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LRP16基因启动子克隆及特征分析 被引量:6
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作者 卢学春 楼方定 +4 位作者 于力 徐周敏 韩为东 母义明 李明 《生物技术通讯》 CAS 2003年第1期20-22,共3页
克隆LRP16基因启动子分子,并对启动子特征进行分析,预测启动子区调控元件,为深入研究LRP16基因的表达调控机制奠定基础。在NCBI的人类基因组数据库中截取并下载LRP16基因转录起始位点5'侧翼区2.7kb的基因组序列,设计PCR引物,从健康... 克隆LRP16基因启动子分子,并对启动子特征进行分析,预测启动子区调控元件,为深入研究LRP16基因的表达调控机制奠定基础。在NCBI的人类基因组数据库中截取并下载LRP16基因转录起始位点5'侧翼区2.7kb的基因组序列,设计PCR引物,从健康外周血单个核细胞中扩增;利用Genomatix程序对5'侧翼区近1000bp进行启动子特征分析。获得了与GenBank序列一致、长度为2.7kb的LRP16基因启动子DNA序列,该序列具有典型的真核生物RNA聚合酶II启动子特征及多个核受体结合位点,如α视黄酸受体及RAR相关孤生受体。 展开更多
关键词 LRP16基因 启动子 克隆 特征分析 TATA盒 GC盒 白血病相关基因
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AFP抑制肝癌细胞中RA-RAR信号通路的传递 被引量:1
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作者 王珊珊 陈宁 +3 位作者 庞丽君 欧阳雅博 李刚 陈德喜 《河北医药》 CAS 2014年第24期3693-3695,共3页
目的探讨肝癌细胞系Hep G2和HLE中,AFP参与RA-RAR信号通路的作用方式及其意义。方法Western blotting检测这两种细胞中AFP与RAR的含量;ATRA处理细胞后,免疫荧光法检测细胞中RAR定位;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况;采用激光共聚焦显... 目的探讨肝癌细胞系Hep G2和HLE中,AFP参与RA-RAR信号通路的作用方式及其意义。方法Western blotting检测这两种细胞中AFP与RAR的含量;ATRA处理细胞后,免疫荧光法检测细胞中RAR定位;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况;采用激光共聚焦显微镜观察AFP与RAR在细胞中的定位情况;免疫共沉淀验证AFP与RAR的相互作用。结果 Western blotting结果显示Hep G2细胞为AFP阳性而HLE为阴性;免疫荧光结果显示加入ATRA后,RAR发生核转位和核聚集现象;FCM结果显示ATRA能够引起这两种肝癌细胞凋亡增加;激光共聚焦显微镜结果显示AFP与RAR在胞浆中存在共定位现象;免疫共沉淀结果证实在Hep G2细胞中AFP与RAR存在相互作用,而HLE因缺失AFP而检测不到。结论 AFP通过抑制RA-RAR信号通路的传递从而参与调控肝癌的发生发展。 展开更多
关键词 肝癌 AFP RAR 信号通路
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肝癌细胞中AFP与RAR相互作用的实验研究 被引量:1
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作者 王珊珊 庞丽君 +3 位作者 欧阳雅博 乔录新 陈德喜 李刚 《北京医学》 CAS 2017年第12期1258-1260,I0002,共4页
目的探讨甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)与维甲酸受体(retinoic acid receptor,RAR)之间的相互作用。方法采用免疫荧光、荧光能量共振转移(fluorescence resonance energy transfer,Fret)及免疫共沉淀实验验证肝癌细胞系Hep G2和SMMC-... 目的探讨甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)与维甲酸受体(retinoic acid receptor,RAR)之间的相互作用。方法采用免疫荧光、荧光能量共振转移(fluorescence resonance energy transfer,Fret)及免疫共沉淀实验验证肝癌细胞系Hep G2和SMMC-7721胞质中AFP与RAR之间的相互关系。结果在胞质中AFP与RAR存在共定位现象,Fret结果显示,两者之间存在很高的能量转移效率,分别为21%和19%。免疫共沉淀实验结果显示,胞质中AFP与RAR存在相互作用。结论 AFP与RAR存在相互作用,为后续研究AFP的生物学功能,以及维甲酸的药物疗效提供实验基础。 展开更多
关键词 甲胎蛋白 维甲酸受体 免疫共沉淀
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