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内蒙古绒山羊毛囊不同发育时期BMP2、Noggin及SHH基因在皮肤中的表达 被引量：13
1
作者 苏蕊 张文广 +2 位作者 常子丽 王瑞军 李金泉 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期54-57,共4页
采用功能分类基因芯片方法,分析内蒙古绒山羊皮肤毛囊发育兴盛期和休止期BMP2、Noggin及SHH基因在皮肤中的表达,探讨其对毛囊发育的作用方式。结果表明:与兴盛期相比,休止期BMP2、Noggin及SHH基因表达分别上调24.61倍、下调0.16倍、下调... 采用功能分类基因芯片方法,分析内蒙古绒山羊皮肤毛囊发育兴盛期和休止期BMP2、Noggin及SHH基因在皮肤中的表达,探讨其对毛囊发育的作用方式。结果表明:与兴盛期相比,休止期BMP2、Noggin及SHH基因表达分别上调24.61倍、下调0.16倍、下调0.22倍。BMP基因可抑制毛囊发育,且与维持毛囊处于休止期有关;在毛囊发育兴盛期,Noggin基因起强抑制BMP2基因表达的作用;在毛囊发育过程中,Noggin对BMP2基因的抑制作用至少是部分通过SHH实现的。 展开更多
关键词 山羊 毛囊发育 BMP2基因 noggin基因 SHH基因 表达
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Noggin在大鼠中枢神经系统发育过程中的表达 被引量：7
2
作者 范晓棠 蔡文琴 +2 位作者 徐海伟 杨忠 张金海 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期573-577,共5页
目的　研究Noggin基因在大鼠中枢神经系统 (CNS)发育过程中的表达。　方法　地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学技术。　结果　ISHH结果显示 ,在胚胎期 (E16 )大鼠 ,nogginmRNA阳性细胞主要位于大脑皮质、海马、丘脑与下丘脑的部分... 目的　研究Noggin基因在大鼠中枢神经系统 (CNS)发育过程中的表达。　方法　地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学技术。　结果　ISHH结果显示 ,在胚胎期 (E16 )大鼠 ,nogginmRNA阳性细胞主要位于大脑皮质、海马、丘脑与下丘脑的部分核团。新生期 (P1～P2 )大鼠 ,noggin在大脑皮质与海马的表达均降低 ,而在丘脑与延脑的表达增强 ;生后 1周 (P1W )noggin在脑内的表达明显降低 ,生后 2周noggin在脑内的表达开始升高 ,在大脑皮质与海马升高尤为明显。生后 1个月 ,noggin表达继续升高 ,在额叶皮质、顶叶皮质、扣带皮质、梨状皮质及海马的齿状回可检测到强阳性信号 ;而在丘脑的侧核、网状核、腹内侧核与腹外侧核可见中等强度的阳性信号。此外 ,在下丘脑的室旁核和视上核亦可见密集深染的阳性神经元。生后 3个月 ,noggin阳性细胞在脑内的表达开始降低 ;生后 18个月 ,noggin表达降至最低 ,仅见散在的阳性神经元。此外 ,在不同发育期大鼠的脊髓亦未观察到nogginmRNA阳性细胞。 展开更多
关键词 中枢神经系统 发育 noggin基因 原位杂交 动物实验
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Noggin基因对成年大鼠海马神经前体细胞增殖的影响 被引量：7
3
作者 范晓棠 蔡文琴 +2 位作者 徐海伟 杨忠 张金海 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第15期1311-1314,共4页
目的　探讨noggin基因对成年海马BrdU标记细胞的调控。方法　原位杂交与RT PCR检测noggin基因在海马的表达 ,免疫组化检测BrdU标记细胞数 ,反义技术阻断内源性noggin基因表达。结果　侧脑室注射反义寡核苷酸后 ,成年大鼠海马内nogginmRN... 目的　探讨noggin基因对成年海马BrdU标记细胞的调控。方法　原位杂交与RT PCR检测noggin基因在海马的表达 ,免疫组化检测BrdU标记细胞数 ,反义技术阻断内源性noggin基因表达。结果　侧脑室注射反义寡核苷酸后 ,成年大鼠海马内nogginmRNA阳性细胞数明显降低 ,而BMP4mRNA阳性细胞数无明显变化 ,同时大鼠海马齿回及齿回颗粒下区的BrdU阳性细胞数均较正常对照组明显降低 ,正义寡核苷酸无此效应。结论　内源性noggin可促进成年内海马神经前体细胞的增殖。 展开更多
关键词 noggin 海马 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 骨形成蛋白4 大鼠
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小鼠 noggin 基因的重组腺病毒构建与鉴定 被引量：7
4
作者 余资江 应大君 +3 位作者 董世武 张伟 崔晓萍 糜建红 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期51-54,共4页
目的：构建小鼠 noggin 基因的重组腺病毒载体并鉴定。方法：采用基因工程技术。经过2次亚克隆将 noggin 基因片段克隆至穿梭质粒 AdTrack-CMV 上,利用 pAdEasy-1系统进行细菌内同源重组后,脂质体转染 293T 细胞包装、扩增。采用 PCR ... 目的：构建小鼠 noggin 基因的重组腺病毒载体并鉴定。方法：采用基因工程技术。经过2次亚克隆将 noggin 基因片段克隆至穿梭质粒 AdTrack-CMV 上,利用 pAdEasy-1系统进行细菌内同源重组后,脂质体转染 293T 细胞包装、扩增。采用 PCR 方法对重组体腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白 GFP 报告基因,对病毒滴度和感染效率进行监测。结果：酶切鉴定及 PCR 结果证明 noggin 基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达6．3×10^(10)pfu/ml。结论：应用细菌内同源重组法成功构建了含小鼠 noggin 基因的重组腺病毒载体。 展开更多
关键词 腺病毒 noggin基因 同源重组
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转染Noggin基因的骨髓基质干细胞体外分化为神经元样细胞的研究 被引量：4
5
作者 孙弦 周盛年 +2 位作者 张明丽 魏先森 刘黎青 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期930-933,共4页
目的构建Noggin基因的表达载体,分离骨髓基质干细胞(BMSCs),探讨转染Noggin基因的BMSCs在体外分化为神经元样细胞的情况。方法应用RT-PCR技术扩增Noggin基因,利用基因工程技术构建载体pCS2+〔Tα1〕-Noggin,分离、培养大鼠BMSCs,借助脂... 目的构建Noggin基因的表达载体,分离骨髓基质干细胞(BMSCs),探讨转染Noggin基因的BMSCs在体外分化为神经元样细胞的情况。方法应用RT-PCR技术扩增Noggin基因,利用基因工程技术构建载体pCS2+〔Tα1〕-Noggin,分离、培养大鼠BMSCs,借助脂质体将Noggin基因转入BMSCs。观察诱导后细胞形态变化,利用免疫细胞化学方法鉴定分化细胞是否表达神经细胞特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白-2(MAP-2)以及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。利用RT-PCR方法检测神经细胞标记物mRNA的表达。结果成功构建Noggin基因的真核表达载体并分离培养BMSCs。转染Noggin基因表达载体后,分化的BMSCs形态似神经细胞;免疫化学检测到NSE、MAP-2特异性标志物表达,未检测到GFAP表达;RT-PCR测得神经细胞标记物GAP43、NCAM、SYN1表达。结论从形态、蛋白、基因水平证实转染Noggin基因的BMSCs在体外可以分化为具有部分功能的神经细胞。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 基因转染 noggin 分化 神经细胞
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Noggin mRNA在新生大鼠脑内的表达 被引量：4
6
作者 范晓棠 蔡文琴 杨忠 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期901-903,共3页
目的　研究NogginmRNA在新生大鼠脑内的表达。方法　采用地高辛标记的cRNA探针原位杂交法。结果　NogginmRNA在新生大鼠的多个脑区均有较强的表达 ,其中在延髓的舌下神经核与楔束核、丘脑的侧核与网状核、下丘脑的室旁核、胼胝体、海马... 目的　研究NogginmRNA在新生大鼠脑内的表达。方法　采用地高辛标记的cRNA探针原位杂交法。结果　NogginmRNA在新生大鼠的多个脑区均有较强的表达 ,其中在延髓的舌下神经核与楔束核、丘脑的侧核与网状核、下丘脑的室旁核、胼胝体、海马的前下托表达最强 ,下丘脑的视上核、室周区、丘脑的背内侧核与腹内侧核亦有较强的阳性信号、而皮层和海马的阳性信号较弱 ,仅有部分散在而淡染的阳性神经元。结论　Noggin与新生大鼠脑的发育和功能活动有关。 展开更多
关键词 原位杂交 noggin基因 基因表达 高辛标记 神经系统发育 MRNA
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noggin基因修饰神经干细胞移植对衰老小鼠学习记忆能力的改善 被引量：3
7
作者 余资江 应大君 +1 位作者 崔晓萍 董世武 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期639-644,共6页
本研究旨在探讨重组腺病毒介导的noggin基因修饰的小鼠神经干细胞(NSCs)移植入D-半乳糖致衰小鼠海马后的迁移及对小鼠学习记忆能力的影响。分别以含noggin基因的重组腺病毒(pAdEasy-1-noggin-GFP)及对照病毒(pAdEasy-1-GFP)转染体外培养... 本研究旨在探讨重组腺病毒介导的noggin基因修饰的小鼠神经干细胞(NSCs)移植入D-半乳糖致衰小鼠海马后的迁移及对小鼠学习记忆能力的影响。分别以含noggin基因的重组腺病毒(pAdEasy-1-noggin-GFP)及对照病毒(pAdEasy-1-GFP)转染体外培养的NSCs,获取神经干细胞克隆(NSCs-noggin;NSCs-GFP),移植入由D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠右侧海马CA3区,术后4周采用Y-电迷宫检测小鼠的学习记忆行为,并对各组小鼠脑组织海马段行石蜡冠状切片、免疫组织化学和BrdU免疫荧光化学方法检测。结果显示:基因修饰的NSCs移植对小鼠的学习记忆行为的改善比pAdEasy-1-GFP组更为明显,其记忆保持率持续时间更长;NSCs移植后能在宿主海马内迁移,基因修饰的NSCs移植组在海马内的BrdU阳性细胞数较多(P<0.05)。以上结果表明noggin基因不但可能参与衰老小鼠的学习记忆行为,而且能够促进NSCs的迁移。 展开更多
关键词 神经干细胞 基因修饰 noggin 小鼠
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BMP2、Noggin和IGF-1对成骨细胞的调节作用 被引量：8
8
作者 杨明飞 冉雪琴 王嘉福 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第14期1791-1793,共3页
目的研究骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein2,BMP2)、noggin、胰岛素样生长因子1(in-sulin like growth factor1,IGF-1)对成骨细胞增殖的调节作用。方法将人成骨肉瘤细胞MG63于RPMI1640培养基中培养,添加不同浓度的BMP2、nog... 目的研究骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein2,BMP2)、noggin、胰岛素样生长因子1(in-sulin like growth factor1,IGF-1)对成骨细胞增殖的调节作用。方法将人成骨肉瘤细胞MG63于RPMI1640培养基中培养,添加不同浓度的BMP2、noggin、IGF-1蛋白进行药物干预,用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl-tet-razolium,MTT)法研究成骨细胞的增殖率。结果各药物干预组OD值与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),对成骨细胞增殖的作用效应呈剂量和时间依赖性,其作用的最佳时间均在72h。各药物组内之间比较,确定了最佳作用浓度,BMP2为2×10-9mol/L,对MG63细胞的增殖率达179.59%;noggin为8×10-9mol/L,对其增殖的抑制率达到15.51%;IGF-1为1×10-8mol/L,其增殖率达189.80%。结论 BMP2、IGF-1对MG63细胞增殖有促进作用,而noggin则抑制MG63细胞的增殖。 展开更多
关键词 BMP2 noggin IGF-1 MG63细胞 增殖
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重组腺病毒介导noggin诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化 被引量：2
9
作者 余资江 康朝胜 +1 位作者 李宏伟 余彦 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期47-50,共4页
目的探讨体外分离、培养大鼠间充质干细胞(MSCs)的方法,采用重组腺病毒介导的noggin基因体外诱导方法,观察MSCs向神经细胞的定向分化效应。方法原代培养MSCs 24h开始贴壁,呈梭形,集落样生长,纯化后,采用含noggin基因的重组腺病毒(pAdEas... 目的探讨体外分离、培养大鼠间充质干细胞(MSCs)的方法,采用重组腺病毒介导的noggin基因体外诱导方法,观察MSCs向神经细胞的定向分化效应。方法原代培养MSCs 24h开始贴壁,呈梭形,集落样生长,纯化后,采用含noggin基因的重组腺病毒(pAdEasy-1-noggin)感染原代培养的MSCs,诱导骨髓MSCs分化为神经细胞。用鉴定神经特异性烯醇化酶(NSE)、神经元核抗原(NeuN)、神经丝蛋白(NF-200)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的免疫细胞化学方法对诱导后的细胞进行鉴定。结果倒置显微镜下观察可见,MSCs经重组腺病毒感染后48h,细胞向神经细胞分化,胞体呈锥形、多角形,由胞体伸出较长的轴突样和树突样突起,且有分支。免疫组织化学鉴定显示,诱导后的细胞能特异性表达NSE、NeuN和NF-200,而GFAP表达阴性。结论利用密度梯度离心法结合贴壁法可以获得比较纯的MSCs;noggin基因重组腺病毒载体可成功诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化。 展开更多
关键词 间充质干细胞 骨髓 细胞分化 noggin
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内源性noggin对学习记忆过程中海马神经发生的调控作用 被引量：5
10
作者 范晓棠 徐海伟 +1 位作者 罗峻 蔡文琴 《中国临床康复》 CSCD 2004年第19期3756-3758,共3页
目的:探讨noggin对成年大鼠海马5溴-2脱氧尿苷(BrdU)表达与学习记忆相关性及长时程增强(longtermpotentiation,LTP)的影响。方法:侧脑室注射noggin反义寡核苷酸,BrdU标记结合免疫组化检测成年海马神经干细胞的增殖,刺激海马CA3区Schaffe... 目的:探讨noggin对成年大鼠海马5溴-2脱氧尿苷(BrdU)表达与学习记忆相关性及长时程增强(longtermpotentiation,LTP)的影响。方法:侧脑室注射noggin反义寡核苷酸,BrdU标记结合免疫组化检测成年海马神经干细胞的增殖,刺激海马CA3区Schaffer侧支,在CA1锥体细胞层记录LTP。结果:侧脑室注射noggin反义寡核苷酸后,能明显抑制学习训练引起的海马齿回与颗粒细胞层BrdU免疫反应阳性细胞的增多效应,使齿回及颗粒细胞层BrdU阳性细胞数减少44.51%(t=82.57,P<0.01)和40.04%(t=68.54,P<0.01)。LTP结果显示noggin反义寡核苷酸明显抑制LTP的诱出率,并使群集性峰电位(populationspike,PS)的增幅与场兴奋性突触后电位(fieldexcitatorypostsynapticpotential,fEPSP)斜率增加的百分率均较对照组显著减低(P<0.01)。结论:提示内源性noggin参与调控学习记忆过程中海马的神经发生。 展开更多
关键词 内源性noggin 学习记忆 海马神经 调控作用 长时程增强 5溴-2脱氧尿苷
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Noggin mRNA与BMP4 mRNA在不同发育年龄大鼠海马与大脑皮层的表达 被引量：1
11
作者 范晓棠 蔡文琴 +2 位作者 徐海伟 杨忠 张金海 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第16期1421-1423,共3页
目的　观察不同发育年龄大鼠前皮质与海马内nogginmRNA与BMP4mRNA表达的变化特点。方法　应用RT PCR技术进行半定量分析。结果　在大鼠前皮质 ,nogginmRNA的表达在P1W明显降低 ,BMP4mRNA在P1M、P3M呈高表达。而在大鼠海马 ,nogginmRNA... 目的　观察不同发育年龄大鼠前皮质与海马内nogginmRNA与BMP4mRNA表达的变化特点。方法　应用RT PCR技术进行半定量分析。结果　在大鼠前皮质 ,nogginmRNA的表达在P1W明显降低 ,BMP4mRNA在P1M、P3M呈高表达。而在大鼠海马 ,nogginmRNA的表达在胚胎期 (E13、E16)表达最高 ,随着发育的进行逐渐降低 ;BMP4在不同发育阶段大鼠海马内的表达模式和noggin相反 ,即在胚胎期及新生期呈弱阳性表达 ,生后 1周表达开始升高 ,生后 2周明显升高 ,并维持这一较高水平 ,在生后 18月大鼠仍维持较高的水平。结论　NogginmRNA与BMP4mRNA在不同发育年龄大鼠的海马与前皮质均有表达 ,表达水平与发育年龄密切相关。Noggin基因与BMP4基因与海马及皮层的发育密切相关。 展开更多
关键词 noggin基因 BMP4基因 海马 皮层 大鼠 发育年龄 大脑皮层
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Noggin蛋白对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆及海马齿状回神经发生的影响 被引量：1
12
作者 朱俊德 余资江 +1 位作者 康朝胜 余彦 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第8期72-74,78,共4页
目的观察侧脑室注射Noggin蛋白后对D-半乳糖致衰老模型小鼠学习记忆行为能力与海马齿状回神经发生的影响。方法采用皮下注射D-半乳糖构建衰老小鼠模型后,连续7 d侧脑室注射Noggin蛋白,对照组同时注射等量生理盐水,造模42 d后对各组小鼠... 目的观察侧脑室注射Noggin蛋白后对D-半乳糖致衰老模型小鼠学习记忆行为能力与海马齿状回神经发生的影响。方法采用皮下注射D-半乳糖构建衰老小鼠模型后,连续7 d侧脑室注射Noggin蛋白,对照组同时注射等量生理盐水,造模42 d后对各组小鼠进行Y迷宫学习记忆能力测试,用BrdU标记海马齿状回增殖细胞。结果Y迷宫检测结果表明,模型组小鼠学习记忆能力较正常对照组明显降低(P<0.05),而模型治疗组小鼠学习记忆能力较模型对照组明显改善(P<0.05);模型组与模型对照组小鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数较正常对照组减少(P<0.05),而模型治疗组BrdU阳性细胞数较模型组、模型对照组显著增多(P<0.05)。结论侧脑室给予Noggin蛋白可改善衰老模型小鼠的空间学习及记忆能力,可能与Noggin能保护海马神经元并促使齿状回神经干细胞增殖有关。 展开更多
关键词 半乳糖 海马 神经元 学习 记忆 noggin蛋白 小鼠
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侧脑室注射Noggin对AD小鼠海马神经发生和学习记忆功能的影响 被引量：1
13
作者 高长越 范晓棠 +4 位作者 方传勤 王延江 张莉莉 李敬诚 周华东 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期781-784,共4页
目的观察侧脑室给予Noggin对AD小鼠海马神经发生和学习记忆功能的影响。方法选取12月龄APP/PS1双转基因AD小鼠,实验组连续7d侧脑室注射Noggin,对照组向侧脑室注射等量生理盐水,Morris水迷宫检测其认知功能,免疫荧光检测海马齿回BrdU的... 目的观察侧脑室给予Noggin对AD小鼠海马神经发生和学习记忆功能的影响。方法选取12月龄APP/PS1双转基因AD小鼠,实验组连续7d侧脑室注射Noggin,对照组向侧脑室注射等量生理盐水,Morris水迷宫检测其认知功能,免疫荧光检测海马齿回BrdU的表达。结果和生理盐水对照组相比,侧脑室注射Noggin组小鼠海马齿回BrdU阳性细胞数显著增加(P<0.01),行为学检测显示逃逸潜伏期缩短、穿过原平台位置次数和在原平台象限探索时间百分率增加(P<0.05)。结论侧脑室注射Noggin可促进AD小鼠海马神经发生并改善其学习记忆能力。 展开更多
关键词 noggin 阿尔茨海默病 海马 学习记忆 神经发生
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电针调控慢性脑灌流不足大鼠海马神经发生的Noggin/BMP4机制研究 被引量：3
14
作者 朱永旺 刘喆 +1 位作者 武嫣斐 蔡晓婧 《中西医结合心脑血管病杂志》 2018年第21期3115-3123,共9页
目的观察电针通过调节Noggin/骨结合蛋白-4(BMP4)对慢性脑灌注不足大鼠海马神经发生的影响。方法使用双血管阻断法(2-VO)制作成年大鼠慢性脑灌注不足模型。采用B5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记分裂细胞方法,观察和比较慢性脑缺血损伤后1... 目的观察电针通过调节Noggin/骨结合蛋白-4(BMP4)对慢性脑灌注不足大鼠海马神经发生的影响。方法使用双血管阻断法(2-VO)制作成年大鼠慢性脑灌注不足模型。采用B5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记分裂细胞方法,观察和比较慢性脑缺血损伤后1周、2周、4周时电针组、模型组与假手术组海马齿状回神经干细胞的增殖、分化水平。结果 (1)电针对慢性脑灌注不足大鼠海马Noggin与BMP4基因表达的影响:与模型组同时间比较,电针组Noggin相对表达明显升高(P <0.05或P <0.01);与模型组同时间相比,电针组BMP4 mRNA有所降低(P <0.05)。(2)神经干细胞的增殖情况:电针组各时间大鼠海马齿状回颗粒下层的BrdU阳性细胞多于模型组。(3)神经干细胞分化情况:造模后2周,海马颗粒细胞层可见少量BrdU+NeuN及BrdU+GFAP双阳性表达细胞,造模后第4周双表达阳性细胞数明显增多;与4周模型组相比,电针组分化为神经元的比例较明显(P <0.05)。结论电针能够促进慢性脑灌注不足大鼠海马Noggin的表达,抑制BMP4的表达,促使海马神经干细胞的增殖,随治疗时间延长可诱导其向神经元分化;电针通过调节Noggin与BMP4的表达,促进神经干细胞增殖和定向分化可能是电针治疗慢性脑缺血疾病机制之一。 展开更多
关键词 慢性脑灌注不足 电针 noggin 骨结合蛋白-4 神经干细胞
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壮骨方对高糖培养下血管内皮细胞增殖及Notch1、Noggin表达的影响 被引量：2
15
作者 白蕊 陈文辉 +6 位作者 李双蕾 蒋云霞 翟琳娜 王婷 曾施琪 贾洪洋 郑洪香 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1814-1817,共4页
目的通过体外细胞实验,探讨壮骨方对高糖培养下血管内皮细胞增殖及Notch1、Noggin表达的影响。方法采用人脐静脉内皮细胞原代培养,待细胞生长至合适浓度后将细胞随机分为阴性对照组、高糖组、高糖+20%壮骨方组、高糖+血小板衍化生长因子... 目的通过体外细胞实验,探讨壮骨方对高糖培养下血管内皮细胞增殖及Notch1、Noggin表达的影响。方法采用人脐静脉内皮细胞原代培养,待细胞生长至合适浓度后将细胞随机分为阴性对照组、高糖组、高糖+20%壮骨方组、高糖+血小板衍化生长因子BB(PDGF-BB)组、20%壮骨方组、PDGF-BB组。干预后采用MTT法检测血管内皮细胞增殖水平,使用流式细胞术检测细胞凋亡水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组血管内皮细胞Notch1、Noggin的表达水平。结果与阴性对照组比较,高糖培养下血管内皮细胞增殖受到显著抑制(P<0.01)、凋亡率显著增加(P<0.01),Notch1、Noggin蛋白及mRNA水平显著降低(P<0.01);与高糖组比较,高糖+20%壮骨方组、高糖+PDGF-BB组血管内皮细胞增殖抑制明显改善(P<0.05)、凋亡率显著下降(P<0.01),Notch1、Noggin蛋白及mRNA水平明显上调(P<0.01)。结论壮骨方能促进血管内皮细胞增殖、抑制细胞凋亡,并可能通过提高血管内皮细胞Notch1、Noggin表达水平促进成骨分化,干预糖尿病性骨质疏松症进程。 展开更多
关键词 壮骨方 糖尿病性骨质疏松症 血管内皮细胞 NOTCH1 noggin
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Noggin蛋白对人骨肉瘤细胞MG63增殖性的影响 被引量：2
16
作者 康健 苟三怀 曹东 《生物骨科材料与临床研究》 CAS 2009年第3期41-44,共4页
目的研究外源性Noggin蛋白对骨肉瘤细胞MG63增殖活性的影响及其分子机制。方法用不同浓度的Noggin蛋白(A组为对照组;B、C、D组浓度分别为:1、10、20g/ml)作用于MG63细胞,利用倒置显微镜观察细胞生长和形态变化情况;MTT比色法检测Noggin... 目的研究外源性Noggin蛋白对骨肉瘤细胞MG63增殖活性的影响及其分子机制。方法用不同浓度的Noggin蛋白(A组为对照组;B、C、D组浓度分别为:1、10、20g/ml)作用于MG63细胞,利用倒置显微镜观察细胞生长和形态变化情况;MTT比色法检测Noggin蛋白对MG63细胞增殖活性的影响及其与剂量和时间的关系。结果倒置显微镜下观察及MTT法检测均证实,外源性Noggin蛋白对MG63细胞的增殖有抑制作用,浓度越高作用越强,并且存在明显的时间依赖性。结论Noggin蛋白可以明显抑制骨肉瘤细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖性。 展开更多
关键词 noggin MG63 BMPS 细胞增殖 MTT
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重组Noggin蛋白对急性肺损伤大鼠肺泡上皮细胞凋亡的影响 被引量：1
17
作者 黄泽清 高浩然 +1 位作者 杨舜 侴伟平 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期282-284,共3页
目的观察重组Noggin蛋白对酸吸入致急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡上皮细胞(AECs)凋亡的影响。方法 30只Wistar雄性大鼠随机均分为对照组(C组)、ALI组(A组)和Noggin组(N组)。麻醉和气管插管后,在吸入相C组给予生理盐水,A组和N组给予盐酸制备... 目的观察重组Noggin蛋白对酸吸入致急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡上皮细胞(AECs)凋亡的影响。方法 30只Wistar雄性大鼠随机均分为对照组(C组)、ALI组(A组)和Noggin组(N组)。麻醉和气管插管后,在吸入相C组给予生理盐水,A组和N组给予盐酸制备模型。然后经尾静脉C组和A组注射生理盐水,N组注射重组Noggin蛋白。造模后6、20 h每组分别处死5只大鼠,取肺组织观察和计数AECs凋亡情况。结果造模后6 h,各组核染色阳性细胞均出现在与肺泡管连接的区域,分布于肺泡壁角落,与Ⅱ型AECs在肺泡内的定位一致;20 h后,许多核染色阳性细胞出现在肺泡腔。定量分析A组造模后6 h和20 h核染色阳性细胞计数明显高于C组,N组核染色阳性细胞数量明显少于A组。结论重组Noggin蛋白明显减轻ALI后AECs凋亡,具有减轻ALI的肺保护作用。 展开更多
关键词 急性肺损伤 肺泡上皮细胞 凋亡 noggin蛋白
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Noggin基因过表达重组腺病毒载体的构建及其对骨肿瘤细胞MG63迁移侵袭能力的影响 被引量：2
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作者 张韬 翁艳 +3 位作者 陈冬冬 周燕芸 肖莉莉 张怡元 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2017年第7期11-15,共5页
目的:研究Noggin基因对骨肿瘤细胞MG63中Noggin,BMP-2,血管内皮生长因子(VEGF)及结缔组织生长因子(CTGF)的表达及细胞迁移侵袭的影响,探讨Noggin基因在骨肿瘤的发生和发展过程中的作用机制。方法:通过构建Noggin基因过表达重组腺病毒载... 目的:研究Noggin基因对骨肿瘤细胞MG63中Noggin,BMP-2,血管内皮生长因子(VEGF)及结缔组织生长因子(CTGF)的表达及细胞迁移侵袭的影响,探讨Noggin基因在骨肿瘤的发生和发展过程中的作用机制。方法:通过构建Noggin基因过表达重组腺病毒载体,并将其转染到骨肿瘤细胞MG63中,采用RT-PCR和Western blot分别检测空白对照组、过表达重组腺病毒组中Noggin,BMP-2,VEGF和CTGF的mRNA水平和蛋白水平,Transwell细胞迁移和侵袭能力实验考察两组细胞的迁移和侵袭能力。结果:成功构建Noggin基因过表达重组腺病毒载体,将其转染到骨肿瘤细胞MG63后,Noggin的mRNA及蛋白表达水平显著升高,BMP-2,VEGF及CTGF的mRNA及蛋白表达水平显著降低,转染Noggin基因过表达重组腺病毒的骨肿瘤细胞MG63迁移和侵袭的能力明显下降。结论:过表达Noggin基因能成功抑制骨肿瘤细胞MG63的侵袭和转移,有望成为骨肿瘤基因治疗的新方法。 展开更多
关键词 noggin基因 过表达重组腺病毒 骨肿瘤细胞MG63 迁移 侵袭
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Noggin诱导泌乳素腺瘤细胞凋亡的实验研究 被引量：1
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作者 王雄伟 范月超 +2 位作者 张洪涛 雷霆 李龄 《实用医学杂志》 CAS 2006年第1期4-6,共3页
目的:探讨骨形态生成蛋白4(BMP-4)拮抗剂Noggin诱导人泌乳素(PRL)腺瘤细胞的凋亡作用。方法:用MTT法和流式细胞仪检测研究Noggin诱导细胞凋亡的情况;用免疫组化和RT-PCR检测分析Noggin诱导细胞凋亡后对BMP-4蛋白和BMP-4mRNA的影响。结果... 目的:探讨骨形态生成蛋白4(BMP-4)拮抗剂Noggin诱导人泌乳素(PRL)腺瘤细胞的凋亡作用。方法:用MTT法和流式细胞仪检测研究Noggin诱导细胞凋亡的情况;用免疫组化和RT-PCR检测分析Noggin诱导细胞凋亡后对BMP-4蛋白和BMP-4mRNA的影响。结果:MTT法测定Noggin对PRL腺瘤细胞的IC50值为11μg/mL,不同浓度的Noggin对PRL腺瘤细胞具有抑制作用,并呈现剂量-效应关系。Noggin处理PRL腺瘤细胞后,AnnexinV标记的凋亡细胞增多,电镜观察细胞凋亡增多,同时Noggin可使BMP-4mRNA及BMP-4蛋白表达下降。结论:Noggin能诱导PRL腺瘤细胞发生凋亡,可有抗PRL腺瘤的作用。 展开更多
关键词 催乳素瘤 细胞凋亡 骨形态发生蛋白质类 noggin 基因表达
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侧脑室注射noggin对海人酸诱导癫痫大鼠学习记忆的影响 被引量：1
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作者 阴金波 马玉新 +3 位作者 徐海伟 范晓棠 安宁 杨辉 《中国行为医学科学》 CSCD 2007年第4期289-291,共3页
目的 观察侧脑室给予noggin对海人酸（kainie acid，KA）诱导的颞叶癫痫大鼠空间学习记忆的影响。方法 侧脑室注射KA诱导大鼠癫痫持续状态（status epileptieus，SE）发作后，连续7d侧脑室注射noggin，2月后大鼠自发性癫痫出现时，Morri... 目的 观察侧脑室给予noggin对海人酸（kainie acid，KA）诱导的颞叶癫痫大鼠空间学习记忆的影响。方法 侧脑室注射KA诱导大鼠癫痫持续状态（status epileptieus，SE）发作后，连续7d侧脑室注射noggin，2月后大鼠自发性癫痫出现时，Morris水迷宫试验进行行为学检测，尼氏染色检测海马神经元丢失。结果KA诱导大鼠颞叶癫痫成功后，海马CA，、CA。区神经元丢失明显，Morris水迷宫实验中大鼠的逃逸潜伏期延长[（27．38±4．75）S]，穿过原平台位置次数[（5．35±1．45）次]和在原平台象限探索时间百分率[（28．73±3．10）％]下降。侧脑室注射noggin的大鼠，海马神经元丢失减少，Morris水迷宫试验中大鼠的逃逸潜伏期缩短[（18．45±2．32）S]，穿过原平台位置次数[（9．80±1．53）次]和在原平台象限探索时间百分率[（46．58±3．70）％]增加。结论 KA致颞叶癫痫大鼠侧脑室给予noggin可改善大鼠的空间学习记忆能力，可能与noggin能保护海马神经元有关。 展开更多
关键词 noggin 海人酸 颞叶癫痫 学习 记忆
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