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人体不同部位正常皮肤成纤维细胞对机械张力反应的研究 被引量:4
1
作者 王志国 匡瑞霞 +2 位作者 徐全臣 陈振雨 李鹏 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期467-471,共5页
目的探讨人体不同部位正常皮肤成纤维细胞对机械张力反应的差异。方法取色素痣切除患者自愿捐赠的背部和上臂内侧正常皮肤,应用组织块法体外培养成纤维细胞,取第5~8代细胞进行实验。将背部和上臂内侧正常成纤维细胞分别设实验组和对照... 目的探讨人体不同部位正常皮肤成纤维细胞对机械张力反应的差异。方法取色素痣切除患者自愿捐赠的背部和上臂内侧正常皮肤,应用组织块法体外培养成纤维细胞,取第5~8代细胞进行实验。将背部和上臂内侧正常成纤维细胞分别设实验组和对照组,实验组细胞采用多通道细胞应力加载仪加载周期性机械张力24、36、48 h;对照组细胞正常培养。各时间点加载结束后,倒置显微镜下观察细胞形态变化;CCK-8法检测细胞增殖活性;RT-PCR法检测细胞内整合素β1、P130Ca s(p130Crk-associated substance)、TGF-β1、Ⅰ型胶原a1链(collagen type Iα1 chain,COL1A1)m RNA水平;ELISA法检测Ⅰ型胶原和TGF-β1含量。对照组于培养对应时间取细胞进行以上观察。结果实验组加载后细胞均增殖旺盛,分布密集,排列呈一定方向性。加载24 h后,实验组背部及上臂内侧细胞增殖,整合素β1、P130Cas、TGF-β1 m RNA表达水平和TGF-β1含量比较,差异均无统计学意义(P〉0.05);加载36、48 h时,背部细胞以上检测指标均显著高于上臂内侧细胞,差异有统计学意义(P〈0.05)。实验组各时间点背部及上臂内侧细胞的COL1A1 m RNA表达水平和Ⅰ型胶原含量比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。对照组各时间点背部及上臂内侧细胞以上指标比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论背部和上臂内侧皮肤成纤维细胞对机械张力的反应不同,提示人体皮肤成纤维细胞的力学特征存在部位差异,可能导致不同部位增生性瘢痕的发生率不同。 展开更多
关键词 成纤维细胞 机械张力 正常皮肤 增生性瘢痕
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5-Fu作用于瘢痕疙瘩成纤维细胞后Caspase-3变化的研究 被引量:1
2
作者 王鹏 弓军胜 +2 位作者 李晋福 张宝林 郑若楠 《中国美容医学》 CAS 2016年第11期60-64,共5页
目的:从蛋白层面证明瘢痕疙瘩、正常皮肤成纤维细胞中Caspase-3蛋白表达水平存在差异。通过5-fu(5-氟尿嘧啶)浓度梯度作用瘢痕疙瘩成纤维细胞后,观察细胞中Caspase-3蛋白的表达,及细胞增殖、迁移和侵袭性变化。方法:临床手术获取瘢痕疙... 目的:从蛋白层面证明瘢痕疙瘩、正常皮肤成纤维细胞中Caspase-3蛋白表达水平存在差异。通过5-fu(5-氟尿嘧啶)浓度梯度作用瘢痕疙瘩成纤维细胞后,观察细胞中Caspase-3蛋白的表达,及细胞增殖、迁移和侵袭性变化。方法:临床手术获取瘢痕疙瘩、正常皮肤组织块,培养瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblast KF)及正常皮肤成纤维细胞(normal skin fibroblast NSF),应用免疫组织化学及Western blot检测组织块及细胞中Caspase-3蛋白的表达;将5-fu(5-氟尿嘧啶)浓度梯度作用瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)后,应用Western blot检测Caspase-3蛋白的表达;CCK-8法检测KF细胞增殖情况;Trans-wells小室实验检测KF细胞的体外迁移和侵袭能力。结果:瘢痕疙瘩组织、正常皮肤组织、KF、NSF中均有Caspase-3蛋白的表达;KF中Caspase-3蛋白表达水平明显低于NSF,差异有统计学意义(P<0.05),瘢痕疙瘩组织块中Caspase-3蛋白表达水平明显低于正常皮肤组织,差异存在统计学意义(P<0.05);5-fu作用KF后,Western blot显示随着5-fu浓度的降低,KF中caspase-3蛋白表达减少,差异存在统计学意义(P<0.05)。CCK-8结果显示,随着5-fu浓度的降低,对KF增值活性的抑制不断减弱,差异有统计学意义(P<0.05);Trans-well侵袭结果显示侵袭到下室的KF数目随5-fu浓度的不断降低,而增多。结论:Caspase-3在KF中的表达明显低于NS,同时是5-fu诱导KF凋亡的关键因子,5-fu以浓度依赖方式促进Caspase-3活性增高,同时抑制KF增值、侵袭、迁移等肿瘤特性。 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩成纤维细胞 正常皮肤成纤维细胞 5-氟脲嘧定子 CASPASE-3蛋白 细胞凋亡
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CD26分子在正常皮肤组织和瘢痕疙瘩组织中成纤维细胞表达的差异分析 被引量:5
3
作者 辛宇 Melia Bogari +3 位作者 Zin Mar Aung 陈伟 柴岗 张艳 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2017年第1期39-42,共4页
目的探究CD26表面分子在正常皮肤组织和瘢痕疙瘩成纤维细胞中表达的差异。方法正常皮肤成纤维细胞(NFs)组的正常皮肤组织取自接受腹部整形术的10例患者;瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)组瘢痕疙瘩组织取自此前未经过任何治疗的10例瘢痕疙瘩患... 目的探究CD26表面分子在正常皮肤组织和瘢痕疙瘩成纤维细胞中表达的差异。方法正常皮肤成纤维细胞(NFs)组的正常皮肤组织取自接受腹部整形术的10例患者;瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)组瘢痕疙瘩组织取自此前未经过任何治疗的10例瘢痕疙瘩患者的胸部和腹部。利用酶消化法获得原代KFs和NFs,应用流式分析技术检测CD26表面分子在2组细胞中的表达差异。用流式分选技术对NFs和KFs组中CD26表达阳性(CD26+)与表达阴性(CD26-)细胞进行分选,体外常规培养4 d后对细胞形态进行初步分析。结果 CD26表面分子在KFs和NFs中均可表达,但KFs组表达率(46.65±13.97)%明显高于NFs组(24.75±16.85)%,差异具有统计学意义(P<0.01)。经流式分选后,CD26+与CD26-细胞群在NFs与KFs组中形态均无明显差异。结论 CD26分子在瘢痕疙瘩组织成纤维细胞中的表达率明显高于正常皮肤组织成纤维细胞中的表达率,CD26-和CK26+细胞群在形态上无明显差异。 展开更多
关键词 CD26分子 成纤维细胞 瘢痕疙瘩 正常皮肤 流式细胞术
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增生性瘢痕成纤维细胞生长特性的研究 被引量:1
4
作者 李卫华 李德水 刘洪琪 《武警医学院学报》 CAS 2003年第5期342-343,356,F004,共4页
目的 :研究增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞生长特性的差异。方法 :应用消化法建立成纤维细胞系 ,在倒置相差显微镜下观察细胞形态 ,应用细胞计数方法绘制细胞生长曲线 ,测定细胞生长速度。结果 :增生性瘢痕成纤维细胞比正常... 目的 :研究增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞生长特性的差异。方法 :应用消化法建立成纤维细胞系 ,在倒置相差显微镜下观察细胞形态 ,应用细胞计数方法绘制细胞生长曲线 ,测定细胞生长速度。结果 :增生性瘢痕成纤维细胞比正常皮肤成纤维细胞胞体大 ,形态不规则。前者细胞倍增时间约为 6d ,后者细胞倍增时间为 3d。细胞融合后前者细胞数为后者的 5 6%。结论 展开更多
关键词 增生性瘢痕成纤维细胞 正常皮肤成纤维细胞 形态学 生长特性
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IL-13对正常人表皮成纤维细胞产生炎症因子作用的实验研究 被引量:1
5
作者 杨高云 乌日娜 +3 位作者 赵雅兰 崔文颖 王莉 钱革 《北京医学》 CAS 2010年第4期301-303,共3页
目的探讨白介素-13(IL-13)对正常人表皮成纤维细胞(NHDF)产生炎症因子的影响。方法使用不同浓度IL-13(0.1、1、10ng/ml)刺激体外培养的NHDF,应用ELISA方法检测IL-13刺激NHDF24h后,白介素-6(IL-6),白介素-8(IL-8),巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP... 目的探讨白介素-13(IL-13)对正常人表皮成纤维细胞(NHDF)产生炎症因子的影响。方法使用不同浓度IL-13(0.1、1、10ng/ml)刺激体外培养的NHDF,应用ELISA方法检测IL-13刺激NHDF24h后,白介素-6(IL-6),白介素-8(IL-8),巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)的蛋白表达水平。结果0.1ng/mlIL-13刺激下,IL-6、MCP-1和Eotaxin的蛋白表达水平分别为(727.33±39.88)pg/ml、(414.67±13.01)pg/ml、(124.67±8.67)pg/ml;1ng/mlIL-13刺激下,分别为(1222.50±49.95)pg/ml、(705.33±25.15)pg/ml、(205.33±16.59)pg/ml;10ng/mlIL-13刺激下,分别为(1502.83±5.31)pg/ml、(1329.17±56.08)pg/ml、(457.50±15.32)pg/ml,均明显高于对照组[(283.50±15.86)pg/ml、(205.17±3.76)pg/ml、(13.50±5.01)pg/ml,P<0.05或0.01],并具有浓度依赖性。IL-8蛋白表达水平与对照组无显著性差异(P>0.05)。结论IL-13可刺激NHDF产生IL-6、MCP-1和Eotaxin,这些炎症因子的大量表达可能参与了IL-13在皮肤组织纤维化过程中的病理性作用。 展开更多
关键词 白介素-13 正常人表皮成纤维细胞 皮肤纤维化
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紫草素调控MicroRNA-382-5p抑制人增生性瘢痕成纤维细胞纤维化 被引量:14
6
作者 唐玉婷 贺茜 +7 位作者 万瑀 王建军 杨安宁 吴凯 焦运 白志刚 姜怡邓 沈江涌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第35期5642-5648,共7页
背景:目前已有研究表明紫草素具有治疗增生性瘢痕的潜力,且miRNA参与增生性瘢痕的病理机制调控,猜测紫草素有可能通过影响miRNA调控增生性瘢痕的发生发展。目的:探讨紫草素通过影响MicroRNA-382-5p对人增生性瘢痕成纤维细胞纤维化的作... 背景:目前已有研究表明紫草素具有治疗增生性瘢痕的潜力,且miRNA参与增生性瘢痕的病理机制调控,猜测紫草素有可能通过影响miRNA调控增生性瘢痕的发生发展。目的:探讨紫草素通过影响MicroRNA-382-5p对人增生性瘢痕成纤维细胞纤维化的作用机制。方法:收集宁夏医科大学总医院烧伤整形外科提供的增生性瘢痕组织及瘢痕旁正常皮肤组织(瘢痕旁3 cm以内),并分别分离出人增生性瘢痕成纤维细胞和正常成纤维细胞用于后续实验。苏木精-伊红染色鉴定正常皮肤和增生性瘢痕;免疫荧光鉴定成纤维细胞;采用实时荧光定量PCR从组织水平检测MicroRNA-382-5p相对表达水平。将增生性瘢痕成纤维细胞随机分为紫草素组(紫草素溶于二甲基亚砜配成浓度为13.46μmol/L的药物干预细胞24 h)、二甲基亚砜组、MicroRNA-382-5p阴性对照组、MicroRNA-382-5p抑制组、紫草素+MicroRNA-382-5p阴性对照组及紫草素+MicroRNA-382-5p过表达组。实时荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原蛋白α1、Ⅲ型胶原蛋白α1和α-平滑肌肌动蛋白mRNA表达;Western blot检测Ⅰ型胶原蛋白α1、Ⅲ型胶原蛋白α1和α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达;CCK-8法检测细胞活性;划痕实验检测细胞迁移能力。结果与结论:①与正常皮肤成纤维细胞相比,增生性瘢痕成纤维细胞增殖活性更强(P<0.01);②与二甲基亚砜组相比,紫草素组可以下调增生性瘢痕成纤维细胞中Ⅰ型胶原蛋白α1、Ⅲ型胶原蛋白α1和α-平滑肌肌动蛋白的表达水平(mRNA:P<0.01,蛋白:P<0.01),并抑制增生性瘢痕成纤维细胞迁移(P<0.05);③与正常皮肤相比,MicroRNA-382-5p在增生性瘢痕中呈高表达(P<0.01),且紫草素能下调增生性瘢痕成纤维细胞中MicroRNA-382-5p的表达(P<0.01);④敲低MicroRNA-382-5p能下调增生性瘢痕成纤维细胞中Ⅰ型胶原蛋白α1、Ⅲ型胶原蛋白α1和α-平滑肌肌动蛋白的表达水平(mRNA:P<0.01,蛋白:P<0.01),并抑制增生性瘢痕成纤维细胞迁移(P<0.05);⑤过表达MicroRNA-382-5p能上调在紫草素影响下增生性瘢痕成纤维细胞中Ⅰ型胶原蛋白α1、Ⅲ型胶原蛋白α1和α-平滑肌肌动蛋白的表达水平(mRNA:P<0.01,蛋白:P<0.01),并促进增生性瘢痕成纤维细胞迁移(P<0.01);⑥提示紫草素可通过下调MicroRNA-382-5p的表达抑制增生性瘢痕成纤维细胞的纤维化和迁移。 展开更多
关键词 紫草素 MicroRNA-382-5p 增生性瘢痕 正常皮肤 成纤维细胞 胶原沉积 细胞迁移
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miR-382-3p抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖 被引量:2
7
作者 贺茜 马芳 +4 位作者 万瑀 唐玉婷 马胜超 姜怡邓 沈江涌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第11期1758-1764,共7页
背景:目前多项研究证实了miRNA影响增生性瘢痕的发生发展,STAT1参与瘢痕成纤维细胞的增殖过程,猜测miR-382-3p也有可能与增生性瘢痕的发生发展有关系。目的:探讨miR-382-3p对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的作用机制。方法:收集宁夏医科... 背景:目前多项研究证实了miRNA影响增生性瘢痕的发生发展,STAT1参与瘢痕成纤维细胞的增殖过程,猜测miR-382-3p也有可能与增生性瘢痕的发生发展有关系。目的:探讨miR-382-3p对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的作用机制。方法:收集宁夏医科大学总医院烧伤整形外科提供的增生性瘢痕和同一个体正常皮肤,提取人增生性瘢痕成纤维细胞和人正常皮肤成纤维细胞;细胞转染分别设置:①对照组(不做处理)、miR-382-3p阴性对照组、miR-382-3p过表达组;②对照组(不做处理)、STAT1干扰对照组(si-NC)和STAT1干扰组(si-STAT1-1、si-STAT1-2、si-STAT1-3)。苏木精-伊红染色鉴定正常皮肤和增生性瘢痕;免疫荧光鉴定成纤维细胞;qRT-PCR检测miR-382-3p、STAT1、增殖细胞核抗原及细胞周期依赖性激酶抑制物(p27)mRNA表达;Western blot检测STAT1、增殖细胞核抗原及p27蛋白表达;CCK8、EdU检测细胞增殖活力和增殖水平;Targetscan预测miR-382-3p的下游靶基因,双荧光素酶验证miR-382-3p与STAT1的结合情况。结果与结论:①与正常皮肤和正常皮肤成纤维细胞相比,miR-382-3p在增生性瘢痕和增生性瘢痕成纤维细胞中呈低表达(组织:P<0.01,细胞:P<0.01),STAT1在增生性瘢痕和增生性瘢痕成纤维细胞中呈高表达(组织水平mRNA:P<0.01,组织水平蛋白:P<0.01;细胞水平mRNA:P<0.01,细胞水平蛋白:P<0.01);②过表达miR-382-3p后细胞增殖能力减弱(P<0.05),EdU阳性细胞数减少(P<0.01),增殖细胞核抗原的表达减少(mRNA:P<0.01,蛋白:P<0.05),p27的表达增加(mRNA:P<0.05,蛋白:P<0.05);③miR-382-3p能够靶向调控STAT1的表达(P<0.01),过表达miR-382-3p可导致STAT1的表达减少(mRNA:P<0.01,蛋白:P<0.01);④干扰STAT1后可导致增殖细胞核抗原的表达减少(P<0.05),p27的表达增加(P<0.05),EdU阳性细胞数减少(P<0.01);⑤结果表明:miR-382-3p可通过抑制STAT1的表达进而抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,为未来增生性瘢痕的治疗寻找有效靶点提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 miR-382-3p STAT1 PCNA P27 增生性瘢痕 正常皮肤 成纤维细胞 增殖
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Toll样受体4与炎性细胞因子在烧伤后增生性瘢痕组织中的表达及临床意义 被引量:18
8
作者 邱荣 雷可 +2 位作者 李艳 陈芊凝 石珊 《陕西医学杂志》 CAS 2020年第12期1543-1548,共6页
目的:研究烧伤后增生性瘢痕(HS)与正常皮肤(NS)组织中Toll样受体4(TLR4)及炎性细胞因子表达的水平及其相关性。方法:选取手术切除的HS组织及余留的NS组织,采用HE、Masson染色验证HS组织的特征,采用免疫组化以及实时定量PCR(RT-qPCR)检... 目的:研究烧伤后增生性瘢痕(HS)与正常皮肤(NS)组织中Toll样受体4(TLR4)及炎性细胞因子表达的水平及其相关性。方法:选取手术切除的HS组织及余留的NS组织,采用HE、Masson染色验证HS组织的特征,采用免疫组化以及实时定量PCR(RT-qPCR)检测HS组织中TLR4及炎性细胞因子的表达分布及表达水平。结果:与NS组织比较,HS组织中成纤维细胞数目、胞外基质蛋白水平、炎性分子TLR4、p65及炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的mRNA水平升高(P<0.05)。相关性分析表明TLR4表达与炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、MCP-1的表达呈正相关(P<0.05)。结论:HS组织中TLR4和炎性细胞因子水平显著高于NS,TLR4与炎性细胞因子的水平呈正相关性,表明炎症是引起HS形成的重要因素。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 正常皮肤 TOLL样受体4 炎性细胞因子 创面愈合 真皮成纤维细胞
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H_2O_2诱导对正常人皮肤成纤维细胞β-catenin、SMP30基因表达的影响
9
作者 张杰 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2018年第3期16-19,共4页
目的观察过氧化氢(H_2O_2)对正常人皮肤成纤维细胞(NHSF)β-链蛋白(β-catenin)和衰老标记蛋白30(SMP30)基因表达的影响,探讨H_2O_2可能诱导NHSF衰老的机制。方法将传至2~4代的NHSF细胞随机分为2组:对照组和实验组。对照组NHSF细胞未作... 目的观察过氧化氢(H_2O_2)对正常人皮肤成纤维细胞(NHSF)β-链蛋白(β-catenin)和衰老标记蛋白30(SMP30)基因表达的影响,探讨H_2O_2可能诱导NHSF衰老的机制。方法将传至2~4代的NHSF细胞随机分为2组:对照组和实验组。对照组NHSF细胞未作任何处理。实验组将NHSF细胞培养24h后,分别给予50(实验1组)、100(实验2组)、150(实验3组)μmol·L-1的H_2O_2。在1、2、3h后,采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测各组β-catenin、SMP30基因表达的水平,并计算β-catenin mRNA、SMP30 mRNA值。结果与对照组比较,实验组β-catenin、SMP30基因表达水平和实验1、2、3组1、2、3h时β-catenin mRNA、SMP30mRNA水平均明显降低(均P<0.05);与实验2组比较,实验1组1、2、3h时β-catenin mRNA、SMP30 mRNA水平均明显升高,实验3组1、2、3h时β-catenin mRNA、SMP30 mRNA水平均明显降低(均P<0.05)。β-catenin、SMP30基因的表达对H_2O_2诱导有较为明显的时间依赖性和浓度剂量依赖性。结论 H_2O_2处理后NHSF细胞中β-catenin、SMP30基因表达水平明显降低,H_2O_2可能在诱导NHSF衰老中起重要作用。 展开更多
关键词 正常人皮肤成纤维细胞 过氧化氢 Β-链蛋白 衰老标记蛋白30 荧光定量PCR
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病理性瘢痕及正常皮肤中成纤维细胞CD90表达情况的研究
10
作者 杨炳林 肖坚 +2 位作者 陈昌明 陈文新 王合兵 《中国医疗美容》 2020年第11期59-62,共4页
目的研究病理性瘢痕和正常皮肤中成纤维细胞CD90的表达情况。方法取我院手术切除的病理性瘢痕15例,瘢痕皮肤边缘位置的正常皮肤15例,经过组织切片后,作为观察组和对照组,使用免疫组织化学法研究CD90表达情况。结果经本文研究,对照组CD9... 目的研究病理性瘢痕和正常皮肤中成纤维细胞CD90的表达情况。方法取我院手术切除的病理性瘢痕15例,瘢痕皮肤边缘位置的正常皮肤15例,经过组织切片后,作为观察组和对照组,使用免疫组织化学法研究CD90表达情况。结果经本文研究,对照组CD90表达荧光定量(34.19±1.53)。观察组CD90表达荧光定量(30.12±2.65)。与对照组对比,差异显著(P<0.05)。在15例病理性瘢痕样本中,有9例(60.0%)可以发现阳性细胞,高于正常皮肤2例(13.3%)。正常皮肤阳性细胞体积小,观察组染色结果与对照组对比,差异显著(P<0.05)。结论成纤维细胞是病理性瘢痕的来源,存在CD90表达量多的特异性特点,通过使用组织芯片检验,可提前预防病理性瘢痕的形成,有助于改善临床疗效,减轻患者心理负担,提高整形治疗效果。 展开更多
关键词 病理性瘢痕 正常皮肤 成纤维细胞 CD90表达
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正常成年男性外阴部皮肤成纤维细胞雄激素受体的研究 Ⅰ.完整细胞受体测定法 被引量:2
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作者 何立敏 卢建 张金山 《男性学杂志》 CSCD 1993年第2期66-69,共4页
本文以[~3H]R1881为配体,建立了正常男性外阴部皮肤成纤维细胞雄激素受体(AR)的完整细胞检测法。实验表明外阴部皮肤成纤维细胞[~3H]R1881的特异结合具有高亲和力、低容量的特点及明显的雄激素结合的特异性,符合AR判定的基本条件。用Sca... 本文以[~3H]R1881为配体,建立了正常男性外阴部皮肤成纤维细胞雄激素受体(AR)的完整细胞检测法。实验表明外阴部皮肤成纤维细胞[~3H]R1881的特异结合具有高亲和力、低容量的特点及明显的雄激素结合的特异性,符合AR判定的基本条件。用Scatchard及单点分析法检测了18例我国正常成年男性包皮成纤维细胞[~3H]R1881的特异结合量,其值为6194±982结合位点/细胞((?)±SD)。该法取材比较容易,不需特殊仪器设备,是AR基础与临床研究的简便灵敏的方法。 展开更多
关键词 雄激素受体 皮肤成纤维细胞 成年男性
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