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超声联合紫外处理对大肠杆菌O157:H7的杀菌作用及机制
1
作者 陈怡 吴雨豪 +2 位作者 周建伟 刘东红 吕瑞玲 《食品科学》 北大核心 2025年第19期10-17,共8页
旨在探究超声联合紫外对大肠杆菌O157:H7的杀菌效率、协同效果及内在机理。探究超声联合紫外杀菌动力学模型、细微观结构变化、细胞膜性质改变及氧化应激水平等方面,结果发现超声联合紫外处理40 s杀灭了8.3(lg(CFU/mL))的大肠杆菌O157:... 旨在探究超声联合紫外对大肠杆菌O157:H7的杀菌效率、协同效果及内在机理。探究超声联合紫外杀菌动力学模型、细微观结构变化、细胞膜性质改变及氧化应激水平等方面,结果发现超声联合紫外处理40 s杀灭了8.3(lg(CFU/mL))的大肠杆菌O157:H7,处理后细胞形态受损显著,细胞内容物流失。联合处理短时间内引起了细胞的应激反应,细胞酯酶活性增强、ATP含量上升、活性氧水平提高、DNA受损。综上所述,超声和紫外联合处理具有显著的协同杀菌效果,通过空化效应增强细胞结构损伤使得紫外直接作用DNA并且共同加剧了氧化应激干扰生物代谢,从而达到协同杀菌的目的。 展开更多
关键词 超声 紫外 大肠杆菌o157:H7 杀菌机制 协同效应
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一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7的全基因组测序及毒力和耐药基因分析
2
作者 周艳 万启旸 +3 位作者 朱树娇 张辉 包红朵 王冉 《广东农业科学》 2025年第2期58-70,共13页
[目的]分析一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1的全基因组信息及其毒力和耐药基因。[方法]基于Nanopore三代测序技术平台和Illumina二代测序技术平台对猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1进行全基因组测序,利用Prokka软... [目的]分析一株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1的全基因组信息及其毒力和耐药基因。[方法]基于Nanopore三代测序技术平台和Illumina二代测序技术平台对猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1进行全基因组测序,利用Prokka软件预测基因组序列信息,并通过UniProt、KEGG、KEGG Pathway、GO、Pfam、COG、TIGERfams、RefSeq和NR数据库进行基因预测和注释,再利用碳水化合物酶(CAZy)、病原与宿主互作(PHI)、毒力因子(VFDB)和耐药基因(CARD)数据库进行基因功能分析。[结果]肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1基因组大小为5404747 bp,GC含量为50.49%,该菌株含有3个质粒;共预测到5674个蛋白质编码基因,包含22个rRNA(7个23S rRNA、7个16S rRNA、8个5S rRNA)、1个tmRNA、102个tRNA基因和282个小RNA分子;预测出9个CRISPR序列、273个重复序列;KEGG、KEGG Pathway、NR、UniProt、GO、COG、Pfam、RefSeq和TIGERfams数据库分别注释到1712、1693、5265、5264、4029、4294、4688、5252和2741个基因;CAZy数据库注释筛选出100个基因,PHI数据库注释筛选出2354个基因,VFDB数据库注释筛选出的毒力基因主要包括菌毛、鞭毛、Ⅱ型分泌系统、Ⅲ型分泌系统、Ⅵ型分泌系统、紧密黏附素、铁转运系统、脂多糖、荚膜、侵袭素和外毒素;CARD数据库注释筛选出的耐药基因与多重耐药外排泵、大环内酯类抗生素、四环素、多粘菌素、杆菌肽、氨基糖苷类抗生素、肽类抗生素及甲硝唑相关。[结论]获得一株肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1全基因组序列,序列分析表明该菌株携带大量毒力基因与耐药基因。 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌o157∶H7 食源性人兽共患病 全基因组测序 基因 功能注释
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一株不产志贺毒素的肠出血性大肠埃希菌O157:H7检测分析
3
作者 李桂满 史亚辉 +6 位作者 欧阳方竹 柯碧霞 刘佳俊 朱海明 颜瑾 李柏生 何冬梅 《华南预防医学》 2025年第7期796-799,805,共5页
目的对菌株CICC10907肠出血性大肠埃希菌O157:H7进行生化特征、血清学鉴定和毒力基因检测。方法采用传统的生化鉴定方法对菌株CICC10907进行鉴定和血清分型;用2种不同的荧光PCR检测试剂和PCR熔解曲线法对CICC10907进行志贺毒素stx基因... 目的对菌株CICC10907肠出血性大肠埃希菌O157:H7进行生化特征、血清学鉴定和毒力基因检测。方法采用传统的生化鉴定方法对菌株CICC10907进行鉴定和血清分型;用2种不同的荧光PCR检测试剂和PCR熔解曲线法对CICC10907进行志贺毒素stx基因和其他毒力基因进行检测;使用全基因组测序分析其MLST型(Mul⁃tilocus sequence typing,MLST)、血清型和毒力基因预测。结果传统的生化鉴定结果显示CICC10907为大肠埃希菌,血清型为O157:H7;3种PCR检测方法结果一致,CICC10907不产志贺毒素stx,毒力基因astA、eae/escV和uidA为阳性;全基因组测序分析结果显示CICC10907的ST型为11,血清型为O157:H7,含有astA、eae、espA、espP、hlyE、katP、tir和toxB基因,不含stx1和stx2毒力基因。结论编号为CICC10907的肠出血性大肠埃希菌O157:H7为一株不产志贺毒素stx的菌株,且具有O157:H7特异性的毒力基因,这将为今后检测肠出血性大肠埃希菌O157:H7的毒力基因提供重要参考。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 o157:H7 生化鉴定 血清型 志贺毒素 基因测序
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食品中大肠杆菌O157:H7快速检测方法的比较
4
作者 朱建英 孔德军 +2 位作者 金杨慧娜 徐黎慧 华思佳 《食品安全导刊》 2025年第25期156-158,共3页
大肠杆菌O157:H7作为高危食源性致病菌,其快速检测对食源性疾病防控至关重要。本文针对食品中大肠杆菌O157:H7的快速检测,分析了免疫分析、分子生物学等方法的灵敏度和成本差异,力求能为不同检测需求提供方法选择依据。
关键词 食品安全 大肠杆菌o157:H7 快速检测 技术适用性
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东台市肠出血性大肠埃希菌O157感染监测 被引量：5
5
作者 吴银华 阮凌霆 +5 位作者 蒋力 季月 王迎庆 万亚军 吉根娣 开学俊 《中国预防医学杂志》 CAS 2005年第1期30-32,共3页
目的　为掌握肠出血性大肠埃希菌O15 7在东台市家禽、家畜中的带菌,腹泻病人中的感染和自来水厂水源水中的污染情况。方法　2 0 0 0 -2 0 0 2年,分别在流行季节采集家禽、家畜和腹泻病人粪便及自来水厂水源水,应用免疫磁珠浓集、山梨醇... 目的　为掌握肠出血性大肠埃希菌O15 7在东台市家禽、家畜中的带菌,腹泻病人中的感染和自来水厂水源水中的污染情况。方法　2 0 0 0 -2 0 0 2年,分别在流行季节采集家禽、家畜和腹泻病人粪便及自来水厂水源水,应用免疫磁珠浓集、山梨醇麦康凯平板分离、生化和血清学反应进行鉴定。结果　3年间东台市采集的6种动物粪便有4种中检出肠出血性大肠埃希菌O15 7,其阳性率牛为11 .3 2 %、羊为10 . 5 8%、猪为9. 3 5 %、鸡为7 .73 %。腹泻病人的阳性率为1 .5 7%。采集的178份自来水厂水源水、60只苍蝇标本中均未分离出肠出血性大肠埃希菌O15 7。3株自动物粪便分离株具有至少2种混合型毒力基因。75株肠出血性大肠埃希菌O15 7菌株对15种抗生素存在不同的耐药率。结论　东台市家禽、家畜和腹泻病人中存在肠出血性大肠埃希菌O15 7感染,且存在流行的潜在危险。 展开更多
关键词 大肠埃希菌o157 东台市 感染监测 肠出血性大肠埃希菌 自来水厂 o157菌株 o157感染 动物粪便 2002年 血清学反应 水源水 污染情况 流行季节 免疫磁珠 腹泻病人 毒力基因 潜在危险 阳性率 家禽 家畜 采集 人粪便 山梨醇 混合型 分离株 耐药率 抗生素 人中
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肠出血性大肠杆菌(EHEC) O157∶H7志贺毒素研究进展 被引量：15
6
作者 陈洪章 邹全明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期83-85,共3页
关键词 肠出血性大肠杆菌 志贺毒素 o157:H7 o157:H7感染 大肠杆菌o157 革兰氏阴性杆菌 法定报告传染病 公共卫生问题
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Eu-TRFM免疫层析试纸条检测大肠杆菌O157:H7方法的建立
7
作者 冯昭仪 吴娅芳 +4 位作者 王英林 赵思远 程家洛 郭旭东 刘箐 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第2期163-172,共10页
【目的】建立一种快速、高效且灵敏的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测方法。【方法】运用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)介导法,以时间分辨荧光微球为标记物与抗体进行偶联,使用荧光读取仪定量分析检测大肠... 【目的】建立一种快速、高效且灵敏的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测方法。【方法】运用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)介导法,以时间分辨荧光微球为标记物与抗体进行偶联,使用荧光读取仪定量分析检测大肠杆菌O157:H7。通过对缓冲液的标记pH、时间分辨荧光微球探针添加量、T线抗体质量浓度以及样本与标记抗体的孵育时间进行优化来提高检测灵敏度。【结果】在最优条件下,大肠杆菌O157:H7的检测灵敏度可达3.2×10^(3)CFU/mL,比传统胶体金免疫层析方法提高了10~1000倍,并且与其他8株常见的食源性致病菌不存在交叉反应。另外,该方法在人工污染的饮用水、牛奶和牛肉实际样品检测中均表现出良好的检测性能。【结论】该Eu-TRFM免疫层析试纸条适用于大肠杆菌O157:H7的检测。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157:H7 时间分辨荧光微球 免疫层析试纸条 检测
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新疆地区不同动物源E.coli O157:H7遗传进化分析及耐药性与成膜能力研究
8
作者 王燕 张凌 +4 位作者 刘怡帆 马万鹏 秦天 王伟 苏战强 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第4期685-692,共8页
新疆不同动物都携带大肠杆菌O157:H7(E.coliO157:H7),但是这些菌株之间的联系不清楚。为了解E.coli O157:H7的进化分群、优势遗传谱系的分布、生物膜形成能力、携带可移动遗传元件情况及其耐药谱,对E.coli O157:H7用多重PCR法鉴定系统... 新疆不同动物都携带大肠杆菌O157:H7(E.coliO157:H7),但是这些菌株之间的联系不清楚。为了解E.coli O157:H7的进化分群、优势遗传谱系的分布、生物膜形成能力、携带可移动遗传元件情况及其耐药谱,对E.coli O157:H7用多重PCR法鉴定系统进化分群,通过多位点序列分型(multilocussequencetyping,MLST)方案检测E.coliO157ST型,结晶紫微孔板法测定生物被膜形成能力(BF),Kirby-Bauer法检测耐药情况,PCR法检测耐药、质粒复制子、整合子基因。结果显示新疆46.7%(7/15)的E.coliO157:H7属于A群,53.3%(8/15)属于E群,羊源以A群流行为主(4/6),牛源以E群为主(6/7);共检测出6种ST型,分别为ST11(8/15)、ST-206(1/15)、ST-6126(3/15)、ST-1640(1/15)、ST-178(1/15)、ST-4550(1/15);有2株具有中等成膜能力,2株具有弱成膜能力,10株无成膜能力;均为多重耐药菌株,对林可霉素、苯唑西林、克林霉素、万古霉素、麦迪霉素和头孢噻吩完全耐药,多黏菌素B、氨苄西林、青霉素G、红霉素耐药率为88%~94%,具有高度耐药性;检测到5种耐药基因,分别是acrA(66.66%,10/15)、tolC(73.33%,11/15)、qurS(13.33%,2/15)、floR和qurA(6.67%,1/15);4种质粒复制子,分别是IncP(66.66%,10/15)、IncFrepB(86.67%,13/15)、IncFIA(6.67%,1/15)、IncFIB(66.66%,10/15);2种Ⅰ类整合子,分别是ISCR1(33.33%,5/15)、ISECP1(20%,3/15)。结果显示,新疆地区的E.coliO157:H7以A群和E群流行为主,羊源以A群流行为主,牛源以E群为主,ST型分布较广,其中以ST11型为主,生物膜成膜能力较弱,耐药性强,均为多重耐药菌株,耐药基因以外排泵为主,耐药基因传播元件较多。 展开更多
关键词 E.colio157H7 分群 MLST 耐药性 质粒复制子 整合子
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肠出血性大肠杆菌O157 EspA的研究进展
9
作者 王庆旭 毛旭虎 邹全明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期73-74,80,共3页
关键词 肠出血性大肠杆菌 大肠杆菌o157 o157:H7感染 o157:H7大肠杆菌 溶血性尿毒综合征 syndrome 血小板减少性紫癜 出血性结肠炎 人类感染 Vero毒素
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赤藓红B钠盐与噬菌体偶联对大肠杆菌O157∶H7的光动力灭活及杀菌机制研究
10
作者 任宇 石慧 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第16期10-19,共10页
光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)是一种新兴非热杀菌技术,但由于缺乏可食用光敏剂和优异的杀菌效果,限制其在食品工业中的应用。该研究将可食用光敏剂赤藓红B钠盐(erythrosine B,EB)和噬菌体ZCFSTP4(P4)合成偶联物(EBP),探究其杀... 光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)是一种新兴非热杀菌技术,但由于缺乏可食用光敏剂和优异的杀菌效果,限制其在食品工业中的应用。该研究将可食用光敏剂赤藓红B钠盐(erythrosine B,EB)和噬菌体ZCFSTP4(P4)合成偶联物(EBP),探究其杀菌效果及机制。将P4和EB通过EDC/NHS法合成偶联物EBP,以大肠杆菌O157∶H7为研究对象,对不同光照时间和EBP浓度进行杀菌条件优化,利用光谱表征EBP合成情况,通过靶向实验检测EBP靶向识别能力,通过检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生能力和种类、细胞膜通透性、细胞质泄露情况、细胞内DNA和蛋白含量研究EBP杀菌机制。结果表明,15μmol/L EBP在60 min光照条件下具有协同杀菌效果;EBP合成成功,且能够特异性识别大肠杆菌O157∶H7;EBP和EB具有相似的ROS产生能力,主要通过Ⅰ型和Ⅱ型2种机制产生ROS,发挥PDT作用改变细胞膜通透性,造成细胞质外漏,导致细胞内DNA和蛋白大量减少。综上所述,EBP能靶向识别细菌并通过产生ROS破坏细胞膜结构,从而有效杀灭细菌,为PDT防控食源性致病菌提供参考。 展开更多
关键词 光动力杀菌 赤藓红B钠盐 噬菌体 偶联物 大肠杆菌o157∶H7 杀菌机制
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辣椒素改善大肠杆菌O157:H7感染的小鼠胃肠道炎症和肠道菌群结构
11
作者 张婷 易金美 +3 位作者 吴中琴 王远亮 侯爱香 李宗军 《现代食品科技》 北大核心 2025年第6期67-77,共11页
该文研究了不同剂量辣椒素对大肠杆菌O157:H7感染小鼠胃肠道炎症和肠道菌群结构的改善作用。通过构建大肠杆菌O157:H7小鼠感染模型,将成功感染的小鼠随机分为对照组、感染组、辣椒素处理组(15、7.5、3.75 mg/kg),试验周期7 d。记录小鼠... 该文研究了不同剂量辣椒素对大肠杆菌O157:H7感染小鼠胃肠道炎症和肠道菌群结构的改善作用。通过构建大肠杆菌O157:H7小鼠感染模型,将成功感染的小鼠随机分为对照组、感染组、辣椒素处理组(15、7.5、3.75 mg/kg),试验周期7 d。记录小鼠摄食量和体质量,检测血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)白细胞介素-6(IL-6)和肠道中炎症标志物髓过氧化物酶(MPO)含量,观察结肠和胃组织病理变化,并通过16S rDNA测序检测小鼠肠道菌群的变化。研究发现,15 mg/kg辣椒素的摄入显著降低了大肠杆菌O157:H7感染小鼠血清和肠道的炎症因子含量,显著改善了胃肠道屏障损伤和炎症情况,显著增加了阿克曼氏菌属(Akkermansia)、厌氧小体属(Anaeroplasma)和鲸杆菌属(Cetobacterium)的丰度,其中Akkermansia的相对丰度较对照组提高了48%;显著降低了另枝菌属(Alistipes)、肠球菌属(Enterococcus)和约克氏菌属(Yokenella)等的丰度。综上所述,适当食用辣椒素含量为15 mg/kg的食物可以改善大肠杆菌O157:H7感染患者胃肠道炎症情况和肠道菌群结构。这可为大肠杆菌O157:H7感染患者的治疗和膳食方式提供指导意见。 展开更多
关键词 辣椒素 大肠杆菌o157:H7 胃肠道炎症 肠道微生物
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罗伊氏乳杆菌素对大肠杆菌O157:H7感染小鼠的保护作用及肠道菌群的影响
12
作者 王宇皓 周东明 +5 位作者 朱进 陈琼 孙学伟 张卓涵 杨展 王长军 《中国微生态学杂志》 北大核心 2025年第7期761-769,共9页
目的探究罗伊氏乳杆菌素(reuterin)对肠出血型大肠杆菌O157∶H7(EHEC O157∶H7)感染小鼠的保护效果及肠道菌群的影响。方法6周龄SPF级C57BL/6雄性实验小鼠,平均体重20 g,随机分为对照组(Control组)、模型组(EHEC组)、处理组(Reuterin组)... 目的探究罗伊氏乳杆菌素(reuterin)对肠出血型大肠杆菌O157∶H7(EHEC O157∶H7)感染小鼠的保护效果及肠道菌群的影响。方法6周龄SPF级C57BL/6雄性实验小鼠,平均体重20 g,随机分为对照组(Control组)、模型组(EHEC组)、处理组(Reuterin组),每组5只。两步发酵法提取制备reuterin,Reuterin组灌胃reuterin(浓度约210 mmol/L)300μL/d,连续7 d,随后EHEC组和Reuterin组灌胃EHEC O157∶H7菌液(浓度1×1010 CFU/mL)300μL 1次,间隔24 h后再灌胃1次。之后24 h内观察小鼠生理状态并麻醉处死,采集组织和粪便样本。采用HE染色观察结肠组织病理变化;检测小鼠氧化应激指标过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;采用qRT-PCR检测小鼠结肠组织炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、趋化因子-2(C-C motif ligand,CCL-2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-10的相对表达水平;对小鼠粪便进行16S rRNA基因测序并统计分析。结果Reuterin组与EHEC组相比,小鼠生理状态较好,结肠组织损伤情况减轻,病理状态比较接近Control组;抗氧化指标CAT(t=4.963,P=0.001)、SOD(t=2.464,P=0.039)水平显著升高,氧化指标MDA(t=2.446,P=0.040)水平降低,差异均有统计学意义;结肠组织炎症因子IL-1β(t=6.571,P<0.001)、IL-6(t=2.759,P=0.025)、CCL-2(t=2.306,P=0.049)、TNF-α(t=4.452,P=0.002)的相对表达水平显著降低,抗炎因子IL-10(t=6.206,P=0.001)的相对表达水平升高,差异均有统计学意义;16S rRNA基因测序显示reuterin影响了肠道微生物的整体结构,促进多种益生菌丰度的增加,抑制了致病菌的生长,并有利于肠道厌氧微生物的繁殖。结论Reuterin通过缓解氧化应激状态,减轻炎症反应,改变肠道菌群结构,增加益生菌的丰度,抑制致病菌的生长,对EHEC O157∶H7感染小鼠有一定的保护作用。 展开更多
关键词 罗伊氏乳杆菌素 肠出血型大肠杆菌o157:H7 感染 肠道菌群
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大肠杆菌O157:H7外膜蛋白C重组表达及免疫原性研究
13
作者 陈鹏 卢帅臣 +1 位作者 韩迎珊 王文彬 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第4期72-80,共9页
【目的】探究大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7外膜蛋白C(OmpC)的免疫原性。【方法】分别构建pET-28a-ompc、pET-22b-ompc-SUMO重组质粒,表达纯化重组蛋白OmpC,并验证大肠杆菌O157:H7菌体免疫制备的2G12抗体的识别抗原是否为O... 【目的】探究大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7外膜蛋白C(OmpC)的免疫原性。【方法】分别构建pET-28a-ompc、pET-22b-ompc-SUMO重组质粒,表达纯化重组蛋白OmpC,并验证大肠杆菌O157:H7菌体免疫制备的2G12抗体的识别抗原是否为OmpC。【结果】作者成功构建了2种重组质粒,其中pET-28a-ompc在E.coli BL21中成功表达;重组蛋白OmpC的最佳诱导表达条件为:0.2 mmol/L IPTG、37℃诱导12 h;在800 mmol/L咪唑洗脱时得到含有His标签的包涵体OmpC,通过尿素梯度复性结合Ni-NTA柱纯化,在500 mmol/L咪唑洗脱时获得可溶性OmpC。【结论】可溶性OmpC和包涵体OmpC均能与单克隆抗体2G12发生特异性反应。该研究为后续利用OmpC制备高亲和力的大肠杆菌O157:H7单克隆抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157:H7 外膜蛋白C 抗体 重组表达 免疫检测 靶点
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基于生物传感技术的食源性大肠杆菌O157∶H7快速检测研究进展
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作者 林心可 张令梅 +1 位作者 邱万伟 刘国东 《分析测试学报》 北大核心 2025年第12期2641-2648,共8页
大肠杆菌O157∶H7(E. coli O157∶H7)是一种常见的食源性致病菌,对人类健康造成巨大威胁,及时快速的分析检测至关重要。近年来,由于生物传感技术的不断进步,对大肠杆菌的检测越来越多元化,一系列快速、灵敏、特异检测大肠杆菌的方法被... 大肠杆菌O157∶H7(E. coli O157∶H7)是一种常见的食源性致病菌,对人类健康造成巨大威胁,及时快速的分析检测至关重要。近年来,由于生物传感技术的不断进步,对大肠杆菌的检测越来越多元化,一系列快速、灵敏、特异检测大肠杆菌的方法被不断完善。该文对近5年来基于生物传感技术的食源性大肠杆菌O157∶H7快速检测相关文章进行综述,阐述了基于电信号、光信号和侧流式生物传感器检测的原理、优缺点,并就该领域的新技术和发展趋势进行了讨论。 展开更多
关键词 生物传感器 食源性致病菌 大肠杆菌o157∶H7(E.coli o157∶H7) 食品安全
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基于水凝胶芯片的数字PCR精准定量葡萄汁中的大肠杆菌O157
15
作者 易子涵 林星宇 《食品科学》 北大核心 2025年第15期1-9,共9页
建立一种可对葡萄汁中大肠杆菌O157(Escherichia coli O157)直接检测的水凝胶数字聚合酶链式反应扩增技术(polymerase chain reaction,PCR)。该方法直接将样本与水凝胶PCR体系混合,通过热裂解释放细菌DNA,利用水凝胶材料的三维网络结构... 建立一种可对葡萄汁中大肠杆菌O157(Escherichia coli O157)直接检测的水凝胶数字聚合酶链式反应扩增技术(polymerase chain reaction,PCR)。该方法直接将样本与水凝胶PCR体系混合,通过热裂解释放细菌DNA,利用水凝胶材料的三维网络结构,实现靶标DNA的原位数字PCR扩增,扩增后形成的荧光信号以荧光点形式呈现,荧光点数量与DNA分子数量一一对应,从而实现精确定量分析。针对大肠杆菌O157设计PCR引物,建立方法体系,并进行可行性、灵敏性、特异性及真实样品实验。结果表明,该方法灵敏度高,检测限可低至单细菌水平,无需DNA提取纯化;特异性强,只检出目标细菌;无需样品前处理,并具有良好的抗抑制效果;从制样到结果报告的检测时间可降至40 min以内。所有葡萄汁污染样品均可直接检测,阳性检出率为100%,与稀释涂布平板方法检测结果一致,平均回收率为96.9%~112.0%,相对标准偏差为3.6%~12.4%。本检测方法具有快速、灵敏、无需样品前处理和操作简单等优点,适合于现场检测。 展开更多
关键词 食源性致病菌 大肠杆菌o157 水凝胶 数字化聚合酶链式反应 荧光检测
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Escherichia coli O157:H7的表面增强拉曼光谱检测方法建立
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作者 王盼雪 李岑 +2 位作者 李香 刘莹 李国梁 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第6期97-105,共9页
【目的】提高大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测的特异性和灵敏度。【方法】基于磁分离和信号放大策略,结合表面增强拉曼光谱(SERS)技术建立了一种特异性好、灵敏度高的E.coli O157:H7检测方法。以适配体为识别元件,联合磁... 【目的】提高大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测的特异性和灵敏度。【方法】基于磁分离和信号放大策略,结合表面增强拉曼光谱(SERS)技术建立了一种特异性好、灵敏度高的E.coli O157:H7检测方法。以适配体为识别元件,联合磁珠和聚苯乙烯(PS)微球,分别构建分离探针MB@Apt和信号放大型拉曼标签4-MBN@PS@Apt。【结果】当E.coli O157:H7存在时,MB@Apt、4-MBN@PS@Apt与E.coli O157:H7可形成MB@Apt/E.coli O157:H7/4-MBN@PS@Apt“三明治”结构复合物,该复合物可借助外源磁场实现快速分离和富集;加入四氢呋喃(THF)后,拉曼标签上负载的低生物背景拉曼报告物4-MBN可被快速释放。4-MBN在1073.9 cm^(-1)处的相对拉曼强度与E.coli O157:H7浓度的对数值在1×10^(3)~1×10^(8) CFU/mL的线性关系良好,决定系数(R^(2))为0.98。该方法对E.coli O157:H7的检测限(LOD)为312 CFU/mL,在自来水和牛奶样本中的检测回收率为61.87%~135.55%,相对标准偏差(RSD)为0.27%~5.28%。【结论】该方法对E.coli O157:H7的检测灵敏度较高,为食源性致病菌的快速检测提供了新思路。 展开更多
关键词 Escherichia coli o157:H7 快速检测 表面增强拉曼光谱 聚苯乙烯微球 低生物背景
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大肠杆菌O157特异基因的PCR检测方法 被引量：14
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作者 郑桂丽 廖绍安 +2 位作者 李钏华 龚玉娇 莫自耀 《中国卫生检验杂志》 CAS 2005年第10期1183-1185,共3页
目的:建立一种灵敏、特异的检测肠出血性大肠杆菌O157的PCR方法。方法:针对大肠杆菌O157特异性基因rfbO157设计引物,扩增一497 bp的O157标识序列。结果:应用该PCR反应体系,对4株O157菌株和14株非O157菌株扩增结果表明,O157菌株均扩增出... 目的:建立一种灵敏、特异的检测肠出血性大肠杆菌O157的PCR方法。方法:针对大肠杆菌O157特异性基因rfbO157设计引物,扩增一497 bp的O157标识序列。结果:应用该PCR反应体系,对4株O157菌株和14株非O157菌株扩增结果表明,O157菌株均扩增出预期的497 bp片段,14株非O157菌株则为阴性。纯菌液检测灵敏度为60 cfu/PCR反应,模拟混合菌液检测灵敏度为400 cfu/PCR反应。结论:该方法用于肠出血性大肠杆菌O157的检测鉴定简便、快捷,具有很高的特异性和灵敏度,为O157的临床辅助诊断提供了有力手段。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157 PCR rfbo157
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武汉市大肠埃希菌O157∶H7监测分析 被引量：3
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作者 熊燕 余滨 +3 位作者 齐小保 龙一兵 陈智 江元山 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期491-491,共1页
关键词 肠出血性大肠埃希菌o157:H7 大肠埃希菌o157:H7宿主动物 武汉市 监测分析 溶血性尿毒综合征 出血性腹泻 2003年 致病性菌 毒力基因 腹泻病人 带菌情况 食品监测 调查结果
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大肠杆菌O157∶H7对牛至精油胁迫的分子响应研究
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作者 张殿鹤 马云芳 +1 位作者 牛力源 相启森 《中国食品添加剂》 2025年第4期40-48,共9页
为了研究牛至精油(oregano essential oil,OEO)对于食源性致病菌的抑菌机制,本文采用非靶向代谢组学技术研究大肠杆菌O157∶H7对牛至精油(oregano essential oil,OEO)胁迫的分子响应。采用微量肉汤稀释法测得OEO对大肠杆菌O157∶H7的最... 为了研究牛至精油(oregano essential oil,OEO)对于食源性致病菌的抑菌机制,本文采用非靶向代谢组学技术研究大肠杆菌O157∶H7对牛至精油(oregano essential oil,OEO)胁迫的分子响应。采用微量肉汤稀释法测得OEO对大肠杆菌O157∶H7的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)为0.078μL/mL。采用液相色谱-质谱联用技术研究了0.5×MIC的OEO处理4 h对大肠杆菌O157∶H7代谢组的影响。结果表明,OEO胁迫导致大肠杆菌O157∶H7共出现665种差异性代谢物,其中382种差异性代谢物含量显著升高,283种差异性代谢物含量显著降低。差异代谢物的KEGG通路富集分析表明,OEO胁迫干扰胞内氧化还原平衡和氨基酸代谢,阻碍能量合成代谢,从而使大肠杆菌O157∶H7细胞活性受到抑制;此外,大肠杆菌O157∶H7可通过增强细胞膜磷脂的生物合成及核苷酸的补救合成来应对OEO胁迫。本研究为OEO在食品保鲜领域的应用提供了理论依据。 展开更多
关键词 牛至精油 大肠杆菌o157:H7 非靶向代谢组学 分子响应
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食品中大肠埃希氏菌O157∶H7/NM能力验证结果分析与讨论
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作者 吴福平 朱宏锴 +1 位作者 陈莹 邵景东 《工业微生物》 2025年第1期171-175,共5页
为评估实验室对食品中大肠埃希氏菌O157∶H7/NM的检测能力,保证日常检测工作的准确性,本实验室参加了大连海关技术中心组织的PTC-T623食品大肠埃希氏菌O157∶H7/NM的能力验证计划。实验室采用GB 4789.36-2016第一法常规培养法进行检测分... 为评估实验室对食品中大肠埃希氏菌O157∶H7/NM的检测能力,保证日常检测工作的准确性,本实验室参加了大连海关技术中心组织的PTC-T623食品大肠埃希氏菌O157∶H7/NM的能力验证计划。实验室采用GB 4789.36-2016第一法常规培养法进行检测分离,通过全自动荧光免疫分析仪进行快速筛检,利用全自动微生物鉴定系统进行生化鉴定,并运用实时荧光定量PCR仪对测试结果进行验证。结果显示,样品编号015检出大肠埃希氏菌O157∶H7,而编号046未检出。该结果与组织方一致,确保了实验室的检测能力。 展开更多
关键词 能力验证 大肠埃希氏菌o157∶H7/NM 分离鉴定
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