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广西眼镜蛇毒蛋白Natrin在体外诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用的研究 被引量：5
1
作者 宋慧 徐星新 +4 位作者 李映新 李雪华 苏延旭 蒋兴明 梁永红 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期118-121,共4页
目的观察广西眼镜蛇毒蛋白Natrin在体外对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用及凋亡诱导作用。方法以不同浓度的Natrin作用于SMMC-7721细胞24 h后,用MTT法检测细胞的生长抑制率;AO/EB双染色法、透射电子显微镜法观察细胞凋亡、流式细胞... 目的观察广西眼镜蛇毒蛋白Natrin在体外对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用及凋亡诱导作用。方法以不同浓度的Natrin作用于SMMC-7721细胞24 h后,用MTT法检测细胞的生长抑制率;AO/EB双染色法、透射电子显微镜法观察细胞凋亡、流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期。结果 Natrin对人肝癌SMMC-7721细胞有体外抑制作用,随着药物浓度的增大抑制率也随之增大,24 h半数抑制浓度IC50为138.69 mg·L-1;给药后,荧光显微镜下与透射电子显微镜下细胞呈现典型的凋亡形态改变;流式细胞仪检测到随着药物浓度的增大凋亡百分数也随之增大;Natrin能诱导SMMC-7721细胞发生S期和G2/M期阻滞。结论Natrin在体外能抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 广西眼镜蛇毒蛋白natrin 肝癌SMMC-7721细胞 细 胞周期 细胞凋亡 透射电镜 流式细胞术
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广西眼镜蛇毒蛋白Natrin对H_2O_2所致大鼠心肌细胞钙超载的影响 被引量：2
2
作者 苏延旭 周燕 +5 位作者 宋慧 李映新 焦杨 李雪华 徐星新 舒雨雁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期69-72,共4页
目的观察广西眼镜蛇毒蛋白Natrin对H2O2诱导的原代培养大鼠乳鼠心肌细胞内钙超载的拮抗作用。方法采取SD大鼠乳鼠心肌细胞原代培养,将心肌细胞分正常对照组:不加任何处理;钙超载模型组:检测时加入终浓度为0.3 mmol.L-1的H2O2;药物处理组... 目的观察广西眼镜蛇毒蛋白Natrin对H2O2诱导的原代培养大鼠乳鼠心肌细胞内钙超载的拮抗作用。方法采取SD大鼠乳鼠心肌细胞原代培养,将心肌细胞分正常对照组:不加任何处理;钙超载模型组:检测时加入终浓度为0.3 mmol.L-1的H2O2;药物处理组:预先分别给以不同剂量的Natrin孵育24 h,检测时加入终浓度为0.3 mmol.L-1的H2O2。以Fluo-3/AM荧光指示剂负载,应用激光共聚焦显微镜技术,动态检测细胞内[Ca2+]i变化。结果动态监测15 min发现,与正常对照组比较,模型组细胞内平均荧光峰值增加49.37%,高于正常对照组(P<0.01)。而高、中、低药物浓度组平均峰荧光值比正常对照组分别增加27.52%、12.71%、5.15%。与模型组比较,药物组细胞内平均峰荧光强度值均降低(P<0.01)。结论广西眼镜蛇毒蛋白Natrin对心肌细胞钙离子通道有较好的阻断作用,能减轻H2O2诱导的心肌细胞内[Ca2+]i超载,且药物组随着药物浓度的逐渐升高,细胞内钙荧光强度逐渐下降,并呈现剂量依赖性。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒蛋白natrin 心肌细胞 钙超载 H2O2 激光共聚焦 Fluo 3 AM
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广西眼镜蛇毒中Natrin蛋白的分离及纯化 被引量：3
3
作者 蒋兴明 焦杨 +4 位作者 宋慧 马兴才 周燕 周元聪 舒雨雁 《广西医科大学学报》 CAS 2011年第5期665-667,共3页
目的:从广西眼镜蛇毒中分离出Natrin蛋白。方法:广西眼镜蛇毒经Sephadex G75凝胶、CM Sepharose CL-6B离子交换层析及FPLC mono-S柱层析分离纯化出Natrin蛋白。结果:从广西眼镜蛇蛇毒中分离纯化得到的Natrin蛋白,经SDS-PAGE电泳测定其... 目的:从广西眼镜蛇毒中分离出Natrin蛋白。方法:广西眼镜蛇毒经Sephadex G75凝胶、CM Sepharose CL-6B离子交换层析及FPLC mono-S柱层析分离纯化出Natrin蛋白。结果:从广西眼镜蛇蛇毒中分离纯化得到的Natrin蛋白,经SDS-PAGE电泳测定其分子量为25ku,质谱测定其分子量为24.937ku,测得其N端的序列为NVDFNSESTRRKKKQKEIVD,C端的序列为NIKK。结论:从广西眼镜蛇毒中分离出纯的Natrin蛋白组分。 展开更多
关键词 广西眼镜蛇毒 natrin蛋白 分离纯化
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广西眼镜蛇毒中Natrin的抗脂质过氧化作用 被引量：4
4
作者 黄燕军 宋慧 +3 位作者 李福森 李姝 焦杨 黄昱 《大众科技》 2011年第10期178-179,共2页
从广西眼镜蛇毒中分离出Natrin蛋白,研究其对大鼠肝脏脂质过氧化作用的影响。结果表明:从广西眼镜蛇毒中分离出纯的Natrin组分,对大鼠肝脏脂质过氧化具有抑制作用。
关键词 广西眼镜蛇毒 natrin 脂质过氧化
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广西中华眼镜蛇的蛇毒蛋白natrin对过氧化氢损伤乳大鼠原代心肌细胞钙超载及相关基因表达的影响
5
作者 梁永红 苏延旭 +6 位作者 马兴才 张洪也 蒋兴明 陆世银 苏志恒 郑华 宋慧 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期95-100,共6页
目的观察广西中华眼镜蛇（Naja naja atra）的蛇毒蛋白（natrin）对SD大鼠原代心肌细胞钙超载的影响,并探讨natrin对心肌的保护作用及对心肌钙、钾离子通道影响的可能作用机制。方法分别用natrin 5,25和125 mg·L^-1预处理原代SD乳... 目的观察广西中华眼镜蛇（Naja naja atra）的蛇毒蛋白（natrin）对SD大鼠原代心肌细胞钙超载的影响,并探讨natrin对心肌的保护作用及对心肌钙、钾离子通道影响的可能作用机制。方法分别用natrin 5,25和125 mg·L^-1预处理原代SD乳大鼠心肌细胞24 h后,再以H2O20.3 mmol·L^-1诱导损伤,以Fluo-3为Ca^2＋荧光探针,应用激光共聚焦显微镜动态检测细胞内游离钙离子浓度变化;另外用natrin 5,25和125 mg·L^-1及维拉帕米（Ver）5 nmol·L^-1预处理24 h后,再以H2O20.3 mmol·L^-1诱导损伤15 min,FQPCR法检测心肌细胞钙离子通道Cav1.2,Calm,Ry R2和钾离子通道Kir6.2的m RNA表达情况。结果激光共聚焦显微镜检测结果发现,与正常对照组比较,H2O2作用3-15 min心肌细胞内钙荧光平均峰值增强49.37%（P〈0.01）;而给予natrin 5,25,125 mg·L^-1预处理24 h组该平均峰值分别增强27.52%,12.71%和5.15%,显著低于H2O2组（P〈0.01）。PCR结果表明,H2O2损伤组其心肌细胞Cav1.2,Calm,Ry R2及Kir6.2的m RNA表达分别为正常对照组的1.78倍,1.26倍,4.34倍和0.79倍（P〈0.01）;而给予natrin及维拉帕米干预组,细胞Cav1.2,Calm和Ry R2的m RNA表达较H2O2损伤组均显著降低（P〈0.01）,而Kir6.2的m RNA表达较H2O2损伤组显著升高（P〈0.05）。结论广西中华眼镜蛇natrin可明显减轻H2O2所致的心肌细胞钙超载,对心肌细胞过氧化损伤有良好的保护作用,其作用机制可能与降低H2O2损伤的心肌细胞的Cav1.2,Calm和Ry R2的m RNA表达及增加Kir6.2的m RNA表达有关。 展开更多
关键词 natrin 钙超载 肌细胞 心脏 离子通道
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广西眼镜蛇毒中Natrin的克隆及在E.coli中的表达
6
作者 宋慧 马兴才 +3 位作者 周燕 焦杨 周元聪 舒雨雁 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期513-515,共3页
目的采用基因工程技术,在大肠杆菌中表达广西眼镜蛇毒中Natrin成熟蛋白。方法将来源于广西眼镜蛇毒的Natrin蛋白的基因克隆至融合表达载体pMAL-c2x中,以N端融合了麦芽糖结合蛋白的形式在大肠杆菌BL21(DE3)通过异丙基硫代半乳糖苷诱导表... 目的采用基因工程技术,在大肠杆菌中表达广西眼镜蛇毒中Natrin成熟蛋白。方法将来源于广西眼镜蛇毒的Natrin蛋白的基因克隆至融合表达载体pMAL-c2x中,以N端融合了麦芽糖结合蛋白的形式在大肠杆菌BL21(DE3)通过异丙基硫代半乳糖苷诱导表达Natrin蛋白。超声破菌后,将上清液经Amylose树脂柱上纯化后,收集并冻干Natrin融合蛋白,利用蛋白印迹分析其是否有Natrin抗原活性。结果经蛋白印迹分析可知在50 kD处的条带具有Natrin抗原活性。结论在大肠杆菌中可以表达出Natrin蛋白。 展开更多
关键词 广西眼镜蛇 蛇毒 natrin 蛋白表达
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中药苦参碱对K562细胞骨架结构与功能的影响(英文) 被引量：1
7
作者 张彦 刘小珊 +3 位作者 何於娟 马凌娣 许相儒 蒋纪恺 《中国临床康复》 CSCD 2003年第20期2788-2789,共2页
目的从细胞骨架方面进一步探索苦参碱对人白血病K562细胞株的作用机制。方法0.1g/L苦参碱处理K562细胞24h前后,采用微管吮吸技术检测其黏弹系数的改变,并运用基因芯片技术分析细胞骨架蛋白基因表达的改变情况。结果0.1g/L苦参碱作用K56... 目的从细胞骨架方面进一步探索苦参碱对人白血病K562细胞株的作用机制。方法0.1g/L苦参碱处理K562细胞24h前后,采用微管吮吸技术检测其黏弹系数的改变,并运用基因芯片技术分析细胞骨架蛋白基因表达的改变情况。结果0.1g/L苦参碱作用K562细胞24h后:弹性系数K1由725.7±215.1下降432.5±67.2;弹性系数K2由433.1±119.3下降242.5±31.2;黏性系数μ由71.5±38.0下降至49.5±15.3。细胞骨架类基因prefoldin与ezrin的mRNA表达增强。结论苦参碱能够导致K562细胞的骨架结构与功能发生变化。 展开更多
关键词 中药 苦参碱 K562细胞 细胞骨架 白血病 基因芯片技术 基因表达
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六厂家生产的头孢哌酮钠的质量评价
8
作者 谢根英 潘浩 《海峡药学》 2006年第3期26-27,共2页
目的考察不同生产厂家的头孢哌酮钠的质量,为临床提供使用依据。方法应用紫外分光光度计,pH值测定仪,分别测定头孢哌酮钠在常温条件下配置后4h内含量、pH值的变化情况。结果与结论在常温条件下,以生理盐水作溶媒,六厂家的头孢哌酮钠质... 目的考察不同生产厂家的头孢哌酮钠的质量,为临床提供使用依据。方法应用紫外分光光度计,pH值测定仪,分别测定头孢哌酮钠在常温条件下配置后4h内含量、pH值的变化情况。结果与结论在常温条件下,以生理盐水作溶媒,六厂家的头孢哌酮钠质量无明显差别。但拥有专利的原研厂家的药品质量较稳定。 展开更多
关键词 头孢哌酮钠 质量 评价
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