2、IL-4、IL-21及BAFF表达于NIH3T3细胞,进一步优化B细胞体外培养条件。方法:利用分子克隆技术构建包含CD40L、IL-2、IL-4、IL-21、BAFF基因的慢病毒表达载体,制备慢病毒并感染NIH3T3细胞,流式细胞术检测CD40L、BAFF表... 目的:将CD40L、IL-2、IL-4、IL-21及BAFF表达于NIH3T3细胞,进一步优化B细胞体外培养条件。方法:利用分子克隆技术构建包含CD40L、IL-2、IL-4、IL-21、BAFF基因的慢病毒表达载体,制备慢病毒并感染NIH3T3细胞,流式细胞术检测CD40L、BAFF表达,ELISA检测IL-2、IL-4、IL-21分泌水平,并对其作为饲养细胞与B细胞在体外共培养16 d,显微镜观察B细胞增殖情况,ELISA检测IgG分泌水平。结果:成功构建了NIH3T3-CD40L-IL-2-IL-4-IL-21-BAFF细胞系,该细胞系能够稳定表达CD40L、BAFF,分泌高水平的IL-2、IL-4、IL-21,与B细胞体外共培养16 d能够支持低密度B细胞高效扩增,并诱导B细胞分化为浆细胞,且其抗体分泌量高达517 ng/mL。结论:本研究成功构建了能够支持B细胞体外增殖与活化的饲养细胞系,为单克隆抗体制备奠定了良好基础。 展开更多
关键词 饲养细胞 CD40L BAFF NIH3T3细胞 体外培养
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沉默TIM-3基因调控TAMs极化对宫颈癌细胞增殖和迁移能力影响的实验研究
4
作者 邓伟伟 唐成琼 马秀敏 《现代检验医学杂志》 2026年第1期21-23,34,共4页
目的探讨沉默T细胞免疫球蛋白黏蛋白‐3(Tim-3)基因对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)极化的调控作用,及这种调控对宫颈癌细胞增殖与迁移能力的影响。方法构建沉默TIM-3基因的TAMs模型,采用CCK-8实验检测宫颈癌细胞增殖能力,Transwell实验检测... 目的探讨沉默T细胞免疫球蛋白黏蛋白‐3(Tim-3)基因对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)极化的调控作用,及这种调控对宫颈癌细胞增殖与迁移能力的影响。方法构建沉默TIM-3基因的TAMs模型,采用CCK-8实验检测宫颈癌细胞增殖能力,Transwell实验检测宫颈癌细胞迁移能力,蛋白质免疫印迹(Western blotting)实验检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白(上皮钙黏素,神经钙黏素)的表达变化,流式细胞术检测TAMs极化状态。结果沉默TIM-3的宫颈癌细胞增殖率、迁移率显著降低,差异具有统计学意义(t=4.17~12.81,均P<0.05);E-cadherin蛋白表达量显著增高,N-cadherin蛋白表达量显著降低,差异具有统计学意义(t=8.90~25.00,均P<0.05);CD86阳性细胞比例显著升高,CD163阳性细胞比例显著降低,差异具有统计学意义(t=11.92~26.10,均P<0.05)。结论沉默TIM-3基因能够有效调控TAMs极化,显著抑制宫颈癌细胞的增殖与迁移能力,为宫颈癌的靶向治疗提供了新的理论依据和潜在靶点。 展开更多
关键词 T细胞免疫球蛋白黏蛋白‐3 宫颈癌细胞 侵袭迁移 肿瘤相关巨噬细胞
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绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜的促成骨效应
5
作者 孙蕾 张琦 张宇 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第8期1877-1884,共8页
背景:绿原酸具有抗菌、抗病毒、促成骨等作用,但水溶性较差限制了其生物活性。目的:观察绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜的促成骨效应。方法:(1)以绿原酸、牛血清蛋白和壳聚糖为原料,通过去溶剂法和静电吸附技术制备绿原酸蛋白微球... 背景:绿原酸具有抗菌、抗病毒、促成骨等作用,但水溶性较差限制了其生物活性。目的:观察绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜的促成骨效应。方法:(1)以绿原酸、牛血清蛋白和壳聚糖为原料,通过去溶剂法和静电吸附技术制备绿原酸蛋白微球。表征绿原酸蛋白微球的微观形貌、粒径大小、Zeta电位与药物包封率。将对数生长期的MC3T3-E1细胞分3组培养:对照组不进行任何处理,绿原酸组加入10 mg/L绿原酸,绿原酸蛋白微球组加入50 mg/L绿原酸蛋白微球,检测细胞增殖、成骨诱导后的碱性磷酸酶活性以及过氧化氢诱导氧化应激下的活性氧水平。(2)利用静电纺丝技术分别制备聚己内酯静电纺丝膜与绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜,扫描电镜观察静电纺丝膜的微观形貌。将对数生长期的MC3T3-E1细胞分4组培养:对照组不进行任何处理,绿原酸组加入10 mg/L绿原酸,聚己内酯组加入聚己内酯静电纺丝膜,微球纺丝膜组加入绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜,成骨诱导7 d后,RT-qPCR检测RUNX2、碱性磷酸酶mRNA表达,Western blot检测RUNX2、碱性磷酸酶蛋白表达。结果与结论:(1)绿原酸蛋白微球为表面光滑的双层结构,粒径较为均一,平均粒径(322.38±8.39)nm,Zeta电位为(42.85±2.11)mV,药物包封率为(57.16±7.32)%。绿原酸与绿原酸蛋白微球均可促进MC3T3-E1细胞增殖与早期成骨分化,降低氧化应激反应的活性氧水平。(2)两组静电纺丝膜均为孔隙较多的3D网状结构,聚己内酯静电纺丝表面较光滑,纺丝直径也较为一致,绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜表面出现较多球状突起,纺丝直径差异较大。绿原酸与绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜均可提高MC3T3-E1细胞内RUNX2、碱性磷酸酶mRNA与蛋白表达。结果表明,绿原酸蛋白微球/聚己内酯静电纺丝膜可促进MC3T3-E1细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 绿原酸 MC3T3-E1细胞 成骨 蛋白微球 静电纺丝 细胞增殖 细胞分化 工程化骨材料
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5T MRI对青年人群牙髓及牙周膜的体内成像效果研究
6
作者 漆正楠 曹轶婷 +5 位作者 王易维 宋庆博 张培荣 孙顺涛 汪登斌 唐子圣 《口腔疾病防治》 2026年第2期139-147,共9页
目的 探讨5T磁共振成像(5T magnetic resonance imaging, 5T MRI)对青年人群牙髓及牙周膜组织的体内成像效果,为高场核磁共振技术在口腔临床检查中的应用提供依据。方法 获得单位医学伦理委员会审批,共招募15名健康志愿者(纳入413颗恒... 目的 探讨5T磁共振成像(5T magnetic resonance imaging, 5T MRI)对青年人群牙髓及牙周膜组织的体内成像效果,为高场核磁共振技术在口腔临床检查中的应用提供依据。方法 获得单位医学伦理委员会审批,共招募15名健康志愿者(纳入413颗恒牙),进行全口腔5T MRI扫描,其中6名志愿者(纳入共168颗恒牙)同时接受3T磁共振成像(3T magnetic resonance imaging, 3T MRI)和锥形束CT(cone-beam computed tomography, CBCT)扫描。由两名口腔科医师采用5级Likert量表对图像上的牙髓及牙周膜成像效果进行独立评分,并记录每颗牙可检测到的根管数目。采用加权kappa检验法和组内相关系数(intraclass correlation coefficient, ICC)评估评分者间一致性。通过非参数检验比较不同组织结构、牙位及成像方式间的成像效果差异。结果 5T MRI能对大部分牙髓组织和部分牙周膜结构实现体内成像;两名评分者对牙髓及牙周膜成像评分的一致性较高(牙髓κ=0.934,牙周膜κ=0.737);牙髓的成像评分显著高于牙周膜(P<0.001),且磨牙牙髓的评分低于前磨牙和前牙。在6名志愿者的多模态对比中,评分者对5T MRI、3T MRI、CBCT成像方式的牙髓、牙周膜评分及根管计数均具有良好一致性(5T MRI牙髓κ=0.971,3T MRI牙髓κ=0.933,CBCT牙髓κ=0.964;5T MRI牙周膜κ=0.625,3T MRI牙周膜κ=0.667,CBCT牙周膜κ=0.571;根管计数ICC均≥0.990)。5T MRI对牙髓和牙周膜的成像评分明显高于3T MRI(牙髓:P<0.001;牙周膜:P=0.022),但两者在根管数目的检出率方面差异无统计学意义(P > 0.05)。虽然5T MRI对牙髓、牙周膜的成像评分以及根管数目的检出率方面不如CBCT(牙髓成像评分:P<0.001;牙周膜成像评分:P=0.02;根管数目:P<0.05),但却能在真正意义上对这两种软组织实现“直接成像”。结论 5T MRI能对青年人群的牙髓及牙周膜组织实现较好的体内直接成像效果,提示其在牙髓及牙周相关疾病的临床诊疗中具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 5T磁共振成像 3T磁共振成像 锥形束CT 牙髓 牙周膜 体内成像 软组织对比 直接成像
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IL-6、HLA-G、Tim-3与急性髓系白血病患者临床病理指标和预后的关系
7
作者 雷喨 侯瑞红 吉霞 《转化医学杂志》 2026年第1期100-104,共5页
目的探究白细胞介素6(IL-6)、人类白细胞抗原G(HLA-G)、T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(Tim-3)与急性髓系白血病(AML)患者临床病理指标和预后的关系。方法选择2020年3月至2023年11月临汾市人民医院收治的AML患者113例作为研究组,另选... 目的探究白细胞介素6(IL-6)、人类白细胞抗原G(HLA-G)、T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(Tim-3)与急性髓系白血病(AML)患者临床病理指标和预后的关系。方法选择2020年3月至2023年11月临汾市人民医院收治的AML患者113例作为研究组,另选择同期健康体检者80例作为对照组。检测并比较两组血清IL-6、HLA-G、Tim-3水平,分析IL-6、HLA-G、Tim-3表达水平与AML患者临床病理指标的关系。根据AML患者1年预后情况将患者分为生存组(85例)和死亡组(28例),比较两组血清IL-6、HLA-G、Tim-3水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清IL-6、HLA-G、Tim-3水平对AML患者预后的预测价值。结果研究组患者血清IL-6、HLA-G、Tim-3水平显著高于对照组(P<0.05)。AML患者血清IL-6、HLA-G、Tim-3水平与外周血白细胞计数及欧洲白血病网(ELN)危险分层有关(P<0.05)。死亡组AML患者血清IL-6、HLA-G、Tim-3水平均高于生存组(P<0.05)。血清IL-6、HLA-G、Tim-3单独预测AML患者预后的曲线下面积分别为0.829、0.840、0.787,三者联合预测预后的曲线下面积为0.948,优于各自单独预测(Z_(三者联合vs IL-6)=2.497、Z_(三者联合vs HLA-G)=2.957、Z_(三者联合vs Tim-3)=3.207,均P<0.05)。结论AML患者血清IL-6、HLA-G、Tim-3水平显著升高,且三者表达水平与外周血白细胞计数及ELN危险分层有关,三者联合可辅助预测AML患者预后。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 白细胞介素6 人类白细胞抗原G T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3 病理 ROC曲线
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靶向Tim-3哺乳动物细胞抗体库的构建、筛选及抗体功能研究
8
作者 杜琳 李国贤 +5 位作者 杜春晓 陈隽睿 李宇翔 王智鼎 李葛 韩根成 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2026年第1期52-59,共8页
目的T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)在天然免疫应答及适应性免疫应答调控中起关键作用,被视为新的免疫治疗靶点。本研究旨在实验室原有靶向人Tim-3的鼠源抗体基础上,借助计算机辅助分子设计,构建靶向人Tim-3的哺乳动物细胞抗体库,并筛... 目的T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)在天然免疫应答及适应性免疫应答调控中起关键作用,被视为新的免疫治疗靶点。本研究旨在实验室原有靶向人Tim-3的鼠源抗体基础上,借助计算机辅助分子设计,构建靶向人Tim-3的哺乳动物细胞抗体库,并筛选出功能改进的抗体。方法整合计算机辅助分子模型构建平台与哺乳动物细胞抗体库技术,对Tim-3母本序列进行设计优化;通过Overlap PCR、载体的酶切、酶连与转化等分子生物学技术,得到靶向Tim-3哺乳动物抗体库的质粒库;通过测序比对获得全新序列抗体,利用ELISA技术进行筛选,获得表达量高、亲和力高的抗体;进一步通过体外功能实验(实时定量PCR、CCK-8)验证优化抗体的功能。结果以实验室前期制备的抗人Tim-3鼠源抗体为母本,利用计算机辅助设计平台,在Tim-3轻链与重链分别设计引入5个关键氨基酸替换;通过Overlap PCR分别获得3个含有突变碱基的轻链(L-1、L-2、L-3)和重链(H-1、H-2、H-3),连接载体后转化入TOP10电转感受态细胞,成功构建富含序列多样性的抗体分子质粒库。对新抗体进行序列的分析比对,筛选并纯化得到亲和力高于母本的抗体,命名为1号抗体。实时定量PCR检测表明,1号抗体阻断巨噬细胞系RAW264.7细胞和小胶质细胞系BV2细胞后,β干扰素(IFN-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6的基因转录水平明显上调;阻断Jurkat^(Tim-3-high)细胞后,IL-2、IFN-γ的基因转录水平明显上调,且1号抗体的阻断作用大于母本Tim-3抗体。CCK-8法检测证明了1号抗体促进Jurkat^(Tim-3-high)细胞的增殖,且1号抗体的促进作用大于母本Tim-3抗体。结论通过计算机辅助分子设计平台和哺乳动物抗体库技术,得到亲和力高于母本抗体、且能够提高人和小鼠细胞系多种细胞因子表达的全新序列的Tim-3人源抗体。 展开更多
关键词 T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3) 哺乳动物细胞抗体库 计算机辅助分子设计
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Tim-3在复发性流产中作用机制的研究进展
9
作者 陈静 郑晶 董益 《中国性科学》 2026年第1期56-59,共4页
复发性流产(RSA)是一种常见的妊娠并发症,其病因和发病机制复杂,可能与母胎免疫耐受异常相关。T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)广泛表达于母胎界面的多种细胞中,在母胎界面免疫耐受和妊娠维持中发挥关键作用。Tim-3的异常表达,可能... 复发性流产(RSA)是一种常见的妊娠并发症,其病因和发病机制复杂,可能与母胎免疫耐受异常相关。T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)广泛表达于母胎界面的多种细胞中,在母胎界面免疫耐受和妊娠维持中发挥关键作用。Tim-3的异常表达,可能会通过调节母胎界面细胞,破坏母胎免疫耐受,进而导致RSA的发生。本文从蜕膜免疫细胞、蜕膜基质细胞、滋养层细胞,以及Tim-3与程序性死亡蛋白1(PD-1)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)等免疫检查点的协同作用等角度,对Tim-3在RSA中的作用机制做一综述,以期为RSA的诊断和免疫治疗提供新思路和潜在靶点。 展开更多
关键词 复发性流产 T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3 母胎免疫耐受
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PD-L1与Tim-3在子痫前期胎盘组织中的表达及其与螺旋动脉结构重塑的相关性
10
作者 高静 李志强 +1 位作者 张帅 梁玉婵 《河北北方学院学报(自然科学版)》 2026年第4期5-8,共4页
目的探讨免疫调节分子PD-L1和Tim-3在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达特征及其与螺旋动脉结构重塑的相关性。方法回顾性分析50例PE患者(按病情严重程度分为重度25例及轻度25例)和30例健康妊娠妇女的临床资料,对胎盘样本进行检测,评估P... 目的探讨免疫调节分子PD-L1和Tim-3在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达特征及其与螺旋动脉结构重塑的相关性。方法回顾性分析50例PE患者(按病情严重程度分为重度25例及轻度25例)和30例健康妊娠妇女的临床资料,对胎盘样本进行检测,评估PD-L1和Tim-3表达水平与胎盘组织病理学改变的关联性。结果与健康对照组相比,PE组患者胎盘组织中绒毛外滋养细胞和绒毛细胞滋养细胞的PD-L1表达显著减弱(P<0.01),而Tim-3在母胎界面淋巴细胞中的表达明显增强(P<0.05)。PD-L1的低水平表达与螺旋动脉肌层结构残留、管腔狭窄程度呈现显著负相关性(r=-0.68,P<0.001;r=-0.71,P<0.001),Tim-3的高表达则与胎盘组织内炎症细胞浸润程度呈明显正相关(r=0.68,P<0.001)。结论PD-L1表达下调可能破坏母胎免疫耐受平衡,抑制滋养细胞正常生理功能;Tim-3表达上调可能诱发免疫细胞功能耗竭与调节失常。这两种免疫检查点分子的异常表达共同参与了螺旋动脉结构重塑障碍的病理过程,可作为PE潜在的病理学诊断指标和靶向治疗干预位点。 展开更多
关键词 子痫前期 程序性死亡受体配体1 T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3 胎盘病理学 螺旋动脉重塑 免疫耐受机制
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骨松汤含药血清对H_(2)O_(2)诱导成骨细胞铁死亡的影响及机制
11
作者 王莉莎 郭中华 +7 位作者 王上增 史栋梁 张仲博 任博文 王云飞 周晓宁 王俊杰 杨少祥 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第10期1405-1412,共8页
目的探究骨松汤含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)铁死亡的影响及其作用机制。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)筛选骨松汤含药血清和铁抑制素-1(Fer-1)处理浓度。选择合适剂量的骨松汤含药血清和Fe... 目的探究骨松汤含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)铁死亡的影响及其作用机制。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)筛选骨松汤含药血清和铁抑制素-1(Fer-1)处理浓度。选择合适剂量的骨松汤含药血清和Fer-1干预,荧光探针检测亚铁离子(Fe^(2+))和活性氧(ROS)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平及碱性磷酸酶(ALP)活性;比色法检测谷胱甘肽(GSH)水平;茜素红S染色检测钙结节吸光度(OD)值;免疫印迹检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链脂酰-Co A合成酶4(ACSL4)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)蛋白表达。细胞过表达NOX4,检测铁死亡相关指标(GPX4和ACSL4蛋白表达、GSH水平、MDA含量)和细胞成骨功能(ALP活性和钙结节OD值)。结果H_(2)O_(2)诱导MC3T3-E1细胞铁死亡。与H_(2)O_(2)组相比,骨松汤含药血清和Fer-1干预显著提高了细胞存活率、SOD和CAT活性、GSH水平以及GPX4蛋白表达(P<0.05),降低细胞MDA含量、Fe^(2+)和ROS水平以及NOX4与ACSL4蛋白表达(P<0.05)。NOX4过表达抑制了骨松汤含药血清对H_(2)O_(2)处理MC3T3-E1细胞铁死亡和成骨功能的保护作用。结论骨松汤含药血清能够抑制H_(2)O_(2)诱导的MC3T3-E1细胞铁死亡,这可能与其抑制NOX4/ROS信号通路活化有关。 展开更多
关键词 骨松汤含药血清 过氧化氢 MC3T3-E1细胞 铁死亡 NOX4 成骨细胞
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负载纳米钽的液晶显示光固化聚乳酸支架制备及促成骨性能
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作者 李明哲 叶翔凌 +1 位作者 王冰 余翔 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第4期670-677,共8页
背景:聚乳酸因具有良好的生物相容性和可控的降解速率在生物医学工程中得到了广泛应用,然而存在机械强度低和生物活性不足等缺陷,限制了其在骨组织工程中的进一步应用。目的:构建聚乳酸/聚多巴胺/钽(PLA/PDA/Ta)骨组织工程支架,探究其... 背景:聚乳酸因具有良好的生物相容性和可控的降解速率在生物医学工程中得到了广泛应用,然而存在机械强度低和生物活性不足等缺陷,限制了其在骨组织工程中的进一步应用。目的:构建聚乳酸/聚多巴胺/钽(PLA/PDA/Ta)骨组织工程支架,探究其生物安全性和体外促成骨性能。方法:利用液晶显示光固化技术制备具有多孔结构的聚乳酸(PLA)支架,将PLA支架分别浸泡在多巴胺溶液与多巴胺-纳米钽混合溶液中分别制备聚乳酸/聚多巴胺(PLA/PDA)支架、PLA/PDA/Ta支架,表征支架的微观形貌与水接触角。将MC3T3-E1细胞分别与PLA、PLA/PDA、PLA/PDA/Ta支架共培养,进行CCK-8检测与活/死细胞染色;成骨诱导分化后,进行碱性磷酸酶、茜素红染色及成骨基因检测。结果与结论:①扫描电镜下可见3种支架均具有互连的多孔三维结构,平均孔径为200μm;PLA/PDA/Ta支架的水接触角低于PLA、PLA/PDA支架(P<0.05);②CCK-8检测显示,相较于PLA、PLA/PDA支架,PLA/PDA/Ta支架可促进细胞的增殖(P<0.05);活/死细胞染色显示3组细胞增殖良好;③碱性磷酸酶与茜素红染色显示,相较于PLA、PLA/PDA支架,PLA/PDA/Ta支架可促进细胞碱性磷酸酶的表达与矿化结节形成;RT-qPCR检测显示,相较于PLA、PLA/PDA支架,PLA/PDA/Ta支架可促进细胞骨形态发生蛋白、Runx-2及Ⅰ型胶原mRNA的表达(P<0.05,P<0.01);④结果表明,PLA/PDA/Ta支架具有优异的促细胞增殖与成骨活性。 展开更多
关键词 液晶显示光固化打印 聚乳酸 聚多巴胺 纳米钽 MC3T3-E1细胞 骨组织工程支架
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参附注射液治疗脓毒症休克伴低T3综合征的效果及对甲状腺功能、预后影响
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作者 黄彩凤 杨晓帆 +2 位作者 黄正米 荣清源 宋林燕 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第7期68-71,共4页
目的 探讨参附注射液治疗脓毒症休克(SS)伴低T3综合征(LT3S)的效果及对甲状腺功能、预后的影响。方法 选取医院2022年2月—2023年11月98例SS伴LT3S患者,随机数字表法分为观察组及对照组,均49例。两组均予以常规治疗,对照组予以左甲状腺... 目的 探讨参附注射液治疗脓毒症休克(SS)伴低T3综合征(LT3S)的效果及对甲状腺功能、预后的影响。方法 选取医院2022年2月—2023年11月98例SS伴LT3S患者,随机数字表法分为观察组及对照组,均49例。两组均予以常规治疗,对照组予以左甲状腺素,观察组在对照组基础上加用参附注射液。比较两组疗效、症状和病情变化、治疗前后血流动力学[CVP、全身血管阻力指数(SVRI)、MAP]、甲状腺功能、炎症因子、预后。结果 两组总有效率分为91.84%(45/49)、85.71%(42/49),差异无统计学意义(P>0.05);治疗7d后,两组中医证候积分、SOFA评分、APACHEⅡ评分均低于治疗前(P<0.05),但两组间比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗7d后,观察组CVP、SVRI、MAP均高于对照组(P<0.05);治疗7d后,观察组FT3、T3、T4均高于对照组(P<0.05);治疗7d后,观察组血清hs-CRP、IL-6、TNF-α均低于对照组(P<0.05);观察组机械通气时间短于对照组(P<0.05)。两组ICU入住时间、28d死亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 参附注射液治疗能改善SS伴LT3S患者血流动力学,促进甲状腺功能恢复,缓解炎症反应,缩短机械通气时间。 展开更多
关键词 脓毒症休克 低T3综合征 参附注射液 甲状腺功能 预后
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基于电子舌、分子互作与分子对接联用技术的鲜味肽呈味特征评价及分子机制解析
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作者 陈万超 李文 +3 位作者 吴迪 张忠 李佳霖 杨焱 《食品科学技术学报》 北大核心 2025年第3期102-111,共10页
为探究鲜味多肽呈味特征及其与鲜味受体相互作用机制,以5种大球盖菇鲜味肽(EP-6、SG-7、PH-5、SE-6、ES-7)为研究对象,采用感官评定、电子舌分析、表面等离子体共振(SPR)分子互作技术及分子对接联用技术,系统评价了5种鲜味肽的鲜味强度... 为探究鲜味多肽呈味特征及其与鲜味受体相互作用机制,以5种大球盖菇鲜味肽(EP-6、SG-7、PH-5、SE-6、ES-7)为研究对象,采用感官评定、电子舌分析、表面等离子体共振(SPR)分子互作技术及分子对接联用技术,系统评价了5种鲜味肽的鲜味强度并解析其与鲜味受体分子的作用机理。通过感官评分(0~10)与滋味稀释分析发现,EP-6与ES-7鲜味评分最高,分别为6.90±0.88、6.70±0.95,阈值分别为0.178 mmol/L和0.167 mmol/L,低于0.3 mg/mL谷氨酸钠(MSG)的阈值(1.774 mmol/L)。电子舌主成分分析结果显示,前两个主成分累积贡献率达91.8%,EP-6与ES-7鲜味强度接近质量分数为0.1%的MSG的鲜味强度,且与感官评定结果一致。SPR动力学分析表明,ES-7与T1R3-VFD受体结合亲和力最强(KD=1.471×10^(-6) mol/L),结合解离速率呈“快上快下”特征;分子对接结果进一步揭示,EP-6与SG-7的对接能量最低,分别为-436.52、-397.81 kJ/mol,其稳定性依赖于ASN68、GLU45、HIS278等关键残基的氢键与疏水作用。此外,含硫氨基酸Cys等通过巯基作用延长鲜味感知,与感官评定的味感绵长特征相印证。通过电子舌、分子互作与分子对接多技术联用构建鲜味肽综合快速评价体系,可突破传统感官评定主观局限,明确鲜味受体结合域核心结合位点,并揭示含硫氨基酸对鲜味持久性的调控作用。研究旨在为天然鲜味增强剂的理性设计与高值化应用,以及食品风味精准调控技术的开发提供分子层面的理论依据。 展开更多
关键词 鲜味肽 分子互作 表面等离子体共振 分子对接 鲜味受体 T1R3
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骨疏康对MC3T3-E1细胞成骨分化及大鼠磨牙压低牙根吸收作用影响的研究
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作者 万哲 杜军 肖朋 《新疆医科大学学报》 2025年第9期1292-1298,共7页
目的探讨骨疏康对MC3T3-E1细胞分化及大鼠磨牙压低牙根吸收的调控作用及内在机制。方法取6只大鼠分别于早晚灌胃骨疏康(0.26 g/kg),持续7 d,末次灌胃结束2 h内腹主动脉取血制备含药血清。采用细胞计数试剂盒-8(Cell counting kit-8,CCK8... 目的探讨骨疏康对MC3T3-E1细胞分化及大鼠磨牙压低牙根吸收的调控作用及内在机制。方法取6只大鼠分别于早晚灌胃骨疏康(0.26 g/kg),持续7 d,末次灌胃结束2 h内腹主动脉取血制备含药血清。采用细胞计数试剂盒-8(Cell counting kit-8,CCK8)法检测骨疏康含药血清对小鼠颅顶前骨细胞(MC3T3-E1细胞)的增殖活性。将细胞分为对照组、骨疏康含药血清组(10%骨疏康含药血清培养24 h)和骨疏康含药血清+MSAB组(Wnt/β-catenin信号通路抑制剂,10%骨疏康含药血清和5μmol/L MSAB培养24 h),采用碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)染色、茜素红S(Alizarin red S,ARS)染色观察细胞成骨分化能力;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein 2,BMP2)、无翅型MMTV整合位点家族成员3A(Wnt family member 3A,Wnt3a)和β-连环蛋白(β-catenin)的蛋白表达。取12只大鼠建立磨牙压低模型,将建模成功大鼠随机分为模型组和骨疏康组(骨疏康,2.1 g/kg,每天1次,连续4 w),每组6只,另取6只未建模大鼠为正常组;采用Western blot法检测磨牙组织Runx2、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达水平。结果CCK8结果显示,与对照组相比,骨疏康含药血清组的细胞增殖活性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,骨疏康含药血清组ALP活性、ALP和ARS染色强度升高,Runx2、BMP2、Wnt3a和β-catenin的蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与骨疏康含药血清组相比,骨疏康含药血清+MSAB组ALP活性、ALP染色强度降低,Runx2和BMP2的蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。动物实验结果显示,与正常组相比,模型组磨牙组织中Runx2、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,骨疏康组磨牙组织中Runx2、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论骨疏康通过介导Wnt/β-catenin通路促进MC3T3-E1细胞及大鼠磨牙组织的成骨分化。 展开更多
关键词 骨疏康 成骨分化 MC3T3-E1细胞 信号通路
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红景天苷促进MC3T3-E1细胞成骨分化能力的体外实验 被引量：4
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作者 刘朝辉 韩晓谦 +2 位作者 段昕 郭鹏达 张云涛 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第2期231-237,共7页
背景:骨缺损可直接影响牙齿种植的成功率及种植体的长期稳定性。研究显示红景天苷可促进成骨细胞增殖、分化,但对于其成骨分化相关通路具体研究不多。目的:体外细胞实验研究红景天苷对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响,并探究其对相关基因... 背景:骨缺损可直接影响牙齿种植的成功率及种植体的长期稳定性。研究显示红景天苷可促进成骨细胞增殖、分化,但对于其成骨分化相关通路具体研究不多。目的:体外细胞实验研究红景天苷对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响,并探究其对相关基因和蛋白表达的影响。方法:采用CCK-8实验和碱性磷酸酶实验筛选红景天苷(0.5,1,5,10,50μmol/L)促进MC3T3-E1细胞增殖和分化的最佳浓度。实验分为4组:对照组、红景天苷组、红景天苷+LY294002组、LY294002组,分别用成骨诱导液、含10μmol/L红景天苷、10μmol/L红景天苷+10μmol/L LY294002、10μmol/L LY294002的成骨诱导液进行培养,观察红景天苷及PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002对成骨相关基因和蛋白表达的影响。结果与结论:①CCK-8实验和碱性磷酸酶实验显示:红景天苷促进MC3T3-E1细胞增殖的作用在10μmol/L时最显著;②与对照组相比,红景天苷可以促进矿化、促进细胞黏附、减少细胞死亡,提高Runx-2、骨钙素、骨桥蛋白的mRNA表达(P<0.01),提高Runx-2和p-Akt蛋白表达(P<0.01);而添加PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002则可逆转以上结果;③结果表明,红景天苷能促进MC3T3-E1细胞矿化,并能促进成骨相关基因、蛋白的表达,这可能与PI3K/Akt信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 红景天苷 MC3T3-E1细胞 细胞分化 成骨 矿化 LY294002 PI3K/AKT信号通路
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一种新人参多糖WGP60的结构表征和抗紫外活性研究
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作者 刘玉峰 王昱壁 +3 位作者 张雨涵 范海涛 陈恩奇 宋冉 《辽宁大学学报(自然科学版)》 2025年第1期32-40,共9页
从人参中分离得到一种新的活性多糖WGP60,并对其比旋光度、分子量分布、单糖组成和寡糖片段等结构特征进行分析,以成纤维细胞NIH3T3对人参多糖WGP60的药理活性进行研究.人参多糖WGP60由葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,物质的量比为77.1∶... 从人参中分离得到一种新的活性多糖WGP60,并对其比旋光度、分子量分布、单糖组成和寡糖片段等结构特征进行分析,以成纤维细胞NIH3T3对人参多糖WGP60的药理活性进行研究.人参多糖WGP60由葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,物质的量比为77.1∶16.8∶6.1,比旋光度为+60.354°,重均分子量约为79108 g/mol.多糖结构中存在Gal-Gal、Ara-Gal-Ara、Gal-Gal-Glc-Ara等结构片段.药理实验结果表明,人参多糖WGP60在1.6×10^(-2)g/L的质量浓度下可显著促进成纤维细胞NIH3T3的增殖;在2.0×10^(-3)g/L的质量浓度下,显著提高紫外线(UVA)损伤的成纤维细胞NIH3T3存活率.研究表明,人参多糖WGP60是一种新的人参多糖成分,对成纤维细胞NIH3T3具有良好的促进增殖和修复UVA损伤作用,为人参临床应用及进一步研究开发提供科学依据. 展开更多
关键词 人参多糖 化学特征 细胞增殖 紫外线(UVA)损伤保护 成纤维细胞NIH3T3
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姜黄素通过上调circRNA_SLC8A1表达促进小鼠的骨折愈合
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作者 马运锋 韩小飞 《沈阳药科大学学报》 2025年第10期978-988,共11页
目的 研究circRNA_SLC8A1在姜黄素促进骨折愈合中发挥的作用,以及其潜在的作用机制。方法 采用RT-qPCR检测骨折患者和健康志愿者外周血中circRNA_SLC8A1表达水平,以及姜黄素干预的成骨细胞MC3T3-E1中circRNA_SLC8A1表达水平;采用star B... 目的 研究circRNA_SLC8A1在姜黄素促进骨折愈合中发挥的作用,以及其潜在的作用机制。方法 采用RT-qPCR检测骨折患者和健康志愿者外周血中circRNA_SLC8A1表达水平,以及姜黄素干预的成骨细胞MC3T3-E1中circRNA_SLC8A1表达水平;采用star Base预测了miR-20b-5p分别与circRNA_SLC8A1和死骨片1(Sequestosome 1,SQSTM1)结合,并通过荧光素酶报告基因分析进行验证。用0、5、10、20、40、80μmol·L^(-1)的姜黄素处理MC3T3-E1细胞72 h,用携带circRNA_SLC8A1的腺病毒载体(sh-circRNA_SLC8A1)、miR-20b-5p mimic、miR-20b-5p inhibitor、SQSTM1的过表达载体(OE-SQSTM1)、SQSTM1的小干扰RNA(si-SQSTM1)和所对应的空白对照转染MC3T3-E1细胞,分别采用CCK-8、Transw ell分析和流式细胞术检测细胞增殖、迁移和凋亡;采用ELISA检测caspase-3活性;采用Western blotting检测骨源性碱性磷酸酶(bone-specific alkaline phosphatase,BALP)和骨钙素(osteocalcin)的蛋白表达水平。除此之外,还构建了小鼠股骨骨折模型,检测建模后21 d小鼠股骨中circRNA_SLC8A1的表达水平变化;Micro-CT分析观察小鼠股骨组织中骨体积(bone volume,BV)、骨小梁体积(trabecular bone volume,TV)和骨密度(bone mineral density,BMD);H&E染色股骨组织切片,显微镜下观察记录骨面积和愈伤组织骨痂面积。结果 circRNA_SLC8A1在骨折患者的外周血中的表达水平显著降低,在骨折小鼠的股骨组织中的表达水平在第7天时达到最低值,随后开始升高。此外,40μmol·L^(-1)的姜黄素处理MC3T3-E1细胞24 h无毒性,48 h后细胞活性降低,我们还发现姜黄素以剂量依赖诱导circRNA_SLC8A1表达水平升高。沉默circRNA_SLC8A1抑制MC3T3-E1细胞的增殖、迁移,诱导细胞凋亡,而姜黄素的处理逆转了这一影响。随后,我们通过验证发现miR-20b-5p能够分别与circRNA_SLC8A1和SQSTM1结合,且circRNA_SLC8A1通过充当miR-20b-5p的海绵上调SQSTM1的表达水平。miR-20b-5p inhibitor或OE-SQSTM1转染M C3T3-E1细胞,促进细胞增殖、迁移,抑制细胞凋亡和caspase-3活化。体内实验发现,骨折小鼠的BV/TV、BMD和骨面积显著减小,愈伤组织骨痂面积增大,股骨组织中circRNA_SLC8A1、SQSTM1、BALP和osteocalcin的表达水平显著降低,miR-20b-5p的表达水平升高;而姜黄素处理增大了小鼠的BV/TV、BMD和骨面积,减小了愈伤组织骨痂面积,促进了股骨组织中circRNA_SLC8A1、SQSTM1、BALP和osteocalcin的表达水平,抑制了miR-20b-5p的表达,高剂量姜黄素效果更佳;除此之外,注射携带circRNA_SLC8A1过表达载体的腺病毒(Lv-circRNA_SLC8A1)同样促进了小鼠的骨折愈合。结论 姜黄素抑制骨折小鼠股骨组织中circRNA_SLC8A1的表达水平降低,经miR-20b-5p/SQSTM1轴加速骨折愈合。 展开更多
关键词 姜黄素 骨折愈合 circRNA_SLC8A1 MC3T3-E1细胞 miR-20b-5p/SQSTM1轴
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六(甲氧基甲基)三聚氰胺/多元醇/二甲基丙烯酸酯的混合体系的聚合 被引量：6
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作者 洪啸吟 余荣阵 +1 位作者 张雷 冯汉保 《高分子学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1993年第3期276-282,共7页
六(甲氧基甲基)三聚氰胺(HMMM)-二缩三乙二醇(T_3EG)和二缩三乙二醇二甲基丙烯酸酯(T_3EGMA)的混合体系加入潜酸催化剂后,在较高温度下可同时进行缩聚和自由基聚合并表现出协同效应.在这一混合聚合体系中HM-MM不仅是交联剂,而且是体系... 六(甲氧基甲基)三聚氰胺(HMMM)-二缩三乙二醇(T_3EG)和二缩三乙二醇二甲基丙烯酸酯(T_3EGMA)的混合体系加入潜酸催化剂后,在较高温度下可同时进行缩聚和自由基聚合并表现出协同效应.在这一混合聚合体系中HM-MM不仅是交联剂,而且是体系中活泼亚甲基氧化为过氧化氢物的催化剂,由潜酸催化剂分解出的酸是缩聚的催化剂,也是过氧化氢物分解为自由基的催化剂,生成的自由基可引发T_3EGMA聚合.有关凝胶时间实验,吸氧实验和活性氧测定的结果支持上述论断. 展开更多
关键词 混合聚合 HMMM t3eg t3egMA
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