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敲低PTGS2抑制肿瘤相关巨噬细胞M2极化在鼻咽癌治疗中的应用价值
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作者 姚晨 黄鑫 +2 位作者 李钢 李增沛 李征 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第7期613-618,共6页
目的探讨敲低PTGS2对肿瘤相关巨噬细胞(TAM)极化方向的影响及其在鼻咽癌(NPC)治疗中的应用价值。方法利用腺病毒介导敲低原代NPC细胞中的PTGS2(Adv-PTGS2 shRNA)。体外建立原代NPC细胞和TAM的共培养体系,以及原代NPC细胞和TAM的3D共培... 目的探讨敲低PTGS2对肿瘤相关巨噬细胞(TAM)极化方向的影响及其在鼻咽癌(NPC)治疗中的应用价值。方法利用腺病毒介导敲低原代NPC细胞中的PTGS2(Adv-PTGS2 shRNA)。体外建立原代NPC细胞和TAM的共培养体系,以及原代NPC细胞和TAM的3D共培养物与人CD8+T细胞的混合培养体系。将体外实验和裸鼠荷瘤实验分为control组、Adv-PTGS2 shRNA组和Adv-shRNA NT组。用ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-12(IL-12)、IL-10和转化生长因子β(TGF-β)的水平。用Western blotting测定基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的表达水平。用CCK-8法测定人CD8+T细胞增殖能力。用实时定量PCR测定γ干扰素(IFN-γ)和颗粒酶B(GZMB)mRNA表达水平。进行裸鼠荷瘤实验,皮下注射上述3种细胞的混合培养物,连续21 d监测瘤体生长情况。结果与control组相比,Adv-PTGS2 shRNA组细胞培养上清液IL-12水平升高,IL-10和TGF-β水平降低(P<0.05);原代NPC内MMP-2和MMP-9的表达水平降低(P<0.05)。与control组相比,Adv-PTGS2 shRNA组人CD8^(+)T细胞增殖能力增强(P<0.05);IFN-γ和GZMB mRNA表达水平上调(P<0.05)。与control组相比,Adv-PTGS2 shRNA组裸鼠荷瘤生长缓慢(P<0.05),瘤体质量较低(P<0.05)。结论敲低PTGS2可抑制TAM M2极化,调节肿瘤微环境为免疫激活状态,抑制鼻咽癌的生长。 展开更多
关键词 鼻咽癌 肿瘤相关巨噬细胞 肿瘤微环境 CD8+T细胞 ptgs2
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开玄解毒核心方调控PTGS2改善银屑病模型小鼠皮损的作用机制
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作者 肖雪 康利平 +3 位作者 代丹 马伊笛 杨斌 宋坪 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第17期49-59,共11页
目的:明确开玄解毒核心方活性成分,探究开玄解毒核心方治疗寻常型银屑病的有效组分及干预靶点。方法:采用高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-Q-TOF MS),对开玄解毒核心方汤剂及其入血化学成分进行鉴定分析,并进一步鉴定单味药水煎液化学成... 目的:明确开玄解毒核心方活性成分,探究开玄解毒核心方治疗寻常型银屑病的有效组分及干预靶点。方法:采用高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-Q-TOF MS),对开玄解毒核心方汤剂及其入血化学成分进行鉴定分析,并进一步鉴定单味药水煎液化学成分,明确开玄解毒核心方中化学成分的来源。通过Swiss ADME数据库将入血后鉴定出的所有化合物成分进行有效活性成分筛选;在Swiss Target Prediction平台检索开玄解毒核心方活性成分靶点;在OMIM、GEO、GeneCards、DisGNET数据库中检索寻常型银屑病靶点,获得药物-疾病交集靶点;使用STRING构建交集靶点蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,进而构建开玄解毒核心方核心入血成分-交集靶点网络;选择网络中核心靶点蛋白与开玄解毒核心方中核心组分进行分子对接;对小分子和蛋白进行预处理,并选择合适的对接位点;通过AutoDock Vina软件不断地进行局部搜索和重复迭代,寻找分子对接构象;使用PyMOL软件和LigPlot+软件进行分析与可视化。继而通过动物实验验证,将SPF级雄性C57小鼠随机分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组及开玄解毒核心方组,模型组、甲氨蝶呤组、开玄解毒核心方组均以咪喹莫特涂抹小鼠背部造模,空白组与模型组予生理盐水灌胃,甲氨蝶呤组予1 mg·kg^(-1)混悬液灌胃,开玄解毒核心方组予30.42 g·kg^(-1)中药水煎液灌胃,给药5 d。苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠皮肤组织样本,分析开玄解毒核心方对银屑病小鼠病理学表现的影响,免疫组化法(IHC)检测小鼠皮肤组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6表达面积,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠皮肤组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、PTGS2 mRNA表达。结果:研究通过UPLC-Q-TOF MS鉴定出开玄解毒核心方中208种化合物,血清中检测到44种化合物,包括28种原型成分和16种代谢物,筛选出12种入血后活性成分,并识别出1153个活性成分靶点和1076个银屑病相关靶点,交集中85个靶点为药物-疾病共性靶点。PPI网络分析显示,TNF-α、IL-1β、IL-6、PTGS2、白蛋白(ALB)为关键靶点蛋白。分子对接结果表明,(+)-己基苯基乙醇酸与PTGS2等关键靶点蛋白的结合能力较稳固,其中PTGS2与多种核心化合物表现出较高的稳定性。与空白组比较,模型组小鼠角质层与表皮层显著增厚,模型组皮肤病理Baker评分显著升高(P<0.01),模型组皮肤组织PTGS2、TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表达面积显著升高(P<0.01),模型组皮肤组织PTGS2、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达显著上升(P<0.01)。与模型组比较,甲氨蝶呤组与开玄解毒核心方组病理Baker评分均显著下降(P<0.01),甲氨蝶呤组与开玄解毒核心方组蛋白表达面积明显降低(P<0.05,P<0.01),甲氨蝶呤组与开玄解毒核心方组皮肤组织PTGS2、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达显著降低(P<0.01)。结论:开玄解毒核心方可有效改善通银屑病模型皮损表现,降低银屑病模型小鼠皮肤组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、PTGS2的表达,PTGS2与方中多种化合物有稳定结合能力,可能为银屑病治疗关键靶点,方中化合物(+)-己基苯基乙醇酸可能发挥关键作用。 展开更多
关键词 开玄解毒 前列腺素内过氧化物合成酶2(ptgs2) 银屑病 网络药理 中药复方
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6-姜辣素联合RSL3上调PTGS2诱导肝癌细胞铁死亡
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作者 姜宇朗 余永鑫 +1 位作者 潘子扬 孙明瑜 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第9期142-147,I0006,I0007,共8页
目的研究6-姜辣素能否增强RSL3诱导的肝癌细胞铁死亡效应及其具体作用机制。方法选取人肝癌细胞株HepG2,根据6-姜辣素对于正常肝细胞L02的最大无毒浓度和RSL3对HepG2细胞的半数抑制浓度(IC 50)来确定6-姜辣素和RSL3的终浓度。细胞按不... 目的研究6-姜辣素能否增强RSL3诱导的肝癌细胞铁死亡效应及其具体作用机制。方法选取人肝癌细胞株HepG2,根据6-姜辣素对于正常肝细胞L02的最大无毒浓度和RSL3对HepG2细胞的半数抑制浓度(IC 50)来确定6-姜辣素和RSL3的终浓度。细胞按不同处理因素分为3组,分别是空白对照组,RSL3处理组(2μmol/L),RSL3(2μmol/L)+6-姜辣素(50μmol/L)处理组。用CCK8法检测细胞活力,平板克隆形成实验评价细胞长期增殖能力,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放实验检测胞内LDH毒性。流式细胞术检测细胞内脂质过氧化物水平。倒置荧光显微镜观察细胞内活性氧含量(reactive oxygen species,ROS)和线粒体膜电位水平。不同程序性死亡细胞抑制剂观察6-姜辣素联合RSL3诱导的肝癌细胞的程序性死亡方式,并检测胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平变化。Western Blot法检测铁死亡相关蛋白:谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、铁蛋白重链(ferritin heavy chain,FTH1)、前列腺素内过氧化物合成酶2(prostaglandin endoperoxide synthase 2,PTGS2)表达水平。网络药理学分析其可能的直接作用靶点。结果6-姜辣素可以显著增强RSL3抑制肝癌细胞增殖和克隆形成的能力(P<0.001),这种细胞死亡方式可以不同程度地被特异性铁死亡抑制剂Fer-1、Lip-1、DFO抑制(P<0.001)。同时6-姜辣素联合RSL3可以显著增强细胞内脂质过氧化物、MDA、ROS的水平(P<0.001),同时可以显著降低GSH含量和线粒体膜电位,显著降低铁死亡抑制基因GPX4、FTH1、SLC7A11的蛋白表达水平(P<0.05),提高了PTGS2蛋白的表达水平(P<0.01)。网络药理学结果显示PTGS2可能是6-姜辣素联合RSL3治疗肝癌的作用靶点之一。结论6-姜辣素联合RSL3通过上调PTGS2增加了肝癌细胞铁死亡的敏感性。 展开更多
关键词 6-姜辣素 RSL3 ptgs2 铁死亡 肝癌
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PTGS2调控细胞增殖及抗氧化能力影响结肠癌患者预后 被引量:3
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作者 贺旸知歌 姜旭 +1 位作者 张志文 龚依伊 《基础医学与临床》 CAS 2024年第11期1522-1529,共8页
目的基于前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2)在结肠癌中的表达及预后分析,探讨并验证PTGS2影响结肠癌患者预后的潜在分子机制。方法从TCGA、HPA、UALCAN等数据库收集泛癌的转录组和蛋白质组学数据,并结合肿瘤患者的分期分型、生存时间等... 目的基于前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2)在结肠癌中的表达及预后分析,探讨并验证PTGS2影响结肠癌患者预后的潜在分子机制。方法从TCGA、HPA、UALCAN等数据库收集泛癌的转录组和蛋白质组学数据,并结合肿瘤患者的分期分型、生存时间等临床数据,分析PTGS2基因的表达模式和预后价值。基于基因集合富集分析(GSEA)鉴定在PTGS2高表达患者中显著激活的生物学功能,并以结肠癌细胞系SW480为例,进行体外验证。构建PTGS2过表达细胞株,使用CCK8法测定对细胞增殖的影响;使用不同浓度H 2O 2形成梯度氧化胁迫,检测细胞抗氧化能力的变化;并通过蛋白质免疫印迹初步验证其调控机制。结果PTGS2的转录水平和表达水平在结肠癌患者中均显著上调(P<0.05),且PTGS2的表达升高与患者的死亡风险升高相关(P<0.05)。数据分析和体外实验表明过表达PTGS2可能通过激活mTOR通路促进结肠癌细胞增殖;并通过上调氧化应激调控蛋白SOD2、NRF2调控细胞抗氧化能力。结论PTGS2是一个潜在的结肠癌危险因素,其表达水平升高促进细胞增殖,增强细胞抗氧化能力,并与结肠癌患者不良预后相关。 展开更多
关键词 结肠癌 前列腺素内过氧化物合成酶2(ptgs2) 泛癌 增殖 抗氧化能力
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策勒黑羊BMPR-IB、MTNR1A和PTGS2基因的RFLP分析 被引量:6
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作者 王琼 邵勇钢 +6 位作者 刘玲玲 田佳 古丽尼沙.吐拉甫 努孜古丽.图尔荪 耿明 莫合塔尔.夏甫开提 刘武军 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1330-1339,共10页
【目的】寻找与绵羊多胎性状相关的DNA标记,为提高绵羊繁殖力的标记辅助选择提供科学依据。【方法】试验以策勒黑羊为主要研究对象,利用PCR-RFLP、DNA测序等技术,对BMPR-IB、MTNR1A和PTGS2基因的遗传多态性进行研究。【结果】策勒黑羊BM... 【目的】寻找与绵羊多胎性状相关的DNA标记,为提高绵羊繁殖力的标记辅助选择提供科学依据。【方法】试验以策勒黑羊为主要研究对象,利用PCR-RFLP、DNA测序等技术,对BMPR-IB、MTNR1A和PTGS2基因的遗传多态性进行研究。【结果】策勒黑羊BMPR-IB基因具有多态性,存在三种基因型:++、B+和BB;MTNR1A和PTGS2基因不存在多态。【结论】验证了BMPR-IB基因的A746G突变位点是策勒黑羊多胎性的主效基因,而MTNR1A和PTGS2基因与策勒黑羊繁殖性能关系不大。 展开更多
关键词 策勒黑羊 多胎性状 BMPR-IB MTNR1A ptgs2
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猪前列腺素内过氧化物酶2(PTGS2)基因的遗传变异及其与繁殖性状相关性研究(英文) 被引量:6
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作者 丁能水 任冬仁 +5 位作者 郭源梅 任军 颜瑛 麻俊武 陈克飞 黄路生 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第3期213-219,共7页
前列腺素内过氧化物酶2是花生四烯酸合成前列腺素的限速酶,在包括排卵、受精、着床、分娩等一系列生殖过程中起着重要作用,因而编码该酶的基因是影响繁殖性状的重要候选基因。通过PCR-RFLP分析前列腺素内过氧化物酶2 基因在15个中外不... 前列腺素内过氧化物酶2是花生四烯酸合成前列腺素的限速酶,在包括排卵、受精、着床、分娩等一系列生殖过程中起着重要作用,因而编码该酶的基因是影响繁殖性状的重要候选基因。通过PCR-RFLP分析前列腺素内过氧化物酶2 基因在15个中外不同繁殖性能猪种中的遗传变异,结果表明,不同类型中国地方猪种和外来商业猪种在此基因位点上存在丰富的多态性,繁殖性能相对较好的江海型、华北型和华中型猪种中A等位基因表现为优势等位基因,卡方检验显示其基因频率分布与西方商业猪种及繁殖性能较低的高原型藏猪和华南型猪种差异均极为显著(P<0.001)。利用二花脸×杜洛克资源家系F2群体分析该基因与繁殖性状的相关性,在180头F2代母猪群体中,未能进一步证实该基因位点对总产仔数、产活仔数和死胎数3个繁殖性状存在显著影响(P=>0.05),但携带优势等位基因A的个体趋向于拥有较高的总产仔数、产活仔数和偏低的死胎数,鉴于该基因的重要作用,基于全基因序列的SNP扫捕和大样本群体的相关性分析仍很有必要。 展开更多
关键词 ptgs2 PCR—RFLP 繁殖性状
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PTGS2/PLA2G4A基因多态性与精神分裂症的关系 被引量:6
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作者 陶然 郭英君 +2 位作者 史杰萍 张小娟 于雅琴 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期84-87,共4页
目的 :在中国北方汉族人群中探讨 PTGS2 / PL A2 G4 A基因多态性与精神分裂症的关系。方法 :采用PCR 技术和限制性内切酶片段长度多态性 (RFL P)的方法 ,检测中国北方汉族 16 8个核心家系的基因型。结果 :PTGS2基因的两个 SNPs(SNP1和 S... 目的 :在中国北方汉族人群中探讨 PTGS2 / PL A2 G4 A基因多态性与精神分裂症的关系。方法 :采用PCR 技术和限制性内切酶片段长度多态性 (RFL P)的方法 ,检测中国北方汉族 16 8个核心家系的基因型。结果 :PTGS2基因的两个 SNPs(SNP1和 SNP2 )与 PL A2 G4 A基因的一个 SNP(SNP3)的等位基因和基因型在病例组和对照组的频数分布差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :在中国北方汉族人群中 PTGS2 / PL A2 G4 A基因多态性与精神分裂症的发病可能无关。 展开更多
关键词 ptgs2/PLA2G4A 精神分裂症/遗传学 DNA遗传标记 基因多态性 多态性 限制性片段长度
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熊果酸通过调控PTGS2对小鼠肝缺血/再灌注损伤的保护作用 被引量:9
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作者 侯文 卢建森 +1 位作者 左怀文 刘宏胜 《实用器官移植电子杂志》 2022年第4期353-359,共7页
目的探索植物提取物熊果酸(ursolic acid,UA)减轻肝缺血/再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury,HIRI)的作用及初步作用机制。方法C57雄性小鼠分为假手术组、假手术组+UA组、HIRI组、HIRI低剂量组和HIRI高剂量组。通过动物实... 目的探索植物提取物熊果酸(ursolic acid,UA)减轻肝缺血/再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury,HIRI)的作用及初步作用机制。方法C57雄性小鼠分为假手术组、假手术组+UA组、HIRI组、HIRI低剂量组和HIRI高剂量组。通过动物实验、网络药理学和分子生物学等方法进行分析验证。结果动物实验显示UA显著降低HIRI小鼠血清中AST、ALT的活性。利用TCMSP、Pharm Mapper、Swiss Target Prediction、GeneCards等数据库获取熊果酸与HIRI对应的靶基因,再利用DAVID、STRING以及Cytoscape得到初步关键靶基因,它们是PPARG(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARG)、MAPK3(mitogen-activated protein kinase 3,MAPK3)及PTGS2(prostaglandin G/H synthase 2,PTGS2)。最后,根据分子对接得分、受体与配体结合的氢键数目,确定PTGS2为本研究的hub靶基因。后经免疫组化实验验证,与假手术组比较,PTGS2在HIRI组中高表达(P<0.01);与HIRI组比较,PTGS2在HIRI低剂量组及HIRI高剂量组的表达明显降低(P<0.01)。结论熊果酸通过调控PTGS2对小鼠肝缺血/再灌注损伤的保护作用,该研究为临床研制干预HIRI的新药提供了参考。 展开更多
关键词 熊果酸 肝缺血/再灌注损伤 ptgs2 保护作用 分子对接
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敲减PTGS2对皮肤成纤维细胞基因表达谱的作用 被引量:9
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作者 魏斌 范金财 +6 位作者 严笠 罗谦 张君毅 候海利 吕晓岩 曹蕊 王春梅 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第4期396-401,共6页
目的研究敲减PTGS2对成纤维细胞全基因组表达谱的影响,在基因水平上探索防治瘢痕疙瘩的新途径。方法运用RNAi干扰正常皮肤成纤维细胞前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)基因的表达,利用real time RT-PCR验证siRNA沉默效果;应用全基因组芯... 目的研究敲减PTGS2对成纤维细胞全基因组表达谱的影响,在基因水平上探索防治瘢痕疙瘩的新途径。方法运用RNAi干扰正常皮肤成纤维细胞前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)基因的表达,利用real time RT-PCR验证siRNA沉默效果;应用全基因组芯片检测基因表达谱变化。结果成纤维细胞的PTGS2基因经siRNA干扰后,其mRNA表达水平明显下调;全基因组芯片表达谱检测到的差异表达基因,按1.5倍差异共189个(115个上调,74个下调),按2倍差异共14个(9个上调,5个下调);基因表达谱的变化与瘢痕疙瘩基因表达谱的变化相吻合,可能促使正常皮肤成纤维细胞向瘢痕疙瘩方向进展。结论检测到与PTGS2基因相关的、在瘢痕疙瘩形成中可能共同发挥作用的相关基因,证明PTGS2与瘢痕疙瘩的发病机制有着密切的关系,为治疗瘢痕疙瘩提供了一个潜在的候选靶点。 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩 ptgs2 SIRNA 全基因组芯片检测
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绵羊PTGS2基因多态性与产羔数关联分析 被引量:2
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作者 安雪姣 赵生国 +3 位作者 潘章源 马琳 蔡原 储明星 《中国草食动物科学》 CAS 2020年第2期18-22,共5页
研究旨在探索PTGS2基因g.65835868A>G和g.65834692A>G位点多态性与绵羊产羔数之间的关系,以期为绵羊多羔分子育种提供新的标记。利用Sequenom MassARRAY^■ SNP技术对PTGS2基因2个单核苷酸多态(Single nucleotide polymorphism,S... 研究旨在探索PTGS2基因g.65835868A>G和g.65834692A>G位点多态性与绵羊产羔数之间的关系,以期为绵羊多羔分子育种提供新的标记。利用Sequenom MassARRAY^■ SNP技术对PTGS2基因2个单核苷酸多态(Single nucleotide polymorphism,SNP)位点在多羔绵羊品种(小尾寒羊、策勒黑羊和湖羊)和单羔绵羊品种(滩羊、苏尼特羊、萨福克羊和草地型藏羊)中进行检测,并与小尾寒羊产羔数关联分析。分型结果表明,g.65835868A>G和g.65834692A>G位点基因型频率和等位基因频率在单、多羔绵羊品种间差异均不显著(P>0.05);群体遗传学分析表明,g.65835868A>G位点在滩羊、小尾寒羊和草地型藏羊3个群体中均表现为低度多态(PIC<0.25),在其余4个群体中表现为中度多态(0.25<PIC<0.5),g.65834692A>G位点在选择的7个群体中均表现为中度多态(0.25<PIC<0.5);卡方适合性检验结果表明,g.65835868A>G位点在小尾寒羊、苏尼特羊、湖羊、策勒黑羊、滩羊和草地型藏羊6个群体中均处于哈代-温伯格平衡状态(P>0.05),g.65834692A>G位点在选择的7个群体中均处于哈代-温伯格平衡状态(P>0.05);关联分析表明,g.65835868A>G位点多态性与小尾寒羊不同胎次产羔数之间并无显著相关(P>0.05),g.65834692A>G位点小尾寒羊第2胎GG型产羔数显著高于AA型(P<0.05)。综上,PTGS2基因与绵羊的繁殖性能有一定相关,且g.65834692A>G位点对绵羊产羔性状有调控作用,可作为多羔绵羊选育的辅助标记。 展开更多
关键词 绵羊 ptgs2基因 产羔数 SNP分型
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RAW264.7细胞Rhoa和Ptgs2基因真核表达载体构建及生物信息学分析 被引量:2
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作者 乔连江 陈晨 +3 位作者 张如 崔立恒 徐丽 杨艳玲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第7期2313-2323,共11页
为深入研究Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene family,member A,Rhoa)和环氧合酶2(cyclooxygenase 2,Ptgs2)分子在布鲁菌逃逸机体免疫中发挥的作用,试验对RAW264.7细胞Rhoa和Ptgs2基因进行扩增与克隆,构建真核表达载体并预测生物... 为深入研究Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene family,member A,Rhoa)和环氧合酶2(cyclooxygenase 2,Ptgs2)分子在布鲁菌逃逸机体免疫中发挥的作用,试验对RAW264.7细胞Rhoa和Ptgs2基因进行扩增与克隆,构建真核表达载体并预测生物信息学功能。根据GenBank数据库中公布的RAW264.7细胞Rhoa和Ptgs2基因CDS区序列(登录号:JN971019.1和NM_011198)设计引物,提取RAW264.7细胞总RNA并反转录为cDNA,经RT-PCR扩增Rhoa和Ptgs2片段并测序,将纯化的Rhoa和Ptgs2片段分别与线性化pcDNA3.1质粒相连接,对重组质粒进行测序分析和双酶切鉴定后,利用LipofectamineTM2000转染293T细胞,经实时荧光定量PCR和Western blotting验证Rhoa和Ptgs2基因的表达情况,并应用生物信息学软件对Rhoa和Ptgs2基因进行预测分析。结果显示,试验成功构建了RAW264.7细胞Rhoa和Ptgs2基因的真核表达质粒;实时荧光定量PCR检测均在转录水平上表达;Western blotting可见Ptgs2蛋白在70 ku处有一明显条带,而Rhoa蛋白未出现条带。生物信息学预测显示,Rhoa和Ptgs2基因核苷酸序列相似性较高,在不同物种之间较为保守;Rhoa不具有信号肽,为不稳定蛋白,而Ptgs2在第17-18位氨基酸处存在信号肽,为稳定蛋白;Rhoa和Ptgs2蛋白分别有12和53个潜在的磷酸化位点;二级结构、三级结构均以无规则卷曲为主。本研究成功构建了RAW264.7细胞Rhoa和Ptgs2基因的真核表达载体,均在转录水平上表达,并分析了其生物学功能,为后续开展RAW264.7细胞Rhoa和Ptgs2基因在布鲁菌免疫机制方面的研究提供了工具。 展开更多
关键词 RAW264.7细胞 RHOA基因 ptgs2基因 真核表达载体 生物信息学
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大白猪PTGS2基因外显子2多态性及其与繁殖性状的关联分析 被引量:2
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作者 聂光伟 李明杨 +3 位作者 毛翠 毛慧敏 王国水 左波 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第1期140-146,共7页
试验旨在研究前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)基因的单核苷酸多态性,并将其与大白猪的繁殖性状进行关联分析,为猪分子遗传标记提供依据。以美系及法系纯种大白猪基因组DNA为模板,构建DNA混合池,... 试验旨在研究前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)基因的单核苷酸多态性,并将其与大白猪的繁殖性状进行关联分析,为猪分子遗传标记提供依据。以美系及法系纯种大白猪基因组DNA为模板,构建DNA混合池,通过克隆测序比对,检测猪PTGS2基因的遗传变异;采用PCR-RFLP技术对多态性位点进行基因分型,并与目标性状进行关联分析。结果显示,在猪PTGS2基因外显子2上存在1个g.86A>G碱基突变,并具有MspⅠ酶切位点多态性,且在大白猪群体中检测到AA、AG和GG 3种基因型;哈迪-温伯格平衡检验结果显示,在法系大白猪群体中,PTGS2基因g.86A>G多态性分布达到遗传平衡状态(P>0.05)。关联分析结果表明,在美系大白猪群体中,AA基因型初产母猪弱仔数显著少于AG基因型(P<0.05),AA基因型经产母猪初生窝重显著高于AG基因型(P<0.05);在法系大白猪群体中,GG基因型个体总产仔数、健仔数和初生窝重均高于AA和AG基因型,但未达到显著水平(P>0.05)。PTGS2基因外显子2g.86A>G多态性位点显著影响初生窝重和弱仔数,可作为猪分子标记辅助选择育种的潜在位点。 展开更多
关键词 ptgs2基因 大白猪 单核苷酸多态性(SNP) 繁殖性状
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大白母猪PTGS2基因内含子3的SNP检测及其与繁殖性状的关联分析
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作者 高玉森 董新星 +6 位作者 张燕林 兰国湘 计春律 严达伟 苟潇 李明丽 鲁绍雄 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2018年第6期1068-1074,共7页
【目的】为揭示PTGS2基因多态性与母猪繁殖性状的关联。【方法】采用PCR产物直接测序法对401头大白母猪PTGS2基因第3内含子的SNP位点进行检测,结合1 786窝母猪繁殖性能记录,采用最小二乘模型分析了各多态位点基因型及其单倍型组合对5个... 【目的】为揭示PTGS2基因多态性与母猪繁殖性状的关联。【方法】采用PCR产物直接测序法对401头大白母猪PTGS2基因第3内含子的SNP位点进行检测,结合1 786窝母猪繁殖性能记录,采用最小二乘模型分析了各多态位点基因型及其单倍型组合对5个繁殖性状的影响。【结果】大白猪PTGS2基因第3内含子区域存在3个紧密连锁的SNP位点:G227A、A392C和T409C,分别以等位基因G、A、T及其纯合子(GG、AA和TT)、GAT单倍型及GAT/GAT组合的频率最高,各位点杂合度在0.320 9~0.353 6之间,遗传多样性较为丰富;G227A位点的GA基因型、A392C位点的AC基因型、T409C位点的TC基因型及GAT单倍型具有显著提高母猪总产仔数、产活仔数和仔猪21日龄成活数的效应(P<0.05或P<0.01),AA、CC和CC基因型及GCC/GCC单倍型组合具有显著提高仔猪21日龄窝重的效应(P<0.05或P<0.01)。【结论】研究结果丰富了猪PTGS2基因的SNP标记,初步证实PTGS2基因对母猪繁殖性状有显著影响,但其具体效应可能会因品种(或猪群)及具体性状的不同而有一定差异。 展开更多
关键词 大白猪 ptgs2基因 内含子3 单核苷酸多态性 繁殖性状
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绵羊ADPN基因和PTGS2基因多态性与产羔数相关性研究
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作者 李婷婷 李桢 +3 位作者 杜淼 邢亚楠 董焕声 潘庆杰 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2018年第11期34-38,共5页
实验旨在研究ADPN基因和PTGS2基因与湖羊和杜泊羊产羔数的相关性,采用直接测序法检测65只湖羊和60只杜泊羊的ADPN基因的第3外显子以及PTGS2基因的第3外显子到第5外显子的多态性,并分析其与产羔数的相关性。结果表明:湖羊在ADPN基因第3... 实验旨在研究ADPN基因和PTGS2基因与湖羊和杜泊羊产羔数的相关性,采用直接测序法检测65只湖羊和60只杜泊羊的ADPN基因的第3外显子以及PTGS2基因的第3外显子到第5外显子的多态性,并分析其与产羔数的相关性。结果表明:湖羊在ADPN基因第3外显子的133 bp处突变的密码子由GAT转变成AAT,并使编码的氨基酸由D(天冬氨酸)转变成N(天冬酰胺);在594bp处突变的密码子由AGA转变为AAA,使编码的氨基酸由R(精氨酸)转变为K(赖氨酸);湖羊在PTGS2基因第3外显子的77 bp位点的密码子由AAA转变为CAA,并使编码的氨基酸由K(赖氨酸)转变为Q(谷氨酰胺);但在杜泊羊群体中并没有发现基因的突变。因此推测ADPN基因和PTGS2基因可能是引起湖羊高繁殖力的基因。 展开更多
关键词 绵羊 ADPN基因 ptgs2基因 多态性
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黄芩苷通过调控铁死亡减轻H9c2细胞缺氧复氧损伤及其机制研究 被引量:3
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作者 李家权 许锦 +1 位作者 谭子富 方孝俊 《中医药导报》 2025年第2期13-18,共6页
目的:研究黄芩苷通过铁死亡途径对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的作用及机制。方法:采用Na_(2)S_(2)O_(4)诱导大鼠H9c2心肌细胞铁死亡模型,随后用黄芩苷干预。采用试剂盒检测细胞活力、ROS、线粒体膜电位和Fe^(2+)水平。Western blotting... 目的:研究黄芩苷通过铁死亡途径对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的作用及机制。方法:采用Na_(2)S_(2)O_(4)诱导大鼠H9c2心肌细胞铁死亡模型,随后用黄芩苷干预。采用试剂盒检测细胞活力、ROS、线粒体膜电位和Fe^(2+)水平。Western blotting检测细胞PTGS2、NOX2和GPX4蛋白表达水平。PTGS2激动剂BUR1联合黄芩苷干预Na_(2)S_(2)O_(4)诱导的细胞后,试剂盒检测细胞Fe^(2+)水平。结果:80μmol/L以内的黄芩苷对H9c2细胞无毒性。Na_(2)S_(2)O_(4)诱导H9c2细胞铁死亡,表现为细胞ROS和Fe^(2+)水平升高,线粒体膜电位坍塌,GPX4表达明显下降(P<0.05)。黄芩苷干预后,Na_(2)S_(2)O_(4)诱导的细胞ROS和Fe^(2+)水平下降,线粒体膜电位恢复,GPX4表达明显升高(P<0.05),铁死亡进程被逆转。Na_(2)S_(2)O_(4)诱导H9c2细胞后,PTGS2和NOX4表达明显升高(P<0.05),而黄芩苷干预后,Na_(2)S_(2)O_(4)诱导的H9c2心肌细胞PTGS2和NOX4表达明显降低(P<0.05)。黄芩苷与PTGS2和NOX4有很好的结合活性,结合能分别为-10.65和-8.82 kcal/mol。BUR1能够逆转黄芩苷抑制的Fe^(2+)水平。结论:黄芩苷对Na_(2)S_(2)O_(4)诱导H9c2细胞建立的缺氧复氧损伤模型铁死亡具有明确的恢复作用,其机制可能与其抑制PTGS2和NOX4蛋白表达有关。 展开更多
关键词 缺血性心肌病 黄芩苷 铁死亡 大鼠H9c2心肌细胞 Na_(2)S_(2)O_(4) ptgs2 NOX4
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《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第10期901-901,共1页
《中国医科大学学报》2025年第54卷第7期刊登的题为《敲低PTGS2抑制肿瘤相关巨噬细胞M2极化在鼻咽癌治疗中的应用价值》[姚晨,黄鑫,李钢,李增沛,李征.敲低PTGS2抑制肿瘤相关巨噬细胞M2极化在鼻咽癌治疗中的应用价值.中国医科大学学报,20... 《中国医科大学学报》2025年第54卷第7期刊登的题为《敲低PTGS2抑制肿瘤相关巨噬细胞M2极化在鼻咽癌治疗中的应用价值》[姚晨,黄鑫,李钢,李增沛,李征.敲低PTGS2抑制肿瘤相关巨噬细胞M2极化在鼻咽癌治疗中的应用价值.中国医科大学学报,2025,54(7):613-618.]一文中,第614页“1.1材料”部分中“1例新鲜NPC组织(Ⅲ期)样本来自我院肿瘤外科NPC切除手术标本”应为“1例新鲜NPC组织(Ⅲ期)样本来自我院耳鼻咽喉科NPC切除手术标本”。特此更正并诚挚向读者致歉。 展开更多
关键词 M2极化 肿瘤相关巨噬细胞 ptgs2 更正 鼻咽癌
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Prediction and Validation of Multi-Target Mechanisms of Scutellaria baicalensis in Treating Primary Dysmenorrhea Based on Network Pharmacology and Molecular Docking
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作者 Xinguo LIU Shengqiang HE +1 位作者 Lei HUANG Lu CHENG 《Medicinal Plant》 2025年第4期20-23,28,共5页
[Objectives]To predict core targets and pathways of flavonoids from Scutellaria baicalensis against PD via network pharmacology.[Methods]Network pharmacology was employed to predict targets of six flavonoids(baicalein... [Objectives]To predict core targets and pathways of flavonoids from Scutellaria baicalensis against PD via network pharmacology.[Methods]Network pharmacology was employed to predict targets of six flavonoids(baicalein,baicalin,chrysin,wogonin,wogonoside,oroxylin A)from S.baicalensis.PD-related targets were screened from DrugBank,DisGeNET,GeneCards,and NCBI databases.Compound-target-disease networks and protein-protein interaction(PPI)networks were constructed.Functional enrichment analysis(GO/KEGG)was performed via Metascape.Molecular docking(Autodock Vina)validated ligand-target binding affinities.[Results]Intersection analysis identified 18 pivotal targets from 148 compound targets and 18 PD-associated targets.PPI network analysis revealed PTGS 2,ESR 1,TNF,and ABCB 1 as core targets(degree>6).KEGG enrichment highlighted ovarian steroidogenesis(hsa04913)and ABC transporters.Molecular docking confirmed robust binding between flavonoids and PTGS 2(binding energy<-5 kcal/mol;baicalin:-13.2).[Conclusions]Flavonoids synergistically target PTGS 2/ESR 1-mediated prostaglandin synthesis and hormonal pathways. 展开更多
关键词 Scutellaria baicalensis Primary dysmenorrhea(PD) Network pharmacology PTGS 2 Molecular docking
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基于网络药理学及分子对接探讨柴胡注射液退热的分子机制 被引量:2
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作者 张雨洁 胡珊珊 +2 位作者 史元元 朱青梅 李东锋 《中国医药科学》 2024年第5期63-67,共5页
目的采用网络药理学方法及分子对接研究柴胡注射液(CI)退热作用的潜在机制。方法使用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)检索、文献补充获取柴胡的活性成分、潜在靶点。借助GeneCards、DurgBank以及人类在线孟德尔遗传数据库(OMMI)... 目的采用网络药理学方法及分子对接研究柴胡注射液(CI)退热作用的潜在机制。方法使用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)检索、文献补充获取柴胡的活性成分、潜在靶点。借助GeneCards、DurgBank以及人类在线孟德尔遗传数据库(OMMI)数据库检索发热相关靶点。运用STRING数据库将交集靶点行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析;在Cytoscape中建立“柴胡注射液-活性成分-靶点基因-发热”的网络;利用David数据库行基因本体(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析;最后使用AutoDock Vina模拟分子对接。结果柴胡共有活性成分17个,作用靶点210个,发热靶点1208个,交集靶点102个。GO条目747个,涉及对外来刺激的反应、炎症反应、细胞对肿瘤坏死因子的反应、对脂多糖反应等生物学过程。KEGG通路156条,涉及AGE-RAGE、TNF、IL-17等信号通路。分子对接中成分与靶点可较好结合。结论CI通过多成分、作用于多靶点和途径对发热产生治疗作用。 展开更多
关键词 柴胡注射液 发热 网络药理 分子对接 ptgs2 TP53
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基于血清药物化学与加权基因共表达网络分析探究葛兰心宁胶囊治疗冠心病的作用 被引量:1
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作者 靳琪鹏 王肖龙 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期3483-3491,共9页
目的探究葛兰心宁胶囊治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)可能调控的关键靶点基因。方法HPLC法对入血成分进行鉴定,同时借助GSE20680数据集,基于P<0.05标准,筛选出15549个差异表达基因。利用加权基因共表达网络分析,鉴定与疾病相关... 目的探究葛兰心宁胶囊治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)可能调控的关键靶点基因。方法HPLC法对入血成分进行鉴定,同时借助GSE20680数据集,基于P<0.05标准,筛选出15549个差异表达基因。利用加权基因共表达网络分析,鉴定与疾病相关的模块基因。确定入血成分可能调控的关键靶点基因,进一步取交集,对其靶点进行富集分析,探索关键靶点的功能和参与的通路,并完成其与相关成分的分子对接。通过动物实验验证加权基因共表达网络分析结果。结果鉴定出21种入血成分。GO分析显示,交集基因主要参与凋亡、炎症反应的调控。KEGG分析显示,入血成分治疗CAD主要参与NF-κB信号通路、糖尿病心肌病等相关通路。分子对接实验验证了同时调控关键靶点PTGS2、PLAU 4种入血成分的相互作用。动物实验显示,葛兰心宁胶囊能够降低小鼠主动脉窦的脂质蓄积,缩小斑块面积,减少PTGS2、PLAU表达。结论本研究揭示了葛兰心宁胶囊入血成分及其治疗CAD可能调控的关键靶点基因,为其进一步临床应用提供了重要依据。 展开更多
关键词 葛兰心宁胶囊 冠心病 血清药物化学 加权基因共表达网络分析 ptgs2 PLAU
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复方葛根汤诱导结肠癌HCT116细胞铁死亡分子机制研究
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作者 钱玲 饶江泉 +4 位作者 赵斌 徐恩惠 罗小泉 杨潮 陈来 《井冈山大学学报(自然科学版)》 2024年第3期58-64,共7页
为探究复方葛根汤对结肠癌HCT116细胞增长作用及其分子机制,通过MTT法检测、克隆形成、形态学分析探讨复方葛根汤对HCT116细胞增长作用,以活性氧试剂盒检测、荧光显微成像及蛋白免疫印迹法探究其分子机制。研究结果显示,与溶媒对照组相... 为探究复方葛根汤对结肠癌HCT116细胞增长作用及其分子机制,通过MTT法检测、克隆形成、形态学分析探讨复方葛根汤对HCT116细胞增长作用,以活性氧试剂盒检测、荧光显微成像及蛋白免疫印迹法探究其分子机制。研究结果显示,与溶媒对照组相比,复方葛根汤能显著抑制HCT116细胞增长能力,并呈浓度和时间依赖性,机制上能显著增加细胞内活性氧,显著上调铁死亡相关蛋白PTGS2、ACSL4蛋白的表达,及明显下调铁死亡相关蛋白GPX4表达,表明复方葛根汤可能通过诱导铁死亡机制抑制HCT116细胞增长。 展开更多
关键词 复方葛根汤 人结肠癌HCT116细胞 铁死亡 ptgs2
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