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猪胸膜肺炎放线杆菌的分离及PCR诊断方法的建立 被引量:19
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作者 梁金华 刘镇明 +3 位作者 顾万军 王淑敏 冼琼珍 黄良宗 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期36-38,共3页
APXⅣA基因是新发现的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的RTX毒素基因,本文通过PCR方法从APP标准血清1型及临床分离到的3株野毒株中扩增出长为442bp的部分APXⅣA基因,而从其它引起猪呼吸道疾病的细菌中无法扩增出此片段。通过玻板凝集试... APXⅣA基因是新发现的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的RTX毒素基因,本文通过PCR方法从APP标准血清1型及临床分离到的3株野毒株中扩增出长为442bp的部分APXⅣA基因,而从其它引起猪呼吸道疾病的细菌中无法扩增出此片段。通过玻板凝集试验鉴定这三株野毒株为血清1型APP。所建立的PCR方法能检测的DNA量最高敏感度为28pg.表明本文所建立的对猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的PCR诊断方法具有较高的特异性和敏感性。 展开更多
关键词 猪胸膜肺炎放线杆菌 分离 聚合酶链式反应 pcr诊断 血清学方法 病原学方法
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鳜鱼病毒PCR诊断方法的建立 被引量:7
2
作者 李新辉 吴淑勤 +4 位作者 李凯彬 白俊杰 潘厚军 罗建仁 简清 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期43-46,共4页
从RAPD扩增的鳜鱼病毒 (SCV)核酸电泳带中回收了二个片断 ,克隆子pUC19质粒 (称为SCVE36 9和SCVE45 0 )。序列分析表明插入片段分别为 36 9bp和 45 0bp与GenBank序列没有显著的同源。根据克隆序列设计两对引物P1/ P2 和P3 /P4 ,在健康... 从RAPD扩增的鳜鱼病毒 (SCV)核酸电泳带中回收了二个片断 ,克隆子pUC19质粒 (称为SCVE36 9和SCVE45 0 )。序列分析表明插入片段分别为 36 9bp和 45 0bp与GenBank序列没有显著的同源。根据克隆序列设计两对引物P1/ P2 和P3 /P4 ,在健康鳜鱼、病鳜以及提纯的SCV核酸中进行PCR试验。结果表明 ,P1/P2 组引物在SCV基因组中扩增出特异性核酸片段 ,可作为鳜鱼病毒PCR诊断 ,检测片段为 36 9bp。 展开更多
关键词 鳜鱼病毒 pcr诊断 基因克隆 序列分析
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松材线虫TaqMan探针实时荧光PCR诊断 被引量:17
3
作者 王金成 季镭 +2 位作者 杨秀丽 马以桂 林茂松 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期281-284,共4页
关键词 拟松材线虫 TAQMAN探针 pcr诊断 荧光 实时 植物病害 林业安全 松树萎蔫病 伞滑刃线虫 北美地区
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禽白血病病毒J亚群(ALV-J)的血清学调查及PCR诊断 被引量:22
4
作者 成子强 赵振华 +2 位作者 郝永清 赵心力 哈斯阿古拉 《中国病毒学》 CAS CSCD 2002年第4期371-373,共3页
We investigated the infection of \%Avian leukosis virus\% subgroup J myelocytomatosis using ELISA method in Inner Mongolia Region. The result indicated that the meat type flocks of three different farms infection rate... We investigated the infection of \%Avian leukosis virus\% subgroup J myelocytomatosis using ELISA method in Inner Mongolia Region. The result indicated that the meat type flocks of three different farms infection rate of ALV J were 28.12%(9/32)?9.38%(3/32)and 8.33%(10/12),respectively,and all laying chickens infection rate were 0%(0/35,0/10).We chose 6 chickens of ALV J antibody positive and 13 chickens of ALV J antibody negative to do PCR test. The result indicated that 6 chickens of ALV J antibody positive were all PCR positive,and 4 chickens were PCR positive among 13 chickens of ALV J antibody negative. The result indicated that there were ALV J virus not only in ALV J antibody positive chickens but also in some ALV J antibody negative chickens. 展开更多
关键词 禽白血病病毒J亚群 ALV-J 血清学调查 pcr诊断 禽骨髓细胞瘤病
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牛传染性支气管炎病毒PCR诊断方法的研究 被引量:18
5
作者 张桂红 童光志 +4 位作者 王柳 仇华吉 赵晓岩 张绍杰 刘宝全 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2000年第4期1-2,共2页
根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒 (IBRV )gB基因序列 ,应用 0ligo4.1程序设计一对引物PB1/PB2 ,分别对IBRVLA株、洛精、美精、BarthaNu/ 67株、B7株、云南 -1和云南 -2分离株进行了PCR扩增。结果显示 7株IBR病毒DNA均有 3 3 9bp的特... 根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒 (IBRV )gB基因序列 ,应用 0ligo4.1程序设计一对引物PB1/PB2 ,分别对IBRVLA株、洛精、美精、BarthaNu/ 67株、B7株、云南 -1和云南 -2分离株进行了PCR扩增。结果显示 7株IBR病毒DNA均有 3 3 9bp的特异性片段。用此引物对其同属的伪狂犬病毒 (PRV)、马立克氏病毒 (MDV)、鸡传染性喉气管炎病毒 (ILTV)进行扩增 ,均未见特异性条带 ,证明该引物是特异的 ;检测PCR的敏感性表明 ,该法可检测出 3 pg的病毒DNA。 展开更多
关键词 传染性鼻气管炎病毒 GB基因 pcr诊断方法
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福建省羊口疮的流行病学调查与PCR诊断 被引量:6
6
作者 董晓宁 李文杨 +3 位作者 刘远 高承芳 张晓佩 林碧芬 《家畜生态学报》 北大核心 2013年第1期47-48,共2页
用PCR方法快速检测福建各地区临床发生羊口疮症状病羊病毒。结果表明,该病在福建省发病率为10%~20%之间,死亡率小于10%;PCR检测结果显示病羊样品可扩增出507bp的特异性片段,健康羊只样品则无条带,首次利用PCR方法确定羊口疮病毒在福建... 用PCR方法快速检测福建各地区临床发生羊口疮症状病羊病毒。结果表明,该病在福建省发病率为10%~20%之间,死亡率小于10%;PCR检测结果显示病羊样品可扩增出507bp的特异性片段,健康羊只样品则无条带,首次利用PCR方法确定羊口疮病毒在福建省的存在,从而证明了羊口疮在福建省山羊中的流行。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 调查 pcr诊断
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湖北蛋鸡群血管瘤型ALV-J血清学检测和PCR诊断 被引量:8
7
作者 杨玉莹 梁雄燕 +3 位作者 余连喜 黄建军 顾玉芳 钟蓓 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第6期1211-1213,共3页
用ELISA和ALV-J特异性PCR对抽检的湖北省某蛋鸡场的4只鸡冠苍白、毛囊和鸡爪出血、脚趾间和剑状软骨处长有肿瘤的海兰褐病鸡,进行J亚群禽白血病血清学检测和ALV-J前病毒核酸检测。结果4只病鸡ALV-J特异性PCR检测和泄殖腔拭子ALV-J ELIS... 用ELISA和ALV-J特异性PCR对抽检的湖北省某蛋鸡场的4只鸡冠苍白、毛囊和鸡爪出血、脚趾间和剑状软骨处长有肿瘤的海兰褐病鸡,进行J亚群禽白血病血清学检测和ALV-J前病毒核酸检测。结果4只病鸡ALV-J特异性PCR检测和泄殖腔拭子ALV-J ELISA抗原检测全部为阳性;间接ELISA检测血清抗体,有3只鸡呈阴性,1只鸡为阳性。血清学检测和PCR检测表明,抽检病例为血管瘤型J亚群禽白血病,并且鸡群中既存在先天感染或早期感染情况,也存在后天感染的现象。 展开更多
关键词 蛋鸡 J亚群禽白血病 血清学检测 pcr诊断
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环形泰勒虫裂殖体表面蛋白基因PCR诊断方法的建立 被引量:10
8
作者 郑进峰 罗金 +6 位作者 谢俊仁 田美媛 袁小松 王芳芳 郭锦霞 李奎 刘光远 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第1期47-51,共5页
为寻求一种快速灵敏的环形泰勒虫病PCR检测方法,基于环形泰勒虫裂殖体表面蛋白(Theirelia annulata surface protein,TaSP)基因序列保守区设计特异性引物,通过PCR技术扩增出该基因长为393bp的高免疫原性区片段。用该引物对环形泰勒虫、... 为寻求一种快速灵敏的环形泰勒虫病PCR检测方法,基于环形泰勒虫裂殖体表面蛋白(Theirelia annulata surface protein,TaSP)基因序列保守区设计特异性引物,通过PCR技术扩增出该基因长为393bp的高免疫原性区片段。用该引物对环形泰勒虫、中华泰勒虫、瑟式泰勒虫、尤氏泰勒虫、吕氏泰勒虫、绵羊泰勒虫、马泰勒虫、驽巴贝斯虫、牛巴贝斯虫基因组模板进行特异性试验,对环形泰勒虫基因组模板进行梯度稀释后扩增,以确定试验的敏感性,同时用本试验建立的方法与常规显微镜镜检方法对150份血清样品进行检测。特异性试验结果显示,在被检测的9个样本中,只有环形泰勒虫基因组模板中扩增出了符合大小的特异核苷酸片段;敏感性试验结果表明,PCR对环形泰勒虫的扩增效率可达到10-10;通过对150份血清样品的检测,并与血涂片方法进行比较,结果显示PCR方法具有特异性强、敏感度高等特点,适用于牛环形泰勒虫病的检测。 展开更多
关键词 环形泰勒虫 环形泰勒虫裂殖体表面蛋白(TaSP)基因 pcr诊断方法
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基于专利分析的肿瘤基因PCR诊断技术研究 被引量:2
9
作者 赵蕴华 袁芳 +2 位作者 傅俊英 李沛 周肖贝 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第1期181-186,共6页
肿瘤目前成为人类健康和生命的重要危胁,肿瘤基因诊断是对肿瘤的各种原癌基因、抑癌基因进行检测,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术是目前临床基因诊断应用最广泛的诊断技术,具有普及率高、特异性好、简便快捷等特点。... 肿瘤目前成为人类健康和生命的重要危胁,肿瘤基因诊断是对肿瘤的各种原癌基因、抑癌基因进行检测,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术是目前临床基因诊断应用最广泛的诊断技术,具有普及率高、特异性好、简便快捷等特点。肿瘤基因PCR诊断技术可以用于已知基因突变的检测,快速了解突变状态,有效制定治疗方案,为肿瘤患者带来福音。本研究主要基于专利数据,对肿瘤基因PCR诊断技术进行分析,探讨了全球与中国在肿瘤基因PCR诊断技术领域的发展现状与趋势。在Innography数据库共检索到PCR技术相关专利16,939件,专利家族6,285件。在肿瘤基因PCR诊断技术领域中,荧光定量PCR技术占比较大,约占肿瘤基因PCR诊断技术总量的三分之一。从技术技术生命周期来看,肿瘤基因PCR诊断技术目前仍处在高速发展阶段。美国是肿瘤基因PCR诊断技术的发展领先国家。该技术的主要来源国为美国,全球42.09%的专利来自美国,同时美国也是同族专利的主要分布地区。在肿瘤基因PCR诊断技术领域,排名前15位的顶尖机构中,来自美国的机构有7所。中国在肿瘤基因PCR诊断技术领域起步较晚,但发展迅速,在该技术领域申请的专利数量仅次于美国。中国申请的肿瘤基因PCR诊断技术的专利绝大多数都只在中国进行专利保护,并没有布局全球市场的意愿。 展开更多
关键词 pcr诊断 肿瘤 基因 专利
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羊猝狙的多重PCR诊断及病原分离株生物学特性试验 被引量:3
10
作者 李生庆 张西云 +6 位作者 黄荣 刘怀新 河生德 祁果 胡国元 王亭亭 李积良 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第10期52-54,58,共4页
从送检羊病料中分离到不同产毒能力的11株疑似产气荚膜梭菌菌株,对分离株进行了形态、菌落特性及产毒能力的观察、分析,并通过血清中和试验,胰酶消化试验进行了血清型鉴定;参照Gen Bank文库相关数据,自行设计了产气荚膜梭菌α,β,ε三... 从送检羊病料中分离到不同产毒能力的11株疑似产气荚膜梭菌菌株,对分离株进行了形态、菌落特性及产毒能力的观察、分析,并通过血清中和试验,胰酶消化试验进行了血清型鉴定;参照Gen Bank文库相关数据,自行设计了产气荚膜梭菌α,β,ε三种毒素的特异性引物,对其中两株产毒性能良好(1000 MLD/m L),溶血特性明显的菌株利用多重PCR进行分型鉴定,分离菌株海F、海H及标准株(721株)均扩增出大小为325 bp的α毒素条带及236 bp的β毒素条带,无ε毒素,结合实验室诊断及多重PCR鉴别诊断结果,确定此次疫情为C型产气荚膜梭菌引起的羊猝狙。本试验的研究为羊猝狙的快速诊断、流行病学调查提供了科学依据,为建立产气荚膜梭菌多重PCR鉴定诊断方法奠定了基础。 展开更多
关键词 羊猝狙 病原分离 多重pcr诊断
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荧光PCR诊断猪流行性腹泻病毒与猪轮状病毒混合感染病例 被引量:3
11
作者 凌洪权 黎朝燕 +10 位作者 曾政 杨泽林 梁望旺 孙燕 骆璐 谢建华 蔺露 董春霞 黄恒 钟小艳 周琼 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第8期83-84,共2页
猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PRV)足3种引起猪病毒性腹泻的重要病原。该3种病毒既可单独感染,也可混合感染,
关键词 猪流行性腹泻病毒 猪轮状病毒 感染病例 混合感染 pcr诊断 猪传染性胃肠炎病毒 荧光 病毒性腹泻
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新疆和静县部分地区散养户焉耆马梨形虫病的PCR诊断 被引量:5
12
作者 呼尔查 哈西巴特 +2 位作者 李永畅 席耐 巴音查汗 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第10期42-44,共3页
马梨形虫病是寄生于马属动物(马、斑马、驴和骡)红细胞内的通过蜱传播的血液原虫病,目前已发现的有马泰勒虫和驽巴贝斯虫两种。被梨形虫感染的马属动物发病后出现发热、皮下淋巴结肿大、贫血、黄疸等主要症状,降低动物的劳动力,偶尔... 马梨形虫病是寄生于马属动物(马、斑马、驴和骡)红细胞内的通过蜱传播的血液原虫病,目前已发现的有马泰勒虫和驽巴贝斯虫两种。被梨形虫感染的马属动物发病后出现发热、皮下淋巴结肿大、贫血、黄疸等主要症状,降低动物的劳动力,偶尔会出现死亡病例。该病常出现在3月底至5月中旬,6月至8月份散发与该地区的蜱虫活动密切相关。 展开更多
关键词 马梨形虫病 pcr诊断 马属动物 和静县 血液原虫病 焉耆马 贝斯 淋巴结肿大 梨形 蜱虫
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肉鸡骨髓细胞瘤病的PCR诊断和病理学研究 被引量:3
13
作者 王金玲 赵振华 +1 位作者 杨玉莹 张二芹 《中国家禽》 北大核心 2004年第19期10-11,14,共3页
对曾感染ALV-J的某肉种鸡场的5只肉鸡进行了PCR检测和病理学研究。结果:5只鸡中有3例PCR呈阳性,5只鸡的骨髓、肝、脾、肾、肺、十二指肠固有膜等组织中均有不同数量的局灶性或单个散在的髓细胞样瘤细胞,瘤细胞胞浆内含有大量圆球形嗜酸... 对曾感染ALV-J的某肉种鸡场的5只肉鸡进行了PCR检测和病理学研究。结果:5只鸡中有3例PCR呈阳性,5只鸡的骨髓、肝、脾、肾、肺、十二指肠固有膜等组织中均有不同数量的局灶性或单个散在的髓细胞样瘤细胞,瘤细胞胞浆内含有大量圆球形嗜酸性颗粒,表明该鸡场仍有骨髓细胞瘤病的存在。其中2只鸡还同时有增生性肉芽肿,提示有大肠杆菌的混合感染。 展开更多
关键词 病理学研究 瘤细胞 pcr诊断 胞浆 局灶性 增生性 骨髓细胞瘤病 肉鸡 鸡场 ALV-J
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开产蛋鸡传染性喉气管炎的PCR诊断及防治 被引量:3
14
作者 郭小参 崔保安 +4 位作者 杨明凡 陈红英 管倩 吕晓丽 王东方 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第9期100-101,共2页
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 pcr诊断 防治 产蛋 呼吸道传染病 呼吸困难 病理剖检 表面附着
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猪增生性肠炎的PCR诊断 被引量:2
15
作者 郑新添 杨小燕 +3 位作者 陈杰 戴爱玲 陈星星 李晓华 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第1期117-118,共2页
关键词 猪增生性肠炎 pcr诊断 培养技术 肠道疾病 内寄生菌 传染性 养猪业 INT
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生猪猪衣原体感染的PCR诊断 被引量:3
16
作者 李润成 马攀 李淼 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第9期47-48,共2页
衣原体是介于细菌和病毒之间的一种微生物,猪衣原体可引起生猪结膜炎、肠炎和肺炎。2015年4月湖南省益阳某规模猪场,约40%的120-160日龄育肥猪出现眼结膜发红、流泪等症状,笔者采用PCR方法检测了6份鼻拭子和2份眼睛分泌物拭子,并进行了... 衣原体是介于细菌和病毒之间的一种微生物,猪衣原体可引起生猪结膜炎、肠炎和肺炎。2015年4月湖南省益阳某规模猪场,约40%的120-160日龄育肥猪出现眼结膜发红、流泪等症状,笔者采用PCR方法检测了6份鼻拭子和2份眼睛分泌物拭子,并进行了药物防治,报告如下。 展开更多
关键词 衣原体感染 pcr诊断 生猪 pcr方法 猪衣原体 规模猪场 药物防治 微生物
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广西猪增生性肠炎的PCR诊断 被引量:2
17
作者 兰家暖 肖爱欢 +3 位作者 谢丽华 侯韶毅 陈云霞 黄伟坚 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第11期13-15,共3页
关键词 猪增生性肠炎 pcr诊断 广西 接触性传染病 顽固性腹泻 猪回肠炎 亚洲地区 饲料报酬
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梅毒的PCR诊断与梅毒螺旋体基因分型研究进展 被引量:3
18
作者 林文生 杨文林 杨健 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第19期2597-2599,共3页
关键词 梅毒螺旋体 pcr诊断 基因分型 梅毒血清学试验 实验室诊断方法 性传播疾病 公共卫生问题 苍白螺旋体
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猪支原体肺炎PCR诊断试剂盒的研制 被引量:2
19
作者 杨莉 余波 +7 位作者 史开志 杨茂生 吴位珩 陈长亮 黄开荣 袁灿 杨潇 魏赐开 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第8期99-101,共3页
为了研制猪支原体肺炎PCR诊断试剂盒,试验根据GenBank中猪肺炎支原体OmpA基因的序列,设计1对特异性引物,通过对PCR反应条件进行优化,并对研制出的猪支原体肺炎PCR诊断试剂盒的特异性、敏感性、保存期进行了检测,同时检测了58份临床样本... 为了研制猪支原体肺炎PCR诊断试剂盒,试验根据GenBank中猪肺炎支原体OmpA基因的序列,设计1对特异性引物,通过对PCR反应条件进行优化,并对研制出的猪支原体肺炎PCR诊断试剂盒的特异性、敏感性、保存期进行了检测,同时检测了58份临床样本。结果表明:该PCR检测试剂盒的最低检测量为0.25 ng/L;能够检测猪肺炎支原体标准株和猪肺炎支原体活疫苗168株,而大肠杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、鸡毒支原体、鸡肠炎沙门杆菌的扩增结果均为阴性;-20℃至少可保存12个月,且重复性良好;对58份临床样本的检测结果与细菌学和生化检验结果相一致。说明该试剂盒能够对猪肺炎支原体的临床样品进行快捷、灵敏、准确的检测。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 pcr诊断试剂盒 OmpA基因
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用PCR诊断不同虫荷量的大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的价值 被引量:7
20
作者 王建成 安亦军 郭增柱 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2003年第3期155-158,共4页
目的 评价在不同虫荷量条件下用 PCR诊断大鼠卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)的价值。 方法 将 PCP大鼠随机分为药物治疗组及未治疗组 ,测定其肺虫荷量 ,收集其支气管灌洗液 (BAL F)和血清标本 ,用 PCR和半套式 (Sn) PCR检测标本中的卡氏肺... 目的 评价在不同虫荷量条件下用 PCR诊断大鼠卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)的价值。 方法 将 PCP大鼠随机分为药物治疗组及未治疗组 ,测定其肺虫荷量 ,收集其支气管灌洗液 (BAL F)和血清标本 ,用 PCR和半套式 (Sn) PCR检测标本中的卡氏肺孢子虫基因 ,比较 PCR和环六亚甲基四胺银 (GMS)染色结果 ,及与病鼠肺虫荷量的关系。 结果 虫荷量高的未治疗组病鼠的 BAL F标本 PCR、Sn PCR及 GMS染色阳性率分别为 10 0 %、10 0 %和 92 .6 % ,差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;而虫荷量低的治疗组的 PCR(88.1% )、Sn PCR(94 .9% )阳性率均显著高于 GMS染色镜检阳性率 (30 .5 % ) (P<0 .0 5 )。肺虫荷量 >5 0 0个 /mg肺的 PCP大鼠 ,血清 PCR阳性率显著高于≤ 5 0 0者 (分别为 4 2 .9%和 1.7% )。 结论 PCR可用于虫株负荷量较低时的 PCP诊断 ,对判断 PCP病情及疗效考核亦有一定的帮助。 展开更多
关键词 pcr诊断 大鼠 卡氏肺孢子虫肺炎 肺虫荷量 聚合酶链反应
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