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蓝莓果实中GA_(3)响应关键基因VcGA2ox2的克隆与表达分析
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作者 王小敏 胡丽超 +3 位作者 平心悦 吴雅琼 吴文龙 李维林 《安徽农业大学学报》 2025年第2期188-194,共7页
【目的】为蓝莓VcGA2ox2载体构建和功能验证提供分子生物信息学基础。【方法】以外源GA_(3)处理受精的蓝莓花而获得无籽蓝莓成熟果实为材料,利用转录组数据筛选出1条差异表达基因,命名为VcGA2ox2,并对其进行了基因克隆及生物信息学分析... 【目的】为蓝莓VcGA2ox2载体构建和功能验证提供分子生物信息学基础。【方法】以外源GA_(3)处理受精的蓝莓花而获得无籽蓝莓成熟果实为材料,利用转录组数据筛选出1条差异表达基因,命名为VcGA2ox2,并对其进行了基因克隆及生物信息学分析。【结果】成功克隆到了该基因,分析其含996 bp的开放阅读框(ORF),编码331个氨基酸,含有2个保守结构域(2OG-FeII_Oxy和DIOX_N),属于亲水性蛋白。氨基酸序列系统进化树分析表明蓝莓VcGA2ox2蛋白与山茶科Cs GA2ox2、Cr GA2ox2亲缘关系较近;q RT-PCR分析结果显示VcGA2ox2在蓝莓花、叶、茎、果和根中均有表达,且具有组织特异性,其中在根中表达量最高。【结论】GA_(3)处理能上调蓝莓果实2个时期中VcGA2ox2表达,推测GA_(3)处理能够诱导GA2ox2高表达,促进蓝莓果实中GA的失活,从而抑制胚珠发育,获得无籽蓝莓果实。 展开更多
关键词 无籽蓝莓 外源GA_(3) VcGA2ox2 分子克隆与表达
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AtGA20ox2基因过表达载体构建及遗传转化植株表型分析 被引量:1
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作者 刘文睿 殷伊君 +5 位作者 陈叶 周爱林 李莲凤 黄荣耀 王艳红 周丽娟 《昆明学院学报》 2025年第3期63-69,共7页
为探究AtGA20ox2基因在拟南芥中的生物学功能,利用同源重组技术成功构建pC1300-35S:AtGA20ox2-eGFP高表达载体,并通过农杆菌花序侵染及抗生素筛选,获得AtGA20ox2稳定高表达的T_3代拟南芥阳性克隆苗.以野生型为对照,对AtGA20ox2高表达及... 为探究AtGA20ox2基因在拟南芥中的生物学功能,利用同源重组技术成功构建pC1300-35S:AtGA20ox2-eGFP高表达载体,并通过农杆菌花序侵染及抗生素筛选,获得AtGA20ox2稳定高表达的T_3代拟南芥阳性克隆苗.以野生型为对照,对AtGA20ox2高表达及突变体植株表型进行对比分析发现,高表达植株花期较野生型提前,叶绿素含量降低12.26%,类胡萝卜素含量升高56.32%,叶长提高53.53%,叶面积增大77.64%;而T-DNA突变体植株表型与之相反,但显著程度明显下降,与野生型相比,突变体材料总叶绿素含量提升1.95%,类胡萝卜素含量降低14.94%,叶长减少13.55%,叶面积减少16.57%.说明AtGA20ox2在叶绿素合成、叶片发育、花发育等方面均具有调控作用.研究结果为进一步探究AtGA20ox2基因在植物生长发育中的功能提供了材料制备方法和相关数据支撑. 展开更多
关键词 拟南芥 AtGA20ox2 植物表达载体构建 赤霉素
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OsGA20ox2基因过量表达对水稻性状的影响 被引量:4
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作者 乔枫 王春连 +1 位作者 陈志 耿贵工 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期25-31,共7页
为研究水稻赤霉素20-氧化酶2(OsGA20ox2)基因的过量表达对水稻株高和生长发育的影响,通过RT-PCR扩增OsGA20ox2基因并构建该基因的过量表达载体pS12Q,采用农杆菌介导法遗传转化水稻,获得了高秆转基因植株。获得T0代的85株中,对其叶片基因... 为研究水稻赤霉素20-氧化酶2(OsGA20ox2)基因的过量表达对水稻株高和生长发育的影响,通过RT-PCR扩增OsGA20ox2基因并构建该基因的过量表达载体pS12Q,采用农杆菌介导法遗传转化水稻,获得了高秆转基因植株。获得T0代的85株中,对其叶片基因组DNA进行Hyg基因扩增,发现其中2株为转基因植株且表现为高秆。分析其T2代表型,高秆植株与对照相比,株高增加9.41%(P<0.05);穗颈长增加15.62%(P<0.05);倒1节间长度增加8.46%(P<0.05);穗长增加7.98%(P<0.05);穗粒数增加6.8%(P<0.05);分蘖数增加了12.5%(P<0.05);百粒重增加2.6%(P<0.05);开花提前10天。这些性状导致高秆植株的产量增加,生育周期缩短。RT-PCR结果显示OsGA20ox2基因在高秆植株茎中的表达高于对照,促进了水稻茎的延伸。结果表明OsGA20ox2基因的过量表达影响了水稻的株高和生长发育。 展开更多
关键词 水稻 OsGA20ox2 过量表达 高秆 生长发育
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督脉电针对慢性脑缺血大鼠OX2R及其配体表达的影响
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作者 刘瑜 陈洪琳 +2 位作者 罗正凯 王淑荣 刘丹 《中医药学报》 CAS 2017年第1期57-59,共3页
目的:研究督脉电针在慢性脑缺血时大鼠脑食欲素受体-2(OX2R)及其配体在不同时间点缺血后的变化。方法:实验中运用分次结扎双侧颈总动脉法建立慢性脑缺血模型,将Wistar大鼠分4组,造模成功后给予督脉电针干预,免疫组织化学法观察OX2R的表... 目的:研究督脉电针在慢性脑缺血时大鼠脑食欲素受体-2(OX2R)及其配体在不同时间点缺血后的变化。方法:实验中运用分次结扎双侧颈总动脉法建立慢性脑缺血模型,将Wistar大鼠分4组,造模成功后给予督脉电针干预,免疫组织化学法观察OX2R的表达,同时运用ELISA技术检测各组大鼠额叶皮质区Orexin-A和Orexin-B的总含量变化。结果:1个月、2个月时,模型组OX2R及其配体表达高于正常组,同时呈递增趋势;在相同时间进行组间比较,1个月时,模型组和针刺治疗组OX2R及其配体的表达无显著差别,立即针刺组OX2R及其配体的表达较模型组有升高;2个月时针刺治疗组OX2R及其配体表达较模型组有明显升高,而立即针刺组与针刺治疗组相比OX2R及其配体表达有升高。结论:实验观察到OX2R及其配体的表达在1个月和2个月时随着时间延长而升高,经过督脉电针干预后促进了OX2R及其配体表达,同时观察到早期干预对OX2R及其配体表达的影响优于针刺治疗组。 展开更多
关键词 督脉电针 慢性脑缺血 OREXIN ox2R
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葡萄赤霉素合成关键基因VvGA20ox2的克隆、亚细胞定位和表达分析 被引量:5
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作者 高世敏 董阳 +1 位作者 王武 陶建敏 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期1331-1338,共8页
本研究建立在对金手指葡萄果形转录组分析的基础上,通过分析样品间表达差异发现,与对照相比,GA20ox2基因的转录水平在GA3处理后有显著差异。为了进一步从分子水平阐述GA20ox2在赤霉素合成途径中的作用机理,本研究以金手指葡萄幼果为材料... 本研究建立在对金手指葡萄果形转录组分析的基础上,通过分析样品间表达差异发现,与对照相比,GA20ox2基因的转录水平在GA3处理后有显著差异。为了进一步从分子水平阐述GA20ox2在赤霉素合成途径中的作用机理,本研究以金手指葡萄幼果为材料,克隆了GA20ox2基因,分析了此基因碱基序列特征,并通过构建融合表达载体对其进行亚细胞定位分析。研究结果表明,克隆了葡萄赤霉素合成途径中的VvGA20ox2基因,测序得CDS全长为1 134 bp,编码377个氨基酸。VvGA20ox2编码的氨基酸序列与NCBI上其他物种GA20ox序列相似性在51%~67%,其中该基因与可可(EOX92603.1)和杨树(PNT28192.1)的亲缘关系较近。该基因定位在细胞核和细胞膜中。外源GA3处理后的成熟葡萄果实与对照相比纵径显著伸长,且在幼果中该基因表达量在一段时间内明显上升,推测VvGA20ox2基因可能参与葡萄果形拉长的调控。 展开更多
关键词 葡萄 赤霉素 VvGA20ox2 亚细胞定位 表达分析
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‘南通小方柿’cDNA文库构建及DkGA2ox2调控因子的筛选 被引量:2
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作者 叶夏林 曹丽芳 +2 位作者 董雨菡 侯应军 渠慎春 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2022年第21期7082-7090,共9页
本研究利用酵母单杂技术筛选DkGA2ox2基因上游转录因子,为进一步研究其表达调控机制提供理论基础。利用HiTAIL-PCR技术获得启动子序列,连入诱饵载体,转化进诱饵菌株。利用Gateway技术构建‘南通小方柿’cDNA文库,再共转化诱饵菌株,筛选... 本研究利用酵母单杂技术筛选DkGA2ox2基因上游转录因子,为进一步研究其表达调控机制提供理论基础。利用HiTAIL-PCR技术获得启动子序列,连入诱饵载体,转化进诱饵菌株。利用Gateway技术构建‘南通小方柿’cDNA文库,再共转化诱饵菌株,筛选得到转录因子。通过HiTAIL-PCR共获得1205 bp启动子序列。构建的文库库容为1.4×107,插入片段大小在750~2000 bp间,重组率100%。初步筛选出HB蛋白、FLL3蛋白和EIN3/EIL1蛋白3个候选蛋白,为探索DkGA2ox2基因上游调控机制提供了理论支撑。 展开更多
关键词 DkGA2ox2 HiTAIL-PCR GATEWAY技术 CDNA文库 酵母单杂
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Orexin Directly Enhances the Excitability of Globus Pallidus Internus Neurons in Rat by Co-activating OX1 and OX2 Receptors 被引量:7
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作者 He-Ren Gao Qian-Xing Zhuang +6 位作者 Yong-Xiao Zhang Zhang-Peng Chen Bin Li Xiao-Yang Zhang Yi-Ting Zhong Jian-Jun Wang Jing-Ning Zhu 《Neuroscience Bulletin》 SCIE CAS CSCD 2017年第4期365-372,共8页
Orexin, released from the hypothalamus, has been implicated in various basic non-somatic functions including feeding, the sleep-wakefulness cycle, emotion,and cognition. However, the role of orexin in somatic motor co... Orexin, released from the hypothalamus, has been implicated in various basic non-somatic functions including feeding, the sleep-wakefulness cycle, emotion,and cognition. However, the role of orexin in somatic motor control is still little known. Here, using whole-cell patch clamp recording and immunostaining, we investigated the effect and the underlying receptor mechanism of orexin-A on neurons in the globus pallidus internus(GPi),a critical structure in the basal ganglia and an effective target for deep brain stimulation therapy. Our results showed that orexin-A induced direct postsynaptic excitation of GPi neurons in a concentration-dependent manner.The orexin-A-induced excitation was mediated via co-activation of both OX1 and OX2 receptors. Furthermore, the immunostaining results showed that OX1 and OX2 receptors were co-localized in the same GPi neurons. These results suggest that the central orexinergic system actively modulates the motor functions of the basal ganglia via direct innervation on GPi neurons and presumably participates in somatic-non-somatic integration. 展开更多
关键词 OREXIN OX1 receptor ox2 receptor Globus pallidus internus Basal ganglia
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OsABA8ox2, an ABA catabolic gene, suppresses root elongation of rice seedlings and contributes to drought response 被引量:5
8
作者 Yan Zhang Xiaoping Wang +6 位作者 Yanzhong Luo Lan Zhang Yuan Yao Lu Han Zhenhua Chen Lei Wang Yubin Li 《The Crop Journal》 SCIE CAS CSCD 2020年第3期480-491,共12页
In rice, OsABA8ox encodes abscisic acid(ABA) 8′-hydroxylase, which catalyzes the committed step of ABA catabolism. The contribution of ABA catabolism in root development remains unclear. We investigated the role of O... In rice, OsABA8ox encodes abscisic acid(ABA) 8′-hydroxylase, which catalyzes the committed step of ABA catabolism. The contribution of ABA catabolism in root development remains unclear. We investigated the role of OsABA8ox2 in root growth and development and drought response. GUS staining results showed that OsABA8ox2 was expressed mainly in roots at seedling stage and was strongly expressed in the meristematic zone of the radicle. OsABA8ox2 expression in roots was markedly decreased after 0.5 h polyethylene glycol(PEG) treatment and increased after 0.5 h rehydration, implying that OsABA8ox2 is a drought-responsive gene.OsABA8ox2 knockout mediated by the CRISPR-Cas9 system increased drought-induced ABA and indole-3-acetic acid accumulation in roots, conferred increased ABA sensitivity, and promoted a more vertically oriented root system architecture(RSA) beneficial to drought tolerance.OsABA8ox2 overexpression suppressed root elongation and increased stomatal conductance and transpiration rate. Consequently, OsABA8ox2 knockout dramatically improved rice drought tolerance, whereas OsABA8ox2 overexpression seedlings were hypersensitive to drought stress,suggesting that OsABA8ox2 contributes to drought response in rice. Compared with wild type,functional leaves of OsABA8ox2 knockout seedlings showed higher ABA levels, whereas overexpression lines showed lower ABA levels, suggesting that OsABA8ox2, as an ABA catabolic gene, modulates ABA concentration through ABA catabolism. OsABA8ox2 and OsABA8ox3 were both localized in the endoplasmic reticulum. Together, these results indicate that OsABA8ox2 suppresses root elongation of rice seedlings, increases water transpiration, and contributes to drought response through ABA catabolism, and that OsABA8ox2 knockout dramatically improves rice drought tolerance. They highlight the key role of ABA catabolism mediated by OsABA8ox2 on root growth and development. OsABA8ox2, as a novel RSA gene, would be a potential genetic target for the improvement of rice drought tolerance. 展开更多
关键词 ABA suppresses root elongation of rice seedlings and contributes to drought response OsABA8ox2 an ABA catabolic gene
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超越传统的OX2发动机
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作者 晓军 《轿车情报》 2000年第5期32-32,共1页
关键词 汽车发动机 ox2发动机 活塞 磨损 运动速度
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肺癌患者血浆SHOX2基因甲基化微滴数字PCR检测临床意义 被引量:8
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作者 王南 李卓伦 +1 位作者 谢昕 沈燕 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2018年第17期1241-1246,共6页
目的应用微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)技术检测肺癌患者血浆中人矮小同源盒基因2(short stature homeobox2,SHOX2)基因甲基化水平,并探讨SHOX2基因甲基化、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、神经元特异性烯醇化酶(ne... 目的应用微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)技术检测肺癌患者血浆中人矮小同源盒基因2(short stature homeobox2,SHOX2)基因甲基化水平,并探讨SHOX2基因甲基化、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)和细胞角蛋白19片段(cytokeratin-19-fragment,CYFRA21-1)检测辅助诊断肺癌的临床价值。方法收集2017-07-01-2017-12-30在郑州大学第一附属医院就诊的肺癌患者和健康体检者的标本,80例肺癌患者外周血标本作为肺癌组,其中30例肺癌患者癌组织标本为肺癌组织组。40名健康体检者外周血标本作为对照组。ddPCR检测SHOX2基因甲基化水平,电化学发光法检测血清中CEA、NSE、CA125和CYFRA21-1水平,并结合肺癌患者临床病理特征进行关联性分析。结果 80例肺癌患者血浆中SHOX2基因甲基化阳性率为71.25%(57/80),高于对照组的2.50%(1/40),差异有统计学意义,χ~2=50.473,P<0.001。30例肺癌患者血浆与匹配的组织标本中SHOX2基因甲基化检测结果符合率为90.0%(27/30),χ~2=1.33,P=0.25。受试者工作特征(receiver operating characteristics curve,ROC)曲线分析显示,SHOX2基因甲基化、CEA、CA125、NSE和CYFRA21-1诊断肺癌曲线下面积(area under curve,AUC)值分别为0.906、0.767、0.642、0.693和0.845。CEA、CA125、NSE和CYFRA21-14项联合检测的敏感性为86.25%(69/80),特异性为82.50%(33/40),AUC值为0.922(95%CI为0.859~0.963);5项指标联合检测的敏感性为93.75%(75/80),特异性为95.00%(38/40),AUC值为0.959(95%CI为0.907~0.987)。SHOX2基因甲基化与CEA、CA125、NSE、CYFRA21-1水平相关系数分别为0.355、0.229、0.220和0.578,差异有统计学意义,均P<0.05。SHOX2基因甲基化与肺癌患者性别、年龄、吸烟状况之间无关联,均P>0.05。SHOX2基因甲基化与病理类型(P=0.042)和TNM分期(P=0.039)有关。腺癌中SHOX2基因甲基化阳性率(58.97%,23/39)低于鳞癌(77.27%,17/22)和小细胞肺癌(89.47%,17/19);Ⅲ和Ⅳ期肺癌患者SHOX2基因甲基化阳性率分别为77.42%(24/31)和85.71%(18/21),高于Ⅰ(40.00%,4/10)和Ⅱ期(61.11%,11/18)。结论 ddPCR可检测肺癌患者血浆中SHOX2基因甲基化,与匹配组织中检测结果一致性较好。SHOX2基因高甲基化与肺癌发生发展有关,联合CEA、NSE、CA125和CYFRA21-1检测可提高诊断效能,提示SHOX2基因甲基化可作为一种非侵入性的肺癌肿瘤标志物。 展开更多
关键词 肺癌 SHox2基因甲基化 肿瘤标志物 微滴数字PCR
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梨矮生相关基因转录组筛选与功能分析
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作者 吝茹雪 王斐 +7 位作者 张艳杰 马力 刘肖烽 李舒然 刘亚龙 王晨 姜淑苓 欧春青 《园艺学报》 北大核心 2025年第3期545-560,共16页
为筛选梨矮生相关基因并分析其功能,以12个株型不同的梨品种(系)为试材,于新梢生长期测定其新梢长度和节间长度;利用转录组测序技术在‘早酥’(普通型)、‘锦香’(半矮生型)和‘中矮1号’(矮生型)梨不同时期生长点、叶片和韧皮部中筛选... 为筛选梨矮生相关基因并分析其功能,以12个株型不同的梨品种(系)为试材,于新梢生长期测定其新梢长度和节间长度;利用转录组测序技术在‘早酥’(普通型)、‘锦香’(半矮生型)和‘中矮1号’(矮生型)梨不同时期生长点、叶片和韧皮部中筛选差异表达基因,并结合在12个品种(系)新梢韧皮部中的表达验证,筛选与矮生性状相关的候选基因,将候选基因PcGA2ox2转化烟草分析其功能。结果表明,‘早酥’‘锦香’和‘中矮1号’的新梢长度在新梢生长初期差异较小,在生长中后期矮生品种短于普通品种;6个普通型品种生长中后期的新梢长度和节间长度均显著长于6个矮生或半矮生型品种(系);‘早酥’‘锦香’和‘中矮1号’不同时期不同组织不同差异分组两两样品间的差异表达基因数量在1882~5729之间,其中,在叶片和韧皮部中的表达量均随枝条长度缩短而升高或降低的差异表达基因有51个;选择在3个品种新梢韧皮部中差异表达的9个基因利用RT-qPCR在12个品种(系)中进行验证,有4个基因表现出在矮生型品种(系)中的表达显著高于或低于普通型品种(系)的趋势,确定为矮生性状相关候选基因;其中1个矮生候选基因为GA2ox家族基因。进一步在‘中矮1号’基因组中鉴定出了15个GA2ox家族成员,分析发现PcGA2ox2在矮生型品种新梢韧皮部中的表达显著高于普通型品种。将PcGA2ox2在烟草中过表达,转化植株较对照明显变小。综上,认为PcGA2ox2在‘中矮1号’的矮生中起重要作用。 展开更多
关键词 矮生 转录组分析 赤霉素 PcGA2ox
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PagGA2oxs基因家族鉴定及盐胁迫响应模式分析
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作者 任莹莹 毛建丰 安新民 《中国细胞生物学学报》 2025年第6期1226-1239,共14页
GA2ox(Gibberellin 2-oxidases)家族酶类在植物的生长发育和非生物逆境胁迫响应中发挥重要作用。该研究旨在系统鉴定杨树GA2ox家族成员并分析其表达模式。基于团队先前发表的84K杨(Populus alba×Populus glandulosa)的基因组数据,... GA2ox(Gibberellin 2-oxidases)家族酶类在植物的生长发育和非生物逆境胁迫响应中发挥重要作用。该研究旨在系统鉴定杨树GA2ox家族成员并分析其表达模式。基于团队先前发表的84K杨(Populus alba×Populus glandulosa)的基因组数据,采用生物信息学方法从84K杨中鉴定获得33个GA2ox基因。进一步对该基因家族成员进行了包括染色体定位、基因结构、理化性质、顺式作用元件、共线性关系、表达模式以及蛋白质互作网络构建等在内的系统分析。研究结果表明PagGA2oxs基因成员可被划分为两个亚家族,每个亚家族都具有相似的基因结构和保守的结构域。通过启动子区域的顺式作用元件分析,发现这些基因富含与胁迫响应、激素信号转导以及植物生长发育相关的顺式作用元件。共线性分析揭示了PagGA2oxs与拟南芥之间存在19个共线性事件,为理解GA2ox基因家族的进化提供了线索。在表达模式分析中,观察到该基因家族在茎、节间中表达量较高,还发现PagGA2ox6、PagGA2ox10、PagGA2ox14、PagGA2ox15、PagGA2ox25、PagGA2ox26、PagGA2ox32参与了盐胁迫响应,暗示它们可能通过与DELLA蛋白的互作,参与调控植物的生长发育和逆境响应,这些结果为理解木本植物GA2oxs基因的功能和解析耐盐机制提供了理论基础,也为培育耐盐性品种提供了潜在的候选基因。 展开更多
关键词 84K杨(Populus alba×Populus glandulosa) GA2ox 共线性分析 表达模式 盐胁迫
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Orexin系统与学习记忆 被引量:2
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作者 池恒 黄伟伟 唐吉友 《国际神经病学神经外科学杂志》 北大核心 2016年第1期69-72,共4页
Orexin系统在学习记忆以及睡眠-觉醒中具有重要的作用。Orexin与其受体结合后通过多种途径,如Gq蛋白/PLC/PKC途径,乙酰胆碱能、谷氨酸能、GABA能途径,离子途径等影响海马的学习记忆功能。睡眠剥夺可影响脑内Orexin-A水平,而睡眠剥夺本... Orexin系统在学习记忆以及睡眠-觉醒中具有重要的作用。Orexin与其受体结合后通过多种途径,如Gq蛋白/PLC/PKC途径,乙酰胆碱能、谷氨酸能、GABA能途径,离子途径等影响海马的学习记忆功能。睡眠剥夺可影响脑内Orexin-A水平,而睡眠剥夺本身同时又可影响海马的学习记忆功能。因此,研究Orexin-A及其受体对睡眠-觉醒的调节并参与学习记忆的作用机制,对寻找新靶点防治睡眠障碍以及所造成的学习记忆功能损害具有重要的临床意义。 展开更多
关键词 OREXIN-A OX1R/ox2R 学习记忆 海马 皮质
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慢性脑缺血大鼠脑OX_2R的表达 被引量:5
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作者 吕瑞娟 张博爱 贾延劼 《中国实用神经疾病杂志》 2007年第1期78-80,共3页
目的研究慢性脑缺血Orexin受体-2(OX2R)的表达。方法通过结扎双侧颈总动脉建立脑缺血模型;用水迷宫进行行为学评价;双标免疫荧光观察OX2R的表达。结果缺血15d时大鼠的学习记忆能力明显减退,1个月、2个月较缺血15d模型组学习记忆能力有... 目的研究慢性脑缺血Orexin受体-2(OX2R)的表达。方法通过结扎双侧颈总动脉建立脑缺血模型;用水迷宫进行行为学评价;双标免疫荧光观察OX2R的表达。结果缺血15d时大鼠的学习记忆能力明显减退,1个月、2个月较缺血15d模型组学习记忆能力有所好转。同时,缺血15d时OX2R在神经元的表达明显增高,1个月时OX2R的表达较15d时明显下降,2个月时OX2R的表达再次增高;此外,OX2R在神经纤维亦有表达其变化趋势同神经元。组织学示15d时部分细胞萎缩,1个月时大部分细胞变形萎缩,2月时部分细胞形态恢复正常。结论提示脑缺血的早期OX2R可能有诱导细胞凋亡的作用,而缺血的后期有神经保护作用。 展开更多
关键词 慢性脑缺血 OREXIN ox2R 大鼠
暂未订购
氯丙咪嗪对大鼠增食素系统mRNA表达的影响
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作者 樊红琨 李德恒 +2 位作者 张桂红 王书春 乔鹏 《医药论坛杂志》 2010年第12期17-19,22,共4页
目的观察皮下注射氯丙咪嗪(CLI)对成年大鼠增食素(orexin)系统各成分mRNA表达的影响。方法 16只大鼠被随机分为两组,注射等量的CLI(20 mg/kg)和生理盐水3次。第3次注射后2h将大鼠断头处死,收集脑组织行半定量RT-PCR测定额叶皮层、海马... 目的观察皮下注射氯丙咪嗪(CLI)对成年大鼠增食素(orexin)系统各成分mRNA表达的影响。方法 16只大鼠被随机分为两组,注射等量的CLI(20 mg/kg)和生理盐水3次。第3次注射后2h将大鼠断头处死,收集脑组织行半定量RT-PCR测定额叶皮层、海马、下丘脑orexin前体和orexin受体的mRNA。结果与生理盐水对照组相比,在额叶皮层、海马和下丘脑,CLI组的orexin前体和orexin2型受体(OX2R)mRNA表达显著减少;但orexin 1型受体(OX1R)mRNA在3个脑区的变化均不显著。结论 CLI抑制了大鼠脑内orexin前体和OX2RmRNA的表达。 展开更多
关键词 氯丙咪嗪 OREXIN OX1R ox2R
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CRISPR/Cas 9基因编辑技术降低贵州禾株高研究 被引量:3
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作者 郭洪刚 曹雪娇 +1 位作者 曾晓芳 赵德刚 《种子》 北大核心 2020年第7期1-5,11,共6页
为获得株高降低的贵州禾水稻新种质,以贵州禾高秆糯稻材料黎平杂边禾为研究材料,根据CRISPR/Cas 9靶位点设计原则设计水稻OsGA20ox2基因的特异性靶点sgRNA序列,构建水稻OsGA20ox2基因的CRISPR/Cas 9定点突变载体,利用农杆菌介导的愈伤... 为获得株高降低的贵州禾水稻新种质,以贵州禾高秆糯稻材料黎平杂边禾为研究材料,根据CRISPR/Cas 9靶位点设计原则设计水稻OsGA20ox2基因的特异性靶点sgRNA序列,构建水稻OsGA20ox2基因的CRISPR/Cas 9定点突变载体,利用农杆菌介导的愈伤转化法遗传转化黎平杂边禾,通过潮霉素筛选,以及PCR分子检测,获得16株转基因植株。对筛选获得的转基因植株基因进行测序,获得7株OsGA20ox2基因靶位点被编辑的突变转基因植株。研究表明,T 1代突变体植株株高比黎平杂边禾降低了29.6%。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas 9 贵州禾 株高 OsGA20ox2基因
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葡萄VvGA2ox1基因克隆、亚细胞定位及时空表达分析 被引量:10
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作者 王西成 王晨 +2 位作者 房经贵 孙欣 冷翔鹏 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期29-34,共6页
以‘藤稔’葡萄(Vitis vinifera×V.labrusca‘Fujiminori’)的花序、叶片和果实为试材,利用RT-PCR结合RACE技术,成功克隆了葡萄VvGA2ox1基因的cDNA序列,全长1 331 bp,共编码332个氨基酸。该基因在GenBank数据库的登录号为JQ608472... 以‘藤稔’葡萄(Vitis vinifera×V.labrusca‘Fujiminori’)的花序、叶片和果实为试材,利用RT-PCR结合RACE技术,成功克隆了葡萄VvGA2ox1基因的cDNA序列,全长1 331 bp,共编码332个氨基酸。该基因在GenBank数据库的登录号为JQ608472。序列比对结果表明:VvGA2ox1与矮牵牛和棉花同源基因的氨基酸序列相似度分别为71.26%和71.08%。进一步构建了VvGA2ox1的亚细胞定位表达载体,定位结果显示,VvGA2ox1蛋白定位于细胞膜上。半定量RT-PCR与定量RT-PCR结果均表明,VvGA2ox1在葡萄花序、叶片和果实等器官中均有表达,但在花序、幼叶和小果中的表达水平较高。 展开更多
关键词 葡萄 VvGA2ox1基因 亚细胞定位 时空表达
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GA2ox1氧化酶基因的克隆及原核表达 被引量:7
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作者 常丽 赵小英 +3 位作者 郭明 林建中 李秀山 刘选明 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1099-1104,共6页
采用RT-PCR从拟南芥基因组中克隆到GA2ox1基因,通过Gateway克隆技术构建原核重组表达载体pD-EST17-GA2ox1,并转化大肠杆菌BL(21)star,对蛋白原核表达条件进行优化。结果表明,最佳表达条件为温度30℃、IPTG浓度0.2 mmol/L、诱导6 h。蛋... 采用RT-PCR从拟南芥基因组中克隆到GA2ox1基因,通过Gateway克隆技术构建原核重组表达载体pD-EST17-GA2ox1,并转化大肠杆菌BL(21)star,对蛋白原核表达条件进行优化。结果表明,最佳表达条件为温度30℃、IPTG浓度0.2 mmol/L、诱导6 h。蛋白表达形式为包涵体,与Biotech对GA2ox1基因在大肠杆菌中的表达情况推测的结论一致。重组蛋白分子质量约为40 kD,经Ni Sepharose亲和层析柱纯化和Western blot鉴定得纯度90%以上的GA2ox1重组蛋白。研究结果为GA2ox1抗体制备及蛋白功能的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 GA2ox1基因 Gateway克隆 原核表达 纯化 WESTERN BLOT
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苹果茎尖组织中GA2ox基因的结构特征及蛋白序列的生物信息学分析 被引量:6
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作者 白牡丹 王彩虹 +2 位作者 田义轲 陈宝印 刘云龙 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第5期55-59,共5页
GA2ox是赤霉素合成代谢的关键酶,以苹果品种富士茎尖为供试材料,应用同源克隆技术克隆GA2ox基因,获得长度为1 656 bp的DNA序列和1 014 bp cDNA序列。对比分析表明,DNA序列存在3个外显子和2个内含子。GA2ox的开放性阅读框编码337个氨基... GA2ox是赤霉素合成代谢的关键酶,以苹果品种富士茎尖为供试材料,应用同源克隆技术克隆GA2ox基因,获得长度为1 656 bp的DNA序列和1 014 bp cDNA序列。对比分析表明,DNA序列存在3个外显子和2个内含子。GA2ox的开放性阅读框编码337个氨基酸残基,推断其相对分子量为37.679 8 kDa,等电点为6.41。蛋白质结构域检索表明,GA2ox属于依赖于2-酮戊二酸的双加氧酶家族成员;氨基酸同源性分析表明,GA2ox与已报道的其他植物的GA2ox氨基酸序列同源性为51%~97%;氨基酸聚类分析表明,苹果和梨首先聚类,其次是毛果杨。 展开更多
关键词 苹果 GA2ox 保守结构域 氨基酸同源性分析 氨基酸聚类分析
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玉米GA2ox类基因的发掘及其在苗期干旱胁迫后的表达分析 被引量:4
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作者 姜志磊 蒋超 +1 位作者 金峰学 李毅丹 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期58-63,70,共7页
GA2ox类基因是玉米赤霉素合成途径中的一类负调控基因,其表达产物(GA 2-oxidases)可通过降解赤霉素及其前体物质,调控植物中赤霉素的含量,进而影响植株的诸多表型。研究中发掘到玉米ZmGA2ox类基因13个,进一步分析各基因的基因结构以及... GA2ox类基因是玉米赤霉素合成途径中的一类负调控基因,其表达产物(GA 2-oxidases)可通过降解赤霉素及其前体物质,调控植物中赤霉素的含量,进而影响植株的诸多表型。研究中发掘到玉米ZmGA2ox类基因13个,进一步分析各基因的基因结构以及在不同组织中的表达状况。通过对各基因干旱胁迫下转录变化的分析发现,只有ZmGA2ox3;1、ZmGA2ox3;2、ZmGA2ox6、ZmGA2ox7;3和ZmGA2ox9共5个ZmGA2ox类基因在干旱胁迫后发生了显著的转录变化。初步鉴定出ZmGA2ox类基因中与玉米耐旱响应相关的候选基因。 展开更多
关键词 玉米 ZmGA2ox类基因 干旱胁迫
原文传递
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