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转录调控因子CBF1(RBP-Jκ)对Cbfa1和Ose2元件启动子活性的影响 被引量：2
1
作者 王胜朝 KAWASHIMA Nobuyuki +5 位作者 SAKAMOTO Kei KATSUBE Ken-Ichi SHINDO Kentaro TAKAGI Minoru SUDA Hideaki 史俊南 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2004年第12期659-662,共4页
目的探讨Notch信号转录调控因子CBF1(RBP-Jκ)对核心结合因子Cbfa1基因启动子和骨钙素基因启动子区域Ose2元件启动子活性的影响。方法构建CBF1真核表达载体pCMV-Tag4/CBF1;将梯度浓度pCMV-Tag4/CBF1和荧光素酶报告质粒共转染两成骨前体... 目的探讨Notch信号转录调控因子CBF1(RBP-Jκ)对核心结合因子Cbfa1基因启动子和骨钙素基因启动子区域Ose2元件启动子活性的影响。方法构建CBF1真核表达载体pCMV-Tag4/CBF1;将梯度浓度pCMV-Tag4/CBF1和荧光素酶报告质粒共转染两成骨前体细胞系Kusa-A1和Kusa-O,用双荧光素酶报告基因方法检测Cbfa1和Ose2元件启动子活性。结果随CBF1浓度增加,Kusa-A1和Kusa-O细胞中Cbfa1和Ose2元件启动子活性均逐渐提高。统计分析表明Kusa-A1细胞中1/40μg/μL实验组两启动子活性均与对照组差异显著;Kusa-O细胞中1/40μg/μL实验组Ose2元件启动子活性与对照组差异显著。结论转录调控因子CBF1可以促进Cbfa1和Ose2元件启动子活性,从而可能对细胞的成骨性分化有正调节作用。 展开更多
关键词 转录调控因子CBF1(RBP—Jκ) Cbfa1启动子 ose2元件 成骨前体细胞Kusa NOTCH信号
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Study of construction hTERP core promoter modified by OSE2 in osteosarcoma transcription target gene therapy
2
《中国临床康复》 CSCD 2002年第14期2166-2167,共2页
关键词 骨肉瘤 骨肿瘤 基因治疗 核心因子 ose2 HTERT 转录靶
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反映成骨细胞特异转录因子Runx2活性的细胞模型构建 被引量：1
3
作者 郭飞马 戴钟铨 +2 位作者 吴峰 商澎 李莹辉 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期157-161,共5页
目的构建稳定表达由6OSE2启动子驱动的萤火虫荧光素酶的小鼠C2C12成肌细胞,并筛选出能定量反映Runx2活性的细胞株。方法双酶切pUC57-6OSE2,获得启动子片段;插入到消化后的pGL4.14,构建真核表达载体;随后将其转染到C2C12细胞中;用潮霉素... 目的构建稳定表达由6OSE2启动子驱动的萤火虫荧光素酶的小鼠C2C12成肌细胞,并筛选出能定量反映Runx2活性的细胞株。方法双酶切pUC57-6OSE2,获得启动子片段;插入到消化后的pGL4.14,构建真核表达载体;随后将其转染到C2C12细胞中;用潮霉素B筛选获得稳定转染的细胞株C2C12-6OSE2-Luc。将Runx2瞬时转染到该细胞株中,鉴定其对Runx2的响应性。利用不同浓度的IGF-I和BMP2处理,通过Luc报告基因的活性增高,筛选出能够响应BMP2的细胞株。结果构建了p6OSE2-Luc表达载体,利用p6OSE2瞬时转染C2C12-Runx2细胞的相对荧光素酶活性是同样处置后的C2C12细胞的4倍。通过筛选获得C2C12-6OSE2-Luc细胞株。转染Runx2质粒后细胞的相对荧光素酶活性是转染空载体细胞的7倍。利用荧光素酶活性筛选出一株报告基因活性随BMP2处理增强的细胞株。结论构建了能定量反映成骨细胞Runx2活性的细胞模型,可以用于进一步Runx2的转录活性及信号传导途径的研究中。 展开更多
关键词 载体构建 C2C12成肌细胞 RUNX2 ose2
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人参皂苷对人体骨肉瘤细胞U_2OS增殖的影响 被引量：28
4
作者 张有为 窦德强 +1 位作者 陈英杰 姚新生 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期232-236,共5页
目的　为寻找人参中抑制骨肉瘤细胞增殖的活性成分。方法　采用细胞计数法检测了 2 7种从人参中得到的单体化合物对体外培养的人体骨肉瘤细胞 U2 OS增殖的影响 ;以流式细胞术分析 DNA含量 ,选择有抑制肿瘤细胞增殖作用的化合物对肿瘤细... 目的　为寻找人参中抑制骨肉瘤细胞增殖的活性成分。方法　采用细胞计数法检测了 2 7种从人参中得到的单体化合物对体外培养的人体骨肉瘤细胞 U2 OS增殖的影响 ;以流式细胞术分析 DNA含量 ,选择有抑制肿瘤细胞增殖作用的化合物对肿瘤细胞的细胞增殖周期的变化进行研究 ;另外 ,以荧光染色法检测了人参皂苷对细胞死亡率变化的影响。结果　对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用研究表明 ,在 5 μmol/ L 浓度下 ,人参皂苷 - Ro,- Rh1 ,- Rh2 ,- F1 和 - L8较明显地抑制了肿瘤细胞的增殖 ,人参皂苷 - Rg1 ,- F3,- Rf,PPT和 PT显著地抑制了肿瘤细胞的增殖 ;进一步对骨肉瘤细胞有抑制作用的化合物检测其对细胞增殖周期影响发现 :人参皂苷 - Ro,- Rf,- Rg1 ,- F1 ,- Rh2 ,PPT和 PT使处于 G0 / G1 期的细胞数目明显增多 ,伴随着 S期和 G2 + M期的细胞明显减少 ,说明这些化合物抑制了肿瘤细胞增殖周期的进行 ;与对照相比人参皂苷 - Rf1 ,- Rg1 ,- F1 和 PPT显著地促进了肿瘤细胞的细胞死亡现象。结论人参皂苷是通过阻止细胞增殖周期的 G0 / G1 期或促使细胞死亡两种方式抑制了肿瘤细胞 U2 展开更多
关键词 人参皂苷 骨肉瘤细胞U2OS 细胞增殖 细胞周期 细胞死亡
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蜂毒素诱导骨肉瘤细胞U_2OS凋亡与坏死的实验研究 被引量：22
5
作者 陈永强 朱振安 +2 位作者 郝永强 戴尅戎 张晨 《中西医结合学报》 CAS 2004年第3期208-209,共2页
目的 :研究蜂毒素是否能够诱导骨肉瘤细胞U2 OS凋亡与坏死。方法 :U2 OS经不同浓度蜂毒素处理后 ,采用台盼蓝排染法测定细胞增殖抑制率 ,利用单克隆抗体 ,通过流式细胞仪检测AnnexinV、Apo2 .7及Fas蛋白的表达。结果 :6 4mg/L蜂毒素作用... 目的 :研究蜂毒素是否能够诱导骨肉瘤细胞U2 OS凋亡与坏死。方法 :U2 OS经不同浓度蜂毒素处理后 ,采用台盼蓝排染法测定细胞增殖抑制率 ,利用单克隆抗体 ,通过流式细胞仪检测AnnexinV、Apo2 .7及Fas蛋白的表达。结果 :6 4mg/L蜂毒素作用U2 OS 12h、2 4h ,其坏死率在 80 %以上。 16mg/L、32mg/L蜂毒素对细胞增殖有明显抑制作用 ,并且可诱导细胞凋亡和坏死的产生 ,增加细胞Aap2 .7及Fas蛋白的表达。结论 :蜂毒素高剂量有明显杀伤U2 OS的作用 ,低剂量具有促细胞凋亡作用 ,并能上调Fas蛋白的表达。 展开更多
关键词 蜂毒素 骨肉瘤 肿瘤细胞 U2OS 细胞凋亡 细胞坏死 实验
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中药片仔癀胶囊对骨肉瘤U-2OS细胞诱导凋亡的作用 被引量：14
6
作者 张俐 于波 林建华 《中国骨伤》 CAS 2009年第4期265-268,共4页
目的:研究中药片仔癀对骨肉瘤U-2OS细胞的诱导凋亡作用。方法:①采用1月龄SD大鼠16只,雌雄各半,体重120g左右,随机分为2组(空白血清组和片仔癀治疗组),每组8只。空白血清组大鼠灌服PBS,片仔癀治疗组大鼠灌服中药片仔癀溶液。②人骨肉瘤U... 目的:研究中药片仔癀对骨肉瘤U-2OS细胞的诱导凋亡作用。方法:①采用1月龄SD大鼠16只,雌雄各半,体重120g左右,随机分为2组(空白血清组和片仔癀治疗组),每组8只。空白血清组大鼠灌服PBS,片仔癀治疗组大鼠灌服中药片仔癀溶液。②人骨肉瘤U-2OS细胞培养于含10%胎牛血清,青霉素100IU/ml,链霉素100μg/ml的RPMI1640培养液中,置于37℃、5%CO2饱和湿度的细胞培养箱中培养。用MTT法检测不同含药血清浓度对骨肉瘤U-2OS细胞增殖的影响,筛选对骨肉瘤U-2OS细胞作用最佳的片仔癀含药血清浓度。③在倒置相差显微镜和电镜下观察骨肉瘤U-2OS细胞形态。④TUNEL原位末端标记法检测细胞的凋亡。⑤提取基因DNA,琼脂糖凝胶电泳,以DNA琼脂糖凝胶电泳和透射电镜检测细胞凋亡。结果:①20%片仔癀含药血清对骨肉瘤细胞的增殖抑制作用最佳。②倒置相差显微镜观察可见空白血清组细胞呈梭形贴壁生长,在20%片仔癀胶囊含药血清组,可见部分细胞体积变小、变圆,细胞膜完整但出现发泡现象,折光性增强。随作用时间延长,变圆细胞逐渐增多,部分贴壁细胞皱缩、变圆、脱落,可见坏死细胞及碎片。③20%片仔癀胶囊含药血清组TUNEL检测阳性。④DNALadder电泳结果:含药血清组细胞基因DNA凝胶电泳出现明显的梯状带。⑤透射电镜观察染色质沿皱缩的核膜下凝聚,细胞表面出现凋亡小体。结论:中药片仔癀胶囊对骨肉瘤U-2OS细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用。 展开更多
关键词 细胞凋亡 中药 片仔癀 骨肉瘤U-2OS细胞
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黄芩素与黄芩苷的体外抗骨肉瘤作用的比较 被引量：4
7
作者 尹军强 陈会明 +3 位作者 罗文敏 沈靖南 郑先玉 贾强 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期133-135,共3页
目的探讨黄芩素与黄芩苷对骨肉瘤细胞系U2OS和U2OS/MTX300生长抑制和诱导凋亡的作用,并比较两者间的差别。方法应用MTT比色法,测定黄芩素与黄芩苷对U2OS和U2OS/MTX300细胞株增殖的影响,检测其抑制骨肉瘤细胞的时间、剂量效应;应用形态... 目的探讨黄芩素与黄芩苷对骨肉瘤细胞系U2OS和U2OS/MTX300生长抑制和诱导凋亡的作用,并比较两者间的差别。方法应用MTT比色法,测定黄芩素与黄芩苷对U2OS和U2OS/MTX300细胞株增殖的影响,检测其抑制骨肉瘤细胞的时间、剂量效应;应用形态学观察,测定黄芩素对U2OS和U2OS/MTX300细胞的凋亡作用,并进行细胞周期的分析。结果黄芩素对U2OS和U2OS/MTX300细胞的生长抑制及诱导凋亡的作用明显比黄芩苷强,且呈时间依赖和剂量依赖性。结论黄芩素在体外对骨肉瘤U2OS和U2OS/MTX300的抑制作用明显比黄芩苷强。 展开更多
关键词 黄芩素 黄芩苷 骨肉瘤细胞系U2OS 凋亡
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槲皮素对人骨肉瘤细胞U-2OS/MTX300增殖和凋亡的影响及其机制研究 被引量：12
8
作者 尹军强 谢显彪 +4 位作者 贾强 王晋 黄纲 邹昌业 沈靖南 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期611-614,共4页
目的:研究槲皮素(quercetin,Qu)对骨肉瘤细胞系U-2OS/MTX300增殖和凋亡的作用及其机制。方法:MTT法观察细胞增殖活性;Annexin V/PI染色检测凋亡;线粒体膜电位及细胞色素C的Western blot检测线粒体凋亡途径;持续活化Akt瞬时转染、Western... 目的:研究槲皮素(quercetin,Qu)对骨肉瘤细胞系U-2OS/MTX300增殖和凋亡的作用及其机制。方法:MTT法观察细胞增殖活性;Annexin V/PI染色检测凋亡;线粒体膜电位及细胞色素C的Western blot检测线粒体凋亡途径;持续活化Akt瞬时转染、Western blot检测Akt通路相关蛋白表达水平变化。结果:槲皮素可明显抑制耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞U-2OS/MTX300生长,并呈时间和剂量依赖性;Annexin V/PI可明显检测到细胞凋亡;进一步发现其作用机制是通过下调线粒体膜电位,促进细胞色素C向胞浆释放及抑制Akt磷酸化来实现。结论:槲皮素可显著抑制耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞系U-2OS/MTX300细胞增殖并诱导其凋亡,其机制与线粒体凋亡途径及抑制Akt活性有关。 展开更多
关键词 槲皮素 U-2OS/MTX300细胞 凋亡
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癌基因MDM2与异构酶PIN1在瘤细胞中的表达 被引量：3
9
作者 张向红 权芳 +1 位作者 李胜利 李宝树 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期103-105,共3页
目的　研究MDM 2癌基因产物与脯氨酰异构酶PIN1之间的相互关系。方法　在U2OS骨髓瘤细胞中分别用MDM2对PIN1的单抗通过免疫沉淀法分离出MDM2或PIN1的结合蛋白 ,再用Westernblot对蛋白进行分离。结果　U2OS骨髓瘤细胞的蛋白天然提取物中M... 目的　研究MDM 2癌基因产物与脯氨酰异构酶PIN1之间的相互关系。方法　在U2OS骨髓瘤细胞中分别用MDM2对PIN1的单抗通过免疫沉淀法分离出MDM2或PIN1的结合蛋白 ,再用Westernblot对蛋白进行分离。结果　U2OS骨髓瘤细胞的蛋白天然提取物中MDM 2与P1 8的共沉淀物移行位置与用PIN1单抗检测的免疫沉淀物的移行位置相同。同时PIN1与P90的共沉淀物的移行位置与用MDM2单抗检测的免疫沉淀物的移行位置相同。结论　U2OS骨髓瘤细胞中MDM2与PIN1形成稳定的复合物 ,这可能是MDM2在调控G2 /M过渡点的重要机制之一。 展开更多
关键词 MDM2癌蛋白 PIN1异构酶 瘤细胞 U2OS骨髓瘤
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OS/2的任务管理 被引量：5
10
作者 陈勇 耿技 刘心松 《小型微型计算机系统》 CSCD 北大核心 1992年第7期35-45,共11页
OS/2是第一个专门为个人计算机开发的单用户多任务操作系统.它的多任务特性、虚拟存储器管理等是其主要特点。本文从系统角度比较详细地阐述了它的多任务特性。首先介绍了OS/2的任务管理模型,包括其中所引用到的几个新颖的概念,然后讲述... OS/2是第一个专门为个人计算机开发的单用户多任务操作系统.它的多任务特性、虚拟存储器管理等是其主要特点。本文从系统角度比较详细地阐述了它的多任务特性。首先介绍了OS/2的任务管理模型,包括其中所引用到的几个新颖的概念,然后讲述了OS/2任务管理所采用的机制以及调度算法的实现方法,最后通过实例对OS/2的任务管理进行性能测试、分析和评价。 展开更多
关键词 操作系统 任务管理 OS/2
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MicroRNA-638在骨肉瘤中表达下调及对其细胞增殖的影响 被引量：3
11
作者 陈斌 符勇 +3 位作者 夏雪 郭伟明 金浩成 王晓旭 《中南医学科学杂志》 CAS 2017年第4期341-345,363,共6页
目的探讨miR-638在人骨肉瘤(OS)细胞增殖行为中的影响。方法通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNA-638在人OS组织及癌旁组织、人OS细胞株(MG63、U2OS、HOS、SaOS2)和正常人成骨NHOst细胞株中的表达;用LipofectamineTM2000转染miR... 目的探讨miR-638在人骨肉瘤(OS)细胞增殖行为中的影响。方法通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNA-638在人OS组织及癌旁组织、人OS细胞株(MG63、U2OS、HOS、SaOS2)和正常人成骨NHOst细胞株中的表达;用LipofectamineTM2000转染miR-638模拟物或抑制物,细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)检测转染后的吸光光度值,平板克隆形成实验检测菌落数量。结果 miR-638在各组细胞中均有表达;OS细胞株中miR-638的表达明显下调(P<0.05);高表达miR-638能抑制OS MG63和U2OS细胞的增殖(P<0.05)。结论miR-638高表达能抑制OS细胞的增殖。 展开更多
关键词 骨肉瘤 MG63 U2OS MicroRNA-638 细胞增殖
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构建裸鼠皮下荷瘤模型:人骨肉瘤细胞株MG63、U2OS和143B 被引量：4
12
作者 吴丽美 伍绍国 +3 位作者 陈卫文 周兰 朱金妹 鲍蓓 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第27期4277-4281,共5页
背景:多种细胞株参与骨肉瘤动物模型的和构建。目的:比较人骨肉瘤细胞株中MG63、U2OS和143B在裸鼠皮下的成瘤情况,为骨肉瘤的动物实验研究奠定基础。方法:将18只裸鼠随机等分成3组:MG63组、U2OS组和143B组,分别于各组裸鼠后侧背部皮下注... 背景:多种细胞株参与骨肉瘤动物模型的和构建。目的:比较人骨肉瘤细胞株中MG63、U2OS和143B在裸鼠皮下的成瘤情况,为骨肉瘤的动物实验研究奠定基础。方法:将18只裸鼠随机等分成3组:MG63组、U2OS组和143B组,分别于各组裸鼠后侧背部皮下注射MG63、U2OS和143B三种细胞株,观察成瘤情况。结果与结论:MG63和U2OS细胞株注射的裸鼠未能成瘤。143B细胞株注射的裸鼠于(6±1)d成瘤,成瘤率100%(6/6),肿瘤生长较迅速,2个月时平均瘤体体积为(3 475±1 544)mm3,荷瘤裸鼠存活时间为(68±10)d。苏木精-伊红染色显示瘤体组织中可见癌细胞成巢,核大深染,多分裂。说明143B细胞株成瘤良好,可用于骨肉瘤动物实验研究。 展开更多
关键词 骨肉瘤 小鼠 裸 肿瘤负荷 存活率分析 实验动物 骨及关节损伤动物模型 细胞株 裸鼠 动物模型 MG63 U2OS 143B 生长曲线
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PEEK-SPEEK-HA复合材料与U2OS细胞相容性研究 被引量：3
13
作者 倪卓 黄苇殷 +2 位作者 王应 吴耿锋 潘田光 《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第1期1-9,共9页
体外培养U2OS细胞,通过噻唑蓝（3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyltet razolium bromide,MTT）法研究新型聚醚醚酮-羟基磷灰石（polyetheretherketone-hydroxyapatite,PEEK-HA）生物复合材料对细胞增殖的影响.研究发现,聚醚... 体外培养U2OS细胞,通过噻唑蓝（3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyltet razolium bromide,MTT）法研究新型聚醚醚酮-羟基磷灰石（polyetheretherketone-hydroxyapatite,PEEK-HA）生物复合材料对细胞增殖的影响.研究发现,聚醚醚酮-磺化聚醚醚酮-羟基磷灰石（polyetheretherketone-sulfnated polyetheretherketone-hydroxyapatite,PEEK-SPEEK-HA）复合材料的细胞增殖作用较PEEK-HA复合材料强,且随着HA含量的增加细胞增殖作用增强,材料浸提液质量浓度为4-8 mg/m L时对细胞有较好的增殖促进作用.复合材料毒性级别为Ⅰ,对细胞无毒性.测定黏附率研究该材料对U2OS细胞的黏附特性,PEEKSPEEK-HA复合材料随着HA含量的增大,细胞黏附率增加,高于PEEK-HA复合材料组,表明加入HA和SPEEK能改善复合材料的黏附性能.采用流式细胞术研究材料对细胞凋亡的影响,发现加入SPEEK的PEEK-HA复合材料能抑制细胞发生早期凋亡,从而降低凋亡率.激光共聚焦和流式细胞仪检测该材料对细胞活性氧的影响发现,SPEEK引入复合材料能够降低细胞活性氧水平,降低细胞毒性.扫描电镜实验表明,U2OS细胞能够在PEEK-SPEEK-HA复合材料表面黏附、伸展和生长. 展开更多
关键词 聚醚醚酮-羟基磷灰石复合材料 U2OS骨瘤细胞 细胞增殖 细胞形态 细胞黏附 细胞凋亡 活性氧
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Fancd2os基因及其编码蛋白的生物信息学分析和表达谱鉴定 被引量：1
14
作者 李晓宾 杨红 +5 位作者 李婷 贾三三 温丽敏 白欣艳 王海龙 郭睿 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第7期670-676,共7页
目的利用生物信息学手段对Fancd2os基因及其编码蛋白进行结构分析和功能预测,并检测该基因在小鼠组织中的表达。方法利用生物信息学分析软件和技术对该基因及其编码蛋白的同源性、结构定位、理化性质及表达谱等特征进行分析和比对;采用... 目的利用生物信息学手段对Fancd2os基因及其编码蛋白进行结构分析和功能预测,并检测该基因在小鼠组织中的表达。方法利用生物信息学分析软件和技术对该基因及其编码蛋白的同源性、结构定位、理化性质及表达谱等特征进行分析和比对;采用半定量RT-PCR、实时定量PCR及Western blot法分别检测Fancd2os m RNA及其编码蛋白在雄性小鼠不同组织以及不同发育阶段睾丸组织的表达;利用免疫组织化学染色方法检测Fancd2os蛋白在小鼠曲细精管中的细胞定位。结果生物信息学分析表明小鼠Fancd2os蛋白的氨基酸系列与人、大鼠和牛的同源性分别为92.1%、97.8%和93.3%,该蛋白主要定位在细胞浆,二级结构以无规则卷曲和α螺旋为主,无信号肽,含有多个磷酸化位点;EST电子表达谱显示该基因主要在睾丸组织中表达;GEO数据库分析提示Fancd2os基因的表达可能与线粒体Clp P蛋白酶的表达密切相关;MGI Interaction Explorer数据库检索发现Fancd2os基因与95个mi RNA具有相互作用。Fancd2os基因及其编码蛋白在小鼠睾丸组织中表达量高,且具有明显的时序性,以8周龄小鼠表达水平最高;Fancd2os蛋白主要定位于曲细精管精母细胞和圆形精子细胞的胞质中。结论 Fancd2os基因为小鼠睾丸组织高表达基因,其表达水平随着睾丸的发育过程呈上调趋势,结合生物信息学分析结果,该基因可能与睾丸的发育及生精过程相关。 展开更多
关键词 Fancd2os 生物信息学 表达谱 小鼠 睾丸 基因表达
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熊果酸抑制骨肉瘤细胞的生物学功能 被引量：1
15
作者 裴祎 张晓晶 +7 位作者 邢浩 郑珂 商冠宁 王玉名 王巍 邱恩铎 薛峰 王广斌 《实用药物与临床》 CAS 2017年第7期748-751,共4页
目的检测熊果酸对骨肉瘤细胞生长转移的影响。方法将不同浓度熊果酸分别作用于人骨肉瘤细胞系U2OS细胞,MTT实验检测细胞增殖情况,Hochest 33258染色检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞转移情况。利用Western blot方法检测熊果酸对... 目的检测熊果酸对骨肉瘤细胞生长转移的影响。方法将不同浓度熊果酸分别作用于人骨肉瘤细胞系U2OS细胞,MTT实验检测细胞增殖情况,Hochest 33258染色检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞转移情况。利用Western blot方法检测熊果酸对相关蛋白的作用。结果 10、20、30μg/mL熊果酸处理U2OS细胞24 h后,对其增殖的抑制率分别为39.51%±0.75%、48.91%±3.64%、56.49%±1.54%。熊果酸通过抑制cyclin d1蛋白抑制U2OS细胞的增殖,通过调节bcl-2和bax蛋白促进U2OS细胞的凋亡。Transwell实验发现,熊果酸可以剂量依赖的方式抑制U2OS细胞的迁移,其抑制作用是通过其对MMP2蛋白的抑制实现的。结论熊果酸可以抑制骨肉瘤细胞系U2OS细胞的增殖与转移,可以作为临床骨肉瘤治疗的潜在化疗药物进行进一步探索。 展开更多
关键词 熊果酸 U2OS 骨肉瘤 增殖 凋亡 迁移
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人端粒酶逆转录酶基因转染U2OS细胞对其基质金属蛋白酶2活性的影响 被引量：1
16
作者 姜成威 杨媚 +2 位作者 石英爱 于晓霞 吴珊 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期812-816,共5页
目的:观察人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因转染U2OS细胞对其基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响,探讨hTERT基因与端粒酶的关系及端粒酶活性在肿瘤浸润和转移中的作用。方法:利用重组质粒PCI-Neo-hTERT转染人骨肉瘤细胞系U2OS,选取转染的2个阳性... 目的:观察人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因转染U2OS细胞对其基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响,探讨hTERT基因与端粒酶的关系及端粒酶活性在肿瘤浸润和转移中的作用。方法:利用重组质粒PCI-Neo-hTERT转染人骨肉瘤细胞系U2OS,选取转染的2个阳性克隆株进行实验,同时以未转染的U2OS细胞为对照。通过RT-PCR和TRAP-ELISA法检测阳性克隆株hTERT基因的转染效果,明胶酶谱法和RT-PCR检测转染hTERT基因对细胞MMP-2的表达和活性的影响。结果:与对照组比较,2个阳性克隆株可见特异性hTERT表达,并表现出明显的端粒酶活性状态(ΔA>0.2 U)。阳性克隆株MMP-2 mRNA的表达无明显改变(P>0.05),而酶原型MMP-2减少(P<0.01)。结论:hTERT稳定转染克隆U2OS细胞株中异位表达hTERT可以产生端粒酶活性,而且端粒酶活性的出现,可能通过调节MMP的分泌影响细胞外基质成分的降解和构建而对肿瘤的浸润和转移产生一定影响。 展开更多
关键词 HTERT基因 U2OS细胞 端粒酶活性 基质金属蛋白酶
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siRNA对骨肉瘤U2OS细胞株MDM2-mRNA表达的抑制作用 被引量：2
17
作者 吕佳音 吴丹凯 +3 位作者 张舵舵 秦中国 吴丹华 赵燕颖 《中国实验诊断学》 2007年第7期878-881,共4页
目的研究载体介导的siRNA(small interfere RNA)技术对骨肉瘤细胞株U2OS中MDM2-mRNA表达的抑制作用。方法依据设计siRNA的原则,以MDM2为靶基因设计并合成有小发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,再克隆到载体PGCsilencerTM中构建... 目的研究载体介导的siRNA(small interfere RNA)技术对骨肉瘤细胞株U2OS中MDM2-mRNA表达的抑制作用。方法依据设计siRNA的原则,以MDM2为靶基因设计并合成有小发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,再克隆到载体PGCsilencerTM中构建重组体(PGCsilencerTM-MDM2 siRNA)。实验分转染重组质粒组,转染阴性对照质粒组和只加脂质体的空白组;RT-PCR法观察U2OS细胞中MDM2-mRNA表达改变。结果成功构建发卡样MDM2siRNA真核表达载体(PGCsilencer TM-MDM2 siRNA);PGCsilencer TM-MDM2 siRNA转染到U2OS细胞后,MDM2-mRNA表达较空白组显著下降(P<0.05),转染阴性对照质粒组与空白组无显著差异(P>0.05)。结论成功构建PGCsilencerTM-MDM2 siRNA重组体,并能有效抑制U2OS细胞中MDM2-mRNA表达。 展开更多
关键词 RNA干扰 U2OS MDM2
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下调HMGA2基因表达对改善骨肉瘤U2OS细胞恶性表型的实验研究 被引量：3
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作者 曲珊珊 李荣贵 +4 位作者 张海英 王洋 史艳芬 吕慧 李玉林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期228-231,共4页
目的:研究HMGA2表达在维持人骨肉瘤U2OS细胞恶性表型中的作用,为基因靶向治疗提供理论依据。方法:采用基于DNA的shRNA表达载体HMGA2-shRNA,稳定转染人骨肉瘤U2OS细胞,下调其HMGA2表达水平,并应用RT-PCR技术检测其对HMGA2基因的沉默效果;... 目的:研究HMGA2表达在维持人骨肉瘤U2OS细胞恶性表型中的作用,为基因靶向治疗提供理论依据。方法:采用基于DNA的shRNA表达载体HMGA2-shRNA,稳定转染人骨肉瘤U2OS细胞,下调其HMGA2表达水平,并应用RT-PCR技术检测其对HMGA2基因的沉默效果;经Cell Counting Kit-8(CCK8)测定、Hoechst33342染色荧光显微镜观察及Boyden小室法分别检测细胞增殖、凋亡及迁移情况;实时定量RT-PCR检测mRNAs表达水平。结果:稳定转染靶向HMGA2的shRNA可特异性下调U2OS细胞HMGA2 mRNA表达水平;其作用结果使细胞的增殖和迁移能力受到明显抑制,自发凋亡率及Caspase 3和Caspas 9基因表达水平显著升高。结论:HMGA2基因异常表达在维持人骨肉瘤U2OS细胞恶性表型中起重要作用,靶向HM-GA2的基因治疗可能为骨肉瘤治疗带来新希望。 展开更多
关键词 HMGA2基因 SHRNA 骨肉瘤U2OS 细胞增殖 细胞凋亡
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OS/2的动态连接技术 被引量：1
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作者 耿技 陈勇 刘心松 《计算机工程与设计》 CSCD 北大核心 1993年第5期26-30,共5页
动态连接技术是OS/2中的基本技术手段,它使OS/2的体系结构变得更加灵活和开放。本文详细讨论了OS/2中两类动态连接技术的实现机理,并简要介绍了动态连接技术在OS/2体系结构方面的作用。
关键词 操作系统 OS/2 动态连接
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八宝丹对骨肉瘤细胞U-2OS的抑制增殖和诱导凋亡实验研究 被引量：8
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作者 周忠 林建华 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2006年第S2期93-95,共3页
目的:探讨八宝丹(BBD)对骨肉瘤U-2OS细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:应用形态学观察、Ki-67染色、MTT实验检测八宝丹对细胞增殖的抑制,原位末端标记、电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测细胞凋亡。结果:MTT实验显示八宝丹抑... 目的:探讨八宝丹(BBD)对骨肉瘤U-2OS细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:应用形态学观察、Ki-67染色、MTT实验检测八宝丹对细胞增殖的抑制,原位末端标记、电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测细胞凋亡。结果:MTT实验显示八宝丹抑制U-2OS细胞的增殖呈时间、浓度依赖的方式,实验组Ki-67指数降低,TUNEL检测阳性,琼脂糖凝胶电泳出现DNA的片段化,流式细胞仪可以检测到凋亡峰,随着作用时间延长和浓度增加,凋亡率增高;电镜观察染色质沿皱缩的核膜下凝聚,细胞表面出现凋亡小体。结论:八宝丹对骨肉瘤细胞U-2OS有抑制增殖和诱导凋亡作用,其作用表现出时间和剂量依赖关系。 展开更多
关键词 增殖抑制 诱导凋亡 八宝丹 骨肉瘤U-2OS细胞
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