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84K杨组培苗高效毛状根遗传转化体系构建
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作者 焦阳 乔静 +6 位作者 曾智新 王深 杨雪鑫 张英睿 杨玉冰 赵禹森 舒文波 《林业科学》 北大核心 2026年第1期122-132,共11页
【目的】针对药用植物毛状根本源转化困难的技术难题,基于异源转化技术发展潜力,选用速生型84K杨构建高效毛状根遗传转化体系。【方法】本研究以84K杨组培苗为材料,通过比较菌株类型、外植体类型、菌液浓度、侵染时间,构建高效的毛状根... 【目的】针对药用植物毛状根本源转化困难的技术难题,基于异源转化技术发展潜力,选用速生型84K杨构建高效毛状根遗传转化体系。【方法】本研究以84K杨组培苗为材料,通过比较菌株类型、外植体类型、菌液浓度、侵染时间,构建高效的毛状根遗传转化体系。进一步克隆金钗石斛萜类生物碱合成途径下游基因LOC110095726(LOC2),评估异源转化效果。【结果】最佳的诱导菌株是C58C1,21天毛状根诱导率达100%,诱导的平均根数(5.06±2.36)条,平均根长为(12.83±5.75)mm,且转化率为46.67%±11.55%;最佳的诱导外植体是叶片,14天毛状根诱导率达93.33%±11.55%,诱导的平均根数(3.89±2.53)条,平均根长为(8.36±4.24)mm;最佳的侵染浓度是0.8(OD_(600)),21天毛状根诱导率达100%,诱导的平均根数为6.03±2.10条,平均根长为17.77±9.23 mm;最佳的侵染时间是15 min,21天毛状根诱导率达100%,诱导的平均根数为6.03±2.10条,平均根长为17.76±9.23 mm。成功克隆了金钗石斛LOC2基因到过表达载体,并转入发根农杆菌C58C1中,获得了LOC2的阳性毛状根。【结论】84K杨毛状根最佳的遗传转化体系为菌液浓度(OD_(600))0.8的C58C1菌液侵染叶片15 min。这套方法以其简便、快捷、稳定性高等优点,可在药用植物代谢物活性成分功能验证和高活性成分植物创制中应用。该体系不仅适用于代谢途径相似的药用植物活性成分功能验证,也能为规模化生产药用活性成分提供可靠的技术基础。 展开更多
关键词 84k 发根农杆菌 毛状根 金钗石斛 遗传转化
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Salt tolerance conferred by over-expression of OsNHX1 gene in Poplar 84K 被引量:7
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作者 WANGShuyao CHENQijun +2 位作者 WANGWenlong WANGXuechen LUMengzhu 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2005年第3期224-228,共5页
OsNHX1 gene (Na+/H+ antiporter gene of Oryza sativa L.) was introduced into Poplar 84K with Agrobacte- rium tumefaciens-mediated transformation. PCR, Southern and Northern blot analysis showed that OsNHX1 gene was inc... OsNHX1 gene (Na+/H+ antiporter gene of Oryza sativa L.) was introduced into Poplar 84K with Agrobacte- rium tumefaciens-mediated transformation. PCR, Southern and Northern blot analysis showed that OsNHX1 gene was incorporated successfully into the genome of Poplar 84K and expressed in these transgenic plants. Salt tolerance test showed that three lines of transgenic plants grew normally in the presence of 200 mmol/L NaCl, while the Na+ content in the leaves of the transgenic plants grown at 200 mmol/L NaCl was significantly higher than that in plants grown at 0 mmol/L NaCl. The osmotic potential in the transgenic plants with high salinity treatment was lower than that of control plants. Our results demonstrate the potential use of these transgenic plants for agricultural use in saline soils. 展开更多
关键词 白杨 OsNHX1基因 耐盐性 分析方法 氨基酸
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Cloning and Characterization of a Mitogen-Activated Protein Kinase Gene 84<i>KMPK</i>14 in Hybrid Poplar (<i>Populus alba</i>×<i>P. glandulosa</i>cv. “84K”)
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作者 Ye Zhao Dan Wang +5 位作者 Yongqiang Zhang Yajie Niu Xiaojuan Zong Yan Ma Xianfeng Guo Jing Guo 《American Journal of Plant Sciences》 2018年第13期2567-2579,共13页
Mitogen-activated protein kinases (MAPKs) are important components in signal transduction modules which play crucial roles in regulation of many biological processes in plants. Although genome-wide analysis of MAPK an... Mitogen-activated protein kinases (MAPKs) are important components in signal transduction modules which play crucial roles in regulation of many biological processes in plants. Although genome-wide analysis of MAPK and MAPKK family has been carried out in poplar species, few data about the biological function analysis of this gene family are available to date. In this study, a group C MAPK gene 84KMPK14 was cloned from hybrid poplar (Populus alba × P. glandulosa cv. “84K”). It contained a typical protein kinase domain, a conserved TEY-motif and an atypical conserved common docking (CD) domain. Sequence alignment revealed that 84KMPK14 was the most homologous to Populus trichocarpa PtMPK14. Expression analysis indicated that the transcript of 84KMPK14 in roots and young leaves was higher than that in other tissues. The expression of 84KMPK14 was down-regulated by low or high temperature and was induced by H2O2 significantly. It was suppressed by drought and salinity stresses slightly one hour after treatment and then increased quickly three hours after treatment. These results indicated that 84KMPK14 may be involved in environmental stresses, which provides basis for further characterization of the physiological analysis on this gene. 展开更多
关键词 MAPK Expression Analysis ABIOTIC Stress 84k poplar MPK14
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84K杨树耐盐基因转化研究 被引量:38
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作者 樊军锋 韩一凡 +2 位作者 李玲 彭学贤 李嘉瑞 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2002年第4期33-37,共5页
在已建立了 84K杨叶片外植体再生系统的基础上 ,利用叶盘法首次开展了 84K杨双价耐盐基因 mtl D/gut D的转化研究 ,经诱导不定芽及诱导生根阶段卡那霉素 (选择性抗生素 )连续筛选 ,获得了 1 6株卡那霉素抗性转化植株。抗性植株经 PCR检... 在已建立了 84K杨叶片外植体再生系统的基础上 ,利用叶盘法首次开展了 84K杨双价耐盐基因 mtl D/gut D的转化研究 ,经诱导不定芽及诱导生根阶段卡那霉素 (选择性抗生素 )连续筛选 ,获得了 1 6株卡那霉素抗性转化植株。抗性植株经 PCR检测 ,有 4株呈阳性。耐盐实验表明 ,3株阳性植株抗 Na Cl能力比对照有不同程度提高。 展开更多
关键词 基因转化 84k 耐盐基因 卡那霉素 叶盘法
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84K杨叶片外植体再生系统的建立 被引量:30
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作者 樊军锋 李玲 +1 位作者 韩一凡 李嘉瑞 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期33-36,共4页
利用正交试验等设计 ,首次系统开展了 84K杨叶片外植体再生系统建立研究 ,确定了84K杨叶片外植体最适不定芽诱导培养基及激素配比为 MS+ 6- BA1 .5 mg/L+ NAA0 .1mg/L,不定芽最适生根诱导培养基及激素配比为 GMS+ NAA0 .0 1 mg/L+ IBA0 ... 利用正交试验等设计 ,首次系统开展了 84K杨叶片外植体再生系统建立研究 ,确定了84K杨叶片外植体最适不定芽诱导培养基及激素配比为 MS+ 6- BA1 .5 mg/L+ NAA0 .1mg/L,不定芽最适生根诱导培养基及激素配比为 GMS+ NAA0 .0 1 mg/L+ IBA0 .2 5 mg/L。该实验结果为 展开更多
关键词 84k 叶片外植体 再生系统
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84K杨的生长特性及杂交可配性 被引量:9
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作者 周永学 符毓秦 +5 位作者 樊军锋 刘玉媛 高建社 王军 符军 李均安 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期11-12,16,共3页
经过多年育苗、造林试验及相关研究,得出了84K杨的生长特性主要表现为:生长迅速,1年生苗通直高大,平均高3.5m左右,最高达5.0m;苗木速生期出现在6、7月份,苗高、地径生长量分别占全年总量的64.5%和46.4%。对比试验林中材积生长量比毛白杨... 经过多年育苗、造林试验及相关研究,得出了84K杨的生长特性主要表现为:生长迅速,1年生苗通直高大,平均高3.5m左右,最高达5.0m;苗木速生期出现在6、7月份,苗高、地径生长量分别占全年总量的64.5%和46.4%。对比试验林中材积生长量比毛白杨高79.8%,比毛白杨3个优良无性系大11.3%;抗病性强,3年生对比林中84K杨对主要病害黑斑病、叶枯病和锈病的感病指数分别为1.60%、1.18%和0.28%;对干部溃疡病,生长旺盛的植株几乎不感染;抗寒、抗旱性强,84K杨的抗寒、抗旱性比新疆杨、M101杨、毛白杨30号都强;根系发达,根蘖能力强,育苗成活率高;84K杨作亲本的杂交组合杂交可配性好,杂种优势强,是很好的杂交亲本。 展开更多
关键词 84k 生长特性 有性杂交
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84K杨叶片再生系统的建立 被引量:10
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作者 王树耀 田宗城 +1 位作者 黄白红 徐艳 《湖南文理学院学报(自然科学版)》 CAS 2004年第4期50-51,55,共3页
选用84K杨的叶片作为外植体,MS作为基本培养基,采用不同浓度组合的BA和NAA对84K杨再生系统进行了研究.结果表明,在MS培养基中单独添加2.0mg/L BA时,不定芽分化率为90%,单独添加0.3mg/L NAA时,不定根产生率最高(90%),但无不定芽生成.... 选用84K杨的叶片作为外植体,MS作为基本培养基,采用不同浓度组合的BA和NAA对84K杨再生系统进行了研究.结果表明,在MS培养基中单独添加2.0mg/L BA时,不定芽分化率为90%,单独添加0.3mg/L NAA时,不定根产生率最高(90%),但无不定芽生成.采用1.5mg/LBA+0.3mg/LNAA组合搭配时,不定芽分化率最高(95%).在此基础上,采用M1(MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L NAA)培养基,研究了不同着生位置的叶片、同一着生位置叶片的不同切段以及叶片在培养基上的放置方式对84K杨叶片再生的影响,结果表明带有叶柄的下切段比其余叶片切段不定芽再生率高,幼嫩叶片比老化叶片再生率高,叶片近轴端向下接触培养基比远轴端向下接触培养基再生率高.叶片再生系统的建立为开展84K杨的工厂化育苗和遗传转化奠定了基础. 展开更多
关键词 84k 叶片 不定芽分化 再生系统 基本培养基 再生率 嫩叶 MS 放置方式 位置
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OsNHX1基因转化84K杨的研究 被引量:8
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作者 王树耀 田宗城 +1 位作者 王云 周芳 《湖南文理学院学报(自然科学版)》 CAS 2005年第1期60-63,共4页
采用农杆菌介导的方法开展了水稻Na+ /H+ 逆向转运蛋白基因OsNHX1转化84K杨的研究.建立了84K杨的叶外植体高频再生系统,经诱导不定芽及诱导生根阶段卡那霉素连续筛选,获得了大量卡那霉素抗性转化植株.PCR检测和Southern杂交检测表明,OsN... 采用农杆菌介导的方法开展了水稻Na+ /H+ 逆向转运蛋白基因OsNHX1转化84K杨的研究.建立了84K杨的叶外植体高频再生系统,经诱导不定芽及诱导生根阶段卡那霉素连续筛选,获得了大量卡那霉素抗性转化植株.PCR检测和Southern杂交检测表明,OsNHX1基因已成功整合到84K杨基因组.耐盐实验表明,转基因植株能在2 0 0mmolNaCl条件下正常生长. 展开更多
关键词 84k 基因转化 高频再生系统 卡那霉素抗性 农杆菌介导 PCR检测 转基因植株 叶外植体 蛋白基因 逆向转运 Na^+ 诱导生根 杂交检测 转化植株 NaCl H^+ 不定芽 基因组 水稻
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84K杨基因转化受体系统的建立 被引量:3
9
作者 张岗 康振生 +2 位作者 孙燕飞 韩青梅 芦晓飞 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第4期87-90,96,共5页
 以84K杨为研究对象,通过建立叶片再生系统及卡那霉素敏感性试验,确立了稳定高效的基因转化受体系统。结果表明,以MS培养基为基本培养基,0.5~1.0mg/L6-BA+0.01~0.1mg/LNAA组合时,叶片出芽率不到50%,每叶平均生芽数5~6个;1.0~1.5mg/...  以84K杨为研究对象,通过建立叶片再生系统及卡那霉素敏感性试验,确立了稳定高效的基因转化受体系统。结果表明,以MS培养基为基本培养基,0.5~1.0mg/L6-BA+0.01~0.1mg/LNAA组合时,叶片出芽率不到50%,每叶平均生芽数5~6个;1.0~1.5mg/L6-BA+0.02mg/L2,4-D组合时,叶片出芽率达90%~100%,每叶平均生芽数约20个。用后者附加不同质量浓度梯度卡那霉素,确定叶片外植体芽诱导卡那霉素临界筛选质量浓度为20mg/L。利用对84K杨芽生根效果较好的培养基GMS+0.01mg/LNAA+0.25mg/LIBA,附加不同质量浓度梯度卡那霉素,筛选出芽生根卡那霉素临界质量浓度亦为20mg/L。 展开更多
关键词 基因转化受体系统 84k 卡那霉素 浓度梯度 质量浓度 敏感性试验 基本培养基 MS培养基 叶片外植体 再生系统 生根效果 出芽率 芽诱导 组合 生芽 平均 筛选 临界
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84K杨愈伤组织再生体系和直接分化再生体系遗传转化的比较性研究 被引量:4
10
作者 王丽娜 王玉成 杨传平 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期542-548,共7页
植物转基因必须以建立良好的植物转化受体系统为基础,而良好的受体系统必须以具有高频率的转化率及较强的再生能力为前提。实验以84K杨叶片为材料研究其在不同培养条件、不同种类及浓度的植物激素对其脱分化及再分化的影响,并建立了两... 植物转基因必须以建立良好的植物转化受体系统为基础,而良好的受体系统必须以具有高频率的转化率及较强的再生能力为前提。实验以84K杨叶片为材料研究其在不同培养条件、不同种类及浓度的植物激素对其脱分化及再分化的影响,并建立了两种成熟的组织再生系统,得出组织培养体系与遗传转化体系的受体系统在激素配比方面存在一定差距,所以在此基础上进行了PCK1、PCK2两个基因的愈伤途径和不定芽途径途径的遗传转化,并对两种遗传转化体系进行了对比性分析并总结出两种体系的优缺点。 展开更多
关键词 84k 愈伤组织 直接分化 遗传转化
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新一代“环保”杨84K的扦插研究
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作者 陈荃 安建平 +2 位作者 焦成瑾 王廷璞 魏志贞 《天水师范学院学报》 2002年第5期34-35,37,共3页
84k杨扦插研究表明:插条浸水、封蜡、加铺地热线均有利于插条生根,80-100ppm浓度的吲哚丁酸(IBA)、大于100PPm浓度的吲哚乙酸(IAA)对插条生根率和根长有明显的促进作用,50PPmIBA和IAA一定程度上可提高插条的生根数。30-100ppm浓度的... 84k杨扦插研究表明:插条浸水、封蜡、加铺地热线均有利于插条生根,80-100ppm浓度的吲哚丁酸(IBA)、大于100PPm浓度的吲哚乙酸(IAA)对插条生根率和根长有明显的促进作用,50PPmIBA和IAA一定程度上可提高插条的生根数。30-100ppm浓度的NAA则对插条的生根率、根长及生根数均有明显的促进作用。 展开更多
关键词 84k 扦插繁殖 植物生长调节剂 插条 生根率 白杨派杨树
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一种84K杨再生体系的建立 被引量:3
12
作者 周熙莹 肖龙敏 +3 位作者 张倩 张永波 马晓荣 程玉祥 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期143-145,F0004,共4页
将脱分化与再分化过程分开,探讨不同培养基和激素配比对黑暗条件下84K杨叶片及茎段外植体产生愈伤组织及愈伤组织诱导出芽的影响。结果表明,84K杨叶片产生愈伤组织的高效培养基为MS+KT 0.5 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;茎段为WPM+KT0.5 mg/L+2,... 将脱分化与再分化过程分开,探讨不同培养基和激素配比对黑暗条件下84K杨叶片及茎段外植体产生愈伤组织及愈伤组织诱导出芽的影响。结果表明,84K杨叶片产生愈伤组织的高效培养基为MS+KT 0.5 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;茎段为WPM+KT0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L。愈伤组织诱导出芽的高效培养基为WPM+TDZ 0.05 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。为下一步获得高效的84K杨转基因体系提供一个高效受体系统。 展开更多
关键词 84k 愈伤组织 不定芽诱导
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‘84K’杨组氨酸激酶基因PaHK3b的克隆及功能分析 被引量:1
13
作者 鲁俊倩 武舒 +3 位作者 钟姗辰 张伟溪 苏晓华 张冰玉 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2021年第1期26-34,共9页
[目的]本研究克隆了银腺杨‘84K’(Populus alba×P.glandulosa‘84K’)组氨酸激酶基因PaHK3b启动子及编码区,并对其表达进行检测及功能鉴定,为深入研究PaHK3b基因在杨树生长发育的调控作用提供线索,为杨树分子育种及品种改良奠定... [目的]本研究克隆了银腺杨‘84K’(Populus alba×P.glandulosa‘84K’)组氨酸激酶基因PaHK3b启动子及编码区,并对其表达进行检测及功能鉴定,为深入研究PaHK3b基因在杨树生长发育的调控作用提供线索,为杨树分子育种及品种改良奠定基础。[方法]根据毛果杨(P.trichocarpa Torr.&Gray)基因组信息,设计引物克隆‘84K’杨组氨酸激酶基因PaHK3b启动子及CDS序列,并对其保守结构域和启动子顺式作用元件进行分析;同时,对‘84K’杨进行植物激素处理(10μmol·L^(−1)ABA、10μmol·L^(−1)6-BA、10μmol·L^(−1) IBA、10μmol·L^(−1) GA3及10μmol·L^(−1)水杨酸(SA))及非生物胁迫处理(42℃高温、0℃低温、200 mmol·L^(−1) NaCl和5%PEG6000),利用实时定量PCR(qRT-PCR)方法检测PaHK3b基因表达情况与表达响应差异,并采用原核表达方法初步确定PaHK3b基因的生物学功能。[结果]PaHK3b基因编码框区长度为3060 bp,编码1019个氨基酸,PaHK3b蛋白具有CHASE、HisKA和REC等典型的细胞分裂素受体结构域。PaHK3b基因启动子序列中不仅含有大量TATA框和CAAT框常见核心元件,还包含低温响应元件LTR、防御与胁迫响应元件TC-rich repeats、赤霉素响应元件GARE-motif、水杨酸响应元件TCA-element等顺式作用元件,这些元件与杨树的激素响应和逆境胁迫响应密切相关。qRT-PCR分析表明:PaHK3b基因在叶片中表达最高,根部中等,茎中最少;另外,与正常条件下相比,在高温、低温、NaCl及PEG处理时,PaHK3b基因表达量与对照明显增高,分别为对照的2.67、2.61、2.28、1.87倍;用IBA诱导处理时,基因表达量与对照相比差异不大,而在6-BA、ABA、GA3及SA处理时,基因表达量与对照相比均呈下调表达;在添加5%PEG6000的LB液体培养基中,转入PaHK3b基因原核表达载体的大肠杆菌菌株生长速度显著高于对照,在添加50~150 mmol·L^(−1)NaCl的LB固体培养基上,转入PaHK3b基因原核表达载体的大肠杆菌菌株单克隆生长均好于对照。[结论]‘84K’杨PaHK3b基因启动子含有逆境和激素响应元件,表明PaHK3b基因与杨树植物激素信号及非生物胁迫信号响应密切相关。经非生物胁迫处理、激素处理及原核表达证实,杨树PaHK3b基因参与杨树植物激素信号响应,并在其抗逆境胁迫过程中发挥重要调控作用。 展开更多
关键词 银腺杨‘84k 组氨酸激酶 表达模式 原核表达
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84k杨叶片离体快繁体系的优化 被引量:1
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作者 苟路正 曲春浦 +1 位作者 刘关君 杨成君 《西部林业科学》 CAS 北大核心 2018年第3期91-95,共5页
以84k杨成熟叶片为外植体,诱导愈伤组织及不定芽的分化,经过壮苗、生根过程获得再生植株,建立了84k杨组织培养和快速繁殖技术新体系。结果表明:最佳叶片不定芽诱导培养基MS+6-BA 0.8mg/L+NAA0.1mg/L,诱导率100%,平均丛生芽数为15.06;最... 以84k杨成熟叶片为外植体,诱导愈伤组织及不定芽的分化,经过壮苗、生根过程获得再生植株,建立了84k杨组织培养和快速繁殖技术新体系。结果表明:最佳叶片不定芽诱导培养基MS+6-BA 0.8mg/L+NAA0.1mg/L,诱导率100%,平均丛生芽数为15.06;最佳壮苗培养基为MS+IBA 0.6mg/L+6-BA 0.1mg/L;最佳生根适宜培养基为MS+IBA 0.6mg/L+NAA 0.4mg/L,生根率100%;将生长良好的组培苗移栽并扣瓶培养1周,成活率达97%。 展开更多
关键词 84k 组织培养 植株再生 体系优化
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氮缺乏对84K杨树组培苗光合特性及次生代谢的影响 被引量:4
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作者 苗娜 史羽桐 +2 位作者 王胜芳 高媛 王慧梅 《西部林业科学》 CAS 北大核心 2024年第3期161-168,共8页
研究氮缺乏对84K杨树组培苗生长的影响,以期为84K杨的育种与繁殖提供理论基础。以84K杨树组培苗为实验材料,通过氮缺乏处理,测定84K杨树组培苗的生物量、光合参数、叶绿素荧光参数,并进一步分析氮缺乏时全氮、全碳、碳氮比、总酚及抗氧... 研究氮缺乏对84K杨树组培苗生长的影响,以期为84K杨的育种与繁殖提供理论基础。以84K杨树组培苗为实验材料,通过氮缺乏处理,测定84K杨树组培苗的生物量、光合参数、叶绿素荧光参数,并进一步分析氮缺乏时全氮、全碳、碳氮比、总酚及抗氧化活性的变化。结果显示:随着培养基中氮含量的减少,84K杨树组培苗的干重、净光合速率(P n)和气孔导度(G s)均受到抑制,同时,氮缺乏导致84K杨树组培苗叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量及最大光化学效率(Fv/Fm)降低。此外,随着培养基中氮素的减少,84K杨树组培苗中全氮含量显著减少,碳氮比显著升高,总酚含量显著增加。抗氧化分析结果表明,培养基中氮含量越低,组培苗的抗氧化活性越好。相关性分析表明,生物量与光合参数及叶绿素含量之间存在极显著正相关,但与总酚含量之间存在负相关;全氮含量与总酚含量之间存在负相关,与全碳及碳氮比之间存在正相关;同时84K杨树组培苗总酚含量及抗氧化活性之间具有明显的相关性。研究结果表明:氮缺乏可对84K杨树组培苗的光合生理及次生代谢产物产生影响,不利于84K杨树组培苗的生长和光合作用,但促进了多酚等抗氧化物质的产生。本研究可为84K杨树的栽培管理提供理论依据和基础数据。 展开更多
关键词 氮缺乏 84k杨树组培苗 生长 光合 总酚 抗氧化活性
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毛白杨、84K杨扦插育苗技术研究 被引量:1
16
作者 马玉林 王维海 《青海农林科技》 2004年第B03期49-50,共2页
试验表明,毛白杨扦插采用浓度200mg·kg-1a—萘乙酸处理成活率达到82 3%,84K杨经生根粉浓度200mg·kg-1处理后,成活率达80%。基质试验表明,采用森林土+河沙+羊板粪等较为疏松的扦插基质扦插效果明显。
关键词 毛白杨 84k 扦插育苗 插穗 扦插基质 插后管理
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA处理对杨树茎生长发育的影响
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作者 寇焙森 程萌萌 +4 位作者 郭雪琴 葛彬 刘迪 陆海 李慧 《生物技术通报》 北大核心 2025年第1期240-251,共12页
【目的】探究组蛋白乙酰化修饰在杨树茎生长发育中的分子机制。【方法】利用组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A, TSA)对84K杨树(Populus alba×P. glandulosa)进行不同时间处理,采用Western blot检测杨树茎中组蛋... 【目的】探究组蛋白乙酰化修饰在杨树茎生长发育中的分子机制。【方法】利用组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A, TSA)对84K杨树(Populus alba×P. glandulosa)进行不同时间处理,采用Western blot检测杨树茎中组蛋白乙酰化水平变化情况,然后用RNA-Seq技术对其茎中基因表达谱进行转录组分析,最后利用石蜡切片和扫描电镜观察木质部的表型变化。【结果】Western Blot结果表明2μmol/L TSA处理2 h能明显提高茎中组蛋白H3的乙酰化水平,随着TSA处理时间延长,组蛋白H3的乙酰化水平进一步升高。转录组结果显示,TSA处理2 h、12 h共得到5 625个差异基因表达,其中2 h上调基因2 158个,下调基因1 556个;12 h上调基因905个、下调基因1 006个。GO功能分析发现,差异上调基因主要富集在细胞壁组分,DNA结合转录因子活性;差异下调基因主要富集在光合作用、响应非生物刺激等词条;KEGG通路分析发现差异上调基因显著富集到木质素合成等通路。表型分析结果显示,相较于未处理组,TSA处理导致植株高度下降9.03%,但是茎直径和木质部厚度未见显著性差异。【结论】组蛋白H3乙酰化水平上升通过促进转录活性或细胞壁相关基因的表达来参与杨树茎的发育,从而影响植株的高度。 展开更多
关键词 转录组 组蛋白乙酰化 TSA 细胞壁 84k杨树
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PagGA2oxs基因家族鉴定及盐胁迫响应模式分析
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作者 任莹莹 毛建丰 安新民 《中国细胞生物学学报》 2025年第6期1226-1239,共14页
GA2ox(Gibberellin 2-oxidases)家族酶类在植物的生长发育和非生物逆境胁迫响应中发挥重要作用。该研究旨在系统鉴定杨树GA2ox家族成员并分析其表达模式。基于团队先前发表的84K杨(Populus alba×Populus glandulosa)的基因组数据,... GA2ox(Gibberellin 2-oxidases)家族酶类在植物的生长发育和非生物逆境胁迫响应中发挥重要作用。该研究旨在系统鉴定杨树GA2ox家族成员并分析其表达模式。基于团队先前发表的84K杨(Populus alba×Populus glandulosa)的基因组数据,采用生物信息学方法从84K杨中鉴定获得33个GA2ox基因。进一步对该基因家族成员进行了包括染色体定位、基因结构、理化性质、顺式作用元件、共线性关系、表达模式以及蛋白质互作网络构建等在内的系统分析。研究结果表明PagGA2oxs基因成员可被划分为两个亚家族,每个亚家族都具有相似的基因结构和保守的结构域。通过启动子区域的顺式作用元件分析,发现这些基因富含与胁迫响应、激素信号转导以及植物生长发育相关的顺式作用元件。共线性分析揭示了PagGA2oxs与拟南芥之间存在19个共线性事件,为理解GA2ox基因家族的进化提供了线索。在表达模式分析中,观察到该基因家族在茎、节间中表达量较高,还发现PagGA2ox6、PagGA2ox10、PagGA2ox14、PagGA2ox15、PagGA2ox25、PagGA2ox26、PagGA2ox32参与了盐胁迫响应,暗示它们可能通过与DELLA蛋白的互作,参与调控植物的生长发育和逆境响应,这些结果为理解木本植物GA2oxs基因的功能和解析耐盐机制提供了理论基础,也为培育耐盐性品种提供了潜在的候选基因。 展开更多
关键词 84k杨(Populus alba×Populus glandulosa) GA2ox 共线性分析 表达模式 盐胁迫
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胡杨PeHINT2过表达提高植物耐盐性
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作者 代新仁 杨艳飞 +2 位作者 任星榕 马庆华 李建波 《北京林业大学学报》 北大核心 2025年第10期96-107,共12页
【目的】胡杨因其显著的耐盐能力成为耐盐机理研究的模式物种,然而目前已知基因数量仍不足以解析其完整的耐盐调控网络。本研究拟通过鉴定并探究胡杨PeHINT2基因在盐胁迫中的作用,旨在为胡杨耐盐分子调控机制的解析和林木抗逆分子育种... 【目的】胡杨因其显著的耐盐能力成为耐盐机理研究的模式物种,然而目前已知基因数量仍不足以解析其完整的耐盐调控网络。本研究拟通过鉴定并探究胡杨PeHINT2基因在盐胁迫中的作用,旨在为胡杨耐盐分子调控机制的解析和林木抗逆分子育种奠定理论基础。【方法】从胡杨中克隆PeHINT2基因并分析其蛋白序列特征,构建进化树并进行亚细胞定位,采用农杆菌介导的花序浸染法和叶盘转化法将PeHINT2基因分别转化拟南芥和84K杨,从表型、生理和分子水平上对比分析过表达PeHINT2对植物耐盐性的影响。【结果】(1)胡杨PeHINT2属于HINT2亚家族,携带典型“His-XHis-X-His-XX”组氨酸三联体结构,与毛果杨和拟南芥的HINT2亲缘关系最近。(2)亚细胞定位结果显示PeHINT2定位在叶绿体中。(3)通过对胡杨组培苗进行盐胁迫处理发现,PeHINT2表达量明显升高,且随着处理时间的增加,PeHINT2表达量呈现先上升后下降的趋势。(4)盐胁迫下,过表达PeHINT2的拟南芥株系叶片生长、根长和鲜质量均显著优于野生型拟南芥,转基因杨的株高和地径降幅亦显著低于野生型杨树。(5)PeHINT2的过表达能增强盐胁迫下杨树PSⅡ的光合电子传递效率、实际光化学效率、光合作用效率和对光的适应能力,并通过减少活性氧积累、提升超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶等抗氧化酶活性来缓解氧化损伤。(6)盐胁迫下,过表达PeHINT2杨树中氧化还原系统相关基因CSD2、APX2、FNR和NTRC的表达量显著提高,表明PeHINT2可能通过影响这4个基因的表达进而调控转基因杨树在盐胁迫下的抗氧化能力。【结论】PeHINT2能够响应盐胁迫,可能通过提高叶绿体光合效率和增强其抗氧化调节能力,进而提升植株耐盐性。本研究不仅为解析胡杨PeHINT2功能提供了重要依据,并为林木耐盐种质资源的育种改良提供了关键的基因靶点。 展开更多
关键词 胡杨 PeHINT2 过表达 盐胁迫 84k 拟南芥 抗逆育种
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杨树SABP2基因的克隆与分析 被引量:4
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作者 董慧霞 理永霞 +2 位作者 贾秀贞 吕全 张星耀 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第3期82-88,95,共8页
【目的】克隆84K杨水杨酸结合蛋白2(Salicylic acid-binding protein 2,SABP2)基因并预测其功能。【方法】以生长至5片小叶的84K杨组培苗为材料,提取其叶和茎的总RNA。根据毛果杨SABP2基因(GenBank序列号:XM_002310718.2)的完整CDs序列... 【目的】克隆84K杨水杨酸结合蛋白2(Salicylic acid-binding protein 2,SABP2)基因并预测其功能。【方法】以生长至5片小叶的84K杨组培苗为材料,提取其叶和茎的总RNA。根据毛果杨SABP2基因(GenBank序列号:XM_002310718.2)的完整CDs序列,设计84K杨SABP2基因的引物,采用RT-PCR技术扩增84K杨SABP2基因全长,然后连接到pGM-T克隆载体,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,对84K杨SABP2基因进行克隆,获得该基因的全长序列。通过各种在线软件对84K杨SABP2基因及其编码的蛋白质进行生物信息学分析。【结果】84K杨基因的cDNA序列全长822bp,开放阅读框789bp,编码263个氨基酸。生物信息学分析表明,84K杨SABP2与毛白杨SABP2(GenBank序列号:JQ086570.1)的同源性最高,达98%;84K杨SABP2基因位于微体中;SABP2蛋白有11个蛋白质结合位点,属于α/β折叠水解酶家庭成员中的酯酶,为亲水性蛋白。【结论】成功克隆了84K杨的SABP2基因,其功能与前人对草本植物中SABP2部分功能的研究结果一致。 展开更多
关键词 84k 水杨酸结合蛋白2(SABP2)基因 生物信息学
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