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Proteomic analysis of hepatocellular carcinoma HepG2 cells treated with platycodin D 被引量:10
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作者 LU Jin-Jian LU De-Zhao +5 位作者 CHEN Yu-Fei DONG Ya-Ting ZHANG Jun-Ren LI Ting TANG Zheng-Hai YANG Zhen 《Chinese Journal of Natural Medicines》 SCIE CAS CSCD 2015年第9期673-679,共7页
Platycodin D(PD), a triterpenoid saponin isolated from Platycodonis Radix, is a famous Chinese herbal medicine that has been shown to have anti-proliferative effects in several cancer cell lines. The aim of this study... Platycodin D(PD), a triterpenoid saponin isolated from Platycodonis Radix, is a famous Chinese herbal medicine that has been shown to have anti-proliferative effects in several cancer cell lines. The aim of this study was to determine the changes in cellular proteins after the treatment of hepatocellular carcinoma HepG2 cells with PD using proteomics approaches. The cell viability was determined using the MTT assay. The proteome was analyzed by two-dimensional difference gel electrophoresis and matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry. Western blot analysis was used to confirm the expression of changed proteins. Our results showed that PD inhibited the proliferation of HepG2 cells in concentration- and time-dependent manners. Sixteen proteins were identified to be up-regulated in PD-treated HepG2 cells, including ATP5 H, OXCT1, KRT9, CCDC40, ERP29, RCN1, ZNF175, HNRNPH1, HSP27, PA2G4, PHB, BANF1, TPM3, ECH1, LGALS1, and MYL6. Three proteins(i.e., RPS12, EMG1, and KRT1) decreased in HepG2 cells after treatment with PD. The changes in HSP27 and PHB were further confirmed by Western blotting. In conclusion, our results shed new lights on the mechanisms of action for the anti-cancer activity of PD. 展开更多
关键词 platycodin d HepG2 Proteome 2-d dIGE
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基于网络药理学结合实验验证探讨桔梗皂苷D抗鼻咽癌的作用机制 被引量:1
2
作者 雷本蓝 杨江平 +5 位作者 陈艳芳 黄精纶 张希平 马灿芳 梁钢 焦爱军 《广西医科大学学报》 2025年第1期65-73,共9页
目的:通过网络药理学方法与细胞实验技术,旨在深入探讨桔梗皂苷D抗鼻咽癌方面的作用机制。方法:通过Pubchem、PharmMapper、GeneCards数据库获取桔梗皂苷D及鼻咽癌对应靶点并取交集后输入DAVID数据库中进行GO和KEGG富集分析,通过STRING... 目的:通过网络药理学方法与细胞实验技术,旨在深入探讨桔梗皂苷D抗鼻咽癌方面的作用机制。方法:通过Pubchem、PharmMapper、GeneCards数据库获取桔梗皂苷D及鼻咽癌对应靶点并取交集后输入DAVID数据库中进行GO和KEGG富集分析,通过STRING数据库和Cytoscape软件获取交集靶点蛋白互作网络(PPI)、“桔梗皂苷D—靶点—鼻咽癌—通路”网络模型,筛选获得相关信号通路及核心靶点,对排名前5的核心靶点和桔梗皂苷D进行分子对接。利用CCK-8法、平板克隆实验、伤口愈合实验、Calcein-AM/PI染色分别评估桔梗皂苷D对鼻咽癌细胞增殖、克隆形成、迁移和凋亡的影响,western blotting检测MAPK/ERK通路相关蛋白表达水平。结果:网络药理学分析获得潜在治疗靶点115个,GO、KEGG富集分析获得生物过程309个、细胞组分44个、和分子功能83个,信号通路125个,综合PPI、“药物—靶点—鼻咽癌—通路”网络模型以及KEGG富集结果筛选获得MAPK1、HRAS、GRB2、MAPK8、MAPK10等10个核心靶点,其中MAPK1度值最高。分子对接结果显示,桔梗皂苷D与核心靶点有较好的结合活性。细胞实验结果显示,桔梗皂苷D可显著抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移及克隆形成能力,诱导凋亡,下调p-ERK蛋白表达(均P<0.05)。结论:桔梗皂苷D可能通过降低p-ERK蛋白的表达,进而抑制MAPK/ERK信号通路的激活,从而发挥抗鼻咽癌的作用。 展开更多
关键词 桔梗皂苷d 鼻咽癌 网络药理学 MAPK/ERK信号通路
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桔梗皂苷D调节AMPK/PINK1/Parkin信号通路对膝骨关节炎大鼠软骨组织损伤的影响
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作者 王平 柳玉兵 《河北医学》 2025年第8期1233-1239,共7页
目的:探讨桔梗皂苷D(Platycodin D)调节活化蛋白激酶(AMPK)/PTEN诱导的推定激酶1(PINK1)/E3泛素连接酶(Parkin)信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨组织损伤的影响。方法:将大鼠分为对照(NC)组、模型(Model)组、Platycodin D低剂量组(Pla... 目的:探讨桔梗皂苷D(Platycodin D)调节活化蛋白激酶(AMPK)/PTEN诱导的推定激酶1(PINK1)/E3泛素连接酶(Parkin)信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨组织损伤的影响。方法:将大鼠分为对照(NC)组、模型(Model)组、Platycodin D低剂量组(Platycodin D-L组,)、Platycodin D高剂量组(Platycodin D-H组)、Platycodin D-H+AMPK通路抑制剂(Compound C)组,每组10只,HE染色观察KOA大鼠膝关节软骨组织形态学变化,并进行Mankin评分;试剂盒检测各组KOA大鼠膝关节软骨组织中氧化损伤标志物SOD、MDA和NO水平;DCFH-DA探针检测活性氧(ROS)水平;ELISA法检测各组软骨组织中炎症因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和单核细胞趋化蛋白1(MCP1)的表达水平;TUNEL法检测各组KOA大鼠膝关节软骨组织中细胞凋亡情况;Western blot检测软骨组织中半胱天冬酶(Caspase)3、Bcl-2家族K蛋白(Bak)及AMPK/PINK1/Parkin通路相关蛋白表达。结果:Model组与NC组相比,大鼠膝关节软骨组织细胞排列紊乱,软骨损伤严重,Mankin评分、MDA、NO、ROS、IL-6、TNF-α、IL-1β、MCP1水平、细胞凋亡率、Caspase3、Bak蛋白表达量明显升高(P<0.05),SOD水平、p-AMPK、p-PINK1、p-Parkin蛋白表达量明显降低(P<0.05);与Model组相比,Platycodin D-L组和Platycodin D-H组大鼠膝关节软骨组织损伤缓解,Mankin评分、MDA、NO、ROS、IL-6、TNF-α、IL-1β、MCP1水平、细胞凋亡率、Caspase3、Bak蛋白表达量明显降低(P<0.05),SOD水平、p-AMPK、p-PINK1、p-Parkin蛋白表达量明显升高(P<0.05);Platycodin D-H+Compound C组中,Platycodin D对软骨组织损伤的缓解作用被逆转(P<0.05)。结论:Platycodin D可能通过调节AMPK/PINK1/Parkin信号通路缓解KOA大鼠软骨组织损伤。 展开更多
关键词 桔梗皂苷d 活化蛋白激酶(AMPK)/PTEN诱导的推定激酶1(PINK1)/E3泛素连接酶(Parkin)信号通路 膝骨关节炎 软骨组织损伤
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桔梗皂苷D对支原体肺炎小鼠肺组织转化生长因子-β_(1)、表皮生长因子表达的影响
4
作者 郭百慧 刘楠楠 +3 位作者 王晓溪 王欣 蒙艳丽 王伟明 《中国现代医学杂志》 2025年第11期33-40,共8页
目的通过抑制纤维因子的表达,探究桔梗皂苷D对支原体肺炎的治疗机制。方法将桔梗皂苷D与转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))进行结合能力测试,采用Biacore软件进行桔梗皂苷D与TGF-β_(1)的亲和力分析,并进行分子对接模拟实验。将雄性SPF级... 目的通过抑制纤维因子的表达,探究桔梗皂苷D对支原体肺炎的治疗机制。方法将桔梗皂苷D与转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))进行结合能力测试,采用Biacore软件进行桔梗皂苷D与TGF-β_(1)的亲和力分析,并进行分子对接模拟实验。将雄性SPF级BALB/c小鼠60只分为对照组、模型组、阿奇霉素组、桔梗皂苷D高、中、低剂量组,每组10只。采用滴鼻法复制小鼠支原体肺炎模型,小鼠麻醉后经鼻滴入20μL含1×10^(6) ccu/mL肺炎支原体的悬液,对照组采用等体积生理盐水滴鼻,1次/d,持续3 d。桔梗皂苷D高、中、低剂量组小鼠分别给予桔梗皂苷D 10.0、5.0、2.5 g/(kg·d),阿奇霉素组小鼠给予32.0 mg/(kg·d)的阿奇霉素,对照组和模型组小鼠则给予等体积的生理盐水,连续给药7 d。制备小鼠肺组织病理切片,采用苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察肺组织的病理学变化。采用免疫组织化学染色(IHC)检测小鼠肺组织TGF-β_(1)和表皮生长因子(EGF)的蛋白阳性表达。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TGF-β_(1)、EGF mRNA的表达。结果Biacore分子互作和分子对接结果显示,桔梗皂苷D在体外能够与TGF-β_(1)蛋白进行特异性结合。各组小鼠肺组织的病理学分析显示,与模型组相比,桔梗皂苷D各剂量组小鼠肺组织中仅见少量肺泡壁充血,炎症细胞浸润显著减少,其组织结构与对照组和阿奇霉素组相似,且桔梗皂苷D高剂量组的炎症细胞浸润最少、肺泡壁充血范围最小。各组小鼠肺组织纤维化病理结果显示,与模型组相比,桔梗皂苷D各剂量组的胶原纤维均减少,与对照组和阿奇霉素组的肺组织相似,且桔梗皂苷D高、中剂量组的胶原纤维显著减少、仅有少量肺泡壁增厚。与对照组比较,模型组TGF-β_(1)阳性表达升高(P<0.05);与模型组比较,桔梗皂苷D高、中、低剂量组TGF-β_(1)阳性表达均减少(P<0.05)。与对照组比较,模型组EGF蛋白阳性表达降低(P<0.05);与模型组比较,桔梗皂苷D高、中剂量组EGF蛋白阳性表达均增多(P<0.05)。与对照组比较,模型组TGF-β_(1)mRNA相对表达量升高(P<0.05);与模型组相比,桔梗皂苷D高、中剂量组的TGF-β_(1)mRNA相对表达量降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组EGF mRNA相对表达量降低(P<0.05);与模型组相比,桔梗皂苷D各给药组的EGF mRNA相对表达量均有不同程度升高(P<0.05)。结论桔梗皂苷D能够有效改善肺炎支原体肺炎的肺间质纤维化,其作用机制可能是通过降低TGF-β_(1)表达、提高EGF表达来抑制上皮间质转化的发生。 展开更多
关键词 支原体肺炎 桔梗皂苷d 上皮间质转化 表皮生长因子 转化生长因子-β_(1) 分子互作
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HPLC法测定不同采收期及不同部位桔梗中桔梗皂苷D含量 被引量:43
5
作者 许传莲 郑毅男 +2 位作者 杨腊虎 刘墨祥 徐保军 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期58-60,64,共4页
为寻找和合理利用桔梗资源及控制生药质量 ,用HPLC法测定春秋两季采挖的桔梗中桔梗皂苷D以及不同部位中桔梗皂苷D的含量。结果表明 :秋季 9、10月份桔梗中桔梗皂苷D的含量最高 ;不同部位中以根部含量最高 ,根皮茎叶中有痕量 ,花果实中... 为寻找和合理利用桔梗资源及控制生药质量 ,用HPLC法测定春秋两季采挖的桔梗中桔梗皂苷D以及不同部位中桔梗皂苷D的含量。结果表明 :秋季 9、10月份桔梗中桔梗皂苷D的含量最高 ;不同部位中以根部含量最高 ,根皮茎叶中有痕量 ,花果实中未检测到。色谱条件 :分析柱为HypersilNH2 (4 4mm×2 0 0mm) ,甲醇∶异丙醇 =38∶6 2为流动相 ,检测波长 2 10nm ,流速 0 8mL/min ,进样量在 0 1~ 1 9μg范围内 ,线性关系良好 ,r =0 9998,回收率 96 86 %。 展开更多
关键词 桔梗 桔梗皂苷d 高效液相色谱法 采收期
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桔梗皂苷D诱导人肺癌细胞A549的凋亡及机制 被引量:27
6
作者 代群 陈哲 +4 位作者 葛宇清 刘培 王海兵 马小琼 吴葆华 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第17期2626-2629,共4页
目的:研究桔梗皂苷D(platycodin,PD)抑制人肺癌A549细胞株增殖和诱导凋亡的分子机制。方法:体外培养人肺癌细胞株A549,PD作用终浓度分别为5~20μmol.L-1。MTT法测定PD对细胞的增殖抑制作用,显微镜观察细胞的形态学变化,Annexin V-FITC... 目的:研究桔梗皂苷D(platycodin,PD)抑制人肺癌A549细胞株增殖和诱导凋亡的分子机制。方法:体外培养人肺癌细胞株A549,PD作用终浓度分别为5~20μmol.L-1。MTT法测定PD对细胞的增殖抑制作用,显微镜观察细胞的形态学变化,Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡率,JC-1检测线粒体膜电位的变化,Western blot方法检测PD对Caspase-3,Caspase-9,PARP的剪切片段和Bax,Bcl-2,Bak,Bcl-xl蛋白表达的影响。结果:PD抑制A549细胞的增殖,并随药物浓度的增加和作用时间的延长,作用更显著;与对照组相比,不同浓度的PD作用24 h后,细胞凋亡率增加,线粒体膜电位降低,且差异显著。蛋白电泳检测结果显示蛋白Caspase-3,Caspase-9均出现剪切片断,并随着时间的增加断裂更明显。PD处理A549细胞后,Bax和Bak蛋白表达升高,Bcl-2和Bcl-xl蛋白表达下降。结论:PD具有明显的细胞毒作用,能诱导A549细胞凋亡,通过对Bax,Bak和Bcl-2,Bcl-xl表达的调控,导致线粒体膜电位的下降,进而激活Caspase最终导致肺癌细胞死亡。 展开更多
关键词 桔梗皂苷d A549 线粒体膜电位 细胞凋亡
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不同产地桔梗药材HPLC指纹图谱及桔梗皂苷D含量测定研究 被引量:36
7
作者 李喜凤 杜云锋 +2 位作者 谢新年 刘素梅 郝哲 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期529-532,共4页
目的:建立桔梗药材的HPLC指纹图谱并测定桔梗皂苷D的含量。方法:采用RP-HPLC法,以Hypersil C18柱(250mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.05 mol/L H3PO4溶液进行梯度洗脱,流速0.5 mL/min,检测波长210 nm(桔梗皂苷D含量测定为206 nm)... 目的:建立桔梗药材的HPLC指纹图谱并测定桔梗皂苷D的含量。方法:采用RP-HPLC法,以Hypersil C18柱(250mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.05 mol/L H3PO4溶液进行梯度洗脱,流速0.5 mL/min,检测波长210 nm(桔梗皂苷D含量测定为206 nm),柱温30℃。结果:以桔梗皂苷D为参照物峰,确定了12个共有峰,建立了18批药材的共有图谱,并比较了样品中桔梗皂苷D的含量。结论:所建立的HPLC指纹图谱及含量分析方法均具有较好的重现性,两者结合为桔梗药材质量控制提供了新的方法。 展开更多
关键词 桔梗 指纹图谱 桔梗皂苷d 含量测定
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桔梗皂苷D抑制人结肠癌SW620细胞增殖及其机制的研究 被引量:18
8
作者 吴葆华 陈喆 +3 位作者 吕望 舒幼娜 周俊 申屠建中 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期354-358,共5页
目的研究桔梗皂苷D对人结肠癌SW620细胞增殖的影响及作用机制。方法采用人结肠癌细胞株SW620细胞,分别以四甲基偶氮唑蓝法观察桔梗皂苷D对细胞增殖的抑制作用,以流式细胞术检测桔梗皂苷D对细胞周期分布和凋亡的影响,蛋白质免疫印迹法检... 目的研究桔梗皂苷D对人结肠癌SW620细胞增殖的影响及作用机制。方法采用人结肠癌细胞株SW620细胞,分别以四甲基偶氮唑蓝法观察桔梗皂苷D对细胞增殖的抑制作用,以流式细胞术检测桔梗皂苷D对细胞周期分布和凋亡的影响,蛋白质免疫印迹法检测桔梗皂苷D对细胞周期蛋白和凋亡蛋白表达的影响。结果与空白对照组比较,桔梗皂苷D呈剂量依赖地抑制人结肠癌SW620细胞的生长;15、20μmol·L-1桔梗皂苷D作用细胞24h后,显著增加G0/G1期细胞比例,分别为(72.83±5.26)%和(76.82±5.83)%(P<0.05,空白对照组(56.78±4.92)%,周期蛋白cyclinD1、c-myc、CDK6表达明显下调;10、15、20μmol·L-1桔梗皂苷D作用细胞48h后,明显增加细胞凋亡率,分别为(19.5±5.1)%、(35.8±5.3)%和(43.8±4.0)%(P<0.05,空白对照组(8.93±5.72)%,相关蛋白pro-caspase3、PARP表达下降。结论桔梗皂苷D通过调控周期蛋白cyclinD1、c-myc、CDK6的表达,将细胞阻滞于G1期,进而诱导细胞凋亡,抑制人结肠癌细胞SW620的增殖。 展开更多
关键词 桔梗皂苷d 结肠癌 SW620细胞 细胞周期阻滞 凋亡
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不同密度下桔梗干物质积累和桔梗皂苷D含量的动态研究 被引量:17
9
作者 耿慧云 王建华 +6 位作者 蔡爱民 周红英 董其亭 孙印石 薛永峰 马晓冲 刘莎 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期22-25,共4页
目的:研究不同密度下桔梗干物质积累和桔梗皂苷D含量动态变化。方法:大田试验设5个密度处理:M1(4cm×25cm),M2(6cm×25cm),M3(8cm×25cm),M4(10cm×25cm),M5(12cm×25cm),分时期对桔梗个体和群体的生物量积累、干... 目的:研究不同密度下桔梗干物质积累和桔梗皂苷D含量动态变化。方法:大田试验设5个密度处理:M1(4cm×25cm),M2(6cm×25cm),M3(8cm×25cm),M4(10cm×25cm),M5(12cm×25cm),分时期对桔梗个体和群体的生物量积累、干物质分配、根产量、桔梗皂苷D含量进行研究。结果:在一定密度范围内,桔梗个体生物量除M2>M3外,随着密度的增大而减少,群体生物量随密度增大而增加。桔梗器官干物质积累各处理间有显著差异,但趋势相近。各器官干物质分配在不同密度处理下差异显著,其中M2花果所占比例最小,根部物质积累最多;桔梗茎、花果干物质量随密度增加显著降低,而叶干物质量随密度增加显著增加。除M2最高外,桔梗单株产量随密度增加而增加。桔梗群体根产量随密度增加而增加。桔梗皂苷D含量以M2处理为最高。结论:适宜的密度对桔梗干物质积累与分配、桔梗根产量、桔梗皂苷D含量及群体产量极为重要。 展开更多
关键词 桔梗 密度 干物质积累 桔梗皂苷d
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HPLC-ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量 被引量:38
10
作者 朱丹妮 舒娈 +1 位作者 郅慧 高山林 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 2001年第4期11-13,共3页
首次采用高效液相 蒸发光散射检测器色谱法测定桔梗〔Platycodongrandiflorum (Jacq .)A .DC .〕中桔梗皂苷D含量 ,以C18(5 μm ,4.6mm× 2 5 0mm)为色谱柱 ,V(乙腈 )∶V(水 ) =2 8∶72为流动相 ,流速 0 .7mL/min ,以ELSD 5 0 0为... 首次采用高效液相 蒸发光散射检测器色谱法测定桔梗〔Platycodongrandiflorum (Jacq .)A .DC .〕中桔梗皂苷D含量 ,以C18(5 μm ,4.6mm× 2 5 0mm)为色谱柱 ,V(乙腈 )∶V(水 ) =2 8∶72为流动相 ,流速 0 .7mL/min ,以ELSD 5 0 0为检测器 ,外标法定量。结果表明 :桔梗皂苷D在 0 3~ 2 4μg范围内呈线性 ,回收率为 99 5 7% (n =5 ) ,RSD为1 10 %。对 8种不同来源的桔梗材料和 2 0个四倍体株系桔梗皂甙D含量的测定说明 ,此法是测定桔梗皂苷D的较佳方法 。 展开更多
关键词 桔梗 桔梗皂甙d 高效液相-蒸发光散射 皂苷含量
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应用RP-HPLC法测定不同产地中桔梗皂甙D 被引量:34
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作者 许传莲 杨腊虎 +2 位作者 郑毅男 刘墨祥 徐宝军 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期35-38,共4页
用反相高效液相色谱(RP- HPLC) 分析方法对常用中药桔梗中主要有效成分桔梗皂甙D(platycodinD) 进行了研究,考察了流动相对分离的影响,选择以C18 为色谱分析柱,乙腈- 磷酸盐缓冲液为流动相,检测波长为... 用反相高效液相色谱(RP- HPLC) 分析方法对常用中药桔梗中主要有效成分桔梗皂甙D(platycodinD) 进行了研究,考察了流动相对分离的影响,选择以C18 为色谱分析柱,乙腈- 磷酸盐缓冲液为流动相,检测波长为210 nm ,进样量在2-0 ~32-0 μg 之间呈良好线性关系,平均回收率为98-13 % ,RSD 为2-3 % 。 展开更多
关键词 RP-HPLC 桔梗 桔梗皂甙d 栽培
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不同产地桔梗中桔梗皂苷D及总多糖的含量比较 被引量:25
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作者 金传山 张伟 +4 位作者 桂双英 彭代银 吴德玲 黄力 李保明 《安徽医药》 CAS 2014年第2期246-249,共4页
目的比较不同产地桔梗中的桔梗皂苷D及总多糖的含量。方法高效液相色谱法和紫外—可见分光光度法分别测定桔梗中的桔梗皂苷D和桔梗总多糖。结果各产地桔梗药材中桔梗皂苷D含量均符合药典标准;不同产地的桔梗中桔梗皂苷D含量和多糖含量... 目的比较不同产地桔梗中的桔梗皂苷D及总多糖的含量。方法高效液相色谱法和紫外—可见分光光度法分别测定桔梗中的桔梗皂苷D和桔梗总多糖。结果各产地桔梗药材中桔梗皂苷D含量均符合药典标准;不同产地的桔梗中桔梗皂苷D含量和多糖含量存在一定相关性。结论通过多指标评价不同产地的桔梗药材质量,可以为桔梗药材的选用提供依据。 展开更多
关键词 不同产地 桔梗 桔梗皂苷d 桔梗多糖
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桔梗皂苷D诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡 被引量:11
13
作者 孔亚 王佳佳 +4 位作者 卢宗亮 周蕊 宋伟 王贺 许红霞 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期350-354,共5页
目的:研究来自桔梗的天然单体化合物桔梗皂苷D(platycodin D,PD)对高转移性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的影响,初步探索其可能的作用机制。方法:以不同浓度(0、2.5、5、10μmol/L)PD处理乳腺癌MDA-MB-231细胞后,采用MTT法检测细胞增殖率... 目的:研究来自桔梗的天然单体化合物桔梗皂苷D(platycodin D,PD)对高转移性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的影响,初步探索其可能的作用机制。方法:以不同浓度(0、2.5、5、10μmol/L)PD处理乳腺癌MDA-MB-231细胞后,采用MTT法检测细胞增殖率并计算IC50值,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达水平。结果:PD呈剂量依赖性显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖(P<0.01),作用72 h的IC50值为(7.30±2.67)μmol/L。与对照组相比,10μmol/L的PD可显著促进MDA-MB-231细胞的凋亡(P<0.05)。PD激活了caspase家族蛋白,上调有活性的cleaved caspase-3、cleaved caspase-8和cleaved caspase-9的表达,下调无活性的caspase-8和caspase-9的表达;PD同时减少Bcl-2的表达,增加Bax的表达,使Bcl-2/Bax的比值降低。研究还发现PD使突变型P53蛋白的表达减少、E2F1的表达增加。结论:PD抑制乳腺癌细胞增殖具有明显的抗肿瘤效应,而诱导凋亡的发生可能是其发挥抗肿瘤效应的机制之一。 展开更多
关键词 桔梗皂苷d 乳腺癌 MdA-MB-231细胞 细胞凋亡
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桔梗皂苷D配伍不同中药有效成分对乳腺癌4T1和MDA-MB-231细胞增殖及侵袭的影响 被引量:29
14
作者 韩向晖 叶依依 +1 位作者 郭保凤 刘胜 《中西医结合学报》 CAS 2012年第1期67-75,共9页
目的:探讨肺经引经药桔梗的有效成分桔梗皂苷D分别配伍不同治则下中药有效成分麦冬总皂苷、莪术醇、蛇床子素对乳腺癌细胞增殖及侵袭的影响。方法:应用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法确定各成分抑制乳腺癌细胞... 目的:探讨肺经引经药桔梗的有效成分桔梗皂苷D分别配伍不同治则下中药有效成分麦冬总皂苷、莪术醇、蛇床子素对乳腺癌细胞增殖及侵袭的影响。方法:应用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法确定各成分抑制乳腺癌细胞4T1和MDA-MB-231增殖的有效剂量;采用均匀设计法进行桔梗皂苷D与不同治则下中药有效成分的配伍优化;通过MTT法和Transwell实验比较和验证各优化配伍抑制乳腺癌细胞增殖及侵袭的作用。结果:逐步回归分析得到桔梗皂苷D加麦冬总皂苷、桔梗皂苷D加蛇床子素、桔梗皂苷D加莪术醇抑制乳腺癌细胞增殖的最佳配伍剂量。验证实验显示,桔梗皂苷D加莪术醇、桔梗皂苷D加蛇床子素优化配伍对4T1和MDA-MB-231细胞增殖的抑制效果明显优于桔梗皂苷D加麦冬总皂苷及各成分单用(P<0.05或P<0.01);对于4T1细胞,桔梗皂苷D加麦冬总皂苷和桔梗皂苷D加蛇床子素优化配伍对细胞侵袭能力的抑制作用优于桔梗皂苷D加莪术醇及各成分单用(P<0.05或P<0.01);对于MDA-MB-231细胞,则以桔梗皂苷D加蛇床子素和桔梗皂苷D加莪术醇对细胞侵袭能力的抑制作用最强,优于桔梗皂苷D加麦冬总皂苷(P<0.01)。结论:桔梗皂苷D与不同治则中药有效成分优化配伍抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭效果明确,不同的桔梗皂苷D配伍对效应指标的作用存在一定的差异。 展开更多
关键词 桔梗皂苷d 中草药 中药配伍 乳腺肿瘤 细胞增殖 肿瘤浸润 均匀设计
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不同产地桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的测定 被引量:27
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作者 谭玲玲 侯晓敏 胡正海 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1682-1684,共3页
目的建立测定桔梗Platycodon grandiflorum中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的测定方法,并准确测定我国不同产地桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的量。方法采用超声波甲醇提取法,称重法测定桔梗总皂苷量;采用HPLC法测定桔梗皂苷D量,色谱条件:Wa... 目的建立测定桔梗Platycodon grandiflorum中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的测定方法,并准确测定我国不同产地桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的量。方法采用超声波甲醇提取法,称重法测定桔梗总皂苷量;采用HPLC法测定桔梗皂苷D量,色谱条件:Waters Symmetry-C18色谱柱,流动相为乙腈-水(22∶78),体积流量1.0 m L/min,检测波长为210 nm,柱温为30℃。结果不同产地的桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D量差别较大。在所测的桔梗药材中,浙江产桔梗总皂苷量最高,为12.03%;黑龙江、辽宁、安徽、山东、江西产桔梗总皂苷量均高于《中国药典》2005年版规定的6%;而其余各省的量均低于6%,最低的为河南,其量仅为1.57%。对于桔梗皂苷D来说,云南产桔梗的量最高,为0.654%;河北产桔梗的量最低,为0.017%。结论建立的方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D量的测定。在我国不同产地桔梗药材中,桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的量存在差异。同一药材中桔梗总皂苷与桔梗皂苷D的量,未显示出相关性。 展开更多
关键词 桔梗 桔梗总皂苷 桔梗皂苷d HPLC 超声波甲醇提取法
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桔梗皂苷D通过FOXO3a通路介导前列腺癌PC-3细胞程序性坏死 被引量:9
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作者 宋伟 王佳佳 +6 位作者 王贺 朱明星 吴长蓬 贺英 黎娜 卢宗亮 许红霞 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期85-93,共9页
目的:研究天然化合物桔梗皂苷D(platycodin D)对前列腺癌PC-3细胞程序性坏死的影响,并初步探索转录因子叉头转录因子O3a(forkhead transcription factor O3a,FOXO3a)在桔梗皂苷D诱导的PC-3细胞程序性坏死中的相关作用机制。方法:分别采... 目的:研究天然化合物桔梗皂苷D(platycodin D)对前列腺癌PC-3细胞程序性坏死的影响,并初步探索转录因子叉头转录因子O3a(forkhead transcription factor O3a,FOXO3a)在桔梗皂苷D诱导的PC-3细胞程序性坏死中的相关作用机制。方法:分别采用广谱的caspase抑制剂Z-VAD-FMK和特异性针对caspase-3的抑制剂AC-DEVD-CHO预处理PC-3细胞,再用不同浓度的桔梗皂苷D处理72 h,MTT法检测PC-3细胞的存活率。分别采用锥虫蓝染色及乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)释放实验检测桔梗皂苷D对PC-3细胞膜完整性(锥虫蓝染色率和LDH释放率)的影响。蛋白质印迹法检测桔梗皂苷D对PC-3细胞中程序性坏死关键因子混合谱系激酶结构区域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like,MLKL)、磷酸化MLKL(phospho-MLKL,p-MLKL)以及p-MLKL四聚体表达水平的影响,以及对FOXO3a及其下游分子自杀相关因子配体(factor-associated suicide ligand,FasL)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factorrelated apoptosis-inducing ligand,TRAIL)蛋白表达的影响。免疫荧光法检测FOXO3a蛋白在细胞核内的表达情况。采用脂质体转染法将FOXO3asiRNA和阴性对照(negative control,NC)-siRNA转入PC-3细胞,蛋白质印迹法检测siRNA对FOXO3a蛋白表达水平的影响。FOXO 3a基因沉默后,分别采用MTT法、锥虫蓝染色及LDH释放实验检测沉默FOXO 3a基因表达后桔梗皂苷D对PC-3细胞存活率和细胞膜完整性(锥虫蓝染色率和LDH释放率)的影响。结果:随着桔梗皂苷D浓度的提高,PC-3细胞的存活率明显降低,呈浓度依赖性;同一桔梗皂苷D浓度下,Z-VAD-FMK和AC-DEVD-CHO组PC-3细胞的存活率与对照组相比,差异均无统计学意义(P值均>0.05),提示桔梗皂苷D对PC-3细胞增殖的抑制作用是非caspase依赖性的。桔梗皂苷D处理PC-3细胞后,锥虫蓝染色率和LDH释放率均明显升高(P值均<0.05)。桔梗皂苷D可上调PC-3细胞中程序性坏死关键因子MLKL、p-MLKL和p-MLKL四聚体蛋白的表达水平(P值均<0.05),并以p-MLKL四聚体的效果最显著。桔梗皂苷D促进了FOXO3a向细胞核内转位,同时上调FOXO3a及其下游分子FasL及TRAIL蛋白的表达水平。FOXO3a-siRNA转染PC-3细胞后,FOXO3a蛋白的表达水平明显下调(P<0.05)。相对于NC-siRNA+桔梗皂苷D组,FOXO3a-siRNA+桔梗皂苷D处理组细胞存活率上升(P<0.05),锥虫蓝染色阳性率降低(P<0.05),LDH释放率下降(P<0.05),提示沉默FOXO 3a基因表达削弱了桔梗皂苷D诱导的PC-3细胞程序性坏死。结论:桔梗皂苷D可诱导PC-3细胞呈caspase非依赖性坏死样死亡;桔梗皂苷D可能通过FOXO3a通路及促进MLKL的磷酸化介导了前列腺癌PC-3细胞程序性坏死。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 桔梗皂苷d 程序性坏死 叉头转录因子O3a
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桔梗皂苷-D抗肿瘤机制研究进展 被引量:10
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作者 赵若琳 张旭 +1 位作者 陈美娟 周坤福 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2015年第2期126-129,共4页
桔梗皂苷-D(PD)是从桔梗中提取的一种三萜类单体。近年来研究表明,PD有广泛的抗癌作用,且疗效满意。本文从增殖、凋亡、浸润和转移、免疫及抗炎等方面对PD抗肿瘤作用机制进行综述,为进一步更好开发和利用PD、发挥其抗肿瘤优势提供参考。
关键词 桔梗皂苷-d 肿瘤 机制 凋亡 综述
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桔梗皂苷-D抑制非小细胞肺癌H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移的作用机制研究 被引量:19
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作者 赵若琳 周坤福 +1 位作者 张旭 陈美娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期241-247,共7页
目的探究桔梗皂苷-D(platycodin-D,PD)抑制非小细胞肺癌(NSCLC)H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移的作用及其作用机制。方法细胞黏附实验、划痕实验、Transwell小室侵袭实验分别检测细胞黏附、迁移和侵袭能力。RT-PCR检测H460和A549细胞中... 目的探究桔梗皂苷-D(platycodin-D,PD)抑制非小细胞肺癌(NSCLC)H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移的作用及其作用机制。方法细胞黏附实验、划痕实验、Transwell小室侵袭实验分别检测细胞黏附、迁移和侵袭能力。RT-PCR检测H460和A549细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA的表达。同时,Western blot法检测MMP-2和MMP-9蛋白、其上游ERK信号通路相关蛋白和p-Akt的表达水平。结果PD有效抑制H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移能力,并呈浓度依赖性(P<0.05)。PD降低H460和A549细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA的表达(P<0.01);同时,PD下调H460和A549细胞中MMP-2和MMP-9蛋白的表达,并抑制其上游Ras、p-c-Raf、p-ERK 1/2和p-Akt的表达,并呈浓度和时间依赖性。结论 PD抑制NSCLC细胞黏附、侵袭和迁移,并且此作用与下调MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白的表达,抑制其上游ERK信号通路和p-Akt表达有关。 展开更多
关键词 桔梗皂苷-d 非小细胞肺癌 黏附 侵袭 迁移 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9
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不同栽培年限川桔梗中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的含量比较 被引量:11
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作者 李心怡 陈玲 +1 位作者 马逾英 邓薇 《中国药房》 CAS 北大核心 2018年第9期1249-1252,共4页
目的:建立测定川桔梗中桔梗总皂苷及桔梗皂苷D含量的方法,探索不同栽培年限川桔梗药材中2种指标成分的差异。方法:采用紫外-可见分光光度法测定川桔梗中桔梗总皂苷的含量;采用高效液相色谱法测定川桔梗中桔梗皂苷D的含量;比较一年生、... 目的:建立测定川桔梗中桔梗总皂苷及桔梗皂苷D含量的方法,探索不同栽培年限川桔梗药材中2种指标成分的差异。方法:采用紫外-可见分光光度法测定川桔梗中桔梗总皂苷的含量;采用高效液相色谱法测定川桔梗中桔梗皂苷D的含量;比较一年生、两年生及三年生各10份川桔梗药材中桔梗总皂苷及桔梗皂苷D的含量。结果:一年生、二年生、三年生川桔梗药材中桔梗总皂苷含量的平均值分别为2.47%、3.01%、2.47%;桔梗皂苷D含量的平均值分别为0.23%、0.27%、0.33%;即一年生的样品中2种指标的含量均较低,二年生样品的桔梗总皂苷含量最高,三年生样品桔梗皂苷D的含量最高。结论:不同栽培年限的川桔梗药材的指标性成分含量具有一定差异,但二者间并未呈现相关性,建议选用栽培年限为二年生或三年生的药材。 展开更多
关键词 川桔梗 桔梗总皂苷 桔梗皂苷d 栽培年限 含量测定
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桔梗同源四倍体株系的鉴定和桔梗皂甙D含量的比较 被引量:19
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作者 彭向东 高山林 朱丹妮 《药物生物技术》 CAS CSCD 2004年第6期351-355,共5页
对组织培养条件下诱导获得的桔梗 (PlatycodongrandiflorumA .DC)四倍体株系 ,进行了农艺性状的鉴定 ,同时采用HPLC ELSD测定了其桔梗皂甙D的含量。结果表明 :在供试的 2 1个桔梗四倍体株系中 ,18个株系的桔梗皂甙D含量高于二倍体株系 ;... 对组织培养条件下诱导获得的桔梗 (PlatycodongrandiflorumA .DC)四倍体株系 ,进行了农艺性状的鉴定 ,同时采用HPLC ELSD测定了其桔梗皂甙D的含量。结果表明 :在供试的 2 1个桔梗四倍体株系中 ,18个株系的桔梗皂甙D含量高于二倍体株系 ;9个株系的单株产量高于二倍体株系 ;15个株系的桔梗皂甙D的生产量高于二倍体株系。这一结果为今后进一步选育出产量高。 展开更多
关键词 桔梗 同源四倍体 桔梗皂甙d 高效液相色谱蒸发光散射检测器检测法
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