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基于RhoA/ROCK通路研究复方中药对腹水肉鸡心肌损伤的作用
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作者 康杰 王慧敏 +1 位作者 邓瑞强 段智变 《特产研究》 2025年第3期44-48,54,共6页
为分析RhoA/ROCK信号通路在肉鸡腹水综合征(Ascites syndrome, AS)心肌损伤中的作用及复方中药的防治机制,本研究选取100羽健康的罗斯肉鸡(7日龄)并随机分成5组(每组20只),即基础饲粮饲养对照组,多因素法构建的AS模型组,复方中药高、低... 为分析RhoA/ROCK信号通路在肉鸡腹水综合征(Ascites syndrome, AS)心肌损伤中的作用及复方中药的防治机制,本研究选取100羽健康的罗斯肉鸡(7日龄)并随机分成5组(每组20只),即基础饲粮饲养对照组,多因素法构建的AS模型组,复方中药高、低剂量治疗组以及L-精氨酸治疗组。观察临床症状和剖检变化,并通过HE染色和Masson染色分别观察35日龄肉鸡心脏组织结构变化和胶原纤维沉积;计算肉鸡腹水心脏指数(Ascites heart index, AHI);利用实时荧光定量PCR检测心脏组织MYPT1 mRNA的转录情况,ELISA法检测心脏组织RhoA/ROCK信号通路相关蛋白的表达。结果表明,与空白对照组相比,模型组肉鸡腹部膨大,触压有波动感,腹腔内呈现大量淡黄色液体,右心肥大,心脏组织结构排列紊乱,胶原纤维大量沉积,而且M组AHI显著升高(P <0.01);荧光定量PCR结果表明,心脏组织MYPT1 mRNA转录显著升高(P <0.01)。ELISA结果表明,RhoA、ROCK、P-MLC表达显著升高(P <0.01),而MLCP表达显著降低(P <0.01);与AS组相比,复方中药治疗组的肉鸡相关临床症状及上述指标明显改善。本研究发现,RhoA/ROCK通路介导的MLC磷酸化参与了AS中心肌损伤的发生,复方中药水提液可通过调节RhoA/ROCK抑制心肌损伤来有效防治AS。 展开更多
关键词 复方中药 肉鸡腹水综合征 心肌损伤 rhoa/ROCK通路
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Circ_BICD2调节miR-218-5p/RHOA轴对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响
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作者 刘彦杰 张晓敏 孙绪高 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2025年第3期359-364,共6页
目的:探讨环状非编码RNA(Circ)_BICD2调节微小RNA(miR)-218-5p/Ras同源基因家族成员A(RHOA)轴对口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:qRT-PCR检测4种OSCC细胞系(Cal-27、SCC-25、SCC-9、HSC-3)和人口腔角质细... 目的:探讨环状非编码RNA(Circ)_BICD2调节微小RNA(miR)-218-5p/Ras同源基因家族成员A(RHOA)轴对口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:qRT-PCR检测4种OSCC细胞系(Cal-27、SCC-25、SCC-9、HSC-3)和人口腔角质细胞HOK中Circ_BICD2、miR-218-5p、RHOA mRNA表达水平;SCC-25细胞分为对照组、sh BICD2组、sh NC组、sh BICD2+miR-218-5p inhibitor组、sh BICD2+inhibitor NC组。检测细胞凋亡、EMT相关蛋白及RHOA表达;验证miR-218-5p分别与Circ_BICD2、RHOA的靶向关系。结果:SCC-25细胞中Circ_BICD2、RHOA mRNA、miR-218-5p表达水平最为显著(P<0.05);miR-218-5p分别与Circ_BICD2、RHOA存在靶向结合位点。干扰BICD2可降低Circ_BICD2、RHOA表达,上调miR-218-5p,抑制细胞增殖及EMT,促进细胞凋亡,miR-218-5p inhibitor逆转了干扰BICD2对SCC-25细胞的恶性行为的抑制作用。结论:干扰Circ_BICD2表达可抑制SCC-25细胞增殖及EMT转化,诱导其凋亡,可能与调控miR-218-5p/RHOA轴有关。 展开更多
关键词 Circ_BICD2 口腔鳞癌 miR-218-5p/rhoa 增殖 凋亡 上皮间质转化
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基于RhoA/ROCK通路探讨多囊卵巢综合征的发病机制与中医药干预研究进展
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作者 陈茜 郑承红 +1 位作者 汪新妮 丑丹 《中南药学》 2025年第11期3305-3312,共8页
多囊卵巢综合征(PCOS)是一种常见的妇科内分泌紊乱疾病,影响女性身心健康。中医药具有多靶点、多通路、全身调理等特点,在防治PCOS中有显著的临床疗效,但其分子机制尚未明确。近年来,Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关的卷曲螺旋激酶(... 多囊卵巢综合征(PCOS)是一种常见的妇科内分泌紊乱疾病,影响女性身心健康。中医药具有多靶点、多通路、全身调理等特点,在防治PCOS中有显著的临床疗效,但其分子机制尚未明确。近年来,Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)通路在PCOS病理生理过程中的作用逐渐受到关注。本文综述了RhoA/ROCK通路的组成与基本功能,讲述其在PCOS相关的卵巢功能异常、胰岛素抵抗、慢性炎症和血管功能障碍等方面的研究进展。并总结目前中药单体、复方及中医外治法等通过调控RhoA/ROCK通路治疗PCOS的研究进展。旨在为深入理解PCOS的发病机制以及开发新的治疗策略提供参考。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 rhoa/ROCK通路 发病机制 中医药
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酸浆苦素B通过抑制RhoA/ROCK信号通路抑制结直肠癌细胞增殖侵袭和迁移并诱导凋亡
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作者 胡秀花 谭福勇 《中国组织化学与细胞化学杂志》 2025年第4期341-348,共8页
目的 探究酸浆苦素B(physalin B,PB)对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响,分析其机制是否与Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路有关。方法 选用CRC细胞SW480,在含不同浓度PB(5、10、20μmol/L)... 目的 探究酸浆苦素B(physalin B,PB)对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响,分析其机制是否与Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路有关。方法 选用CRC细胞SW480,在含不同浓度PB(5、10、20μmol/L)或PB+Rho/ROCK信号通路激动剂溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)(20μmol/L PB+50μmol/L LPA)的处理条件下,采用CCK-8法和Edu染色检测细胞增殖;利用流式细胞术和TUNEL染色;检测细胞凋亡;通过Transwell实验和划痕实验;检测细胞侵袭和迁移能力;采用Western blot;检测RhoA、ROCK及凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、caspase-3)的表达水平。结果 CCK-8和Edu染色检测显示,细胞增殖能力呈PB(5、10、20μmol/L)处理浓度依赖性下降。PB处理后,Transwell和划痕实验显示细胞侵袭与迁移能力下降,流式细胞术与TUNEL染色结果显示细胞凋亡率升高;Western blot检测发现Bax和caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2、RhoA和ROCK蛋白表达减少。在含PB+LPA(20μmol/L PB+50μmol/L LPA)处理条件下,细胞增殖、侵袭与迁移的下降,凋亡率的增加,Bcl-2、RhoA和ROCK蛋白表达的降低,以及Bax和Caspase-3蛋白表达的下调明显减少。结论 PB可能通过抑制RhoA/ROCK信号通路,抑制CRC细胞增殖、侵袭和迁移等恶性生物学行为,诱导CRC细胞凋亡,进而发挥抑制CRC的作用。 展开更多
关键词 酸浆苦素B rhoa/ROCK信号通路 结直肠癌 增殖 凋亡
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Retraction:Procaine inhibits the proliferation and migration of colon cancer cells through inactivation of the ERK/MAPK/FAK pathways by regulation of RhoA
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作者 Oncology Research Editorial Office 《Oncology Research》 2025年第4期991-991,共1页
The published article titled“Procaine inhibits the proliferation and migration of colon cancer cells through inactivation of the ERK/MAPK/FAK pathways by regulation of RhoA”has been retracted from Oncology Research,... The published article titled“Procaine inhibits the proliferation and migration of colon cancer cells through inactivation of the ERK/MAPK/FAK pathways by regulation of RhoA”has been retracted from Oncology Research,Vol.26,No.2,2018,pp.209–217. 展开更多
关键词 rhoa PROCAINE colon cancer cells erk mapk fak pathways regulation rhoa migration PROLIFERATION REGULATION
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大麻素受体1通过G_(αi/o)/RhoA信号通路促进急性肺损伤小鼠巨噬细胞M1极化 被引量:2
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作者 马秀珍 周妮 +2 位作者 郭思琪 王源媛 麦平 《上海交通大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期161-168,共8页
目的·探讨阻断大麻素受体1(cannabinoid receptor 1,CB1)对小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响及其潜在的分子机制。方法·将40只小鼠随机分为空白对照组、AM281(CB1拮抗剂)对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)... 目的·探讨阻断大麻素受体1(cannabinoid receptor 1,CB1)对小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响及其潜在的分子机制。方法·将40只小鼠随机分为空白对照组、AM281(CB1拮抗剂)对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组、LPS+AM281组,每组10只。利用LPS诱导建立小鼠ALI模型。经苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,H-E)染色观察各组小鼠肺组织病理表现并计算炎症评分。通过反转录和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测各组小鼠肺巨噬细胞M1型标志物[肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-12]和M2型标志物[精氨酸酶(arginase,Arg)、甘露糖受体C型2(mannose receptor,C type 2,Mrc2)、巨噬细胞半乳糖型凝集素1(macrophage galactose-type lectin 1,Mgl1)]的mRNA水平。体外培养人髓系白血病单核细胞THP-1,通过免疫荧光技术检测THP-1细胞中CB1和CB2的表达,并在进一步阻断CB1及抑制G_(αi/o)/RhoA信号通路后,检测M1型标志物的mRNA水平。结果·LPS组小鼠肺组织损伤明显,炎症评分明显升高;阻断CB1后,与LPS组相比,LPS+AM281组小鼠肺损伤得到改善,表现为肺泡壁毛细血管充血改善、肺间质及肺泡腔内炎症细胞浸润减少,炎症评分下降(P=0.007)。与对照组相比,LPS组小鼠肺组织中M1型标志物水平上调,而在阻断CB1后巨噬细胞极性发生改变,M1/M2比例发生反转(均P<0.05)。体外研究发现,巨噬细胞表达CB1和CB2,利用花生四烯基-2-氯乙酰胺(arachidonyl-2-chloroethylamide,ACEA)激活CB1可上调M1型标志物的表达,阻断CB1及选择性抑制G_(αi/o)/RhoA信号通路后,M1型标志物的表达均明显下调(均P<0.05)。结论·CB1在ALI中通过G_(αi/o)/RhoA信号通路促进巨噬细胞向M1极化,阻断CB1可改善肺损伤。 展开更多
关键词 急性肺损伤 大麻素受体1 巨噬细胞 M1极化 G_(αi/o)/rhoa信号通路
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芍药汤介导RhoA/ROCK信号通路改善Caco-2细胞炎症模型紧密连接蛋白损伤的作用机制 被引量:2
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作者 谢念佳 吴东升 +6 位作者 曹晖 张彧 阳玉婷 邹博 赵达 芦易 武明胜 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第13期70-77,共8页
目的:探讨芍药汤(SYT)介导Ras同源基因家族成员A/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶(RhoA/ROCK)信号通过改善脂多糖(LPS)诱导的人结肠癌上皮腺癌细胞(Caco-2)炎症模型紧密连接损伤的保护作用及干预机制。方法:将Caco-2细胞分为空白组,模型... 目的:探讨芍药汤(SYT)介导Ras同源基因家族成员A/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶(RhoA/ROCK)信号通过改善脂多糖(LPS)诱导的人结肠癌上皮腺癌细胞(Caco-2)炎症模型紧密连接损伤的保护作用及干预机制。方法:将Caco-2细胞分为空白组,模型组(LPS,10 mg·L^(-1)),芍药汤含药血清10%、15%、20%组,抑制剂组(Fasudil,25μmol·L^(-1)))。按分组干预24 h后,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞存活率。运用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组细胞中内皮素-1(ET-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组细胞RhoA、ROCK2、闭合蛋白-5(Claudin-5)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)的mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Claudin-5、ZO-1、RhoA、ROCK2的蛋白表达量。结果:与空白组比较,模型组Caco-2细胞活力显著降低(P<0.01),Caco-2细胞ET-1、TNF-α、IL-1β、IL-6表达显著升高(P<0.01),ZO-1、Claudin-5 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.01),RhoA、ROCK2的mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,芍药汤含药血清10%、15%、20%组细胞活力显著增高(P<0.01),细胞ET-1、TNF-α、IL-1β、IL-6表达显著降低(P<0.01),ZO-1、Claudin-5mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),RhoA、ROCK2的mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.01);与芍药汤含药血清10%组比较,抑制剂组及芍药汤含药血清15%、20%组ET-1、TNF-α、IL-1β、IL-6表达明显降低(P<0.05,P<0.01),ZO-1、Claudin-5mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),RhoA、ROCK2的mRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:芍药汤含药血清可降低LPS诱导的Caco-2细胞炎症因子及内皮素水平,改善Caco-2细胞炎症模型紧密连接损伤,其机制与调节RhoA/ROCK信号通路蛋白表达相关。 展开更多
关键词 芍药汤 人结肠癌上皮腺癌细胞(Caco-2) Ras同源基因家族成员A/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶(rhoa/ROCK)信号通路 紧密连接
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毛兰素通过调节HMGB1/RAGE-RhoA/ROCK1信号通路缓解特应性皮炎
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作者 徐可欣 王丹丹 +5 位作者 金泓宇 杜月 李莉 宋艺兰 延光海 李良昌 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第4期11-20,共10页
目的探究毛兰素(Erianin)在特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)中的作用及其在高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1,HMGB1)/晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)-Ras同源基因家族成员A(Ra... 目的探究毛兰素(Erianin)在特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)中的作用及其在高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1,HMGB1)/晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)-Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene family member A,RhoA)/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1(recombinant Rho associated coiled coil containing protein kinase 1,ROCK1)信号通路中的调控机制。方法1-氯-2,4-二硝基苯(1-Chloro-2,4-dinitrobenzene,DNCB)诱导BALB/c小鼠作为AD的模型,测量小鼠的皮肤厚度、脾和淋巴结的重量。甲苯胺蓝和HE染色检测小鼠的背部皮肤和耳朵的病理改变;ELISA检测炎症因子水平;肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激HaCaT细胞建立AD体外模型;采用流式细胞术检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS);免疫荧光法检测线粒体活性氧(mitochondrion reactive oxygen species,mtROS);TUNEL检测细胞凋亡情况;免疫蛋白印迹法检测HMGB1、RAGE、RhoA、ROCK1蛋白表达情况。结果在体内实验中毛兰素抑制皮肤厚度的增加,减轻脾和淋巴结重量,改善炎症细胞的浸润和肥大细胞脱颗粒,降低炎症因子水平(P<0.05)。在体外实验中,毛兰素减少TNF-α诱导的HaCaT细胞ROS、mtROS的产生(P<0.01)。毛兰素治疗后HMGB1、RAGE、RhoA及ROCK1的蛋白表达量下降(P<0.01);使用RAGE特异性阻断剂(TFA)处理r-HMGB1刺激的HaCaT细胞后,HMGB1的表达没有发生变化,RAGE、RhoA及ROCK1表达减少(P<0.01);在Rho激酶抑制剂Y-27632+r-HMGB1组中,除RAGE的表达没有降低,其余结果与TFA+r-HMGB1组相近。结论毛兰素可能通过调节HMGB1/RAGE-RhoA/ROCK1信号通路缓解特应性皮炎。 展开更多
关键词 毛兰素 特应性皮炎 HMGB1 RAGE rhoa ROCK1
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电针内关穴通过抑制RhoA/ROCK信号通路活化减轻脂多糖诱导脓毒症小鼠心功能障碍 被引量:1
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作者 卢颖琼 陈惠娟 +1 位作者 郑佳铃 郑晓燕 《广州中医药大学学报》 2025年第1期170-175,共6页
【目的】观察电针内关穴减轻脂多糖(LPS)诱导的脓毒症模型小鼠心功能障碍的作用机制。【方法】将48只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组,即正常对照组、生理盐水+电针组、脓毒症模型组、脓毒症+电针组。脓毒症模型组及脓毒症+电针组小鼠给予... 【目的】观察电针内关穴减轻脂多糖(LPS)诱导的脓毒症模型小鼠心功能障碍的作用机制。【方法】将48只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组,即正常对照组、生理盐水+电针组、脓毒症模型组、脓毒症+电针组。脓毒症模型组及脓毒症+电针组小鼠给予腹腔注射LPS(5 mg/kg)诱导脓毒症心肌损伤模型。LPS注射后立即对小鼠实施电针治疗。于LPS处理后6 h,采用彩色超声心动图监测小鼠左心室短轴收缩末期内径(LVIDs)和短轴缩短率(FS)。酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测心脏组织中Rho激酶(ROCK)1、ROCK2蛋白表达水平及肌球蛋白磷酸酶底物1(MYPT1)、肌球蛋白轻链2(MLC2)磷酸化水平。【结果】与正常对照组比较,脓毒症模型组小鼠LVIDs增加(P<0.05),FS下降(P<0.05),血清中TNF-α、IL-6含量均升高(P<0.001),心脏组织MYPT1磷酸化水平显著升高(P<0.05);与脓毒症模型组比较,脓毒症+电针组LVIDs降低(P<0.05),FS升高(P<0.05),血清中TNF-α、IL-6含量下降(P<0.05或P<0.01),MYPT1磷酸化水平显著降低(P<0.05)。各组ROCK1、ROCK2蛋白表达水平以及MLC2的磷酸化水平无显著性差异(P>0.05)。【结论】电针内关穴可能通过抑制心脏组织RhoA/ROCK信号通路活化,减轻脓毒症模型小鼠全身和局部炎性反应水平,改善心功能,产生心肌保护效应。 展开更多
关键词 电针 脓毒症 内关穴 心功能障碍 rhoa/ROCK信号通路 小鼠
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桂皮醛抑制RhoA/ROCK1/MLC通路改善膝骨关节炎小鼠滑膜巨噬细胞胞葬功能
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作者 苏子珊 于利凯 +4 位作者 田地 刘尚齐 王泽恩 王培民 张农山 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第9期1636-1643,共8页
目的探讨桂皮醛对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)小鼠滑膜病变的治疗作用,及其对滑膜巨噬细胞胞葬功能的调控机制。方法动物实验中,提取小鼠血清及滑膜组织,HE染色评估滑膜组织炎性细胞浸润;ELISA检测血清中白细胞介素等炎症因子... 目的探讨桂皮醛对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)小鼠滑膜病变的治疗作用,及其对滑膜巨噬细胞胞葬功能的调控机制。方法动物实验中,提取小鼠血清及滑膜组织,HE染色评估滑膜组织炎性细胞浸润;ELISA检测血清中白细胞介素等炎症因子含量;Western blot检测滑膜组织中Ras同系物家族成员A(Ras homolog family member A,RhoA)、Rho激酶1(Rho-associated kinase 1,ROCK1)、肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)及p-MLC蛋白的表达;RT-qPCR检测滑膜组织中的炎症因子及通路相关mRNA表达;TUNEL染色检测滑膜组织凋亡。细胞实验中,对干预后的RAW267.4细胞使用Western blot及RT-qPCR进行上述指标的检测,最后使用共聚焦显微镜检测胞葬功能。结果桂皮醛干预后,滑膜炎性浸润明显减少,RhoA/ROCK1/MLC信号通路的mRNA及蛋白表达明显下调,TUNEL染色荧光强度明显下降,巨噬细胞胞葬功能提高。结论桂皮醛可以通过抑制RhoA/ROCK1/MLC信号通路,增强巨噬细胞胞葬作用,进而改善滑膜组织炎症反应,延缓KOA小鼠病情进展。 展开更多
关键词 桂皮醛 胞葬 膝骨关节炎 滑膜 巨噬细胞 rhoa/ROCK1/MLC
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参附注射液通过NgR1/Lingo-1/p75NTR复合物及RhoA/ROCKⅡ信号通路减轻心肺复苏脑损伤机制的研究 被引量:1
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作者 肖佳佳 邓海霞 吴鑫宇 《中国中医急症》 2025年第1期33-36,50,共5页
目的观察参附注射液对心脏骤停后脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用,研究其是否通过调控NgR1/RhoA/ROCKⅡ信号通路及其上游因子Nogo受体相互作用蛋白1(Lingo-1)和p75神经营养因子受体(p75NTR),减轻脑损伤并促进神经轴突再生。方法制... 目的观察参附注射液对心脏骤停后脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用,研究其是否通过调控NgR1/RhoA/ROCKⅡ信号通路及其上游因子Nogo受体相互作用蛋白1(Lingo-1)和p75神经营养因子受体(p75NTR),减轻脑损伤并促进神经轴突再生。方法制备心脏骤停/心肺复苏大鼠模型,将大鼠分为模型组、参附组、拮抗剂组及参拮组。通过ELISA检测各组脑组织中NgR1、p75NTR、Lingo-1、RhoA和RockⅡ的表达水平,并通过HE染色观察脑组织损伤情况。结果ELISA结果显示,心脏骤停后大鼠脑皮层中,模型组的各指标表达在特定时间点显著升高,尤其在3 d时NgR1、p75NTR、RhoA和ROCKⅡ达到峰值,显著高于空白组(P<0.01);参附组、拮抗剂组及参拮组的各指标表达水平均显著低于模型组(P<0.01),其中参拮组在所有时间点均表现出较低的NgR1、p75NTR、Lingo-1、RhoA及ROCKⅡ水平,尤其在3 d和7 d的ROCKⅡ和RhoA表达方面,显著低于模型组(P<0.01),RhoA在7 d时显著低于空白组(P<0.01)。HE染色结果表明,参附组和参拮组在各时间点的脑组织结构恢复效果优于模型组,细胞排列改善,水肿减轻。结论参附注射液通过调控NgR1/RhoA/ROCKⅡ信号通路及其上游因子,减轻了心脏骤停后脑缺血再灌注损伤,促进了神经轴突再生与功能恢复。 展开更多
关键词 心肺复苏 脑损伤 参附注射液 NgR1/p75NTR/Lingo-1复合物 rhoa/RockⅡ信号通路 神经轴突再生
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醒脾胶囊调节5-HT-RhoA/ROCK2通路干预脾虚腹泻型肠易激综合征大鼠的机制 被引量:3
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作者 王港 崔伶雯 +6 位作者 刘相凝 朱镕鑫 黄明月 孙颖 焦伯阳 王然 李春 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第6期60-69,共10页
目的:探讨醒脾胶囊(XPC)在治疗脾虚腹泻型肠易激综合征(IBS-D)中的功效,并阐明其潜在的分子机制。方法:采用番泻叶给药联合约束应激和游泳疲劳连续14 d制备大鼠脾虚IBS-D模型。取10只SPF级健康大鼠作为正常组;将造模成功后的SPF级大鼠... 目的:探讨醒脾胶囊(XPC)在治疗脾虚腹泻型肠易激综合征(IBS-D)中的功效,并阐明其潜在的分子机制。方法:采用番泻叶给药联合约束应激和游泳疲劳连续14 d制备大鼠脾虚IBS-D模型。取10只SPF级健康大鼠作为正常组;将造模成功后的SPF级大鼠随机分为模型组、匹维溴铵组(1.5 mg·kg^(-1))和XPC低、高剂量组(0.135、0.54 g·kg^(-1)),每组10只。正常组与模型组大鼠灌胃蒸馏水,其余各组灌胃相应药液,每天1次,连续14 d。每日观测大鼠体质量和粪便情况,记录粪便Bristol评分;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清和结肠组织中5-羟色胺(5-HT)水平;利用透射电子显微镜观察结肠微绒毛和紧密连接等细微结构;通过苏木素-伊红(HE)染色法、免疫组织化学法和蛋白免疫印迹法(Western blot)评价结肠屏障完整性、检测肠道运动及相关通路蛋白的表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量下降和稀便率、稀便级及Bristol评分均显著升高(P<0.01),HE染色结果模型组见结肠黏膜层明显充血、水肿,提示其不完整,电镜结果提示结肠屏障结构致密度和完整性下降,微绒毛脱落与消失,紧密连接处发生明显增宽,结肠组织膜整合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-5(Claudin-5)表达显著下调(P<0.01),血清和结肠组织中5-HT含量显著升高(P<0.01),小肠推进率显著上升(P<0.01),结肠组织Ras同源物基因家族A(RhoA)、Rho相关卷曲螺旋激酶2(ROCK2)表达及肌球蛋白轻链(MLC_(20))的磷酸化程度均显著上调(P<0.01)。与模型组比较,各治疗组腹泻及其伴随症状和结肠组织的病理表现有不同程度缓解;其中,高剂量的XPC可有效缓解腹泻并促进结肠黏膜结构恢复整齐致密同时有效减轻充血水肿,显著上调Occludin、Claudin-5表达(P<0.01),明显降低血清和结肠组织中5-HT含量(P<0.05,P<0.01),显著减缓小肠推进率(P<0.01),明显下调结肠组织收缩蛋白RhoA、ROCK2表达及MLC_(20)的磷酸化程度(P<0.05,P<0.01)。结论:XPC可有效缓解脾虚腹泻症状并调节脑肠肽的分泌。其特色主要体现在从肠道黏膜保护与抑制肠道平滑肌收缩2个方面缓解脾虚IBS-D,其机制与调控5-HT-RhoA/ROCK2通路表达密切相关。 展开更多
关键词 腹泻型肠易激综合征 醒脾胶囊 5-羟色胺(5-HT)-Ras同源物基因家族A(rhoa)/Rho相关卷曲螺旋激酶2(ROCK2)2途径
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二味杜仲汤调控Rhoa/Rock通路防治绝经后骨质疏松症作用机制研究
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作者 吴佳宝 师建平 +6 位作者 刘钰 党赢 海日 王璐 李月炜 姚文智 张慧 《辽宁中医药大学学报》 2025年第2期24-30,共7页
目的 探讨二味杜仲汤调控Rhoa/Rock通路防治绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的机制,探讨“补肾清热”中医理论在绝经后骨质疏松症中的应用。方法 选取6月龄SPF级健康雌性未孕SD大鼠60只,设置为假手术组、模型组、... 目的 探讨二味杜仲汤调控Rhoa/Rock通路防治绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的机制,探讨“补肾清热”中医理论在绝经后骨质疏松症中的应用。方法 选取6月龄SPF级健康雌性未孕SD大鼠60只,设置为假手术组、模型组、二味杜仲汤低剂量组、二味杜仲汤中剂量组、二味杜仲汤高剂量组、雌激素组。术后12周,使用双能骨密度仪(DXA)检测大鼠骨密度,假手术组和模型组给予0.9%氯化钠溶液灌胃,二味杜仲汤低、中、高剂量组分别给予二味杜仲汤低、中、高剂量药液,雌激素组给予雌激素。指标检测:DXA检测大鼠骨密度;全自动生化分析仪检测大鼠血清中钙、磷含量的变化;HE染色观察股骨的病理变化;ELISA法测定碱性磷酸酶(ALP)、血清骨钙素(BGP)、骨保护素(OPG);Western Blot法检测骨组织中Rhoa、Rock1、Rock2的蛋白表达;Q-PCR法测定大鼠骨组织Rhoa、Rock1、Rock2 mRNA的表达。结果 与假手术组相比,模型组大鼠体质量增加明显(P<0.01),子宫系数降低显著(P<0.01);与模型组相比,二味杜仲汤低、中、高剂量组及雌激素组体质量明显下降(P<0.01),子宫系数明显上升(P<0.05)。HE染色结果显示:与模型组相比,二味杜仲汤各剂量组和雌激素组骨微结构明显改善,骨小梁排列较为紧密,脂肪细胞减少,骨髓腔内粒细胞数量明显增多。骨密度结果显示:与模型组相比,二味杜仲汤低、中、高剂量组及雌激素组骨密度显著上升(P<0.01);生化结果表明:与模型组相比,二味杜仲汤低、中、高剂量组及雌激素组血清钙磷含量明显升高(P<0.01)。ELISA结果显示:与模型组相比,二味杜仲汤低、中、高剂量组及雌激素组均有效降低了血清中的ALP、BGP含量(P<0.01),提高了OPG含量(P<0.01);Western Blot结果显示:与模型组相比,二味杜仲汤低、中、高剂量组及雌激素组Rhoa、Rock1、Rock2表达明显升高(P<0.01)。Q-PCR结果显示:与模型组相比,二味杜仲汤低、中、高剂量组及雌激素组Rhoa、Rock1、Rock2表达明显升高(P<0.01)。结论 二味杜仲汤可以改善骨组织的微结构,从而改善骨密度,以改善骨质疏松。其机制可能是通过调控Rhoa/Rock信号通路,提高成骨因子Rhoa、Rock1、Rock2的表达来实现的。 展开更多
关键词 二味杜仲汤 绝经后骨质疏松症 rhoa/Rock信号通路
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苓桂术甘汤对心肌梗死后心室重构及RhoA/ROCK信号通路的影响
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作者 任涵 赵婉竹 +4 位作者 王舒舒 蔡瑞 张远红 黄圣意 黄金玲 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第11期1-9,共9页
目的:探讨苓桂术甘汤对心肌梗死(MI)后心室重构(VR)小鼠及其对Ras同源基因家族成员A(Rho A)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路的影响。方法:通过手术结扎左前降支冠状动脉法建立小鼠心肌梗死模型,共60只,分为假手术组,模型组... 目的:探讨苓桂术甘汤对心肌梗死(MI)后心室重构(VR)小鼠及其对Ras同源基因家族成员A(Rho A)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路的影响。方法:通过手术结扎左前降支冠状动脉法建立小鼠心肌梗死模型,共60只,分为假手术组,模型组,苓桂术甘汤低、中、高剂量组(2.34、4.68、9.36 g·kg^(-1))及卡托普利组(3.25 mg·kg^(-1)),每组10只。灌胃4周后使用小动物多普勒超声检测各组小鼠心功能水平;苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠心肌组织形态学变化;马松(Masson)染色计算小鼠心肌组织胶原纤维沉积率;小麦胚芽凝集素(WGA)染色比较各组小鼠心肌细胞横截面积;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测纤维化相关蛋白,包括α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1);细胞凋亡相关蛋白,包括B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、切割型胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)的表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测通路相关基因Rho A、ROCK1、ROCK2 m RNA表达;Western blot检测Rho A、ROCK1、ROCK2蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组小鼠心功能水平显著下降,心肌组织形态学发生明显变化,心肌细胞横截面积显著增大(P<0.01);纤维化相关蛋白α-SMA、MMP-2、ColⅠ、ColⅢ表达显著上调(P<0.01),TIMP1蛋白表达显著下降(P<0.01);细胞凋亡相关蛋白Bax的表达显著上调(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.01);Rho A、ROCK1、ROCK2的m RNA和蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型组比较,苓桂术甘汤低、中、高组及卡托普利组明显逆转了模型组的上述实验结果(P<0.05,P<0.01),且呈剂量依赖性。结论:苓桂术甘汤可显著减轻小鼠心肌梗死后心肌纤维化、心肌肥大及心肌细胞凋亡,有效逆转心室重构,其机制可能与调控Rho A/ROCK信号通路有关。 展开更多
关键词 心室重构 心肌梗死 苓桂术甘汤 Ras同源基因家族成员A(rhoa)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路 心肌纤维化
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基于RHOA/ROCK1通路探讨脑心通胶囊抑制大鼠脑缺血再灌注损伤中周细胞收缩机制
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作者 文胤琏 尚津锋 +4 位作者 王伯洪 韦婉婷 张晓璐 黄贵金凤 刘欣 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第12期159-167,共9页
目的:基于Ras同源家族成员A(RHOA)/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1(ROCK1)通路介导的周细胞改变探讨脑心通胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法:90只大鼠随机分为假手术组,模型组,阳性药银杏提取物组(21.6 mg·kg^(-1)),... 目的:基于Ras同源家族成员A(RHOA)/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1(ROCK1)通路介导的周细胞改变探讨脑心通胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法:90只大鼠随机分为假手术组,模型组,阳性药银杏提取物组(21.6 mg·kg^(-1)),脑心通胶囊低、中、高剂量组(55、110、220 mg·kg^(-1)),每组15只,除假手术组外,均进行短暂大脑中动脉阻塞(tMCAO)造模。神经功能评分检测神经功能,激光散斑血流成像仪检测脑血流量,红四氮唑(TTC)染色计算脑梗死率,苏木素-伊红(HE)染色和尼氏染色观察病理改变,透射电镜观察周细胞形态,伊文思蓝染色观察血脑屏障破坏情况,试剂盒检测白蛋白、缺血修饰白蛋白水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RHOA、ROCK1、血小板衍生生长因子受体β(PDGFRB)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA和蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分下降,脑血流量减少百分比、脑梗死率增加(P<0.01),皮层神经元核固缩,有水肿表现,尼氏体数量减少,周细胞面积减少,皮层中白蛋白含量增加(P<0.05),缺血修饰白蛋白水平上升(P<0.01),RHOA、ROCK1、PDGFRB、α-SMA、MMP-2、MMP-9的mRNA和蛋白相对表达水平增加(P<0.01),ZO-1表达水平降低。与模型组比较,各给药组大鼠神经功能评分上升,脑血流量减少百分比、脑梗死率减少(P<0.01),皮层组织病理改变减轻,尼氏体数量增加,周细胞面积增多,皮层中白蛋白含量减少,缺血白蛋白水平降低(P<0.01),RHOA、ROCK1、PDGFRB、α-SMA、MMP-2、MMP-9的mRNA和蛋白相对表达水平降低(P<0.01),ZO-1的表达水平提高。其中,中剂量的脑心通胶囊对脑缺血再灌注损伤的改善效果最为明显。结论:脑心通胶囊能够恢复脑缺血再灌注损伤大鼠的血流供应,减少微循环障碍,保护血脑屏障,其作用机制可能与抑制RHOA/ROCK1信号通路,减少周细胞收缩相关。 展开更多
关键词 脑心通胶囊 脑缺血再灌注损伤 周细胞收缩 Ras同源家族成员A(rhoa)/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1(ROCK1)通路 药理机制
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吉马酮调节RhoA/ROCK信号通路对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 师红利 王莉 +3 位作者 胡帅 张慧慧 袁丽芳 张玲玥 《河北医学》 2025年第7期1063-1068,共6页
目的:探讨吉马酮基于RhoA/ROCK信号通路对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响。方法:将CRC细胞SW480细胞分为对照组、L-吉马酮组、M-吉马酮组、H-吉马酮组、Y-27632组、H-吉马酮+LPA组。分别利用CCK-8试剂盒、流式细胞术、划痕实验... 目的:探讨吉马酮基于RhoA/ROCK信号通路对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响。方法:将CRC细胞SW480细胞分为对照组、L-吉马酮组、M-吉马酮组、H-吉马酮组、Y-27632组、H-吉马酮+LPA组。分别利用CCK-8试剂盒、流式细胞术、划痕实验、Transwell法、western blot检测SW480细胞的增殖活性、凋亡、迁移、侵袭能力以及RhoA/ROCK信号通路蛋白表达情况。结果:与对照组的OD值、细胞凋亡率、划痕愈合率、侵袭细胞数、RhoA、ROCK蛋白表达比较,L-吉马酮组、M-吉马酮组、H-吉马酮组、Y-27632组细胞OD值、划痕愈合率、侵袭细胞数、RhoA、ROCK蛋白表达显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05);与H-吉马酮组比较,H-吉马酮+LPA组细胞OD值(P<0.001)、划痕愈合率(P<0.001)、侵袭细胞数(P<0.001)、RhoA(P<0.001)、ROCK(P<0.001)蛋白表达显著升高(P<0.05),细胞凋亡率(P<0.001)显著降低(P<0.05)。结论:吉马酮对CRC细胞恶性生物学行为的影响,可能是通过抑制RhoA/ROCK信号通路实现的。 展开更多
关键词 吉马酮 rhoa/ROCK信号通路 结直肠癌 增殖 凋亡
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大黄素抑制RhoA、ROCK表达减轻脂多糖诱导的足细胞损伤 被引量:2
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作者 甘源 范小光 +2 位作者 王丽姣 李国峰 周玗洁 《广州中医药大学学报》 2025年第4期962-968,共7页
【目的】观察大黄素对脂多糖(LPS)诱导的足细胞损伤的改善作用及机制。【方法】以人肾小球足细胞为研究对象,将其随机分为空白组,LPS组,大黄素低、中、高剂量组,溶血磷脂酸[LPA,RhoA/Rho蛋白相关卷曲螺旋激酶(ROCK)激活剂]组。细胞计数... 【目的】观察大黄素对脂多糖(LPS)诱导的足细胞损伤的改善作用及机制。【方法】以人肾小球足细胞为研究对象,将其随机分为空白组,LPS组,大黄素低、中、高剂量组,溶血磷脂酸[LPA,RhoA/Rho蛋白相关卷曲螺旋激酶(ROCK)激活剂]组。细胞计数试剂盒8(CCK-8)法和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色法测定足细胞增殖能力,Transwell实验检测足细胞迁移能力,流式细胞仪检测足细胞凋亡,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测足细胞上清液中炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平,Western Blot法检测足细胞中RhoA、ROCK蛋白表达水平。【结果】LPS组足细胞的光密度(OD)_(450 nm)、EdU阳性细胞率、迁移数低于空白组,细胞凋亡率,上清液中TNF-α、IL-1β、IL-18水平,细胞中RhoA、ROCK蛋白表达水平高于空白组,差异均有统计学意义(P<0.05);与LPS组比较,大黄素低、中、高剂量组足细胞的OD_(450 nm)、EdU阳性细胞率、迁移数升高,细胞凋亡率,上清液中TNF-α、IL-1β、IL-18水平,细胞中RhoA、ROCK蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);LPA组足细胞的OD_(450 nm)、EdU阳性细胞率、迁移数低于大黄素高剂量组,细胞凋亡率,上清液中TNF-α、IL-1β、IL-18水平,细胞中RhoA、ROCK蛋白表达水平高于大黄素高剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】大黄素可改善LPS诱导的足细胞损伤,其机制可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。 展开更多
关键词 大黄素 糖尿病肾病 rhoa Rho蛋白相关卷曲螺旋激酶 脂多糖 足细胞损伤
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利多卡因抑制RhoA/ROCK通路对食管癌细胞增殖侵袭血管生成拟态的影响
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作者 尼特伟布子 陈勇 +1 位作者 张玉锋 周平 《河北医学》 2025年第9期1446-1452,共7页
目的:探讨利多卡因抑制小GTP酶(RhoA)/Rho相关的蛋白激酶(ROCK)通路对食管癌(EC)细胞增殖、侵袭、血管生成拟态的影响。方法:体外培养人EC细胞系Eca-109,将其分为NC组、利多卡因低剂量组(利多卡因5mmoL/L)、利多卡因中剂量组(利多卡因10... 目的:探讨利多卡因抑制小GTP酶(RhoA)/Rho相关的蛋白激酶(ROCK)通路对食管癌(EC)细胞增殖、侵袭、血管生成拟态的影响。方法:体外培养人EC细胞系Eca-109,将其分为NC组、利多卡因低剂量组(利多卡因5mmoL/L)、利多卡因中剂量组(利多卡因10mmoL/L)、利多卡因高剂量组(利多卡因15mmoL/L)、利多卡因高剂量+RhoA/ROCK通路激活剂(LPA)组(15mmoL/L利多卡因+50μmoL/L LPA),分别采用克隆形成实验、Transwell小室实验、Matrigel管腔形成实验检测各组Eca-109细胞增殖、侵袭能力及血管生成;qRT-PCR实验检测各组Eca-109细胞中RhoA和ROCK mRNA表达量;Western blot检测各组Eca-109细胞中RhoA、ROCK、CCND1、Myc、VEGF、TIMP-1蛋白表达量。结果:与NC组相比,利多卡因低、中、高剂量组Eca-109细胞集落形成数量、侵袭数量、血管生成管状结构数量均减少,RhoA、ROCK mRNA及其蛋白表达量降低,CCND1、Myc、VEGF蛋白表达量也明显下降,TIMP-1蛋白表达量明显上升(P<0.05);与利多卡因高剂量组相比,利多卡因高剂量+LPA组Eca-109细胞集落形成数量、侵袭数量、血管生成管状结构数量增加,RhoA、ROCK mRNA及其蛋白表达量升高,CCND1、Myc、VEGF蛋白表达量也明显上升,TIMP-1蛋白表达量明显下降(P<0.05)。结论:利多卡因可通过抑制RhoA/ROCK通路抑制EC细胞增殖、侵袭以及血管生成拟态。 展开更多
关键词 食管癌 利多卡因 rhoa/ROCK通路 增殖 侵袭 血管生成拟态
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达格列净通过调节miR-199a-5p和ARHGAP21表达及抑制RhoA/ROCK通路减轻肺纤维化的机制
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作者 张炳丽 许文亚 +2 位作者 刘运婵 郑亚妹 谢甜 《热带医学杂志》 2025年第9期1157-1163,1194,F0004,共9页
目的研究达格列净通过调节miR-199a-5p和Rho GTP酶激活蛋白21(ARHGAP21)的表达及抑制RhoA/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路对肺纤维化(PF)的潜在治疗作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为正常组(未处理)、模型组、5 mg/kg达格列净组... 目的研究达格列净通过调节miR-199a-5p和Rho GTP酶激活蛋白21(ARHGAP21)的表达及抑制RhoA/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路对肺纤维化(PF)的潜在治疗作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为正常组(未处理)、模型组、5 mg/kg达格列净组、20 mg/kg达格列净组,每组6只,模型组、5 mg/kg达格列净组、20 mg/kg达格列净组通过气管内注射博莱霉素建立PF模型,5、20 mg/kg达格列净组分别给予5、20 mg/kg达格列净;苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色评估小鼠肺组织病理变化。将肺癌细胞A549分为miR-199a-5p模拟物(miR-199a-5p mimic)组和阴性对照(NC-mimic)组,分别转染miR-199a-5p mimic、NC-mimic慢病毒载体,RT-PCR和Western blot检测各组miR-199a-5p和ARHGAP21表达,双荧光素酶报告基因实验验证miR-199a-5p对ARHGAP21的靶向抑制作用,最后通过GLISA分析评估RhoA和ROCK的活性。结果HE染色显示,正常组小鼠肺组织肺泡结构完整,气道和肺泡壁清晰且无增厚;模型组肺泡结构破坏,肺泡壁增厚,并有明显的炎性细胞浸润;与模型组比较,5、20 mg/kg达格列净组小鼠肺组织肺泡结构较为完整,炎性细胞浸润减少,其中20 mg/kg达格列净组肺泡结构接近正常。Masson染色显示,正常组小鼠肺组织仅见少量胶原纤维沉积,模型组中蓝色胶原纤维沉积明显增多,差异有统计学意义(q=14.62,P<0.001),提示肺组织纤维化较重;与模型组比较,5、20 mg/kg达格列净组小鼠胶原纤维沉积明显减少,差异均有统计学意义(q=7.92、10.26,P均<0.001),其中20 mg/kg达格列净组纤维化改善更为显著。RT-PCR检测结果显示,与正常组比较,模型组肺组织中ARHGAP21表达水平显著降低,miR-199a-5p mRNA表达水平显著升高,差异均有统计学意义(q=8.59、33.44,P均<0.001);与模型组比较,5、20 mg/kg达格列净组ARHGAP21表达水平显著升高,miR-199a-5p mRNA表达水平显著降低,差异均有统计学意义(q=11.69、42.97,35.82、51.85,P均<0.001)。肺组织免疫组化检测结果进一步证实,正常组小鼠肺组织中ARHGAP21表达较高,呈现为广泛的棕色染色;模型组ARHGAP21表达显著减少,仅见少量染色;5、20 mg/kg达格列净组小鼠肺组织中ARHGAP21表达较模型组有所增加,其中20 mg/kg达格列净组表达接近正常组水平。细胞实验结果显示,miR-199a-5p mimic组中ARHGAP21 mRNA、蛋白相对表达表达水平显著低于NC-mimic组,差异均有统计学意义(t=11.76、10.50,P均<0.001)。Targetscan数据库分析结果显示,miR-199a-5p与ARHGAP21的3′UTR存在结合位点,并设计对应突变位点;双荧光素酶实验结果显示,ARHGAP21-WT-miR-199a-5p组相对荧光素酶活性显著低于ARHGAP21-WT-NC组,差异有统计学意义(q=26.16,P<0.001)。GLISA分析结果显示,模型组相对RhoA、ROCK活性显著高于正常组,差异均有统计学意义(q=52.50、40.30,P均<0.001);与模型组比较,5、20 mg/kg达格列净组相对RhoA、ROCK活性显著降低,差异均有统计学意义(q=17.44、15.41,38.51、35.75,P均<0.001)。结论达格列净可能通过下调miR-199a-5p、上调ARHGAP21以及抑制RhoA/ROCK信号通路,减轻PF的病理变化,具有潜在的治疗作用。 展开更多
关键词 肺纤维化 达格列净 miR-199a-5p ARHGAP21 rhoa/ROCK信号通路
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白芍总苷调控RhoA/ROCK1信号通路改善肠缺血再灌注大鼠肠屏障功能的研究
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作者 冯亚利 胡敏 +1 位作者 姜卫星 王亚博 《中国中医急症》 2025年第8期1335-1339,共5页
目的观察白芍总苷对肠缺血再灌注大鼠肠屏障功能的影响并探寻潜在机制。方法实验设假手术组、模型组、白芍总苷组、白芍总苷+Ras同源基因家族成员A(RhoA)拮抗剂组和白芍总苷+RhoA激动剂组,每组8只大鼠。肠缺血再灌注动物模型通过阻断肠... 目的观察白芍总苷对肠缺血再灌注大鼠肠屏障功能的影响并探寻潜在机制。方法实验设假手术组、模型组、白芍总苷组、白芍总苷+Ras同源基因家族成员A(RhoA)拮抗剂组和白芍总苷+RhoA激动剂组,每组8只大鼠。肠缺血再灌注动物模型通过阻断肠系膜上动脉1 h的方法制备。通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中肠屏障功能指标,测定肠含水量,通过HE染色检查肠组织形态结构变化,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肠组织中RhoA、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)mRNA水平,蛋白质印迹法(Western blotting)检测肠组织中RhoA、ROCK1、闭锁小带蛋白1抗体(ZO-1)、Occludin、Claudins-5蛋白水平。结果经白芍总苷或白芍总苷+RhoA拮抗剂治疗4周能够显著降低肠缺血再灌注模型大鼠血清中二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)、内毒素(ET)水平和肠含水量(P<0.05或P<0.01);明显改善肠组织病理性形态结构变化;降低RhoA、ROCK1 m RNA和蛋白水平,提高ZO-1、Occludin、Claudins-5蛋白水平(P<0.01)。RhoA拮抗剂能够明显增强白芍总苷对肠缺血再灌注大鼠各项指标的调控作用,RhoA激动剂则能够明显减弱白芍总苷上述作用(P<0.05或P<0.01)。结论白芍总苷具有改善肠缺血再灌注大鼠肠屏障功能的作用,其机制与抑制RhoA/ROCK1信号通路有关。 展开更多
关键词 肠缺血再灌注损伤 肠屏障功能 白芍总苷 rhoa/ROCK1信号通路 肠含水量 大鼠
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