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白念珠菌RIM101途径与环境pH的应答反应 被引量:5
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作者 李明春 梁勇 +1 位作者 魏东盛 邢来君 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期366-369,共4页
白念珠菌(Candida albicans)是一种重要条件致病菌,近年来引起人们的关注,大量的研究由此展开。对环境的改变积极做出应答是白念珠菌致病的重要条件。外界环境尤其是pH的变化影响着白念珠菌的形态和毒力。RIM101途经是真菌中一种保守的... 白念珠菌(Candida albicans)是一种重要条件致病菌,近年来引起人们的关注,大量的研究由此展开。对环境的改变积极做出应答是白念珠菌致病的重要条件。外界环境尤其是pH的变化影响着白念珠菌的形态和毒力。RIM101途经是真菌中一种保守的信号转导途径,白念珠菌也存在RIM101途经,并且该途径至少部分地控制着细胞对pH的应答。这里主要综述了近年来有关白念珠菌RIM101途径、pH应答及两者相互关系的研究。 展开更多
关键词 白念珠菌 rim101途经 pH应答 rim101p
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酿酒酵母细胞基因组中与转录因子Rim101亚细胞定位相关的磷酸酶和激酶基因的筛选 被引量:1
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作者 张艳 王頔 +1 位作者 赵运英 蒋伶活 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第5期9-14,共6页
Rim101是一个具有锌指结构的转录因子,在调控酿酒酵母细胞耐受碱性和高盐环境、钙离子稳态、细胞分裂以及硒毒性方面起作用。前人研究结果显示,细胞周期依赖性激酶基因PHO85的缺失,导致Rim101蛋白在细胞核内积累。为了探索Rim101亚细胞... Rim101是一个具有锌指结构的转录因子,在调控酿酒酵母细胞耐受碱性和高盐环境、钙离子稳态、细胞分裂以及硒毒性方面起作用。前人研究结果显示,细胞周期依赖性激酶基因PHO85的缺失,导致Rim101蛋白在细胞核内积累。为了探索Rim101亚细胞定位的新调节因子,通过荧光显微镜技术对酿酒酵母细胞基因组中编码磷酸酶的73个非必需基因缺失株和编码激酶的139个非必需基因缺失株进行了筛选,发现编码磷脂酰肌醇磷酸(Ptd Ins P)的磷酸酶Sac1调控Rim101的亚细胞定位。 展开更多
关键词 rim101 Sac1 磷酸酶 激酶
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白念珠菌pH应答转录因子Rim101p在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 桂磊 郑雯 +1 位作者 邢来君 李明春 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期96-100,共5页
Rim101蛋白是白念珠菌中pH应答反应的重要转录因子.为进一步研究Rim101p的功能,采用PCR方法获得RIM101基因序列,并将其克隆入表达载体pET-21a,转化大肠杆菌表达菌BL21,通过摸索诱导条件使Rim101p在大肠杆菌中成功表达.EMSA实验结果进一... Rim101蛋白是白念珠菌中pH应答反应的重要转录因子.为进一步研究Rim101p的功能,采用PCR方法获得RIM101基因序列,并将其克隆入表达载体pET-21a,转化大肠杆菌表达菌BL21,通过摸索诱导条件使Rim101p在大肠杆菌中成功表达.EMSA实验结果进一步验证了重组Rim101p的活性. 展开更多
关键词 白念珠菌 rim101p EMSA
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酵母细胞中碱性应答蛋白Rim101与ESCRT复合物的相互调控作用
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作者 赵运英 王頔 曹春蕾 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期2574-2584,共11页
本研究采用同源重组、倍比稀释及荧光定位等方法研究了ESCRT基因对Rim101蛋白定位的影响及Rim101其对钙稳态相关基因VNX1和SPF1的调控作用。结果显示,7个ESCRT基因(SNF7, SNF8, VPS20,STP22, VPS25, VPS28和VPS36)的缺失导致GFP-Rim101... 本研究采用同源重组、倍比稀释及荧光定位等方法研究了ESCRT基因对Rim101蛋白定位的影响及Rim101其对钙稳态相关基因VNX1和SPF1的调控作用。结果显示,7个ESCRT基因(SNF7, SNF8, VPS20,STP22, VPS25, VPS28和VPS36)的缺失导致GFP-Rim101不能进入细胞核,VNX1基因的缺失不影响7个ESCRT缺失株对钙离子的敏感性,而SPF1基因的缺失导致7个ESCRT缺失株对钙离子更加敏感。研究表明ESCRT基因不仅调控Rim101的功能也影响其定位,VNX1和SPF1基因是Rim101组成型活性蛋白Rim101-531抑制ESCRT缺失株对钙离子敏感性所必需的,这些研究结果为进一步研究ESCRT的功能提供了基础。 展开更多
关键词 酿酒酵母 rim101 ESCRT VNX1 SPF1
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基于pH信号通路的白头翁汤正丁醇提取物对白念珠菌生物膜作用机制的研究 被引量:8
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作者 汪云霞 马克龙 +4 位作者 王艳 吴大强 邵菁 汪天明 汪长中 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期350-356,共7页
该文基于pH信号通路探讨白头翁汤正丁醇提取物(butyl alcohol extract of Baitouweng Decoction,BAEB)对白念珠菌生物膜的影响。以扫描电镜观察pH突变株生物膜形态结构; CLSM测量pH突变株生物膜厚度;酶标仪检测pH突变株生物膜活性;流式... 该文基于pH信号通路探讨白头翁汤正丁醇提取物(butyl alcohol extract of Baitouweng Decoction,BAEB)对白念珠菌生物膜的影响。以扫描电镜观察pH突变株生物膜形态结构; CLSM测量pH突变株生物膜厚度;酶标仪检测pH突变株生物膜活性;流式细胞仪检测pH突变株生物膜损伤; qRT-PCR法检测pH突变株生物膜相关基因的表达。结果显示,对生物膜结构,PHR1基因缺失造成结构缺陷,PHR1回补则基质较多; BAEB干预对该2株无明显影响。RIM101基因缺失或回补无明显结构损伤,但BAEB干预后,这2种菌株生物膜均被明显抑制。对生物膜厚度,PHR1基因缺失或PHR1回补的厚度降低;BAEB干预后,该2株厚度变化不明显。而RIM101基因缺失或回补对生物膜厚度影响不大;加入BAEB后,该2株生物膜厚度明显变薄。对生物膜活性,PHR1基因缺失、PHR1回补和RIM101基因缺失均造成活性降低,RIM101回补无明显变化;BAEB干预后,PHR1基因缺失、PHR1回补、RIM101缺失与RIM101回补的生物膜活性与干预前相比显著降低。对生物膜损伤程度,PHR1基因缺失、PHR1回补和RIM101基因缺失、RIM101回补均出现不同程度损伤;加入BAEB干预后,PHR1缺失或PHR1回补的损伤率差异并不大,但RIM101缺失或RIM101回补的损伤率显著升高。对基因表达水平,除HSP90基因上调外,PHR1缺失、PHR1回补、RIM101缺失、RIM101回补的ALS3,SUN41,HWP1,UME6和PGA10基因均出现了不同倍数的下调趋势。该研究表明,pH信号通路中PHR1和RIM101基因突变能提高菌株对于抗真菌药物BAEB的敏感性,从而抑制白念珠菌生物膜形成及相关基因的表达。 展开更多
关键词 白头翁汤正丁醇提取物 pH信号通路 PHR1基因 rim101基因 白念珠菌生物膜
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白头翁汤正丁醇提取物对酸性条件下白念珠菌pH突变株黏附的影响 被引量:4
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作者 汪云霞 马克龙 +4 位作者 王艳 吴大强 邵菁以 汪天明 汪长中 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期6009-6016,共8页
目的 基于pH信号通路探讨白头翁汤正丁醇提取物(butyl alcohol extract of Baitouweng Decoction,BAEB)对白念珠菌黏附的影响。方法 Spotassay检测酸性条件下pH突变株的活性;XTT法检测酸性条件下pH突变株黏附时的代谢活力;荧光显微镜观... 目的 基于pH信号通路探讨白头翁汤正丁醇提取物(butyl alcohol extract of Baitouweng Decoction,BAEB)对白念珠菌黏附的影响。方法 Spotassay检测酸性条件下pH突变株的活性;XTT法检测酸性条件下pH突变株黏附时的代谢活力;荧光显微镜观察酸性条件下pH突变株细胞黏附活力;正辛烷容纳法测定酸性条件下pH突变株疏水性;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测酸性条件下pH突变株黏附相关基因的表达。结果 512μg/m L BAEB对共培养24、48 h的pH突变株的活性影响不大;phr2/phr2在酸性条件下代谢活性低,512μg/m L BAEB可明显抑制白念珠菌野生株(WT)、PHR2回补菌株、rim101/rim101、RIM101回补菌株的代谢活性,对phr2/phr2代谢活性影响不大;512μg/m L BAEB可明显抑制WT、PHR2回补菌株、rim101/rim101、RIM101回补菌株的细胞黏附活力,phr2/phr2加药前后细胞黏附活性无明显变化;512μg/mL BAEB对WT、phr2/phr2、PHR2回补、rim101/rim101及RIM101回补菌株的细胞表面疏水性影响不明显;q RT-PCR法检测512μg/m L BAEB对pH突变株在酸性条件下黏附相关基因作用不明显,但1 024μg/m L BAEB则对大多数黏附相关基因有明显抑制作用。结论 BAEB在酸性条件下能一定程度抑制白念珠菌的黏附。 展开更多
关键词 白头翁汤 正丁醇提取物 pH信号通路 PHR2基因 rim101基因 白念珠菌 黏附
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利用定点突变分析白念珠菌依赖铁基因FRP1启动子元件 被引量:1
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作者 桂磊 梁勇 +3 位作者 魏东盛 郑雯 邢来君 李明春 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1348-1353,共6页
通过对白念珠菌高铁还原酶基因FRP1启动子进行突变分析,确认启动子中特殊调控元件。我们通过分析FRP1起始密码子上游1000bp序列发现在-160和-650处有2个推测的Rim101p结合位点,对其分别进行定点突变,然后构建启动子与报告基因LacZ融合质... 通过对白念珠菌高铁还原酶基因FRP1启动子进行突变分析,确认启动子中特殊调控元件。我们通过分析FRP1起始密码子上游1000bp序列发现在-160和-650处有2个推测的Rim101p结合位点,对其分别进行定点突变,然后构建启动子与报告基因LacZ融合质粒,转化整合到白念珠菌rim101-/-株和野生株中,检测不同缺铁条件下β-半乳糖苷酶活性。结果发现碱性条件,Rim101p能够正向调控FRP1的表达;启动子-160处突变对启动子功能影响较弱,而-650突变使启动子活性大大降低,此结果和双突变的结果相同,表明Rim101p主要通过与启动子-650处结合位点相互作用来调控FRP1的表达。 展开更多
关键词 定点突变 白念珠菌 rim101蛋白 高铁还原酶基因
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pH 调控临床光滑念珠菌生长的机制 被引量:1
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作者 刘静 陶丽 黄广华 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期214-225,共12页
光滑念珠菌Candida glabrata是仅次于白念珠菌C.albicans的第二大念珠菌病原体,在免疫缺陷人体中引发较高的发病率和死亡率。该物种能在复杂多变的宿主环境中生存,pH是宿主体内重要的环境因子,光滑念珠菌适应不同生态位中pH的能力与其... 光滑念珠菌Candida glabrata是仅次于白念珠菌C.albicans的第二大念珠菌病原体,在免疫缺陷人体中引发较高的发病率和死亡率。该物种能在复杂多变的宿主环境中生存,pH是宿主体内重要的环境因子,光滑念珠菌适应不同生态位中pH的能力与其致病性密切相关。本研究发现,pH能够影响光滑念珠菌细胞增殖,尤其在相对碱性的pH环境中,光滑念珠菌的生长受到显著抑制。进一步研究发现,pH感应途径关键调控因子Rim101、Rim8和Rim21在其中发挥重要调控作用,并介导TOR信号通路调控细胞增殖。同时发现碱性pH环境能够破坏光滑念珠菌细胞壁完整性。上述结果表明,碱性pH环境影响光滑念珠菌生长的抑制及细胞壁完整性,本研究可为该菌临床感染的防控提供参考。 展开更多
关键词 光滑念珠菌 环境pH 生长抑制 调控因子rim101 TOR信号通路
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