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自噬相关基因在肺纤维化模型中的表达:生物信息学分析及实验验证
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作者 刘可新 郝凯敏 +1 位作者 庄文越 李正祎 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第5期1129-1138,共10页
背景:自噬对上皮细胞、成纤维细胞和肌成纤维细胞之间的应激作用与肺纤维化的形成过程密切相关。目的:筛选肺纤维化患者基因水平变化与自噬相关的基因,并探究其与肺纤维化患者预后的关联,以期为临床干预肺纤维化提供新的靶点。方法:以GS... 背景:自噬对上皮细胞、成纤维细胞和肌成纤维细胞之间的应激作用与肺纤维化的形成过程密切相关。目的:筛选肺纤维化患者基因水平变化与自噬相关的基因,并探究其与肺纤维化患者预后的关联,以期为临床干预肺纤维化提供新的靶点。方法:以GSE70866下载的基因表达谱数据集为训练集,利用R语言对肺纤维化患者和正常健康者之间基因表达进行差异分析并与自噬相关基因取交集,鉴定出变化最为显著的差异基因。运用多种分析方法筛选出关键预后基因,并构建基因预后模型。根据肺纤维化患者的风险评分分为高风险组和低风险组,应用Siena cohort和Leuven cohort验证集验证预后模型的有效性。并通过转化生长因子β1诱导HFL-1细胞(人胚肺成纤维细胞)建立肺纤维化细胞模型以及博莱霉素气管滴注建立小鼠肺纤维化动物模型验证预后基因的表达。结果与结论:①肺纤维化组织和正常组织之间存在2650个差异基因,其中与自噬相关基因有34个发生显著变化;②Siena cohort和Leuven cohort验证集的Kaplan-Meier生存分析曲线显示,高风险组的存活率明显比低风险组低;③筛选出3个与预后相关的自噬基因:骨髓瘤病病毒癌基因、趋化因子配体2、GABAA型受体相关蛋白样1;④体内外研究均显示与对照组相比,肺纤维化模型组骨髓瘤病病毒癌基因和趋化因子配体2 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05),而GABAA型受体相关蛋白样1 mRNA及蛋白表达有所降低(P<0.001);⑤结论:通过生物信息学方法分析了3个自噬相关基因在肺纤维化中的表达及其与肺纤维化患者预后的相关性,构建的预后模型对肺纤维化患者1,2,3年生存率具有良好的预测能力;并且通过体内和体外模型验证了在肺纤维化细胞和组织中骨髓瘤病病毒癌基因和趋化因子配体2呈高水平表达,GABAA型受体相关蛋白样1呈低水平表达。 展开更多
关键词 肺纤维化 自噬 生物信息学 差异表达基因 预后模型 R语言 博莱霉素 TGF-β1
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新型研发机构GMP中试平台推动CGT产品孵化的天津实践
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作者 原辉 张红海 +5 位作者 陈继生 司远 吴爽 李姗姗 程涛 张英驰 《中国细胞生物学学报》 2026年第1期234-240,共7页
中试是科研成果从实验室走向规模化生产的关键环节,是跨越科技成果转化“死亡之谷”的核心桥梁。细胞产品作为“活的药物”,其生产工艺复杂、质量控制难度极高。近年来,随着细胞与基因治疗产业的快速发展,传统的小规模实验室制备已难以... 中试是科研成果从实验室走向规模化生产的关键环节,是跨越科技成果转化“死亡之谷”的核心桥梁。细胞产品作为“活的药物”,其生产工艺复杂、质量控制难度极高。近年来,随着细胞与基因治疗产业的快速发展,传统的小规模实验室制备已难以满足临床转化与产业化需求。因此,建设符合药品生产质量管理规范(GMP)要求的中试平台已刻不容缓。该文以细胞生态海河实验室GMP中试平台为例,总结在硬件建设、GMP体系建设和科研立项等方面的实践举措,为同类项目提供参考与借鉴。 展开更多
关键词 细胞与基因治疗 新型研发机构 中试平台 药品生产质量管理规范 质量保证 质量控制
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亚洲大豆锈病抗性基因研究进展 被引量:1
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作者 卢自华 邓克林 +4 位作者 杨红丽 陈水莲 单志慧 郝青南 陈海峰 《中国油料作物学报》 北大核心 2025年第4期806-813,共8页
由豆薯层锈菌引起的亚洲大豆锈病对全球大豆产量造成严重威胁,以喷施化学药剂为主的防治方法既增加生产成本又会造成环境污染,亟需培育抗锈病大豆品种以优化防治方案。目前为止已定位到8个抗锈病基因位点(Rpp1、Rpp2、Rpp3、Rpp4、Rpp5... 由豆薯层锈菌引起的亚洲大豆锈病对全球大豆产量造成严重威胁,以喷施化学药剂为主的防治方法既增加生产成本又会造成环境污染,亟需培育抗锈病大豆品种以优化防治方案。目前为止已定位到8个抗锈病基因位点(Rpp1、Rpp2、Rpp3、Rpp4、Rpp5、Rpp6、Rpp7以及Rpp6907),相关抗锈基因的克隆以及大豆抗锈病分子机制的研究正在积极开展。本文对近年来大豆抗锈病基因的研究进展进行综述,归纳总结抗锈基因位点定位和功能基因挖掘相关研究,以及抗锈基因主要功能及分子机制,并对其在抗锈育种中的应用进行展望,以期为抗锈基因研究及品种培育提供参考。 展开更多
关键词 大豆锈病 抗病基因 基因功能 分子机制
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FGF2对小鼠肠道间质细胞R-spondin 1表达的调控作用
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作者 李景聪 赵涵 +3 位作者 林巧雯 孙宏翔 苏冰 伍宁波 《上海交通大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第8期939-948,共10页
目的·初步探究成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)对小鼠结肠CD34^(+)CD81^(+)间质细胞R-spondin 1(Rspo1)表达的调控作用及机制。方法·利用流式细胞术分选Rspo1-tdTomato荧光报告基因小鼠结肠中CD45^(-)C... 目的·初步探究成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)对小鼠结肠CD34^(+)CD81^(+)间质细胞R-spondin 1(Rspo1)表达的调控作用及机制。方法·利用流式细胞术分选Rspo1-tdTomato荧光报告基因小鼠结肠中CD45^(-)CD326^(-)CD31^(-)GP38^(+)CD81^(+)Rspo1-tdTomato^(+)细胞,并进行体外培养。运用流式细胞术检测培养14 d后该类细胞表面蛋白标志物分子的表达情况。通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测该细胞分别在FGF2、FGF9、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、血小板衍生生长因子-bb(platelet-derived growth factor-bb,PDGFbb)、胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF1)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)刺激条件下Rspo1的表达情况。通过转录组测序和生物信息学方法分析FGF2调控Rspo1表达的信号通路,并用信号通路抑制剂及qPCR进行初步验证。结果·流式分选得到的小鼠结肠间质细胞经过体外培养14 d后,能够表达CD34、CD81和糖蛋白GP38,而不表达CD45、CD326、CD31等其他细胞谱系标志分子。qPCR结果发现,20 ng/mL的FGF2即可显著抑制该细胞Rspo1的表达,其他生长因子则无显著抑制作用。转录组测序和生物信息学分析结果显示,丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)信号通路可能是FGF2调节Rspo1表达的关键信号通路。qPCR结果显示,丝裂原细胞外激酶1/2(mitogen extracellular kinase 1/2,MEK1/2)抑制剂U0216预处理可逆转FGF2对Rspo1表达的抑制作用。结论·FGF2可能通过MEK1/2-细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase 1/2, ERK1/2)通路抑制小鼠结肠CD34^(+)CD81^(+)间质细胞Rspo1的表达。 展开更多
关键词 R-spondin 1基因 成纤维细胞生长因子2 CD34^(+)CD81^(+)间质细胞 丝裂原活化蛋白激酶通路
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野菊花NBS-LRR基因家族的鉴定和生物信息学分析
5
作者 叶福民 闫烨 +5 位作者 张晓波 张文洋 李振 徐敏 庄得凤 阮芳 《分子植物育种》 北大核心 2025年第6期1790-1799,共10页
NBS-LRR类基因是植物R基因中最大的一类,对于抵抗病原体侵染发挥重要作用。本研究利用生物信息学,从野菊花的56870个基因中,筛选出343个编码NBS类蛋白的基因,其中N型218个,NL型17个,CNL型15个。进一步对野菊花中同时包含NBS和LRR结构域... NBS-LRR类基因是植物R基因中最大的一类,对于抵抗病原体侵染发挥重要作用。本研究利用生物信息学,从野菊花的56870个基因中,筛选出343个编码NBS类蛋白的基因,其中N型218个,NL型17个,CNL型15个。进一步对野菊花中同时包含NBS和LRR结构域的32个植物抗病基因(NBS-LRR)家族成员的基本理化性质、蛋白质的亚细胞定位、进化树的构建、基因结构、保守结构域和保守基序进行分析。结果发现野菊花NBS-LRR基因家族主要定位在细胞质和细胞膜上,推测其与保证细胞正常活动和防止病原菌进入细胞内部有一定关联。32个NBS-LRR基因中有17个蛋白序列的稳定性较差;31个蛋白序列具有亲水性。进化树分析结果表明CNL和NL两种类型的基因进化路径的相似性较高。保守性分析表明,motif 1、motif 2的保守基序的保守性较高。顺式作用元件分析表明该家族成员可能参与生长素、赤霉素、脱落酸等激素响应,抵御非生物胁迫。转录组分析表明NBS-LRR基因家族在同为菊科作物的杭白菊各部位正常生长时普遍处于自动抑制状态。该研究为进一步挖掘野菊花中的功能性R基因提供一定的参考。 展开更多
关键词 野菊花 基因家族 R基因 NBS-LRR 生物信息学
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(R)-兰索拉唑不对称合成中Baeyer-Villiger单加氧酶的筛选 被引量:2
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作者 李邱红 王乾韬 王慧婧 《华西药学杂志》 北大核心 2025年第1期6-9,共4页
目的挖掘新的(R)-兰索拉唑不对称合成中的Baeyer-Villiger单加氧酶(BVMO)。方法在基因组数据库中挖掘、筛选得到6种候选BVMOs,将候选酶克隆至表达载体pET-28a(+)中,转化至大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),筛选最佳诱导条件,获得可... 目的挖掘新的(R)-兰索拉唑不对称合成中的Baeyer-Villiger单加氧酶(BVMO)。方法在基因组数据库中挖掘、筛选得到6种候选BVMOs,将候选酶克隆至表达载体pET-28a(+)中,转化至大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),筛选最佳诱导条件,获得可溶性蛋白。利用候选酶不对称催化合成(R)-兰索拉唑。结果挖掘得到的6种新酶中,PlBVMO、CSKBVMO、AbBVMO能够完成从底物兰索拉唑硫醚到(R)-兰索拉唑的不对称合成,其中,PlBVMO的收率达12.8%,对映体过量百分数(ee)>99%。结论挖掘、筛选新的BVMOs可为(R)-兰索拉唑类药物的生物合成提供新的方法与路线。 展开更多
关键词 (R)-兰索拉唑 Baeyer-Villiger单加氧酶 基因挖掘 蛋白表达 蛋白电泳 酶催化 不对称合成 大肠杆菌 质子泵抑制剂
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细胞外囊泡发生的新途径在肿瘤演进中的作用与临床意义
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作者 高瑛 魏灯辉 +5 位作者 钟理 廖丹 郑雪萍 林雨洁 方冬梅 康铁邦 《中国细胞生物学学报》 2025年第3期393-402,共10页
肿瘤细胞间或与间质细胞、免疫细胞之间的串扰在肿瘤的演进中至关重要。细胞外囊泡(EVs)是一种异质性的分泌信使,携带生物活性分子,在这种细胞−细胞通信中起关键作用,可作为肿瘤治疗靶点、生物标志物或治疗工具。因此,解析EVs的生物发... 肿瘤细胞间或与间质细胞、免疫细胞之间的串扰在肿瘤的演进中至关重要。细胞外囊泡(EVs)是一种异质性的分泌信使,携带生物活性分子,在这种细胞−细胞通信中起关键作用,可作为肿瘤治疗靶点、生物标志物或治疗工具。因此,解析EVs的生物发生机制及其在肿瘤中的调控机制是当今的肿瘤科学前沿。该文综述康铁邦团队对EVs在肿瘤演进中的研究:(1)骨肉瘤中融合蛋白以ESCRT方式分泌到外泌体,重塑肿瘤微环境促进骨肉瘤肺转移;(2)表皮生长因子受体(EGFR)以ESCRT非依赖的外泌体以及微囊泡分泌,在细胞间传递其靶向耐药性;(3)激活型干扰素基因刺激因子(STING)以新的EVs亚群R-EV形式分泌,发挥抗肿瘤免疫作用。 展开更多
关键词 细胞外囊泡 肿瘤转移 耐药 Rafeesome-R-EV 干扰素刺激因子 表皮生长因子受体
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“芯片符号转译”导向下的复合型半导体研发园区营造策略--以江波龙中山存储产业园为例
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作者 邓爱财 郭晓 《建设科技》 2025年第22期88-92,共5页
面对半导体产业从“代工制造”向“自主创新”转型的空间需求,传统产业园区“厂房+配套”模式已难以回应“高智人群”对研发、生活、品牌昭示的复合诉求。本文以江波龙中山存储产业园为实证样本,构建“场地诊断—需求量化—符号转译—... 面对半导体产业从“代工制造”向“自主创新”转型的空间需求,传统产业园区“厂房+配套”模式已难以回应“高智人群”对研发、生活、品牌昭示的复合诉求。本文以江波龙中山存储产业园为实证样本,构建“场地诊断—需求量化—符号转译—空间验证”的四步研究框架,提出“芯片符号空间转译+功能弹性复合+气候适应性优化”的三维策略体系。研究证实:以Flash Die晶圆结构为母题的立面符号系统,可有效提升企业品牌识别度;“底层架空+独立核心筒+弹性单元”的空间骨架,使园区在三年内完成从研发→测试→生产的无痛迭代;通过“留景框、留风廊、留绿院”的被动式气候策略,夏季空调负荷降幅可达18.7%。 展开更多
关键词 芯片特色 研发综合体 空间基因 弹性设计 气候适应性
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植物抗病基因研究进展 被引量:39
9
作者 董继新 董海涛 李德葆 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期1-9,共9页
植物抗病基因的研究是目前植物病理学科的热点及难点之一。 R基因的克隆与鉴定促进了寄主与病原物互作分子机制研究的深入。本文就近几年来对植物 R基因的克隆、结构与功能 ,R基因信号传导途径和 R基因的进化等方面的研究进展作一评述。
关键词 抗病基因 互作机制 信号传导 植物病害 寄主 病原 抗病反应 基因结构 基因功能 基因克隆 基因进化
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结球甘蓝NBS-LRR类R基因同源序列的分离 被引量:13
10
作者 曹必好 雷建军 +4 位作者 夏勇 宋洪元 陈国菊 Xiang Cheng-bin David J.Oliver 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期1081-1084,共4页
根据大多数抗病基因编码蛋白质的核苷酸结合区(NBS)和富含亮氨酸重复序列(LRR)保守区域的特点,设计PCR特异简并引物,从抗TuMV的结球甘蓝材料84075中,扩增出513 bp的DNA片段,经克隆、测序后,得到4个含有NBS-LRR保守区域的R基因同源序列,... 根据大多数抗病基因编码蛋白质的核苷酸结合区(NBS)和富含亮氨酸重复序列(LRR)保守区域的特点,设计PCR特异简并引物,从抗TuMV的结球甘蓝材料84075中,扩增出513 bp的DNA片段,经克隆、测序后,得到4个含有NBS-LRR保守区域的R基因同源序列,分别命名为:Bor1、Bor2、Bor3和Bor4,同源性比较分析表明,它们与已克隆的抗病基因或抗病基因片段有不同程度的同源性。以Bor1为探针,对84075进行Southern blot和RFLP分析的结果表明,Bor1以多拷贝形式存在。 展开更多
关键词 结球甘蓝 R基因 同源序列 分离 核苷酸结合区 富含亮氨酸重复序列 抗病基因
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柚cDNA中NBS-LRR类R基因同源序列的分离 被引量:19
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作者 黄代青 王平 吕柳新 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1580-1584,共5页
提取柚花柱的总RNA,通过逆转录合成其cDNA,根据已知植物抗病基因(R基因)的NBS保守区设计简并引物,对cDNA进行扩增,获得大小约为500bp的PCR产物,对连接产物进行酶切归类,筛选得到不同类别的克隆12个,并进行了测序。通过序列同源比较分析... 提取柚花柱的总RNA,通过逆转录合成其cDNA,根据已知植物抗病基因(R基因)的NBS保守区设计简并引物,对cDNA进行扩增,获得大小约为500bp的PCR产物,对连接产物进行酶切归类,筛选得到不同类别的克隆12个,并进行了测序。通过序列同源比较分析发现,其中有10个片段属于NBS-LRR类抗病基因的同源序列(RGA),与已知植物R基因相应区段的氨基酸序列的同源性为11.5%~47.1%。 展开更多
关键词 R基因 同源序列 植物抗病 接产 抗病基因 区段 花柱 DNA NBS 同源比较
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甘薯基因组NBS-LRR类抗病家族基因挖掘与分析 被引量:18
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作者 黄小芳 毕楚韵 +7 位作者 石媛媛 胡韵卓 周丽香 梁才晓 黄碧芳 许明 林世强 陈选阳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1195-1207,共13页
NBS-LRR类基因家族是植物抗病R基因(Resistance gene)数量最多的一类,具有NBS(Nucleotide-binding site)和LRR(Leucine-leucine-repeat)结构域。甘薯(Ipomoea batatas)栽培种基因组已完成测序,但尚未注释,本研究对甘薯基因组序列进行外... NBS-LRR类基因家族是植物抗病R基因(Resistance gene)数量最多的一类,具有NBS(Nucleotide-binding site)和LRR(Leucine-leucine-repeat)结构域。甘薯(Ipomoea batatas)栽培种基因组已完成测序,但尚未注释,本研究对甘薯基因组序列进行外显子预测,得到甘薯染色体组全基因组蛋白序列,在此基础上进一步对NBS-LRR家族基因鉴定和分析表明,甘薯基因组中含有379个NBS-LRR家族基因,占全基因组基因总数的0.212%,其中N型亚家族120个,NL型103个,CNL型133个,TNL型22个,PN型1个。所有染色体上均有NBS-LRR家族基因分布,但数量明显不同,其中有60.9%的NBS-LRR基因序列呈簇状分布。NBS-LRR基因序列有15个保守结构域,在N端较为保守。研究结果为甘薯进一步开展NBS-LRR家族基因的功能研究和抗性育种提供了参考。 展开更多
关键词 甘薯 NBS-LRR R基因 基因家族 生物信息学
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BCL、RIP细胞凋亡基因向小麦中的导入和赤霉病抗性鉴定 被引量:12
13
作者 叶兴国 Shirley Sato +4 位作者 徐惠君 杜丽璞 黄益洪 陆维忠 Tom Clemente 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1389-1393,共5页
利用农杆菌介导法将BCL和RIP 2个与细胞凋亡有关的基因分别导人了小麦品种扬麦10号和Bobwhite,转化效率分别为1.60%和1.25%。Southern检测结果表明,细胞凋亡基因已稳定整合到小麦染色体上,多数植株为单拷贝整合。Northern检测结... 利用农杆菌介导法将BCL和RIP 2个与细胞凋亡有关的基因分别导人了小麦品种扬麦10号和Bobwhite,转化效率分别为1.60%和1.25%。Southern检测结果表明,细胞凋亡基因已稳定整合到小麦染色体上,多数植株为单拷贝整合。Northern检测结果表明,细胞凋亡基因能够在小麦遗传背景中高水平转录为RNA。转基因植株T1代分离比例为2.11~2.33:1,表明外源基因在后代中能够稳定遗传。BCL转基因植株和RIP转基因植株对赤霉病均表现出一定抗性,其中BCL-20、BCL-21、RIP-8、RIP-18等15个T1代植株的小穗发病率为5.6%~16.1%,可望进一步培育抗赤霉病小麦新材料。 展开更多
关键词 小麦 BCL基因 RIP基因 转化 赤霉病
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水稻中一个NBS-LRR抗病同源基因家族的克隆和分析 被引量:12
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作者 王世全 张德春 +4 位作者 李平 汪旭东 李世贵 朱立煌 翟文学 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期704-711,共8页
利用克隆的抗病基因同源序列RS13作为探针,从水稻IR64的BAC文库中筛选到4个阳性克隆,其中一个克隆14E19能够覆盖其余3个克隆。对14E19进行全序列测定和分析,获得了73kb的全长DNA序列,基因预测显示其上有4个编码NBSLRR结构域的基因(NL),... 利用克隆的抗病基因同源序列RS13作为探针,从水稻IR64的BAC文库中筛选到4个阳性克隆,其中一个克隆14E19能够覆盖其余3个克隆。对14E19进行全序列测定和分析,获得了73kb的全长DNA序列,基因预测显示其上有4个编码NBSLRR结构域的基因(NL),分别命名为NLA,B,C和D。对具有相同基因组背景的IRBB56同一染色体位置上跨度更大的BAC克隆106P13进行分析,发现其上有10个NL同源拷贝,其中4个同14E19上的NL一样。搜索日本晴、9311、广陆矮4号的序列,发现三者有类似的同源序列。但与已知的NBSLRR抗病基因同源性较低,说明NL是一个至少由10个成员(分别命名为NLA至J)组成的新基因家族。对NL家族进行RTPCR和cDNA库筛选分析,发现NLB基因能够在抗白叶枯病品系IRBB4中表达,暗示该基因参与了抗病反应。 展开更多
关键词 水稻 抗病基因 BAC克隆测序 NBS-LRR基因家族
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针刺对肥胖大鼠食欲调节因子神经肽Y与瘦素的作用研究 被引量:32
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作者 孙志 张中成 +1 位作者 马丽 刘志诚 《中国行为医学科学》 CSCD 2005年第12期1057-1059,共3页
目的观察针刺对肥胖大鼠食欲调节因子神经肽Y(NPY)、瘦素(leptin)的影响,探讨针灸减肥的细胞分子机制。方法用放射免疫法检测外周血和下丘脑NPY、Leptin的含量,用RTPCR、NorthernBlot技术测定NPY、瘦素受体(OBR)基因表达水平,观察针刺... 目的观察针刺对肥胖大鼠食欲调节因子神经肽Y(NPY)、瘦素(leptin)的影响,探讨针灸减肥的细胞分子机制。方法用放射免疫法检测外周血和下丘脑NPY、Leptin的含量,用RTPCR、NorthernBlot技术测定NPY、瘦素受体(OBR)基因表达水平,观察针刺治疗前后肥胖大鼠体质量、Lee’s指数和NPY、Leptin的含量及NPY、OBR基因表达水平的变化。结果肥胖大鼠的体质量、Lee’s指数和血清NPY、Leptin的含量及NPY基因表达明显高于正常大鼠,而下丘脑Leptin含量[(0.23±0.15)ng/mg]、OBR基因表达(0.13±0.02)明显低于正常大鼠[(0.51±0.13)ng/mg,(0.21±0.03)],针刺治疗后,针刺组大鼠的体质量、Lee’s指数和血清NPY、Leptin的含量及NPY基因表达显著下降,下丘脑Leptin含量[(0.58±0.08)ng/mg]、OBR基因表达(0.18±0.02)明显回升。结论针刺对肥胖机体外周血及中枢NPY、Leptin具有良性调整作用,同时可促进OBR基因表达和抑制NPY基因表达,这可能是针灸减肥的重要作用机制之一。 展开更多
关键词 肥胖症 针刺 神经肽Y 瘦素 瘦素受体 基因表达
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稻纵卷叶螟肠道细菌群落结构与多样性分析 被引量:33
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作者 刘小改 杨亚军 +3 位作者 廖秋菊 徐红星 刘映红 吕仲贤 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期965-976,共12页
【目的】为明确水稻主要害虫稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis(Guenée)幼虫肠道细菌的群落结构和多样性。【方法】利用Illumina Mi Seq技术对稻纵卷叶螟4龄幼虫肠道细菌的16S r DNA V3-V4变异区序列进行测序,应用USEARCH和QI... 【目的】为明确水稻主要害虫稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis(Guenée)幼虫肠道细菌的群落结构和多样性。【方法】利用Illumina Mi Seq技术对稻纵卷叶螟4龄幼虫肠道细菌的16S r DNA V3-V4变异区序列进行测序,应用USEARCH和QIIME软件整理和统计样品序列数和操作分类单元(operational taxonomic unit,OTU)数量,分析4龄幼虫肠道细菌的物种组成、丰度和多样性。【结果】稻纵卷叶螟4个数量不同的4龄幼虫样本(1,2,3和5头)共得165 386条reads,在97%相似度下可将其聚类为604个OTUs。总共注释到22个门,43个纲,82个目,142个科,204个属,244个种。其中在门水平上,主要优势菌为变形菌门(Proteobacteria)(相对丰度26%~34%)和放线菌门(Actinobacteria)(23%~32%);在纲水平上,主要优势菌为放线菌纲(Actinobacteria)(相对丰度23%~32%)、酸杆菌纲(Acidobacteria)(9%~11%)、α-变形菌纲(Alphaproteobacteria)(10%~13%)、β-变形菌纲(Betaproteobacteria)(6%~8%)和γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)(6%~12%);在科水平上,共有优势菌为类诺卡氏菌科(Nocardioidaceae)、丛毛单胞菌科(Comamonadaceae)、黄单胞菌科(Xanthomonadaceae)、鞘脂单胞菌科(Sphingomonadaceae)和芽单胞菌科(Gemmatimonadaceae)等。在属水平上,4个样本前5位优势属中,类诺卡氏属Nocardioides和鞘脂单胞菌Sphingomonas为共有优势属。稻纵卷叶螟肠道细菌Simpson指数、Shannon指数、Ace指数和Chao指数分别为0.16~0.65,0.94~3.22,212~488和210~490。【结论】稻纵卷叶螟幼虫肠道细菌多样性比较丰富,个体间微生物群落结构和多样性有差异。不同数量样本数据与总体数据有助于综合反映稻纵卷叶螟种群肠道微生物状况。本研究结果为进一步研究稻纵卷叶螟肠道微生物的功能及其在防治中的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 稻纵卷叶螟 肠道细菌 多样性 16S RDNA 基因测序
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植物抗病基因与病原菌无毒基因互作的分子基础 被引量:15
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作者 韩德俊 曹莉 +1 位作者 陈耀锋 李振岐 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1319-1326,共8页
近10年来,大量的植物抗病基因和病原菌无毒基因被克隆,抗病基因和无毒基因的结构、功能及其互作关系的研究也取得重大进展。通过介绍抗病基因与无毒基因互作的两种模式,从抗病基因与病原菌无毒基因互作角度探讨了抗病基因在植物抗病育... 近10年来,大量的植物抗病基因和病原菌无毒基因被克隆,抗病基因和无毒基因的结构、功能及其互作关系的研究也取得重大进展。通过介绍抗病基因与无毒基因互作的两种模式,从抗病基因与病原菌无毒基因互作角度探讨了抗病基因在植物抗病育种和农作物生产中应用的问题,提出抗细菌和真菌单基因转化很难赋予农作物切实抗性。 展开更多
关键词 植物-病原菌互作 抗病基因(R) 无毒基因(Avr) 警戒模式 受体-配体模式
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转基因改良水稻抗稻瘟病的策略及其进展 被引量:6
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作者 谭炎宁 易自力 +2 位作者 蒋建雄 覃静萍 肖亮 《分子植物育种》 CAS CSCD 2004年第6期847-852,共6页
利用转基因技术是改良水稻稻瘟病抗性的有效途径。已有研究证实通过某些抗病基因、抗真菌蛋白基因、杀菌肽基因的转基因,可以培育出获得对稻瘟病广谱抗性的水稻品种。本文就以上几个方面的进展评述了水稻稻瘟病抗性的分子改良策略。
关键词 水稻 抗病育种 稻瘟病 转基因技术 抗真菌蛋白基因 杀菌肽基因 抗病基因
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猪场土壤中5种四环素抗性基因的检测和定量 被引量:29
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作者 吴楠 乔敏 朱永官 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2009年第5期705-710,共6页
近年来由于四环素在畜禽养殖业中的大量使用,诱导了环境中四环素抗性微生物的产生,然而有关四环素抗性基因在土壤中存在、迁移和扩散的研究目前还很少.论文提取了北京一规模化养猪场周边土壤的微生物DNA,利用普通PCR检测到5种四环素抗... 近年来由于四环素在畜禽养殖业中的大量使用,诱导了环境中四环素抗性微生物的产生,然而有关四环素抗性基因在土壤中存在、迁移和扩散的研究目前还很少.论文提取了北京一规模化养猪场周边土壤的微生物DNA,利用普通PCR检测到5种四环素抗性基因(tet(B/P)、tet(M)、tet(O)、tet(T)、tet(W)),这5种基因都属于编码核糖体保护蛋白的一类.进一步建立了定量PCR程序对这5种基因进行了定量.结果显示,除tet(T)和tet(M)含量接近外(p=0.367),其余几种基因含量之间均差异显著(p<0.05),其中tet(W)的含量最高((2.16±0.20)×108copies·g-1(干土)),比含量最低的tet(B/P)((2.89±0.54)×106copies·g-(1干土))高出约两个数量级.抗性基因tet(W)、tet(T)、tet(M)、tet(O)含量均较高,为猪场土壤中优势抗性基因.这些基因曾被报道广泛存在于猪和牛的肠道中,显示抗性基因很可能是通过基因横向转移(HGT)等机制从养殖动物体内传播到周围土壤中土著微生物体内的.论文所建立的实验方法为进一步系统研究抗生素抗性基因在土壤中的环境行为及其生态风险提供了基础. 展开更多
关键词 四环素抗性基因 实时荧光定量PCR 土壤 猪场
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