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基于CRISPR/Cas9系统构建NCOA4敲除的MARC 145细胞系及其对HP-PRRSV复制的影响
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作者 官凯锋 袁晨阳 +1 位作者 吕镕州 张改平 《华中农业大学学报》 北大核心 2025年第5期134-141,共8页
为探究NCOA4介导的铁自噬在PRRSV感染中的作用,利用CRISPR/Cas9技术在PRRSV易感的MARC-145细胞中敲除铁自噬的关键受体NCOA4基因,并结合Sanger测序和Western blot检测NCOA4的敲除效率。同时运用流式细胞术、qPCR、Western blot、TCID_(... 为探究NCOA4介导的铁自噬在PRRSV感染中的作用,利用CRISPR/Cas9技术在PRRSV易感的MARC-145细胞中敲除铁自噬的关键受体NCOA4基因,并结合Sanger测序和Western blot检测NCOA4的敲除效率。同时运用流式细胞术、qPCR、Western blot、TCID_(50)等对NCOA4缺失型和野生型MARC-145进行细胞周期、细胞活性检测,以及检测NCOA4缺失对PRRSV复制的影响。结果显示,本研究成功构建NCOA4基因敲除的MARC-145细胞系。此外,相比于野生型MARC-145细胞系,敲除NCOA4显著增加PRRSV ORF7 mRNA、N蛋白及病毒滴度水平,同时促进FTH 1蛋白表达。结果表明,铁自噬的关键受体基因NCOA4缺失能促进PRRSV复制。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 NCOA4 铁自噬 猪繁殖与呼吸综合征 基因敲除 细胞活性
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猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的流行特点及防控策略
2
作者 芙蓉 《猪业科学》 2025年第11期64-65,共2页
0引言内蒙古巴彦淖尔独特的自然环境与养殖模式使猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)流行呈现地域性特征。本文分析地区PRRS流行特点,并针对中小规模养殖场集中的现状提出具有可操作性的防控建议,对保障区域生猪产业安全具有一定现实意义。1巴彦... 0引言内蒙古巴彦淖尔独特的自然环境与养殖模式使猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)流行呈现地域性特征。本文分析地区PRRS流行特点,并针对中小规模养殖场集中的现状提出具有可操作性的防控建议,对保障区域生猪产业安全具有一定现实意义。1巴彦淖尔地区PRRS流行特点巴彦淖尔地区PRRS疫情呈现显著的双周期高峰特征,其流行强度与当地极端大陆性季风气候形成精密耦合机制:每年3月至5月的流行高峰恰逢昼夜温差骤升期(日均温差达13~14℃),此时猪群因呼吸道黏膜屏障功能受冷热交替冲击而防护效能衰减。 展开更多
关键词 巴彦淖尔 防控策略 流行特点 养殖模式 prrS
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猪群感染PRRSV后病毒血症规律和血清中N蛋白抗体消减规律探究
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作者 陈磊 杜伟国 +4 位作者 李艺雷 龚彦 王锋锋 崔德旺 杨东辉 《现代畜牧科技》 2025年第2期60-63,共4页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)持续影响着猪场效益,为探究安阳禾丰农牧有限公司(以下简称本公司),体系内猪群感染不同PRRS毒株后病毒血症持续时间、N蛋白抗体消减规律及两者之间相关性,该探究选取3组感染不同PRRS毒株的猪群,监测PRRS核酸、... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)持续影响着猪场效益,为探究安阳禾丰农牧有限公司(以下简称本公司),体系内猪群感染不同PRRS毒株后病毒血症持续时间、N蛋白抗体消减规律及两者之间相关性,该探究选取3组感染不同PRRS毒株的猪群,监测PRRS核酸、N蛋白抗体。第1组流产猪,感染类NADC30流产后第7、14、21天采血监测;第2组170日龄后备猪,PRRS弱毒活苗(VR2332)驯化后第21、28、35、42天采血监测;第3组170日龄后备猪,感染PRRS类NADC30后第7、14、21天采血监测。结果显示,本公司体系内猪群感染PRRSV后21 d内病毒血症大概率消失;猪群感染PRRSV后PRRS N蛋白抗体先快速上升后快速下降,最后趋于平稳或缓慢下降;N蛋白抗体显著下降趋势时病毒血症大概率消失。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 病毒血症 N蛋白
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LncRNA PRR34-AS1调节miR-296-5p/DDI2轴对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
4
作者 陈海洋 王春梅 +1 位作者 石金升 代贺阳 《中国细胞生物学学报》 2025年第7期1593-1603,共11页
该文旨在探究LncRNA PRR34-AS1调节miR-296-5p/DDI2轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR法检测CRC细胞与组织中LncRNA PRR34-AS1、miR-296-5p、DDI2 mRNA水平;用双荧光素酶实验检测LncRNA PRR34-AS1与miR-296-5p及DDI... 该文旨在探究LncRNA PRR34-AS1调节miR-296-5p/DDI2轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR法检测CRC细胞与组织中LncRNA PRR34-AS1、miR-296-5p、DDI2 mRNA水平;用双荧光素酶实验检测LncRNA PRR34-AS1与miR-296-5p及DDI2与miR-296-5p的靶向关系;将HCT116细胞分为Control组、sh-NC组、sh-PRR34-AS1组、sh-PRR34-AS1+antiNC组、sh-PRR34-AS1+anti-miR-296-5p组,除Control组外,其余各组转染质粒;用克隆法、划痕法和Transwell法分别检测HCT116细胞增殖、迁移、侵袭能力;免疫印迹和免疫组化法检测相关蛋白表达水平;裸鼠成瘤实验检测LncRNA PRR34-AS1对CRC移植瘤生长及对miR-296-5p、DDI2表达的影响。在CRC细胞和组织中,LncRNA PRR34-AS1、DDI2 mRNA表达水平升高,miR-296-5p表达水平降低(P<0.05)。在线预测显示,LncRNA PRR34-AS1与miR-296-5p、DDI2与miR-296-5p有靶向关系。与sh-NC组比较,sh-PRR34-AS1组细胞LncRNA PRR34-AS1、DDI2、PCNA、MMP-2、MMP-9表达下调,miR-296-5p表达上调,克隆形成数目、划痕愈合率、侵袭细胞数目降低(P<0.05);与sh-PRR34-AS1+anti-NC组比较,sh-PRR34-AS1+anti-miR-296-5p组miR-296-5p表达下调,DDI2、PCNA、MMP-2、MMP-9表达上调,克隆形成数目、划痕愈合率、侵袭细胞数目上升(P<0.05)。与sh-NC组相比,sh-PRR34-AS1组肿瘤体积更小、质量更低,LncRNA PRR34-AS1、DDI2表达下调,miR-296-5p表达上调(P<0.05)。抑制LncRNA PRR34-AS1可通过靶向miR-296-5p/DDI2轴,抑制CRC细胞的增殖、迁移、侵袭。 展开更多
关键词 结直肠癌 LncRNA prr34-AS1 miR-296-5p DDI2 增殖 迁移 侵袭
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一例疑似PRRSV感染的实验室诊断 被引量:1
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作者 黄恩福 毕小球 +5 位作者 李婷 邢明 戴五洲 黄解珠 罗锋 范寅 《江西畜牧兽医杂志》 2024年第6期38-40,共3页
江西某猪场发生疑似猪繁殖与呼吸综合征病例,为确诊该病,通过临床观察,仔猪表现出咳嗽、气喘、呼吸困难、体温高达42℃、耳尖及皮下发绀、生长发育迟缓等一系列症状;通过死亡猪剖检可见肾脏有出血点、肠系淋巴结肿大、肺弥漫性出血呈肉... 江西某猪场发生疑似猪繁殖与呼吸综合征病例,为确诊该病,通过临床观察,仔猪表现出咳嗽、气喘、呼吸困难、体温高达42℃、耳尖及皮下发绀、生长发育迟缓等一系列症状;通过死亡猪剖检可见肾脏有出血点、肠系淋巴结肿大、肺弥漫性出血呈肉样变、心外膜出血、脾脏周边有梗死灶;取肺脏进行病毒RNA的提取,RT-PCR扩增、PCR产物凝胶电泳等一系列方法,获得与预期一致的特异性片段。综上可得,确诊本次病例为猪繁殖与呼吸综合征,其遗传变异和致病性有待进一步研究。 展开更多
关键词 prrS RT-PCR 诊断
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Genome-editing of a circadian clock gene TaPRR95 facilitates wheat peduncle growth and heading date 被引量:2
6
作者 Mingxue Fu Shaoshuai Liu +14 位作者 Yuqing Che Dada Cui Zhongyin Deng Yang Li Xinyu Zou Xingchen Kong Guoliang Chen Min Zhang Yifan Liu Xiang Wang Wei Liu Danmei Liu Shuaifeng Geng Aili Li Long Mao 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2024年第10期1101-1110,共10页
Plant height and heading date are important agronomic traits in wheat(Triticum aestivum L.)that affect final grain yield.In wheat,knowledge of pseudo-response regulator(PRR)genes on agronomic traits is limited.Here,we... Plant height and heading date are important agronomic traits in wheat(Triticum aestivum L.)that affect final grain yield.In wheat,knowledge of pseudo-response regulator(PRR)genes on agronomic traits is limited.Here,we identify a wheat TaPRR95 gene by genome-wide association studies to be associated with plant height.Triple allele mutant plants produced by CRISPR/Cas9 show increased plant height,particularly the peduncle,with an earlier heading date.The longer peduncle is mainly caused by the increased cell elon-gation at its upper section,whilst the early heading date is accompanied by elevated expression of flow-ering genes,such as TaFT and TacO1.A peduncle-specific transcriptome analysis reveals up-regulated photosynthesis genes and down-regulated IAAVAux genes for auxin signaling inpr95abad plants that may act as a regulatory mechanism to promote robust plant growth.A haplotype analysis identifies a TaPRR95-B haplotype(Hap2)to be closely associated with reduced plant height and increased thousand-grain weight.Moreover,the Hap2 frequency is higher in cultivars than that in landraces,suggesting the artifi-cial selection on the allele during wheat breeding.These findings suggest that TaPRR95 is a regulator for plant height and heading date,thereby providing an important target for wheat yield improvement. 展开更多
关键词 Pseudo-response regulator(prr) Taprr95 CRISPR/Cas9 Plant height Heading date Photosynthesis PHYTOHORMONE WHEAT
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PRR15调控PI3K/AKT途径影响三阴性乳腺癌的恶性生物学进程
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作者 朱志霞 陈菊 +2 位作者 陈学彰 王斌 杨耀林 《解剖科学进展》 CAS 2024年第5期530-533,共4页
目的探究PRR15与PI3K/AKT信号通路在三阴性乳腺癌细胞的恶性生物学进程中的作用。方法免疫组织化学方法检测三阴性乳腺癌组织以及癌旁组织中PRR15的表达水平;将三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468细胞分为pcDNA PRR15组、pcDNA NC组和LY29400... 目的探究PRR15与PI3K/AKT信号通路在三阴性乳腺癌细胞的恶性生物学进程中的作用。方法免疫组织化学方法检测三阴性乳腺癌组织以及癌旁组织中PRR15的表达水平;将三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468细胞分为pcDNA PRR15组、pcDNA NC组和LY294002组,CCK-8实验检测MDA-MB-468细胞的增殖能力;Transwell实验分析MDA-MB-468细胞的侵袭能力;细胞划痕实验分析MDA-MB-468细胞的迁移能力;蛋白免疫印迹检测PI3K/AKT信号通路以及PRR15蛋白的表达水平。结果三阴性乳腺癌组织中PRR15表达水平降低;pcDNA PRR15和LY294002组MDA-MB-468细胞的生长速度下降、细胞侵袭数量减少、细胞迁移率降低、细胞中PI3K与AKT蛋白表达水平降低。结论PRR15在三阴性乳腺癌组织中低表达,上调PRR15表达后,三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞的增殖、侵袭以及迁移能力降低。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 prr15 PI3K AKT 增殖 侵袭
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2019—2023年张家港市生猪FMD、CSF和HP-PRRS免疫抗体水平的监测与分析
8
作者 贺亚楠 寇龙龙 +2 位作者 汤丹 王嘉熠 张鑫雷 《现代畜牧科技》 2024年第12期36-38,共3页
生猪疫病是困扰健康养殖的重要因素。为了解张家港市生猪口蹄疫(FMD)、猪瘟(CSF)、高致病性蓝耳病(HP-PRRS)3种主要疫病免疫抗体水平,从2019—2023年分别采集张家港市规模化养殖场和散养户3738、3674、3085份猪血清,用于检测口蹄疫、猪... 生猪疫病是困扰健康养殖的重要因素。为了解张家港市生猪口蹄疫(FMD)、猪瘟(CSF)、高致病性蓝耳病(HP-PRRS)3种主要疫病免疫抗体水平,从2019—2023年分别采集张家港市规模化养殖场和散养户3738、3674、3085份猪血清,用于检测口蹄疫、猪瘟、高致病性蓝耳病抗体水平。检测结果显示,口蹄疫免疫抗体水平在2021年最低为77.07%,2022年最高为96.79%;猪瘟免疫抗体水平在2019年最低为82.00%,2021年最高为97.51%;高致病性蓝耳病免疫抗体水平在2021年最低为88.43%,2020年最高为96.74%。近5年口蹄疫、猪瘟、高致病性蓝耳病抗体水平总体维持在77.07%~97.51%,能够更好地保护生猪免遭重大疫病的威胁。该研究为动物疫病防控和流行病学调研提供重要的参考依据。 展开更多
关键词 口蹄疫 猪瘟 高致病性蓝耳病 抗体 流行病学
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PRRS导致母猪PRRSV病原检测、抗体水平及繁殖性能指标的变化
9
作者 何子双 《现代畜牧兽医》 2024年第11期68-71,共4页
试验旨在比较猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病前后母猪血液猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)病原检测、血清抗体水平以及引种前后繁殖性能指标的变化,探讨药物和PRRSV灭活疫苗对上述指标的改善效果。结果显示,母猪发病前血液PRRSV阳性率为0... 试验旨在比较猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病前后母猪血液猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)病原检测、血清抗体水平以及引种前后繁殖性能指标的变化,探讨药物和PRRSV灭活疫苗对上述指标的改善效果。结果显示,母猪发病前血液PRRSV阳性率为0,发病后分别为30%、40%、12%、10%。发病前未检出Ct值,发病后Ct值中位数分别为26.45、30.82、32.92、33.85。发病前血清PRRSV抗体阳性率为78.65%,发病后分别为97.14%、95.89%和91.43%;发病前S/P平均值为1.11,发病后分别为1.69、1.88、1.43。引种前母猪失配率为1.92%,引种后为2.50%~13.77%;引种前母猪分娩率为94.72%,引种后为84.41%~94.05%;引种前无效仔率为7.37%,引种后为5.26%~10.43%;引种前母猪死亡率为0.52%,引种后为0.38%~0.90%;引种前仔猪死亡率为3.14%,引种后为2.02%~4.68%。研究表明,母猪PRRS发病后,PRRSV核酸阳性率、抗体水平提高,Ct值中位数逐月提高,引种后失配率、无效仔率、母猪和仔猪死亡率增加,分娩率降低,上述指标持续异常的时间2~5个月。药物和PRRSV灭活疫苗对母猪和仔猪的死亡率具有一定改善效果,对PRRSV持续性感染和繁殖性能改善不明显。 展开更多
关键词 母猪 猪繁殖与呼吸综合征(prrS) 猪繁殖与呼吸综合征病毒(prrSV) 抗体水平 繁殖性能
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2021—2024年河南省猪繁殖与呼吸综合征流行病学监测
10
作者 靳冬 赵胜杰 尼博 《中国动物检疫》 2025年第6期9-12,54,共5页
为掌握近年来河南省猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)流行情况,2021—2024年对采自4211场次的80865份猪组织样品进行了PRRS病原学检测,并按年份、月份和季节,区域以及场点类别对检测结果进行了时间、空间和群间分布分析。结果显示:2021—2024年... 为掌握近年来河南省猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)流行情况,2021—2024年对采自4211场次的80865份猪组织样品进行了PRRS病原学检测,并按年份、月份和季节,区域以及场点类别对检测结果进行了时间、空间和群间分布分析。结果显示:2021—2024年,河南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)平均场群阳性率为3.23%,平均个体阳性率为1.18%,近4年PRRSV场群和个体阳性率均呈逐年上升的趋势;冬春季节,尤其是1月份和11月份阳性率相对较高;豫东、豫西和豫北地区阳性率相对较高,豫中和豫南地区相对较低;无害化处理厂PRRSV阳性率高于养殖场和屠宰场,种猪场和散养户无阳性样品检出。结果表明:河南省PRRSV分布具有一定时间、空间和群间特征,冬春季节高发、沿黄河和黄河以北地区流行较严重,无害化处理厂污染风险较高。提示应依据病原分布特征和流行规律,加强高发季节和流行区域的PRRS防控及净化工作,同时加强无害化处理厂、屠宰场的清洗消毒和生物安全管理,降低病原流行和散播风险。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 病原 监测 分析 河南省
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猪繁殖与呼吸综合征防控与净化研究进展 被引量:2
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作者 唐燕婷 裴建武 +3 位作者 葛杰 朱九超 叶萃玉 鞠厚斌 《国外畜牧学(猪与禽)》 2025年第1期14-21,共8页
猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道症状为主要特征的一种免疫抑制... 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道症状为主要特征的一种免疫抑制性传染病。由于PRRSV的高变异率和高重组率,猪群的PRRS感染率居高不下,并且广泛流行、不断发展,给全球养猪业造成巨大经济损失。本文通过综述PRRS病毒分子生物学特征、国内外流行情况、防控措施及净化技术的研究进展,以期为PRRS流行规律研究、防控及净化工作等方面提供参考。 展开更多
关键词 prrS 免疫抑制 流行情况 防控
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PRRS病毒感染对猪细胞因子IL-2、IL-4和IL-10mRNA转录的影响 被引量:16
12
作者 郑洁 郭鑫 +3 位作者 杨汉春 王彬 陈艳红 查振林 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期483-489,共7页
通过构建猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的缺失cDNA竞争分子,利用定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒感染过程中细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的mRNA进行转录水平变化的定量检测,研究PRRS病毒感染对猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10m... 通过构建猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的缺失cDNA竞争分子,利用定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒感染过程中细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的mRNA进行转录水平变化的定量检测,研究PRRS病毒感染对猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10mRNA转录的影响。结果表明猪Th1型细胞因子IL 2的mRNA转录水平分别在PRRS病毒感染后1d、28d和56d出现3个mRNA转录高峰;而Th2型细胞因子IL 4的mRNA转录水平在病毒感染后56d内,一直处于低水平,而后才逐渐升高;IL 10的mRNA转录水平在病毒感染后6d内,一直处于低水平状态,第6d后才逐渐上升,至42d到达高峰,而后下降,恢复正常。结果显示PRRS病毒感染可导致Th2型细胞因子IL 4和IL 10基因转录的抑制。 展开更多
关键词 prrS病毒感染 细胞因子 IL-2 IL-4 IL-10mRNA转录 影响因素 PCR技术 繁殖器官 呼吸道
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2008-2010年中国华东地区PRRSV ORF5基因遗传变异分析 被引量:11
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作者 王小敏 何孔旺 +10 位作者 张文文 陈蔚 茅爱华 俞正玉 温立斌 倪艳秀 张雪寒 吕立新 郭容利 周俊明 李彬 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第18期3886-3894,共9页
【目的】对来自2008-2010年中国华东地区7个不同省市的疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病猪场送检的病料进行PRRSV检测,并对其ORF5基因进行测序,确定当前PRRSV在中国华东地区的分子流行病学特征,并分析PRRSV在中国的遗传演化规律。【方... 【目的】对来自2008-2010年中国华东地区7个不同省市的疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病猪场送检的病料进行PRRSV检测,并对其ORF5基因进行测序,确定当前PRRSV在中国华东地区的分子流行病学特征,并分析PRRSV在中国的遗传演化规律。【方法】利用RT-PCR方法对采集的样品进行PRRSV检测,并对PRRSV检测呈阳性的36份病料进行ORF5基因的序列测定和分析。【结果】260份病料中共检测到118份PRRSV阳性样品,阳性率为45.4%。ORF5序列分析和系统进化树分析结果表明,本试验所获得的36株PRRSV毒株序列均属于北美型,与GenBank中高致病性PRRSV(HP-PRRSV)参考毒株的氨基酸同源性为94.6%-100%,并可分为5个亚群,亚群III与HP-PRRSV同源性最高,几乎所有的亚群中和表位(primary neutralizing epitope,PNE)都存在变异,亚群III和IV相对于其它亚群具有更多的糖基化位点。由于36个毒株是于2008-2010年间采集自安徽、江苏、上海等7省,进化树分析结果表明,病毒的分型并没有呈现明显的地域性。【结论】2008-2010年间中国华东地区普遍存在PRRSV感染,PRRSV流行株为HP-PRRSV,其遗传演化相对稳定,但也具有不同的遗传特征。来源于不同省市的PRRSV毒株的遗传关系存在交叉,虽然亚群IV和V只出现在部分省市,但PRRSV的分布没有呈现明显的地域特征。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征(prrS) 华东地区 ORF5基因 遗传变异
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PRRS病毒核衣壳蛋白在大肠杆菌中的高效表达 被引量:9
14
作者 高云 杨汉春 +4 位作者 刘平黄 陈声 郭鑫 韩军 黄芳芳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期438-440,共3页
用表达非融合蛋白的原核表达载体 p BV2 2 0 ,通过 PCR技术的引物设计对猪繁殖与呼吸综合征( PRRS)病毒 BJ-4株核衣壳蛋白 ( N)基因起始密码子上游进行了改造和修饰 ,成功地构建了含有 PRRS病毒 N基因的原核重组表达载体 p BV-N。 p BV-... 用表达非融合蛋白的原核表达载体 p BV2 2 0 ,通过 PCR技术的引物设计对猪繁殖与呼吸综合征( PRRS)病毒 BJ-4株核衣壳蛋白 ( N)基因起始密码子上游进行了改造和修饰 ,成功地构建了含有 PRRS病毒 N基因的原核重组表达载体 p BV-N。 p BV-N转化大肠杆菌 DH5α,温度诱导后菌体裂解物经 SDS-PAGE分析发现 ,在约 1 5 0 0 0处出现 1条诱导前后的 p BV2 2 0载体对照和诱导前的 p BV-N中均缺少的特异性的蛋白条带 ,分子量大小与 PRRS病毒 N蛋白相符 ,并随着诱导时间的延长而变化 ,在诱导后 4 h达到高峰。薄层扫描结果显示 ,重组 N蛋白表达量最多可占菌体总蛋白的 2 7.4 %。 Western-blotting检测 ,此 1 5 0 0 0的蛋白带可为 PRRS病毒 N蛋白的单克隆抗体所识别 ,表明该重组 展开更多
关键词 prrS病毒 核衣壳蛋白 原核表达 PBV220 猪繁殖与呼吸综合征 prrS
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从疑似PRRS流产胎儿分离PRRSV的研究 被引量:954
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作者 郭宝清 陈章水 +1 位作者 刘文兴 崔益洙 《中国畜禽传染病》 CSCD 1996年第2期1-5,共5页
采用猪肺巨噬细胞和Marc-145细胞培养对国内暴发流行PRRS的某地猪场进行了病毒分离,从流产胎儿分离出特征性致细胞病变因子。用PRRSV SDOW-17单克隆抗体进行间接免疫荧光染色,证明从4头流产胎儿分离出4株PRRSV(CH-la,CH-lb,CH-lc,CH-ld... 采用猪肺巨噬细胞和Marc-145细胞培养对国内暴发流行PRRS的某地猪场进行了病毒分离,从流产胎儿分离出特征性致细胞病变因子。用PRRSV SDOW-17单克隆抗体进行间接免疫荧光染色,证明从4头流产胎儿分离出4株PRRSV(CH-la,CH-lb,CH-lc,CH-ld)。这4株毒均可在猪肺巨噬细胞和Marc-145细胞上生长,并产生特征性CPE变化。用PRRSV美国分离毒株VR-2332和NVSL抗血清分别对4株CH-1、VR-2332和NVSL毒株感染细胞进行间接免疫荧光试验,结果表明4个CH-l毒株近似于美洲型PRRSV。间接免疫荧光试验证明,4个CH-l分离株与HCV、PrV、PPV、TGEV、PEDV和HEV无交叉抗原。本文首次报道在国内暴发生殖和呼吸道综合征猪群分离到PRRS病毒。 展开更多
关键词 猪病 生殖呼吸综合征 prrS 病毒
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板蓝根多糖对PRRS弱毒苗免疫猪抗体和T细胞亚群的影响 被引量:11
16
作者 张红英 崔沛 +5 位作者 崔保安 王学斌 陈红英 金钺 赵现敏 赵金凤 《中国农学通报》 CSCD 2008年第6期4-7,共4页
研究板蓝根多糖对PRRSV弱毒苗免疫抗体和猪外周血T细胞亚群的影响。35日龄断奶仔猪16只随机分为4组,将多糖分别以高、低两个剂量和猪PRRSV弱毒苗同时注射,于免疫后不同的时间点采血,ELISA方法检测猪PRRSV抗体水平,流式细胞术检测猪外周... 研究板蓝根多糖对PRRSV弱毒苗免疫抗体和猪外周血T细胞亚群的影响。35日龄断奶仔猪16只随机分为4组,将多糖分别以高、低两个剂量和猪PRRSV弱毒苗同时注射,于免疫后不同的时间点采血,ELISA方法检测猪PRRSV抗体水平,流式细胞术检测猪外周血中T淋巴细胞亚群的变化。弱毒苗免疫后7d,板蓝根多糖高剂量组即可检测到PRRSV阳性抗体,而其它组在免疫后14d,均可检测到PRRS阳性抗体,板蓝根多糖对PRRS弱毒苗产生抗体的影响是和剂量密切相关的,高剂量能提高抗体水平,低剂量会阻碍PRRSV抗体的产生。板蓝根多糖和PRRS弱毒苗联合使用对猪外周血CD3+和CD4+细胞数量的影响不显著,在早期可促进猪外周血CD8+细胞的增殖。合适剂量的板蓝根多糖可以作为免疫增强剂与PRRSV弱毒苗联合使用。 展开更多
关键词 板蓝根多糖 prrS弱毒苗 T淋巴细胞亚群
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人PRR11启动子的结构与功能初步分析 被引量:9
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作者 艾青 卜友泉 +6 位作者 刘竹 兰欢 吉颖 杜刚 杨正梅 刘革力 宋方洲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期356-363,共8页
PRR11(proline-rich protein 11,PRR11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因.初步研究表明,PRR11参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程.为了进一步研究PRR11基因的转录调控机制并全面解析其功能,本研究对PRR11基因的启... PRR11(proline-rich protein 11,PRR11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因.初步研究表明,PRR11参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程.为了进一步研究PRR11基因的转录调控机制并全面解析其功能,本研究对PRR11基因的启动子进行了克隆鉴定和初步分析.首先,应用5'RACE(rapid amplification of cDNA ends,cDNA末端快速扩增)技术鉴定了PRR11基因的转录起始位点,发现了其具有多个转录起始位点.通过PCR定向克隆和DNA blunting技术,构建了6个相互重叠并覆盖PRR11基因转录起始位点附近约2.0 kb区域的PRR 11基因启动子荧光素酶报告基因重组体.启动子活性分析表明,PRR 11基因启动子主要定位于转录起始位点附近-563 bp~+341 bp的区域内.采用转录因子结合位点预测分析软件分析表明,PRR 11基因启动子缺乏典型的TATA盒,但含有典型的GC盒、CCAAT盒以及潜在的经典转录因子E2F1和MYB的结合位点,提示Sp1、NF-Y、E2F1和MYB等经典转录因子可能参与PRR 11基因的转录调控. 展开更多
关键词 prr11(proline-rich PROTEIN 11) 启动子 转录调控 肿瘤相关基因
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猪繁殖呼吸综合征病毒(PRRSV)S_A毒株的分离与鉴定 被引量:11
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作者 张婉华 叶向阳 +2 位作者 祁贤 朱永军 陆鑫芳 《上海农业学报》 CSCD 2002年第2期76-79,共4页
从仔猪内脏分离到一株猪繁殖呼吸综合征病毒 (PRRSV)毒株 ,该毒株能在Marc 14 5细胞上增殖致细胞病变 ,该病变能被PRRSV美洲型阳性血清所抑制 ,不被乙脑病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒阳性血清所抑制 ,经美洲型PRRSV荧光抗体染色呈阳性反... 从仔猪内脏分离到一株猪繁殖呼吸综合征病毒 (PRRSV)毒株 ,该毒株能在Marc 14 5细胞上增殖致细胞病变 ,该病变能被PRRSV美洲型阳性血清所抑制 ,不被乙脑病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒阳性血清所抑制 ,经美洲型PRRSV荧光抗体染色呈阳性反应 ,电镜观察到直径 5 5nm左右的病毒粒子 ,属RNA病毒 ,接种阴性仔猪未见临床症状异常 ,但血清学阳性。命名该分离毒为PRRSV SA 毒株。 展开更多
关键词 繁殖呼吸综合征病毒 prrSV SA毒株 分离 鉴定
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重组M蛋白-乳胶凝集试验检测PRRS病毒血清抗体的研究 被引量:21
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作者 王忠 杨汉春 +1 位作者 郭鑫 陈艳红 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2002年第7期11-13,共3页
利用纯化的 PRRS病毒重组 M蛋白致敏乳胶制成乳胶抗原 ,成功地建立了一种检测 PRRS病毒血清抗体的乳胶凝集试验 (L AT)诊断方法。用制备的乳胶 M抗原分别检测猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、猪弓形体病、猪衣原体病、猪乙型脑炎阳性血... 利用纯化的 PRRS病毒重组 M蛋白致敏乳胶制成乳胶抗原 ,成功地建立了一种检测 PRRS病毒血清抗体的乳胶凝集试验 (L AT)诊断方法。用制备的乳胶 M抗原分别检测猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、猪弓形体病、猪衣原体病、猪乙型脑炎阳性血清 ,结果均为阴性 ,无交叉反应 ,说明建立的 L AT方法具有良好的特异性。用建立的乳胶凝集试验方法与国外IDEXX公司 PRRS病毒抗体检测试剂盒同时对 76份猪血清样本进行检测 ,结果表明建立的 L AT方法的特异性和敏感性均为 95 % ,两种方法的总符合率为 87% ,检出率基本一致。研究结果表明 L AT方法具有操作简便、快速、敏感性高、特异性强、价格低廉且可用于现场检测等优点 ,是一种适合基层兽医单位用于 展开更多
关键词 prrS病毒 重组M蛋白 乳胶凝集试验 抗体检测
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猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)CH-la株糖蛋白基因的遗传变异分析 被引量:4
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作者 仇华吉 童光志 +5 位作者 周彦君 郭宝清 张绍杰 王柳 王云峰 刘宝全 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期357-360,共4页
新近发现的猪生殖 -呼吸道综合征病毒 (PRRSV)是单股RNA病毒 ,属于不久前成立的动脉炎病毒科。为了比较国内分离的CH la株与国外毒株的分子遗传学关系 ,扩增并克隆了PRRSVCH la株糖蛋白基因ORF2~ 5 ,测定了其核苷酸序列。用序列分析软... 新近发现的猪生殖 -呼吸道综合征病毒 (PRRSV)是单股RNA病毒 ,属于不久前成立的动脉炎病毒科。为了比较国内分离的CH la株与国外毒株的分子遗传学关系 ,扩增并克隆了PRRSVCH la株糖蛋白基因ORF2~ 5 ,测定了其核苷酸序列。用序列分析软件分析了其编码产物的分子量、等电点、疏水性、抗原性和有关位点 ,并与国外毒株进行了序列比较和系统发育进化分析。结果表明 :CH la株与VR 2 332株尽管密切相关 ,但二者之间也有较大的变异 ,且ORF3和ORF4重叠区存在一个高变区。这提示CH la株和VR 2 332株可能是北美洲型中的两个不同亚型。 展开更多
关键词 猪生殖呼吸道综合征(prrS)病毒 ORF2~5 糖蛋白 遗传变异
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