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兔抗大肠杆菌O157H7抗血清制备及鉴定
1
作者 张丽娟 田延东 +5 位作者 宫文湖 才迎 伦永志 苗迎秋 刘阳 宋筠 《中国卫生检验杂志》 CAS 1999年第4期282-283,共2页
肠出血性大肠杆菌Ｏ１５７Ｈ７主要引起出血性结肠炎并可引起溶血性尿毒综合征。近年来国外多次报道过该菌引起的暴发流行。患者死亡率较高，我国除个别地区国际海关检疫局检出该菌外，还未见报道。国外一些国家的疾病控制中心已规定医... 肠出血性大肠杆菌Ｏ１５７Ｈ７主要引起出血性结肠炎并可引起溶血性尿毒综合征。近年来国外多次报道过该菌引起的暴发流行。患者死亡率较高，我国除个别地区国际海关检疫局检出该菌外，还未见报道。国外一些国家的疾病控制中心已规定医疗单位门诊及住院部细菌检测室应将该... 展开更多
关键词 大肠杆菌o157h7 抗血清 制备 鉴定
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上转换免疫层析方法检测牛奶中大肠杆菌O157H7 被引量：4
2
作者 黄震 肖小月 +4 位作者 熊智娟 黄艳梅 黄鹤 刘成伟 刘道峰 《南昌大学学报（理科版）》 CAS 北大核心 2019年第6期556-563,共8页
免疫层析方法是最常见的快速检测方法之一,然而灵敏度低和基质耐受能力差限制了其在食源性致病菌检测中的应用。在本研究中,我们制备了上转换纳米材料(Upconversion Nanoparticles,UCNPs),并将其应用于免疫层析平台。由于UCNPs的反斯托... 免疫层析方法是最常见的快速检测方法之一,然而灵敏度低和基质耐受能力差限制了其在食源性致病菌检测中的应用。在本研究中,我们制备了上转换纳米材料(Upconversion Nanoparticles,UCNPs),并将其应用于免疫层析平台。由于UCNPs的反斯托克激发特性,所建立的方法能有效解决灵敏度差及机制耐受能力差的问题。通过系统性优化,所建立的免疫层析方法可在4.6×104 CFU·mL^-1~1×107 CFU·mL^-1浓度范围内实现定量检测,检测限为2.8×104 CFU·mL^-1。该方法在实际牛奶样本检测中表现出优良的抗基质干扰能力,其批内回收率为82.7%~105.4%,变异系数为5.8%~13.3%;批间回收率为79.4%~102.5%,变异系数为6.7%~7.5%。方法灵敏度较高,抗基质干扰能力强,不仅能用于大肠杆菌O157:H7的检测,也可被推广应用于其它食源性致病菌检测。 展开更多
关键词 上转换纳米颗粒 免疫层析 牛奶 大肠杆菌O157:H7
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基于双球信号放大的大肠杆菌O157H7免疫HCR检测方法
3
作者 李国强 熊智娟 +4 位作者 黄艳梅 山珊 黄鹤 刘成伟 刘道峰 《南昌大学学报（理科版）》 CAS 北大核心 2019年第6期569-576,共8页
快速准确的检测大肠杆菌O157:H7对食品安全及食源性疾病的早期诊治具有重要意义,免疫学检测方法具有特异性好、操作简便等优点成为最常见的快速检测方法之一,然而灵敏度低限制了其在食源性致病菌检测中的应用。研究将免疫学与HCR相结合... 快速准确的检测大肠杆菌O157:H7对食品安全及食源性疾病的早期诊治具有重要意义,免疫学检测方法具有特异性好、操作简便等优点成为最常见的快速检测方法之一,然而灵敏度低限制了其在食源性致病菌检测中的应用。研究将免疫学与HCR相结合建立一种免疫HCR方法检测大肠杆菌O157:H7,并采用双球策略规避了由于抗体与引发链同时标记在同一乳胶微球上存在相互干扰的问题,降低了抗体(mAb)对引发链的干扰,提高引发效率和检测方法的灵敏度。与基于单球的免疫HCR的灵敏度(2.7×10^3 CFU·mL^-1)相比,本方法中基于双球的免疫HCR的灵敏度(4.8×10^2 CFU·mL^-1)提高了5.6倍。 展开更多
关键词 免疫HCR 大肠杆菌o157h7 检测 信号放大
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两种纳米铁氧化物对大肠杆菌O157:H7碳源代谢的差异性调控
4
作者 刘单鹏 汤宇晴 +4 位作者 蒋宇 赵升 王远鹏 石淮毓 欧阳凯 《环境科学学报》 北大核心 2026年第1期436-445,共10页
土壤中的病原菌可通过鞭毛、荚膜等特殊结构定殖于矿物表面形成生态位,其碳代谢适应性直接影响环境存活率与致病风险.以肠出血性大肠杆菌O157:H7为模式菌,通过紫外分光光度法、等温微量热分析及ATP定量检测,结合菌落计数验证,系统评估... 土壤中的病原菌可通过鞭毛、荚膜等特殊结构定殖于矿物表面形成生态位,其碳代谢适应性直接影响环境存活率与致病风险.以肠出血性大肠杆菌O157:H7为模式菌,通过紫外分光光度法、等温微量热分析及ATP定量检测,结合菌落计数验证,系统评估了温度(28°Cvs 37°C)及纳米颗粒浓度(0.1~10 mg·mL^(-1))对大肠杆菌O157:H7葡萄糖代谢的影响,揭示了纳米针铁矿与纳米赤铁矿对其碳源代谢的调控规律.结果表明,等温培养条件下,各体系大肠杆菌O157:H7葡萄糖代谢速率呈显著组间差异(纳米赤铁矿组>纯菌对照组>纳米针铁矿组);37°C条件下病原菌代谢活性显著高于28°C条件下,证实其为适宜代谢温度.纳米赤铁矿呈浓度依赖性促进作用,10 mg·mL^(-1)组代谢速率可达纯菌体系的1.3~12.3倍,并伴随ATP合成峰前移及生物量显著增加;纳米针铁矿则表现出显著抑制作用,10 mg·mL^(-1)组代谢速率降低至纯菌体系的27%~69%,ATP积累速率减缓且细胞增殖受抑.以上研究结果可为评估土壤矿物-病原菌互作及控制食源性致病菌传播提供理论依据. 展开更多
关键词 土壤 纳米铁氧化物 病原菌 大肠杆菌O157:H7 碳源代谢
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牛至精油气相熏蒸抑制亚致死态大肠杆菌O157:H7修复及其对解冻猪肉品质的影响
5
作者 牛力源 吴小桥 +3 位作者 霍遵屹 吕静 相启森 张志坚 《肉类研究》 北大核心 2026年第1期10-17,共8页
在冷冻肉的加工与流通过程中,冷冻胁迫环境会诱导肉中有害微生物处于亚致死损伤状态,其在肉品解冻、加工等环节极易恢复生长繁殖,对消费者健康造成潜在威胁。本研究首先采用选择性平板计数法,阐明冷冻胁迫下猪肉中亚致死态大肠杆菌O157... 在冷冻肉的加工与流通过程中,冷冻胁迫环境会诱导肉中有害微生物处于亚致死损伤状态,其在肉品解冻、加工等环节极易恢复生长繁殖,对消费者健康造成潜在威胁。本研究首先采用选择性平板计数法,阐明冷冻胁迫下猪肉中亚致死态大肠杆菌O157:H7的形成规律,然后通过测定不同溶剂中6种植物源抑菌剂气相熏蒸对大肠杆菌O157:H7的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),筛选最适抑菌剂及其溶剂,探究其对解冻猪肉中亚致死态大肠杆菌O157:H7修复的影响,并通过测定菌落总数、pH值、色泽、质构特性和硫代巴比妥酸反应物值等指标,对解冻猪肉品质进行评价。结果表明:在-20℃下,猪肉中大肠杆菌O157:H7的亚致死率随冻藏时间的延长显著提高(P<0.05);以丙二醇或无水乙醇为溶剂的牛至精油气相熏蒸对大肠杆菌O157:H7的抑制效果最好,MIC分别为625、312.5μL/L;将冻藏15 d的猪肉解冻并冷藏24 h后发现,仅使用丙二醇解冻的猪肉中亚致死态大肠杆菌O157:H7逐渐修复,与之相比,使用2×MIC、4×MIC和6×MIC牛至精油气相熏蒸处理后,猪肉中选择性培养基大肠杆菌O157:H7菌落数分别降低0.30、0.33、0.58(lg(CFU/g)),说明牛至精油气相熏蒸显著抑制了解冻猪肉中亚致死态大肠杆菌O157:H7的修复;当牛至精油含量为6×MIC时,还可有效降低解冻猪肉的菌落总数,延缓脂质氧化进程,较好地维持猪肉的pH值、色泽和质构特性。 展开更多
关键词 牛至精油 气相熏蒸 大肠杆菌O157:H7 亚致死损伤 解冻猪肉
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超声波联合紫外杀菌在椰子水中的应用
6
作者 李芹 吴雨豪 +5 位作者 周建伟 刘东红 郑鑫 胡秘芬 江英英 吕瑞玲 《现代食品科技》 北大核心 2025年第10期241-252,共12页
该研究探讨超声波和紫外联合处理对椰子水中微生物的杀灭效果以及对贮藏期椰子水品质的影响。以紫外、超声波单独处理作对比,探究联合处理对椰子水中大肠杆菌O157:H7的杀灭效果。同时对贮藏期椰子水中糖含量、酶活性和挥发性化合物进行... 该研究探讨超声波和紫外联合处理对椰子水中微生物的杀灭效果以及对贮藏期椰子水品质的影响。以紫外、超声波单独处理作对比,探究联合处理对椰子水中大肠杆菌O157:H7的杀灭效果。同时对贮藏期椰子水中糖含量、酶活性和挥发性化合物进行检测和分析,探究联合处理对贮藏期椰子水品质的影响。实验结果表明,超声波与紫外联合处理杀菌效果最佳,采用该技术对椰子水处理180 s后(超声波,频率20000 Hz,功率200 W;紫外,功率8 W,波长253.7 nm,照射距离6 cm),大肠杆菌O157:H7计数降低8.31个对数值。在贮藏实验中,29种挥发性化合物的峰值面积百分比未发生明显变化,理化指标保持稳定,且贮藏12 d后的椰子水总色差值不超过1。该研究证明联合处理180 s是椰子水杀菌的较优条件,因其协同效应大幅提升了杀菌效果,为超声波联合紫外杀菌技术的开发与应用提供科学的理论依据。 展开更多
关键词 超声波 紫外 非热杀菌 椰子水 大肠杆菌O157:H7
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超声联合紫外处理对大肠杆菌O157:H7的杀菌作用及机制
7
作者 陈怡 吴雨豪 +2 位作者 周建伟 刘东红 吕瑞玲 《食品科学》 北大核心 2025年第19期10-17,共8页
旨在探究超声联合紫外对大肠杆菌O157:H7的杀菌效率、协同效果及内在机理。探究超声联合紫外杀菌动力学模型、细微观结构变化、细胞膜性质改变及氧化应激水平等方面,结果发现超声联合紫外处理40 s杀灭了8.3(lg(CFU/mL))的大肠杆菌O157:... 旨在探究超声联合紫外对大肠杆菌O157:H7的杀菌效率、协同效果及内在机理。探究超声联合紫外杀菌动力学模型、细微观结构变化、细胞膜性质改变及氧化应激水平等方面,结果发现超声联合紫外处理40 s杀灭了8.3(lg(CFU/mL))的大肠杆菌O157:H7,处理后细胞形态受损显著,细胞内容物流失。联合处理短时间内引起了细胞的应激反应,细胞酯酶活性增强、ATP含量上升、活性氧水平提高、DNA受损。综上所述,超声和紫外联合处理具有显著的协同杀菌效果,通过空化效应增强细胞结构损伤使得紫外直接作用DNA并且共同加剧了氧化应激干扰生物代谢,从而达到协同杀菌的目的。 展开更多
关键词 超声 紫外 大肠杆菌O157:H7 杀菌机制 协同效应
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一株不产志贺毒素的肠出血性大肠埃希菌O157:H7检测分析
8
作者 李桂满 史亚辉 +6 位作者 欧阳方竹 柯碧霞 刘佳俊 朱海明 颜瑾 李柏生 何冬梅 《华南预防医学》 2025年第7期796-799,805,共5页
目的对菌株CICC10907肠出血性大肠埃希菌O157:H7进行生化特征、血清学鉴定和毒力基因检测。方法采用传统的生化鉴定方法对菌株CICC10907进行鉴定和血清分型;用2种不同的荧光PCR检测试剂和PCR熔解曲线法对CICC10907进行志贺毒素stx基因... 目的对菌株CICC10907肠出血性大肠埃希菌O157:H7进行生化特征、血清学鉴定和毒力基因检测。方法采用传统的生化鉴定方法对菌株CICC10907进行鉴定和血清分型;用2种不同的荧光PCR检测试剂和PCR熔解曲线法对CICC10907进行志贺毒素stx基因和其他毒力基因进行检测;使用全基因组测序分析其MLST型(Mul⁃tilocus sequence typing,MLST)、血清型和毒力基因预测。结果传统的生化鉴定结果显示CICC10907为大肠埃希菌,血清型为O157:H7;3种PCR检测方法结果一致,CICC10907不产志贺毒素stx,毒力基因astA、eae/escV和uidA为阳性;全基因组测序分析结果显示CICC10907的ST型为11,血清型为O157:H7,含有astA、eae、espA、espP、hlyE、katP、tir和toxB基因,不含stx1和stx2毒力基因。结论编号为CICC10907的肠出血性大肠埃希菌O157:H7为一株不产志贺毒素stx的菌株,且具有O157:H7特异性的毒力基因,这将为今后检测肠出血性大肠埃希菌O157:H7的毒力基因提供重要参考。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 O157:H7 生化鉴定 血清型 志贺毒素 基因测序
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一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7的全基因组测序及毒力和耐药基因分析
9
作者 周艳 万启旸 +3 位作者 朱树娇 张辉 包红朵 王冉 《广东农业科学》 2025年第2期58-70,共13页
[目的]分析一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1的全基因组信息及其毒力和耐药基因。[方法]基于Nanopore三代测序技术平台和Illumina二代测序技术平台对猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1进行全基因组测序,利用Prokka软... [目的]分析一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1的全基因组信息及其毒力和耐药基因。[方法]基于Nanopore三代测序技术平台和Illumina二代测序技术平台对猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1进行全基因组测序,利用Prokka软件预测基因组序列信息,并通过UniProt、KEGG、KEGG Pathway、GO、Pfam、COG、TIGERfams、RefSeq和NR数据库进行基因预测和注释,再利用碳水化合物酶(CAZy)、病原与宿主互作(PHI)、毒力因子(VFDB)和耐药基因(CARD)数据库进行基因功能分析。[结果]肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1基因组大小为5404747 bp,GC含量为50.49%,该菌株含有3个质粒;共预测到5674个蛋白质编码基因,包含22个rRNA(7个23S rRNA、7个16S rRNA、8个5S rRNA)、1个tmRNA、102个tRNA基因和282个小RNA分子;预测出9个CRISPR序列、273个重复序列;KEGG、KEGG Pathway、NR、UniProt、GO、COG、Pfam、RefSeq和TIGERfams数据库分别注释到1712、1693、5265、5264、4029、4294、4688、5252和2741个基因;CAZy数据库注释筛选出100个基因,PHI数据库注释筛选出2354个基因,VFDB数据库注释筛选出的毒力基因主要包括菌毛、鞭毛、Ⅱ型分泌系统、Ⅲ型分泌系统、Ⅵ型分泌系统、紧密黏附素、铁转运系统、脂多糖、荚膜、侵袭素和外毒素;CARD数据库注释筛选出的耐药基因与多重耐药外排泵、大环内酯类抗生素、四环素、多粘菌素、杆菌肽、氨基糖苷类抗生素、肽类抗生素及甲硝唑相关。[结论]获得一株肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1全基因组序列,序列分析表明该菌株携带大量毒力基因与耐药基因。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 食源性人兽共患病 全基因组测序 基因 功能注释
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食品中大肠杆菌O157:H7快速检测方法的比较
10
作者 朱建英 孔德军 +2 位作者 金杨慧娜 徐黎慧 华思佳 《食品安全导刊》 2025年第25期156-158,共3页
大肠杆菌O157:H7作为高危食源性致病菌,其快速检测对食源性疾病防控至关重要。本文针对食品中大肠杆菌O157:H7的快速检测,分析了免疫分析、分子生物学等方法的灵敏度和成本差异,力求能为不同检测需求提供方法选择依据。
关键词 食品安全 大肠杆菌O157:H7 快速检测 技术适用性
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Eu-TRFM免疫层析试纸条检测大肠杆菌O157:H7方法的建立
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作者 冯昭仪 吴娅芳 +4 位作者 王英林 赵思远 程家洛 郭旭东 刘箐 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第2期163-172,共10页
【目的】建立一种快速、高效且灵敏的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测方法。【方法】运用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)介导法,以时间分辨荧光微球为标记物与抗体进行偶联,使用荧光读取仪定量分析检测大肠... 【目的】建立一种快速、高效且灵敏的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测方法。【方法】运用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)介导法,以时间分辨荧光微球为标记物与抗体进行偶联,使用荧光读取仪定量分析检测大肠杆菌O157:H7。通过对缓冲液的标记pH、时间分辨荧光微球探针添加量、T线抗体质量浓度以及样本与标记抗体的孵育时间进行优化来提高检测灵敏度。【结果】在最优条件下,大肠杆菌O157:H7的检测灵敏度可达3.2×10^(3)CFU/mL,比传统胶体金免疫层析方法提高了10~1000倍,并且与其他8株常见的食源性致病菌不存在交叉反应。另外,该方法在人工污染的饮用水、牛奶和牛肉实际样品检测中均表现出良好的检测性能。【结论】该Eu-TRFM免疫层析试纸条适用于大肠杆菌O157:H7的检测。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:H7 时间分辨荧光微球 免疫层析试纸条 检测
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赤藓红B钠盐与噬菌体偶联对大肠杆菌O157∶H7的光动力灭活及杀菌机制研究
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作者 任宇 石慧 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第16期10-19,共10页
光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)是一种新兴非热杀菌技术,但由于缺乏可食用光敏剂和优异的杀菌效果,限制其在食品工业中的应用。该研究将可食用光敏剂赤藓红B钠盐(erythrosine B,EB)和噬菌体ZCFSTP4(P4)合成偶联物(EBP),探究其杀... 光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)是一种新兴非热杀菌技术,但由于缺乏可食用光敏剂和优异的杀菌效果,限制其在食品工业中的应用。该研究将可食用光敏剂赤藓红B钠盐(erythrosine B,EB)和噬菌体ZCFSTP4(P4)合成偶联物(EBP),探究其杀菌效果及机制。将P4和EB通过EDC/NHS法合成偶联物EBP,以大肠杆菌O157∶H7为研究对象,对不同光照时间和EBP浓度进行杀菌条件优化,利用光谱表征EBP合成情况,通过靶向实验检测EBP靶向识别能力,通过检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生能力和种类、细胞膜通透性、细胞质泄露情况、细胞内DNA和蛋白含量研究EBP杀菌机制。结果表明,15μmol/L EBP在60 min光照条件下具有协同杀菌效果;EBP合成成功,且能够特异性识别大肠杆菌O157∶H7;EBP和EB具有相似的ROS产生能力,主要通过Ⅰ型和Ⅱ型2种机制产生ROS,发挥PDT作用改变细胞膜通透性,造成细胞质外漏,导致细胞内DNA和蛋白大量减少。综上所述,EBP能靶向识别细菌并通过产生ROS破坏细胞膜结构,从而有效杀灭细菌,为PDT防控食源性致病菌提供参考。 展开更多
关键词 光动力杀菌 赤藓红B钠盐 噬菌体 偶联物 大肠杆菌O157∶H7 杀菌机制
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辣椒素改善大肠杆菌O157:H7感染的小鼠胃肠道炎症和肠道菌群结构
13
作者 张婷 易金美 +3 位作者 吴中琴 王远亮 侯爱香 李宗军 《现代食品科技》 北大核心 2025年第6期67-77,共11页
该文研究了不同剂量辣椒素对大肠杆菌O157:H7感染小鼠胃肠道炎症和肠道菌群结构的改善作用。通过构建大肠杆菌O157:H7小鼠感染模型,将成功感染的小鼠随机分为对照组、感染组、辣椒素处理组(15、7.5、3.75 mg/kg),试验周期7 d。记录小鼠... 该文研究了不同剂量辣椒素对大肠杆菌O157:H7感染小鼠胃肠道炎症和肠道菌群结构的改善作用。通过构建大肠杆菌O157:H7小鼠感染模型,将成功感染的小鼠随机分为对照组、感染组、辣椒素处理组(15、7.5、3.75 mg/kg),试验周期7 d。记录小鼠摄食量和体质量,检测血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)白细胞介素-6(IL-6)和肠道中炎症标志物髓过氧化物酶(MPO)含量,观察结肠和胃组织病理变化,并通过16S rDNA测序检测小鼠肠道菌群的变化。研究发现,15 mg/kg辣椒素的摄入显著降低了大肠杆菌O157:H7感染小鼠血清和肠道的炎症因子含量,显著改善了胃肠道屏障损伤和炎症情况,显著增加了阿克曼氏菌属(Akkermansia)、厌氧小体属(Anaeroplasma)和鲸杆菌属(Cetobacterium)的丰度,其中Akkermansia的相对丰度较对照组提高了48%;显著降低了另枝菌属(Alistipes)、肠球菌属(Enterococcus)和约克氏菌属(Yokenella)等的丰度。综上所述,适当食用辣椒素含量为15 mg/kg的食物可以改善大肠杆菌O157:H7感染患者胃肠道炎症情况和肠道菌群结构。这可为大肠杆菌O157:H7感染患者的治疗和膳食方式提供指导意见。 展开更多
关键词 辣椒素 大肠杆菌O157:H7 胃肠道炎症 肠道微生物
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罗伊氏乳杆菌素对大肠杆菌O157:H7感染小鼠的保护作用及肠道菌群的影响
14
作者 王宇皓 周东明 +5 位作者 朱进 陈琼 孙学伟 张卓涵 杨展 王长军 《中国微生态学杂志》 北大核心 2025年第7期761-769,共9页
目的探究罗伊氏乳杆菌素(reuterin)对肠出血型大肠杆菌O157∶H7(EHEC O157∶H7)感染小鼠的保护效果及肠道菌群的影响。方法6周龄SPF级C57BL/6雄性实验小鼠,平均体重20 g,随机分为对照组(Control组)、模型组(EHEC组)、处理组(Reuterin组)... 目的探究罗伊氏乳杆菌素(reuterin)对肠出血型大肠杆菌O157∶H7(EHEC O157∶H7)感染小鼠的保护效果及肠道菌群的影响。方法6周龄SPF级C57BL/6雄性实验小鼠,平均体重20 g,随机分为对照组(Control组)、模型组(EHEC组)、处理组(Reuterin组),每组5只。两步发酵法提取制备reuterin,Reuterin组灌胃reuterin(浓度约210 mmol/L)300μL/d,连续7 d,随后EHEC组和Reuterin组灌胃EHEC O157∶H7菌液(浓度1×1010 CFU/mL)300μL 1次,间隔24 h后再灌胃1次。之后24 h内观察小鼠生理状态并麻醉处死,采集组织和粪便样本。采用HE染色观察结肠组织病理变化;检测小鼠氧化应激指标过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;采用qRT-PCR检测小鼠结肠组织炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、趋化因子-2(C-C motif ligand,CCL-2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-10的相对表达水平;对小鼠粪便进行16S rRNA基因测序并统计分析。结果Reuterin组与EHEC组相比,小鼠生理状态较好,结肠组织损伤情况减轻,病理状态比较接近Control组;抗氧化指标CAT(t=4.963,P=0.001)、SOD(t=2.464,P=0.039)水平显著升高,氧化指标MDA(t=2.446,P=0.040)水平降低,差异均有统计学意义;结肠组织炎症因子IL-1β(t=6.571,P<0.001)、IL-6(t=2.759,P=0.025)、CCL-2(t=2.306,P=0.049)、TNF-α(t=4.452,P=0.002)的相对表达水平显著降低,抗炎因子IL-10(t=6.206,P=0.001)的相对表达水平升高,差异均有统计学意义;16S rRNA基因测序显示reuterin影响了肠道微生物的整体结构,促进多种益生菌丰度的增加,抑制了致病菌的生长,并有利于肠道厌氧微生物的繁殖。结论Reuterin通过缓解氧化应激状态,减轻炎症反应,改变肠道菌群结构,增加益生菌的丰度,抑制致病菌的生长,对EHEC O157∶H7感染小鼠有一定的保护作用。 展开更多
关键词 罗伊氏乳杆菌素 肠出血型大肠杆菌O157:H7 感染 肠道菌群
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应用免疫磁珠法分离大肠杆菌O_(157)H_7 被引量：16
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作者 赵文彬 周克捷 +2 位作者 李家富 李莉 林红玉 《现代预防医学》 CAS 2000年第3期331-332,共2页
目的 :进一步探讨免疫磁珠法 (IMS)分离大肠杆菌 O1 5 7H7(E.O1 5 7H7)的敏感性。方法 :应用 IMS检测该菌的主要贮存宿主动物 (家禽、家畜 ) E.O1 5 7H7感染情况 ,同时用传统分离法作对照。结果 :家禽 (畜 )粪便中 E.O1 5 7H7分离率分... 目的 :进一步探讨免疫磁珠法 (IMS)分离大肠杆菌 O1 5 7H7(E.O1 5 7H7)的敏感性。方法 :应用 IMS检测该菌的主要贮存宿主动物 (家禽、家畜 ) E.O1 5 7H7感染情况 ,同时用传统分离法作对照。结果 :家禽 (畜 )粪便中 E.O1 5 7H7分离率分别为鸡 2 .38% (2 / 84)、牛 9.5 2 % (4 / 42 )、猪 2 .41% (2 / 83) ,鸭、鹅、狗、驴和羊的粪便中未分离到 E.O1 5 7H7;传统法均未从上述家禽 (畜 )粪便中分离到 E.O1 5 7H7。结论 :据本次检测结果 ,表明 IMS分离 O1 5 7能提高检测的灵敏度 (检测水平为 2 cfu/ g,传统法为 2 0 0 cfu/ g) ,并缩短检测时间 1天 ,是开展 E.O1 5 7H7病原学分离 (包括人间和宿主动物的流行病学监测 ) 展开更多
关键词 免疫磁珠法 大肠杆菌o157h7 分离
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基于生物传感技术的食源性大肠杆菌O157∶H7快速检测研究进展
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作者 林心可 张令梅 +1 位作者 邱万伟 刘国东 《分析测试学报》 北大核心 2025年第12期2641-2648,共8页
大肠杆菌O157∶H7(E. coli O157∶H7)是一种常见的食源性致病菌,对人类健康造成巨大威胁,及时快速的分析检测至关重要。近年来,由于生物传感技术的不断进步,对大肠杆菌的检测越来越多元化,一系列快速、灵敏、特异检测大肠杆菌的方法被... 大肠杆菌O157∶H7(E. coli O157∶H7)是一种常见的食源性致病菌,对人类健康造成巨大威胁,及时快速的分析检测至关重要。近年来,由于生物传感技术的不断进步,对大肠杆菌的检测越来越多元化,一系列快速、灵敏、特异检测大肠杆菌的方法被不断完善。该文对近5年来基于生物传感技术的食源性大肠杆菌O157∶H7快速检测相关文章进行综述,阐述了基于电信号、光信号和侧流式生物传感器检测的原理、优缺点,并就该领域的新技术和发展趋势进行了讨论。 展开更多
关键词 生物传感器 食源性致病菌 大肠杆菌O157∶H7(E.coli O157∶H7) 食品安全
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EHEC O157∶H7志贺毒素ⅡA1亚单位蛋白的构建表达与免疫原性鉴定 被引量：7
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作者 罗萍 曾浩 +5 位作者 易勇 张卫军 郭鹰 刘璐 陈洪章 邹全明 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期287-290,共4页
目的构建表达GST-STX2A1融合蛋白并鉴定其免疫原性。方法通过PCR反应从EHEC O157∶H7EDL933标准株菌中扩增STX2A1基因,将此基因克隆到GST融合蛋白原核表达载体PGEX-6p-1,得到阳性克隆PGEX-6p-1/STX2A1,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导GST-STX... 目的构建表达GST-STX2A1融合蛋白并鉴定其免疫原性。方法通过PCR反应从EHEC O157∶H7EDL933标准株菌中扩增STX2A1基因,将此基因克隆到GST融合蛋白原核表达载体PGEX-6p-1,得到阳性克隆PGEX-6p-1/STX2A1,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导GST-STX2A1融合蛋白的表达,采用亲和层析纯化该蛋白,SDS-PAGE分析其表达量、表达形式和纯度;用纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,免疫双向扩散鉴定抗血清效价,Western blotting鉴定抗血清的特异性。结果成功构建重组质粒PGEX-6p-1/STX2A1,经DNA测序证实插入序列与设计完全一致,并在大肠杆菌中表达出Mr约为5.3×104大小的可溶性目的蛋白,经亲和层析纯化后纯度可达90%,免疫Balb/c小鼠产生的抗血清效价为1∶16,Western blotting表明可与天然STX2A蛋白反应。结论在大肠杆菌中成功表达了可溶性的GST-STX2A1融合蛋白,该蛋白具有较好的免疫原性,为O157∶H7亚单位疫苗及制备抗STX2A1的单克隆抗体提供了必要的物质基础。 展开更多
关键词 o157h7 STX2A1 免疫原性
暂未订购
大肠杆菌O157:H7外膜蛋白C重组表达及免疫原性研究
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作者 陈鹏 卢帅臣 +1 位作者 韩迎珊 王文彬 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第4期72-80,共9页
【目的】探究大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7外膜蛋白C(OmpC)的免疫原性。【方法】分别构建pET-28a-ompc、pET-22b-ompc-SUMO重组质粒,表达纯化重组蛋白OmpC,并验证大肠杆菌O157:H7菌体免疫制备的2G12抗体的识别抗原是否为O... 【目的】探究大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7外膜蛋白C(OmpC)的免疫原性。【方法】分别构建pET-28a-ompc、pET-22b-ompc-SUMO重组质粒,表达纯化重组蛋白OmpC,并验证大肠杆菌O157:H7菌体免疫制备的2G12抗体的识别抗原是否为OmpC。【结果】作者成功构建了2种重组质粒,其中pET-28a-ompc在E.coli BL21中成功表达;重组蛋白OmpC的最佳诱导表达条件为:0.2 mmol/L IPTG、37℃诱导12 h;在800 mmol/L咪唑洗脱时得到含有His标签的包涵体OmpC,通过尿素梯度复性结合Ni-NTA柱纯化,在500 mmol/L咪唑洗脱时获得可溶性OmpC。【结论】可溶性OmpC和包涵体OmpC均能与单克隆抗体2G12发生特异性反应。该研究为后续利用OmpC制备高亲和力的大肠杆菌O157:H7单克隆抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:H7 外膜蛋白C 抗体 重组表达 免疫检测 靶点
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一株肠出血性大肠杆菌O_(157)H_7免疫奶牛实验即抗EHEC O_(157)H_7免疫乳的试制 被引量：5
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作者 郭军 张和平 +4 位作者 李立民 刘桂芳 云振宇 武俊瑞 周然 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第8期254-258,共5页
用1株O157H7菌株和另外11株人类肠道主要病原细菌配制O157H7单菌疫苗和多菌联合多价疫苗,对荷斯坦牛进行免疫实验。对免疫常乳中抗EHEC O157H7特异性抗体凝集价进行了长期监测,并对受试奶牛的免疫反应、应激反应及疫苗对奶牛可能产生的... 用1株O157H7菌株和另外11株人类肠道主要病原细菌配制O157H7单菌疫苗和多菌联合多价疫苗,对荷斯坦牛进行免疫实验。对免疫常乳中抗EHEC O157H7特异性抗体凝集价进行了长期监测,并对受试奶牛的免疫反应、应激反应及疫苗对奶牛可能产生的毒性作用进行了观察。结果证明,疫苗免疫效果很好,所有奶牛在整个泌乳期一直保持较高的特异性抗体效价(滴度),均在27以上,下个泌乳期开始阶段也未见明显下降的迹象。本次实验意外发现约有30%的未进行过免疫注射的对照组乳样有较高的O157H7特异性抗体滴度,个别乳样凝集价高达27,这可能说明这些牛群中有较高的O157H7感染率或携带率。O157H7是人类近二十余年来才开始认识到的出血性结肠炎(HC)的主要致病菌,能造成出血性腹泻和其它严重并发症。是值得研究和重点防范的病原细菌。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌o157h7 免疫奶牛 免疫乳 疫苗 抗体滴度 免疫注射
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Escherichia coli O157:H7的表面增强拉曼光谱检测方法建立
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作者 王盼雪 李岑 +2 位作者 李香 刘莹 李国梁 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第6期97-105,共9页
【目的】提高大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测的特异性和灵敏度。【方法】基于磁分离和信号放大策略,结合表面增强拉曼光谱(SERS)技术建立了一种特异性好、灵敏度高的E.coli O157:H7检测方法。以适配体为识别元件,联合磁... 【目的】提高大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测的特异性和灵敏度。【方法】基于磁分离和信号放大策略,结合表面增强拉曼光谱(SERS)技术建立了一种特异性好、灵敏度高的E.coli O157:H7检测方法。以适配体为识别元件,联合磁珠和聚苯乙烯(PS)微球,分别构建分离探针MB@Apt和信号放大型拉曼标签4-MBN@PS@Apt。【结果】当E.coli O157:H7存在时,MB@Apt、4-MBN@PS@Apt与E.coli O157:H7可形成MB@Apt/E.coli O157:H7/4-MBN@PS@Apt“三明治”结构复合物,该复合物可借助外源磁场实现快速分离和富集;加入四氢呋喃(THF)后,拉曼标签上负载的低生物背景拉曼报告物4-MBN可被快速释放。4-MBN在1073.9 cm^(-1)处的相对拉曼强度与E.coli O157:H7浓度的对数值在1×10^(3)~1×10^(8) CFU/mL的线性关系良好,决定系数(R^(2))为0.98。该方法对E.coli O157:H7的检测限(LOD)为312 CFU/mL,在自来水和牛奶样本中的检测回收率为61.87%~135.55%,相对标准偏差(RSD)为0.27%~5.28%。【结论】该方法对E.coli O157:H7的检测灵敏度较高,为食源性致病菌的快速检测提供了新思路。 展开更多
关键词 Escherichia coli O157:H7 快速检测 表面增强拉曼光谱 聚苯乙烯微球 低生物背景
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