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我国D2-43株PrM-E基因的复制型载体质粒DNA的免疫原性研究 被引量：1
1
作者 陈水平 秦鄂德 +5 位作者 于曼 胡志君 赵卫 范宝昌 王鹏程 杨佩英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期466-467,481,共3页
目的通过观察含我国登革2型病毒株D2-43的PrM-E基因的复制型SFV重组质粒DNA的免疫原性,为登革新型疫苗的研制提供依据。方法将PrM-E基因自T载体上切下,插入复制型SFV病毒载体质粒DNA中。将此重组质粒DNA以电穿孔法导入BHK21细胞,表达产... 目的通过观察含我国登革2型病毒株D2-43的PrM-E基因的复制型SFV重组质粒DNA的免疫原性,为登革新型疫苗的研制提供依据。方法将PrM-E基因自T载体上切下,插入复制型SFV病毒载体质粒DNA中。将此重组质粒DNA以电穿孔法导入BHK21细胞,表达产物的特异性用间接免疫荧光法进行鉴定。采用去除内毒素的质粒提取试剂盒制备重组质粒DNA,然后以不同剂量通过肌肉注射途径免疫Balb/c鼠,鼠血清中的抗体用间接免疫荧光法进行检测。结果含PrM-E基因的重组SFV质粒DNA在BHK21细胞中可表达登革2型病毒的特异蛋白;经免疫Balb/c鼠后,鼠血清可与登革D2-43感染的C6/36抗原片起特异的抗原抗体反应。结论含登革2型病毒PrM-E基因的复制型SFV病毒载体质粒DNA在Balb/c鼠中可诱导登革2型病毒特异抗体的产生,但抗体水平较低。 展开更多
关键词 sfv载体 登革病毒 PrM-E基因 DNA免疫
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传统DNA疫苗载体与Semliki森林病毒复制子对HIV-1 Pr55^(gag)表达与体液免疫原性的比较性研究 被引量：13
2
作者 张健慧 Jens Wild +6 位作者 Kurt Bieler Marcus Graf Ludwig Deml Hans Wolf PeterLiljestrm Ralf Wagner 邵一鸣 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期1-8,共8页
为探索Semliki森林病毒 (SFV)衍生的复制型DNA载体可否用于HIV疫苗的候选载体 ,对该载体与传统DNA疫苗载体对HIV - 1Pr5 5 gag的表达与体液免疫原性进行了系统比较研究。将野生型 (wtgag)及密码子改造(syngag)的HIV - 1ⅢBgag 基因分别... 为探索Semliki森林病毒 (SFV)衍生的复制型DNA载体可否用于HIV疫苗的候选载体 ,对该载体与传统DNA疫苗载体对HIV - 1Pr5 5 gag的表达与体液免疫原性进行了系统比较研究。将野生型 (wtgag)及密码子改造(syngag)的HIV - 1ⅢBgag 基因分别克隆于SFVDNA载体及传统DNA疫苗载体 [pCDNA3 1(+) ],对其Pr5 5 gag细胞内表达水平、Pr5 5 gag病毒样颗粒释放、以及在BALB/c鼠的体液免疫原性进行了比较。在 2 93T、H12 99、C2C12和BHK细胞系中 ,SFV -wtgag可以Rev非依赖方式有效表达Pr5 5 gag ,而 pC -wtgag转染的细胞不能有效表达Pr5 5 gag,从而不能诱导小鼠产生免疫反应。虽然SFV质粒的细胞转化效率明显低于pCDNA载体 ,SFV -wtgag和SFV -syngag在细胞内Pr5 5 gag的表达量与 pC -syngag相似 ,而Pr5 5 gag病毒样颗粒的释放明显低于 pC -syngag。在肌内注射免疫的小鼠中 ,低剂量 (0 1和 1 0 μg)的SFV及 pCDNAgag表达质粒均未诱导出GAG特异性免疫反应。在高剂量 (10 ,30 ,10 0 μg)免疫组中 ,与SFVgag表达质粒相比 ,pC -syngag可诱导出较高水平的TH1型GAG特异性抗体。SFV -syngag较SFV -wtgag可诱导出高水平的体液免疫反应。结果提示 ,SFV衍生的复制子单独使用不能在小鼠诱导出优于传统DNA疫苗载体的HIV - 1GAG特异性? 展开更多
关键词 HIV-1 Semliki森林病毒 DNA疫苗 表达 免疫原性 载体 复制子
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基于西门利克森林病毒复制子的“自杀性”DNA疫苗载体的构建及其体外表达特性 被引量：3
3
作者 方六荣 肖少波 +3 位作者 谢京国 潘永飞 姚林 陈焕春 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期217-221,共5页
对西门利克森林病毒(SFV)复制子质粒型表达载体pSFV1进行改造,即在SFV非结构蛋白(nSPs) 上游插入依赖于RNA聚合酶Ⅱ的人巨细胞病毒立即早期启动子/增强子序列(hCMV IE Pro/Enh),同时在pS- FV1的多克隆位点下游插入SV40 poly(A)终止信号... 对西门利克森林病毒(SFV)复制子质粒型表达载体pSFV1进行改造,即在SFV非结构蛋白(nSPs) 上游插入依赖于RNA聚合酶Ⅱ的人巨细胞病毒立即早期启动子/增强子序列(hCMV IE Pro/Enh),同时在pS- FV1的多克隆位点下游插入SV40 poly(A)终止信号序列,获得可以完全在DNA水平上操作并具有自主复制功能的表达载体pSFV-DNA。为了进一步探讨改造载体的转染效率、表达能力以及是否能诱导细胞凋亡等特性, 将报告基因EGFP插入pSFV-DNA中亚基因组启动子下游,构建的重组表达质粒pSFV-EGFP转染BHK-21 细胞,转染后12 h即可观察到荧光,但转染效率明显低于直接由hCMV IE Pro/Enh驱动的EGFP真核表达质粒pEGFP-C1;提取转染后48 h的细胞基因组DNA,电泳发现pSFV-EGFP转染细胞均呈典型的DNA断裂(ladder),而pEGFP-C1转染细胞未观察到这种现象。上述结果表明:改造的载体不仅可完全在DNA水平上操作,而且能正确表达外源基因和诱导细胞凋亡,为开展各种病原微生物的“自杀性”DNA疫苗研究提供了良好的工具。 展开更多
关键词 西门利克森林病毒复制子 “自杀性”DNA疫苗 表达载体 表达特性
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双基因共表达的“自杀性”DNA疫苗载体的改造及其体外表达特性 被引量：2
4
作者 谢京国 方六荣 +3 位作者 肖少波 姚林 潘永飞 陈焕春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期583-585,590,共4页
PCR扩增西门利克森林病毒(SFV)亚基因组启动子26S序列及人工合成Linker,将其插入基于SFV复制子的“自杀性”DNA疫苗表达载体pSCA1的多克隆位点,获得含2个26S启动子并能同时驱动双基因共表达的“自杀性”DNA疫苗表达载体pSCA2。为了验证p... PCR扩增西门利克森林病毒(SFV)亚基因组启动子26S序列及人工合成Linker,将其插入基于SFV复制子的“自杀性”DNA疫苗表达载体pSCA1的多克隆位点,获得含2个26S启动子并能同时驱动双基因共表达的“自杀性”DNA疫苗表达载体pSCA2。为了验证pSCA2的表达能力,PCR扩增绿色荧光蛋白基因EGFP和红色荧光蛋白基因DsRed2,分别插入pSCA2的2个26s启动子下游,获得EGFP和DsRed2双基因共表达的“自杀性”DNA疫苗pSCA2-EGFP/RFP。将pSCA2-EGFP/RFP转染BHK-21细胞,转染后24h,可同时观察到被转染细胞发绿色荧光和红色荧光,证实EGFP和DsRed2均获得表达。 展开更多
关键词 西门利克森林病毒复制子 “自杀性”DNA疫苗 表达载体 双基因共表达
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基于数据符号化表示和云模型的时序数据生成方法 被引量：2
5
作者 夏建明 杨俊安 张琼 《计算机应用研究》 CSCD 北大核心 2010年第10期3691-3693,3697,共4页
为得到可靠的仿真数据,提出一种基于数据符号化表示和云模型的时序数据生成方法。首先用SFVS算法将原数据或是数据的先验知识(很多时候仅能获得相关领域的一些知识而非数据)表达为一个符号矢量,然后用定性定量转换工具——云模型利用符... 为得到可靠的仿真数据,提出一种基于数据符号化表示和云模型的时序数据生成方法。首先用SFVS算法将原数据或是数据的先验知识(很多时候仅能获得相关领域的一些知识而非数据)表达为一个符号矢量,然后用定性定量转换工具——云模型利用符号矢量产生相应的时序数据。仿真实验表明,该方法产生的数据具有与原数据一样的结构特征、知识蕴涵,并具有可控的随机性、复杂性。 展开更多
关键词 时序数据 符号化表示 符号化统计特征矢量 云模型 云发生器
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基于统计特征矢量符号值和聚类经验模态分解的短时电能质量扰动信号分析 被引量：1
6
作者 欧阳静 张立彬 +2 位作者 潘国兵 徐红伟 陈金鑫 《高技术通讯》 北大核心 2017年第11期929-937,共9页
研究了希尔伯特-黄变换(HHT)方法分析电能质量扰动信号的不足,提出了一种统计特征矢量符号化(SFVS)算法与聚类经验模态分解(EEMD)相结合的短时电能质量扰动信号分析方法。该方法采用循环周期比较的欧氏距离的边界检测算法来对电能质量... 研究了希尔伯特-黄变换(HHT)方法分析电能质量扰动信号的不足,提出了一种统计特征矢量符号化(SFVS)算法与聚类经验模态分解(EEMD)相结合的短时电能质量扰动信号分析方法。该方法采用循环周期比较的欧氏距离的边界检测算法来对电能质量扰动信号的突变时间进行检测,以突变时刻为边界点将原始电能质量信号进行划分,再用EEMD方法对区块划分信号进行分解,有效抑制模态混叠,以改善信号分解性能。测试结果表明,该方法能够实现突变时刻的准确检测,对电能质量扰动信号中的各种成分进行准确分析。 展开更多
关键词 短时电能质量扰动 暂态分析 统计特征矢量符号化(sfvS) 聚类经验模态分解(EEMD) 模态混叠
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