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黑龙江省猪流行性腹泻病毒流行毒株分离鉴定与遗传进化分析
1
作者 张欣欣 张岳 +6 位作者 崔安 李金儒 张芸菁 何丽霞 杨桂君 任玉东 李广兴 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期378-389,共12页
【目的】通过对黑龙江省猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)毒株进行分离鉴定,基于PEDV分离株S、ORF3基因序列进行遗传进化分析,丰富现有PEDV材料,为猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)的防治及疫苗研... 【目的】通过对黑龙江省猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)毒株进行分离鉴定,基于PEDV分离株S、ORF3基因序列进行遗传进化分析,丰富现有PEDV材料,为猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)的防治及疫苗研发提供参考依据。【方法】采集养猪场疑似猪流行性腹泻病料,利用Vero-E6细胞进行适应性培养获得病毒,并通过RT-PCR和间接免疫荧光试验(IFA)对毒株进行分离鉴定。通过PCR分别扩增PEDV分离毒株的S1、S2和ORF3基因,构建重组质粒并测序鉴定,获得PEDV分离株的S、ORF3基因序列。将分离株与26株参考毒株的S和ORF3基因序列进行核苷酸序列相似性比对和遗传进化分析,确定分离毒株的所属亚群。【结果】在Vero-E6细胞上培养分离的PEDV毒株,感染细胞出现变形圆缩、折光性降低,细胞发生融合,后期细胞脱落出现空斑等典型细胞病变;RT-PCR和IFA检测显示,扩增均出现片段大小约600 bp的特异性条带,分离株感染细胞后均可与PEDV N蛋白单克隆抗体发生特异性反应,表明分离的3株病毒株均为PEDV,分别命名为HLJ、HLJ2020和HLJ2021株。成功构建PEDV各分离株的S1、S2和ORF3基因重组质粒并测序获得相应基因序列。核苷酸序列相似性比对与遗传进化树分析结果显示,PEDV HLJ与HLJ2020株为GⅠb亚群毒株,PEDV HLJ2021株归入GⅡc亚群。【结论】本研究从黑龙江地区腹泻猪小肠组织中成功分离获得3株PEDV流行毒株,其中分离毒株PEDV HLJ与PEDV HLJ2020属于GⅠb亚群,PEDV HLJ2021株属于GⅡc亚群。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 分离鉴定 S基因 ORF3基因 遗传进化分析
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山东地区猪流行性腹泻病毒分子流行病学调查及流行毒株的分离鉴定 被引量：3
2
作者 张志豪 李建达 +9 位作者 曹志 曾昊 任素芳 张玉玉 丁罗刚 刘飞 陈智 孙文博 于江 吴家强 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第7期80-88,共9页
猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染可引起仔猪急性腹泻和脱水,死亡率高。为了明确山东地区PEDV的流行趋势与遗传进化情况,本研究于2022—2023年对山东省的13个地级市进行了流行病学调查。通过对PEDV N基因的RT-PCR检测,结果在228份疑似腹泻样... 猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染可引起仔猪急性腹泻和脱水,死亡率高。为了明确山东地区PEDV的流行趋势与遗传进化情况,本研究于2022—2023年对山东省的13个地级市进行了流行病学调查。通过对PEDV N基因的RT-PCR检测,结果在228份疑似腹泻样本中,PEDV阳性率达48.68%;同时,在PEDV感染的样本中,发现PEDV与猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪轮状病毒(PoRV)共感染的现象。对PEDV阳性样本进行S1基因的扩增测序,通过MEGA6软件对PEDV阳性样本进行S1基因的遗传进化分析,发现扩增的4株流行毒株属于GⅡc型,1株流行毒株属于GⅡa型。进一步对流行毒株进行分离,通过PEDV N基因的检测和间接免疫荧光染色,证实成功分离到1株PEDV(命名为SDQD20230628)。对分离株进行S基因的遗传进化分析,发现分离株S基因与GⅡc亚型毒株同源性较近。本研究发现PEDV仍是引起山东地区猪场腹泻猪主要病毒,且呈现出GⅡc亚型毒株趋于流行的趋势,研究结果丰富了山东地区PEDV分子流行病学数据,也为PEDV感染的防控提供了理论依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 流行病学调查 病毒分离鉴定 S基因 遗传进化 山东地区
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我国部分地区牛冠状病毒S基因遗传变异分析 被引量：1
3
作者 张欣怡 高辉 +7 位作者 崔进 房琳琳 郑辉 刘爽 魏荣 李晓成 肖啸 董雅琴 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第1期188-198,共11页
为了解我国部分地区牛冠状病毒(BCoV)流行及变异情况,2020—2021年,收集我国9个省份53个临床发病牛群的拭子、粪便、组织等样品1432份,采用实时荧光RT-PCR方法进行BCoV检测,并选取部分核酸阳性样品进行S基因全长的扩增、测序与遗传变异... 为了解我国部分地区牛冠状病毒(BCoV)流行及变异情况,2020—2021年,收集我国9个省份53个临床发病牛群的拭子、粪便、组织等样品1432份,采用实时荧光RT-PCR方法进行BCoV检测,并选取部分核酸阳性样品进行S基因全长的扩增、测序与遗传变异分析。53个发病牛群中,BCoV阳性场占54.72%,冬季BCoV感染率(14.87%)最高,犊牛最易感(16.13%)。本研究共获得17条S基因全长序列与参考序列核苷酸同源性为96.7%~99.7%。系统进化分析表明,BCoV毒株分为欧洲(GⅠ型)和亚-美(GⅡ型)两大分支,所测毒株均属GⅡ型,且与大多中国参考毒株共同位于GⅡ中相对独立的分支。与中国参考毒株相比,所测毒株存在60个氨基酸变异位点,所测4个内蒙古毒株存在16个有别于其他测序株的相同突变,推测与中国参考株HLJ/HH-10/2020、BCoV-GX-NN190313有相同的祖先。该研究为揭示我国BCoV流行情况及流行毒株分子特征提供参考。 展开更多
关键词 牛冠状病毒 S基因 系统进化分析 氨基酸变异
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内含赤羽病病毒S基因假病毒的构建、鉴定及初步应用 被引量：1
4
作者 李超 潘俊慧 +6 位作者 王素春 隋金钰 魏世萌 祁倩 吴发兴 李博文 王楷宬 《中国动物检疫》 2025年第1期96-102,共7页
为制备赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)核酸诊断试剂中的阳性对照品,本研究首先合成AKAV S全基因,然后构建重组慢病毒穿梭载体pLenti-GIII-CMV-CBH-GFP-2A-Puro-AKAV,并将测序鉴定成功的重组慢病毒穿梭载体与包装载体共转染293T细胞;收... 为制备赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)核酸诊断试剂中的阳性对照品,本研究首先合成AKAV S全基因,然后构建重组慢病毒穿梭载体pLenti-GIII-CMV-CBH-GFP-2A-Puro-AKAV,并将测序鉴定成功的重组慢病毒穿梭载体与包装载体共转染293T细胞;收获纯化的细胞培养液上清,进行核酸质粒残留检测;将上清感染293T细胞,观察绿色荧光蛋白基因表达情况,并采用RT-PCR和荧光定量RT-PCR试验检测上清中是否存在AKAV S基因片段,最终通过数字RT-PCR方法进行绝对定值。结果显示;纯化的细胞培养液上清中无核酸质粒残留,在培养72 h的293T细胞中可观察到绿色荧光;采用RT-PCR和荧光定量RT-PCR试验均可扩增出AKAV S基因目的片段;采用数字RT-PCR方法,将制备的假病毒溶液拷贝数浓度定值为3.36×10^(3)copies/μL。结果表明,本研究成功构建了含AKAV S全基因片段的假病毒,可作为AKAV核酸检测的阳性对照品,为后续研发AKAV核酸诊断试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 赤羽病病毒 S基因 假病毒粒子 阳性对照品
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猪流行性腹泻病毒HNxp23株的分离鉴定及其基因特性分析
5
作者 饶丹 秦锋 +11 位作者 阮梦凡 葛雨 张明旭 杨喜梅 李美佳 陈文雪 于林洋 赵攀登 胡静 刘向楠 郑全芳 董建国 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第9期79-86,共8页
为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本试验对2023年9月河南省西平县某规模化猪场疑似感染PEDV的腹泻猪进行样品采集、PCR鉴定、病毒分离、间接免疫荧光鉴定和电子显微镜观察,并对病毒重要基因进行测序分析。结果显示,成功... 为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本试验对2023年9月河南省西平县某规模化猪场疑似感染PEDV的腹泻猪进行样品采集、PCR鉴定、病毒分离、间接免疫荧光鉴定和电子显微镜观察,并对病毒重要基因进行测序分析。结果显示,成功分离得到1株PEDV毒株,命名为HNxp23。遗传进化分析结果显示,HNxp23毒株纤突蛋白基因S、膜蛋白基因M和辅助蛋白基因ORF3均与中国黑龙江分离毒株CH-HLJJS-2022位于同一分支,属于GⅡa亚型。氨基酸同源性分析结果显示,HNxp23毒株S和ORF3蛋白与中国黑龙江分离毒株CH-HLJJS-2022同源性最高,分别为98.7%和99.4%;M蛋白与中国北京分离毒株LZW同源性最高,为99.3%。S蛋白氨基酸抗原表位分析结果显示,与CV777毒株相比,HNxp23毒株S蛋白在抗原表位COE区、SS2区、SS6区和2C10区分别存在19、1、1和0个氨基酸差异。结果表明,本试验分离毒株HNxp23属于PEDV的GⅡa亚型,S蛋白在COE区易发生氨基酸突变。本试验结果可为河南地区PEDV的流行特征分析以及PEDV疫苗和药物的研发提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) S基因 M基因 ORF3基因
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猪流行性腹泻病毒变异毒株与S-indel流行毒株S基因嵌合毒株的构建
6
作者 尹丽萍 常长琳 +5 位作者 范宝超 丁小燕 白娟 张海涛 李彬 姜平 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第7期877-883,共7页
本研究通过靶向设计2条sgRNA对AH2012/12全基因BAC重组质粒进行切割,将S-indel毒株的S基因质粒与AH2012/12基因BAC质粒转化至NEB 10-beta大肠杆菌,获得重组BAC质粒,转染至Vero细胞,拯救出S-indel毒株S基因替代AH2012/12毒株S基因的嵌合... 本研究通过靶向设计2条sgRNA对AH2012/12全基因BAC重组质粒进行切割,将S-indel毒株的S基因质粒与AH2012/12基因BAC质粒转化至NEB 10-beta大肠杆菌,获得重组BAC质粒,转染至Vero细胞,拯救出S-indel毒株S基因替代AH2012/12毒株S基因的嵌合重组病毒。病毒基因序列分析、间接免疫荧光试验、空斑试验及生长曲线测定等证明该嵌合病毒株拯救成功,命名为rAH2012/12-S,本研究为PEDV新疫苗研发和快速应对新发PED防控奠定了重要基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 S基因 反向遗传
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1株犬冠状病毒山西株变异与遗传进化特征
7
作者 刘晶英 李炜 +2 位作者 杨勃 孙子龙 张鼎 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第4期85-92,共8页
旨在阐明分离自山西省的1株犬冠状病毒(CCoV)基因变异与遗传进化特征。将疑似CCoV感染犬粪便接种犬肾传代细胞系(MDCK),收毒后扩增CCoV山西株纤突蛋白(S)基因、膜蛋白(M)基因,分别利用DNASTAR、ESPript 3.x和MEGA-X软件分析基因、氨基... 旨在阐明分离自山西省的1株犬冠状病毒(CCoV)基因变异与遗传进化特征。将疑似CCoV感染犬粪便接种犬肾传代细胞系(MDCK),收毒后扩增CCoV山西株纤突蛋白(S)基因、膜蛋白(M)基因,分别利用DNASTAR、ESPript 3.x和MEGA-X软件分析基因、氨基酸相似性以及遗传进化关系。结果:CCoV山西株S基因与已公布参考序列的相似性为88.6%~98.3%,M基因相似性为83.6%~96.3%;CCoV山西株S蛋白、M蛋白均存在部分氨基酸位点变异,其中S蛋白主要为氨基酸点突变,M蛋白第10~40位点呈现高频氨基酸突变区;邻近法(Neighbor-Joining)构建遗传进化树结果显示,CCoV山西株属于CCoVⅡ型毒株,与越南分离株LC190907处于同一分支。综上,S基因、M基因分析结果一致,均表明该CCoV山西株属于CCoVⅡ型毒株,存在不同程度的核苷酸、氨基酸变异,与越南分离株亲缘关系最近。本研究结果为山西省CCoV相关疾病的防控提供了重要的参考。 展开更多
关键词 犬冠状病毒 纤突蛋白基因 膜蛋白基因 同源性 遗传进化
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松墨天牛GST基因克隆及高温胁迫下的表达特性分析 被引量：1
8
作者 李子纯 郝德君 +4 位作者 李慧 李长燕 许丹雯仪 杨华磊 赵培渊 《南京林业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第1期28-36,共9页
【目的】克隆松墨天牛(Monochamus alternatus)谷胱甘肽S转移酶(glutathione S-transferases,GST)相关基因,明确GST基因在松墨天牛响应高温胁迫中的效用,为探究亚热带地区松墨天牛的耐热分子机制提供理论依据。【方法】克隆3条松墨天牛... 【目的】克隆松墨天牛(Monochamus alternatus)谷胱甘肽S转移酶(glutathione S-transferases,GST)相关基因,明确GST基因在松墨天牛响应高温胁迫中的效用,为探究亚热带地区松墨天牛的耐热分子机制提供理论依据。【方法】克隆3条松墨天牛GST基因,结合DNAMAN 9.0、I-TASSER等软件分析松墨天牛GST基因的结构特征;利用qRT-PCR技术测定分析松墨天牛成虫和4龄幼虫在不同高温、不同处理时长后GST基因的相对表达量;通过纸盘扩散法验证3条松墨天牛GST基因在保护机体免受氧化应激中的作用。【结果】克隆3条松墨天牛GST基因的cDNA序列,分别命名为MaltGSTe1、MaltGSTe2和MaltGSTt1。MaltGSTe1与MaltGSTe2均属于GST的Epsilon家族,MaltGSTt1属于GST的Theta家族。3条GST基因三维蛋白结构具有指示性结构特征,属于胞质型GST。松墨天牛4龄幼虫在高温胁迫下MaltGSTe1、MaltGSTe2和MaltGSTt1的相对表达量均出现显著变化,MaltGSTe2相对表达水平上调幅度最大;MaltGSTt1在松墨天牛雄虫体内相对表达量出现明显下调;异源表达3条GST基因蛋白的大肠杆菌表现出较强的抗氧化能力,其中,MaltGSTe2具有更强的抗氧化能力。【结论】克隆获得3条松墨天牛GST基因,发现高温胁迫可诱导GST基因表达量上调;纸盘扩散分析结果表明异源表达GST基因蛋白具有抗氧化能力,推测GST基因具有通过保护机体免受氧化应激来参与松墨天牛幼虫的高温胁迫响应机制。 展开更多
关键词 松墨天牛 高温胁迫 谷胱甘肽S转移酶 GST基因 氧化应激 基因克隆 表达分析 生物信息学
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人乳头瘤病毒阳性鳞状上皮内病变患者的阴道微生物16 SrRNA检测分析
9
作者 高月月 顾丽霞 +3 位作者 杨梦霞 朱慧 冯海娇 陈书玲 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2025年第5期314-319,共6页
目的分析人乳头瘤病毒(HPV)阳性的鳞状上皮内病变(SIL)者与无明显宫颈病变者阴道微生物菌群差异,探讨HPV对阴道微生物菌群变化的影响。方法收集2022年1月至2023年12月河北北方学院附属第一医院妇产科收治的SIL患者(SIL组)121例和经宫颈... 目的分析人乳头瘤病毒(HPV)阳性的鳞状上皮内病变(SIL)者与无明显宫颈病变者阴道微生物菌群差异,探讨HPV对阴道微生物菌群变化的影响。方法收集2022年1月至2023年12月河北北方学院附属第一医院妇产科收治的SIL患者(SIL组)121例和经宫颈液基薄层细胞学检查及阴道镜检查均正常的无明显宫颈病变者(对照组)107例。使用NovaSeq6000测序平台对微生物V4区进行16SrRNA基因测序,以97%的相似性阈值将样本序列划分为不同的操作分类单元(OTU)。使用主坐标分析(PCoA)和置换多元方差分析(Adonis检验)比较不同分组生物群落结构组成差异。计算不同分组者的Chao1指数和Shannon多样性指数差异。用MaAsLin分析(多元线性模型)计算不同组微生物群落间的差异丰度OTU。结果基于BrayCurtis距离的PCoA分析β多样性可见,是否发生SIL与阴道微生物群落结构的差异相关,但SIL仅解释了总变异的1.4%(R2=0.014,AdonisP=0.002)。SIL组的Chao1指数(Z=8.873,P<0.001)、香农指数(Z=2.041,P=0.041)均高于对照组。对照组HPV阳性者与SIL组阴道微生物群落组成的α、β多样性差异无统计学意义(AdonisP=0.085)。对照组HPV阳性者、对照组HPV阴性者和SIL组3组受试者的阴道微生物群落组成的α和β多样性存在差异,不同分组差异对微生物群落结构变异的解释度仅为1.3%(R2=0.013,AdonisP=0.002),对照组HPV阴性者的Chao1指数低于对照组HPV阳性者和SIL组(H=10.879,P=0.004),提示HPV感染状态是阴道微生物群落变化的主要驱动因素。使用MaAsLin分析和多重假设检验可见HPV感染与凝聚小短杆菌属和金黄短杆菌属相对丰度增加以及两种乳酸杆菌种的OTU减少之存相关性(均P<0.001)。结论阴道微生物群落多样性变化与HPV感染相关,而与是否存在SIL关系较弱。 展开更多
关键词 宫颈鳞状上皮内病变 微生物群 16SRRNA基因 乳头瘤病毒
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内江市中华按蚊杀虫剂靶标基因的多态性及抗性突变频率研究
10
作者 曾佳芮 刘鹃 +1 位作者 谭爱 刘鹏 《中华卫生杀虫药械》 2025年第3期261-265,共5页
目的了解四川省内江市中华按蚊对常用杀虫剂的抗性状况及抗性相关基因突变情况,为当地中华按蚊防控提供支撑。方法分别对2018年9月及2021年7月内江市4个县(市、区)采集的86只中华按蚊,采用基因片段测序的方法,检测3个靶标基因(ace、VGSC... 目的了解四川省内江市中华按蚊对常用杀虫剂的抗性状况及抗性相关基因突变情况,为当地中华按蚊防控提供支撑。方法分别对2018年9月及2021年7月内江市4个县(市、区)采集的86只中华按蚊,采用基因片段测序的方法,检测3个靶标基因(ace、VGSC、rdl),4个抗性相关位点(ace-119、VGSC-1014、rdl-296、rdl-327)的基因型,分析个体基因型类型与频率以及抗性等位基因频率,并对VGSC基因和rdl基因做了单倍型的识别和序列比对分析。结果除rdl-327抗性频率低(2.94%)外,ace-119、VGSC-1014、rdl-296抗性频率均较高,分别为44.77%、83.14%、89.41%。基因单倍型分析表明,VGSC-H1、VGSC-H2、VGSC-H3具有不同于VGSC-H4、VGSC-H5的进化来源。结论根据抗性基因频率,推测内江市中华按蚊抗性水平较高,建议专业机构加强对媒介生物防制工作的科学指导,采用综合防制手段进行蚊虫防控。 展开更多
关键词 中华按蚊 杀虫剂 靶标基因 抗性突变
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猪流行性腹泻病毒在抗体选择压下的基因变异
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作者 余蕊 高艺 +2 位作者 孙永科 张恒 杨玉艾 《云南农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第1期79-85,共7页
【目的】研究猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)在抗体选择压下的分子变异。【方法】将PEDV Sinder02株在添加适量抗体和不添加抗体的Vero E6细胞上连续传代40代,对传代前后毒株的全基因组序列进行扩增、测序、... 【目的】研究猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)在抗体选择压下的分子变异。【方法】将PEDV Sinder02株在添加适量抗体和不添加抗体的Vero E6细胞上连续传代40代,对传代前后毒株的全基因组序列进行扩增、测序、拼接和分析。【结果】第40代有抗体组和无抗体组全基因组核苷酸发生突变的位点累计分别为71和50个,氨基酸发生突变的位点累计分别为50和26个。有抗体组S基因的非同义突变(nonsynonymous mutation,NS)与同义突变(synonymous mutation,S)的比值(NS/S值)为4.25,ORF3基因的NS/S值为3.67。有抗体组S基因出现6个稳定突变位点,其中4个与已知抗原表位有关;ORF3基因出现5个稳定突变位点,其中3个与已知抗原表位有关。有抗体组、无抗体组与原代病毒序列的同源性逐代降低,且有抗体组与原代病毒之间的差距更大、遗传距离更远。【结论】首次证明抗体选择压对PEDV Sinder02株的S基因和ORF3基因起到促变异作用。研究结果为探索PEDV变异提供了理论基础,也为新型PEDV疫苗的研制提供了科学参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) S基因 ORF3基因 抗体选择压 基因变异
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基于Aβ_(25-35)表位重组基因疫苗能有效改善阿尔茨海默病模型小鼠认知功能障碍
12
作者 肖芳艳 李文华 +2 位作者 杨楠 黄薇 刘雁勇 《基础医学与临床》 2025年第7期897-904,共8页
目的探究构建的Aβ_(25-35)表位重组基因疫苗对阿尔茨海默病(AD)的治疗效应。方法以Aβ_(25-35)为表位,pcDNA3.1质粒作为载体,构建pcDNA-Aβ_(25-35)-GRP94重组基因疫苗。选择早期AD双转基因APP/PS1模型小鼠作为实验对象,设置AD对照组和... 目的探究构建的Aβ_(25-35)表位重组基因疫苗对阿尔茨海默病(AD)的治疗效应。方法以Aβ_(25-35)为表位,pcDNA3.1质粒作为载体,构建pcDNA-Aβ_(25-35)-GRP94重组基因疫苗。选择早期AD双转基因APP/PS1模型小鼠作为实验对象,设置AD对照组和pcDNA-Aβ_(25-35)-GRP94免疫组,定期免疫。ELISA检测免疫后小鼠体内Aβ特异性抗体滴度和分型;水迷宫和旷场实验检测小鼠认知能力和精神行为的改变;采用免疫组化评估疫苗对AD模型小鼠脑内Aβ斑块和胶质细胞的作用;利用ELISA试剂盒检测小鼠脑中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的水平。结果与AD对照组相比,pcDNA-Aβ_(25-35)-GRP94疫苗可诱导APP/PS1小鼠产生较高水平的Aβ特异性抗体(P<0.05),且主要诱导形成IgG1抗体(P<0.01)。疫苗显著减少脑内Aβ斑块(P<0.05),有效改善APP/PS1小鼠学习记忆损伤(P<0.05),未造成精神行为异常。此外,疫苗可抑制胶质细胞异常增生(P<0.05),未导致明显的脑内炎性反应。结论早期接种Aβ_(25-35)表位重组基因疫苗能够诱导AD模型小鼠形成高水平的Aβ特异性抗体,有效改善其学习记忆损伤,缓解相关神经病理改变,具有治疗效果。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 重组基因疫苗 Aβ_(25-35)表位 葡萄糖调节蛋白94(GRP94) 主动免疫
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阿尔茨海默病的遗传学研究进展
13
作者 陈馨 徐运 赵秀丽 《基础医学与临床》 2025年第11期1516-1521,共6页
阿尔茨海默病(AD)是一种中枢神经系统的退行性病变,遗传因素在其发生发展中起重要作用。近年来,随着高通量测序技术和全基因组关联分析(GWAS)的广泛应用,AD遗传学研究取得了显著进展。AD具有显著的遗传基础:早发性AD(EOAD)主要由APP、PS... 阿尔茨海默病(AD)是一种中枢神经系统的退行性病变,遗传因素在其发生发展中起重要作用。近年来,随着高通量测序技术和全基因组关联分析(GWAS)的广泛应用,AD遗传学研究取得了显著进展。AD具有显著的遗传基础:早发性AD(EOAD)主要由APP、PSEN1和PSEN2突变驱动,导致β-淀粉样蛋白(Aβ)积聚;晚发性AD(LOAD)的主要风险因子则是APOEε4。此外,GWAS研究还发现了TREM2等多个影响神经炎性反应等通路的风险基因。同时,表观遗传调控和罕见变异也共同参与了疾病的发生。对AD复杂机制的深入理解有助于相关治疗策略的研发。因此,本文围绕AD遗传学研究进行综述,并分析探讨AD遗传学研究面临的挑战及未来潜在的研究方向。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 遗传学 致病基因 致病机制
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桃蛀螟GST基因家族的鉴定与表达分析
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作者 张元臣 冯倩 +3 位作者 王露露 石珊珊 卢绍辉 王景顺 《安阳工学院学报》 2025年第6期116-123,共8页
谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-transferase, GST)是昆虫体内重要的解毒酶系,在昆虫生长发育、利用寄主和适应环境中发挥重要作用。本研究根据转录组数据对桃蛀螟Conogethes punctiferalis的GST家族基因成员进行筛选和鉴定,并对它们... 谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-transferase, GST)是昆虫体内重要的解毒酶系,在昆虫生长发育、利用寄主和适应环境中发挥重要作用。本研究根据转录组数据对桃蛀螟Conogethes punctiferalis的GST家族基因成员进行筛选和鉴定,并对它们的理化性质、保守基序、亚细胞定位、系统发育等进行了分析,同时确定了桃蛀螟取食不同植物后体内GST基因的表达情况。结果表明,从桃蛀螟转录组共鉴定到16个GST基因,预测编码蛋白质含有的氨基酸残基数量为104~285个,均为亲水性蛋白。系统发育树表明,桃蛀螟GST家族基因分为6个类型,同一类型基因一般具有相似的保守基序。桃蛀螟取食不同植物后GST基因均有表达,且不同基因的表达水平差异较大。研究结果为深入研究桃蛀螟GST的生理功能奠定了基础。 展开更多
关键词 桃蛀螟 谷胱甘肽S-转移酶 生物信息学分析 基因表达
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GSTM1基因多态性与儿童急性淋巴细胞白血病医院感染的关联
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作者 薛永梅 杨翊 +1 位作者 赵伟青 高彬昌 《中华医院感染学杂志》 北大核心 2025年第3期436-440,共5页
目的探究谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)基因多态性与儿童急性淋巴细胞白血病医院感染的关联,并分析病原菌的耐药性以及微炎症状态对其预测价值。方法选取2021年1月—2024年1月青岛市中医医院收治的急性淋巴细胞白血病患儿115例为研究对象,... 目的探究谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)基因多态性与儿童急性淋巴细胞白血病医院感染的关联,并分析病原菌的耐药性以及微炎症状态对其预测价值。方法选取2021年1月—2024年1月青岛市中医医院收治的急性淋巴细胞白血病患儿115例为研究对象,根据医院感染情况分为感染组56例,非感染组59例。统计感染患儿病原菌及其药敏结果;比较两组GSTM1基因多态性及CD64、降钙素原(PCT)、超敏C-反应蛋白(hsCRP)、淀粉样蛋白A(SAA)水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析CD64、PCT、hs-C RP、SAA对儿童急性淋巴细胞白血病医院感染的预测价值。结果56例急性淋巴细胞白血病医院感染患儿检出72株病原菌,革兰阴性菌42株占58.33%,革兰阳性菌28株占38.89%,以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌为主。大肠埃希菌主要对氨苄西林耐药率较高(>90%),对阿米卡星敏感;金黄色葡萄球菌对青霉素G耐药率较高(100.00%),对庆大霉素、利福平、利奈唑胺、万古霉素较为敏感。感染组GSTM1缺失基因型分布占比高于非感染组(P=0.012)。感染组CD64、PCT、hs-CRP、SAA分别为(69.45±20.88)%、(0.71±0.22)ng/ml、(12.26±3.94)mg/L、(117.78±36.57)mg/L高于非感染组(P<0.05)。ROC曲线显示联合检测诊断急性淋巴细胞白血病院内感染患儿的曲线下面积(AUC)为0.935高于单独检测(P<0.05),且联合检测的敏感度、特异度为91.07%、84.75%。结论急性淋巴细胞白血病医院感染患儿CD64、PCT、hs-CRP、SAA水平表达异常,且四者联合检测可提高对医院感染的诊断价值,GSTM1基因多态性与急性淋巴细胞白血病患儿医院感染有关。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 医院感染 谷胱甘肽硫转移酶M1 基因多态性 药敏试验 CD64 降钙素原 超敏C-反应蛋白 淀粉样蛋白A 预测价值
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KLK6、PROS1对帕金森病患者认知障碍的预测价值
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作者 武孟君 李秋 《华夏医学》 2025年第4期107-113,共7页
目的分析激肽释放酶6(KLK6)、蛋白S基因(PROS1)对帕金森病(PD)患者认知障碍(CI)的预测效能。方法选取118例PD患者的一般资料、临床资料,依据是否发生CI将其分别列为CI组和非CI组,归纳PD继发CI的危险因素,验证KLK6、PROS1对PD继发CI的预... 目的分析激肽释放酶6(KLK6)、蛋白S基因(PROS1)对帕金森病(PD)患者认知障碍(CI)的预测效能。方法选取118例PD患者的一般资料、临床资料,依据是否发生CI将其分别列为CI组和非CI组,归纳PD继发CI的危险因素,验证KLK6、PROS1对PD继发CI的预测效能。结果经统计,118例PD患者的CI发生率为23.73%(28/118)。CI组的年龄、合并吸烟史占比、Hoehn-Yahr(H-Y)分期>2.5期占比、合并运动功能障碍占比、以强直及步态障碍为主要症状表现占比、匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评分、KLK6、PROS1均高于非CI组,CI组的受教育年限、PD首发年龄均低于非CI组,差异有统计学意义(P<0.05)。年龄、受教育年限、合并运动功能障碍、以强直及步态障碍为主要症状表现、PSQI评分、KLK6、PROS1为PD患者继发CI的危险因素(P<0.05)。KLK6、PROS1联合检测对PD继发CI的预测灵敏度、特异度均高于KLK6、PROS1单独检测。结论KLK6、PROS1高表达为PD继发CI的危险因素,KLK6、PROS1联合检测能实现对CI发生风险的早期预测。 展开更多
关键词 帕金森病 认知障碍 激肽释放酶6 蛋白S基因 预测价值
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脑胶质瘤中PROS1、PSMA2表达与上皮间质转化的相关性及预后意义
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作者 陈志强 赵建凯 +5 位作者 张翡 贾宝铭 闫建敏 张颜礼 王双豹 冯国强 《疑难病杂志》 2025年第12期1467-1472,共6页
目的研究脑胶质瘤组织中蛋白S基因(PROS1)、蛋白酶体20S亚基α2(PSMA2)表达及其与上皮间质转化(EMT)的相关性及预后意义。方法选取2020年2月—2022年2月邢台市中心医院神经外科诊治的脑胶质瘤患者102例为研究对象。采用实时荧光定量PCR... 目的研究脑胶质瘤组织中蛋白S基因(PROS1)、蛋白酶体20S亚基α2(PSMA2)表达及其与上皮间质转化(EMT)的相关性及预后意义。方法选取2020年2月—2022年2月邢台市中心医院神经外科诊治的脑胶质瘤患者102例为研究对象。采用实时荧光定量PCR检测组织PROS1、PSMA2、EMT指标[Snail、上皮型钙黏蛋白(E⁃cad)、神经型钙黏蛋白(N⁃cad)]mRNA表达,免疫组织化学检测组织PROS1、PSMA2蛋白水平;Pearson相关系数分析PROS1、PSMA2 mRNA表达与EMT指标mRNA表达的相关性;Kaplan⁃Meier法分析PROS1、PSMA2蛋白水平对脑胶质瘤患者生存预后的影响;Cox回归分析脑胶质瘤患者生存预后的影响因素。结果脑胶质瘤患者癌组织中PROS1、PSMA2,Snail、N⁃cad mRNA表达高于癌旁组织,E⁃cad mRNA表达低于癌旁组织(t/P=31.199/<0.001、31.146/<0.001、24.632/<0.001、31.892/<0.001、19.886/<0.001);脑胶质瘤组织中PROS1、PSMA2 mRNA与Snail、N⁃cad mRNA呈正相关,与E⁃cad mRNA呈负相关(PROS1:r/P=0.665/<0.001、0.714/<0.001、-0.687/<0.001;PSMA2:r/P=0.702/<0.001、0.689/<0.001、-0.734/<0.001);脑胶质瘤患者癌组织中PROS1、PSMA2蛋白阳性率高于癌旁组织(χ^(2)/P=93.645/<0.001、82.797/<0.001);肿瘤直径≥3 cm、WHO分级Ⅲ~Ⅳ级的脑胶质瘤组织中PROS1、PSMA2蛋白阳性率高于肿瘤直径<3 cm、WHO分级Ⅰ~Ⅱ级(χ^(2)/P=13.512/<0.001、8.525/0.004、7.913/0.005、8.824/0.003);PROS1阳性组患者3年总生存率低于PROS1阴性组(36.11%vs.66.67%,Log⁃Rankχ^(2)=8.530,P=0.004),PSMA2阳性组患者3年总生存率低于PSMA2阴性组(34.29%vs.68.75%,Log⁃Rankχ^(2)=11.670,P=0.001);WHO分级Ⅲ~Ⅳ级、PROS1阳性、PSMA2阳性是影响脑胶质瘤患者预后死亡的独立危险因素[HR(95%CI)=1.789(1.184~2.706)、1.605(1.157~2.226)、1.454(1.077~1.962)]。结论脑胶质瘤中PROS1、PSMA2表达升高,两者与EMT指标有关,是评估脑胶质瘤患者预后的有效指标。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 蛋白S基因 蛋白酶体20S亚基α2 上皮间质转化 预后
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基于网络药理学及实验验证探讨加减薯蓣丸治疗阿尔茨海默病
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作者 周剑杰 李鸣 +1 位作者 谭子虎 王建婷 《世界中医药》 北大核心 2025年第21期3826-3831,3840,共7页
目的:根据网络药理学技术分析加减薯蓣丸治疗阿尔茨海默病(AD)的有效活性成分及其疗效作用机制。方法:通过网络药理数据库与分析平台(TCMSP)筛选加减薯蓣丸的潜在活性成分与相对应的靶点;根据GEO数据库挖掘AD疾病差异基因;通过加减薯蓣... 目的:根据网络药理学技术分析加减薯蓣丸治疗阿尔茨海默病(AD)的有效活性成分及其疗效作用机制。方法:通过网络药理数据库与分析平台(TCMSP)筛选加减薯蓣丸的潜在活性成分与相对应的靶点;根据GEO数据库挖掘AD疾病差异基因;通过加减薯蓣丸相关药物活性成分与AD疾病靶点基因,构建中药复方调控网络,并进行基因本体(GO)功能富集及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;通过Cytoscape软件构建中药成分-靶点网络模型、靶点-通路网络模型,并分析其交互靶点及信号通路;通过APP/PS1双转基因小鼠模型对网络药理学部分靶点蛋白进行验证。采用蛋白质印迹法(WB)检测CD14蛋白、TLR4蛋白、IKKβ蛋白的表达情况。结果:加减薯蓣丸中可能包含paeoniflorin、luteolin、Myricanone等12个有效活性成分,CD14、IKBKB、MAPK14等9个靶点基因;GO功能富集分析涉及脂多糖反应、炎症反应、脂磷壁酸反应、髓系白细胞分化、成肌细胞分化调控等方式治疗AD;KEGG富集分析得出45条信号通路,涉及Toll-样受体信号通路、Th1和Th2细胞分化、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路等。WB结果显示,与模型组比较,加减薯蓣丸能显著降低CD14、TLR4、IKKβ蛋白表达(P<0.05)。结论:加减薯蓣丸可能通过对CD14、IKBKB等靶点基因的调节起到治疗AD的作用,且通过实验证实了部分靶点基因蛋白,这为临床治疗与实验研究提供了客观理论依据。 展开更多
关键词 加减薯蓣丸 阿尔茨海默病 网络药理学 作用机制 差异基因 靶点 信号通路 实验验证
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蓝莓花青素相关VcGSTF19基因的克隆及功能研究
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作者 张永艳 郭思健 +4 位作者 李晶 郝思怡 李瑞得 刘嘉鹏 程春振 《生物技术通报》 北大核心 2025年第9期139-146,共8页
【目的】Phi亚家族谷胱甘肽转移酶(GSTF)在多种植物花青素积累和转运中发挥关键作用。为研究蓝莓GSTF的功能,对蓝莓花青素相关GSTF19基因进行克隆和功能研究。【方法】利用反转录PCR克隆获得蓝莓花青素相关GSTF19的编码序列并构建过表... 【目的】Phi亚家族谷胱甘肽转移酶(GSTF)在多种植物花青素积累和转运中发挥关键作用。为研究蓝莓GSTF的功能,对蓝莓花青素相关GSTF19基因进行克隆和功能研究。【方法】利用反转录PCR克隆获得蓝莓花青素相关GSTF19的编码序列并构建过表达载体,基于蓝莓果实瞬时转化和拟南芥tt19突变体互补实验研究其功能。【结果】VcGSTF19的瞬时过表达可以显著促进蓝莓果皮中花青素的积累。过表达VcGSTF19的蓝莓果皮花青素含量达到空载对照的6.61倍。其瞬时过表达显著提高了蓝莓果皮中VcCHS、VcCHI、VcF3H、VcDFR、VcANS和VcUFGT等花青素合成结构基因的表达水平。此外,VcGSTF19异源转化拟南芥tt19突变体恢复了突变体花青素积累,转基因莲座叶中花青素含量约为突变体的6.21倍。【结论】蓝莓VcGSTF19基因在花青素积累和转运中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 花青素 蓝莓 Phi亚家族谷胱甘肽转移酶 基因克隆 功能研究
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石杉碱甲生物合成研究进展
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作者 雷明 欧夏莲 +4 位作者 张羽 白镇瑜 李翠 冯世鑫 张占江 《广西科学》 北大核心 2025年第5期1026-1041,共16页
石杉碱甲(Huperzine A,HupA)是从石杉科(Huperziaceae)植物及其内生真菌中分离提取到的一种生物碱,临床上主要用于阿尔茨海默病(Alzheimer′s Disease,AD)、精神分裂症、重症肌无力等病证的缓解和治疗。本文描述了产HupA植物的组织培养... 石杉碱甲(Huperzine A,HupA)是从石杉科(Huperziaceae)植物及其内生真菌中分离提取到的一种生物碱,临床上主要用于阿尔茨海默病(Alzheimer′s Disease,AD)、精神分裂症、重症肌无力等病证的缓解和治疗。本文描述了产HupA植物的组织培养和内生真菌的相关研究,介绍了HupA的化学合成研究进展,重点综述了HupA的生物来源、合成通路与功能基因的研究进展,并对未来利用微生物或异源植物等底盘细胞工业化量产HupA的关键技术突破口进行了探讨,旨在基于HupA的胆碱酯酶抑制特性及其生物合成通路,为神经退行性疾病的治疗、产HupA生物资源的合理利用及规模化生产提供参考。 展开更多
关键词 石杉碱甲 阿尔茨海默病 组织培养 内生真菌 生物合成通路 功能基因
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