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凡纳滨对虾WSSV、SHIV和BP病毒PCR同步检测方法的优化及初步应用
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作者 甄茜 全健槟 +1 位作者 刘姝妤 张颖超 《水产学杂志》 2025年第5期21-28,共8页
本研究针对养殖凡纳滨对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)、虾血细胞虹彩病毒(shrimp hemocyte iridescent virus,SHIV)、对虾杆状病毒(baculovirus penaei,BP)3种常见的DNA病毒,建立聚合酶链式反应(polymerase chain ... 本研究针对养殖凡纳滨对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)、虾血细胞虹彩病毒(shrimp hemocyte iridescent virus,SHIV)、对虾杆状病毒(baculovirus penaei,BP)3种常见的DNA病毒,建立聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)同步检测法,为高效、精准检测养殖对虾病害提供理论基础和技术支撑。根据NCBI公布的WSSV、SHIV和BP基因序列,设计特异性引物并制备质粒,建立同步检测3种病毒的PCR方法,并应用梯度稀释质粒法进行灵敏度测试。结果表明:新建立的检测方法灵敏度高、检测时间短及检测结果准确性高,该方法对WSSV和SHIV的检测下限均为1 fg,BP检测下限为0.1 fg。利用本方法分别于2023年10月9日和2024年5月11日对渤海地区102份凡纳滨对虾样品中的WSSV、SHIV、BP进行检测,结果发现2023年10月9日成虾WSSV、SHIV和BP阳性率分别为0、80.4%和98.0%,2024年5月11日虾苗WSSV、SHIV和BP的阳性率均为0,与常规单一PCR检测结果相比,符合率达到100%。综上所述,本检测技术可有效用于对虾养殖过程中WSSV、SHIV和BP 3种病原的快速检测和诊断,为养殖生产中实时监测病害提供优质技术服务。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 白斑综合征病毒 虾血细胞虹彩病毒 对虾杆状病毒 PCR同步检测
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SHIV-1157i及衍生病毒的研究进展
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作者 金光 丛喆 +1 位作者 王卫 魏强 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第5期66-69,共4页
C亚型是世界上流行的HIV-1主要亚型,带有HIV-1 C亚型env区的SHIV和相应的非人灵长类模型是研究人类艾滋病的有效工具。SHIV-1157i及其衍生病毒能够成功地通过黏膜途径感染恒河猴和猪尾猴,并诱发艾滋病类似症状,而且恒河猴缓慢的发病进... C亚型是世界上流行的HIV-1主要亚型,带有HIV-1 C亚型env区的SHIV和相应的非人灵长类模型是研究人类艾滋病的有效工具。SHIV-1157i及其衍生病毒能够成功地通过黏膜途径感染恒河猴和猪尾猴,并诱发艾滋病类似症状,而且恒河猴缓慢的发病进程与人类感染HIV-1相似。因此,掌握SHIV-1157i及其衍生病毒感染恒河猴的发病规律并探索其机制,将对研究人类HIV-1感染和发病机制,以及评价HIV-1 C亚型env区为靶点的艾滋病候选疫苗具有重要意义。 展开更多
关键词 shiv-1157i shiv-1157ipd3N4 恒河猴 猪尾猴
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人/猴免疫缺陷病毒SHIV衣壳蛋白p27的表达纯化及活性鉴定 被引量:2
3
作者 华秋东 姜成刚 +3 位作者 王海 相文华 周建华 陈维多 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第11期51-55,共5页
利用PCR技术从质粒SHIV89.6P中扩增p27gag基因,并克隆入pMD18-T载体,测序鉴定;将p27gag基因插入表达载体pET32aT7启动子下游,构成重组质粒pET32a-p27并使其在大肠杆菌BL21中高效表达,最后利用固定化金属离子(Ni2+)配体亲和层析技术从表... 利用PCR技术从质粒SHIV89.6P中扩增p27gag基因,并克隆入pMD18-T载体,测序鉴定;将p27gag基因插入表达载体pET32aT7启动子下游,构成重组质粒pET32a-p27并使其在大肠杆菌BL21中高效表达,最后利用固定化金属离子(Ni2+)配体亲和层析技术从表达蛋白中纯化目的蛋白,Western Blot检测活性。结果显示,融合蛋白p27经SDS-PAGE电泳观察可见45ku的明显条带,与预期分子质量大小一致且多以可溶形式表达,目的蛋白占菌体总蛋白的36.8%;经镍柱纯化,获得目的蛋白p27纯度可达98%;经Western Blot试验检测,证明此融合蛋白p27能与SHIV阳性血清发生特异性反应,具有较好的抗原活性。该研究为进一步开发早期诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定了初步基础。 展开更多
关键词 shiv P27 原核表达 大肠杆菌
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全基因组SHIV-KB9克隆的构建及其在人、猴外周血单核细胞中的复制(英文) 被引量:5
4
作者 吴颖运 洪坤学 +3 位作者 陈佩 陈启明 耿运琪 邵一鸣 《中国病毒学》 CSCD 2004年第2期114-119,共6页
将分别携带SHIV-KB9 (SIV/HIV-1 KB9) 基因组的3′端和5′端的两个半长克隆,体外连接成SHIV-KB9全基因组克隆。含有全长基因的质粒培养时易发生同源重组和缺失,采用JM109作为宿主菌以及30℃、低转速的培养条件,可保持质粒的稳定性。通过... 将分别携带SHIV-KB9 (SIV/HIV-1 KB9) 基因组的3′端和5′端的两个半长克隆,体外连接成SHIV-KB9全基因组克隆。含有全长基因的质粒培养时易发生同源重组和缺失,采用JM109作为宿主菌以及30℃、低转速的培养条件,可保持质粒的稳定性。通过PCR , RT-PCR 和猴免疫缺陷病毒(SIV) gag p27 核心抗原滴度检测表明:感染性克隆SHIV-KB9可有效在人、恒河猴及食蟹猴的外周血单核细胞中复制。 展开更多
关键词 shiv-KB9 克隆 基因组 质粒 恒河猴 食蟹猴 外周血单核细胞 复制
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B亚型SHIV_(SF162p3)中国恒河猴小剂量多次阴道黏膜感染 被引量:3
5
作者 丛喆 刘浩 +7 位作者 朵建英 王卫 蒋虹 高虹 杨志伟 Sylvain Fleury 魏强 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第2期44-48,共5页
目的模拟HIV性传播感染特点进行中国恒河猴阴道黏膜小剂量多次感染研究,为我国艾滋病疫苗有效性评价提供新的模型构建思路。方法选用20-30TCID50剂量的SHIVSF162p3病毒阴道黏膜途径感染六只成年雌性中国恒河猴,共感染13次,每次攻毒间隔4... 目的模拟HIV性传播感染特点进行中国恒河猴阴道黏膜小剂量多次感染研究,为我国艾滋病疫苗有效性评价提供新的模型构建思路。方法选用20-30TCID50剂量的SHIVSF162p3病毒阴道黏膜途径感染六只成年雌性中国恒河猴,共感染13次,每次攻毒间隔4~7 d。采取测定血浆病毒载量和外周血CD4+∶CD8+。结果 6只中国恒河猴经13次病毒攻击后,经检测均建立系统性感染,血浆病毒载量呈阳性;CD4+∶CD8+均有下降。结论成功建立了中国恒河猴阴道黏膜小剂量多次感染模型,为艾滋病研究提供了新的更接近于自然感染状态的模型建立模式。 展开更多
关键词 猴-人免疫缺陷病毒(shiv) 模型 动物 黏膜感染
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SHIV感染恒河猴十二指肠黏膜活检组织病理学观察 被引量:3
6
作者 刘颖 朱华 +3 位作者 代小伟 丛喆 蒋虹 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 2009年第3期28-31,I0003,共5页
目的使用消化内窥镜对SHIV感染恒河猴十二指肠黏膜进行观察。方法SHIV感染恒河猴,消化内镜检查并进行活检取材,对活检标本进行固定,石蜡包埋,常规HE染色镜检。结果内镜大体观察胃黏膜和十二指肠黏膜基本上完整平滑,1例胃黏膜有弥漫性白... 目的使用消化内窥镜对SHIV感染恒河猴十二指肠黏膜进行观察。方法SHIV感染恒河猴,消化内镜检查并进行活检取材,对活检标本进行固定,石蜡包埋,常规HE染色镜检。结果内镜大体观察胃黏膜和十二指肠黏膜基本上完整平滑,1例胃黏膜有弥漫性白斑,3例有小面积的出血;光镜下十二指肠黏膜完整未见脱落,固有层中有散在分布的慢性炎细胞,活检取材最深可达黏膜下层,未见其他特异性病理改变。结论不同毒株,不同感染时间的SHIV感染恒河猴和对照恒河猴的十二指肠黏膜活检组织HE染色组织结构清晰,呈慢性炎症改变,病理形态上没有明显的差异。 展开更多
关键词 人/猿嵌合免疫缺陷病毒(shiv) 消化内窥镜 黏膜活检
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SHIV减毒株在AIDS疫苗研究中的应用 被引量:2
7
作者 吴颖运 洪坤学 +1 位作者 耿运琪 邵一鸣 《中国病毒学》 CAS CSCD 2004年第2期187-191,共5页
关键词 shiv 减毒株 AIDS 疫苗 获得性免疫缺陷综合症 人免疫缺陷病毒 HIV-1
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SHIV1157ipd3N4中国恒河猴细胞适应株静脉感染中国恒河猴有效浓度的确定 被引量:2
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作者 丛喆 蒋虹 +8 位作者 金光 陈霆 王卫 陶真 姚南 熊竞 吴芳新 陈志伟 魏强 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第4期12-15,共4页
目的确定SHIV1157ipd3N4静脉途径感染中国恒河猴的有效病毒浓度,明确SHIV1157ipd3N4感染实验猴体内病毒复制和免疫损伤情况。方法 10只正常中国恒河猴分成6组,分别用10倍系列稀释的病毒液1 mL静脉感染,测定血浆病毒载量,CD4+/CD8+,CD4+... 目的确定SHIV1157ipd3N4静脉途径感染中国恒河猴的有效病毒浓度,明确SHIV1157ipd3N4感染实验猴体内病毒复制和免疫损伤情况。方法 10只正常中国恒河猴分成6组,分别用10倍系列稀释的病毒液1 mL静脉感染,测定血浆病毒载量,CD4+/CD8+,CD4+T淋巴细胞绝对数,分析感染后恒河猴体内病毒复制和免疫损伤情况。结果 5TCID50/mL以上浓度的SHIV1157ipd3N4能通过静脉途径感染中国恒河猴。结论该实验的成功进行为SHIV/中国恒河猴疾病及评价模型的建立奠定了良好的基础,为今后使用此模型评价抗病毒药物或疫苗提供了条件。 展开更多
关键词 shiv1157ipd3N4 中国恒河猴 模型 动物 AIDS
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SHIV-B'whu感染中国猕猴的组织病理学观察 被引量:1
9
作者 唐志佼 代明 +6 位作者 包容 王勇 张晶 鲜巧阳 饶艳 李任翔 孙理华 《实验动物与比较医学》 CAS 2008年第2期99-101,共3页
目的观察SHIV-B'whu感染中国猕猴的组织病理学变化。方法SHIV-B'whu感染中国猕猴,4次传代(P1 ̄P4),定时测量动物体温变化,对各代感染的猴在第14天处死,进行病理学解剖观察,并且对全身主要脏器以及多处淋巴结组织取材做病理分析... 目的观察SHIV-B'whu感染中国猕猴的组织病理学变化。方法SHIV-B'whu感染中国猕猴,4次传代(P1 ̄P4),定时测量动物体温变化,对各代感染的猴在第14天处死,进行病理学解剖观察,并且对全身主要脏器以及多处淋巴结组织取材做病理分析。结果中国猕猴在感染急性期体温有短暂升高,经病理分析,4代感染猴均有典型的间质性肺炎特征,肝组织有点状或灶性坏死,淋巴窦扩张,淋巴滤泡萎缩,淋巴细胞减少,淋巴结出现噬红细胞现象,组织巨噬细胞免疫组化染色阳性率从P1到P4逐步增加,从3.5%到22%。结论SHIV-B'whu能成功感染中国猕猴,引起与HIV感染人后所相似的免疫病理学变化。 展开更多
关键词 shiv 感染 免疫 病理学变化
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IL-21对恒河猴SHIV特异性CD8~+T细胞毒性效应的影响 被引量:3
10
作者 赵长城 高锡强 +6 位作者 薛婧 丛喆 张伟伦 苏爱华 陈霆 魏强 秦川 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第5期29-34,共6页
目的探讨白细胞介素21(interleukin 21,IL-21)对SHIV特异性CD8+T细胞毒性效应的影响。方法定时采集16只SHIV感染恒河猴的外周血,应用实时荧光定量RT-PCR测定病毒载量,流式细胞仪测定CD8+T细胞绝对数,并且体外检测经IL-21刺激SHIV特异性C... 目的探讨白细胞介素21(interleukin 21,IL-21)对SHIV特异性CD8+T细胞毒性效应的影响。方法定时采集16只SHIV感染恒河猴的外周血,应用实时荧光定量RT-PCR测定病毒载量,流式细胞仪测定CD8+T细胞绝对数,并且体外检测经IL-21刺激SHIV特异性CD8+T细胞后其IL-21R、CD107a及胞内穿孔素(perforin)的表达水平。结果体内实验结果表明外周血病毒载量和CD8+T细胞绝对数之间呈一定程度的负相关。体外实验结果表明SHIV特异性CD8+T细胞经IL-21刺激后其细胞表面表达的IL-21R显著上调,而且perforin+CD8+T细胞和CD107a+CD8+T细胞的百分比上升,同未经刺激的对照组相比具有统计学差异。结论 IL-21能够促进SHIV特异性CD8+T细胞的毒性效应。 展开更多
关键词 白细胞介素21 CD8+T淋巴细胞 细胞毒性效应 恒河猴 shiv感染
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RT-SHIV感染中国恒河猴及体内传代 被引量:1
11
作者 姚南 王卫 +5 位作者 丛喆 陈霆 金光 陶真 陈志伟 魏强 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第4期16-20,共5页
目的了解RT-SHIV感染中国恒河猴的感染特点,研究RT-SHIV在中国恒河猴中传代特点;建立RT-SHIV中国恒河猴动物模型,为评价HIV-1药物有效性提供动物平台。方法选择4只健康恒河猴,其中两只动物经上肢静脉感染RT-SHIV病毒,感染急性期采取外... 目的了解RT-SHIV感染中国恒河猴的感染特点,研究RT-SHIV在中国恒河猴中传代特点;建立RT-SHIV中国恒河猴动物模型,为评价HIV-1药物有效性提供动物平台。方法选择4只健康恒河猴,其中两只动物经上肢静脉感染RT-SHIV病毒,感染急性期采取外周血分离CD8-PBMC,扩增病毒,将新制备的病毒静脉感染另外两只中国恒河猴,通过监测血浆病毒载量,CD4+/CD8+比值,CD4+T淋巴细胞和B淋巴细胞的绝对数,了解实验猴的感染状态,同时分析病毒RT基因变异情况。结果 4只动物均获得系统性感染,且传代动物急性期表现更为强烈,RT基因在感染和传代的过程中共观察到3个氨基酸的改变。结论本研究为RT-SHIV中国恒河猴模型的建立提供了基础信息。 展开更多
关键词 RT-shiv 传代 RT基因突变
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感染性嵌合病毒SHIV cDNA的构建及活性筛选
12
作者 吴颖运 乔文涛 +2 位作者 陈启民 耿运琪 邵一鸣 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期84-89,共6页
以感染性克隆SHIV-KB9cDNA为主要骨架,将其env基因区域的gp120和部分gp41(从N末端的50到650个氨基酸)的1.7kb片段,用来源于4个不同中国HIV-1B′/C毒株env的相应区域进行替换,构建了50个全基因SHIVcDNA克隆,大规模体外活性筛选实验,获得... 以感染性克隆SHIV-KB9cDNA为主要骨架,将其env基因区域的gp120和部分gp41(从N末端的50到650个氨基酸)的1.7kb片段,用来源于4个不同中国HIV-1B′/C毒株env的相应区域进行替换,构建了50个全基因SHIVcDNA克隆,大规模体外活性筛选实验,获得了能够在人的PBMC中进行生产性复制的SHIV-XJ02170cDNA克隆. 展开更多
关键词 shiv-XJ02170 CDNA克隆 构建 活性筛选 复制
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携带GFP发光基因人猴嵌合免疫缺陷病毒SHIV的构建及活性检测
13
作者 李悦 莎日娜 +3 位作者 许璇 乔文涛 邵一鸣 杨贵波 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第2期7-11,F0002,I0001,共7页
目的获得正常感染宿主细胞并稳定表达绿色荧光的SHIV毒株,为后期建立发光SHIV/恒河猴感染模型奠定基础。方法通过分子克隆手段,将绿色荧光蛋白基因克隆到携带HIV-1包膜蛋白的SHIV病毒全基因组中,并在细胞水平检测各毒株的感染活性及荧... 目的获得正常感染宿主细胞并稳定表达绿色荧光的SHIV毒株,为后期建立发光SHIV/恒河猴感染模型奠定基础。方法通过分子克隆手段,将绿色荧光蛋白基因克隆到携带HIV-1包膜蛋白的SHIV病毒全基因组中,并在细胞水平检测各毒株的感染活性及荧光蛋白表达能力。结果得到一株可表达绿色荧光蛋白的病毒株SHIV-KB9nefGFP,并具有感染TZM-bl细胞系及猴PBMC的能力。结论该毒株在宿主细胞恒河猴PBMC中具有一定复制能力,希望通过后续的猴体内传代实验获得毒力更强的发光病毒。 展开更多
关键词 HIV-1 shiv 模型 动物 GFP荧光蛋白 感染活性
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SHIV-KB9病毒中国恒河猴细胞适应株的制备
14
作者 丛喆 陶真 +5 位作者 王卫 陈霆 金光 姚南 苏爱华 魏强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第3期23-27,共5页
试验旨在研究体外制备SHIV-KB9病毒中国恒河猴细胞适应株,在细胞水平和中国恒河猴体内评价其生物学特性。试验将SHIV-KB9半长质粒连接后转染CEMx174细胞,转染上清与正常恒河猴PBMCs共培养。定期测定培养液中的P27抗原水平。当病毒复制... 试验旨在研究体外制备SHIV-KB9病毒中国恒河猴细胞适应株,在细胞水平和中国恒河猴体内评价其生物学特性。试验将SHIV-KB9半长质粒连接后转染CEMx174细胞,转染上清与正常恒河猴PBMCs共培养。定期测定培养液中的P27抗原水平。当病毒复制达高峰期时收集培养上清,分装并冻存,测定病毒RNA载量和TCID50。静脉感染中国恒河猴,研究该批次SHIV-KB9在体内的病毒学、免疫学指标变化及变异情况,分析其基本的生物学特性。结果表明,本研究共制备了95mLSHIV-KB9病毒原液,病毒载量为2.678×105拷贝/mL,TZM-bl细胞测定病毒的TCID50为3.16×103/mL,gp120序列分析表明病毒未发生变异。10倍稀释的3个不同浓度的SHIV-KB9均静脉成功感染中国恒河猴,引起外周血CD4+/CD8+大幅下降。因此,此次制备的SHIV-KB9细胞适应株生物学特性稳定,适合作为毒种库建立SHIV-KB9/中国恒河猴模型。 展开更多
关键词 shiv-KB9 中国恒河猴 外周血单核淋巴细胞 半数感染量
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SHIV1157ipd3N4小量多次阴道粘膜感染中国猕猴的初步研究
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作者 丛喆 蒋虹 +11 位作者 金光 王卫 高虹 姚南 陶真 陈霆 杨志伟 Sylvain.Fleury Anick Chalifour Ruth. M. Ruprecht 魏强 秦川 《实验动物与比较医学》 CAS 2011年第1期38-42,共5页
目的建立R5-SHIV1157ipd3N4病毒中国猕猴阴道粘膜小剂量多次感染模型,为我国艾滋病疫苗有效性评价提供新的模型构建、应用策略。方法选用10—20TCID50剂量的SHIV1157ipd3N4病毒阴道黏膜途径感染6只雌性中国猕猴,共感染11次,每次攻毒... 目的建立R5-SHIV1157ipd3N4病毒中国猕猴阴道粘膜小剂量多次感染模型,为我国艾滋病疫苗有效性评价提供新的模型构建、应用策略。方法选用10—20TCID50剂量的SHIV1157ipd3N4病毒阴道黏膜途径感染6只雌性中国猕猴,共感染11次,每次攻毒间隔4~7d。定期测定血浆病毒载量和外周血CD4+:CD8+。结果6只中国猕猴经11次病毒攻击后,均建立系统性感染,血浆病毒载量呈阳性;CD4+:CD8+均有下降。结论初步建立了R5-SHIV1157ipd3N4中国猕猴阴道黏膜小剂量多次感染模型,为艾滋病研究提供了更接近于自然感染状态的模型建立模式。 展开更多
关键词 shiv1157ipd3N4 黏膜感染 中国猕猴
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全血及血浆病毒分离方法在SHIV-KB9感染猴模型中的应用
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作者 丛喆 王卫 +3 位作者 许琰 蒋虹 杨贵波 魏强 《医学动物防制》 2008年第6期401-403,共3页
目的使用全血和血浆病毒分离方法分离SHIV-KB9感染标本,验证方法的可行性和敏感性。方法将SHIV-KB9感染恒河猴的血浆和全血标本与CEMx174细胞共培养,观察细胞病变,测定感染猴血浆病毒载量。结果全血病毒分离的滴度与血浆病毒载量测定结... 目的使用全血和血浆病毒分离方法分离SHIV-KB9感染标本,验证方法的可行性和敏感性。方法将SHIV-KB9感染恒河猴的血浆和全血标本与CEMx174细胞共培养,观察细胞病变,测定感染猴血浆病毒载量。结果全血病毒分离的滴度与血浆病毒载量测定结果趋势相符,高峰相同,但血浆病毒分离阳性分离率较低。结论全血病毒分离敏感性高于血浆病毒分离,可用于SHIV-KB9感染猴模型。 展开更多
关键词 shiv 病毒分离 病毒载量
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RT-SHIV中国恒河猴适应株细胞水平生物学特性分析
17
作者 姚南 王卫 +3 位作者 丛喆 金光 陶真 魏强 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第2期31-35,79,共6页
目的体外增值、制备动物感染来源的RT-SHIV病毒中国恒河猴适应株,比较PBMCs和CEMx174两种细胞制备出病毒的差异,同时用TZM-bl、CEMx174、PBMC三种细胞滴定测定病毒TCID50。方法用RT-SHIV病毒静脉感染中国恒河猴,定期采血测定血浆病毒载... 目的体外增值、制备动物感染来源的RT-SHIV病毒中国恒河猴适应株,比较PBMCs和CEMx174两种细胞制备出病毒的差异,同时用TZM-bl、CEMx174、PBMC三种细胞滴定测定病毒TCID50。方法用RT-SHIV病毒静脉感染中国恒河猴,定期采血测定血浆病毒载量,当病毒载量达高峰时采血分离外周血单核淋巴细胞(PBMCs),与正常恒河猴PBMCs或CEMx174细胞共培养,定期测定培养液中的P24抗原水平,当病毒复制达高峰期时收集培养上清,分装并冻存;测定病毒RNA载量、P24抗原浓度,滴定病毒的TCID50。结果本研究共制备了78 mL PBMCs来源的RT-SHIV病毒和85 mL CEMx174细胞来源的RT-SHIV病毒。RT基因序列和原始序列的相似度为99%,仅在第254和265位的氨基酸发现突变。RT-SHIV(PBMC)和RT-SHIV(CEMx174)病毒载量分别为1.641×108 copies/mL和8.375×108 copies/mL,P24抗原水平分别为20.745 ng/mL和4.28 ng/mL,TZM-bl、CEMx174、PBMC细胞测定病毒的TCID50分别为3.16×105 TCID50/mL和1×104 TCID50/mL,5×102 TCID50/mL和5×105 TCID50/mL,5×102 TCID50/mL和5×103 TCID50/mL。结论 PBMCs细胞来源制备的病毒较CEMx174制备的病毒具有更高的感染性。 展开更多
关键词 RT-shiv TCID50 细胞培养
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SHIV1157ipd3N4细胞适应株的制备及其生物特性
18
作者 丛喆 姚南 +4 位作者 刘浩 金光 陶真 陈霆 魏强 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第2期12-15,共4页
目的体外制备SHIV1157ipd3N4病毒中国恒河猴细胞适应株,在细胞水平和中国恒河猴体内评价其生物学特性。方法用SHIV1157ipd3N4病毒阴道感染中国恒河猴,在血浆病毒载量高峰期采血分离外周血单核淋巴细胞(PBMCs),与正常中国恒河猴PBMCs共... 目的体外制备SHIV1157ipd3N4病毒中国恒河猴细胞适应株,在细胞水平和中国恒河猴体内评价其生物学特性。方法用SHIV1157ipd3N4病毒阴道感染中国恒河猴,在血浆病毒载量高峰期采血分离外周血单核淋巴细胞(PBMCs),与正常中国恒河猴PBMCs共培养。定期测定培养液中的P24抗原水平。当病毒复制达高峰期时收集培养上清,分装并冻存。测定病毒RNA载量、P24抗原浓度和TCID50。静脉感染中国恒河猴,研究该批次SHIV1157ipd3N4在体内的病毒学、免疫学指标变化及变异情况,分析其基本的生物学特性。结果本研究共制备了243 mL SHIV1157ipd3N4病毒原液,gp120序列分析表明病毒未发生变异,CCR5的嗜性也未发生改变。病毒载量为1.586×108 copies/mL,P24抗原水平为1.16×103 pg/mL,TZM-bl细胞测定病毒的TCID50为3.16×103/mL。1 mL SHIV1157ipd3N4静脉成功感染中国恒河猴G1004V,高峰期病毒载量达到1.0×106 copies/mL以上。结论此次制备的SHIV1157ipd3N4细胞适应株生物学特性稳定,适合作为毒种库构建SHIV1157ipd3N4/中国恒河猴模型。 展开更多
关键词 shiv1157ipd3N4 CCR5嗜性 中国恒河猴 外周血单核淋巴细胞 半数感染量
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广东沿海地区凡纳滨对虾EHP、VPAHPND和SHIV感染情况调查与分析 被引量:19
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作者 孙卫芳 黄小帅 +3 位作者 胡晓娟 文国樑 曹煜成 张建设 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2343-2349,共7页
【目的】掌握广东沿海对虾主养区虾肝肠胞虫(EHP)、急性肝胰腺坏死病致病性副溶血弧菌(VPAHPND)和虾血细胞虹彩病毒(SHIV)3种病原的流行趋势及特点,为广东省对虾养殖业的病害防控提供参考依据。【方法】建立针对EHP、VPAHPND和SHIV的PC... 【目的】掌握广东沿海对虾主养区虾肝肠胞虫(EHP)、急性肝胰腺坏死病致病性副溶血弧菌(VPAHPND)和虾血细胞虹彩病毒(SHIV)3种病原的流行趋势及特点,为广东省对虾养殖业的病害防控提供参考依据。【方法】建立针对EHP、VPAHPND和SHIV的PCR检测方法,在广东茂名和汕尾两地区采集凡纳滨对虾样品检测EHP、VPAHPND和SHIV 3种病原,并针对生长缓慢或个体规格差异明显的部分养殖凡纳滨对虾进行病原感染情况调查。【结果】广东茂名地区凡纳滨对虾幼虾的EHP、VPAHPND和SHIV携带率分别为20.24%、2.38%和9.52%,汕尾地区凡纳滨对虾幼虾的EHP、VPAHPND和SHIV携带率分别为26.98%、4.76%和42.86%。根据养殖模式划分,土塘养殖凡纳滨对虾幼虾以携带EHP为主,携带率高达40.48%;高位池养殖凡纳滨对虾幼虾主要感染SHIV,携带率为29.27%;工厂化池塘中,凡纳滨对虾幼虾的EHP和SHIV携带率较高,分别为21.88%和23.44%。池塘水、水源水、虾苗及丰年虫等养殖要素均能检出病原,其中池塘水和水源水中EHP和SHIV的检出率较高。对个体规格差异明显的患病凡纳滨对虾群体进行检测,结果发现大、小规格样品的EHP感染率分别为30.00%和80.00%;在表现生长缓慢的患病凡纳滨对虾群体中,大、小规格幼虾样品的EHP携带率分别为95.00%和100.00%。【结论】广东沿海地区养殖凡纳滨对虾的EHP和SHIV携带率较高、流行趋势明显,而VPAHPND检出率较低、流行趋势不明显。养殖水体是EHP、VPAHPND和SHIV的重要传播媒介,生物饵料也是养殖过程中病原传播的源头。因此,在实际生产中应根据养殖凡纳滨对虾的病原流行特点,尤其针对EHP和SHIV高携带率的现象,从病原、宿主和环境三方面同时着手进行防控,采取综合防控措施减少病害发生。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 虾肝肠胞虫(EHP) AHPND致病性副溶血弧菌(VPAHPND) 虹彩病毒(shiv) 携带率
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恒河猴Mamu-A^*01基因与SIV/SHIV感染相关的研究进展 被引量:3
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作者 刘秀英 丛喆 魏强 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2008年第1期74-78,共5页
SIV/SHIV感染的恒河猴是研究艾滋病及艾滋病药物筛选、疫苗评价较理想的动物模型。MHC在细胞免疫中起着关键作用,研究表明,MHC-I类分子的多态性与SIV/SHIV感染者的疾病进展有着明显的关联作用,Mamu-A*01是恒河猴中的一种MHC-I类分子,它... SIV/SHIV感染的恒河猴是研究艾滋病及艾滋病药物筛选、疫苗评价较理想的动物模型。MHC在细胞免疫中起着关键作用,研究表明,MHC-I类分子的多态性与SIV/SHIV感染者的疾病进展有着明显的关联作用,Mamu-A*01是恒河猴中的一种MHC-I类分子,它可以呈递特定的病毒蛋白片段到细胞的表面,从而激发CTL反应。国外发现Mamu-A*01阳性的猴艾滋病恒河猴会出现疾病进展缓慢,存活时间长等特征。本文就恒河猴Mamu-A*01基因与SIV/SHIV感染相关的研究进展做一综述,以期进一步加深对MHC在疫苗研究中的作用的了解,并促进更行之有效地对HIV/AIDS疫苗进行评价。 展开更多
关键词 恒河猴 Mamu-A^*01 SIV shiv 细胞免疫
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