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β-细辛醚对PC12细胞和乳鼠皮层神经细胞形态学及细胞活力的影响 被引量：14
1
作者 陈奕芝 方永奇 +2 位作者 王绮雯 谢宇辉 匡忠生 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期317-321,共5页
目的:观察β-细辛醚对PC12细胞和乳鼠皮层神经细胞形态学及细胞活力的影响。方法:用免疫细胞化学方法检测皮层神经细胞特异性标志物NSE、GFAP的表达;在体外将不同浓度β-细辛醚与PC12细胞和皮层神经细胞各作用24 h,用相差显微镜观察细... 目的:观察β-细辛醚对PC12细胞和乳鼠皮层神经细胞形态学及细胞活力的影响。方法:用免疫细胞化学方法检测皮层神经细胞特异性标志物NSE、GFAP的表达;在体外将不同浓度β-细辛醚与PC12细胞和皮层神经细胞各作用24 h,用相差显微镜观察细胞形态的改变,并用MTT比色法检测细胞活力的变化。结果:原代培养的乳鼠皮层神经细胞大多数NSE呈阳性表达,少量GFAP呈阳性表达;β-细辛醚与PC12细胞作用24 h,低浓度β-细辛醚(7.5、15、30、60μg/ml)有促增殖作用,高浓度β-细辛醚(120、140、2480μg/ml)则可抑制其增殖,且随药物浓度的增加而增强;β-细辛醚与皮层神经细胞作用24 h,7.5、15、30、60、120μg/mlβ-细辛醚对其细胞形态和活力无明显影响,240μg/mlβ-细辛醚对其有促增殖作用,而480μg/mlβ-细辛醚对其则有损伤作用。结论:β-细辛醚可能有抗肿瘤和保护神经细胞的作用。 展开更多
关键词 pci2细胞 皮层神经细胞 MTT法 Β-细辛醚 石菖蒲
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抗霉素A抑制PC12细胞线粒体COⅡ基因表达 被引量：6
2
作者 邱小忠 欧阳钧 +5 位作者 余磊 张黎声 陆云涛 陈瑗 周玫 钟世镇 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期167-170,共4页
采用不同浓度的抗霉素 A(一种能提高线粒体内活性氧水平的线粒体抑制剂 )处理 PC12细胞 ,利用血细胞计数、台盼蓝排除法以及 MTT法进行细胞活性检测。实验证明 ,当抗霉素 A的浓度达到 15 0 μmol/L时 ,PC12细胞开始出现损伤 ;进一步采用... 采用不同浓度的抗霉素 A(一种能提高线粒体内活性氧水平的线粒体抑制剂 )处理 PC12细胞 ,利用血细胞计数、台盼蓝排除法以及 MTT法进行细胞活性检测。实验证明 ,当抗霉素 A的浓度达到 15 0 μmol/L时 ,PC12细胞开始出现损伤 ;进一步采用 RNA斑点杂交和 RT-PCR技术分析发现抗霉素 A所致的细胞损伤和线粒体内细胞色素 C氧化酶亚基 (CO )基因表达下降有关。本研究证实线粒体介导的活性氧的产生能早期诱导线粒体细胞色素氧化酶的活性的改变 ,逐步引起 展开更多
关键词 抗霉素A pci2细胞 线粒体 COⅡ 基因表达 细胞色素C氧化酶亚基Ⅱ 活性氧 损伤
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氯化钴诱导PC12细胞凋亡的分子机制 被引量：6
3
作者 曾季平 王立祥 +5 位作者 胡晓燕 杨玲玲 孔峰 吴伟芳 陈蔚文 崔行 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期193-195,共3页
目的确定氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的分子机制。方法500μmolLCoCl2诱导PC12细胞24h后,检测活性氧(ROS)生成量的变化以及抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)、二硫代苏糖醇(DTT)对细胞存活率和ROS生成量的影响;琼脂糖凝胶电泳检测NAC、DTT... 目的确定氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的分子机制。方法500μmolLCoCl2诱导PC12细胞24h后,检测活性氧(ROS)生成量的变化以及抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)、二硫代苏糖醇(DTT)对细胞存活率和ROS生成量的影响;琼脂糖凝胶电泳检测NAC、DTT对CoCl2诱导PC12细胞DNA片段化的影响;利用RTPCR法检测凋亡相关基因bclxl和bax在PC12细胞调亡过程中的表达及NAC、DTT对基因表达的影响;化学发光法检测NAC、DTT对Caspase3表达的作用。结果在CoCl2诱导PC12细胞凋亡中,ROS生成量明显上升,为正常时的2.92倍;NAC、DTT可提高细胞存活率,由53.1%上升为94.8%和92.3%(P<0.01),并有效抑制ROS的生成,为正常时的24.2%和82.1%(P<0.01);同时抑制DNA片段化的发生。bclxl在细胞凋亡过程中表达明显下降,bax表达无明显变化;NAC和DTT可使bclxl的表达明显上升。Caspase3在细胞凋亡中被激活,NAC、DTT可抑制Caspase3的表达(P<0.01)。结论ROS介导了CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,这一过程与抑制bclxl表达,激活Caspase3有关。 展开更多
关键词 氯化钴 pci2细胞 细胞凋亡 活性氧 基因bcl-xl
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五味子乙素和五味子醇甲对PC12细胞氧化损伤的保护作用 被引量：36
4
作者 王蕾 唐勇 黄山 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第47期64-67,F0003,共5页
目的:观察五味子乙素和五味子醇甲对过氧化氢(H2O2)PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法:实验于2005-08/2006-07在首都医科大学附属北京中医医院中心实验室完成。①PC12细胞培养在RPMI1640培养液中,加入2.5,5,10,20μmol/L等不同浓度的五... 目的:观察五味子乙素和五味子醇甲对过氧化氢(H2O2)PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法:实验于2005-08/2006-07在首都医科大学附属北京中医医院中心实验室完成。①PC12细胞培养在RPMI1640培养液中,加入2.5,5,10,20μmol/L等不同浓度的五味子乙素和五味子醇甲,与细胞培养24h,然后加入0.1,0.2,0.3,0.5mmol/L不同浓度过氧化氢(H2O2)溶液,37℃作用30min。模型组细胞只加入H2O2;正常对照组只加入等量的培养基。②采用倒置显微镜观察PC12细胞形态学变化,四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞生存率,用自动生化分析仪测定乳酸脱氢酶的活性,按试剂盒说明书用慧星法测定细胞内DNA损伤。结果:①五味子乙素及五味子醇甲对PC12细胞形态学的影响:倒置相差显微镜观察到PC12细胞被H2O2损伤后,细胞形态学发生变化,表现为胞体肿胀、突起断裂、细胞膜溶解等。经五味子乙素及五味子醇甲处理后细胞,状态明显改善,细胞数目较多,而且细胞形态较完整。②五味子乙素及五味子醇甲对细胞生存率的影响:PC12细胞经0.1,0.2,0.3,0.5mmol/L不同浓度H2O2处理30min后,与正常对照组相比,四甲基偶氮唑盐法测定其生存率,分别降低了4%,13%,40%,57%,(P<0.05或P<0.01)。不同浓度的五味子乙素及五味子醇甲(2.5～20μmol/L)均能提高细胞的生存率,并呈浓度依赖关系,浓度为5,10,20μmol/L时,与模型组比较,具有明显的差异(P<0.05或P<0.01),特别是10μmol/L五味子乙素及五味子醇甲的作用较强。③五味子乙素及五味子醇甲对细胞内乳酸脱氢酶和DNA损伤的影响:用0.3mmol/LH2O2处理细胞后细胞内乳酸脱氢酶漏出率高于正常对照组(P<0.01)。大量的DNA被损伤,与正常对照组比较,差异有显著性(P<0.01)。细胞与10.0μmol/L五味子乙素及五味子醇甲作用后发现细胞内乳酸脱氢酶漏出率低于模型组(P均<0.01)。DNA损伤明显抑制,与模型组比较,差异有显著性(P均<0.01)。结论:五味子乙素及五味子醇甲均能有效地减轻H2O2对神经细胞的氧化损伤作用。推测保护作用机制是通过清除氧自由基,减轻其对DNA的损伤等方面实现的。 展开更多
关键词 五味子素 五味子 pci2细胞/药物作用 过氧化氢
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蒺藜总皂苷对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡的保护作用 被引量：7
5
作者 姜恩平 李红 +1 位作者 纪影实 杨世杰 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期183-186,共4页
目的:探讨蒺藜总皂苷(GSTT)对过氧化氢(H2O2)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)凋亡的保护作用及其机制。方法:PC12细胞分为对照组、模型组及蒺藜总皂苷高(GSTT1)、低(GSTT2)剂量组。用H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细... 目的:探讨蒺藜总皂苷(GSTT)对过氧化氢(H2O2)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)凋亡的保护作用及其机制。方法:PC12细胞分为对照组、模型组及蒺藜总皂苷高(GSTT1)、低(GSTT2)剂量组。用H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细胞活性,流式细胞仪检测PC12细胞亚二倍体峰比率及线粒体膜电位的变化,免疫组织化学方法检测与凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax。结果:与模型组比较,蒺藜总皂苷组随着剂量的增加PC12细胞存活率提高(P<0.001),凋亡比率下降(P<0.01),线粒体膜电位回升(P<0.01),Bcl-2表达增加(P<0.05),而Bax的表达降低(P<0.05)。结论:蒺藜总皂苷可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与抑制线粒体途径的细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 蒺藜总皂苷 pci2细胞 细胞凋亡
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锰对PC12细胞毒性作用的研究 被引量：6
6
作者 李妍 陈景元 +3 位作者 蔡同建 郑刚 杜可军 骆文静 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期4-6,共3页
目的研究不同剂量的锰（Mn）对PC12细胞生长增殖的影响。方法体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞。以100，900μmol／LMnCl2染毒后进行四唑盐比色实验（MTT）观察MnCl2对细胞的抑制作用，TUNEL法观察细胞凋亡，Western blot检测α-共核蛋... 目的研究不同剂量的锰（Mn）对PC12细胞生长增殖的影响。方法体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞。以100，900μmol／LMnCl2染毒后进行四唑盐比色实验（MTT）观察MnCl2对细胞的抑制作用，TUNEL法观察细胞凋亡，Western blot检测α-共核蛋白（α-SYN）表达情况。结果MTT结果显示100—900μmol／L MnCl2对细胞的生长增殖有显著的抑制作用（P〈0．01）。TUNEL染色结果显示MnCl2处理组TUNEL阳性细胞增多（P〈0．05）。Westem blot结果显示与对照组相比，100、300、500μmol／L MnCl2组α-SYN表达水平分别升高1．8、4．5、7．3倍（P〈0．05）。结论一定剂量的MnCl2对PCl2细胞的生长增殖有明显的抑制作用，这一作用可能是通过诱导胞内α-SYN表达增高实现的。提示预防、阻止α-SYN在细胞中的聚集可能会降低Mn对多巴胺能神经细胞的损伤。 展开更多
关键词 MnCl2 大鼠嗜铬细胞瘤pci2细胞 凋亡 Α-共核蛋白
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灵孢多糖对MPP^+损伤PC12细胞的保护作用 被引量：5
7
作者 杨海华 李毅 +4 位作者 张丹桃 徐评议 刘焯霖 朱雯 骆飞飞 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期393-396,共4页
【目的】观察灵孢多糖(GLPS)对甲基-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导损伤的PC12细胞的保护作用。【方法】将MPP+或GLPS加入体外培养的PC12细胞中,建立多巴胺能神经元损伤模型,用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞活力的变化;以乳酸脱氢酶(LDH)检测... 【目的】观察灵孢多糖(GLPS)对甲基-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导损伤的PC12细胞的保护作用。【方法】将MPP+或GLPS加入体外培养的PC12细胞中,建立多巴胺能神经元损伤模型,用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞活力的变化;以乳酸脱氢酶(LDH)检测法检测培养上清液中LDH水平的改变;通过酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学法检测TH阳性细胞数及蛋白的表达。【结果】MPP+处理48h后,细胞活力降至对照组的52%,经GLPS(100、200、300!g/mL)预处理后,细胞活力明显提高,分别为65%,75%,79%(P<0.05)。MPP+处理48h后,上清液中LDH水平较对照组明显提高,经不同浓度的GLPS预处理后,上清中LDH水平有所下降(P<0.05),且TH阳性细胞数及表达强度明显高于MPP+组。【结论】灵孢多糖对MPP+诱导损伤的PC12细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 灵孢多糖 pci2细胞 帕金森病 1-甲基-4苯基吡啶离子
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神经再生素激活PC12细胞ERK1/2的实验研究 被引量：7
8
作者 强亮 顾星星 丁斐 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期369-372,共4页
本实验初步探讨了神经再生素 ( NRF)作用于 PC12细胞的信号传导途径。采用 MTT法检测 NRF对无血清培养的PC12细胞存活率的影响 ;用磷酸化的 Elk单克隆抗体 ,通过 Western blot法观察 NRF的不同浓度 ( 10、10 0、10 0 0 ng/ m l)及不同... 本实验初步探讨了神经再生素 ( NRF)作用于 PC12细胞的信号传导途径。采用 MTT法检测 NRF对无血清培养的PC12细胞存活率的影响 ;用磷酸化的 Elk单克隆抗体 ,通过 Western blot法观察 NRF的不同浓度 ( 10、10 0、10 0 0 ng/ m l)及不同作用时间 ( 0 min、15 min、3 0 min、1h、2 h)对无血清培养的 PC12细胞 ERK1/ 2活性的影响 ;还运用 MEK1/ 2阻断剂 U0 12 6,观察NRF激活 ERK1/ 2是否需要其上游信号蛋白 MEK1/ 2的激活。结果表明 ,NRF作用于无血清培养的 PC12细胞 ,可以激活ERK1/ 2 ,存在明显的剂量效应关系和时间依赖作用 ,在 10 0 0 ng/ ml浓度下最大 ,作用 2 h时达峰值 ;U0 12 6作用后 ,可抑制 NRF作用于 PC12细胞引起的 ERK1/ 2的激活。由此可见 ,NRF对无血清培养的 PC12细胞具有保护作用 ,可能通过激活 ERK1/ 2磷酸化级联途径来介导这些作用。 展开更多
关键词 神经再生素 ERKl/2 U0126 pci2细胞 信号传导途径 细胞培养
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原花青素对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞周期紊乱的保护作用 被引量：3
9
作者 谢朝阳 梅寒芳 +2 位作者 祝其锋 吴斌华 陈小芳 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1197-1200,共4页
目的观察原花青素(PAC)对β-淀粉样肽(25-35)(Aβ25-35)诱导体外血清饥饿培养的PC12细胞周期紊乱与凋亡的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用血清饥饿培养使PC12细胞同步于G0期,PAC预处理后加入Aβ25-35,通过流式细胞仪分析细... 目的观察原花青素(PAC)对β-淀粉样肽(25-35)(Aβ25-35)诱导体外血清饥饿培养的PC12细胞周期紊乱与凋亡的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用血清饥饿培养使PC12细胞同步于G0期,PAC预处理后加入Aβ25-35,通过流式细胞仪分析细胞周期与凋亡,RT-PCR和Western印迹从mRNA及蛋白水平检测p21、Cyclin D1、pRb和E2F1基因表达的变化。结果与Aβ25-35诱导组比较,PAC保护组S期细胞百分率明显减少,凋亡率明显降低(P<0.05);p21 mRNA和蛋白表达增加(P<0.05),Cyclin D1、E2F1 mRNA和Cyclin D1、pRb蛋白表达降低(P<0.05)。结论PAC对Aβ25-35诱导的PC12细胞周期紊乱与凋亡起保护作用,其机制可能与上调p21表达,下调Cyclin D1、pRb、E2F1表达有关。 展开更多
关键词 原花青素 AΒ25-35 pci2细胞 细胞周期 基因表达
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MPP^+诱导PC12细胞氧化应激损伤的实验研究 被引量：4
10
作者 安丽凤 刘树民 +1 位作者 董杨 唐波 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2010年第11期2243-2245,共3页
目的:考察MPP+诱导PC12细胞氧化应激损伤作用,并探讨其机制。方法:以不同浓度、不同作用时间的MPP+作用于PC12细胞,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪测细胞凋亡率,紫外可见分光光度计测LDH、NO、NOS、MDA含量和SOD活性。结果:MPP+终浓度... 目的:考察MPP+诱导PC12细胞氧化应激损伤作用,并探讨其机制。方法:以不同浓度、不同作用时间的MPP+作用于PC12细胞,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪测细胞凋亡率,紫外可见分光光度计测LDH、NO、NOS、MDA含量和SOD活性。结果:MPP+终浓度达到300μmol/L时,作用48h后可明显降低PC12细胞存活率(P<0.001),提高细胞凋亡率(P<0.01),增强LDH、NO、NOS、MDA的含量和降低SOD活性,有统计学意义(P<0.05)。结论:MPP+能诱导PC12细胞氧化应激损伤,其作用机制可能是通过增加PC12细胞NO和NOS含量,引起胞内SOD的活性降低,从而引起脂质过氧化物增加来损伤多巴胺能神经细胞的。 展开更多
关键词 MPP+ pci2细胞 氧化应激
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阿魏酸钠对H_2O_2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用的探讨 被引量：10
11
作者 曲喜英 祝其锋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期553-556,共4页
目的　探讨阿魏酸钠 (sodiumferulate ,SF)对H2 O2 引起的PC12细胞凋亡保护作用的可能机制。方法　在H2 O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上 ,采用MTT比色分析测细胞存活率 ,RT PCR检测 par 4和caspase 3基因mRNA表达 ,Westernblot检测Par ... 目的　探讨阿魏酸钠 (sodiumferulate ,SF)对H2 O2 引起的PC12细胞凋亡保护作用的可能机制。方法　在H2 O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上 ,采用MTT比色分析测细胞存活率 ,RT PCR检测 par 4和caspase 3基因mRNA表达 ,Westernblot检测Par 4蛋白表达和Caspase 3P2 0活性片段 ,用比色法检测Caspase 3相对活性。 结果　不同剂量SF预处理 1h可提高PC12细胞的存活率 ,降低 par 4和cas pase 3的mRNA表达以及Par 4的蛋白表达 ,Caspase 3P2 0活性片段和Caspase 3相对活性减少 ,但变化不明显。结论　SF可剂量依赖性地对抗H2 O2 的神经毒性作用 ,其机制可能与凋亡基因 par 4表达有关 ,与Caspase 展开更多
关键词 阿魏酸钠 H2O2 pci2细胞 凋亡 PAR-4 CASPASE-3
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14-3-3蛋白在PC12细胞的分布及MPP^+对其表达的影响 被引量：3
12
作者 陈小武 孙圣刚 +2 位作者 程道宾 田有勇 王岚 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期399-401,I0001,共4页
目的探讨14-3-3蛋白在PC12细胞中的分布及其与MPP+诱导PC12细胞死亡的关系。方法用免疫荧光染色检测14-3-3蛋白的分布,并分别用免疫印迹技术与MTT法检测MPP+,对14-3-3蛋白表达及细胞活力的影响。结果PC12细胞中β、γ、ε、ζ、η和θ... 目的探讨14-3-3蛋白在PC12细胞中的分布及其与MPP+诱导PC12细胞死亡的关系。方法用免疫荧光染色检测14-3-3蛋白的分布,并分别用免疫印迹技术与MTT法检测MPP+,对14-3-3蛋白表达及细胞活力的影响。结果PC12细胞中β、γ、ε、ζ、η和θ亚型免疫反应阳性。14-3-3蛋白表达随着MPP+处理的时间延长呈下降趋势,在6h变化不明显,12h显著下降(P<0.05),到48h后14-3-3蛋白的减少极其显著(P<0.01)。PC12细胞的存活率也呈现同样的变化趋势。结论MPP+引起PC12细胞的死亡可能与细胞内14-3-3蛋白含量的下降有关。 展开更多
关键词 14—3—3蛋白 MPP^+ pci2细胞 帕金森病
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醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞缺氧损伤的保护作用 被引量：4
13
作者 杨牧祥 田元祥 +3 位作者 徐华洲 赵建新 于文涛 王少贤 《中西医结合心脑血管病杂志》 2004年第11期651-652,共2页
目的　探讨醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞缺氧损伤的影响。方法　采用血清药理学方法 ,体外培养PC12细胞 ,用Na2 S2 O4产生缺氧损伤 ,观察PC12细胞形态学、MTT法细胞活力、乳酸脱氢酶LDH活性的变化。结果　醒脑启智胶囊药物血清对PC1... 目的　探讨醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞缺氧损伤的影响。方法　采用血清药理学方法 ,体外培养PC12细胞 ,用Na2 S2 O4产生缺氧损伤 ,观察PC12细胞形态学、MTT法细胞活力、乳酸脱氢酶LDH活性的变化。结果　醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞的形态改变具有明显的保护作用 ,可增强细胞活力 ,降低LDH活性。结论　醒脑启智胶囊药物血清能明显减轻PC12细胞的缺氧损伤 ,并呈现一定的剂量依赖关系。 展开更多
关键词 缺氧损伤 醒脑启智胶囊 药物血清 PC12细胞 保护作用 细胞活力 LDH pci2细胞 血清药理学方法 MTT法
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星形胶质细胞条件培养液对tbOOH致PC12细胞凋亡的抑制作用 被引量：3
14
作者 莫永炎 邢飞跃 +2 位作者 张宝 陈瑗 姜勇 《第一军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期998-1000,共3页
目的探讨星形胶质细胞条件培养液对活性氧叔丁基脂氢过氧化物tbOOH诱导的PC12细胞凋亡的影响。方法以分离、纯化的SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞制备的条件培养液培养tbOOH应激的PC12细胞,采用荧光显微镜和透射电镜形态观察细胞凋亡;用流... 目的探讨星形胶质细胞条件培养液对活性氧叔丁基脂氢过氧化物tbOOH诱导的PC12细胞凋亡的影响。方法以分离、纯化的SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞制备的条件培养液培养tbOOH应激的PC12细胞,采用荧光显微镜和透射电镜形态观察细胞凋亡;用流式细胞术测定细胞凋亡率的变化;用巴比妥酸法评估细胞内丙二醛含量的变化。结果tbOOH可诱导PC12细胞凋亡,而星形胶质细胞条件培养液可降低其凋亡;同时,巴比妥酸法显示星形胶质细胞条件培养液可显著性降低PC12细胞丙二醛含量(P<0.05)。结论星形胶质细胞条件培养液有提高PC12细胞抗氧化能力,可抑制活性氧tbOOH诱导的神经细胞凋亡。 展开更多
关键词 星形胶质细胞条件培养液/抗氧化作用 叔丁基脂氢过氧化物 pci2细胞/凋亡 活性氧种
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线粒体凋亡途径在硫酸黏菌素致PC12细胞凋亡中的作用 被引量：2
15
作者 蒋红 李继昌 +1 位作者 王宏军 林巍 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期75-79,F0003,共6页
探讨线粒体凋亡途径在硫酸黏菌素诱导PC12细胞凋亡中作用。取对数生长期PC12细胞,用含0、62.5、125、250μg.mL-1硫酸黏菌素DMEM培养液,作用24 h,采用Hoechst33258荧光染色法检测PC12细胞凋亡,Western blot法检测细胞色素C(Cyt-C)、Bax... 探讨线粒体凋亡途径在硫酸黏菌素诱导PC12细胞凋亡中作用。取对数生长期PC12细胞,用含0、62.5、125、250μg.mL-1硫酸黏菌素DMEM培养液,作用24 h,采用Hoechst33258荧光染色法检测PC12细胞凋亡,Western blot法检测细胞色素C(Cyt-C)、Bax、Bcl-2蛋白表达含量,试剂盒检测Caspase-3活性。与对照组相比,125、250μg.mL-1硫酸黏菌素剂量组细胞PC12细胞Cyt-C、Bax蛋白表达量、Caspase-3活性显著升高(P<0.01);Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.01),具有剂量-效应关系。说明线粒体途径介导PC12细胞凋亡是硫酸黏菌素神经毒性作用机制之一。 展开更多
关键词 硫酸黏菌素 pci2细胞 细胞凋亡 线粒体途径
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葛根总黄酮对过氧化氢所致PC_(12)细胞氧化损伤的防护(英文) 被引量：5
16
作者 宋淑珍 房征宇 田亚平 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第31期171-173,共3页
背景:葛根具有防治高血压、心脏病、糖尿病和血液病等多种生物学功效,其提取物对S180肉瘤及Lewis肺癌的增殖有一定抑制作用。目的:观察葛根总黄酮对嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞生长的影响和抗过氧化氢所致细胞氧化损伤的防护作用。设计:完... 背景:葛根具有防治高血压、心脏病、糖尿病和血液病等多种生物学功效,其提取物对S180肉瘤及Lewis肺癌的增殖有一定抑制作用。目的:观察葛根总黄酮对嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞生长的影响和抗过氧化氢所致细胞氧化损伤的防护作用。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:解放军总医院生化科和老年病研究所。材料:葛根购自同仁堂药店,由本实验室用乙醇、乙酸乙酯按常规提取分离提纯葛根总黄酮,用理化方法和薄层色谱进行鉴定,定量测定提取物中葛根素含量为31.79%。四甲基偶氮唑盐(Sigma公司)。鲁米诺购自Sigma公司。抗氧化活性试剂用黄嘌呤氧化酶(Sigma公司)。PC12细胞为解放军总医院老年病研究所惠赠。方法:实验于2001-01/07在解放军总医院老年病研究所完成。①以20g/LDMEM细胞培养液(pH7.1～7.2)培养细胞。将培养细胞按随机抽签法分为2组:葛根总黄酮组和过氧化氢损伤+葛根总黄酮组,其中每组又根据葛根总黄酮的浓度平行分为5个质量浓度进行观察(0,1.0mg/L,10,100mg/L,1.0g/L),每组平行培养8孔,每孔100mL培养液(细胞数为1×109L-1),葛根总黄酮组于37℃条件下,加入葛根总黄酮培养72h;过氧化氢+葛根总黄酮组:在37℃条件下,加入葛根总黄酮培养48h后,再加入500mmol/L过氧化氢,继续培养24h。②用四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞活性;用Griess方法测定培养液中亚硝酸盐含量,用次黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶测定培养液中的超氧化物歧化酶活性,以观察葛根总黄酮对PC12细胞生长活性的调控;并外源性加入过氧化氢,观察葛根总黄酮对过氧化氢所致培养PC12细胞氧化损伤的防护作用;结果以抑制率表示[(空白A值-测定A值)/空白A值×100%],抑制率越高,说明培养液中清除O2-的能力越强。③数据间差异比较采用单因素方差分析。主要观察指标:葛根总黄酮对PC12细胞培养液中亚硝酸盐含量、超氧化物歧化酶活性、及细胞活性的影响。结果:①葛根总黄酮对PC12细胞活力的影响:1～10mg/L的葛根总黄酮对PC12细胞的生长无明显影响,100mg/L葛根总黄酮可促进PC12细胞的生长(P<0.05),当葛根总黄酮在培养液中的浓度增加至1.0g/L时,则表现出明显地抑制细胞生长效能(P<0.01)。培养液中葛根总黄酮浓度在1～100mg/L内可有效提高过氧化氢损伤组细胞的活力(P<0.05)。②葛根总黄酮对PC12细胞培养液清除O2-的影响:葛根总黄酮组和过氧化氢损伤+葛根总黄酮组清除O2-的能力均随着葛根总黄酮质量浓度的增加而逐渐升高(除外过氧化氢+葛根总黄酮组加入葛根总黄酮1mg/L时),具有明显量效关系。两组均在加入100mg/L和1g/L葛根总黄酮时PC12细胞培养液中超氧化物歧化酶活性明显高于未加入葛根总黄酮时(P<0.05～0.01)。③葛根总黄酮对PC12细胞亚硝酸盐的调控:低浓度(1～100mg/L)的葛根总黄酮使培养细胞亚硝酸盐生成减少,但培养液中葛根总黄酮浓度达1g/L时,亚硝酸盐生成量则增加。结论:①葛根总黄酮对培养的PC12细胞具有一定生长调控作用,低质量浓度(1～100mg/L)时促进细胞生长,高质量浓度(1g/L)时抑制细胞生长,但抗氧化能力最强。②在培养液中加入1～100mg/L的葛根总黄酮对过氧化氢所致PC12氧化损伤具有明显防护效能。 展开更多
关键词 葛根 黄酮类 pci2细胞/药物作用 超氧化物歧化酶
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β-淀粉样蛋白25-35片段诱导PC12细胞凋亡 被引量：4
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作者 罗蔓 谢瑞满 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期618-621,共4页
目的　探讨 β -淀粉样蛋白 2 5 - 35片段 (Aβ2 5-3 5)对体外培养的PC12细胞的毒性作用机制。方法　用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)代谢率检测 ,光镜吖啶橙荧光染色术 ,透射电镜以及流式细胞仪技术研究Aβ2 5-3 5损伤PC12细胞的途径。结果　用... 目的　探讨 β -淀粉样蛋白 2 5 - 35片段 (Aβ2 5-3 5)对体外培养的PC12细胞的毒性作用机制。方法　用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)代谢率检测 ,光镜吖啶橙荧光染色术 ,透射电镜以及流式细胞仪技术研究Aβ2 5-3 5损伤PC12细胞的途径。结果　用Aβ2 5-3 5处理PC12细胞 2 4h ,Aβ2 5-3 5剂量依赖性地引起PC12细胞的MTT代谢率减少 ,荧光染色及电镜观察发现经Aβ2 5-3 5处理的PC12细胞表现出凋亡细胞的特征 ,流式细胞仪检测发现 ,对照组 2 0 μmol/L及 5 0 μmol/L的Aβ2 5-3 5组PC12细胞的凋亡率分别为 0 .0 8%± 0 .0 1% ,14 .8%± 1.13% ,2 5 .9%± 2 .34%。 展开更多
关键词 pci2细胞 AΒ25-35 Β-淀粉样蛋白 PC12细胞 凋亡 MTT 诱导 代谢率 片段 发现
暂未订购
神经再生素对PC12细胞分化的影响 被引量：7
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作者 强亮 丁斐 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期235-240,共6页
目的　探索神经再生素 (nerveregenerationfactor,NRF)诱导PC12细胞神经元性分化的潜在能力。方法　以NGF为阳性对照 ,采用细胞培养方法 ,观察NRF在低血清的情况下 ,诱导PC12细胞发生的形态学改变 ;同时 ,使用荧光免疫细胞化学方法 ,观... 目的　探索神经再生素 (nerveregenerationfactor,NRF)诱导PC12细胞神经元性分化的潜在能力。方法　以NGF为阳性对照 ,采用细胞培养方法 ,观察NRF在低血清的情况下 ,诱导PC12细胞发生的形态学改变 ;同时 ,使用荧光免疫细胞化学方法 ,观察神经元标志性物质—低分子量神经丝蛋白 (NF L)在NRF诱导分化的PC12细胞中的表达。采用RT PCR方法观察NRF对无血清培养的PC12细胞即早基因c-fos的表达变化。结果　加药后第 14天 ,NRF组以及NGF组的PC12细胞呈现明显的形态学改变 :细胞胞体皱缩 ,且有明显的突起生长。空白对照组、NRF组 (0 0 1μg/ml、0 1μg/ml、 1μg /ml)、NGF组 (0 0 5 μg/ml)具有明显突起的分化细胞占总细胞的比例分别为 5 16 9%、 2 5 718%、4 3 32 5 %、 73 0 38%、 85 2 86 %。免疫荧光细胞化学结果显示NRF、NGF组的分化细胞基本都为NF L标记阳性的细胞 ;NRF能使c fos的表达上调 ,作用 2h后达峰值。结论　神经再生素具有诱导PC12细胞的神经元性分化作用 ,且能使c-fos表达上调。 展开更多
关键词 神经再生素 神经丝蛋白-L pci2细胞 细胞分化 神经元性分化 中药
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微波辐射对PC12细胞突触素Ⅰ表达的影响及其机制 被引量：1
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作者 王丽峰 彭瑞云 +6 位作者 胡向军 高亚兵 王水明 高荣莲 徐新萍 苏镇涛 董霁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期655-659,共5页
目的:探讨微波辐射对PC12细胞突触素I表达及其磷酸化水平的影响,并通过对其相关影响因子BDNF及其受体TrkB改变的探讨,初步揭示突触素I改变的机制。方法:采用30mW/cm2微波辐射PC12细胞,于辐射后1h,通过HPLC检测氨基酸递质释放的改变;于... 目的:探讨微波辐射对PC12细胞突触素I表达及其磷酸化水平的影响,并通过对其相关影响因子BDNF及其受体TrkB改变的探讨,初步揭示突触素I改变的机制。方法:采用30mW/cm2微波辐射PC12细胞,于辐射后1h,通过HPLC检测氨基酸递质释放的改变;于辐射后3h、9h、1d和2d,通过RT-PCR、Westernblot和免疫细胞化学检测突触素I,BDNF和TrkB表达以及突触素I磷酸化的改变;通过免疫共沉淀检测BDNF和TrkB相互作用的改变。结果:30mW/cm2微波辐射后1h,PC12细胞释放的Asp、Glu、GABA和Gly均减少(P<0.01);突触素ⅠmRNA于辐射后3～9h减少,1d增加(P<0.01或P<0.05),2d基本恢复;其蛋白于辐射后9h～2d减少(P<0.01或P<0.05);磷酸化的突触素Ⅰ在辐射后3～9h减少,1d增加,2d又见减少(P<0.01或P<0.05)。BDNFmRNA于辐射后3～9h减少,1d增加,2d又见减少(P<0.01或P<0.05);其蛋白于辐射后3h减少,1～2d又见增加(P<0.05或P<0.01)。TrkBmRNA在辐射后3h和2d减少;其蛋白于辐射后3h～1d增加(P<0.05或P<0.01),2d基本恢复。BDNF和TrkB的相互作用于辐射后3～9h增强,1～2d减弱(P<0.05或P<0.01)。结论:微波辐射可引起PC12细胞氨基酸递质释放障碍,突触素Ⅰ表达及其磷酸化水平降低,BDNF和受体TrkB表达及其相互作用异常,参与微波辐射所引起的PC12细胞信息传递障碍及其修复过程。 展开更多
关键词 微波 pci2细胞 突触素Ⅰ BDNF TRKB
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醋酸锰对PC12细胞损伤作用的研究 被引量：1
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作者 栾玉静 庆宏 +4 位作者 卢剑清 谢海燕 林凡凯 毛健 邓玉林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1574-1578,共5页
目的研究醋酸锰对PC12细胞的损伤作用机制。方法不同浓度醋酸锰处理PC12细胞24h后,MTT法检测细胞存活率,Hoechst 33258和DNA凝胶电泳的方法检测细胞凋亡,利用高效液相色谱—电化学方法(HPLC-ECD)检测细胞内儿茶酚异喹啉物质的生成,同时... 目的研究醋酸锰对PC12细胞的损伤作用机制。方法不同浓度醋酸锰处理PC12细胞24h后,MTT法检测细胞存活率,Hoechst 33258和DNA凝胶电泳的方法检测细胞凋亡,利用高效液相色谱—电化学方法(HPLC-ECD)检测细胞内儿茶酚异喹啉物质的生成,同时测定细胞内丙二醛(MDA)和羟自由基的生成量。结果不同水平的醋酸锰处理使PC12细胞存活率下降且呈浓度依赖性(P<0.05)。Hoechst 33258和DNA凝胶电泳结果表明细胞发生了凋亡。MDA和羟自由基的含量与对照相比明显升高(P<0.05),多巴胺(DA)的含量呈下降趋势(P<0.05)。Sal(6,7-二羟基-1,2,3,4-四氢异喹啉,Sal)和NMSal(N-甲基-6,7-二羟基-1,2,3,4-四氢异喹啉,NMSal)的含量则随锰浓度的增加而增加(P<0.05)。结论过量的醋酸锰导致PC12细胞产生高氧化应激水平,从而生成了一系列儿茶酚异喹啉物质,对细胞产生损伤作用,这可能是三价锰发挥损伤作用的途径之一。 展开更多
关键词 醋酸锰 pci2细胞 损伤 氧化应激
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