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水稻矮缩病毒次要外壳蛋白P9多克隆抗体的制备和应用
1
作者 李晶 张雅婷 +2 位作者 林泽芬 魏太云 陈倩 《植物病理学报》 北大核心 2025年第4期991-1000,共10页
由水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus,RDV)引起的水稻矮缩病是危害水稻安全生产的主要病毒病害,建立RDV的监测技术体系对于水稻矮缩病的田间早期预警与防控具有重要意义。本研究通过反转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)从RDV感染... 由水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus,RDV)引起的水稻矮缩病是危害水稻安全生产的主要病毒病害,建立RDV的监测技术体系对于水稻矮缩病的田间早期预警与防控具有重要意义。本研究通过反转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)从RDV感染的水稻病株中扩增1056 bp的P9基因片段,并将其在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达。以纯化的P9蛋白为抗原免疫新西兰雄兔,制备P9多克隆抗血清。酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)结果显示该抗血清效价为1:32000。蛋白质印迹(Western blotting)结果表明经抗原亲和纯化获得的多克隆抗体可特异性识别RDV感染的水稻病株及带毒介体黑尾叶蝉中的RDV P9蛋白。进一步将该多克隆抗体应用于间接ELISA和斑点ELISA(dot-ELISA)分析,并结合RT-PCR对采集自福建省莆田市仙游县的田间样品,包括水稻、稗草及3种昆虫介体(黑尾叶蝉、电光叶蝉、褐飞虱)共223份样本进行检测。结果显示:相对于RDV,水稻和稗草的感病率分别为29.03%和19.05%,黑尾叶蝉、电光叶蝉和褐飞虱的带毒率分别为12.28%、2.56%和0。本研究成功制备了高效价、高特异性的RDV P9多克隆抗体,基于此建立的血清学检测方法不仅提升了水稻矮缩病诊断的可靠性,更为后续P9蛋白功能研究及RDV检测提供了技术支撑。 展开更多
关键词 水稻矮缩病毒(RDV) 次要外壳蛋白p9 多克隆抗体
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花生NBS-LRR类基因P9的克隆与序列分析 被引量：2
2
作者 朱晓峰 姜涛 +3 位作者 赵西拥 王嵩 汪清 倪皖莉 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期737-743,共7页
为探索花生NBS-LRR类基因在花生抗病中的分子作用机制,本研究以花生品种‘Z525’为试验材料,采用电子克隆与RT-PCR相结合的方法,克隆了花生叶片中的P9基因。结果表明,获得一个长度为3557 bp的序列,该序列包含一个完整的开放阅读框(ORF),... 为探索花生NBS-LRR类基因在花生抗病中的分子作用机制,本研究以花生品种‘Z525’为试验材料,采用电子克隆与RT-PCR相结合的方法,克隆了花生叶片中的P9基因。结果表明,获得一个长度为3557 bp的序列,该序列包含一个完整的开放阅读框(ORF),ORF的长度为3195 bp(93 bp^3287 bp),编码1064个氨基酸(120.4 kD),等电点pI为5.92。序列分析表明,该基因编码的蛋白与花生中假定的抗性蛋白RPP13-like及花生二倍体野生种Arachis duranensis和Arachis ipaensis推测的抗病蛋白At3g14460、RPP13-like高度相似;P9蛋白属于NBS-LRR家族,具有典型的NB-ARC和LRR-3两个保守结构域,推测该基因参与花生抗病调控过程。蛋白质亚细胞定位预测表明该基因编码的蛋白主要位于叶绿体中,可能少量分布于细胞核中,推测该基因可能主要作为叶绿体蛋白参与细胞的抗氧化、抗衰老等抗逆过程,其次作为转录因子参与转录调控作用。本研究克隆了P9基因的全长cDNA序列,并对该基因序列、结构和功能等方面进行了分析,为进一步研究花生抗病分子机制提供理论基础,同时为花生抗病品种的选育提供理论支持。 展开更多
关键词 花生 p9基因 克隆 序列分析
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抗sTn抗体3P9和B72.3在子宫内膜癌血清学诊断中的对比研究 被引量：2
3
作者 郭琦 陈秀芹 +5 位作者 孙海斌 付建红 郭尚云 翟旭华 杨晓辉 孟芳 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1117-1121,共5页
目的:探讨sTn与子宫内膜癌的关系,以及两种检测方法在子宫内膜癌血清学诊断中的价值。方法:选用100例子宫内膜癌患者为研究组,以42例健康非孕妇女、15例妊娠妇女、43例其他妇科良性疾病妇女作为对照组,利用两种方法(3P9和4A6联合法及B7... 目的:探讨sTn与子宫内膜癌的关系,以及两种检测方法在子宫内膜癌血清学诊断中的价值。方法:选用100例子宫内膜癌患者为研究组,以42例健康非孕妇女、15例妊娠妇女、43例其他妇科良性疾病妇女作为对照组,利用两种方法(3P9和4A6联合法及B72.3和CC49联合法)对两组患者血清中sTn水平进行检测。结果:子宫内膜癌组血清sTn水平及其阳性率均明显高于对照组(P<0.05)。妊娠妇女的血清sTn水平较高。随子宫内膜癌临床分期的增加,sTn抗原水平及检出阳性率也增加。3P9法在检测的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、诊断准确性方面均高于B72.3法。结论:sTn有望成为子宫内膜癌的新型血清学诊断标志物,筛查时应将妊娠患者排除在外;3P9法优于B72.3法。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 肿瘤标志物 STN 3p9 B72 3
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A335P9大弯曲半径U型管制造技术研究 被引量：6
4
作者 陈明健 江克 《热加工工艺》 CSCD 北大核心 2015年第5期144-146,150,共4页
介绍了A335 P9大弯曲半径U型管中频感应热弯成形的制造装置及工艺。检测了成形后U型管的壁厚减薄率、椭圆度、平面度等参数。对比研究中频热弯、回火、正火+回火3种状态下U型管的力学性能、硬度值、微观组织情况。结果显示,经正火+回火... 介绍了A335 P9大弯曲半径U型管中频感应热弯成形的制造装置及工艺。检测了成形后U型管的壁厚减薄率、椭圆度、平面度等参数。对比研究中频热弯、回火、正火+回火3种状态下U型管的力学性能、硬度值、微观组织情况。结果显示,经正火+回火热处理后的U型管总体性能更优。 展开更多
关键词 A335p9钢管 大弯曲半径 U型管 中频感应加热
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石化装置用P9无缝钢管的研发 被引量：1
5
作者 何彪 肖功业 +4 位作者 王国亮 赵庆权 王庆国 许磊磊 张俊萍 《钢管》 CAS 2014年第4期38-40,共3页
介绍了石化装置用P9热轧无缝钢管的国产化研发过程。通过合理的炼钢、轧制以及热处理工艺控制,研制出的P9热轧无缝钢管化学成分以及各项性能均满足ASME SA 335/SA 335M标准要求,显微组织为回火马氏体,脆性转变温度在-48℃左右,短时高温... 介绍了石化装置用P9热轧无缝钢管的国产化研发过程。通过合理的炼钢、轧制以及热处理工艺控制,研制出的P9热轧无缝钢管化学成分以及各项性能均满足ASME SA 335/SA 335M标准要求,显微组织为回火马氏体,脆性转变温度在-48℃左右,短时高温性能达到ASME相关规范要求,在600℃时,屈服强度仍能够达到270 MPa,可以替代进口,实现P9无缝钢管的国产化。 展开更多
关键词 p9无缝钢管 耐热钢 生产工艺 脆性转变温度 短时高温性能
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重症肌无力P9-ZFD蛋白的骨骼肌亚细胞定位 被引量：1
6
作者 任明山 吕传真 +3 位作者 乔健 任惠民 徐韧 甘仁宝 《中国神经科学杂志》 CSCD 2003年第5期308-312,共5页
目的 :表达、纯化重症肌无力相关P9基因TRAF型锌指结构 (P9TRAF typezincfingerdomain ,简称P9 ZFD)编码的蛋白质 ,制备P9 ZFD多克隆抗体 ,研究P9 ZFD蛋白的骨骼肌亚细胞定位。 方法 :应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR )克隆编码P9 ZFD... 目的 :表达、纯化重症肌无力相关P9基因TRAF型锌指结构 (P9TRAF typezincfingerdomain ,简称P9 ZFD)编码的蛋白质 ,制备P9 ZFD多克隆抗体 ,研究P9 ZFD蛋白的骨骼肌亚细胞定位。 方法 :应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR )克隆编码P9 ZFD的cDNA序列 ,构建pET2 4a P9 ZFD表达载体 ,在E .coliBL2 1(DE3)中胞内诱导表达P9 ZFD蛋白 ,组氨酸亲和色谱法纯化P9 ZFD蛋白并免疫Balb/c小鼠制备其多克隆抗体。ELISA和Westernblot鉴定抗体效价及其免疫特异性。免疫组织化学及免疫电镜观察P9 ZFD蛋白在骨骼肌中的表达部位及其亚细胞分布。结果 :表达、纯化的P9 ZFD蛋白相对分子质量约 30kD ,纯度达 95 %以上。制备的P9 ZFD抗体具有特异的免疫反应性。免疫组织化学和免疫电镜结果显示 ,P9 ZFD蛋白的免疫染色部位集中沿MG骨骼肌细胞膜分布。结论 :重症肌无力相关的P9 ZFD蛋白在MG骨骼肌细胞膜处表达 ,是一种骨骼肌细胞膜蛋白组分。 展开更多
关键词 重症肌无力 p9-ZFD蛋白 骨骼肌亚细胞定位 制备 逆转录-聚合酶链反应 CDNA序列
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小鼠腹腔巨噬细胞内胆固醇酯再形成的选择性抑制剂——FO-6979-P9 被引量：2
7
作者 司书毅 生田目 +2 位作者 供田洋 吴剑波 大村智 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期1-3,共3页
ＦＯ－６９７９－Ｐ９是在从真菌培养液筛选巨噬细胞泡沫化抑制剂过程中获得的，其对小鼠腹腔巨噬细胞中胆固醇酯再形成的抑制ＩＣ５０为０．３８ｍｇ／Ｌ（０．７８μｍｏｌ／Ｌ），而对甘油三酯和磷脂的再形成无显著抑制作用。真菌Ｂ... ＦＯ－６９７９－Ｐ９是在从真菌培养液筛选巨噬细胞泡沫化抑制剂过程中获得的，其对小鼠腹腔巨噬细胞中胆固醇酯再形成的抑制ＩＣ５０为０．３８ｍｇ／Ｌ（０．７８μｍｏｌ／Ｌ），而对甘油三酯和磷脂的再形成无显著抑制作用。真菌Ｂｅａｕｖｅｒｉａｓｐ．ＦＯ－６９７９静置培养１４ｄ后，经有机溶媒提取，常压ＯＤＳ柱层析和制备ＨＰＬＣ柱层析分离得到ＦＯ－６９７９－Ｐ９纯品。又经过测定其ＦＡＢＭＳ、ＵＶ、１Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ、１Ｈ－１ＨＣＯＳＹ、ＤＥＰＴ、ＨＭＱＣ和ＨＭＢＣ等光谱数据。 展开更多
关键词 小鼠腹腔巨噬细胞 泡沫细胞 胆固醇酯再形成抑制剂 FO-6979-p9
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乳腺癌患者血清中tRF-32-Q99P9P9NH57SJ的表达及临床意义 被引量：2
8
作者 王承霞 朱玉蓉 《现代检验医学杂志》 CAS 2019年第6期16-19,共4页
目的检测tRNA及其来源片段(tRNA-derived fragments)-tRF-32-Q99P9P9NH57SJ(tRF-32)在乳腺癌患者血清中的表达及意义。方法选取2017年11月~2019年2月在江苏省肿瘤医院乳腺外科确诊的51例乳腺癌患者及同期25例健康对照者的血清,记录患者... 目的检测tRNA及其来源片段(tRNA-derived fragments)-tRF-32-Q99P9P9NH57SJ(tRF-32)在乳腺癌患者血清中的表达及意义。方法选取2017年11月~2019年2月在江苏省肿瘤医院乳腺外科确诊的51例乳腺癌患者及同期25例健康对照者的血清,记录患者临床资料。运用RT-PCR检测血清tRF-32的表达水平,分析其表达水平与临床病理资料的关系。结果 51例乳腺癌患者血清中tRF-32的表达量(13.84±2.62)与25例健康对照组血清中的tRF-32表达量(39.47±7.21)比较,差异有统计学意义(t=4.091, P<0.000 1)。临床TNM分期I-II期的tRF-32表达量(16.97±3.315)明显高于III-IV期tRF-32表达量(7.07±2.83),差异有统计学意义(t=2.241, P=0.029)。无淋巴结转移患者血清中的t RF-32表达量(18.75±3.91)明显高于有淋巴结转移患者血清中tRF-32表达量(7.80±2.51),差异有统计学意义(t=2.47, P=0.017)。乳腺癌患者tRF-32表达量与年龄无关(χ^2=0.621,P>0.05),与TNM临床分期(χ^2=8.463,P=0.004)以及淋巴结是否转移相关(χ^2=5.856, P=0.016)。受试者工作曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)显示血清tRF-32诊断乳腺癌的曲线下面积(area under curve, AUC)是0.776(95%CI:0.673~0.880),敏感度和特异度分别为84.0%和68.8%。结论 tRF-32在乳腺癌患者血清中低表达,tRF-32的表达水平与乳腺癌的临床分期和淋巴结转移有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 tRF-32-Q99p9p9NH57SJ 荧光定量PCR 临床诊断
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国产P9无缝钢管的性能分析及应用 被引量：2
9
作者 王起江 张清廉 +1 位作者 樊志菁 刘耀恒 《石油化工腐蚀与防护》 CAS 2013年第1期48-51,共4页
根据国产石油裂化用P9铁素体合金无缝钢管的研制过程,以正火+回火和等温退火两种热处理方式对P9产品室温性能、瞬时高温拉伸性能、高温持久蠕变性能以及微观组织形貌进行分析。并把试验数据、主要化学成分控制水平、高温持久强度和应用... 根据国产石油裂化用P9铁素体合金无缝钢管的研制过程,以正火+回火和等温退火两种热处理方式对P9产品室温性能、瞬时高温拉伸性能、高温持久蠕变性能以及微观组织形貌进行分析。并把试验数据、主要化学成分控制水平、高温持久强度和应用业绩与进口管实物质量进行对比,结果表明国产P9铁素体合金无缝钢管产品能满足美国材料与试验学会标准ASTM A335的要求,产品质量达到了国外先进水平,可替代进口产品。 展开更多
关键词 石油裂化 p9铁素体钢 无缝钢管 合金
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稀土元素铈对P9钢组织及性能的影响 被引量：1
10
作者 张迎春 左著 《热加工工艺》 CSCD 北大核心 2012年第20期49-51,共3页
研究了稀土Ce对P9钢显微组织和力学性能的影响。结果表明,稀土Ce加入量小于0.5%时,稀土Ce能起到净化基体和细化晶粒的作用,对P9钢的综合力学性能有一定改善。
关键词 稀土Ce p9钢 显微组织 力学性能
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马传贫驴白细胞弱毒疫苗株酸性蛋白p9基因的克隆与表达
11
作者 薛飞 朱远茂 +5 位作者 杨建德 王晓钧 相文华 赵立平 吕晓玲 沈荣显 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第5期86-90,共5页
从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码p9蛋白的基因 ,并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的蛋白是一种可溶性的融合蛋白 ,其氨基端带有 6个组氨酸的标签 ,因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下... 从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码p9蛋白的基因 ,并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的蛋白是一种可溶性的融合蛋白 ,其氨基端带有 6个组氨酸的标签 ,因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下进行纯化。在间接酶联免疫吸附试验 (ELISA)和免疫印迹试验中 ,重组的酸性蛋白p9可与马传贫阳性血清样品发生反应 ,而与健康马血清无任何反应。这表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性 。 展开更多
关键词 白细胞 弱毒疫苗株 酸性蛋白p9基因 克隆 表达 马传染性贫血病毒
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植物乳杆菌P9改善小鼠免疫功能的作用及机制
12
作者 王炜 尉景娟 +2 位作者 李亚娜 萨磊 孙伟 《标记免疫分析与临床》 CAS 2024年第3期507-511,共5页
目的探讨植物乳杆菌P9对小鼠免疫功能的调节作用及潜在机制。方法用低、中、高3个剂量(0.5、1.0mg/kg和3.0mg/kg)的植物乳杆菌P9对C57BL/6J小鼠进行灌胃处理,每日记录小鼠一般情况。30d后处死小鼠,计算脏器指数;通过抗体生成细胞实验和... 目的探讨植物乳杆菌P9对小鼠免疫功能的调节作用及潜在机制。方法用低、中、高3个剂量(0.5、1.0mg/kg和3.0mg/kg)的植物乳杆菌P9对C57BL/6J小鼠进行灌胃处理,每日记录小鼠一般情况。30d后处死小鼠,计算脏器指数;通过抗体生成细胞实验和血清溶血素实验分析该菌对小鼠体液免疫功能的影响;通过延迟型过敏实验和脾淋巴细胞转化实验分析该菌对小鼠细胞免疫功能的影响;通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定、碳廓清实验和细胞活力测定研究该菌对小鼠单核-巨噬细胞功能和自然杀伤(NK)细胞活性的影响。结果对照组与低、中、高剂量植物乳杆菌P9组小鼠的脏器指数差异无统计学意义。但是,植物乳杆菌P9处理后,小鼠血清溶血素生成能力、延迟型过敏、腹腔巨噬细胞的吞噬能力、碳清除能力以及NK细胞活力均显著性提高。结论植物乳杆菌P9可能从体液免疫、细胞免疫、单核-巨噬细胞功能和NK细胞活性等多方面参与调解和改善小鼠的免疫功能。 展开更多
关键词 植物乳杆菌p9 免疫功能 小鼠 机制
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水稻矮缩病毒外壳蛋白P9具有体内转录激活活性 被引量：9
13
作者 尹哲 吉栩 +1 位作者 吴云锋 李毅 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2007年第3期61-65,共5页
将RDV微核心蛋白基因S9克隆到酵母表达载体pGBKT7中,转入AH109酵母细胞,转化子可以在SD/Trp-His-Ade-多营养缺陷固体培养基上正常生长,证明RDV P9在酵母中具有转录激活活性,运用β-半乳糖苷酶的活性分析对重组质粒转化子的转录激活程度... 将RDV微核心蛋白基因S9克隆到酵母表达载体pGBKT7中,转入AH109酵母细胞,转化子可以在SD/Trp-His-Ade-多营养缺陷固体培养基上正常生长,证明RDV P9在酵母中具有转录激活活性,运用β-半乳糖苷酶的活性分析对重组质粒转化子的转录激活程度做了定量分析,发现与正对照相比,转化pGBK-S9的酵母菌中β-半乳糖苷酶活性可达到正对照的40%以上。构建了含有gusA报告基因的植物表达载体用来分析P9在植物中的转录激活活性,实验结果表明,融合GAL4 DB的P9蛋白可以在植物体内激活报告基因的表达,Western印迹法分析表明了P9蛋白在酵母和植物中均可以表达。证明了在植物体内RDV P9蛋白同样能够激活基因的转录,暗示该蛋白可能在病毒的侵染和复制过程中参与调控病毒或寄主基因的转录表达。 展开更多
关键词 水稻矮缩病毒 微核心蛋白p9 转录激活活性
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植物乳杆菌P9 接种量对凝固型发酵乳贮藏特性的影响 被引量：11
14
作者 张媛 潘潇 +2 位作者 刘文君 白梅 陈永福 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2022年第2期21-24,共4页
探究了添加不同接种量植物乳杆菌P9对凝固型发酵乳贮藏特性的影响。以商业基础发酵剂为对照组,分别添加1×105,1×106,1×107 mL-1植物乳杆菌P9与基础发酵剂复配为实验组。结果表明,添加不同接种量的植物乳杆菌P9均可增加... 探究了添加不同接种量植物乳杆菌P9对凝固型发酵乳贮藏特性的影响。以商业基础发酵剂为对照组,分别添加1×105,1×106,1×107 mL-1植物乳杆菌P9与基础发酵剂复配为实验组。结果表明,添加不同接种量的植物乳杆菌P9均可增加发酵乳硬度、稠度和内聚性,改善发酵乳质构,且贮藏期间pH值和滴定酸度无显著变化。当植物乳杆菌P9接种量为1×106 mL-1时,发酵乳的黏度和持水力显著高于其他3组,且植物乳杆菌P9的添加能赋予发酵乳良好的感官特性。综上,益生菌植物乳杆菌P9在发酵乳中具有良好的应用潜力。 展开更多
关键词 益生菌 植物乳杆菌p9 发酵乳 质构特性 感官评价
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热处理对P9钢蠕变行为的影响 被引量：1
15
作者 樊志菁 王起江 +3 位作者 单爱党 高加强 周冶东 齐晨洁 《金属热处理》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1-5,共5页
对退火态和正火+回火态P9钢的高温蠕变性能及组织演变过程进行研究。通过对650℃不同应力下P9钢的蠕变曲线分析发现,其稳态蠕变速率与蠕变断裂时间满足Monkman-Grant关系。同时介绍蠕变安全性评估方法和连续蠕变损伤机制,讨论了P9钢的... 对退火态和正火+回火态P9钢的高温蠕变性能及组织演变过程进行研究。通过对650℃不同应力下P9钢的蠕变曲线分析发现,其稳态蠕变速率与蠕变断裂时间满足Monkman-Grant关系。同时介绍蠕变安全性评估方法和连续蠕变损伤机制,讨论了P9钢的蠕变损伤机制。 展开更多
关键词 p9钢 蠕变 稳态蠕变速率 蠕变断裂时间 连续蠕变损伤机制
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基于非靶向代谢组学技术筛选植物乳植杆菌P9抑黄曲霉物质 被引量：3
16
作者 陈佳敏 张文羿 孟和毕力格 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第5期87-95,共9页
为解析共培养下植物乳植杆菌P9代谢产生的抑黄曲霉物质,本研究将植物乳植杆菌P9与黄曲霉进行共培养处理,分析植物乳植杆菌P9单菌及共培养中活菌数的差异,依据活菌数差异,分别在共培养9 h和13 h取样,进行非靶向代谢组学分析,并对取样点... 为解析共培养下植物乳植杆菌P9代谢产生的抑黄曲霉物质,本研究将植物乳植杆菌P9与黄曲霉进行共培养处理,分析植物乳植杆菌P9单菌及共培养中活菌数的差异,依据活菌数差异,分别在共培养9 h和13 h取样,进行非靶向代谢组学分析,并对取样点的差异代谢物及其通路富集情况进行研究。结果显示:共培养下植物乳植杆菌P9可以显著抑制黄曲霉,共培养产生的差异代谢物主要集中在能量代谢途径,包括:糖酵解/糖异生途径,柠檬酸循环,丙酮酸代谢途径,氨基酸代谢途径,叶酸生物合成途径及有机酸代谢途径。与已报道的植物乳植杆菌产生的抑菌物质进行比对,鉴定到的差异代谢物中可能对黄曲霉起拮抗作用的物质主要为2-氨基-3-羟基丁酸、十六烷酸、2,3-二羟基苯甲酸等有机酸,以及杆菌肽等氨基酸类物质,本研究为深入探寻植物乳植杆菌抑黄曲霉物质提供参考。 展开更多
关键词 植物乳植杆菌p9 黄曲霉 液体共培养 非靶向代谢组学 代谢差异
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植物乳杆菌P9对小鼠功能性便秘的作用及机制 被引量：11
17
作者 唐田 沈真如 +1 位作者 石璐 刘振权 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第9期123-130,共8页
目的:研究植物乳杆菌P9对小鼠功能性便秘的润肠通便作用及其对肠道菌群的影响。方法:将100只BALB/c雄性小鼠随机分成空白组、模型组、植物乳杆菌P9低剂量组(给予0.42 mg/(kg m_(b)·d)菌粉(活菌数2.0×10^(11)CFU/g,下同))、中... 目的:研究植物乳杆菌P9对小鼠功能性便秘的润肠通便作用及其对肠道菌群的影响。方法:将100只BALB/c雄性小鼠随机分成空白组、模型组、植物乳杆菌P9低剂量组(给予0.42 mg/(kg m_(b)·d)菌粉(活菌数2.0×10^(11)CFU/g,下同))、中剂量组(给予0.84 mg/(kg m_(b)·d)菌粉)、高剂量组(给予2.5 mg/(kg m_(b)·d)菌粉),每组20只小鼠。将相应剂量的菌粉用无菌去离子水配制成菌悬液,按照10 mL/(kg m_(b)·d)剂量灌胃15 d,空白组、模型组灌胃等量无菌去离子水。实验第16天,模型组、植物乳杆菌P9干预组以洛哌丁胺4 mg/(kg m_(b)·d)灌胃诱导小鼠功能性便秘,随机选取10只进行排便实验,检测小鼠首次排黑便时间、6 h排黑便量;剩余10只进行小肠运动实验,测定墨汁推进率,并采用16S rRNA高通量测序技术测定小鼠盲肠内容物菌群组成。排便实验结束后模型组、植物乳杆菌P9干预组剩余小鼠持续灌胃洛哌丁胺4 mg/(kg m_(b)·d)建立小鼠功能性便秘模型,空白组给予等量无菌去离子;造模1 h后,植物乳杆菌P9干预组给予相应剂量植物乳杆菌P9,空白组、模型组灌胃等量无菌去离子,继续干预6 d后,采用苏木精-伊红染色观察结肠组织病理学变化,并测定小鼠血清神经递质胃动素(motilin,MTL)、胃泌素(gastrin,GAS)、乙酰胆碱酯酶(acetylcholine,AchE)、一氧化氮的水平。结果:与模型组相比,植物乳杆菌P9中剂量能显著缩短功能性便秘小鼠的首次排黑便时间(P<0.05),中、高剂量能显著增加小鼠6 h排黑便量(P<0.01、P<0.001),低、中、高剂量皆可显著提高小鼠墨汁推进率(P<0.01、P<0.05、P<0.001)。植物乳杆菌P9低、中、高剂量均可增加小鼠血清中MTL、GAS、AchE质量浓度,且低剂量组能够高度显著提高GAS质量浓度(P<0.001),高剂量组能极显著提高MTL质量浓度(P<0.01),低、中剂量组能显著增加AchE质量浓度(P<0.05),低、中剂量显著降低NO浓度(P<0.05)。植物乳杆菌P9各剂量组小鼠受损肠屏障得到修复,肠道菌群丰富度、多样性显著提高。结论:植物乳杆菌P9具有良好的润肠通便作用,其机制可能与提高肠道运动能力,调节胃肠血清神经递质,增加肠道菌群丰富度和多样性有关。 展开更多
关键词 植物乳杆菌p9 功能性便秘 润肠通便 肠道菌群 16SrRNA
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对虾白斑综合症病毒P9蛋白转录水平的微阵列分析及其免疫荧光标记 被引量：1
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作者 吴常嵩 谢希贤 杨丰 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期268-271,共4页
从构建的对虾白斑综合症病毒cDNA文库中,我们筛选到一个拷贝数最高,编码82个氨基酸的基因(命名为p9,wsv230).该基因被克隆到pGEX-2T载体中进行GST融合蛋白的原核表达,纯化的融合蛋白GST-P9用于制备特异的多克隆抗体.利用微阵列技术和免... 从构建的对虾白斑综合症病毒cDNA文库中,我们筛选到一个拷贝数最高,编码82个氨基酸的基因(命名为p9,wsv230).该基因被克隆到pGEX-2T载体中进行GST融合蛋白的原核表达,纯化的融合蛋白GST-P9用于制备特异的多克隆抗体.利用微阵列技术和免疫荧光标记技术,对该蛋白的转录水平及其在感染细胞内的分布进行了初步研究,表明该基因为高丰度表达,推测是对虾白斑综合症病毒的一个重要基因. 展开更多
关键词 对虾白斑综合症病毒 p9基因 微阵列 免疫荧光标记
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屋尘螨变应原Der p9基因的克隆表达、纯化及反应原性鉴定 被引量：4
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作者 李平 黄娜娜 +4 位作者 常可欣 李诞 杨礼腾 刘志刚 刘晓宇 《南昌大学学报（医学版）》 CAS 2018年第6期1-4,10,共5页
目的克隆表达及纯化屋尘螨第九组变应原(Der p9)蛋白,并鉴定其反应原性。方法提取屋尘螨总RNA,通过RT-PCR克隆Der P9基因,并连接到pET-32a表达载体上,得到的重组质粒pET-32a-Der p9转化至E.Coli BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(I... 目的克隆表达及纯化屋尘螨第九组变应原(Der p9)蛋白,并鉴定其反应原性。方法提取屋尘螨总RNA,通过RT-PCR克隆Der P9基因,并连接到pET-32a表达载体上,得到的重组质粒pET-32a-Der p9转化至E.Coli BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过镍离子亲和层析纯化目的蛋白;通过Western blotting等方法检测Der p9重组蛋白的反应原性。结果 Der p9基因片段大小约为850 bp,其基因片段与Gen Bank公布的Der p9基因(登录号为AAP57077.1)同源性为81.94%;重组Der p9在BL21(DE3)中可高效表达,分子质量约为47 k Da,表达后的重组蛋白主要以包涵体的形式存在。Der p9重组蛋白与屋尘螨过敏患者血清呈阳性反应,具有反应原性。结论成功克隆并表达出Der p9,通过纯化获得较强反应原性的Der p9重组蛋白,为尘螨过敏性疾病诊断及免疫治疗奠定理论基础。 展开更多
关键词 屋尘螨 Derp9 表达 纯化 反应原性
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基于压缩试验法的P91韧性断裂行为研究 被引量：4
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作者 刘雨桐 袁朝龙 +2 位作者 吴任东 焦玮 强浩 《中国机械工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第16期2254-2258,共5页
金属塑性加工中发生的断裂多为韧性断裂,测定材料韧性断裂时的临界损伤值是对切底、冲裁等包含断裂行为的塑性加工过程进行数值模拟的关键。采用压缩法进行了材料试验,并利用数值模拟解决了镦粗过程中应力积分较为复杂的问题,得到了Norm... 金属塑性加工中发生的断裂多为韧性断裂,测定材料韧性断裂时的临界损伤值是对切底、冲裁等包含断裂行为的塑性加工过程进行数值模拟的关键。采用压缩法进行了材料试验,并利用数值模拟解决了镦粗过程中应力积分较为复杂的问题,得到了Normalized C-L准则下耐热高强合金P91的临界损伤值,在此基础上,采用单元删除法对P91无缝钢管切底制坯过程进行了模拟,模拟结果与实际工程结果基本吻合。 展开更多
关键词 韧性断裂 p91合金(9Cr1Mo) 压缩法 切底 归一化C-L准则
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