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干扰转录因子StMYB90-like对彩色马铃薯花青素合成的影响 被引量：1
1
作者 潘阳 王立春 +5 位作者 付学鹏 田国奎 王海艳 李凤云 庞泽 李明雪 《中国瓜菜》 北大核心 2025年第10期56-60,共5页
为明确转录因子StMYB90-like在花青素合成代谢中的调控机制,以彩色马铃薯黑金刚为研究对象,基于前期生物信息学筛选的转录因子StMYB90-like,通过干扰载体构建、遗传转化、荧光定量分析、花青素含量的测定,对转基因马铃薯进行检测和分析... 为明确转录因子StMYB90-like在花青素合成代谢中的调控机制,以彩色马铃薯黑金刚为研究对象,基于前期生物信息学筛选的转录因子StMYB90-like,通过干扰载体构建、遗传转化、荧光定量分析、花青素含量的测定,对转基因马铃薯进行检测和分析。结果表明,干扰彩色马铃薯黑金刚中转录因子StMYB90-like的表达后,其自身表达量显著降低,且马铃薯叶片中的花青素含量极显著降低了47.94%,马铃薯块茎颜色变浅,马铃薯块茎中的花青素含量显著降低了9.79%。说明转录因子StMYB90-like能够正向调控彩色马铃薯中花青素的合成,推测其可能通过上调花青素生物合成相关结构基因的方式调控马铃薯花青素的合成和积累。 展开更多
关键词 彩色马铃薯 花青素 遗传转化 转录因子 stmyb90-like
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马铃薯Stpatatin 05基因转录调控因子筛选及互作验证 被引量：1
2
作者 俞婷 黄丹丹 +3 位作者 朱炎辉 杨梅宏 艾菊 高冬丽 《生物技术通报》 北大核心 2025年第3期137-145,共9页
【目的】筛选对patatin启动子有调控作用的转录因子,为patatin蛋白积累提供新的基因资源。【方法】选取Stpatatin 05作为候选基因,克隆其启动子序列,构建pAbAi-Stpatatin 05pro诱饵载体,将其转化至酵母细胞中,获得诱饵酵母菌株。利用马... 【目的】筛选对patatin启动子有调控作用的转录因子,为patatin蛋白积累提供新的基因资源。【方法】选取Stpatatin 05作为候选基因,克隆其启动子序列,构建pAbAi-Stpatatin 05pro诱饵载体,将其转化至酵母细胞中,获得诱饵酵母菌株。利用马铃薯幼嫩块茎组织的c DNA文库进行酵母单杂交筛库实验,对候选蛋白进行互作验证和互作位点分析,并利用双荧光素酶报告实验分析其对下游靶标基因表达的影响。【结果】经酵母单杂交筛选获得一个候选蛋白StMYB86-like。StMYB86-like属于MYB类转录因子家族,该蛋白编码320个氨基酸,定位在细胞核。克隆StMYB86-like基因全长序列,进行酵母单杂交验证,结果显示在30 mmol/L 3-氨基-1,2,4-三氮唑的条件下,对照组酵母不能正常生长,而实验组酵母能正常生长,表明转录因子与基因启动子存在互作。酵母单杂交结果表明StMYB86-like转录因子能够结合启动子中的CAACTG结构域,双荧光素酶报告实验证明StMYB86-like负调控下游靶标基因的表达。【结论】StMYB86-like与Stpatatin 05启动子互作,可能对马铃薯块茎中patatin蛋白的积累发挥作用。 展开更多
关键词 马铃薯 patatin蛋白 酵母单杂交 Stpatatin 05 stmyb86-like 转录调控
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番茄抗叶霉病相关基因片段克隆及VIGS重组载体的构建与鉴定
3
作者 何姗姗 赵婷婷 +2 位作者 姜景彬 李景富 许向阳 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第1期29-32,共4页
以含有Cf-19基因的番茄抗叶霉病品种CGN18423为材料,运用RT-PCR技术克隆番茄抗叶霉病相关基因细胞色素P450 90A1-like(CYP 90A1-like)部分序列,片段长295 bp;以番茄八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)基因作为阳性对照,片段长... 以含有Cf-19基因的番茄抗叶霉病品种CGN18423为材料,运用RT-PCR技术克隆番茄抗叶霉病相关基因细胞色素P450 90A1-like(CYP 90A1-like)部分序列,片段长295 bp;以番茄八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,PDS)基因作为阳性对照,片段长349 bp。测序结果表明,序列与番茄同源性达100%;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,在番茄感染叶霉病后,随时间延长CYP 90A1-like基因相对表达量呈上调趋势,说明该基因在番茄抗叶霉病过程中有重要作用;以烟草脆裂病毒(TRV2)为载体,成功构建CYP 90A1-like、PDS基因的病毒诱导基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)重组载体。构建的p TRV2-CYP 90A1-like、p TRV2-PDS重组载体将为下一步利用VIGS技术在番茄上研究CYP 90A1-like基因与番茄抗叶霉病的关系奠定试验基础。 展开更多
关键词 番茄 细胞色素P450 90A1-like基因 八氢番茄红素脱氢酶(PDS) 病毒诱导的基因沉默(VIGS)
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