目的:探讨萝卜硫素(Sulforaphane,SFN)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、周期、转移和凋亡的影响及其机制。方法:将PANC-1细胞随机分为四组:对照组(sh-NC)、SFN组(sh-NC+SFN)、实验组(sh-TP53)和sh-TP53+SFN组,并制备不同浓度的SFN溶液(0、6、8...目的:探讨萝卜硫素(Sulforaphane,SFN)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、周期、转移和凋亡的影响及其机制。方法:将PANC-1细胞随机分为四组:对照组(sh-NC)、SFN组(sh-NC+SFN)、实验组(sh-TP53)和sh-TP53+SFN组,并制备不同浓度的SFN溶液(0、6、8、10、16和20μg/mL)。细胞增殖-毒性检测(Cell counting Kit-8,CCK-8)试剂盒检测细胞存活率,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术用于分析细胞周期和细胞凋亡能力,蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma 2 associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Cysteinyl aspartate specific proteinase-9,Caspase-9),周期蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent protein kinase 1,CDK1)和细胞周期蛋白B(Cyclin B),转移蛋白基质金属蛋白酶-9(Matrix metallopeptidase-9,MMP-9)和E-钙粘蛋白(E-cadherin),p53信号通路中生长停滞与DNA损伤诱导蛋白45A(growth arrest and DNA damage inducible alpha,GADD45A),细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(cyclin-dependent kinase inhibitors 1A,p21)和肿瘤蛋白p53(Tumor protein p53,TP53)的表达水平,研究SFN对细胞增殖以及p53信号通路的影响。结果:SFN以浓度依赖性的方式抑制PANC-1细胞增殖。与对照组相比,SFN处理后的PANC-1细胞增殖率显著降低(P<0.001);迁移及侵袭能力减弱(P<0.01,P<0.0001);阻滞PANC-1细胞在G2/M期(P<0.0001);同时促进细胞凋亡(P<0.0001);上调Bax、Caspase-3、Caspase-9、E-cadherin、GADD45A、p21和TP53的蛋白水平,下调Bcl-2、CDK1、Cyclin B和MMP-9的蛋白水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。与SFN组相比,敲低TP53能显著下调SFN抑制PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭和阻滞在G2/M期的能力,显著下调SFN促进PANC-1细胞凋亡的能力,下调Bax、Caspase-3、Caspase-9、E-cadherin、GADD45A、p21和TP53的蛋白水平,上调Bcl-2、CDK1、Cyclin B和MMP-9的蛋白水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。结论:SFN抑制胰腺癌PANC-1细胞活性与激活p53信号通路相关。展开更多
目的研究重楼皂苷Ⅶ对人胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移与侵袭作用及机制。方法采用MTT法检测重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞存活率的影响;观察重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞形态的影响;采用划痕实验和Transwell小室法考察重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞迁移和...目的研究重楼皂苷Ⅶ对人胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移与侵袭作用及机制。方法采用MTT法检测重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞存活率的影响;观察重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞形态的影响;采用划痕实验和Transwell小室法考察重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞迁移和侵袭能力的影响;采用流式细胞术检测重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞凋亡的影响;采用Western blotting法检测重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(B-celllymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-associated X protein,Bax)、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、DNA酶抑制物(inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease,ICAD)和程序性死亡分子配体-1(programmed death ligand 1,PD-L1)蛋白表达的影响。结果重楼皂苷Ⅶ可抑制PANC-1细胞存活率,显著抑制PANC-1细胞迁移和侵袭能力(P<0.01),显著诱导PANC-1细胞凋亡(P<0.05、0.01),显著升高PANC-1细胞中凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3、PARP、Bax表达水平(P<0.01),显著降低pro-PARP、ICAD、Bcl-2、PD-L1蛋白表达水平(P<0.05、0.01)。结论重楼皂苷Ⅶ能够抑制PANC-1细胞增殖、迁移和侵袭,并可能通过下调PD-L1表达诱导PANC-1细胞凋亡。展开更多
文摘目的:探讨萝卜硫素(Sulforaphane,SFN)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、周期、转移和凋亡的影响及其机制。方法:将PANC-1细胞随机分为四组:对照组(sh-NC)、SFN组(sh-NC+SFN)、实验组(sh-TP53)和sh-TP53+SFN组,并制备不同浓度的SFN溶液(0、6、8、10、16和20μg/mL)。细胞增殖-毒性检测(Cell counting Kit-8,CCK-8)试剂盒检测细胞存活率,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术用于分析细胞周期和细胞凋亡能力,蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma 2 associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Cysteinyl aspartate specific proteinase-9,Caspase-9),周期蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent protein kinase 1,CDK1)和细胞周期蛋白B(Cyclin B),转移蛋白基质金属蛋白酶-9(Matrix metallopeptidase-9,MMP-9)和E-钙粘蛋白(E-cadherin),p53信号通路中生长停滞与DNA损伤诱导蛋白45A(growth arrest and DNA damage inducible alpha,GADD45A),细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(cyclin-dependent kinase inhibitors 1A,p21)和肿瘤蛋白p53(Tumor protein p53,TP53)的表达水平,研究SFN对细胞增殖以及p53信号通路的影响。结果:SFN以浓度依赖性的方式抑制PANC-1细胞增殖。与对照组相比,SFN处理后的PANC-1细胞增殖率显著降低(P<0.001);迁移及侵袭能力减弱(P<0.01,P<0.0001);阻滞PANC-1细胞在G2/M期(P<0.0001);同时促进细胞凋亡(P<0.0001);上调Bax、Caspase-3、Caspase-9、E-cadherin、GADD45A、p21和TP53的蛋白水平,下调Bcl-2、CDK1、Cyclin B和MMP-9的蛋白水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。与SFN组相比,敲低TP53能显著下调SFN抑制PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭和阻滞在G2/M期的能力,显著下调SFN促进PANC-1细胞凋亡的能力,下调Bax、Caspase-3、Caspase-9、E-cadherin、GADD45A、p21和TP53的蛋白水平,上调Bcl-2、CDK1、Cyclin B和MMP-9的蛋白水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。结论:SFN抑制胰腺癌PANC-1细胞活性与激活p53信号通路相关。
文摘目的研究重楼皂苷Ⅶ对人胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移与侵袭作用及机制。方法采用MTT法检测重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞存活率的影响;观察重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞形态的影响;采用划痕实验和Transwell小室法考察重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞迁移和侵袭能力的影响;采用流式细胞术检测重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞凋亡的影响;采用Western blotting法检测重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(B-celllymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-associated X protein,Bax)、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、DNA酶抑制物(inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease,ICAD)和程序性死亡分子配体-1(programmed death ligand 1,PD-L1)蛋白表达的影响。结果重楼皂苷Ⅶ可抑制PANC-1细胞存活率,显著抑制PANC-1细胞迁移和侵袭能力(P<0.01),显著诱导PANC-1细胞凋亡(P<0.05、0.01),显著升高PANC-1细胞中凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3、PARP、Bax表达水平(P<0.01),显著降低pro-PARP、ICAD、Bcl-2、PD-L1蛋白表达水平(P<0.05、0.01)。结论重楼皂苷Ⅶ能够抑制PANC-1细胞增殖、迁移和侵袭,并可能通过下调PD-L1表达诱导PANC-1细胞凋亡。
