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RFDD-PCR技术用于构建证的相关基因表达谱初探 被引量：2
1
作者 胡岳山 李杰芬 +2 位作者 王剑 高丽 谭宇蕙 《现代中西医结合杂志》 CAS 2004年第8期981-984,共4页
目的　运用限制性酶切片段差异显示 (RFDD -PCR)技术初步筛选支气管哮喘肾虚证的相关基因 ,以冀探讨构建中医证的相关基因表达谱的一种研究方法。方法　应用RFDD -PCR技术 ,收集支气管哮喘肾虚证患者治疗前后外周血 ,分离其总RNA ,进行D... 目的　运用限制性酶切片段差异显示 (RFDD -PCR)技术初步筛选支气管哮喘肾虚证的相关基因 ,以冀探讨构建中医证的相关基因表达谱的一种研究方法。方法　应用RFDD -PCR技术 ,收集支气管哮喘肾虚证患者治疗前后外周血 ,分离其总RNA ,进行DNaseI处理、合成双链cDNA、TaqI限切酶酶切、在其两端连上接头、特异配对于接头的引物来降落PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、AgNO3 染色、回收差异条带并重新PCR扩增、反向斑点杂交、测序、生物信息学分析。结果　共找到 36条差异条带 ,其中 2 5条能用斑点杂交验证 ,选取 3条测序 ,结果与基因库比较未发现同源序列。结论　 3条基因片段可能是与支气管哮喘肾虚证相关的新基因 ;RFDD -PCR技术不失为构建中医证的相关基因表达谱的一种好方法。 展开更多
关键词 rfdd-pcr 基因表达谱 肾虚证 支气管哮喘
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卵巢癌及癌旁正常卵巢组织中USP2、USP14和UBE4A的差异表达 被引量：4
2
作者 杨瑛 侯建青 +5 位作者 曲路云 王桂青 鞠红卫 赵志伟 于振海 羊惠君 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期504-506,共3页
目的:探讨泛素特异性蛋白酶(USP)2、14和泛素因子E4A(UBE4A)在卵巢浆液性囊腺癌及癌旁正常卵巢组织间的表达差异。方法:采用RFDD-PCR、半定量RT-PCR和免疫组织化学染色方法检测USP2、USP14和UBE4A在40例卵巢浆液性囊腺癌患者卵巢癌组织... 目的:探讨泛素特异性蛋白酶(USP)2、14和泛素因子E4A(UBE4A)在卵巢浆液性囊腺癌及癌旁正常卵巢组织间的表达差异。方法:采用RFDD-PCR、半定量RT-PCR和免疫组织化学染色方法检测USP2、USP14和UBE4A在40例卵巢浆液性囊腺癌患者卵巢癌组织及其癌旁正常卵巢组织上的表达差异。结果:泛素特异性蛋白酶USP2、USP14和UBE4A在卵巢浆液性囊腺癌组织中高表达,而在正常卵巢组织中无表达或低表达。结论:USP2、USP14和UBE4A在卵巢癌组织中表达上调,提示卵巢癌中泛素-蛋白酶体系统活动明显增强。 展开更多
关键词 卵巢癌 差异表达 rfdd-pcr 泛素-蛋白酶体系统
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卵巢癌组织与正常卵巢组织差异表达谱的初步分析 被引量：1
3
作者 侯建青 杨瑛 +1 位作者 王桂青 于振海 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1290-1292,共3页
目的:通过采用限制片段差异显示聚合酶链反应(RFDD-PCR)建立卵巢癌组织与正常卵巢组织基因差异表达谱,分析比较卵巢癌发病机制相关基因的表达差异。方法:采集上皮性卵巢癌手术患者的卵巢癌组织和正常卵巢组织,用RFDD-PCR技术平行检测,... 目的:通过采用限制片段差异显示聚合酶链反应(RFDD-PCR)建立卵巢癌组织与正常卵巢组织基因差异表达谱,分析比较卵巢癌发病机制相关基因的表达差异。方法:采集上皮性卵巢癌手术患者的卵巢癌组织和正常卵巢组织,用RFDD-PCR技术平行检测,对各组织间有表达差异的基因进行生物信息学分析,筛选与卵巢癌发病机制相关的基因。结果:运用RFDD-PCR技术,构建了两种不同组织的基因表达谱,通过对卵巢癌组织及正常卵巢组织差异表达谱的分析中发现与肿瘤的发生、发展密切相关的原癌基因和抑癌基因、细胞周期相关基因、增殖和凋亡相关基因、血管生长因子、代谢酶等6类基因36种因子的表达差异。结论:利用RFDD-PCR差异显示技术能够建立卵巢癌组织和正常卵巢组织基因差异表达谱,是对肿瘤的发病机制和寻找治疗靶点研究的一种有效的手段。 展开更多
关键词 卵巢癌 差异表达 rfdd-pcr
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差异显示技术对变异链球菌生物膜基因表达差异的分析 被引量：2
4
作者 黄正蔚 刘正 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期777-780,共4页
目的对生物膜和浮游状态下的变异链球菌细胞进行比较研究,采用限制性酶切差异显示技术比较分析两者的基因表达谱。方法分别收集变异链球菌浮游菌细胞与贴壁的生物膜细胞,分离纯化总RNA,对于逆转录获得的cDNA进行限制性酶切差异显示PCR技... 目的对生物膜和浮游状态下的变异链球菌细胞进行比较研究,采用限制性酶切差异显示技术比较分析两者的基因表达谱。方法分别收集变异链球菌浮游菌细胞与贴壁的生物膜细胞,分离纯化总RNA,对于逆转录获得的cDNA进行限制性酶切差异显示PCR技术(RFDD-PCR)比较分析两者的表达谱,对于获得的差异表达片段通过克隆测序并于BLAST比对获得这些片段的基因信息,进而推断其功能。结果通过对差异片段的分析,确证其中4条片段分属结构基fruA、SMU.438c、SMU.751与adhB/C。结论限制性酶切差异显示技术可用于分析生物膜形成过程中基因表达的差异。 展开更多
关键词 变异链球菌 限制性酶切差异显示技术 生物膜基因表达差异 差异显示技术 生物膜形成 基因表达差异 变异链球菌 差异表达片段 限制性酶切 基因表达谱 PCR技术 膜细胞
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