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拟南芥Ran2基因的原核表达及产物的纯化 被引量:6
1
作者 马立安 江涛 张忠明 《长江大学学报(自科版)(中旬)》 CAS 2007年第1期45-47,60,共4页
采用RT-PCR方法扩增Ran2cDNA完整的编码区序列,构建pTYB2-Ran2重组质粒,转化大肠杆菌ER2566,经IPTG诱导蛋白表达后SDS-PAGE分析表达产物及存在形式。结果表明,表达的蛋白26ku与预期的理论值一致,并以包涵体形式存在;包涵体经纯化、破碎... 采用RT-PCR方法扩增Ran2cDNA完整的编码区序列,构建pTYB2-Ran2重组质粒,转化大肠杆菌ER2566,经IPTG诱导蛋白表达后SDS-PAGE分析表达产物及存在形式。结果表明,表达的蛋白26ku与预期的理论值一致,并以包涵体形式存在;包涵体经纯化、破碎变性、复性及PBS透析,得到纯度较高的表达蛋白(Ran2)。 展开更多
关键词 拟南芥(Arnbidopsis thaliana) 小GTP结合蛋白 ran2基因 原核表达 蛋白纯化
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拟南芥Ran2小GTP结合蛋白抗血清的制备及其FITC荧光标记 被引量:2
2
作者 马立安 江涛 张忠明 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期439-442,共4页
将原核表达、纯化的Ran2蛋白对新西兰兔进行免疫制备抗血清,ELISA测定其效价为1∶51 200。免疫印迹分析表明,原核表达、纯化的Ran2和拟南芥可溶性蛋白杂交带均在26 ku处。FITC荧光标记抗体检测Ran2绿色杂交带主要出现在细胞分裂间期的... 将原核表达、纯化的Ran2蛋白对新西兰兔进行免疫制备抗血清,ELISA测定其效价为1∶51 200。免疫印迹分析表明,原核表达、纯化的Ran2和拟南芥可溶性蛋白杂交带均在26 ku处。FITC荧光标记抗体检测Ran2绿色杂交带主要出现在细胞分裂间期的核膜上。 展开更多
关键词 ran2小GTP结合蛋白 抗血清 免疫印迹 FITC荧光标记
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拟南芥Ran2基因超表达和RNAi载体的构建 被引量:1
3
作者 马立安 张忠明 《长江大学学报(自科版)(中旬)》 CAS 2007年第2期41-44,共4页
根据编码拟南芥小GTP结合蛋白的Ran2基因cDNA全序列设计超表达引物和序列内部第397-610bp之间序列设计RNAi引物,以pMD18-T-Ran2为模板,用PCR方法分别扩增出666bp和214bp的片段,分别连接至双元表达载体和RNAi载体上,得到了植物超表达载体... 根据编码拟南芥小GTP结合蛋白的Ran2基因cDNA全序列设计超表达引物和序列内部第397-610bp之间序列设计RNAi引物,以pMD18-T-Ran2为模板,用PCR方法分别扩增出666bp和214bp的片段,分别连接至双元表达载体和RNAi载体上,得到了植物超表达载体pBI-Ran2和RNAi载体Hellsgate2-Ran2,并用电转化法导入农杆菌GV3101菌株中,PCR扩增结果表明所构建的植物超表达载体pBI-Ran2和RNAi载体Hellsgate2-Ran2已导入农杆菌。 展开更多
关键词 ran2 超表达载体 RNAI载体 电转化法
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基于MIC的RAN2并行化设计与实现
4
作者 蔡晓龙 《赤峰学院学报(自然科学版)》 2015年第17期22-25,共4页
RAN2是线性同余随机数发生器中的一种,因其周期长且随机性好广为人们应用.为了提升RAN2的产生速度,本文在研究RAN2串行算法的基础上,利用Simple skip ahead方法对其进行并行化.实验结果显示,并行化后的RAN2通过了Test U01的455项测试,... RAN2是线性同余随机数发生器中的一种,因其周期长且随机性好广为人们应用.为了提升RAN2的产生速度,本文在研究RAN2串行算法的基础上,利用Simple skip ahead方法对其进行并行化.实验结果显示,并行化后的RAN2通过了Test U01的455项测试,与串行结果相同.相对于CPU单线程,MIC平台下的最高加速比为17.25. 展开更多
关键词 随机数发生器 ran2 并行化 MIC
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拟南芥Ran小GTP结合蛋白在细胞有丝分裂中的定位 被引量:3
5
作者 马立安 江涛 张忠明 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期701-704,共4页
分别采用RT-PCR和直接荧光免疫方法分析Ran2 mRNA在拟南芥不同组织器官中的表达及Ran2的亚细胞定位。结果表明,Ran2基因在拟南芥根、茎、叶和花中均有表达;Ran2蛋白在细胞分裂间期主要定位于核膜周边,在后期定位于赤道板上和纺锤体上,... 分别采用RT-PCR和直接荧光免疫方法分析Ran2 mRNA在拟南芥不同组织器官中的表达及Ran2的亚细胞定位。结果表明,Ran2基因在拟南芥根、茎、叶和花中均有表达;Ran2蛋白在细胞分裂间期主要定位于核膜周边,在后期定位于赤道板上和纺锤体上,末期又回到子细胞核膜周边。 展开更多
关键词 拟南芥ran2小GTP结合蛋白 FITC-anti-ran2抗体 亚细胞定位
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3种植物Ran基因的克隆及序列分析 被引量:1
6
作者 马立安 张忠明 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第34期17281-17283,共3页
[目的]研究洋葱、大蒜和油菜中Ran基因与拟南芥Ran2基因的同源性,以确定3种植物材料能否作为拟南芥的替代材料研究Ran的定位。[方法]采用RT-PCR方法,以拟南芥Ran2的引物分别从洋葱、大蒜和油菜分裂细胞提取的总RNA中克隆出同源基因,进... [目的]研究洋葱、大蒜和油菜中Ran基因与拟南芥Ran2基因的同源性,以确定3种植物材料能否作为拟南芥的替代材料研究Ran的定位。[方法]采用RT-PCR方法,以拟南芥Ran2的引物分别从洋葱、大蒜和油菜分裂细胞提取的总RNA中克隆出同源基因,进行测序、比对分析。[结果]洋葱、大蒜和油菜的Ran基因开放阅读框分别为666、663和666bp;分别编码221、220和221个氨基酸,分子量约24.3kD;与拟南芥AtRan2氨基酸序列同源性分别为99.1%、100.0%(除末端缺少1个天冬氨酸D外)和96.4%;进化树分析显示洋葱和大蒜Ran基因与拟南芥进化关系更近。[结论]为进一步研究植物Ran基因的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 植物Ran 拟南芥ran2 RT-PCR 序列分析
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Cloning and Sequence Analysis of Three Plant Ran Genes 被引量:1
7
作者 马立安 张忠明 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2010年第1期21-24,共4页
[Objective]The aim was to study homology between Ran gene in Allium cepa,Allium sativum and Brassica napus and Ran2 gene in Arabidopsis in order to determine whether three kinds of plant material as substitute for Ara... [Objective]The aim was to study homology between Ran gene in Allium cepa,Allium sativum and Brassica napus and Ran2 gene in Arabidopsis in order to determine whether three kinds of plant material as substitute for Arabidopsis. [Method]By using RT-PCR method,homology gene was cloned from totoal RNA which extracted from splinter cells of Allium cepa,Allium sativum and Brassica napus with Arabidopsis Ran2 primer,then,carrying out sequence and comparative analysis. [Result]The results showed that the open reading frames of Ran genes in Allium cepa,Allium sativum and Brassica napus were 666,663,666 bp,coding 221,220 and 221 amino acids respectively,with the molecular weight of 24.3 kDa. The sequence analysis showed that the amino acid homology of Ran genes between Allium cepa,Allium sativum,Brassica napus and Arabidopsis Ran2 were respectively 99.1 %,100 % (except an Asp D at Allium sativum C terminal),96.4 %. The phylogenetic tree indicated that Ran genes from Allium cepa and Allium sativum had closer evolutionary relationship with Arabidopsis Ran2. [Conclusion]The research laid a foundation for further study on the biological function of plant Ran gene. 展开更多
关键词 Plant Ran Arabidopsis ran2 RT-PCR Sequence analysis
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用酵母双杂交系统筛选与拟南芥成膜素相关蛋白(PhrIP1)相互作用的蛋白质
8
作者 马立安 王芳 张忠明 《长江大学学报(自科版)(中旬)》 CAS 2007年第4期58-61,共4页
用酵母双杂交系统,以pEG202-PhrIP1为诱饵筛选拟南芥AD-cDNA文库,寻找与成膜素相关蛋白(PhrIP1)相互作用的蛋白质。结果表明,在5×106个转化子中得到6个阳性克隆,经测序及体外蛋白质相互作用证实,得到与PhrIP1相互作用的2个靶蛋白,... 用酵母双杂交系统,以pEG202-PhrIP1为诱饵筛选拟南芥AD-cDNA文库,寻找与成膜素相关蛋白(PhrIP1)相互作用的蛋白质。结果表明,在5×106个转化子中得到6个阳性克隆,经测序及体外蛋白质相互作用证实,得到与PhrIP1相互作用的2个靶蛋白,即Ran2小GTP结合蛋白和CIPK6钙调节激酶。 展开更多
关键词 酵母双杂交系统 成膜素相关蛋白(PhrIP1) ran2小GTP结合蛋白 CIPK6钙调节激酶
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XDK型高效吸附剂在大亚湾核电站超高压变压器油处理中的应用 被引量:5
9
作者 任乔林 田世杰 +4 位作者 陶颍 王开林 何国泉 卢理成 胡恚然 《变压器》 北大核心 2000年第2期34-37,共4页
介绍了用XDK吸附剂对大亚湾核电站主变压器油进行处理的经验。
关键词 超高压变压器 吸附剂 变压器油处理 XDK型
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基于RanBP2介导的TRPV1 SUMO化修饰探讨芩百清肺浓缩丸抑制气道神经源性炎症的机制
10
作者 贾维刚 周迎春 +2 位作者 曲龙 袁星星 冯丽辉 《中医药信息》 2025年第11期9-15,共7页
目的:观察芩百清肺浓缩丸对RanBP2介导的TRPV1 SUMO化修饰的影响,从而阐明其抑制气道神经源性炎症的分子机制。方法:选择人神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y),采用缓激肽和辣椒素联合诱导构建PIC细胞模型,给予芩百清肺浓缩丸含药血清和RanBP... 目的:观察芩百清肺浓缩丸对RanBP2介导的TRPV1 SUMO化修饰的影响,从而阐明其抑制气道神经源性炎症的分子机制。方法:选择人神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y),采用缓激肽和辣椒素联合诱导构建PIC细胞模型,给予芩百清肺浓缩丸含药血清和RanBP2抑制剂干预。光学显微镜观察SH-SY5Y形态的变化,ELISA法检测神经肽SP和CGRP的含量,免疫荧光染色检测RanBP2和TRPV1蛋白的表达,免疫共沉淀检测TRPV1蛋白的SUMO化修饰。在此基础上,通过Transwell将SH-SY5Y与人原代气道平滑肌细胞(HTSMC)共培养;光学显微镜观察HTSMC形态的变化,细胞划痕实验检测细胞迁移水平,ELISA法检测IL-6、IL-8的含量。结果:与模型组比较,芩百清肺浓缩丸能够显著抑制SH-SY5Y细胞SP和CGRP的分泌,下调RanBP2蛋白的表达和TRPV1蛋白的SUMO化修饰(P<0.01);能够显著抑制HTSMC的迁移率以及IL-6、IL-8分泌(P<0.01)。结论:芩百清肺浓缩丸能够通过抑制RanBP2调控TRPV1蛋白的SUMO化修饰,实现抑制PIC气道神经源性炎症的作用。 展开更多
关键词 芩百清肺浓缩丸 Ran结合蛋白2 瞬时受体电位香草素受体1 SUMO化修饰 气道神经源性炎症
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RANBP2基因突变致家族性急性坏死性脑病患儿的诊治并文献复习 被引量:5
11
作者 罗泽民 李久伟 +3 位作者 刘星宇 蒋琼 朱书瑶 谢丹凤 《中华妇幼临床医学杂志(电子版)》 CAS 2020年第4期398-408,共11页
目的探讨RANBP2基因突变致家族性急性坏死性脑病(ANE1)的临床特征、诊治及预后。方法选择2018年1月及2019年3月,于北京儿童医院(患儿1)及四川省妇幼保健院(患儿2)确诊的2例RANBP2基因突变所致ANE1患儿为研究对象。回顾性分析其临床病例... 目的探讨RANBP2基因突变致家族性急性坏死性脑病(ANE1)的临床特征、诊治及预后。方法选择2018年1月及2019年3月,于北京儿童医院(患儿1)及四川省妇幼保健院(患儿2)确诊的2例RANBP2基因突变所致ANE1患儿为研究对象。回顾性分析其临床病例资料,包括临床表现、实验室检查结果、头颅MRI特征、治疗及随访结果等。同时,检索国内外数据库中RANBP2基因突变所致ANE1患者相关文献进行复习。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果①临床病例资料:患儿1系发热后头痛、嗜睡、精神反应差、表情淡漠、直线行走不稳、近期记忆力下降;患儿2系甲型流感病毒感染后,出现发热、头痛、呕吐、进行性意识障碍伴面瘫。2例患儿头颅MRI检查均提示丘脑、岛叶、脑桥、外囊等多部位对称性损害,部分囊性改变。基因检测结果显示,2例患儿均为RANBP2基因第12外显子c.1754 C>T(p.Thr585Met)杂合错义突变;经丙种球蛋白、糖皮质激素调节免疫功能治疗,以及“线粒体鸡尾酒疗法”修复线粒体功能等治疗后,患儿颅内病灶均好转,精神及运动能力均恢复。②文献复习:总结文献报道的74例及本组2例RANBP2基因突变所致ANE1患者临床特征如下。其发病年龄为5个月至40岁,首发年龄中位数为3.5岁,男女患者比例为35∶41。其主要临床表现中,发热为82.5%(47/57),癫痫发作为81.1%(43/53),局灶性神经功能障碍(FND)为28.6%(8/28),脑病为93.4%(71/76);脑脊液蛋白升高(EP)为90.3%(56/62),脑脊液细胞数增多(Pl)为28.6%(8/28)。患儿头颅MRI/CT检查提示的病变部位,主要位于丘脑(83.1%,49/59),脑干(72.9%,43/59),颞叶(71.2%,42/59),小脑(26.3%,5/19),脊髓(13.8%,4/29),基底节(8.5%,5/59)。结论RANBP2基因突变所致ANE1,具有典型临床症状和特征性头颅MRI表现,临床对发热性疾病伴丘脑等部位对称性损害患者,应注意本病可能。对疑似该病的患者,应尽早进行RANBP2基因检测,将有助于明确本病诊断、进行合理治疗并改善患者预后。 展开更多
关键词 急性发热性脑病 家族性 Ran结合蛋白2 磁共振成像 遗传学 突变 误义 丘脑 儿童
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