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Prohibitin1和Prohibitin2在缺氧性肾小管上皮细胞损伤中的表达及作用 被引量:3
1
作者 彭单单 覃远汉 +6 位作者 邵明斌 周添标 徐会凌 程会元 雷凤英 周春 黄韦芳 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期346-348,共3页
目的探讨Prohibitn1(PHB1)、Prohibitin2(PHB2)在缺氧性肾小管上皮细胞(RTEC)损伤中的表达和作用。方法以体外培养的大鼠近端肾小管上皮细胞株(NRK-52E)为对象,NRK-52E细胞置于50 mL.L-1二氧化碳(CO2),37℃培养箱中孵育至80%,传代后随... 目的探讨Prohibitn1(PHB1)、Prohibitin2(PHB2)在缺氧性肾小管上皮细胞(RTEC)损伤中的表达和作用。方法以体外培养的大鼠近端肾小管上皮细胞株(NRK-52E)为对象,NRK-52E细胞置于50 mL.L-1二氧化碳(CO2),37℃培养箱中孵育至80%,传代后随机分为正常组和模型组。正常组细胞继续培养,模型组细胞置于真空罐中,负压吸引器抽尽残余空气,充以配好的缺氧气体(950 mL.L-1氮气和50 mL.L-1CO2)密封建立缺氧性RTEC损伤模型,分别于造模第12、24、36小时采用实时荧光定量PCR检测PHB1、PHB2、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA表达,Western blot检测PHB1、PHB2蛋白表达。结果 1.与正常组比较,模型组各时间点NRK-52E细胞的PHB1、PHB2蛋白及其mRNA表达均降低(Pa<0.05),缺氧时间越长,表达量越低;NRK-52E细胞的TGF-β1 mRNA表达均增高(Pa<0.05),缺氧时间越长,表达量越高。2.相关性分析:模型组NRK-52E细胞的PHB1、PHB2 mRNA表达与TGF-β1 mRNA表达均呈负相关(r=-0.97、-0.99,Pa<0.05)。结论缺氧所致NRK-52E细胞的PHB1、PHB2蛋白及mRNA表达均降低,缺氧时间越长,表达量越低,NRK-52E细胞损伤越重。PHB1、PHB2可能参与RTEC损伤的发生发展。 展开更多
关键词 prohibitin1 prohibitin2 肾小管上皮细胞损伤
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人参皂苷Rg1组合诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化过程中Prohibitin的表达与定位变化 被引量:8
2
作者 石松林 李祺福 +3 位作者 刘庆榕 许东辉 唐剑 梁盈 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期180-187,共8页
选择性抽提经人参皂苷Rg1组合(RCT)诱导处理前后的人成骨肉瘤MG-63细胞核基质,对prohibitin在核基质中的存在、分布及其与相关基因产物在RCT处理前后MG-63细胞中的共定位关系进行观察研究.蛋白质组学分析结果显示,prohibitin存在于人成... 选择性抽提经人参皂苷Rg1组合(RCT)诱导处理前后的人成骨肉瘤MG-63细胞核基质,对prohibitin在核基质中的存在、分布及其与相关基因产物在RCT处理前后MG-63细胞中的共定位关系进行观察研究.蛋白质组学分析结果显示,prohibitin存在于人成骨肉瘤MG-63细胞核基质蛋白组分中,并在RCT处理后细胞核基质中表达下调;蛋白质印迹杂交确证了prohibitin在MG-63细胞核基质中的存在及其在RCT处理后下调变化;免疫荧光显微镜观察进一步证实prohibitin定位在核基质上,经RCT处理后出现分布位置与表达水平变化;激光共聚焦显微镜观察可见prohibitin与c-Fos、c-Myc、p53和Rb基因产物均存在共定位关系,并在RCT处理后共定位分布区域出现变化.本研究证实了prohibitin是一种新发现的核基质蛋白,其在核基质上的定位与表达在RCT诱导分化前后发生显著变化,并与相关癌基因、抑癌基因产物存在共定位关系.实验表明RCT处理引起的prohibitin的变化与人成骨肉瘤MG-63细胞的诱导分化与调控具有密切关系,为深入揭示RCT等中药有效成分诱导肿瘤细胞分化的机理提供了重要科学依据和深入探索的新方向. 展开更多
关键词 prohibitin 核基质 人成骨肉瘤MG-63细胞 细胞分化 人参皂苷RG1
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过表达prohibitin促进NB4-R1急性早幼粒细胞白血病维甲酸耐药细胞凋亡 被引量:4
3
作者 刘雁峰 贺鹏程 +2 位作者 刘锋 程小岩 张梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期933-936,共4页
目的构建人prohibitin基因真核过表达载体,探讨上调prohibitin对NB4-R1急性早幼粒细胞白血病维甲酸耐药细胞凋亡的影响。方法 PCR钓取目的基因prohibitin,与pEGFP-N1-3FLAG真核载体定向连接,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。将阳性重组载体pE... 目的构建人prohibitin基因真核过表达载体,探讨上调prohibitin对NB4-R1急性早幼粒细胞白血病维甲酸耐药细胞凋亡的影响。方法 PCR钓取目的基因prohibitin,与pEGFP-N1-3FLAG真核载体定向连接,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。将阳性重组载体pEGFP-N1-3FLAG-prohibitin转染NB4-R1细胞,以实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测过表达效果,annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测prohibitin过表达对NB4-R1细胞凋亡的影响。结果 PCR筛选及测序比对,证明成功构建了prohibitin基因过表达载体;对NB4-R1细胞转染率可达70%以上;qRT-PCR结果显示转染pEGFP-N1-3FLAG-prohibitin过表达载体组(OE)prohibitin mRNA表达水平较空白对照组(CON)和阴性对照组(NC)分别上调(1.64±0.37)倍和(1.58±0.43)倍(P<0.05),Western blot结果显示OE组prohibitin蛋白表达水平较CON组和NC组分别上调(1.91±0.33)倍和(1.99±0.37)倍(P<0.05);流式细胞术结果表明CON组、NC组和OE组NB4-R1细胞凋亡率分别为(5.88±0.43)%、(6.63±0.46)%和(28.22±1.33)%,OE组较CON组和NC组细胞凋亡率分别增加了(3.80±0.24)倍和(3.39±0.30)倍(P<0.05)。结论过表达prohibitin可诱导NB4-R1细胞凋亡。 展开更多
关键词 prohibitin 过表达 NB4-R1细胞 凋亡 急性早幼粒细胞白血病
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Prohibitin在单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化中的表达和作用 被引量:3
4
作者 赵艳君 覃远汉 +3 位作者 陈静 雷凤英 胡鹏 庞玉生 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期69-72,共4页
目的探讨Prohibitin(PHB)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏组织中的表达和作用。方法48只雄性6周龄Wistar大鼠随机分为假手术组和模型组,每组24只,模型组大鼠麻醉后,背侧切口行左侧输尿管结扎术,假手术组只探及肾包膜,造模后分别于第7、14... 目的探讨Prohibitin(PHB)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏组织中的表达和作用。方法48只雄性6周龄Wistar大鼠随机分为假手术组和模型组,每组24只,模型组大鼠麻醉后,背侧切口行左侧输尿管结扎术,假手术组只探及肾包膜,造模后分别于第7、14、21、28天各处死6只大鼠,行肾脏病理检查并计算肾间质纤维化指数,采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学方法检测肾脏组织中PHB与转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA和蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组各时间点肾间质纤维化指数显著增高(P<0.01),梗阻时间越长纤维化指数越高;模型组各时间点PHB的mRNA和蛋白表达显著减少(P<0.01),梗阻时间越长,表达量越低;模型组各时间点TGF-β1的mRNA和蛋白的表达显著增高(P<0.01),梗阻时间越长,表达量越高。模型组PHB的蛋白表达与间质纤维化指数呈显著负相关(r=-0.825),TGF-β1的蛋白表达与间质纤维化指数呈显著正相关(r=0.995),PHB蛋白表达与TGF-β1蛋白表达呈显著负相关(r=-0.786)。结论UUO大鼠肾脏组织PHB表达显著降低,可能参与肾间质纤维化的发生发展。 展开更多
关键词 prohibitin 肾间质纤维化 转化生长因子-Β1
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胰岛素对高糖环境下大鼠颌骨骨髓基质细胞成骨分化过程中Prohibitin表达的影响 被引量:2
5
作者 李颖 刘洪臣 +2 位作者 鄂玲玲 吕燕 王东胜 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期526-530,共5页
目的:探讨胰岛素对高糖环境下大鼠颌骨骨髓基质细胞成骨分化过程中prohibitin表达的影响。方法 :从Wistar大鼠下颌骨中分离培养骨髓基质细胞,分别于不同糖浓度(5.5、25、45 mM)及胰岛素(0、10-5M)的干预下成骨诱导(5.5 mM组、5.5 mM+In... 目的:探讨胰岛素对高糖环境下大鼠颌骨骨髓基质细胞成骨分化过程中prohibitin表达的影响。方法 :从Wistar大鼠下颌骨中分离培养骨髓基质细胞,分别于不同糖浓度(5.5、25、45 mM)及胰岛素(0、10-5M)的干预下成骨诱导(5.5 mM组、5.5 mM+Ins组、25 mM组、25 mM+Ins组、45 mM组、45 mM+Ins组)。成骨诱导21d,以茜素红染色进行矿化结节定量分析。成骨诱导1、3、7、14、21 d,ELISA试剂盒检测prohibitin蛋白的表达。采用SPSS15.0软件包对数据进行统计学分析。结果:45 mM高糖环境显著抑制了rBMSC的矿化,胰岛素可改善高糖对rBMSC矿化的抑制。45 mM组prohibitin的表达较5.5 mM组和25 mM组均显著下降。矿化诱导第3天,各组prohibitin蛋白的表达均达到最高峰。在25 mM和45 mM的糖浓度下,10-5M的胰岛素可显著上调rBMSC prohibitin蛋白的表达。结论:高糖环境抑制prohibitin蛋白的表达,胰岛素可改善高糖环境对prohibitin蛋白在骨髓基质细胞成骨分化过程中表达的影响。prohibitin蛋白在骨髓基质细胞成骨分化早期表达显著。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 高糖环境 prohibitin蛋白 成骨分化
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prohibitin在乳腺癌MCF-7细胞表达抑制的鉴定 被引量:2
6
作者 赵丽华 何谦 +2 位作者 张淑群 安哲 张磊 《现代检验医学杂志》 CAS 2011年第6期17-20,共4页
目的 利用靶向prohibitin基因的shRNA表达质粒转染乳腺癌MCF-7细胞,进而观察prohibitin 在转染组细胞的表达情况.方法 将构建的prohibitin基因shRNA表达质粒用脂质体法转染人乳腺癌MCF-7细胞,通过荧光定量PCR和Western blot 检测其在mRN... 目的 利用靶向prohibitin基因的shRNA表达质粒转染乳腺癌MCF-7细胞,进而观察prohibitin 在转染组细胞的表达情况.方法 将构建的prohibitin基因shRNA表达质粒用脂质体法转染人乳腺癌MCF-7细胞,通过荧光定量PCR和Western blot 检测其在mRNA及蛋白水平的干扰效应.结果 转染Ⅰ组、转染Ⅱ组、转染Ⅲ组细胞PHB mRNA表达量分别是阴性对照组的27.2%,45.6%和29.4%;空白对照组的23.7%,39.7%和25.6%;转染Ⅰ组、转染Ⅱ组、转染Ⅲ组细胞PHB/β-actin灰度值比值分别是阴性对照组的27.4%,39.4%和30.1%;空白对照组的26.9%,38.7%和29.5%.构建的shRNA表达载体可以使MCF-7细胞中prohibitin基因的mRNA及其蛋白含量降低.结论 构建的针对prohibitin基因的shRNA表达载体,转染MCF-7细胞后可有效抑制细胞中prohibitin的表达,证实构建有效. 展开更多
关键词 prohibitin基因 SHRNA MCF-7
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Prohibitin与乳腺癌 被引量:4
7
作者 彭琳 黄裔腾 +2 位作者 许镒洧 方裕森 霍霞 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2012年第1期75-77,共3页
Prohibitin(PHB/PHB1)基因具有增殖抑制作用,被认为是一个新的候选肿瘤抑制基因。PHB参与许多肿瘤的发生、发展,与乳腺癌的关系甚为密切。本文主要阐述PHB的结构与功能、细胞增殖抑制机制及其基因多态性与乳腺癌易感性的关系,同时对PHB... Prohibitin(PHB/PHB1)基因具有增殖抑制作用,被认为是一个新的候选肿瘤抑制基因。PHB参与许多肿瘤的发生、发展,与乳腺癌的关系甚为密切。本文主要阐述PHB的结构与功能、细胞增殖抑制机制及其基因多态性与乳腺癌易感性的关系,同时对PHB作为乳腺癌诊疗新靶标的应用前景作一展望。 展开更多
关键词 prohibitin 增殖抑制 乳腺癌 多态性
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抗增殖蛋白Prohibitin与肿瘤 被引量:5
8
作者 祁晓晨 冒韵东 崔毓桂 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期52-55,共4页
抗增殖蛋白(prohibitin,PHB)是进化上高度保守的蛋白,广泛分布于不同种属的生物细胞。PHB不同的亚细胞器定位决定了它在调节细胞周期、增殖凋亡、核转录、细胞分化、细胞黏附、维持线粒体形态及功能等方面有重要作用。同时,PHB及其翻译... 抗增殖蛋白(prohibitin,PHB)是进化上高度保守的蛋白,广泛分布于不同种属的生物细胞。PHB不同的亚细胞器定位决定了它在调节细胞周期、增殖凋亡、核转录、细胞分化、细胞黏附、维持线粒体形态及功能等方面有重要作用。同时,PHB及其翻译后修饰也参与了PI3K/AKT、Ras/Raf/MAPK等信号通路的调控。近年来,PHB功能及其机制研究有助于我们揭示恶性肿瘤疾病形成的分子机制,将为预防和治疗这些疾病提供理论基础。 展开更多
关键词 prohibitin 抗增殖蛋白 肿瘤 细胞凋亡 生物学治疗
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不同家族史鼻咽癌患者癌组织Prohibitin的表达 被引量:7
9
作者 陈舒华 刘丹 +4 位作者 张继平 陈艳琼 张华宋 刘湘 黄泽棋 《中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志》 2016年第2期84-88,共5页
目的对比Prohibitin(PMB)在不同家族史的鼻咽癌患者癌组织中的表达,以探究鼻咽组织中Prohibitin是否可以作为鼻咽癌潜在标记物。方法收集高癌家系气虚质鼻咽癌患者、鼻咽黏膜慢性炎症患者的鼻咽组织各9例,散发气虚质鼻咽癌患者的鼻咽组... 目的对比Prohibitin(PMB)在不同家族史的鼻咽癌患者癌组织中的表达,以探究鼻咽组织中Prohibitin是否可以作为鼻咽癌潜在标记物。方法收集高癌家系气虚质鼻咽癌患者、鼻咽黏膜慢性炎症患者的鼻咽组织各9例,散发气虚质鼻咽癌患者的鼻咽组织12例,应用实时定量PCR方法检测Prohibitin在各组鼻咽组织中的表达。利用Western-blotting蛋白免疫印迹方法检测Prohibitin在各组患者鼻咽组织中的表达。结果 PHB m RNA在鼻咽黏膜慢性炎症鼻咽组织、散发气虚质鼻咽癌组织、高癌家系气虚质鼻咽癌组织中的2-△△Ct值分别为1.00±0.72、1.08±0.49、0.97±0.41(P>0.05)。PHB蛋白相对表达依次为0.33±0.21、0.59±0.25、1.72±0.96(P<0.05)。分析各组间对比PHB基因表达量无明显变化,但蛋白表达量鼻咽癌患者明显高于正常人,高癌家系鼻咽癌患者蛋白表达量高于散发患者,考虑与级联放大反应有关,有望成为高癌家系气虚质鼻咽癌患者早期诊断及筛查的标志物。 展开更多
关键词 鼻咽癌高癌家系 prohibitin 生物标志物 气虚体质
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Prohibitin 3'-UTR基因多态性与粤东乳腺癌发病风险的研究 被引量:3
10
作者 彭琳 黄裔腾 罗育豪 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2013年第4期293-296,共4页
目的:探讨Prohibitin(PHB)3'-非翻译区(untranslated region,UTR)基因多态性与粤东汉族女性乳腺癌易感性的关系。方法:采用病例-对照研究,收集231例乳腺癌患者和169例健康对照,提取血液基因组DNA,利用高分辨率熔解曲线(high resolut... 目的:探讨Prohibitin(PHB)3'-非翻译区(untranslated region,UTR)基因多态性与粤东汉族女性乳腺癌易感性的关系。方法:采用病例-对照研究,收集231例乳腺癌患者和169例健康对照,提取血液基因组DNA,利用高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)法对PHB基因单核苷酸多态性位点rs1049620、rs9893420、rs4987083进行基因分型,并对检测结果进行非2条件Logistic回归分析和χ检验。结果:PHB基因rs9893420和rs4987083位点在病例组和对照组人群均表现为单一基因型,rs1049620三种基因型G/G、A/G、A/A在病例组和对照组间分布差异均无统计学意义(P>0.05),在不同组织病理学分型和不同激素受体表达病例中分布差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论:未发现PHB基因3'-UTRSNP与粤东汉族女性乳腺癌易感性存在关联。 展开更多
关键词 乳腺癌 prohibitin 单核苷酸多态性 高分辨率熔解曲线
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Prohibitin在姜黄素诱导人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡过程中的调控机制 被引量:1
11
作者 石松林 赵振利 +6 位作者 王国红 刘凡 路锟 杨玲 韩荣 李晓 李祺福 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期72-80,共9页
目的探讨姜黄素(curcumin)诱导成骨肉瘤细胞凋亡前后,Prohibitin(PHB)蛋白的定位与表达变化,及PHB与凋亡相关基因产物的共定位关系。方法选择性抽提经姜黄素诱导处理前后的人成骨肉瘤MG-63细胞核基质蛋白,以蛋白质组学、免疫印迹法和激... 目的探讨姜黄素(curcumin)诱导成骨肉瘤细胞凋亡前后,Prohibitin(PHB)蛋白的定位与表达变化,及PHB与凋亡相关基因产物的共定位关系。方法选择性抽提经姜黄素诱导处理前后的人成骨肉瘤MG-63细胞核基质蛋白,以蛋白质组学、免疫印迹法和激光扫描共焦显微技术对PHB在核基质中存在、分布及其与凋亡相关基因产物在MG-63细胞中的共定位关系进行了研究。结果双向凝胶电泳、质谱鉴定和免疫印迹法结果显示,PHB存在于MG-63细胞核基质蛋白组分中,细胞凋亡后在细胞核基质蛋白中表达下调。免疫荧光显微镜观察显示,PHB定位于MG-63细胞核基质纤维上,经姜黄素处理后出现分布位置与表达水平的变化。激光扫描共焦显微镜观察结果显示,PHB在MG-63细胞凋亡过程中与Bax、Bcl-2、Fas、P53、c-Myc和Rb等基因产物具有共定位关系,且共定位区域发生了变化。结论 PHB是一种核基质结合蛋白;PHB在MG-63细胞凋亡过程中的表达与分布变化,及其与细胞凋亡相关基因的共定位关系,对MG-63细胞凋亡具有重要影响。 展开更多
关键词 prohibitin 核基质 人成骨肉瘤MG-63细胞 姜黄素 免疫印迹法
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Prohibitin 2调节肌细胞增强因子2转录因子活性的分子机制 被引量:1
12
作者 孙陆果 马克威 +2 位作者 黄红兰 卫红飞 王丽颖 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期774-778,共5页
目的:探讨Prohibitin 2(PHB2)抑制肌细胞增强因子2(myocyte enhancer factor,MEF2)转录因子活性的分子机制,为进一步研究PHB2在其他MEF2阳性表达细胞中的调控作用提供依据。方法:利用脂质体转染方法将表达PHB2和MEF2的真核表达载体与荧... 目的:探讨Prohibitin 2(PHB2)抑制肌细胞增强因子2(myocyte enhancer factor,MEF2)转录因子活性的分子机制,为进一步研究PHB2在其他MEF2阳性表达细胞中的调控作用提供依据。方法:利用脂质体转染方法将表达PHB2和MEF2的真核表达载体与荧光素酶报告基因载体共转染入体外培养的Hela细胞中,转染36 h后,裂解细胞获取细胞裂解上清,Western blotting检测上清中重组蛋白的表达及利用发光检测仪检测上清中荧光素酶的生物发光活性。结果:转染PHB2细胞组与未转染PHB2细胞组中,MEF2调控的荧光素酶生物发光活性比分别为0.28±0.02和1.00±0.02,两组比较差异具有显著性(P<0.01),且降低程度与PHB2的表达量呈正比;在未转染PHB2细胞组,MEF2转录激活区调控的荧光素酶生物发光活性比为9.53±1.06,而在转染PHB2细胞组其为2.24±0.21,两组比较差异具有显著性(P<0.01);组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂TSA处理组与未处理组,共转染PHB2细胞中MEF2调控的荧光素酶生物发光活性比分别为0.98±0.12和0.38±0.04,两组比较差异具有显著性(P<0.01),提示TSA解除了PHB2对MEF2的抑制作用。结论:PHB2抑制MEF2转录活性的分子机制是通过作用于MEF2的转录激活区由HDAC介导完成的,该抑制作用非依赖于成肌调节因子MyoD,且与MEF2的DNA结合功能无关。 展开更多
关键词 prohibitin2 肌细胞增强因子2 转录抑制 组蛋白去乙酰化酶
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Prohibitin——肿瘤与代谢性疾病治疗的新靶标 被引量:5
13
作者 郭东升 钱令嘉 袁聚祥 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2007年第5期401-405,共5页
Prohibitin(PHB)是一种高度保守、分布广泛的蛋白质。PHB不仅是一类新型的分子伴侣蛋白,而且参与调节细胞周期、维持线粒体结构和功能,具有抗细胞凋亡、衰老和增殖的作用。PHB的多种功能和不同定位,以及在多种疾病中存在表达差异的现象... Prohibitin(PHB)是一种高度保守、分布广泛的蛋白质。PHB不仅是一类新型的分子伴侣蛋白,而且参与调节细胞周期、维持线粒体结构和功能,具有抗细胞凋亡、衰老和增殖的作用。PHB的多种功能和不同定位,以及在多种疾病中存在表达差异的现象提示,PHB可能参与疾病的发生与发展过程。因此,PHB在多种疾病如:肿瘤、糖尿病和肥胖等的治疗方面将会成为有用的药物靶标。 展开更多
关键词 prohibitin 肿瘤 代谢性疾病 治疗
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Prohibitin在低胆固醇培养人前列腺癌细胞系PC-3中表达上调及其可能机制 被引量:1
14
作者 董培 李永红 +2 位作者 尧凯 刘卓炜 周芳坚 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2116-2119,共4页
目的:探讨prohibitin(PHB)表达上调在低胆固醇培养抑制前列腺癌PC-3细胞增殖中的作用及对前列腺癌进展的影响。方法:PC-3细胞分别培养于普通和低胆固醇培养基中48 h后,real-time PCR鉴定PHB mRNA的差异表达。克隆PHB基因启动子片段,构... 目的:探讨prohibitin(PHB)表达上调在低胆固醇培养抑制前列腺癌PC-3细胞增殖中的作用及对前列腺癌进展的影响。方法:PC-3细胞分别培养于普通和低胆固醇培养基中48 h后,real-time PCR鉴定PHB mRNA的差异表达。克隆PHB基因启动子片段,构建萤光质粒并转染至PC-3细胞,检测细胞培养基中胆固醇变化对于PHB基因启动子萤光素酶表达影响。结果:低胆固醇培养基组中PHB表达上调约19倍,在低胆固醇培养基的前列腺癌PC-3细胞中PHB基因启动子质粒萤光素酶表达显著增强,同普通培养对照组相比有显著差异。结论:PHB在低胆固醇培养前列腺癌PC-3细胞中表达显著增强,这可能是前列腺癌细胞在不利于增殖条件下的一种自我保护调节机制。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 胆固醇 prohibitin 启动子
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Prohibitin特异性MiRRNAi表达载体构建及其干扰效果测定 被引量:1
15
作者 郭东升 王新兴 +3 位作者 刘晓华 战锐 袁聚祥 钱令嘉 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期139-144,共6页
目的:构建携带prohibitin(PHB-1)基因的MiR RNAi真核表达载体pcDNA^(TM)6.2-GW/EmGFP-MiR,并观察其转染HEK293细胞株前后PHB-1的表达变化。方法:根据GenBank中prohibitin的序列,设计特异的两条互补的单链寡核苷酸退火后形成双链,克隆至p... 目的:构建携带prohibitin(PHB-1)基因的MiR RNAi真核表达载体pcDNA^(TM)6.2-GW/EmGFP-MiR,并观察其转染HEK293细胞株前后PHB-1的表达变化。方法:根据GenBank中prohibitin的序列,设计特异的两条互补的单链寡核苷酸退火后形成双链,克隆至pcDNA^(TM)6.2-GW/EmGFP-MiR质粒缺口末端,连接在质粒上生成含MiR RNAi pcDNA^(TM) 6.2-GW/EmGFP-MiR-PHB载体,测序鉴定后,用脂质体将重组子转染至HEK293细胞中,用Western blotting检测干扰后HEK293细胞内PHB-1表达的变化。结果:将目的序列成功连接到载体上,并经测序分析证实载体构建成功。Western blotting检测结果证实构建的PHB-1 MiR RNA表达重组体可显著抑制HEK293细胞内PHB-1的表达。结论:成功构建了携带PHB-1基因的MiR RNAi真核表达载体。 展开更多
关键词 prohibitin HEK293细胞 RNA干扰
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HMBA诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化过程中prohibitin的表达与定位变化 被引量:1
16
作者 李祺福 赵春红 +2 位作者 唐剑 刘庆榕 石松林 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2008年第1期1-10,共10页
本文以HMBA诱导处理前后的人成骨肉瘤MG-63细胞为对象,对prohibitin在核基质中存在、分布及其与相关基因产物在HMBA处理前后MG-63细胞中的共定位关系进行观察研究。蛋白印迹杂交结果确证prohibitin存在于人成骨肉瘤MG-63细胞核基质蛋白... 本文以HMBA诱导处理前后的人成骨肉瘤MG-63细胞为对象,对prohibitin在核基质中存在、分布及其与相关基因产物在HMBA处理前后MG-63细胞中的共定位关系进行观察研究。蛋白印迹杂交结果确证prohibitin存在于人成骨肉瘤MG-63细胞核基质蛋白组分中,并在HMBA处理后细胞核基质中表达下调,免疫荧光显微镜观察显示prohibitin定位在核基质上,经HMBA处理后出现分布位置与表达水平的变化,激光共聚焦显微镜观察可见prohibitin与MG-63细胞中c-fos、c-myc、p53和rb基因产物均存在共定位关系,但在HMBA处理后细胞中其共定位分布区域出现变化。研究结果证实prohibitin是一种核基质蛋白,定位于核基质上,prohibitin在人成骨肉瘤MG-63细胞诱导分化过程中的表达分布及其与相关癌基因、抑癌基因产物的共定位现象值得进一步探索和研究。 展开更多
关键词 prohibitin 人成骨肉瘤MG-63细胞 核基质-中间纤维系统 细胞分化
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Prohibitin rs6917 C>T基因多态性与潮汕女性乳腺癌易感性的关系研究 被引量:1
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作者 彭琳 陈建良 +2 位作者 方裕森 吴库生 霍霞 《中国医药导报》 CAS 2012年第31期16-17,20,共3页
目的研究潮汕汉族女性人群中Prohibitin(PHB)基因rs6917 C〉T单核苷酸多态性(single nucleotide polymor-phism,SNP)与乳腺癌遗传易感性的关系。方法采用病例-对照研究,于2009年7-12月收集汕大医学院附属肿瘤医院231例乳腺癌住院患... 目的研究潮汕汉族女性人群中Prohibitin(PHB)基因rs6917 C〉T单核苷酸多态性(single nucleotide polymor-phism,SNP)与乳腺癌遗传易感性的关系。方法采用病例-对照研究,于2009年7-12月收集汕大医学院附属肿瘤医院231例乳腺癌住院患者和169例正常对照女性的外周血,提取全血基因组DNA,以高分辨率熔解曲线(highresolution mehing,HRM)法检测PHB基因rs6917位点基因型,计算各种基因型的乳腺癌发生风险及其95%可信区间。结果潮汕地区女性人群PHB rs6917存在两种基因型CC和TC,在乳腺癌组的频率分别为74.46%(C/C)、25.54%(T/C),在正常人群的频率分别为72.78%(C/C)和27.22%(T/C)。经统计学分析,T/C基因型携带者与C/C基因型携带者在乳腺癌发病风险上并无显著性差异(OR=1.090,95%CI=0.695~1.709,P=0.706)。结论未发现PHB基因rs6917位点SNP与潮汕汉族女性乳腺癌易感性具有相关性。 展开更多
关键词 prohibitin 单核苷酸多态性 乳腺癌 高分辨率熔解曲线
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低氧环境下子宫内膜基质细胞增殖及Prohibitin表达 被引量:1
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作者 朱媛媛 吴夏迪 +6 位作者 侯振 高超 高莉 严正杰 刘嘉茵 崔毓桂 冒韵东 《生殖医学杂志》 CAS 2017年第8期814-819,共6页
目的观察常氧和低氧环境下子宫内膜基质细胞(ESCs)的增殖,探讨抗增殖蛋白prohibitin(PHB)在子宫内膜异位症(EMs)病理机制中的作用。方法 10例正常内膜组织(正常对照组)和10例EMs患者在位内膜组织(在位内膜组)各分为两份,分别置于常氧(21... 目的观察常氧和低氧环境下子宫内膜基质细胞(ESCs)的增殖,探讨抗增殖蛋白prohibitin(PHB)在子宫内膜异位症(EMs)病理机制中的作用。方法 10例正常内膜组织(正常对照组)和10例EMs患者在位内膜组织(在位内膜组)各分为两份,分别置于常氧(21%O_2)与低氧(1%O_2)环境中培养。运用BrdU方法检测细胞增殖,并以光密度值(OD)代表细胞的增殖能力;通过流式细胞技术检测细胞凋亡;细胞免疫荧光技术和蛋白质印记法(Western blot)检测细胞中PHB表达。结果在常氧环境,在位内膜组的OD值略高于正常对照组但无统计学差异(P>0.05);而在低氧环境,在位内膜组的OD值[(1.400±0.659)]显著高于正常对照组[(0.590±0.021)](P<0.001),且显著高于常氧环境的在位内膜OD值[(1.156±0.044)](P<0.05)。无论是常氧还是低氧环境,在位内膜组的细胞凋亡率均显著低于对照组[分别为(4.117±0.450)%vs.(7.247±0.707)%及(4.983±0.393)%vs.(9.867±0.675)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。在常氧环境,在位内膜组ESCs的PHB表达[(0.747±0.026)]显著高于正常对照组[(0.590±0.021)](P<0.05);在低氧环境,正常对照组和在位内膜组ESCs的PHB表达水平均较常氧环境的PHB表达水平降低[分别为(0.358±0.071)vs.(0.590±0.021)和(0.458±0.054)vs.(0.747±0.026)],且差异有统计学意义(P<0.05)。结论正常子宫内膜组织表达PHB,EMs患者的在位内膜组织PHB表达升高;低氧环境下ESCs的PHB表达水平显著降低,可能与促进ESCs增殖、抑制ESCs凋亡相关,因此PHB在EMs病理机制中起重要作用。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 低氧 prohibitin 细胞增殖 细胞凋亡
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Prohibitin与肿瘤关系的研究进展 被引量:5
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作者 刘丹 陈舒华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第23期3865-3867,共3页
1989年MeClung 等首先克隆出哺乳动物 PHB 基因,将 PHB1 mRNA 在显微镜下注射到小鼠胚胎成纤维细胞中,发现其能抑制细胞周期的发展,故称之为抗增殖蛋白(Prohibitin,PHB)。PHB 广泛分布在各种生物细胞和组织中。目前研究显示,PHB... 1989年MeClung 等首先克隆出哺乳动物 PHB 基因,将 PHB1 mRNA 在显微镜下注射到小鼠胚胎成纤维细胞中,发现其能抑制细胞周期的发展,故称之为抗增殖蛋白(Prohibitin,PHB)。PHB 广泛分布在各种生物细胞和组织中。目前研究显示,PHB具有抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡和抗肿瘤等多种生理功能,并在乳腺癌、前列腺癌、宫颈癌、鼻咽癌等恶性肿瘤中异常表达。本文将从PHB 的结构与定位、生物学功能及其与肿瘤的关系等方面作一综述。 展开更多
关键词 prohibitin 抗肿瘤 小鼠胚胎成纤维细胞 抑制细胞增殖 诱导细胞凋亡 PHB 生物学功能 哺乳动物
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稳定表达Prohibitin 2蛋白SW620细胞株的建立 被引量:1
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作者 武标 徐丽丽 +2 位作者 王妍 汤玲 孙文旦 《江苏医药》 CAS 2015年第20期2373-2376,共4页
目的构建prohibitin 2(Phb2)蛋白基因的真核表达载体,并建立稳定表达Phb2蛋白的细胞株。方法扩增Phb2基因全长编码序列,经双酶切后克隆至真核表达载体pcDNA3中,将重组表达质粒pcDNA3-FLAG-Phb2转染至SW620细胞,用G418筛选阳性克隆,Weste... 目的构建prohibitin 2(Phb2)蛋白基因的真核表达载体,并建立稳定表达Phb2蛋白的细胞株。方法扩增Phb2基因全长编码序列,经双酶切后克隆至真核表达载体pcDNA3中,将重组表达质粒pcDNA3-FLAG-Phb2转染至SW620细胞,用G418筛选阳性克隆,Western blot检测Phb2蛋白的表达。结果经测序鉴定,成功构建了Phb2基因的真核表达载体。转染SW620细胞后能够稳定有效的表达Phb2蛋白。结论成功构建了稳定表达Phb2蛋白的细胞株。 展开更多
关键词 基因表达 prohibitin 2
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