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伯氏疏螺旋体表膜蛋白C(OspC)的研究和应用
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作者 佟玉品 汪治清 毕胜利 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第6期67-69,15,共4页
关键词 莱姆病 伯氏疏螺旋体 表膜蛋白C ospc
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含伯氏疏螺旋体OspA、OspC蛋白VLPs的构建及鉴定 被引量:2
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作者 于喜冰 李俊姣 +6 位作者 常瑾 费亦东 穆佳琦 丁佳欣 李金斗 丁壮 尹仁福 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1336-1341,1346,共7页
莱姆病是一种经蜱传播的人兽共患病,随着人们经济的发展,伴侣动物的不断出现增加了人与动物经蜱传播莱姆病的风险,而当前并未有治疗莱姆病的有效方法,因此研制莱姆病疫苗成为一大热点。为了更好地预防莱姆病的发生,本研究通过替换新城... 莱姆病是一种经蜱传播的人兽共患病,随着人们经济的发展,伴侣动物的不断出现增加了人与动物经蜱传播莱姆病的风险,而当前并未有治疗莱姆病的有效方法,因此研制莱姆病疫苗成为一大热点。为了更好地预防莱姆病的发生,本研究通过替换新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶蛋白(haemagglutinin-neuraminidase protein,HN)胞外域的方式,利用昆虫杆状病毒表达系统分别构建了含伯氏疏螺旋体候选抗原表位外膜蛋白A(outer surface protein A,OspA)、外膜蛋白C(outer surface protein C,OspC)的新城疫病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),形成了含有伯氏疏螺旋体抗原表位的新城疫病毒样颗粒,为之后研制莱姆病疫苗提供了新思路、新想法。 展开更多
关键词 伯氏疏螺旋体候选抗原蛋白 OspA/ospc 昆虫杆状病毒表达系统 新城疫病毒样颗粒
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伯氏疏螺旋体外膜蛋白OspC和鞭毛蛋白FlaB多克隆抗体的制备和免疫原性研究
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作者 张学潮 朱函坪 +7 位作者 姚苹苹 徐海君 徐芳 孙一晟 卢杭景 张云 岳明 杨章女 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2020年第5期531-535,共5页
目的对伯氏疏螺旋体(又称莱姆病螺旋体,Borrelia burgdorferi)外膜蛋白OspC和鞭毛蛋白FlaB原核表达后,制备多克隆抗体并进一步进行免疫原性检测。方法以伯氏疏螺旋体BgNMJW1基因组DNA为模板,PCR扩增出外膜蛋白OspC和鞭毛蛋白FlaB的基因... 目的对伯氏疏螺旋体(又称莱姆病螺旋体,Borrelia burgdorferi)外膜蛋白OspC和鞭毛蛋白FlaB原核表达后,制备多克隆抗体并进一步进行免疫原性检测。方法以伯氏疏螺旋体BgNMJW1基因组DNA为模板,PCR扩增出外膜蛋白OspC和鞭毛蛋白FlaB的基因片段,克隆入表达载体pGEX-6p-1,转入表达菌株Rosetta,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导产生融合蛋白,并经谷胱甘肽转移酶柱蛋白纯化或割胶纯化。纯化后的蛋白用于免疫新西兰大白兔得到多克隆抗血清。结果经聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,经过诱导的携带目的基因载体,与对照相比,有明显的目的蛋白表达,大小分别约为49×103和63×103,诱导结果表明,在细菌培养至吸光度(A)值为0.4时,加入1 mmol/L的IPTG,在25℃下,诱导10 h,此时产生的蛋白表达量较大。将融合表达产生的蛋白纯化后免疫新西兰大白兔得到多克隆抗血清,应用抗血清对B.garinii和B.burgdorferi 2种基因型的伯氏疏螺旋体代表菌株(BgNMJW1和BbB31A3)的OspC和FlaB进行蛋白免疫印迹检测,可得到清晰检测条带。结论OspC和FlaB的联合应用可对莱姆病的诊断起到有效作用。 展开更多
关键词 伯氏疏螺旋体 原核表达 外膜蛋白 鞭毛蛋白 多克隆抗体
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Recombinant OspC identification and antigenicity detection from Borreliaburgdorferi PD91 in China
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作者 ChenJ WanKL 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第21期1969-1969,共1页
关键词 莱姆病 ospc基因 基因重组 大肠杆菌 早期诊断
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中国莱姆病螺旋体PD91重组OspC的鉴定和抗原性检测 被引量:4
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作者 陈建 万康林 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期917-919,共3页
目的 重组中国莱姆病螺旋体PD91外膜蛋白C(OspC)并在大肠埃希菌中表达 ,用于早期莱姆病诊断的研究。方法 用聚合酶链反应 (PCR)扩增出PD91外膜蛋白C基因 ,定向克隆到表达载体PET 11D ,构建重组质粒PET 11D ospC。用PCR、限制性内切酶... 目的 重组中国莱姆病螺旋体PD91外膜蛋白C(OspC)并在大肠埃希菌中表达 ,用于早期莱姆病诊断的研究。方法 用聚合酶链反应 (PCR)扩增出PD91外膜蛋白C基因 ,定向克隆到表达载体PET 11D ,构建重组质粒PET 11D ospC。用PCR、限制性内切酶分析及序列测定等方法鉴定重组质粒。用WesternBlot检测其抗原性。结果 OspC基因被正确克隆到表达载体PET 11D中。序列测定结果证实与国外已报道的序列存在一定的差异。OspC具有强抗原性。 展开更多
关键词 中国 莱姆病 螺旋体 PD91 ospc 鉴定 抗原性检测 大肠埃希菌 外膜蛋白C
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伯氏疏螺旋体外膜蛋白C的表达及抗原性分析 被引量:1
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作者 付钰广 关贵全 +9 位作者 牛庆丽 杨吉飞 刘志杰 李有全 马米玲 任巧云 刘爱红 彭欲率 罗建勋 殷宏 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期661-665,共5页
以伯氏疏螺旋体SZ(B.garinii)、BO23(B.afzelii)、B31(B.burgdorferi sensu stricto)菌株的外膜蛋白OspC基因为靶基因,将PCR扩增出的目的片段克隆到表达载体pGEX-4T-1中构建重组质粒进行表达,表达的蛋白用MagneGSTTMProtein Purificatio... 以伯氏疏螺旋体SZ(B.garinii)、BO23(B.afzelii)、B31(B.burgdorferi sensu stricto)菌株的外膜蛋白OspC基因为靶基因,将PCR扩增出的目的片段克隆到表达载体pGEX-4T-1中构建重组质粒进行表达,表达的蛋白用MagneGSTTMProtein Purification System纯化,之后用此3株菌株免疫羊制备的阳性血清做Western-blot,检测该重组蛋白。证明这3个基因型菌株的重组OspC具有抗原性及交叉反应性。本研究表达的重组蛋白OspC(SZ菌株)为建立羊体内伯氏疏螺旋体抗体的ELISA检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 伯氏疏螺旋体 ospc基因 克隆 表达 抗原性分析
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吉林省四平市周边地区莱姆病流行情况调查及优势菌株外膜蛋白C的表达
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作者 冯嘉轩 杨莹莹 +1 位作者 李俊姣 阎慧 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期2151-2155,共5页
为了解吉林省四平市周边地区伯氏疏螺旋体流行情况,本试验于2017年5-7月分别采集四平市周边地区蜱虫样品共25份。通过筛选扩增伯氏疏螺旋体外膜蛋白C(OspC)基因片段的通用引物、优化反应条件后建立用于检测蜱体内伯氏疏螺旋体的PCR方法... 为了解吉林省四平市周边地区伯氏疏螺旋体流行情况,本试验于2017年5-7月分别采集四平市周边地区蜱虫样品共25份。通过筛选扩增伯氏疏螺旋体外膜蛋白C(OspC)基因片段的通用引物、优化反应条件后建立用于检测蜱体内伯氏疏螺旋体的PCR方法。从25份样品中分离到8份阳性样品(阳性率约为32%),经过测序比对发现其基因型均为Borrelia burgdorferi;并以分离到的Borrelia burgdorferi DNA为模板,PCR扩增OspC基因,构建重组质粒pET-30a-OspC,以IPTG诱导蛋白表达,为建立伯氏疏螺旋体ELISA检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 莱姆病 伯氏疏螺旋体 ospc基因 流行病学
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莱姆病原菌上一关键蛋白的结构
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作者 陈锦荣 《生物制品快讯》 2001年第12期17-17,共1页
关键词 莱姆病原菌 ospc蛋白 结构 莱姆病疫苗
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用基因工程抗原建立ELISA检测莱姆病特异IgM抗体
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作者 贾月萍 周国萍 +1 位作者 曾丽苹 高峰 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期159-160,共2页
目的 利用伯氏疏螺旋体基因工程抗原外膜蛋白C(OspC)建立间接ELISA ,检测莱姆病特异性抗体IgM。方法 基因工程抗原OspC的包被浓度和酶标抗 μ链单抗所用浓度及血清稀释倍数 ,均由方阵滴定法确定 ,并进行精密度、特异性试验、阻断试验... 目的 利用伯氏疏螺旋体基因工程抗原外膜蛋白C(OspC)建立间接ELISA ,检测莱姆病特异性抗体IgM。方法 基因工程抗原OspC的包被浓度和酶标抗 μ链单抗所用浓度及血清稀释倍数 ,均由方阵滴定法确定 ,并进行精密度、特异性试验、阻断试验和干扰试验。结果 OspC最佳浓度为 15 0 μg/L ,批内平均变异系数 4 6 % ,批间平均变异系数 14 2 % ,用ELISA测定临床已确诊莱姆病 33例 ,5 7例正常体检者 ,同时与进口ELISA试剂盒比较 ,两方法符合率 97 8%。结论 该方法特异性强、敏感性高、实验结果可靠 ,是莱姆病早期诊断的好方法。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附试验 外膜蛋白C 莱姆病 IGM抗体 基因工程
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